MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒 货号22411-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒  货号22411
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
通过荧光显微镜观察活细菌和死细菌
特色服务 :
包邮

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MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒  货号22411

货号 22411 存储条件                      f/l
规格                           100 Tests                                            
Ex (nm) 488/540 Em (nm) 530/620
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

        MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,AAT Bioquest的MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒提供双色荧光检测,通过荧光显微镜观察活细菌和死细菌。MycoLight 520是一种非荧光酯酶底物,可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。在细菌细胞内非特异性酯酶水解后,产生绿色荧光产物并在细菌内积累。相比之下,碘化丙锭是一种红色荧光核酸染色剂,只能穿透受损膜的细菌。因此,使用MycoLight 520和碘化丙锭染料的适当混合物,具有完整细胞膜的活细菌发出绿色荧光,而具有受损膜的死细菌产生红色荧光。MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒是一种用于对活/死细菌进行成像的强大工具。可以在Ex / Em = 488 / 525nm(FITC滤光器组)和540 / 620nm(TRITC滤光器组)下荧光测量染色细胞,分别用于活细菌和死细菌。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒。 

产品说明书

染色样品示例

概述

1.准备100X MycoLight 520原液
2.准备细菌样本
3.加入MycoLight 520和碘化丙锭
4.将细菌样品与MycoLight 520和碘化丙啶在37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟
5.用FITC和TRITC滤光片组通过荧光显微镜分析样品
注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分

操作步骤

        在没有额外说明的情况下,所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C,避免反复冻融循环。

1.MycoLight 520原液(100X):
将100μLDMSO(组分D)加入MycoLight 520(组分A)的小瓶中。
注意:将储备溶液储存在-20°C,避免光照,反复冻融。

2.制备浓度为106至108个细胞/ mL的细菌样品。 在适当的培养基中将细菌培养到对数晚期。

注意:测量波长= 600 nm(OD600)的细菌培养物的光密度以确定细胞数。 对于大肠杆菌培养物,OD 600 = 1.0等于8×108个细胞/ ml。

3.通过以10,000xg离心10分钟除去培养基,并将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分C)中。
4.通过用70%乙醇处理30分钟,然后煮沸60分钟,可以制备死细菌。
 
5.染色
        以下是推荐的方案,应根据不同的细菌菌株或其他特定需求进行优化。 如果观察到更高的背景,可以在成像之前添加任选的洗涤步骤。
 
5.1将1μL100XMycoLight 520原液和1μL100X碘化丙啶(组分B)加入到100μL测定缓冲液中的细菌样品中。
5.2充分混合并在37℃下在黑暗中孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟以获得染色结果。
5.3通过FITC(Ex / Em = 488 / 530nm)和TRITC(Ex / Em = 540 / 620nm)通道用荧光显微镜监测细菌的荧光。
 
染色结果
 
MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒  货号22411
图1.用MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒染色活的和死的枯草芽孢杆菌的混合群体。 具有活性细胞内酯酶的活细菌显示绿色荧光,而具有受损膜的70%酒精杀死的死细菌显示红色荧光。

 

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒 货号22409-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒  货号22409
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒  货号22409

简要概述

        MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,MycoLight 活细菌荧光成像套件提供了一种简便方法,可通过荧光显微镜可视化活细菌。 MycoLight 520是一种非荧光酯酶底物,可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。 通过细菌细胞内非特异性酯酶水解后,会产生绿色荧光产物,并在细菌内积累。 与常用的酯酶底物CFDA和CFDA-AM相比,该试剂盒可提供更明亮,更稳定的信号,具有更低的背景和更容易的染色方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备100X染料储备溶液
2.准备细菌样品
3.添加MycoLight 520
4.将细菌样品与MycoLight 520信号增强剂在黑暗中于37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟
5.通过带有FITC滤光片组的荧光显微镜分析样品

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1MycoLight 520储备液(100X):
将100 uL DMSO(组分D)添加到MycoLight 520(组分A)小瓶中,制成100X储备液。

样品示例及操作

1.准备细菌样品,浓度范围为106到108个细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分C)中。注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液,然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液(组分C)中,以使处理过的样品中细菌的浓度与活菌浓度相同。注意:开始治疗之前,请确定细菌培养物的浓度。注意:死细菌可以作为阴性对照,建议使用70%乙醇杀死细菌30分钟,然后煮沸60分钟。

3.将1 µL 100X MycoLight 520储备液和10 µL 10X Signal Enhancer(组分B)加到90 µL的测定缓冲液细菌样品中。

4.充分混合并在黑暗中于37°C孵育5-10分钟,或在室温孵育60分钟,以获得染色效果。

5.使用荧光显微镜通过FITC(Ex / Em = 488/530 nm)通道监控细菌的荧光。注意:相同的方案也可用于酶标仪检测。

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒 货号22407-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒 货号22407
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒 货号22407

简要概述

        MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,MycoLight流式细胞术活菌分析试剂盒提供了一种简便的方法,可根据细胞内酯酶活性评估细菌活力。 MycoLight™520是一种非荧光酯酶底物,可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。 通过细菌细胞内非特异性酯酶水解后,会产生绿色荧光产物,并在细菌内积累。 与常用的酯酶底物CFDA和CFDA-AM相比,该试剂盒可提供更明亮,更稳定的信号,具有更低的背景和更容易的染色方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备100X染料储备溶液。
2.准备细菌样品。
3.将细菌样品与MycoLight 520在黑暗中于37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟。
4.通过带有FITC通道的流式细胞仪分析样品。

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1MycoLight 520储备液(100X):
将100 µL DMSO(组分C)加入一小瓶MycoLight 520(组分A)中,制成100X储备液。

样品示例及操作

1.准备细菌样品,浓度范围为106到108个细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分B)中。注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液,然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液(组分B)中,以使处理后样品中的细菌浓度与活菌浓度相同。注意:开始治疗之前,请确定细菌培养物的浓度。注意:死细菌可以作为阴性对照,建议使用70%乙醇杀死细菌30分钟,然后煮沸60分钟。

3.活/死细菌混合物制备示例:混合7种不同比例的细菌悬液,如表1所示,每个样品的总体积为200 µL。

4.将2 µL 100X MycoLight 520储备液加到200 µL Assay Buffer中的细菌样品中。

5.充分混合并在黑暗中于37°C孵育5-10分钟,或在室温孵育60分钟,以获得染色效果。

6.在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加300 µL分析缓冲液(组分C)以增加体积。

7.用流式细胞仪通过FITC通道(488/530 nm)监测细菌的荧光。注意:要排除杂物,建议将流式细胞仪的阈值设置为以下值:FSC> 10,000,SSC> 5,000。注意:MycoLight 520的效率高度依赖菌株,因此应相应优化染色条件。

表1.混合以达到各种活/死比的活样本和死样本的示例体积

活细胞比例 样品死亡µL 活样品µL
0:100 0 200
10:90 20 180
30:70 60 140
50:50 100 100
90:10 180 20
100:0 200 0

MycoLight Green JJ98核酸染料 货号24000-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight Green JJ98核酸染料  货号24000
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95
产品规格 :
100ul
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Product details

MycoLight Green JJ98核酸染料

MycoLight Green JJ98核酸染料  货号24000

简要概述

MycoLight Green JJ98核酸染料是美国AAT Bioquest生产的核酸染料,MycoLight 绿色JJ98染色是一种绿色荧光核和染色体复染剂,对原核胞和真核细胞膜均具有渗透性。MycoLight Green JJ98染料对DNA具有高亲和力,并且在与 接近488 nm氩激光线的激发大值和~500 nm处的荧光发射大值结合时显示出增强的荧光。MycoLight Green JJ98染色剂特别适用于细菌检测的核复染剂,因为它可以染色活的和死的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。它是STYO®9(STYO®是Invitrogen的商标)的替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight Green JJ98核酸染料。 

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产品说明书

样品实验方案

操作步骤

以下协议适用于大多数细胞类型。这些条件需要调整每种细胞类型和实验系统。生长培养基,细胞密度,其他细胞类型和因子的存在可能影响染色。玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的染色,并导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

稀释MycoLight Green JJ98和JJ99时使用塑料管,因为稀释的污渍粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中获得结果。

1.培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上原位染色。通过离心和悬浮液沉淀细胞重悬于缓冲盐溶液或水中。

2.用非磷酸盐缓冲液(如Hepes缓冲液或您选择的缓冲液)稀释MycoLight Green JJ98或JJ99。添加MycoLight Green JJ98。使用下表1中列出的浓度作为指导。在 初的实验中,在整个建议范围内尝试几种染料浓度,以确定产生染色的浓度。

表格1 用MycoLight Green JJ98染色细胞的建议条件

适用 溶度 染色条件
细菌细胞 50 nM – 20μM 涡旋混合,然后孵育1-30分钟。
真核细胞 10 nM – 5μM 孵育10-120分钟。
微孔板 TE缓冲液中50nM 孵育5分钟,冲洗干净。

3.染色的真核细胞通常显示弥漫性细胞质染色以及核染色。 特别是经常观察到MycoLight Green JJ98和JJ99对核内体的强烈荧光染色。

MycoLight Green JJ99核酸染料 货号24001-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
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MycoLight Green JJ99核酸染料  货号24001
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100ul
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

