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Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪 货号11505-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

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Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪 货号11505
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
检测过氧化氢的试剂盒
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪

3192Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪 货号11505

货号 11505 存储条件 F/L
规格 100 Tests
Ex (nm) 405 Em (nm) 450
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

        Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒，过氧化氢是一种活性氧代谢副产物，可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多与动脉粥样硬化，糖尿病血管病变，骨质疏松症，许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物具有细胞渗透性，当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具，并且它被优化用于流式细胞术。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

ReadiLink xtra Rapid Cy7抗体标记试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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ReadiLink xtra Rapid Cy7抗体标记试剂盒
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
2Lalelings
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

ReadiLink™xtra Rapid Cy7抗体标记试剂盒

ReadiLink xtra Rapid Cy7抗体标记试剂盒

简要概述

ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂是AAT 研发，由金畔代理销售的Cy7标记的抗体标记试剂盒。ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒基本上只需要2个简单的混合步骤，而无需纯化。ReadiLink™试剂盒中使用的预活化Cy7非常稳定，对抗体表现出良好的反应性和选择性。该试剂盒具有用于标记〜2×50 ug抗体的所有基本成分。试剂盒中提供的两个预活化Cy7染料小瓶中的每一个均经过优化，可标记约50 µg抗体。ReadiLink™xtra Cy7快速抗体标记试剂盒提供了一种方便而强大的方法，。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的抗体标记试剂盒。 

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产品说明书

实验方案

工作溶液配制

蛋白质工作溶液（A）

为了标记50 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将5 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与50 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：如果蛋白质浓度不同，请相应地调整蛋白质体积，以使〜50 µg蛋白质可用于标记反应。
注意：要标记100 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将10 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：蛋白质应溶于1X磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.2-7.4；如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，则必须针对1X PBS（pH 7.2-7.4）进行透析，或使用10 kDa的Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜去除游离的胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）被广泛用于蛋白质沉淀。
注意：为获得标记效率，建议终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL，结合效率明显降低，低于1 mg / mL。 

操作步骤

运行缀合反应

  1. 将蛋白质工作溶液（溶液A）添加到一个小瓶的标记染料（组分A）中，并通过将小瓶涡旋几秒钟将它们充分混合。
    注意：如果要标记100 µg的蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg的蛋白质分成2 x 50 µg的蛋白质，并使每个50 µg的蛋白质与一小瓶的标记染料反应。然后合并两个小瓶，用于下一步。

  2. 将缀合反应混合物在室温下放置30-60分钟。
    注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。 

停止缀合反应

  1. 将5 µL（对于50 µg蛋白质）或10 µL（对于100 µg蛋白质）添加到缀合反应混合物中，占TQ™染色猝灭缓冲液（组分C）总反应体积的10％；混合均匀。

  2. 在室温下孵育10分钟。标记的蛋白（抗体）可以使用了。 

蛋白质缀合物的储存

蛋白质缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间，可以将蛋白质缀合物冻干或分成单份使用，并存储在≤–20°C下。

 

图示

ReadiLink xtra Rapid Cy7抗体标记试剂盒

图1. HeLa细胞中微管蛋白的免疫荧光染色。HeLa细胞用4％PFA固定，用0.1％Triton X-100透化并封闭。然后将细胞与小鼠抗微管蛋白抗体一起孵育，并用ReadiLink™xtra Rapid Cy7抗体标记试剂盒（#1973）标记的山羊抗小鼠IgG染色。

PE-Cy5.5抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 货号1341-AAT Bioquest荧光染料

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PE-Cy5.5抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 货号1341
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
2 Labelings
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Buccutite PE-Cy5.5抗体标记试剂盒 标记25ug抗体

PE-Cy5.5抗体标记试剂盒 标记25ug抗体 货号1341

简要概述

        Buccutite PE-Cy5.5抗体标记试剂盒提供了一种以微观方式标记抗体的 便捷方法。PE-Cy5.5是流式细胞仪中常用的颜色。其主要吸收峰位于565nm，发射峰位于~700nm。对于这种串联颜色，推荐使用682/33 nm和695/40 nm的滤光片组。 AAT Bioquest提供这种Buccutite 快速标记试剂盒，以促进PE-Cy5.5与抗体和其他蛋白质（如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂）的串联结合。 Buccutite PE-Cy5.5共轭试剂盒为您的抗体与PE结合提供了一种强大而方便的方法。该试剂盒包括预活化的PE和反应缓冲液。整个过程仅需要两次简单的混合，无需进一步纯化。缀合的抗体可用于WB，ELISA和IHC应用。该试剂盒足以进行2次标记反应，每次反应 多25μg抗体。考虑到PE的大尺寸（240kDa），标记反应中使用的抗体量必须始终小于PE的量。任何新抗体试剂的比例必须通过实验确定，但每50μgPE使用25μgIgG抗体通常可获得结果。我们的试剂盒提供预活化的PE-Cy5.5，以促进PE-Cy5.5串联结合抗体和其他蛋白质，如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂。我们的预活化PE-Cy5.5串联已准备好结合，产生比常规繁琐的基于SMCC的缀合化学高得多的产率。此外，我们的预活化PE-Cy5.5串联通过其蛋白质丰富的氨基与蛋白质缀合，而SMCC化学靶向必须通过抗体还原而再生的硫醇基团。Buccutite PE-Cy5.5抗体标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

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产品说明书

实验方案

操作步骤

1.运行Antibody-Buccutite MTA反应

1.1将抗体溶液直接加入到Buccutite MTA（组分B）的小瓶中，并通过反复移液几次将其充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

1.2将抗体-Buccutite MTA反应混合物在室温下保持30-60分钟。 注意：如果需要，抗体-Buccutite MTA反应混合物可以旋转或摇动更长时间。

2.准备旋转柱用于抗体-Buccutite MTA纯化

2.1将提供的旋转柱（组分D）反转几次以重新悬浮沉降的凝胶并除去任何气泡。

2.2取下 并将色谱柱放入洗涤管（2 mL，未提供）中。取下盖子，让多余的填料缓冲液通过重力排放到凝胶床的顶部。如果色谱柱没有开始流动，请将盖子推回色谱柱并再次将其取出以开始流动。丢弃排出的缓冲液，然后将色谱柱放回洗涤管中。但是，如果将色谱柱放入12 x 75 mm试管（未提供）中，请立即离心。

2.3在摇动式离心机中以1,000×g离心2分钟（参见“离心注意事项”部分）以除去包装缓冲液。丢弃缓冲液。

2.4向柱中加入1-2 mL 1X PBS（pH 7.2-7.4）。每次施用PBS后，让缓冲液通过重力排出，或将柱离心2分钟以除去缓冲液。丢弃收集管中的缓冲液。重复此过程3-4次。

2.5在摇动式离心机中以1,000×g离心2分钟（参见“离心注意事项”部分）以除去包装缓冲液。丢弃缓冲液。

3.纯化抗体-Buccutite MTA溶液

3.1将柱（来自步骤准备旋转柱用于抗体-Buccutite MTA纯化）置于干净的收集管（1.5mL，未提供）中。 小心地将样品（~105μL，来自Step Antibody-Buccutite MTA反应）直接加载到色谱柱中心。

3.2加载样品后，加入5μL1XPBS（pH 7.2-7.4），使总体积为110μL。 将柱以1,000xg离心5-6分钟，并收集含有所需抗体-Buccutite MTA溶液的溶液。

4.制备抗体-PE缀合物

4.1通过向Buccutite FOL活化的PE（组分A）的小瓶中加入50μLddH2O制备Buccutite FOL活化的PE溶液，通过反复移液几次充分混合或将小瓶涡旋几秒钟。

4.2将整瓶Buccutite FOL活化的PE溶液混合到纯化的抗体-Buccutite MTA溶液（来自步骤纯化抗体-Buccutite MTA溶液）中，充分混合并在室温下旋转混合物1小时。

4.3抗体-PE结合物现在可以使用了。 注意：立即使用时，抗体-PE结合物需要用您选择的缓冲液稀释。 注意：对于长期储存，需要浓缩或冷冻干燥抗体-PE结合物溶液。

5.抗体-PE共轭物的储存

抗体缀合物应在载体抗体（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5mg / mL储存。 当在2mM叠氮化钠存在下储存并避光时，抗体-PE缀合物溶液可以在4℃下储存两个月而没有显着变化。 对于更长时间的储存，可以将抗体-PE缀合物冻干并在≤-20℃下储存。

6.离心注意事项

6.1旋转柱（组分D）可以装入2mL微量离心管或12×75mm试管中，用于在离心过程中收集样品。 使用2 mL微管和色谱柱进行初始色谱柱平衡步骤。

6.2能够产生1,000 x g的 小力的摆动式离心机适用于Bio-Spin柱。 在特定转速下产生的重力是微量离心机转子半径的函数。 有关从每分钟转数（RPM）到离心力或g力的转换信息，请参阅摆动式离心机说明手册。 或者，使用以下等式计算达到1,000 x g重力所需的RPM速度。

6.3RCF（xg）=（1.12 x 10-5）×（RPM）×2×r（RCF是相对离心力，r是从转子中心到Bio-Spin柱中间测量的以厘米为单位的半径 ，RPM是转子的速度）。