MycoLight Green JJ99核酸染料

MycoLight Green JJ99核酸染料  货号24001

简要概述

产品基本信息

货号:24001

产品名称:MycoLight Green JJ99核酸染料

规格:100ul

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

产品物理化学光谱特性

溶剂:DMSO

激发波长(nm):482

发射波长(nm):512

产品介绍

MycoLight Green JJ99核酸染料是一种优良的绿色荧光核染色剂,可渗透到原核和真核细胞膜中。MycoLight 绿色荧光核酸染料对DNA有很高的亲和力,与488nm氩激光线结合后荧光增强,在500nm处荧光发射大。MycoLight 绿色荧光核酸染料对活的和死的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有染色作用,因此是细菌检测的核复染剂。它是SYTO®9的替代品(SYTO®是Invitrogen的商标)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight Green JJ99核酸染料。 

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图示

MycoLight Green JJ99核酸染料  货号24001

图1.用5 uM MycoLight Green JJ99将大肠杆菌染色30分钟,并用FITC通道成像。

MycoLight Green JJ99核酸染料  货号24001

图2.用5 uM MycoLight Green JJ99染色大肠杆菌30分钟,并用FITC通道成像。

MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒 货号22413-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒 货号22413
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒

MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒 货号22413

简要概述

        MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细菌的试剂盒,MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒为测定活细菌中的革兰标志提供了一种简单方便的方法。革兰染色是临床和研究环境中常用的方法,用于将细菌物种分类分类为两大类。但是,传统的革兰染色方法是繁琐的并涉及细菌固定,如果要进一步表征细菌,这可能是一个显著的缺点。 MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒为活细菌提供一步革兰染色分析,克服了传统革兰氏染色分析中固有的问题。 MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒使用两种DNA染料MycoLight Green和MycoLight Red,具有染色革兰氏阳性和阴性细菌的差异能力。 MycoLight Green染色革兰氏阳性和阴性细菌,而MycoLight Red优先标记革兰氏阳性细菌。这两种染料的激发/发射 值对于MycoLight Green为约484 / 504nm,对于MycoLight Red为518 / 600nm。因此,当用染料染色革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的混合物时,革兰氏阳性细菌将发出红色荧光,革兰氏阴性细菌将发出绿色荧光。革兰氏阳性和阴性染色可分别用TRITC和FITC滤光片组进行荧光监测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight 快速荧光细菌革兰染色试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细菌样本
2.准备并将MycoLight 染料工作溶液添加到细菌样品中
3.在室温下与MycoLight 染料工作溶液在黑暗中孵育15分钟
4.使用FITC和TRITC滤光片组通过荧光显微镜或荧光光谱分析样品

溶液制备

1.工作溶液配制

1.1MycoLight 染料工作溶液:
在试管中混合等体积的MycoLight 绿色(组分A)和MycoLight 红色(组分B),并充分混合。

样品示例及操作

1.细菌样品的制备

1.1准备浓度约为107cells / ml的细菌样品。 在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。 注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。 对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

1.2通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重新悬浮在ddH2O中,将细菌浓度调节至〜107细胞/ ml。

2.染色方案

2.1向100 µL细菌悬液中加入2 µL MycoLight 染料工作溶液。

2.2充分混合并在室温下于黑暗中孵育15分钟。

2.3用荧光显微镜通过FITC(Ex / Em = 488/530 nm)通道监测革兰氏阴性细菌的荧光,并通过TRITC(Ex / Em = 540/620 nm)通道监测革兰氏阳性细菌的荧光。 注意:该试剂盒仅提供指导,应根据不同的细菌菌株或其他特定需求进行优化。 注意:该试剂盒中的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的相对比例也可以通过荧光光谱法估算。

MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒 货号22415-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒 货号22415
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒

MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒 货号22415

         

简要概述

        MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细菌的试剂盒,AAT Bioquest的MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒提供了一种新颖的一步荧光测定法,用于确定活菌中的革兰氏菌。革兰氏染色是在临床和研究环境中对细菌进行分类的重要且广泛使用的方法。原始方法涉及很多步骤,例如热固定,两步染色方案,酒精提取和复染。这些步骤可能会导致不一致的染色。 AAT Bioquest的一站式工具包消除了更多步骤,从而克服了出现的问题。该试剂盒使用了荧光标记的伴刀豆球蛋白A(ConA),这是一种凝集素,可选择性地与暴露于革兰氏阳性细菌表面的N-乙酰氨基葡糖结合。当革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌用荧光标记的ConA共轭物染色时,只有革兰氏阳性菌发出红色荧光。染色的细菌可以通过荧光监测。因为与其他现有染料相比,我们试剂盒中使用的荧光标记ConA共轭物显示出更高的亮度和光稳定性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细菌样本
2.准备并添加IF647-ConA
3.在黑暗中于室温下将细菌样品与IF647-ConA孵育5-15分钟
4.去除IF647-ConA染色溶液并重悬于测定缓冲液中
5.使用Cy5滤光片组通过荧光显微镜分析样品

溶液制备

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1IF647-ConA储备溶液(100X):
向IF647-ConA小瓶(组分A)中加入100 µL测定缓冲液(组分B),并充分混合。 注意:将储备溶液储存在-20ºC,避免光照,并以较小的等分试样储存,以避免重复的冻融循环。

样品示例及操作

1.细菌样品的制备

1.1在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。 准备细菌样品,浓度范围为106到108个细胞/ mL。 注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。 对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ mL。

1.2通过以10,000 x g离心5分钟除去培养基,然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分B)中。

2.染色方案

2.1向100 µL细菌样品中加入1 µL IF647-ConA储备溶液(100X)。

2.2充分混合,然后在室温下于黑暗中孵育5-15分钟。

2.3以10,000 x g离心5分钟,然后除去IF647-ConA染色溶液。

2.4重悬于100 µL分析缓冲液(组分B)中。

2.5使用荧光显微镜通过Cy5(Ex / Em = 650/669 nm)通道监控细菌的荧光。 注意:该协议仅提供指导,应根据不同的细菌菌株或其他特定需求进行优化。 如果观察到更高的背景,则可以在成像之前添加一个可选的检测缓冲液(组分B)洗涤步骤。

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒 货号22405-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

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MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒 货号22405
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒 货号22405

简要概述

        MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,CTC流式细胞术活菌分析试剂盒提供了一种简便的方法,可根据呼吸活动评估细菌的健康和活力。 CTC本身是非荧光的,一旦被活细菌细胞表面的电子转移系统还原,就会形成红色和不溶性荧光CTC甲maz,可以用流式细胞仪检测到。 不能呼吸的死细菌或以较低频率呼吸的不健康细菌将不产生或产生很少的带有CTC染色的红色荧光,因此可对细菌种群的健康状况进行半定量测量。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备10倍染料储备液
2.准备细菌样本
3.将细菌样品与CTC在37°C孵育30分钟
4.PE-Texas Red通道通过流式细胞仪分析样品

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1. CTC储备溶液(10倍):
将1 mL蒸馏水加到CTC(组分A)小瓶中,制成10X储备液。 注意:原液在-20°C稳定2周。 避光。

操作步骤

1.准备细菌样品,浓度为106细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重悬于适量的PBS中。注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液,然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液(组分B)中,以使处理后样品中的细菌浓度与活菌浓度相同。注意:开始治疗之前,请确定细菌培养物的浓度。注意:死细菌可以作为阴性对照。建议用70%乙醇杀死细菌30分钟,然后煮沸60分钟。

3.将10 µL 10X CTC储备溶液加到90 µL细菌样品中。

4.充分混合,然后在黑暗中于37°C孵育30分钟。

5.在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加400 µL分析缓冲液(组分B)以增加体积。

6.用流式细胞仪通过PE-Taxes Red通道(Ex / Em = 488/615 nm)监测细菌的荧光。注意:要排除杂物,建议将流式细胞仪的阈值设置为以下值:FSC> 10,000,SSC> 5,000。注意:CTC的效率高度依赖菌株,因此会相应优化染色条件。

MycoLight Red JJ94核酸染料 货号24006-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
  • 产品详情

MycoLight Red JJ94核酸染料  货号24006
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100ul
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

MycoLight Red JJ94核酸染料

MycoLight Red JJ94核酸染料  货号24006

简要概述

MycoLight Red JJ94核酸染料是美国AAT Bioquest生产的核酸染料,绿色荧光蛋白(GFP)衍生物广泛用作荧光试剂,在细胞和分子水平上研究生物过程,包括标记细菌等。然而,基于绿色荧光蛋白的细菌标记是单一的,而且一些重要的生物体仍然难以被修饰并表达。SYTO-9被开发广泛用于以更方便的方式标记细菌,即通过简单的培养。但,据报道SYTO-9能抑制一些细菌的生长。AAT Bioquest开发了与SYTO-9性能相似的Myoclight JJ94 红色染料,而且它对细菌生长抑制非常低。另外,MycoLight JJ94 红色染料可用于细菌的多色检测,它的激发和发射波长分别为637和651nm。这与大多数荧光显微镜和流式细胞仪中常用的氦激光激发和Cy5滤光片完全匹配。MycoLight JJ94 红色染料是一种远红色荧光DNA结合染料,用于直接的活细菌细胞标记,它自身荧光较低,但与DNA结合后,其荧光强度急剧增加。MycoLight JJ94 红色染料在不影响微生物生长的情况下,很容易染上活细菌。在相同的条件下,SYTO-9抑制细菌生长,而MycoLight JJ94 红色染料与正常细菌在液体或固体培养基上生长完全一致。将细菌转移到无染料培养基中后,MycoLight Red JJ94进行的细菌荧光标记可在数小时内保持稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight Red JJ94核酸染料。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  • 在不影响正常微生物生长的情况下染色活细菌

  • 使用Cy5滤光片组和He激光激发,可在大多数流式细胞仪和荧光显微镜中广泛使用

  • 可用于细菌中的多色检测

  • 稳定标记数个小时

操作步骤

  1. 使用自备缓冲液稀释MycoLight Red JJ94。MycoLight Red JJ94可以直接添加到细菌培养基中, 终浓度为2.5 µM。

  2. 涡旋混合样品,然后孵育至少10分钟。

  3. 通过荧光显微镜或带有Cy5滤波器的流式细胞仪检测样品的荧光信号。

注意1:  以上方案可适用于大多数细菌菌株。这些条件需要针对每个菌株和实验系统进行调整。生长培养基,细胞密度,其他生物的存在和因素可能会影响染色。玻璃器皿上残留的洗涤剂也可能会影响许多生物的染色。注意2:  稀释MycoLight Red JJ94时请使用塑料管,因为稀释的污渍会粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中可获得结果。 注意3:  可以使用不同的细菌菌株优化染料浓度以获得结果。 注意4:  MycoLight Red JJ94与细菌的生长完全兼容,可以将活细菌与MycoLight Red JJ94长时间孵育。

图示

MycoLight Red JJ94核酸染料  货号24006

图1. 随时间推移补充了1%DMSO(对照),MycoLight Red JJ94和Syto-9 的大肠杆菌 LB培养物的光密度(OD600 nm)对比。Syto-9 基本上抑制细菌生长,而MycoLight Red JJ94与正常细菌生长完全相容。

MycoLight Red JJ94核酸染料  货号24006

图2.用2.5μM MycoLight Red JJ94将庆笙红球菌染色20分钟。 用具有Cy5滤光片组的Keyence荧光显微镜拍摄图像。

MycoLight 绿色 JJ98 货号23998-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight 绿色 JJ98

MycoLight 绿色 JJ98

货号 23998 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 ug 价格 1776
Ex (nm) 482 Em (nm) 512
分子量 N/A 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

MycoLight Green JJ98核酸染料是美国AAT Bioquest生产的核酸染料,MycoLight 绿色JJ98染色是一种优秀的绿色荧光核和染色体复染剂,对原核细胞和真核细胞膜均具有渗透性。MycoLight Green JJ98染料对DNA具有高亲和力,并且在与最接近488 nm氩激光线的激发最大值和~500 nm处的荧光发射最大值结合时显示出增强的荧光。MycoLight Green JJ98染色剂特别适用于细菌检测的核复染剂,因为它可以染色活的和死的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。它是STYO®9(STYO®是Invitrogen的商标)的绝佳替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight Green JJ98核酸染料。 

点击查看光谱

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片
发射: FITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

操作步骤

以下协议适用于大多数细胞类型。这些条件需要调整每种细胞类型和实验系统。生长培养基,细胞密度,其他细胞类型和因子的存在可能影响染色。玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的染色,并导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

稀释MycoLight Green JJ98和JJ99时使用塑料管,因为稀释的污渍粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中获得最佳结果。

 

1.培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上原位染色。通过离心和悬浮液沉淀细胞重悬于缓冲盐溶液或水中。

2.用非磷酸盐缓冲液(如Hepes缓冲液或您选择的缓冲液)稀释MycoLight Green JJ98或JJ99。添加MycoLight Green JJ98。使用下表1中列出的浓度作为指导。在最初的实验中,最好在整个建议范围内尝试几种染料浓度,以确定产生最佳染色的浓度。

 

表格1 用MycoLight Green JJ98染色细胞的建议条件

适用 溶度 染色条件
细菌细胞 50 nM – 20μM 涡旋混合,然后孵育1-30分钟。
真核细胞 10 nM – 5μM 孵育10-120分钟。
微孔板 TE缓冲液中50nM 孵育5分钟,冲洗干净。

3.染色的真核细胞通常显示弥漫性细胞质染色以及核染色。 特别是经常观察到MycoLight Green JJ98和JJ99对核内体的强烈荧光染色。

 

参考文献

A loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for Strongyloides stercoralis in stool that uses a visual detection method with SYTO-82 fluorescent dye
Authors: Watts MR, James G, Sultana Y, Ginn AN, Outhred AC, Kong F, Verweij JJ, Iredell JR, Chen SC, Lee R.
Journal: Am J Trop Med Hyg (2014): 306

A new triplex real time PCR which distinguishes between MRSA, MSSA, and mecA coagulase negative strains by means of melting point analysis using SYTO 9
Authors: Weidner J, Cassens U, Gohde W, Wullenweber J, Greve B.
Journal: Clin Lab (2013): 795

Compatibility of SYTO 13 and Hoechst 33342 for longitudinal imaging of neuron viability and cell death
Authors: Hubbard KS, Gut IM, Scheeler SM, Lyman ME, McNutt PM.
Journal: BMC Res Notes (2012): 437

Evaluation of Pseudomonas aeruginosa (PAO1) adhesion to human alveolar epithelial cells A549 using SYTO 9 dye
Authors: Larrosa M, Truchado P, Espin JC, Tomas-Barberan FA, Allende A, Garcia-Conesa MT.
Journal: Mol Cell Probes (2012): 121

Rapid quantification of cell viability and apoptosis in B-cell lymphoma cultures using cyanine SYTO probes
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Darzynkiewicz Z.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 81

SYTO dyes and EvaGreen outperform SYBR Green in real-time PCR
Authors: Eischeid AC.
Journal: BMC Res Notes (2011): 263

Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using double duplex real-time PCR and dye Syto 9
Authors: Seputiene V, Vilkoicaite A, Armalyte J, Pavilonis A, Suziedeliene E.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2010): 502

Use of SYTO 13, a fluorescent dye binding nucleic acids, for the detection of microparticles in in vitro systems
Authors: Ullal AJ, Pisetsky DS, Reich CF, 3rd.
Journal: Cytometry A (2010): 294

Assessment of acridine orange and SYTO 16 for in vivo imaging of the peritoneal tissues in mice
Authors: Udovich JA, Besselsen DG, Gmitro AF.
Journal: J Microsc (2009): 124

Dynamic analysis of apoptosis using cyanine SYTO probes: from classical to microfluidic cytometry
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Faley S, Darzynkiewicz Z, Cooper JM.
Journal: Exp Cell Res (2009): 1706

说明书
MycoLight 绿色 JJ98.pdf

MycoLight 绿色 JJ98 货号23999-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight 绿色 JJ98

MycoLight 绿色 JJ98

货号 23999 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 7896
Ex (nm) 482 Em (nm) 512
分子量 N/A 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

MycoLight Green JJ98核酸染料是美国AAT Bioquest生产的核酸染料,MycoLight 绿色JJ98染色是一种优秀的绿色荧光核和染色体复染剂,对原核细胞和真核细胞膜均具有渗透性。MycoLight Green JJ98染料对DNA具有高亲和力,并且在与最接近488 nm氩激光线的激发最大值和~500 nm处的荧光发射最大值结合时显示出增强的荧光。MycoLight Green JJ98染色剂特别适用于细菌检测的核复染剂,因为它可以染色活的和死的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。它是STYO®9(STYO®是Invitrogen的商标)的绝佳替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight Green JJ98核酸染料。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片
发射: FITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

操作步骤

以下协议适用于大多数细胞类型。这些条件需要调整每种细胞类型和实验系统。生长培养基,细胞密度,其他细胞类型和因子的存在可能影响染色。玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的染色,并导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

稀释MycoLight Green JJ98和JJ99时使用塑料管,因为稀释的污渍粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中获得最佳结果。

 

1.培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上原位染色。通过离心和悬浮液沉淀细胞重悬于缓冲盐溶液或水中。

2.用非磷酸盐缓冲液(如Hepes缓冲液或您选择的缓冲液)稀释MycoLight Green JJ98或JJ99。添加MycoLight Green JJ98。使用下表1中列出的浓度作为指导。在最初的实验中,最好在整个建议范围内尝试几种染料浓度,以确定产生最佳染色的浓度。

 

表格1 用MycoLight Green JJ98染色细胞的建议条件

适用 溶度 染色条件
细菌细胞 50 nM – 20μM 涡旋混合,然后孵育1-30分钟。
真核细胞 10 nM – 5μM 孵育10-120分钟。
微孔板 TE缓冲液中50nM 孵育5分钟,冲洗干净。