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15264-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒（荧光法） 红色荧光

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒（荧光法） 红色荧光

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15264 货号 15264 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 250 Tests 价格 4584
Ex (nm) 571 Em (nm) 585
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒（荧光法）红色荧光是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP +）是细胞中发现的两种重要的辅因子。 NADH是NAD +的还原形式，NAD +是NADH的氧化形式。 NAD形成NADP，通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的2’位置。 NADP用于合成代谢生物反应，例如脂肪酸和核酸合成，其需要NADPH作为还原剂。 在叶绿体中，NADP是在光合作用的初步反应中重要的氧化剂。 通过光合作用产生的NADPH用作卡尔文光合作用循环中生物合成反应的还原能力。

传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定通过监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化来完成。 这些方法具有低灵敏度和高干扰，因为测定是在需要昂贵的石英微孔板的UV范围内进行的。 基于吸收的NADP / NADPH测定的低灵敏度使得测定难以自动化以进行通常使用小样品量的高通量筛选。

这种Amplite 荧光NADP / NADPH比率检测试剂盒为敏感检测NADP，NADPH及其比例提供了一种便捷的方法。 系统中的酶特异性识别酶再循环反应中的NADP / NADPH，其显着提高了检测灵敏度。 此外，该测定具有非常低的背景，因为其在红色可见范围内运行，这显着降低了样品干扰。 可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行测定。 其信号可以通过荧光酶标仪在Ex / Em = 530-570 / 590-600nm（最大Ex / Em = 540 / 590nm）或吸光度酶标仪在~576nm处容易地读取。 这也提供NADP，NADPH提取缓冲液和细胞裂解缓冲液。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的NADP/NADPH检测试剂盒。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 576 ± 5 nm
推荐孔板： 透明底板
荧光酶标仪  
激发： 540nm
发射： 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板： 黑色孔板

产品说明书

96孔板检测示例

概述

准备NADPH标准品或测试样品（25μL）

在室温下加入25μLNADPH或NADP提取液孵育15分钟

加入25μLNADP或NADPH提取液（25μL）

加入NADP / NADPH反应混合物（75μL）孵育于 室温保持15分钟 –  2小时

监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度

注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

 

操作步骤

1.准备NADPH原液：

将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品（组分C）的小瓶中，得到1mM（1nmol / L）NADPH储备溶液。

注意：未使用的NADPH原液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

2.制备NADP / NADPH反应混合物：

将10mL NADPH传感器缓冲液（组分B）加入NADP / NADPH回收酶混合物（组分A）的瓶中，并充分混合。

注意：这种NADP / NADPH反应混合物足以用于两个96孔板。未使用的NADP / NADPH反应混合物应分成一次性等分试样并储存在-20℃。

 

3.准备NADPH标准品的连续稀释液（0至10μM）：

3.1将10μL1mMNADPH储备溶液（来自步骤1）加入990μLPBS缓冲液（pH7.4）中，得到10μM（10pmol / L）NADPH标准溶液。

注意：稀释的NADPH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.2取200μL10M NADPH标准溶液（来自步骤3.1）进行1：3连续稀释，得到NADPH标准品的3,1,0.3,0.1,0.03,0.01和0 M系列稀释液。

3.3如表1和2中所述，将含有NADPH标准品和含NADP / NADPH的测试样品的系列稀释液加入到固体黑色96孔微量培养板中。

注意：根据需要准备细胞或组织样本。为方便起见，NADP / NADPH裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞。

 

表1.实心黑色96孔微孔板中NADPH标准品和测试样品的布局

BL

BL

TS

TS

TS (NADPH)

TS (NADHP)

TS (NADP)

TS (NADP)

NS1

NS1

….

….

….

….

….

….

NS2

NS2

 

 

 

 

 

 

NS3

NS3

 

 

 

 

 

 

NS4

NS4

 

 

 

 

 

 

NS5

NS5

 

 

 

 

 

 

NS6

NS6

 

 

 

 

 

 

NS7

NS7

 

 

 

 

 

  

注意：NS = NADP / NADPH标准; BL =空白对照; TS =测试样品; TS（NADPH）=用NADPH提取液处理10至15分钟的测试样品，然后用NADP提取溶液中和; TS（NADP）=用NADP提取溶液处理10至15分钟的测试样品，然后用NADPH提取溶液中和。

 

表2每个孔的试剂组成

NADPH Standard

Blank Control

Test Sample (NADP/NADPH)

Test Sample (NADPH Extract)

Test Sample

(NADP Extract)

Serial Dilutions*: 25 μL

PBS: 25 μL

Test Sample: 25 μL

Test Sample: 25 μL

Test Sample: 25 μL

Component F:

25 μL

Component F:

25 μL

Component F:

25 μL

Component D:

25 μL

Component E:

25 μL

Incubate at room temperature for 10 to 15 minutes

Component F:

25 μL

Component F:

25 μL

Component F:

25 μL

Component E:

25 μL

Component D:

25 μL

Total: 75 μL

Total: 75 μL

Total: 75 μL

Total: 75 μL

Total: 75 μL

*注意：将连续稀释的NADPH标准品（0.01μM至3μM）加入NS1至NS7的孔中，一式两份。 高浓度的NADPH（例如，>100μM，最终浓度）可能由于NADPH传感器（对非荧光产物）的过度氧化而导致荧光信号降低。

 

3.4对于NADPH提取（NADPH）：将25μLNADPH提取溶液（组分D）加入含有NADP / NADPH的测试样品的孔中。在室温下孵育10至15分钟，然后加入25μL的NADP提取溶液（组分E）以中和NADPH提取物，如表1和2中所述。

对于NADP提取（NADP）：将25μLNAP提取溶液（组分E）加入含有NADP / NADPH的测试样品的孔中。在室温下孵育10至15分钟，然后加入25μLNADPH提取溶液（组分D）以中和NADP提取物，如表1和2中所述。

对于总NAPD和NADPH：将25μLNADP/ NADPH对照溶液（组分F）加入NADPH标准品的孔和含有NADP / NADPH的测试样品中。在室温下孵育10至15分钟，然后如表1和2中所述添加25μL对照溶液（组分F）。

注意：根据需要准备细胞或组织样本。 NADP / NADPH裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞。

 

4.在上清液反应中运行NADP / NADPH测定：

4.1将75μLNADPH反应混合物（来自步骤2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品（来自步骤3.4）的每个孔中，以使总NADPH测定体积为150μL/孔。

4.2在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

4.3用Ex / Em = 540 / 590nm的荧光板读数器监测荧光增加。

注意：也可以将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

 

数据分析

        空白孔中的荧光（仅用PBS缓冲液）用作对照，并从具有NADPH反应的那些孔的值中减去。 典型数据如图1所示（总NADP和NADPH对比NADP或NADPH提取物）。

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15264

图1.使用Gemini酶标仪（Molecular Devices），在96孔黑色板中用Amplite 荧光NADP / NADPH比率测定试剂盒测量总NADPH和NADP及其提取物剂量响应。 用或不用NADPH或NADP提取溶液处理25μL等量的NADP和NADPH 15分钟，然后在室温下用提取溶液中和。 在加入75μLNADPH反应混合物后30分钟，在Ex / Em = 540 / 590nm（在570nm处截止）获得信号。 从具有NADPH反应的那些孔的值中减去空白信号（注意：荧光背景随时间增加，因此重要的是减去每个数据点的空白孔的荧光强度值）。

 

试剂应用文献

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation

Authors: Yang, Fei and Heit, Caitlin and Inglis, Debra L
Journal: Fermentation (2017): 61

 

参考文献

A metabolomic study of the effect of Candida albicans glutamate dehydrogenase deletion on growth and morphogenesis
Authors: Ting-Li Han, Richard D Cannon, Sandra M Gallo, Silas G Villas-Boas
Journal: NPJ biofilms and microbiomes (2019): 13

Growth suppression by altered (p) ppGpp levels results from non-optimal resource allocation in Escherichia coli
Authors: Manlu Zhu, Xiongfeng Dai
Journal: Nucleic acids research (2019)

FOXO transcription factors both suppress and support breast cancer progression.
Authors: Marten Hornsveld, Lydia M Smits, Maaike Meerlo, Miranda van Amersfoort, Marian J Groot Koerkamp, Dik van Leenen, David E Kloet, Frank C Holstege, Patrick WB Derksen, Boudewijn MT Burgering
Journal: Cancer Research (2018): canres–2511

Piperlongumine activates Sirtuin1 and improves cognitive function in a murine model of Alzheimer’s disease
Authors: Jun Go, Ji Yeon Seo, Tae-Shin Park, Young-Kyoung Ryu, Hye-Yeon Park, Jung-Ran Noh, Yong-Hoon Kim, Jung Hwan Hwang, Dong-Hee Choi, Dae Youn Hwang
Journal: Journal of Functional Foods (2018): 103–111

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

 

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产品名称 货号
Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) Cat#15274
Amplite NAD/NADH比率检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 Cat#15263
Amplite NADPH检测试剂盒(比色法) Cat#15272

说明书
Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒（荧光法） 红色荧光.pdf

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法)