3.染色的真核细胞通常显示弥漫性细胞质染色以及核染色。 特别是经常观察到MycoLight Green JJ98和JJ99对核内体的强烈荧光染色。

 

参考文献

A loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for Strongyloides stercoralis in stool that uses a visual detection method with SYTO-82 fluorescent dye
Authors: Watts MR, James G, Sultana Y, Ginn AN, Outhred AC, Kong F, Verweij JJ, Iredell JR, Chen SC, Lee R.
Journal: Am J Trop Med Hyg (2014): 306

A new triplex real time PCR which distinguishes between MRSA, MSSA, and mecA coagulase negative strains by means of melting point analysis using SYTO 9
Authors: Weidner J, Cassens U, Gohde W, Wullenweber J, Greve B.
Journal: Clin Lab (2013): 795

Compatibility of SYTO 13 and Hoechst 33342 for longitudinal imaging of neuron viability and cell death
Authors: Hubbard KS, Gut IM, Scheeler SM, Lyman ME, McNutt PM.
Journal: BMC Res Notes (2012): 437

Evaluation of Pseudomonas aeruginosa (PAO1) adhesion to human alveolar epithelial cells A549 using SYTO 9 dye
Authors: Larrosa M, Truchado P, Espin JC, Tomas-Barberan FA, Allende A, Garcia-Conesa MT.
Journal: Mol Cell Probes (2012): 121

Rapid quantification of cell viability and apoptosis in B-cell lymphoma cultures using cyanine SYTO probes
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Darzynkiewicz Z.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 81

SYTO dyes and EvaGreen outperform SYBR Green in real-time PCR
Authors: Eischeid AC.
Journal: BMC Res Notes (2011): 263

Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using double duplex real-time PCR and dye Syto 9
Authors: Seputiene V, Vilkoicaite A, Armalyte J, Pavilonis A, Suziedeliene E.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2010): 502

Use of SYTO 13, a fluorescent dye binding nucleic acids, for the detection of microparticles in in vitro systems
Authors: Ullal AJ, Pisetsky DS, Reich CF, 3rd.
Journal: Cytometry A (2010): 294

Assessment of acridine orange and SYTO 16 for in vivo imaging of the peritoneal tissues in mice
Authors: Udovich JA, Besselsen DG, Gmitro AF.
Journal: J Microsc (2009): 124

Dynamic analysis of apoptosis using cyanine SYTO probes: from classical to microfluidic cytometry
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Faley S, Darzynkiewicz Z, Cooper JM.
Journal: Exp Cell Res (2009): 1706

说明书
MycoLight 绿色 JJ98.pdf

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
200 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401

简要概述

        MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,AAT Bioquest的MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒使用荧光传感器,在低浓度的革兰氏阳性和阴性细菌细胞中均呈现绿色荧光,但由于较大的染料分子聚集,荧光在较高的细胞溶质浓度下向红色发射转移膜电位。 膜电位的大小随着不同的细菌种类而变化。 对于许多革兰氏阳性物种,红/绿比率倾向于随质子梯度的强度而变化,而在许多革兰氏阴性细菌中,染料的响应似乎与质子梯度强度不成比例。 该试剂盒设计用于在细菌浓度范围为每毫升105-107个生物体时测定细菌膜电位。 可以在510-530nm(FITC滤光器)和600-660nm(德克萨斯红色滤光器)下荧光测量染色细胞,激发波长为 常见的激发光源488nm。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

操作方法

1.在任何适当的培养基中培养细菌从对数期培养物中获得健康细菌的佳结果。在PBS(组分C)或等效的无菌缓冲液中将细菌培养物稀释至~106个细胞/ mL。可以直接从培养基中稀释细菌而不洗涤。准备足够的悬浮液,每次测试提供500 mL。

2.将500μl细菌悬浮液等分到流式细胞仪管中,进行每个染色实验。准备两个额外的管用于去极化控制和未染色的对照。

3.向去极化的对照样品中加入10μl500μMCCCP(组分B)并混合。

4.向每个流式细胞仪管中加入5μlMycoStainIt Green(100X)(组分A)并混合(不要在未染色的对照样品上加入染色剂)。在室温下孵育样品30分钟。可在5分钟后分析染色样品,但信号强度继续增加直至约30分钟。

5.可以在配备有发射488nm的激光的流式细胞仪中测定染色细菌。在绿色(荧光素滤光片)和红色(德克萨斯红色滤光片)通道中收集荧光。应使用对数信号放大收集前向散射,侧向散射和荧光。

6.仪器调整对于检测细菌等相对较小的颗粒尤其重要。使用未染色的对照样品定位前向和侧向散射通道中的细菌群。使用侧向散射作为设置采集触发器的参数。

7.如上所述,在调节流式细胞仪后应用去极化的对照样品。使用正向散射和侧向散射对细菌进行门控并调整荧光光电倍增管电压,使得绿色和红色MFI值近似相等。不要设置补偿。

8.虽然红色和绿色荧光强度的相对量将随着细胞大小和聚集而变化,但红色与绿色荧光强度的比率可以用作膜电位的尺寸无关指示。还可以通过使用正向散射与侧向散射对细菌进行门控来处理数据,并使用红色与绿色荧光的点图分析门控群体,将MFI值报告为线性值,而不是通道。

9.在比率直方图上,在感兴趣的峰周围设置标记并记录平均比值。对于红色与绿色荧光的点图,设置感兴趣群体周围的区域并记录每个的红色和绿色平均荧光强度(MFI)值。为了评估数据,将红色种群MFI除以绿色种群MFI。

10.在流式细胞仪中,细菌仅根据其大小和染色能力进行鉴定。通过荧光显微镜检查每个样品,以确认检测到的颗粒确实是细菌。

数据分析

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401

图1.将枯草芽孢杆菌培养至对数期并在PBS中稀释至1×10 6个细胞/ mL的浓度。 然后将细胞用5μMCCCP处理20分钟,并与1X MycoStainIt Green孵育30分钟,然后进行流式细胞术分析。

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 货号22401-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光     货号22401 货号 22401 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 483 Em (nm) 501
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,AAT Bioquest的MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒使用荧光传感器,在低浓度的革兰氏阳性和阴性细菌细胞中均呈现绿色荧光,但由于较大的染料分子聚集,荧光在较高的细胞溶质浓度下向红色发射转移膜电位。 膜电位的大小随着不同的细菌种类而变化。 对于许多革兰氏阳性物种,红/绿比率倾向于随质子梯度的强度而变化,而在许多革兰氏阴性细菌中,染料的响应似乎与质子梯度强度不成比例。 该试剂盒设计用于在细菌浓度范围为每毫升105-107个生物体时测定细菌膜电位。 可以在510-530nm(FITC滤波片组)和600-660nm(德克萨斯红色滤波片组)下荧光测量染色细胞,激发波长为最常见的激发光源488nm。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm,610/20nm滤波片
推荐孔板: FITC,PE-Texas Red通道
荧光显微镜  
激发: 510/600nm
发射: 530/660nm
推荐孔板: 黑色透明
通道: FITC/Texas Red滤波片

产品说明书

操作方法

1.在任何适当的培养基中培养细菌从对数期培养物中获得健康细菌的最佳结果。在PBS(组分C)或等效的无菌缓冲液中将细菌培养物稀释至~106个细胞/ mL。可以直接从培养基中稀释细菌而不洗涤。准备足够的悬浮液,每次测试提供500 mL。

2.将500μl细菌悬浮液等分到流式细胞仪管中,进行每个染色实验。准备两个额外的管用于去极化控制和未染色的对照。

3.向去极化的对照样品中加入10μl500μMCCCP(组分B)并混合。

4.向每个流式细胞仪管中加入5μlMycoStainIt Green(100X)(组分A)并混合(不要在未染色的对照样品上加入染色剂)。在室温下孵育样品30分钟。可在5分钟后分析染色样品,但信号强度继续增加直至约30分钟。

5.可以在配备有发射488nm的激光的流式细胞仪中测定染色细菌。在绿色(荧光素滤光片)和红色(德克萨斯红色滤光片)通道中收集荧光。应使用对数信号放大收集前向散射,侧向散射和荧光。

6.仪器调整对于检测细菌等相对较小的颗粒尤其重要。使用未染色的对照样品定位前向和侧向散射通道中的细菌群。使用侧向散射作为设置采集触发器的参数。

7.如上所述,在调节流式细胞仪后应用去极化的对照样品。使用正向散射和侧向散射对细菌进行门控并调整荧光光电倍增管电压,使得绿色和红色MFI值近似相等。不要设置补偿。

8.虽然红色和绿色荧光强度的相对量将随着细胞大小和聚集而变化,但红色与绿色荧光强度的比率可以用作膜电位的尺寸无关指示。还可以通过使用正向散射与侧向散射对细菌进行门控来处理数据,并使用红色与绿色荧光的点图分析门控群体,将MFI值报告为线性值,而不是通道。

9.在比率直方图上,在感兴趣的峰周围设置标记并记录平均比值。对于红色与绿色荧光的点图,设置感兴趣群体周围的区域并记录每个的红色和绿色平均荧光强度(MFI)值。为了评估数据,将红色种群MFI除以绿色种群MFI。