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法)

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274 货号 15274 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 250 Tests 价格 4584
Ex (nm) 460 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒 （比色法）是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）是细胞中发现的两种重要的辅酶。 NAD形成NADP，通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的2’位置。 NADH（NADPH）是NAD（NADP）的还原形式，NAD（NADP）是NADH（NADPH）的氧化形式。 NAD或NADP在氧化还原反应中起辅助因子的作用，在细胞反应中转移电子。 氧化形式和还原形式之间的平衡是NAD / NADH（NADP / NADPH）比率。 该比率是指示细胞氧化还原状态的重要组分，并且它是反映代谢活性和细胞健康的测量。 在健康的哺乳动物组织中，游离NAD和NADH之间的比率的估计可以高达700。相反，NADP / NADPH比率通常为约0.005，因此NADPH是该辅酶的主要形式。

该Amplite 比色NADP / NADPH比率分析试剂盒提供了一种比色法，用于测量培养细胞中细胞内总NADP / NADPH量和NADP / NADPH比率。 在该测定中，裂解物中的NADPH可以用NADPH提取溶液提取，然后通过NADPH探针识别，在反应后得到黄色染料，其在460nm处具有吸光度。 产生的染料量与细胞裂解物中NADP或NADPH的浓度成正比，可用作细胞NADP / NADPH浓度的指示剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的NADP/NADPH检测试剂盒。 

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 460nm
推荐孔板： 透明底板

产品说明书

96孔板检测示例

概述

准备25μLNADPH标准品和/或测试样品

加入25μLNADPH提取液

在室温下孵育15分钟

加入25μL中和溶液

加入75μLNADPP/ NADPH反应混合物在室温下孵育15分钟至2小时监测 在460nm处的吸光度

注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

 

操作步骤

1.准备NADPH原液：

将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品（组分C）的小瓶中，得到1mM（1nmol / L）NADPH储备溶液。

注意：未使用的NADPH原液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

2.制备NADP / NADPH反应混合物：

2.1将8mL NADPH探针缓冲液（组分B-II）加入到NADP / NADPH回收酶混合物（组分A）的瓶中，并充分混合。

2.2将2 mL NADPH探针（组分B-I）加入上述瓶中（来自步骤2.1）并充分混合。

注意：这种NADP / NADPH反应混合物足以进行125~200次分析。 未使用的NADP / NADPH反应混合物应分成一次性等分试样并储存在-20℃。

 

3.准备连续稀释的NADPH标准品（0至2μM）：

3.1将2L 1mM NADPH储备溶液（来自步骤1）加入998L PBS缓冲液（pH7.4）中，产生2M（2 pmols / L）NADPH标准溶液。

注意：稀释的NADPH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.2取200μL2MNADPH标准溶液（来自步骤3.1）进行1：2连续稀释，得到1，0.5,0.25,0.125,0.0625,0.0313和0M系列稀释的NADPH标准品。

 

4.运行总NADP / NADPH分析（总共400个分析/试剂盒）：

4.1如说明书中的表1和2中所述，将NADPH标准品和含有NADP / NADPH的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微孔板中。

注意：根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见，裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞。 （详见附录）。

4.2将50μL的NADP / NADPH反应混合物（来自步骤2.2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品（来自步骤4.1）的每个孔中，以使总NADP / NADPH测定体积为100μL/孔。

4.3在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

4.4使用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。

 

5.运行NADP / NADPH比率分析（总共250个分析/试剂盒）：

5.1如说明书中的表3和4中所述，将连续稀释的NADPH标准品和/或含NADP / NADPH的测试样品加入白色/透明96孔微量培养板中。

注意：根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见，裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞。

5.2对于NADPH提取（NADPH量）：将25μLNADPH提取溶液（组分D）加入含有NADP / NADPH的测试样品的孔中。在室温下孵育10至15分钟，然后加入25μL中和溶液（组分E）以中和NADPH提取物，如说明书中的表3和4中所述。

对于总NADP和NADPH（总量）：将25μLNADPP/ NADPH对照溶液（组分F）加入NADPH标准品的孔和含有NADP / NADPH的测试样品中。在室温下孵育10至15分钟，然后如说明书中的表3和4中所述添加25μL提取对照溶液（组分F）。

注意：根据需要准备细胞或组织样本。为方便起见，裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞（详见附录）。

 

5.3将75μL的NADP / NADPH反应混合物（来自步骤2.2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品（NADP / NADPH）的每个孔中，并测试样品（NADPH提取物）（来自步骤5.1）以使总量达到测定体积为150μL/孔。

5.4在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

5.5使用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。

 

数据分析

        空白孔中的吸光度（仅PBS缓冲液）用作对照，并从具有NADPH反应的那些孔的值中减去。

Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274

图1. Amplite™比色NADP / NADPH比率分析试剂盒用于使用SpectraMax酶标仪（Molecular devices）测量白色/透明96孔微量培养板中的总NADP / NADPH量和NADP / NADPH比率。

A-总NADPH和NADP剂量反应：孵育1小时可检测到低至0.03μM的总NADPH。

B-NADP / NADPH比例：用或不用NADP提取溶液处理等量的NADP和NADPH混合物15分钟，然后在室温下用提取溶液中和。 在460nm读取信号。 NADP / NADPH摩尔比基于图1B中所示的吸光度计算。

 

附录：使用组分G（NAD / NADH裂解缓冲液）的测试样品制剂

1.植物细胞样品：

用裂解缓冲液以200mg / mL均化，并以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测试。

 

2.细菌样品：

离心收集细菌细胞（（10,000 g，0°C，15 min）。使用约1亿至1千万细胞/ mL裂解缓冲液，将处理后的溶液在室温下保持15分钟。以2500 rpm离心5分钟， 用上清液进行试验。

 

3.哺乳动物细胞样本：

从平板孔中取出培养基，每1-5百万个细胞使用约100μL裂解缓冲液（或在96孔细胞培养板中使用50-100μL/孔），并将处理过的溶液在室温下保持15分钟。 直接使用细胞裂解液或以1500 rpm离心5分钟，使用上清液进行测试。

 

4.组织样品：

称取约20mg组织，用冷PBS洗涤。 在微量离心管中用400μl裂解缓冲液均化。 以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测定。

 

试剂应用文献

Impact of Genetic Reduction of NMNAT2 on Chemotherapy-Induced Losses in Cell Viability In Vitro and Peripheral Neuropathy In Vivo
Authors: Slivicki, Richard A and Ali, Yousuf O and Lu, Hui-Chen and Hohmann, Andrea G
Journal: PloS one (2016): e0147620

NMNAT2: HSP90 Complex Mediates Proteostasis in Proteinopathies
Authors: Ali, Yousuf O and Allen, Hunter M and Yu, Lei and Li-Kroeger, David and Bakhshizadehmahmoudi, Dena and Hatcher, Asante and McCabe, Cristin and Xu, Jishu and Bjorklund, Nicole and Taglialatela, Giulio and others
Journal: PLoS Biol (2016): e1002472

ACLY and ACC1 Regulate Hypoxia-Induced Apoptosis by Modulating ETV4 via α-ketoglutarate
Authors: Keenan, Melissa M and Liu, Beiyu and Tang, Xiaohu and Wu, Jianli and Cyr, Derek and Stevens, Robert D and Ilkayeva, Olga and Huang, Zhiqing and Tollini, Laura A and Murphy, Susan K and others
Journal: PLoS Genet (2015): e1005599

Analysis of the nicotinamide phosphoribosyltransferase family provides insight into vertebrate adaptation to different oxygen levels during the water-to-land transition
Authors: Fang, Chengchi and Guan, Lihong and Zhong, Zaixuan and Gan, Xiaoni and He, Shunping
Journal: FEBS journal (2015): 2858–2878

Metformin-induced energy deficiency leads to the inhibition of lipogenesis in prostate cancer cells
Authors: Loubière, Camille and Goiran, Thomas and Laurent, Kathiane and Djabari, Zied and Tanti, Jean-Frančois and Bost, Frédéric
Journal: Oncotarget (2015): 15652

Prediction of intracellular metabolic states from extracellular metabolomic data
Authors: Aurich, Maike K and Paglia, Giuseppe and Rolfsson, Ottar and Hrafnsdóttir, Sigrún and Magnúsdóttir, Manuela and Stefaniak, Magdalena M and Palsson, Bernhard O and Fleming, Ronan MT and Thiele, Ines
Journal: Metabolomics (2015): 603–619

 

参考文献

Enhanced metabolic activities for ATP production and elevated metabolic flux via pentose phosphate pathway contribute for better CIK cells expansion
Authors: Weiwei Zhang, Huimin Huang, Haibo Cai, Wen-Song Tan
Journal: Cell proliferation (2019)

Soluble α-Klotho treatment protects adenine-induced uremia rats from sciatic nerve damage
Authors: Yingdan Zhao, Jun Ma, Bo Gu, Yang Yi, Hanqing Wang, Zhiyong Guo
Journal: Biomedical Research (2018)

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

 

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产品名称 货号
Amplite NAD/NADH比率检测试剂盒(比色法) Cat#15273
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Amplite NADPH检测试剂盒(比色法) Cat#15272

说明书
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Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光 货号22630-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光 货号22630
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超纯、高纯
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Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光

Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光 货号22630

简要概述

        Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒，对活细胞中的RNA分子进行检测和成像对于多种分子生物学程序极为重要，包括物理运输，遗传信息解释，基因表达调控和某些重要的生物催化作用。 在活细胞中染色RNA的主要挑战是DNA造成的干扰。 为了解决该困难，开发了新型绿色荧光染料作为RNA选择性探针。 AAT Bioquest的Cell Navigator 活细胞RNA成像套件包括StrandBrite RNA Green，因为它能特异性结合细胞中的RNA。 与用于体内RNA染色的商用SYTO®RNA Select染料相比，StrandBrite RNA Green显示出更亮的信号和对RNA的更好的选择性。 此外，该试剂盒可对活细胞和固定细胞中的RNA进行染色。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒。

Amplite 比色法次氯酸检测试剂盒 货号13845-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法次氯酸检测试剂盒 货号13845
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Amplite 比色法次氯酸检测试剂盒

货号 13845 存储条件 F/L
规格 200 Tests
Ex (nm) 575 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

Amplite 比色次氯酸盐（次氯酸）检测试剂盒提供了一种灵敏的基于吸收的检测方法，用于高特异性测量次氯酸盐（次氯酸）。在与次氯酸盐（次氯酸盐）选择性反应后，无色Oxirite 次氯酸盐传感器产生强烈的颜色产物。彩色信号可以通过吸收酶标仪在〜580 nm处测量。用这种比色法次氯酸盐（次氯酸）测定试剂盒，可以检测到痕量的次氯酸盐。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法次氯酸检测试剂盒。

Amplite 比色法次氯酸检测试剂盒 货号13845

通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测 货号22821-AAT Bioquest荧光染料

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通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测 货号22821
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Cell Meter 通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测

通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测 货号22821

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量活细胞中的通用胱天蛋白酶（胱天蛋白酶-1，-3，-4，-5，-6，-7，-8和-9）激活来检测细胞凋亡。胱天蛋白酶激活被广泛认为是细胞凋亡的可靠指标。大多数胱天蛋白酶具有对肽序列Val-Ala-Asp（VAD）的底物选择性。该试剂盒使用TF2-VAD-FMK作为大多数半胱天冬酶活性的荧光指示剂。TF2-VAD-FMK是细胞渗透性的，无毒的，并且与凋亡细胞中活化的casepase-1，-3，-4，-5，-6，-7，-8和-9不可逆地结合。一旦与胱天蛋白酶结合，绿色荧光试剂将保留在细胞内。结合后阻止了胱天蛋白酶的进一步催化，但不会阻止凋亡的进行。添加到培养基中后的15分钟内，该试剂将开始与活性caspase酶反应。该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。它用于定量凋亡细胞中大多数激活的胱天蛋白酶活性，或筛选胱天蛋白酶抑制剂。绿色荧光标记允许通过流式细胞仪直接检测凋亡细胞中激活的胱天蛋白酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 通用Caspase活性荧光法检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞

  2. 将0.5 µL细胞溶液中加入1 µL 500X TF2-VAD-FMK

  3. 将细胞在37°C，5％CO2培养箱中孵育1-4小时

  4. 沉淀细胞并将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液或生长培养基中

  5. 使用带有530/30 nm滤光片（FITC通道）的流式细胞仪分析细胞

实验步骤

1.对于每个样品，在0.5 mL温热培养基或自备缓冲液中以5×105至1×106cell/ mL的密度制备细胞。注意：应单独评估每种细胞系，以确定诱导凋亡的细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段时间，以诱导细胞凋亡，并建立阳性和阴性对照。

3.向处理过的细胞中加入1µL 500X TF2-VAD-FMK（组分A）。

4.将细胞在37°C，5％CO2培养箱中孵育1-4小时。注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在与TF2-VAD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.洗涤并旋转细胞两次。将细胞重悬于0.5 mL分析缓冲液（组分B）或生长培养基中。注意：TF2-VAD-FMK是荧光的；因此，重要的是洗净任何未结合的试剂以除去背景。

6.可选：可以用DNA染色剂标记细胞（例如碘化丙啶或死细胞的7-AAD）。

7.可选：修复细胞。

8.使用带有530/30 nm滤光片的流式细胞仪（FITC通道）检测荧光强度。

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
200 Tests
品牌 :
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用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
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MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401

简要概述

        MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒，AAT Bioquest的MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒使用荧光传感器，在低浓度的革兰氏阳性和阴性细菌细胞中均呈现绿色荧光，但由于较大的染料分子聚集，荧光在较高的细胞溶质浓度下向红色发射转移膜电位。 膜电位的大小随着不同的细菌种类而变化。 对于许多革兰氏阳性物种，红/绿比率倾向于随质子梯度的强度而变化，而在许多革兰氏阴性细菌中，染料的响应似乎与质子梯度强度不成比例。 该试剂盒设计用于在细菌浓度范围为每毫升105-107个生物体时测定细菌膜电位。 可以在510-530nm（FITC滤光器）和600-660nm（德克萨斯红色滤光器）下荧光测量染色细胞，激发波长为 常见的激发光源488nm。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒。 

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产品说明书

操作方法

1.在任何适当的培养基中培养细菌从对数期培养物中获得健康细菌的佳结果。在PBS（组分C）或等效的无菌缓冲液中将细菌培养物稀释至~106个细胞/ mL。可以直接从培养基中稀释细菌而不洗涤。准备足够的悬浮液，每次测试提供500 mL。

2.将500μl细菌悬浮液等分到流式细胞仪管中，进行每个染色实验。准备两个额外的管用于去极化控制和未染色的对照。

3.向去极化的对照样品中加入10μl500μMCCCP（组分B）并混合。

4.向每个流式细胞仪管中加入5μlMycoStainIt Green（100X）（组分A）并混合（不要在未染色的对照样品上加入染色剂）。在室温下孵育样品30分钟。可在5分钟后分析染色样品，但信号强度继续增加直至约30分钟。

5.可以在配备有发射488nm的激光的流式细胞仪中测定染色细菌。在绿色（荧光素滤光片）和红色（德克萨斯红色滤光片）通道中收集荧光。应使用对数信号放大收集前向散射，侧向散射和荧光。

6.仪器调整对于检测细菌等相对较小的颗粒尤其重要。使用未染色的对照样品定位前向和侧向散射通道中的细菌群。使用侧向散射作为设置采集触发器的参数。

7.如上所述，在调节流式细胞仪后应用去极化的对照样品。使用正向散射和侧向散射对细菌进行门控并调整荧光光电倍增管电压，使得绿色和红色MFI值近似相等。不要设置补偿。

8.虽然红色和绿色荧光强度的相对量将随着细胞大小和聚集而变化，但红色与绿色荧光强度的比率可以用作膜电位的尺寸无关指示。还可以通过使用正向散射与侧向散射对细菌进行门控来处理数据，并使用红色与绿色荧光的点图分析门控群体，将MFI值报告为线性值，而不是通道。

9.在比率直方图上，在感兴趣的峰周围设置标记并记录平均比值。对于红色与绿色荧光的点图，设置感兴趣群体周围的区域并记录每个的红色和绿色平均荧光强度（MFI）值。为了评估数据，将红色种群MFI除以绿色种群MFI。

10.在流式细胞仪中，细菌仅根据其大小和染色能力进行鉴定。通过荧光显微镜检查每个样品，以确认检测到的颗粒确实是细菌。

数据分析

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401

图1.将枯草芽孢杆菌培养至对数期并在PBS中稀释至1×10 6个细胞/ mL的浓度。 然后将细胞用5μMCCCP处理20分钟，并与1X MycoStainIt Green孵育30分钟，然后进行流式细胞术分析。

Amplite 荧光法通用型基质金属蛋白酶MMP活性检测试剂盒 绿色荧光 货号13510-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法通用型基质金属蛋白酶MMP活性检测试剂盒 绿色荧光 货号13510
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
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Amplite 荧光法通用型基质金属蛋白酶MMP活性检测试剂盒 绿色荧光

Amplite 荧光法通用型基质金属蛋白酶MMP活性检测试剂盒 绿色荧光 货号13510

货号                     13510                      存储条件 f/l                 
规格 100 Tests                        
Ex (nm) 494 Em (nm) 515
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

        Amplite 荧光法通用型基质金属蛋白酶MMP活性检测试剂盒 绿色荧光 是美国AAT Bioquest生产的用于检测MMP的试剂盒，基质金属蛋白酶（MMP）构成锌依赖性内肽酶家族，其在细胞外基质内起作用。 这些酶负责结缔组织的分解，并且在骨重塑，月经周期和组织损伤的修复中是重要的。虽然很难评估MMP对某些病理过程的确切贡献，但MMP似乎在关节炎的发展以及癌症的侵袭和转移中起关键作用。