10.在流式细胞仪中,细菌仅根据其大小和染色能力进行鉴定。最好通过荧光显微镜检查每个样品,以确认检测到的颗粒确实是细菌。

 

数据分析

MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光     货号22401

图1.将枯草芽孢杆菌培养至对数期并在PBS中稀释至1×10 6个细胞/ mL的浓度。 然后将细胞用5μMCCCP处理20分钟,并与1X MycoStainIt Green孵育30分钟,然后进行流式细胞术分析。

 

参考文献

Raman spectroscopic analysis of Lactobacillus rhamnosus GG in response to dehydration reveals DNA conformation changes
Authors: Myintzu Hlaing, M.; Wood, B.; McNaughton, D.; Ying, D.; Augustin, M. A.
Journal: J Biophotonics (2017): 589-597

Antibacterial and antigelatinolytic effects of Satureja hortensis L. essential oil on epithelial cells exposed to Fusobacterium nucleatum
Authors: Zeidan-Chulia, F.; Keskin, M.; Kononen, E.; Uitto, V. J.; Soderling, E.; Moreira, J. C.; Gursoy, U. K.
Journal: J Med Food (2015): 503-6

Inactivation of Cronobacter sakazakii in reconstituted infant formula by combination of thymoquinone and mild heat
Authors: Shi, C.; Jia, Z.; Chen, Y.; Yang, M.; Liu, X.; Sun, Y.; Zheng, Z.; Zhang, X.; Song, K.; Cui, L.; Baloch, A. B.; Xia, X.
Journal: J Appl Microbiol (2015): 1700-6

Fourier transform infra-red spectroscopy and flow cytometric assessment of the antibacterial mechanism of action of aqueous extract of garlic (Allium sativum) against selected probiotic Bifidobacterium strains
Authors: Booyens, J.; Thantsha, M. S.
Journal: BMC Complement Altern Med (2014): 289

Deposition and survival of Escherichia coli O157:H7 on clay minerals in a parallel plate flow system
Authors: Cai, P.; Huang, Q.; Walker, S. L.
Journal: Environ Sci Technol (2013): 1896-903

Observation of injured E. coli population resulting from the application of high-pressure throttling treatments
Authors: De Lamo-Castellvi, S.; Toledo, R.; Frank, J. F.
Journal: J Food Sci (2013): M582-6

Effect of air drying on bacterial viability: A multiparameter viability assessment
Authors: Nocker, A.; Fernandez, P. S.; Montijn, R.; Schuren, F.
Journal: J Microbiol Methods (2012): 86-95

patients and environment
Authors: Lindback, T.; Rottenberg, M. E.; Roche, S. M.; Rorvik, L. M., The ability to enter into an avirulent viable but non-culturable (VBNC) form is widespread among Listeria monocytogenes isolates from salmon
Journal: Vet Res (2010): 8

Behaviors of physiologically active bacteria in water environment and chlorine disinfection
Authors: Sawaya, K.; Kaneko, N.; Fukushi, K.; Yaguchi, J.
Journal: Water Sci Technol (2008): 1343-8

Long-term survival of Legionella pneumophila in the viable but nonculturable state after monochloramine treatment
Authors: Alleron, L.; Merlet, N.; Lacombe, C.; Frere, J.
Journal: Curr Microbiol (2008): 497-502

说明书
MycoLight 比率细菌膜电位试剂盒 红色/绿色荧光 .pdf

MycoLight Green JJ98核酸染料 货号24000-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight Green JJ98核酸染料

MycoLight Green JJ98核酸染料

MycoLight Green JJ98核酸染料    货号24000 货号 24000 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 uL 价格 2604
Ex (nm) 482 Em (nm) 512
分子量 N/A 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

MycoLight Green JJ98核酸染料是美国AAT Bioquest生产的核酸染料,MycoLight 绿色JJ98染色是一种优秀的绿色荧光核和染色体复染剂,对原核细胞和真核细胞膜均具有渗透性。MycoLight Green JJ98染料对DNA具有高亲和力,并且在与最接近488 nm氩激光线的激发最大值和~500 nm处的荧光发射最大值结合时显示出增强的荧光。MycoLight Green JJ98染色剂特别适用于细菌检测的核复染剂,因为它可以染色活的和死的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。它是SYTO®9(SYTO®是Invitrogen的商标)的绝佳替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight Green JJ98核酸染料。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片
发射: FITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

操作步骤

以下协议适用于大多数细胞类型。这些条件需要调整每种细胞类型和实验系统。生长培养基,细胞密度,其他细胞类型和因子的存在可能影响染色。玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的染色,并导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

稀释MycoLight Green JJ98和JJ99时使用塑料管,因为稀释的污渍粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中获得最佳结果。

 

1.培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上原位染色。通过离心和悬浮液沉淀细胞重悬于缓冲盐溶液或水中。

2.用非磷酸盐缓冲液(如Hepes缓冲液或您选择的缓冲液)稀释MycoLight Green JJ98或JJ99。添加MycoLight Green JJ98。使用下表1中列出的浓度作为指导。在最初的实验中,最好在整个建议范围内尝试几种染料浓度,以确定产生最佳染色的浓度。

 

表格1 用MycoLight Green JJ98染色细胞的建议条件

适用 溶度 染色条件
细菌细胞 50 nM – 20μM 涡旋混合,然后孵育1-30分钟。
真核细胞 10 nM – 5μM 孵育10-120分钟。
微孔板 TE缓冲液中50nM 孵育5分钟,冲洗干净。

3.染色的真核细胞通常显示弥漫性细胞质染色以及核染色。 特别是经常观察到MycoLight Green JJ98和JJ99对核内体的强烈荧光染色。

 

参考文献

A loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for Strongyloides stercoralis in stool that uses a visual detection method with SYTO-82 fluorescent dye
Authors: Watts MR, James G, Sultana Y, Ginn AN, Outhred AC, Kong F, Verweij JJ, Iredell JR, Chen SC, Lee R.
Journal: Am J Trop Med Hyg (2014): 306

A new triplex real time PCR which distinguishes between MRSA, MSSA, and mecA coagulase negative strains by means of melting point analysis using SYTO 9
Authors: Weidner J, Cassens U, Gohde W, Wullenweber J, Greve B.
Journal: Clin Lab (2013): 795

Compatibility of SYTO 13 and Hoechst 33342 for longitudinal imaging of neuron viability and cell death
Authors: Hubbard KS, Gut IM, Scheeler SM, Lyman ME, McNutt PM.
Journal: BMC Res Notes (2012): 437

Evaluation of Pseudomonas aeruginosa (PAO1) adhesion to human alveolar epithelial cells A549 using SYTO 9 dye
Authors: Larrosa M, Truchado P, Espin JC, Tomas-Barberan FA, Allende A, Garcia-Conesa MT.
Journal: Mol Cell Probes (2012): 121

Rapid quantification of cell viability and apoptosis in B-cell lymphoma cultures using cyanine SYTO probes
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Darzynkiewicz Z.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 81

SYTO dyes and EvaGreen outperform SYBR Green in real-time PCR
Authors: Eischeid AC.
Journal: BMC Res Notes (2011): 263

Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using double duplex real-time PCR and dye Syto 9
Authors: Seputiene V, Vilkoicaite A, Armalyte J, Pavilonis A, Suziedeliene E.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2010): 502

Use of SYTO 13, a fluorescent dye binding nucleic acids, for the detection of microparticles in in vitro systems
Authors: Ullal AJ, Pisetsky DS, Reich CF, 3rd.
Journal: Cytometry A (2010): 294

Assessment of acridine orange and SYTO 16 for in vivo imaging of the peritoneal tissues in mice
Authors: Udovich JA, Besselsen DG, Gmitro AF.
Journal: J Microsc (2009): 124

Dynamic analysis of apoptosis using cyanine SYTO probes: from classical to microfluidic cytometry
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Faley S, Darzynkiewicz Z, Cooper JM.
Journal: Exp Cell Res (2009): 1706

说明书
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MycoLight Green JJ99核酸染料 货号24001-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight Green JJ99核酸染料

MycoLight Green JJ99核酸染料

MycoLight Green JJ99核酸染料    货号24001 货号 24001 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 ul 价格 2604
Ex (nm) 482 Em (nm) 512
分子量 N/A 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:24001

产品名称:MycoLight Green JJ99核酸染料

规格:100ul

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

溶剂:DMSO

激发波长(nm):482

发射波长(nm):512

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片组
发射: FITC滤波片组
cutoff: 黑色透明

 

产品介绍

MycoLight Green JJ99核酸染料是一种优良的绿色荧光核染色剂,可渗透到原核和真核细胞膜中。MycoLight 绿色荧光核酸染料对DNA有很高的亲和力,与488nm氩激光线结合后荧光增强,在500nm处荧光发射最大。MycoLight 绿色荧光核酸染料对活的和死的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有染色作用,因此是细菌检测的核复染剂。它是SYTO®9的绝佳替代品(SYTO®是Invitrogen的商标)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight Green JJ99核酸染料。 