        我们的Amplite 通用荧光MMP活性测定试剂盒使用Tide Fluor 2（TF2）/ Tide Quencher 2（TQ2）荧光共振能量转移（FRET）肽作为通用MMP活性指示剂。 它旨在检查MMP酶的一般活性并筛选MMP抑制剂。 在完整的FRET肽中，TF2的荧光被TQ2猝灭。 在通过MMP切割成两个单独的片段后，回收TF2的荧光。 TF2探针具有优异的荧光量子产率和更长的波长，比EDANS / Dabcyl FRET底物灵敏得多。 其信号可通过荧光酶标仪在Ex / Em = 490/525 nm处轻松读取。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法通用型基质金属蛋白酶MMP活性检测试剂盒。 

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产品说明书

96孔板测定示例

概述

添加适当的对照或测试样品（50μL）

预孵育10-15分钟

添加MMP Green™底物溶液（50μL）

孵育0分钟（用于动力学读数）或30分钟至1小时（终点读数）

在Ex / Em = 490/525 nm处监测荧光强度

注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

操作方法

1.根据需要制备含有生物样品的MMP。

2.激活pro-MMPs：

2.1制备2mM APMA工作溶液（2X）：用1：500稀释1M APMA（组分B）和测定缓冲液（组分C），得到2mM APMA工作溶液（2X）。

注意：APMA属于有机汞。 小心轻放！ 根据当地法规处理。

2.2用APMA包埋MMPs：用等体积的2mM APMA工作溶液（2X，来自步骤2.1）孵育含有MMP的样品或纯化的MMPs。 有关孵育时间，请参阅说明书中的附录I. 在实验之前立即激活MMP。

注意1：将含酶样品保存在冰上。 避免剧烈涡旋酶。长时间储存活化酶会使酶失活。

注意2：对于酶活化，优选在较高蛋白质浓度下活化。激活后，您可以进一步稀释酶。

3.准备工作解决方案：

3.1制备MMP Green™底物工作溶液：用1：100稀释MMP Green™底物（组分A）和测定缓冲液（组分C），如说明书中表1所示。

3.2制备MMP稀释：如果使用纯化的MMP，则在测定缓冲液（组分C）中将MMP稀释至合适的浓度。

注意：Pro-MMP需要在使用前激活（参见步骤2.2）。 避免剧烈涡旋酶。 

3.3制备抑制剂和化合物稀释：如果您正在筛选MMPs抑制剂，请根据需要稀释已知的MMPs抑制剂和测试化合物。

4.根据说明书中的表2和表3在96孔微孔板中建立酶促反应：

5.运行酶反应：

5.1如果您正在筛选MMPs抑制剂，则将培养板在酶反应（例如25°C或37°C）的所需温度下预孵育10-15分钟。

5.2将50μL（96孔）或20μL（384孔）MMP Green™底物溶液（来自步骤3.1）加入到测定板的样品和对照孔中。充分混合试剂。

5.3用Ex / Em = 490 / 525nm的荧光板读数器监测荧光强度。

动态读数：立即开始测量荧光强度，每5分钟连续记录数据30至60分钟。

终点读数：在室温下孵育反应30至60分钟，如果可能，避免光照。 充分混合试剂，然后测量荧光强度。

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒 货号45280-AAT Bioquest荧光染料

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iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒 货号45280
级别 :
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95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
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iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒，含山羊抗小鼠IgG

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒 货号45280

简要概述

Power Styramide 信号放大（PSA）系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一，其荧光信号强度比广泛使用的tyramide（TSA）试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时，iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度（超过100倍）的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶（HRP）来催化活性原位共价沉积荧光团，PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多，这使PSA系统比传统的TSA试剂更快，更耐用，更灵敏。与酪酰胺试剂相比，Styramide 缀合物具有更率标记靶标的能力，因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比，Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 594 PSA试剂盒是基于Alexa Fluor 594酪酰胺的试剂盒或其他光谱相似的荧光酪酰胺或TSA试剂盒的出色替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的iFluor 594 Styramide PSA试剂盒。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织

  2. 在封闭缓冲液中添加一抗

  3. 加入结合HRP的二抗

  4. 准备Styramide工作溶液，并在室温下添加到细胞或组织中（5-10分钟）

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液（100X）：将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的Styramide 缀合物（组分A）的小瓶中，制成100X Styramide 储备溶液。注意：一次性使用等分试样，并将未使用的100X储备溶液在2-8℃的冰箱避光保存，并避免重复冻融循环。

2.H2O2溶液（100X）：向9 mL的ddH2O中添加1 mL的3％过氧化氢（组分E）。注意：在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液。

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液（1X）：每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2 储备溶液。注意：盖玻片或96孔板中每孔所需的100 µL Styramide 工作溶液，提供的Styramide 足以进行100次测试。注意： 必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液，并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液：在含1％BSA的PBS中以1：100稀释100X二级抗体-HRP储备溶液。注意：  此试剂盒中提供的二抗HRP足以用于100μL HRP工作溶液/盖玻片或96孔板中的每孔进行100次测试。

实验步骤

（该步骤适用于细胞或组织染色）

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7％甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1％Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

组织固定，脱石蜡和补液

（根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。）

过氧化物酶标记

1.可选：通过在过氧化物酶淬灭溶液（例如3％过氧化氢）中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性，然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选：如果使用结合HRP的链霉亲和素，建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液（例如含1％BSA的PBS）封闭30分钟。

4.除去封闭溶液，并添加稀释好的一抗，在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中，并在室温下孵育60分钟。注意：孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液，并在室温下孵育5-10分钟。 注意：如果您观察到非特异性信号，则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的佳孵育时间，或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂，如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

图示

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒 货号45280

图1.Power Styramide 信号放大（PSA）系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标灵敏的方法之一，其荧光信号强度比广泛使用的tyramide（TSA）试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性，iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度（超过100倍）的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶（HRP）的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多，这使PSA系统比传统的TSA试剂更快，更耐用，更灵敏。

 iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒 货号45280

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide（左）或AlexaFluor 350酪酰胺（中和右）染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像，并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间（25毫秒）下，iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间（125毫秒）才能使染色可视化。

 iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒 货号45280

图3.使用iFluor PSA 成像试剂盒对甲醛固定，对石蜡包埋的人肺腺癌进行顺序免疫染色。用兔抗EpCam抗体和带有山羊抗兔IgG的iFluor 488 PSA 成像试剂盒标记EpCam，然后洗涤。Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗体标记、iFluor 555 PSA 成像试剂盒带有山羊抗小鼠IgG标记。细胞核用DAPI标记。在共聚焦显微镜上采集图像。

 

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22796-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22796
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
200 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
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Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22796

简要概述

        Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 3/7的活性而用于细胞凋亡检测的。因为Caspase-3 (CPP32/apopain)在细胞凋亡的起始过程中发挥着重要作用，因此其作为一个值得信赖的细胞凋亡指示剂广泛地被大家所接受。Caspase 3具有特异性的底物多肽识别序列，即天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)。本试剂盒用Z-DEVD-Rh 110-DVED-Z作为Caspase-3活性的荧光指示剂。通过Caspase 3作用，断裂Rh 110多肽，产生具有强烈绿色荧光的Rh 110，检测其在520-530 nm处的荧光强度，其激发光波长在340~350nm处。本试剂盒提供所有必需组分和检测方案。本检测法强大、稳定，能够用于多种荧光研究平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。使用时96孔板时，每孔用100ul试剂，本试剂盒提供的试剂足够进行200次检测；用384微孔板时，每孔加25ul试剂，本试剂盒提供的试剂足够进行800次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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产品说明书

样本实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 3/7工作溶液
3.在室温下孵育1小时
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光强度（截止= 515 nm）

工作溶液配制

将50μLCaspase3/7底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 3/7工作溶液。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37℃，5％CO2，培养箱中孵育所需的一段时间（对于用喜树碱处理的Jurkat细胞，4-6小时）以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 3/7工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 3/7工作溶液10分钟后，将1μL1mM Ac-DEVD-CHO caspase 3/7抑制剂加入到选定的样品中，以确认抑制半胱天冬酶3/7样活动。

5.以800rpm离心细胞板（特别是对于非贴壁细胞）2分钟（制动关闭）。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）下监测荧光强度。

数据分析

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22796

图1. Jurkat细胞中半胱天冬酶3/7活性的检测。 Jurkat细胞在同一天以80,000个细胞/孔/90μL接种在黑色壁/透明底96孔板中。 用或不用20μM喜树碱处理细胞5小时，和/或用5μM半胱天冬酶3/7抑制剂AC-DEVD-CHO处理细胞10分钟。 加入半胱天冬酶3/7工作溶液（100μL/孔）并在室温下温育1小时。 使用NOVOstar仪器（BMG Labtech）在Ex / Em = 490 / 525nm（截止值= 515nm）下测量荧光强度。

Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒 货号17594-AAT Bioquest荧光染料

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Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒

Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒

Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒 货号17594 货号 17594 存储条件 室温储存不要冷冻, 避免光照
规格 1 Kit 价格 2604
Ex (nm) 495 Em (nm) 540
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：17594

产品名称：Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒

规格：1kit

储存条件：保存在冰箱-15℃避光干燥

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

外观：液体

激发波长（nm）：495

发射波长（nm）：540

 

适用仪器

透射仪  
激发： 254nm or 300nm
发射: long Path 绿色滤波片（如：SYBR或GelStar）

 

产品介绍

Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒 是美国AAT Bioquest生产的核酸染料，Cyber Orange 是一种极其敏感的核酸凝胶染料，可使用标准的300 nm UV透照仪和Polaroid 667黑白印刷胶片检测凝胶中的DNA或RNA。 与Cyber Green 染色剂一样，这种出色的敏感性可以归因于独特的染料特性的结合。 由于与核酸结合的Cyber Orange 染料在〜495 nm和〜300 nm处均显示出最大激发光（最大发射量为〜537 nm），因此它可与多种仪器兼容，包括紫外线落射照明器和透射照明器以及 蓝光透射灯，以及基于汞弧灯和氩离子激光的凝胶扫描仪。我们的Gelite 橙色核酸凝胶染色凝胶试剂盒包括我们的Cyber Orange 核酸染色剂，具有优化且稳定的操作流程。 它为凝胶中的核酸样品染色提供了方便的操作方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒 。 

产品说明书

样品实验方案

溶液配制

工作溶液

将1μLGelite 橙色（组分A）添加到200μL5X凝胶上样缓冲液（组分B）中。 通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。

 

操作步骤

1.根据需要准备DNA样品。

2.将4 µL Gelite Orange工作溶液加入16 µL DNA样品中，并充分混合。 电泳前，在室温下孵育5-15分钟。

3.根据您的标准方案运行凝胶。

4.使用300 nm紫外线或254 nm透照器或使用长路径绿色滤光片（例如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的基于激光的凝胶扫描仪对凝胶成像。

 

参考文献

A Broadly Reactive One-Step SYBR Green I Real-Time RT-PCR Assay for Rapid Detection of Murine Norovirus
Authors: Hanaki K, Ike F, Kajita A, Yasuno W, Yanagiba M, Goto M, Sakai K, Ami Y, Kyuwa S.
Journal: PLoS One (2014): e98108

A SYBR Green I based real time RT-PCR assay for specific detection and quantitation of Peste des petits ruminants virus
Authors: Abera T, Thangavelu A, Joy Chandran ND, Raja A.
Journal: BMC Vet Res (2014): 22

A SYBR-green I quantitative real-time reverse transcription-PCR assay for rabies viruses with different virulence
Authors: Wang L, Liu Y, Zhang S, Wang Y, Zhao J, Miao F, Hu R.
Journal: Virol Sin (2014): 131

Comparison of SYBR Green and TaqMan methods in quantitative real-time polymerase chain reaction analysis of four adenosine receptor subtypes
Authors: Tajadini M, Panjehpour M, Javanmard SH.
Journal: Adv Biomed Res (2014): 85

Detection and characterization of Leishmania (Leishmania) and Leishmania (Viannia) by SYBR green-based real-time PCR and high resolution melt analysis targeting kinetoplast minicircle DNA
Authors: Ceccarelli M, Galluzzi L, Migliazzo A, Magnani M.
Journal: PLoS One (2014): e88845

Detection of Cardamom mosaic virus and Banana bract mosaic virus in cardamom using SYBR Green based reverse transcription-quantitative PCR
Authors: Siljo A, Bhat AI, Biju CN.
Journal: Virusdisease (2014): 137

Development and comparative evaluation of SYBR Green I-based one-step real-time RT-PCR assay for detection and quantification of West Nile virus in human patients
Authors: Kumar JS, Saxena D, Parida M.
Journal: Mol Cell Probes. (2014)

Development and evaluation of SYBR Green-I based quantitative PCR assays for herpes simplex virus type 1 whole transcriptome analysis
Authors: Garvey CE, McGowin CL, Foster TP.
Journal: J Virol Methods (2014): 101

Development of a High-resolution Melting Analysis Method Based on SYBR Green-I for rs7216389 Locus Genotyping in Asthmatic Child Patients
Authors: Vali Z, Raz A, Bokharaei H, Nabavi M, Bemanian MH, Yazdi MS, Djadid ND.
Journal: Avicenna J Med Biotechnol (2014): 72

Development of a SYBR Green I based one-step real-time PCR assay for the detection of Hantaan virus
Authors: Jiang W, Wang PZ, Yu HT, Zhang Y, Zhao K, Du H, Bai XF.
Journal: J Virol Methods (2014): 145

 

相关产品

产品名称 货号
Gelite 绿色核酸凝胶染色试剂盒 Cat#17589

说明书
Gelite 橙色核酸凝胶染色试剂盒 .pdf

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *PPi选择性高* 货号21614-AAT Bioquest荧光染料

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PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *PPi选择性高*

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *PPi选择性高*

货号 21614 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 4584
Ex (nm) 370 Em (nm) 467
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测焦磷酸的试剂盒，焦磷酸盐（PPi）通过许多生化反应产生，例如ATP水解，DNA和RNA聚合，腺苷酸环化酶形成的环AMP和脂肪酸的酶促活化以形成它们的辅酶A酯。我们的PhosphoWroks 焦磷酸盐检测试剂盒提供了最强大的分光光度法测量焦磷酸盐。该试剂盒使用我们专有的荧光焦磷酸盐，其荧光强度成比例地取决于焦磷酸盐的浓度。与磷酸盐和ATP相比，该试剂盒中使用的PPi探针对PPi具有相当高的选择性。我们的测定法比酶偶联焦磷酸盐方法更容易和更稳定，这些方法需要至少两种酶用于焦磷酸盐检测。该试剂盒提供了测定焦磷酸盐的所有必需成分。该试剂盒已成功用于高通量筛选（HTS）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒。 

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 370nm
发射： 470nm
cutoff： 455nm
推荐孔板： 黑色孔板

产品说明书

操作步骤

简要概述

准备PPi探针工作溶液（50μL）
添加焦磷酸盐标准品和/或测试样品（50μL）
在室温下孵育10至30分钟
检测Ex / Em = 370/470 nm处的荧光强度（cutoff= 455 nm）

 

溶液制备

1.制备储备溶液

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 PPi探针储备溶液（200X）：
将50μLDMSO（组分D）加入到PPi探针（组分B）的小瓶中以制备200X PPi探针储备溶液。 注意：对于一个96孔板，25μLPPiSensor储备溶液就足够了。

 

2.制备标准溶液

焦磷酸盐标准
通过将10μL50mM焦磷酸盐标准品（组分C）加入490μL测定缓冲液（组分A）或您选择的缓冲液（优选50 mM Hepes缓冲液，pH 7）中制备1 mM焦磷酸盐标准品，制成1 mM焦磷酸盐标准品。 取1 mM焦磷酸盐标准品（PS7）进行1：3连续稀释，得到连续稀释的焦磷酸盐标准品（PS6-PS1）和测定缓冲液（组分A）。

 

3.制备工作溶液

将25μL200XPPi Sensor储备溶液加入5 mL分析缓冲液（组分A）中，并充分混合。 注意：由于该检测方法对PPi具有高灵敏度，因此使用不含PPi的实验室器具和试剂非常重要。 注意：DTT（1 uM）会增加背景，MgCl2≥2mM会降低反应。

 

样品实验方案

表1.实心黑色96孔微孔板中焦磷酸盐标准品和测试样品的布局。

PS =焦磷酸盐标准，BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
PS1 PS1 … …
PS2 PS2 … …
PS3 PS3    
PS4 PS4    
PS5 PS5    
PS6 PS6    
PS7 PS7    

 

表2.每个孔的试剂组成

孔 规格 试剂
PS1-PS7 50ul 连续稀释（1至1000μM）
BL 50ul 分析缓冲液（组分A）
TS 50ul 样品

根据表1和2中提供的布局制备焦磷酸盐标准品（PS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

向焦磷酸盐标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLPPiSensor工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLPPiSensor工作溶液，总体积为50μL/孔。

在室温下孵育反应10-30分钟，避光。

使用荧光酶标仪在Ex / Em = 370/470 nm（截止= 455 nm）下检测荧光

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算PPi样本。 我们建议使用在线线性回归计算器，该计算器可在以下位置找到：

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *PPi选择性高* 货号21614

图1.使用PhosphoWorks Fluoremetric焦磷酸盐测定试剂盒在固体黑色96孔板中使用荧光酶标仪测量焦磷酸盐，ATP和磷酸盐剂量响应。

 

参考文献

Biological studies and target-engagement of the 2-C-methyl-D-erythritol 4-phosphate cytidylyltransferase (IspD)-targeting antimalarial agent (1R, 3S)-MMV008138 and analogs
Authors: Maryam Ghavami, Emilio Fernando Merino, ZhongKe Yao, Rubayet Elahi, Morgan Simpson, Maria Fernandez-Murga, Joshua Hayden Butler, Michael Casasanta, Priscilla Krai, Maxim Totrov
Journal: ACS Infectious Diseases (2017)

Structural Insights into Inhibition of Escherichia coli Penicillin-binding Protein 1B
Authors: Dustin T King, Gregory A Wasney, Michael Nosella, Anita Fong, Natalie CJ Strynadka
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): 979–993

Biomarkers identified by urinary metabonomics for noninvasive diagnosis of nutritional rickets
Authors: Maoqing Wang, Xue Yang, Lihong Ren, Songtao Li, Xuan He, Xiaoyan Wu, Tingting Liu, Liqun Lin, Ying Li, Changhao Sun
Journal: Journal of proteome research (2014): 4131–4142