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图示

 

MycoLight Green JJ99核酸染料    货号24001

图1.用5 uM MycoLight Green JJ99将大肠杆菌染色30分钟,并用FITC通道成像。

MycoLight Green JJ99核酸染料    货号24001

图2.用5 uM MycoLight Green JJ99染色大肠杆菌30分钟,并用FITC通道成像。

 

 

参考文献

A loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for Strongyloides stercoralis in stool that uses a visual detection method with SYTO-82 fluorescent dye
Authors: Watts MR, James G, Sultana Y, Ginn AN, Outhred AC, Kong F, Verweij JJ, Iredell JR, Chen SC, Lee R.
Journal: Am J Trop Med Hyg (2014): 306

A new triplex real time PCR which distinguishes between MRSA, MSSA, and mecA coagulase negative strains by means of melting point analysis using SYTO 9
Authors: Weidner J, Cassens U, Gohde W, Wullenweber J, Greve B.
Journal: Clin Lab (2013): 795

Compatibility of SYTO 13 and Hoechst 33342 for longitudinal imaging of neuron viability and cell death
Authors: Hubbard KS, Gut IM, Scheeler SM, Lyman ME, McNutt PM.
Journal: BMC Res Notes (2012): 437

Evaluation of Pseudomonas aeruginosa (PAO1) adhesion to human alveolar epithelial cells A549 using SYTO 9 dye
Authors: Larrosa M, Truchado P, Espin JC, Tomas-Barberan FA, Allende A, Garcia-Conesa MT.
Journal: Mol Cell Probes (2012): 121

Rapid quantification of cell viability and apoptosis in B-cell lymphoma cultures using cyanine SYTO probes
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Darzynkiewicz Z.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 81

SYTO dyes and EvaGreen outperform SYBR Green in real-time PCR
Authors: Eischeid AC.
Journal: BMC Res Notes (2011): 263

Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using double duplex real-time PCR and dye Syto 9
Authors: Seputiene V, Vilkoicaite A, Armalyte J, Pavilonis A, Suziedeliene E.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2010): 502

Use of SYTO 13, a fluorescent dye binding nucleic acids, for the detection of microparticles in in vitro systems
Authors: Ullal AJ, Pisetsky DS, Reich CF, 3rd.
Journal: Cytometry A (2010): 294

Assessment of acridine orange and SYTO 16 for in vivo imaging of the peritoneal tissues in mice
Authors: Udovich JA, Besselsen DG, Gmitro AF.
Journal: J Microsc (2009): 124

Dynamic analysis of apoptosis using cyanine SYTO probes: from classical to microfluidic cytometry
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Faley S, Darzynkiewicz Z, Cooper JM.
Journal: Exp Cell Res (2009): 1706

说明书
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MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒 货号22405-AAT Bioquest荧光染料

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MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒    货号22405 货号 22405 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 450 Em (nm) 630
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,CTC流式细胞术活菌分析试剂盒提供了一种简便的方法,可根据呼吸活动评估细菌的健康和活力。 CTC本身是非荧光的,一旦被活细菌细胞表面的电子转移系统还原,就会形成红色和不溶性荧光CTC甲maz,可以用流式细胞仪检测到。 不能呼吸的死细菌或以较低频率呼吸的不健康细菌将不产生或产生很少的带有CTC染色的红色荧光,因此可对细菌种群的健康状况进行半定量测量。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒。 

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488 nm 激光
发射: 610/20 nm 滤波片
通道: PE-Texas Red通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备10倍染料储备液
2.准备细菌样本
3.将细菌样品与CTC在37°C孵育30分钟
4.PE-Texas Red通道通过流式细胞仪分析样品

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1. CTC储备溶液(10倍):
将1 mL蒸馏水加到CTC(组分A)小瓶中,制成10X储备液。 注意:原液在-20°C稳定2周。 避光。

 

操作步骤

1.准备细菌样品,浓度为106细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重悬于适量的PBS中。注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液,然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液(组分B)中,以使处理后样品中的细菌浓度与活菌浓度相同。注意:开始治疗之前,请确定细菌培养物的浓度。注意:死细菌可以作为阴性对照。建议用70%乙醇杀死细菌30分钟,然后煮沸60分钟。

3.将10 µL 10X CTC储备溶液加到90 µL细菌样品中。

4.充分混合,然后在黑暗中于37°C孵育30分钟。

5.在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加400 µL分析缓冲液(组分B)以增加体积。

6.用流式细胞仪通过PE-Taxes Red通道(Ex / Em = 488/615 nm)监测细菌的荧光。注意:要排除杂物,建议将流式细胞仪的阈值设置为以下值:FSC> 10,000,SSC> 5,000。注意:CTC的效率高度依赖菌株,因此会相应优化染色条件。

 

参考文献

Production of Superoxide in Bacteria Is Stress- and Cell State-Dependent: A Gating-Optimized Flow Cytometry Method that Minimizes ROS Measurement Artifacts with Fluorescent Dyes
Authors: M. E. McBee
Journal: Front Microbiol (2017): 459

Effect of extremely low frequency electromagnetic fields on bacterial membrane
Authors: S. Oncul
Journal: Int J Radiat Biol (2016): 42-9

Simple and rapid preparation of red fluorescence and red color S. aureus derived nanobioparticles for pathogen detection
Authors: W. Hu
Journal: J Microbiol Methods (2015): 47-53

Reduction of biofilm formation on titanium surface with ultraviolet-C pre-irradiation
Authors: Y. Yamada
Journal: J Biomater Appl (2014): 161-171

A novel staining protocol for multiparameter assessment of cell heterogeneity in Phormidium populations (cyanobacteria) employing fluorescent dyes
Authors: D. Tashyreva
Journal: PLoS One (2013): e55283

Method for the direct observation and quantification of survival of bacteria attached to negatively or positively charged surfaces in an aqueous medium
Authors: B. Asadishad
Journal: Environ Sci Technol (2011): 8345-51

Potential action of copper surfaces on meticillin-resistant Staphylococcus aureus
Authors: L. Weaver
Journal: J Appl Microbiol (2010): 2200-5

Carbonate crystals precipitated by freshwater bacteria and their use as a limestone consolidant
Authors: D. V. Zamarreno
Journal: Appl Environ Microbiol (2009): 5981-90

Effects of long-term starvation on a host bivalve (Codakia orbicularis, Lucinidae) and its symbiont population
Authors: A. Caro
Journal: Appl Environ Microbiol (2009): 3304-13

Rapid Detection of Starved Escherichia coli with Respiratory Activity in Potable Water by Signal-Amplified in situ Hybridization Following Formazan Reduction
Authors: N. Yamaguchi
Journal: Microbes Environ (2009): 286-90

说明书
MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒.pdf

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒 货号22407-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒    货号22407 货号 22407 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 498 Em (nm) 526
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,MycoLight流式细胞术活菌分析试剂盒提供了一种简便的方法,可根据细胞内酯酶活性评估细菌活力。 MycoLight™520是一种非荧光酯酶底物,可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。 通过细菌细胞内非特异性酯酶水解后,会产生绿色荧光产物,并在细菌内积累。 与常用的酯酶底物CFDA和CFDA-AM相比,该试剂盒可提供更明亮,更稳定的信号,具有更低的背景和更容易的染色方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488 nm 激光
发射: 530/30 nm 滤波片
通道: FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备100X染料储备溶液。
2.准备细菌样品。
3.将细菌样品与MycoLight 520在黑暗中于37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟。
4.通过带有FITC通道的流式细胞仪分析样品。

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1MycoLight 520储备液(100X):
将100 µL DMSO(组分C)加入一小瓶MycoLight 520(组分A)中,制成100X储备液。

 

样品示例及操作

1.准备细菌样品,浓度范围为106到108个细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分B)中。注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液,然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液(组分B)中,以使处理后样品中的细菌浓度与活菌浓度相同。注意:开始治疗之前,请确定细菌培养物的浓度。注意:死细菌可以作为阴性对照,建议使用70%乙醇杀死细菌30分钟,然后煮沸60分钟。

3.活/死细菌混合物制备示例:混合7种不同比例的细菌悬液,如表1所示,每个样品的总体积为200 µL。

4.将2 µL 100X MycoLight 520储备液加到200 µL Assay Buffer中的细菌样品中。

5.充分混合并在黑暗中于37°C孵育5-10分钟,或在室温孵育60分钟,以获得最佳染色效果。

6.在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加300 µL分析缓冲液(组分C)以增加体积。

7.用流式细胞仪通过FITC通道(488/530 nm)监测细菌的荧光。注意:要排除杂物,建议将流式细胞仪的阈值设置为以下值:FSC> 10,000,SSC> 5,000。注意:MycoLight 520的效率高度依赖菌株,因此应相应优化染色条件。

 

表1.混合以达到各种活/死比的活样本和死样本的示例体积

活细胞比例 样品死亡µL 活样品µL
0:100 0 200
10:90 20 180
30:70 60 140
50:50 100 100
90:10 180 20
100:0 200 0

 