Host-Pathogen Interaction and Signaling Molecule Secretion Are Modified in the dpp3 Knockout Mutant of Candida lusitaniae
Authors: Ayman Sabra, Jean-Jacques Bessoule, Vessela Atanasova-Penichon, Thierry Noel, Karine Dementhon
Journal: Infection and immunity (2014): 413–422

 

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Cell Meter 细菌活性检测试剂盒 货号22400-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 细菌活性检测试剂盒

Cell Meter 细菌活性检测试剂盒

Cell Meter 细菌活性检测试剂盒 货号22400 货号 22400 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 482 Em (nm) 512
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细菌活力检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌活力的试剂盒，AAT Bioquest的Mycolight 细菌活力检测试剂盒提供革兰氏阳性和阴性细菌细胞中细菌活力的双色荧光检测。该试剂盒使用我们的绿色荧光核酸染色MycoLight Green和红色荧光核酸染色碘化丙啶的混合物。单独使用时，MycoLight Green染色剂通常标记人群中的所有细菌（活的和死的）。相比之下，碘化丙锭仅渗透膜受损的细菌，当存在两种染料时，导致MycoLight Green染色荧光减少。因此，使用MycoLight Green和碘化丙锭染料的适当混合物，具有完整细胞膜的活细菌发出绿色荧光，而具有受损膜的死亡或垂死细菌产生红色荧光。 Mycolight 细菌活力检测试剂盒是一种强大的工具，用于监测细菌群体的活力，作为细胞膜完整性的函数。可以在510-530nm（FITC滤光器）和600-660nm（德克萨斯红色滤光器）下荧光测量染色细胞，激发波长为最常见的激发光源488nm。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细菌活力检测试剂盒。 

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适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 530/30nm,610/20nm滤波片
通道： FITC，PE-Texas Red通道
荧光显微镜  
激发： 510/600nm
发射： 530/660nm
推荐孔板： 黑色透明
通道： FITC/Texas Red滤波片

产品说明书

操作方法

溶液配制

染料工作溶液（250X）：
在微量离心管中加入等体积的MycoLight Green（组分A）和碘化丙啶（组分B）并充分混合。 注意：每次准备新鲜的工作溶液。

 

样品实验方案

1.在任何适当的培养基中培养细菌从对数期培养物中获得健康细菌的最佳结果。在0.85％NaCl或适当的缓冲液中将细菌培养物稀释至~106至108个细胞/ mL。准备足够的悬浮液，为流式细胞仪每次测试提供500μL，或为96孔板提供每次测试100μL。注意：在染色细菌之前去除生长培养基的痕迹。单次洗涤步骤通常足以从细菌悬浮液中除去显着痕量的干扰介质组分。建议不要使用磷酸盐清洗缓冲液，因为它们会降低染色效率。

2.向每mL细菌悬浮液中加入4μL染料工作溶液（250X）。充分混合并在室温下孵育15分钟。避光。

3.可以通过荧光显微镜，荧光酶标仪或流式细胞术分析染色的细菌细胞。

4.来自活细菌和死细菌的荧光可以与任何标准荧光素长通滤光片组同时观察。或者，可以用荧光素和德克萨斯红过滤器组分别观察活的（绿色荧光的）和死的（红色荧光的）细胞。

 

数据分析

Cell Meter 细菌活性检测试剂盒 货号22400

图1.用Cell Meter 细菌活力测定试剂盒（Cat＃22400）染色的大肠杆菌HST08的荧光图像。 具有完整细胞膜的活细菌显示绿色荧光（左），而具有受损膜的70％酒精杀死的死细菌（右）显示红色荧光。 活的和死的大肠杆菌细菌细胞也在混合群体中可视化（中）。

 

参考文献

Applicability of LIVE/DEAD BacLight stain with glutaraldehyde fixation for the measurement of bacterial abundance and viability in rainwater
Authors: Hu, W.; Murata, K.; Zhang, D.
Journal: J Environ Sci (China) (2017): 202-213

the BacLight Live/Dead viability assay and other vital dyes
Authors: Karkashan, A.; Khallaf, B.; Morris, J.; Thurbon, N.; Rouch, D.; Smith, S. R.; Deighton, M., Comparison of methodologies for enumerating and detecting the viability of Ascaris eggs in sewage sludge by standard incubation-microscopy
Journal: Water Res (2015): 533-44

Determination of the effects of medium composition on the monochloramine disinfection kinetics of Nitrosomonas europaea by the propidium monoazide quantitative PCR and Live/Dead BacLight methods
Authors: Wahman, D. G.; Schrantz, K. A.; Pressman, J. G.
Journal: Appl Environ Microbiol (2010): 8277-80

Monochloramine disinfection kinetics of Nitrosomonas europaea by propidium monoazide quantitative PCR and Live/dead BacLight methods
Authors: Wahman, D. G.; Wulfeck-Kleier, K. A.; Pressman, J. G.
Journal: Appl Environ Microbiol (2009): 5555-62

Assessment and interpretation of bacterial viability by using the LIVE/DEAD BacLight Kit in combination with flow cytometry
Authors: Berney, M.; Hammes, F.; Bosshard, F.; Weilenmann, H. U.; Egli, T.
Journal: Appl Environ Microbiol (2007): 3283-90

Evaluation of the LIVE/DEAD BacLight kit for detection of extremophilic archaea and visualization of microorganisms in environmental hypersaline samples
Authors: Leuko, S.; Legat, A.; Fendrihan, S.; Stan-Lotter, H.
Journal: Appl Environ Microbiol (2004): 6884-6

LIVE/DEAD BacLight : application of a new rapid staining method for direct enumeration of viable and total bacteria in drinking water
Authors: Boulos, L.; Prevost, M.; Barbeau, B.; Coallier, J.; Desjardins, R.
Journal: J Microbiol Methods (1999): 77-86

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22786
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 红色荧光 Cat#22783
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 *近红外荧光,适合微孔板检测* Cat#22787

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Cell Meter 细菌活性检测试剂盒.pdf

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401 货号 22401 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 483 Em (nm) 501
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒，AAT Bioquest的MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒使用荧光传感器，在低浓度的革兰氏阳性和阴性细菌细胞中均呈现绿色荧光，但由于较大的染料分子聚集，荧光在较高的细胞溶质浓度下向红色发射转移膜电位。 膜电位的大小随着不同的细菌种类而变化。 对于许多革兰氏阳性物种，红/绿比率倾向于随质子梯度的强度而变化，而在许多革兰氏阴性细菌中，染料的响应似乎与质子梯度强度不成比例。 该试剂盒设计用于在细菌浓度范围为每毫升105-107个生物体时测定细菌膜电位。 可以在510-530nm（FITC滤波片组）和600-660nm（德克萨斯红色滤波片组）下荧光测量染色细胞，激发波长为最常见的激发光源488nm。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒。 

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适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 530/30nm,610/20nm滤波片
推荐孔板： FITC，PE-Texas Red通道
荧光显微镜  
激发： 510/600nm
发射： 530/660nm
推荐孔板： 黑色透明
通道： FITC/Texas Red滤波片

产品说明书

操作方法

1.在任何适当的培养基中培养细菌从对数期培养物中获得健康细菌的最佳结果。在PBS（组分C）或等效的无菌缓冲液中将细菌培养物稀释至~106个细胞/ mL。可以直接从培养基中稀释细菌而不洗涤。准备足够的悬浮液，每次测试提供500 mL。

2.将500μl细菌悬浮液等分到流式细胞仪管中，进行每个染色实验。准备两个额外的管用于去极化控制和未染色的对照。

3.向去极化的对照样品中加入10μl500μMCCCP（组分B）并混合。

4.向每个流式细胞仪管中加入5μlMycoStainIt Green（100X）（组分A）并混合（不要在未染色的对照样品上加入染色剂）。在室温下孵育样品30分钟。可在5分钟后分析染色样品，但信号强度继续增加直至约30分钟。

5.可以在配备有发射488nm的激光的流式细胞仪中测定染色细菌。在绿色（荧光素滤光片）和红色（德克萨斯红色滤光片）通道中收集荧光。应使用对数信号放大收集前向散射，侧向散射和荧光。

6.仪器调整对于检测细菌等相对较小的颗粒尤其重要。使用未染色的对照样品定位前向和侧向散射通道中的细菌群。使用侧向散射作为设置采集触发器的参数。

7.如上所述，在调节流式细胞仪后应用去极化的对照样品。使用正向散射和侧向散射对细菌进行门控并调整荧光光电倍增管电压，使得绿色和红色MFI值近似相等。不要设置补偿。

8.虽然红色和绿色荧光强度的相对量将随着细胞大小和聚集而变化，但红色与绿色荧光强度的比率可以用作膜电位的尺寸无关指示。还可以通过使用正向散射与侧向散射对细菌进行门控来处理数据，并使用红色与绿色荧光的点图分析门控群体，将MFI值报告为线性值，而不是通道。

9.在比率直方图上，在感兴趣的峰周围设置标记并记录平均比值。对于红色与绿色荧光的点图，设置感兴趣群体周围的区域并记录每个的红色和绿色平均荧光强度（MFI）值。为了评估数据，将红色种群MFI除以绿色种群MFI。

10.在流式细胞仪中，细菌仅根据其大小和染色能力进行鉴定。最好通过荧光显微镜检查每个样品，以确认检测到的颗粒确实是细菌。

 

数据分析

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401

图1.将枯草芽孢杆菌培养至对数期并在PBS中稀释至1×10 6个细胞/ mL的浓度。 然后将细胞用5μMCCCP处理20分钟，并与1X MycoStainIt Green孵育30分钟，然后进行流式细胞术分析。

 

参考文献

Raman spectroscopic analysis of Lactobacillus rhamnosus GG in response to dehydration reveals DNA conformation changes
Authors: Myintzu Hlaing, M.; Wood, B.; McNaughton, D.; Ying, D.; Augustin, M. A.
Journal: J Biophotonics (2017): 589-597

Antibacterial and antigelatinolytic effects of Satureja hortensis L. essential oil on epithelial cells exposed to Fusobacterium nucleatum
Authors: Zeidan-Chulia, F.; Keskin, M.; Kononen, E.; Uitto, V. J.; Soderling, E.; Moreira, J. C.; Gursoy, U. K.
Journal: J Med Food (2015): 503-6

Inactivation of Cronobacter sakazakii in reconstituted infant formula by combination of thymoquinone and mild heat
Authors: Shi, C.; Jia, Z.; Chen, Y.; Yang, M.; Liu, X.; Sun, Y.; Zheng, Z.; Zhang, X.; Song, K.; Cui, L.; Baloch, A. B.; Xia, X.
Journal: J Appl Microbiol (2015): 1700-6

Fourier transform infra-red spectroscopy and flow cytometric assessment of the antibacterial mechanism of action of aqueous extract of garlic (Allium sativum) against selected probiotic Bifidobacterium strains
Authors: Booyens, J.; Thantsha, M. S.
Journal: BMC Complement Altern Med (2014): 289

Deposition and survival of Escherichia coli O157:H7 on clay minerals in a parallel plate flow system
Authors: Cai, P.; Huang, Q.; Walker, S. L.
Journal: Environ Sci Technol (2013): 1896-903

Observation of injured E. coli population resulting from the application of high-pressure throttling treatments
Authors: De Lamo-Castellvi, S.; Toledo, R.; Frank, J. F.
Journal: J Food Sci (2013): M582-6

Effect of air drying on bacterial viability: A multiparameter viability assessment
Authors: Nocker, A.; Fernandez, P. S.; Montijn, R.; Schuren, F.
Journal: J Microbiol Methods (2012): 86-95

patients and environment
Authors: Lindback, T.; Rottenberg, M. E.; Roche, S. M.; Rorvik, L. M., The ability to enter into an avirulent viable but non-culturable (VBNC) form is widespread among Listeria monocytogenes isolates from salmon
Journal: Vet Res (2010): 8

Behaviors of physiologically active bacteria in water environment and chlorine disinfection
Authors: Sawaya, K.; Kaneko, N.; Fukushi, K.; Yaguchi, J.
Journal: Water Sci Technol (2008): 1343-8

Long-term survival of Legionella pneumophila in the viable but nonculturable state after monochloramine treatment
Authors: Alleron, L.; Merlet, N.; Lacombe, C.; Frere, J.
Journal: Curr Microbiol (2008): 497-502

说明书
MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 .pdf

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 蓝色荧光 货号22500-AAT Bioquest荧光染料

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 蓝色荧光

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 蓝色荧光

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 蓝色荧光 货号22500 货号 22500 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 1944
Ex (nm) 406 Em (nm) 445
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于细胞功能的荧光显微镜研究。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 这个特定的试剂盒设计用于在蓝色荧光中均匀标记固定的哺乳动物细胞，以用于流式细胞仪应用紫激光激发。 该试剂盒使用了专有的蓝色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料被紫激光充分激发（405 nm激发），以460 nm发出荧光。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光流式细胞仪应用。

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适用仪器

流式细胞仪  
激发： 405nm激光
发射： 450/40nm滤波片
通道： Pacific Blue通道
荧光显微镜  
激发： 410nm
发射： 450nm
推荐孔板： 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在HHBS中制备样品（0.5 mL /测定）
2.替换为HHBS
3.将Stain It™Violet 450添加到细胞悬液中
4.在室温或37°C下将细胞染色20-60分钟
5.清洗细胞
6.修复细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Stain It Violet 450储备溶液（500X）：
将200 µL DMSO（组分B）加入Stain It Violet 450（组分A）小瓶中，制成500X Stain It Violet 450储备液。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×106 / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It Violet 450储备溶液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO2的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞。

 

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22501
Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 橙色荧光 Cat#22502
Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22601

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光 货号22501-AAT Bioquest荧光染料

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光 货号22501 货号 22501 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 1944
Ex (nm) 412 Em (nm) 505
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于细胞功能的荧光显微镜研究。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 这种特殊的试剂盒设计用于在绿色荧光中均匀标记固定的哺乳动物细胞，以便通过紫激光激发在流式细胞仪中使用。 该试剂盒使用专有的绿色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料已被紫激光（405 nm激发）充分激发到510 nm的荧光。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光流式细胞仪应用。

点击查看光谱

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 405nm激光
发射： 525/40nm滤波片
推荐孔板： AmCyan通道
荧光显微镜  
激发： 408nm
发射： 512nm
推荐孔板： 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在HHBS中制备样品（0.5 mL /测定）
2.替换为HHBS
3.将Stain It V510添加到细胞悬液中
4.在室温或37°C下将细胞染色20-60分钟
5.清洗细胞
6.修复细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

 

溶液配制

1.储备溶液配制

1.1 Stain It V510储备溶液（500X）：
将200 µL DMSO（组分B）添加到Stain It V510（组分A）的小瓶中，以得到500X Stain It V510储备液。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×106 / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It Violet 510储备溶液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO2的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞。

 

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 蓝色荧光 Cat#22500
Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 橙色荧光 Cat#22502
Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22601

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 橙色荧光 货号22502-AAT Bioquest荧光染料

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 橙色荧光

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 橙色荧光

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 橙色荧光 货号22502 货号 22502 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 1944
Ex (nm) 394 Em (nm) 537
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于细胞功能的荧光显微镜研究。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 这种特殊的试剂盒设计用于在绿色荧光中均匀标记固定的哺乳动物细胞，以便通过紫激光激发在流式细胞仪中使用。 该试剂盒使用专有的绿色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料已被紫激光（405 nm激发）充分激发到510 nm的荧光。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光流式细胞仪应用。

点击查看光谱

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 405nm激光
发射： 525/50nm滤波片
通道： Pacific Orange通道
荧光显微镜  
激发： 398nm
发射： 550nm
推荐孔板： 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在HHBS中制备样品（0.5 mL /测定）
2.替换为HHBS
3.将Stain It V550添加到细胞悬液中
4.在室温或37°C下将细胞染色20-60分钟
5.清洗细胞
6.修复细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Stain It V550储备溶液（500X）：
将200 µL DMSO（组分B）添加到Stain It V550（组分A）的小瓶中，得到500X Stain It V550储备液。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×106 / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It Violet 550储备溶液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO2的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞。

 

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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产品名称 货号
Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 蓝色荧光 Cat#22500
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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 深红色荧光 货号22604-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 深红色荧光

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 深红色荧光

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 深红色荧光 货号22604 货号 22604 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 1944
Ex (nm) 649 Em (nm) 664
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细胞的试剂盒，我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于对细胞功能进行荧光显微镜检查。 细胞的有效标记为研究细胞事件提供了一种有力的方法。 该特定试剂盒设计用于以蓝色荧光均匀标记固定的哺乳动物细胞，以进行长期的显微镜检查。 该试剂盒使用了专有的蓝色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料具有很好的光稳定性，因此可以重复检查图像。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒。 

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适用仪器

流式细胞仪  
激发： 640nm激光
发射： 660/20 nm滤波片
通道： APC通道
荧光显微镜  
激发： 649nm
发射： 660nm
推荐孔板： 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用HHBS制备样品（0.5 mL /分析）
2.替换为HHBS
3.将Stain It 添加到细胞悬浮液中
4.在室温或37°C下染色细胞20-60分钟
5.洗净细胞
6.固定细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

 

操作步骤

表1.用于流式细胞术分析的荧光光谱特性和激发光

货号 描述 Ex(nm) Em(nm) 激发光源（nm）
22500 蓝色荧光，405nm激发 410 450 405
22501 绿色荧光，405nm激发 408 512 405
22502 橙色荧光，405nm激发 398 550 405
22599 红色荧光优化用于流式细胞术 523 617 488
22600 蓝色荧光 353 442 335
22601 绿色荧光 498 521 488
22602 橙色荧光 547 573 561或488
22603 红色荧光 583 603 561
22604 深红色荧光 649 660 633
22605 近红外荧光 749 775 633

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×106 / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It 储备液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO2的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞（参见表1）。

 

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
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Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
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Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
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Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
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Journal: Journal of Periodontal Research

 

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