参考文献

Seminal plasma affects the survival rate and motility pattern of raw llama spermatozoa
Authors: F. G. Fumuso
Journal: Anim Reprod Sci (2018): 99-106

New fluorescein precursors for live bacteria detection
Authors: C. Guilini
Journal: Anal Chem (2015): 8858-66

Protective effects of antithrombin on free groin flaps after secondary venous stasis in the rat model
Authors: J. Wallmichrath
Journal: J Plast Reconstr Aesthet Surg (2014): 707-11

Comparison of different live/dead stainings for detection and quantification of adherent microorganisms in the initial oral biofilm
Authors: P. N. Tawakoli
Journal: Clin Oral Investig (2013): 841-50

A multiplexed immunofluorescence method identifies Phakopsora pachyrhizi Urediniospores and determines their viability
Authors: R. Vittal
Journal: Phytopathology (2012): 1143-52

Rapid flow cytometric method for viability determination of solventogenic clostridia
Authors: M. Linhova
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2012): 307-11

Expansion of chondrocytes in a three-dimensional matrix for tracheal tissue engineering
Authors: T. Walles
Journal: Ann Thorac Surg (2004): 444-8; discussion 448-9

Functional changes and motility characteristics of Japanese Black bull spermatozoa separated by Percoll
Authors: K. Suzuki
Journal: Anim Reprod Sci (2003): 157-72

Validation of flow cytometry for assessment of viability and acrosomal integrity of dog spermatozoa and for evaluation of different methods of cryopreservation
Authors: A. I. Pena
Journal: J Reprod Fertil Suppl (2001): 371-6

Kinetic and temporal factors influence chilling injury to germinal vesicle and mature bovine oocytes
Authors: Y. Zeron
Journal: Cryobiology (1999): 35-42

说明书
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MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒 货号22409-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒    货号22409 货号 22409 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 498 Em (nm) 526
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,MycoLight 活细菌荧光成像套件提供了一种简便方法,可通过荧光显微镜可视化活细菌。 MycoLight 520是一种非荧光酯酶底物,可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。 通过细菌细胞内非特异性酯酶水解后,会产生绿色荧光产物,并在细菌内积累。 与常用的酯酶底物CFDA和CFDA-AM相比,该试剂盒可提供更明亮,更稳定的信号,具有更低的背景和更容易的染色方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒。 

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: 488nm
发射: 530nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备100X染料储备溶液
2.准备细菌样品
3.添加MycoLight 520
4.将细菌样品与MycoLight 520信号增强剂在黑暗中于37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟
5.通过带有FITC滤光片组的荧光显微镜分析样品

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1MycoLight 520储备液(100X):
将100 uL DMSO(组分D)添加到MycoLight 520(组分A)小瓶中,制成100X储备液。

 

样品示例及操作

1.准备细菌样品,浓度范围为106到108个细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分C)中。注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液,然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液(组分C)中,以使处理过的样品中细菌的浓度与活菌浓度相同。注意:开始治疗之前,请确定细菌培养物的浓度。注意:死细菌可以作为阴性对照,建议使用70%乙醇杀死细菌30分钟,然后煮沸60分钟。

3.将1 µL 100X MycoLight 520储备液和10 µL 10X Signal Enhancer(组分B)加到90 µL的测定缓冲液细菌样品中。

4.充分混合并在黑暗中于37°C孵育5-10分钟,或在室温孵育60分钟,以获得最佳染色效果。

5.使用荧光显微镜通过FITC(Ex / Em = 488/530 nm)通道监控细菌的荧光。注意:相同的方案也可用于酶标仪检测。

 

参考文献

Raman spectroscopic analysis of Lactobacillus rhamnosus GG in response to dehydration reveals DNA conformation changes
Authors: Myintzu Hlaing, M.; Wood, B.; McNaughton, D.; Ying, D.; Augustin, M. A.
Journal: J Biophotonics (2017): 589-597

Antibacterial and antigelatinolytic effects of Satureja hortensis L. essential oil on epithelial cells exposed to Fusobacterium nucleatum
Authors: Zeidan-Chulia, F.; Keskin, M.; Kononen, E.; Uitto, V. J.; Soderling, E.; Moreira, J. C.; Gursoy, U. K.
Journal: J Med Food (2015): 503-6

Inactivation of Cronobacter sakazakii in reconstituted infant formula by combination of thymoquinone and mild heat
Authors: Shi, C.; Jia, Z.; Chen, Y.; Yang, M.; Liu, X.; Sun, Y.; Zheng, Z.; Zhang, X.; Song, K.; Cui, L.; Baloch, A. B.; Xia, X.
Journal: J Appl Microbiol (2015): 1700-6

Fourier transform infra-red spectroscopy and flow cytometric assessment of the antibacterial mechanism of action of aqueous extract of garlic (Allium sativum) against selected probiotic Bifidobacterium strains
Authors: Booyens, J.; Thantsha, M. S.
Journal: BMC Complement Altern Med (2014): 289

Deposition and survival of Escherichia coli O157:H7 on clay minerals in a parallel plate flow system
Authors: Cai, P.; Huang, Q.; Walker, S. L.
Journal: Environ Sci Technol (2013): 1896-903

Observation of injured E. coli population resulting from the application of high-pressure throttling treatments
Authors: De Lamo-Castellvi, S.; Toledo, R.; Frank, J. F.
Journal: J Food Sci (2013): M582-6

Effect of air drying on bacterial viability: A multiparameter viability assessment
Authors: Nocker, A.; Fernandez, P. S.; Montijn, R.; Schuren, F.
Journal: J Microbiol Methods (2012): 86-95

patients and environment
Authors: Lindback, T.; Rottenberg, M. E.; Roche, S. M.; Rorvik, L. M., The ability to enter into an avirulent viable but non-culturable (VBNC) form is widespread among Listeria monocytogenes isolates from salmon
Journal: Vet Res (2010): 8

Behaviors of physiologically active bacteria in water environment and chlorine disinfection
Authors: Sawaya, K.; Kaneko, N.; Fukushi, K.; Yaguchi, J.
Journal: Water Sci Technol (2008): 1343-8

Long-term survival of Legionella pneumophila in the viable but nonculturable state after monochloramine treatment
Authors: Alleron, L.; Merlet, N.; Lacombe, C.; Frere, J.
Journal: Curr Microbiol (2008): 497-502

说明书
MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒.pdf

MycoLight Red JJ94核酸染料 货号24006-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight Red JJ94核酸染料

MycoLight Red JJ94核酸染料

MycoLight Red JJ94核酸染料    货号24006 货号 24006 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 uL 价格 3924
Ex (nm) 637 Em (nm) 651
分子量 738.75 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

MycoLight Red JJ94核酸染料是美国AAT Bioquest生产的核酸染料,绿色荧光蛋白(GFP)衍生物广泛用作荧光试剂,在细胞和分子水平上研究生物过程,包括标记细菌等。然而,基于绿色荧光蛋白的细菌标记是单一的,而且一些重要的生物体仍然难以被修饰并表达。SYTO-9被开发广泛用于以更方便的方式标记细菌,即通过简单的培养。但,据报道SYTO-9能抑制一些细菌的生长。AAT Bioquest开发了与SYTO-9性能相似的Myoclight JJ94 红色染料,而且它对细菌生长抑制非常低。另外,MycoLight JJ94 红色染料可用于细菌的多色检测,它的激发和发射波长分别为637和651nm。这与大多数荧光显微镜和流式细胞仪中常用的氦激光激发和Cy5滤光片完全匹配。MycoLight JJ94 红色染料是一种远红色荧光DNA结合染料,用于直接的活细菌细胞标记,它自身荧光较低,但与DNA结合后,其荧光强度急剧增加。MycoLight JJ94 红色染料在不影响微生物生长的情况下,很容易染上活细菌。在相同的条件下,SYTO-9抑制细菌生长,而MycoLight JJ94 红色染料与正常细菌在液体或固体培养基上生长完全一致。将细菌转移到无染料培养基中后,MycoLight Red JJ94进行的细菌荧光标记可在数小时内保持稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight Red JJ94核酸染料。 

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 640nm激光
发射: 660/20nm滤波片
通道: APC通道
荧光显微镜  
激发: 630nm
发射: 660nm滤波片
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy5滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  • 在不影响正常微生物生长的情况下染色活细菌
  • 使用Cy5滤光片组和He激光激发,可在大多数流式细胞仪和荧光显微镜中广泛使用
  • 可用于细菌中的多色检测
  • 稳定标记数个小时

 

操作步骤

  1. 使用自备缓冲液稀释MycoLight Red JJ94。MycoLight Red JJ94可以直接添加到细菌培养基中,最终浓度为2.5 µM。
  2. 涡旋混合样品,然后孵育至少10分钟。
  3. 通过荧光显微镜或带有Cy5滤波器的流式细胞仪检测样品的荧光信号。

注意1:  以上方案可适用于大多数细菌菌株。这些条件需要针对每个菌株和实验系统进行调整。生长培养基,细胞密度,其他生物的存在和因素可能会影响染色。玻璃器皿上残留的洗涤剂也可能会影响许多生物的染色。注意2:  稀释MycoLight Red JJ94时请使用塑料管,因为稀释的污渍会粘附在玻璃上。通常,在不含磷酸盐的缓冲液中可获得最佳结果。 注意3:  可以使用不同的细菌菌株优化染料浓度以获得最佳结果。 注意4:  MycoLight Red JJ94与细菌的生长完全兼容,可以将活细菌与MycoLight Red JJ94长时间孵育。

 

图示

MycoLight Red JJ94核酸染料    货号24006

图1. 随时间推移补充了1%DMSO(对照),MycoLight Red JJ94和Syto-9 的大肠杆菌 LB培养物的光密度(OD600 nm)对比。Syto-9 基本上抑制细菌生长,而MycoLight Red JJ94与正常细菌生长完全相容。

MycoLight Red JJ94核酸染料    货号24006

图2.用2.5μM MycoLight Red JJ94将庆笙红球菌染色20分钟。 用具有Cy5滤光片组的Keyence荧光显微镜拍摄图像。

 

 参考文献

A loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for Strongyloides stercoralis in stool that uses a visual detection method with SYTO-82 fluorescent dye
Authors: Watts MR, James G, Sultana Y, Ginn AN, Outhred AC, Kong F, Verweij JJ, Iredell JR, Chen SC, Lee R.
Journal: Am J Trop Med Hyg (2014): 306

A new triplex real time PCR which distinguishes between MRSA, MSSA, and mecA coagulase negative strains by means of melting point analysis using SYTO 9
Authors: Weidner J, Cassens U, Gohde W, Wullenweber J, Greve B.
Journal: Clin Lab (2013): 795

Compatibility of SYTO 13 and Hoechst 33342 for longitudinal imaging of neuron viability and cell death
Authors: Hubbard KS, Gut IM, Scheeler SM, Lyman ME, McNutt PM.
Journal: BMC Res Notes (2012): 437

Evaluation of Pseudomonas aeruginosa (PAO1) adhesion to human alveolar epithelial cells A549 using SYTO 9 dye
Authors: Larrosa M, Truchado P, Espin JC, Tomas-Barberan FA, Allende A, Garcia-Conesa MT.
Journal: Mol Cell Probes (2012): 121

Rapid quantification of cell viability and apoptosis in B-cell lymphoma cultures using cyanine SYTO probes
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Darzynkiewicz Z.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 81

SYTO dyes and EvaGreen outperform SYBR Green in real-time PCR
Authors: Eischeid AC.
Journal: BMC Res Notes (2011): 263

Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus using double duplex real-time PCR and dye Syto 9
Authors: Seputiene V, Vilkoicaite A, Armalyte J, Pavilonis A, Suziedeliene E.
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2010): 502

Use of SYTO 13, a fluorescent dye binding nucleic acids, for the detection of microparticles in in vitro systems
Authors: Ullal AJ, Pisetsky DS, Reich CF, 3rd.
Journal: Cytometry A (2010): 294

Assessment of acridine orange and SYTO 16 for in vivo imaging of the peritoneal tissues in mice
Authors: Udovich JA, Besselsen DG, Gmitro AF.
Journal: J Microsc (2009): 124

Dynamic analysis of apoptosis using cyanine SYTO probes: from classical to microfluidic cytometry
Authors: Wlodkowic D, Skommer J, Faley S, Darzynkiewicz Z, Cooper JM.
Journal: Exp Cell Res (2009): 1706

说明书
MycoLight Red JJ94核酸染料.pdf

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒 货号22411-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒    货号22411 货号 22411 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 5244
Ex (nm) 488/540 Em (nm) 530/620
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,AAT Bioquest的MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒提供双色荧光检测,通过荧光显微镜观察活细菌和死细菌。MycoLight 520是一种非荧光酯酶底物,可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。在细菌细胞内非特异性酯酶水解后,产生绿色荧光产物并在细菌内积累。相比之下,碘化丙锭是一种红色荧光核酸染色剂,只能穿透受损膜的细菌。因此,使用MycoLight 520和碘化丙锭染料的适当混合物,具有完整细胞膜的活细菌发出绿色荧光,而具有受损膜的死细菌产生红色荧光。MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒是一种用于对活/死细菌进行成像的强大工具。可以在Ex / Em = 488 / 525nm(FITC滤光器组)和540 / 620nm(TRITC滤光器组)下荧光测量染色细胞,分别用于活细菌和死细菌。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒。 

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 488nm / 540nm
发射: 530nm / 620nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC / TRITC滤波片组

产品说明书

染色样品示例

概述

1.准备100X MycoLight 520原液
2.准备细菌样本
3.加入MycoLight 520和碘化丙锭
4.将细菌样品与MycoLight 520和碘化丙啶在37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟
5.用FITC和TRITC滤光片组通过荧光显微镜分析样品
注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分

操作步骤

        在没有额外说明的情况下,所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C,避免反复冻融循环。


1.MycoLight 520原液(100X):
将100μLDMSO(组分D)加入MycoLight 520(组分A)的小瓶中。
注意:将储备溶液储存在-20°C,避免光照,反复冻融。

2.制备浓度为106至108个细胞/ mL的细菌样品。 在适当的培养基中将细菌培养到对数晚期。

注意:测量波长= 600 nm(OD600)的细菌培养物的光密度以确定细胞数。 对于大肠杆菌培养物,OD 600 = 1.0等于8×108个细胞/ ml。

3.通过以10,000xg离心10分钟除去培养基,并将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分C)中。

4.通过用70%乙醇处理30分钟,然后煮沸60分钟,可以制备死细菌。
 
5.染色
        以下是推荐的方案,应根据不同的细菌菌株或其他特定需求进行优化。 如果观察到更高的背景,可以在成像之前添加任选的洗涤步骤。
 
5.1将1μL100XMycoLight 520原液和1μL100X碘化丙啶(组分B)加入到100μL测定缓冲液中的细菌样品中。
5.2充分混合并在37℃下在黑暗中孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟以获得最佳染色结果。
5.3通过FITC(Ex / Em = 488 / 530nm)和TRITC(Ex / Em = 540 / 620nm)通道用荧光显微镜监测细菌的荧光。
 
染色结果
 
MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒    货号22411
图1.用MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒染色活的和死的枯草芽孢杆菌的混合群体。 具有活性细胞内酯酶的活细菌显示绿色荧光,而具有受损膜的70%酒精杀死的死细菌显示红色荧光。
 
参考文献

Raman spectroscopic analysis of Lactobacillus rhamnosus GG in response to dehydration reveals DNA conformation changes
Authors: Myintzu Hlaing, M.; Wood, B.; McNaughton, D.; Ying, D.; Augustin, M. A.
Journal: J Biophotonics (2017): 589-597

Antibacterial and antigelatinolytic effects of Satureja hortensis L. essential oil on epithelial cells exposed to Fusobacterium nucleatum
Authors: Zeidan-Chulia, F.; Keskin, M.; Kononen, E.; Uitto, V. J.; Soderling, E.; Moreira, J. C.; Gursoy, U. K.
Journal: J Med Food (2015): 503-6

Inactivation of Cronobacter sakazakii in reconstituted infant formula by combination of thymoquinone and mild heat
Authors: Shi, C.; Jia, Z.; Chen, Y.; Yang, M.; Liu, X.; Sun, Y.; Zheng, Z.; Zhang, X.; Song, K.; Cui, L.; Baloch, A. B.; Xia, X.
Journal: J Appl Microbiol (2015): 1700-6

Fourier transform infra-red spectroscopy and flow cytometric assessment of the antibacterial mechanism of action of aqueous extract of garlic (Allium sativum) against selected probiotic Bifidobacterium strains
Authors: Booyens, J.; Thantsha, M. S.
Journal: BMC Complement Altern Med (2014): 289

Deposition and survival of Escherichia coli O157:H7 on clay minerals in a parallel plate flow system
Authors: Cai, P.; Huang, Q.; Walker, S. L.
Journal: Environ Sci Technol (2013): 1896-903

Observation of injured E. coli population resulting from the application of high-pressure throttling treatments
Authors: De Lamo-Castellvi, S.; Toledo, R.; Frank, J. F.
Journal: J Food Sci (2013): M582-6

Effect of air drying on bacterial viability: A multiparameter viability assessment
Authors: Nocker, A.; Fernandez, P. S.; Montijn, R.; Schuren, F.
Journal: J Microbiol Methods (2012): 86-95

patients and environment
Authors: Lindback, T.; Rottenberg, M. E.; Roche, S. M.; Rorvik, L. M., The ability to enter into an avirulent viable but non-culturable (VBNC) form is widespread among Listeria monocytogenes isolates from salmon
Journal: Vet Res (2010): 8

Behaviors of physiologically active bacteria in water environment and chlorine disinfection
Authors: Sawaya, K.; Kaneko, N.; Fukushi, K.; Yaguchi, J.
Journal: Water Sci Technol (2008): 1343-8

Long-term survival of Legionella pneumophila in the viable but nonculturable state after monochloramine treatment
Authors: Alleron, L.; Merlet, N.; Lacombe, C.; Frere, J.
Journal: Curr Microbiol (2008): 497-502

说明书
MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒.pdf