Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 蓝色荧光

	货号	22500	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	1944
	Ex (nm)	406	Em (nm)	445
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于细胞功能的荧光显微镜研究。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 这个特定的试剂盒设计用于在蓝色荧光中均匀标记固定的哺乳动物细胞，以用于流式细胞仪应用紫激光激发。 该试剂盒使用了专有的蓝色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料被紫激光充分激发（405 nm激发），以460 nm发出荧光。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光流式细胞仪应用。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在HHBS中制备样品（0.5 mL /测定）
2.替换为HHBS
3.将Stain It™Violet 450添加到细胞悬液中
4.在室温或37°C下将细胞染色20-60分钟
5.清洗细胞
6.修复细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Stain It Violet 450储备溶液（500X）：
将200 µL DMSO（组分B）加入Stain It Violet 450（组分A）小瓶中，制成500X Stain It Violet 450储备液。

点击查看细胞制备方案

样品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It Violet 450储备溶液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO₂的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 绿色荧光

	货号	22501	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	1944
	Ex (nm)	412	Em (nm)	505
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于细胞功能的荧光显微镜研究。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 这种特殊的试剂盒设计用于在绿色荧光中均匀标记固定的哺乳动物细胞，以便通过紫激光激发在流式细胞仪中使用。 该试剂盒使用专有的绿色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料已被紫激光（405 nm激发）充分激发到510 nm的荧光。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光流式细胞仪应用。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在HHBS中制备样品（0.5 mL /测定）
2.替换为HHBS
3.将Stain It V510添加到细胞悬液中
4.在室温或37°C下将细胞染色20-60分钟
5.清洗细胞
6.修复细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

溶液配制

1.储备溶液配制

1.1 Stain It V510储备溶液（500X）：
将200 µL DMSO（组分B）添加到Stain It V510（组分A）的小瓶中，以得到500X Stain It V510储备液。

点击查看细胞制备方案

样品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It Violet 510储备溶液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO₂的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

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Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 橙色荧光

	货号	22502	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	1944
	Ex (nm)	394	Em (nm)	537
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于细胞功能的荧光显微镜研究。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 这种特殊的试剂盒设计用于在绿色荧光中均匀标记固定的哺乳动物细胞，以便通过紫激光激发在流式细胞仪中使用。 该试剂盒使用专有的绿色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料已被紫激光（405 nm激发）充分激发到510 nm的荧光。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光流式细胞仪应用。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在HHBS中制备样品（0.5 mL /测定）
2.替换为HHBS
3.将Stain It V550添加到细胞悬液中
4.在室温或37°C下将细胞染色20-60分钟
5.清洗细胞
6.修复细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Stain It V550储备溶液（500X）：
将200 µL DMSO（组分B）添加到Stain It V550（组分A）的小瓶中，得到500X Stain It V550储备液。

点击查看细胞制备方案

样品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It Violet 550储备溶液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO₂的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

相关产品

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 深红色荧光

	货号	22604	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	1944
	Ex (nm)	649	Em (nm)	664
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细胞的试剂盒，我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于对细胞功能进行荧光显微镜检查。 细胞的有效标记为研究细胞事件提供了一种有力的方法。 该特定试剂盒设计用于以蓝色荧光均匀标记固定的哺乳动物细胞，以进行长期的显微镜检查。 该试剂盒使用了专有的蓝色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料具有很好的光稳定性，因此可以重复检查图像。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用HHBS制备样品（0.5 mL /分析）
2.替换为HHBS
3.将Stain It 添加到细胞悬浮液中
4.在室温或37°C下染色细胞20-60分钟
5.洗净细胞
6.固定细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

操作步骤

表1.用于流式细胞术分析的荧光光谱特性和激发光

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It 储备液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO₂的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞（参见表1）。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

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Live or Dead 酵母活力检测试剂盒

简要概述

产品说明书

样品分析方案

概述

准备酵母样品

添加 1 µL MycoLight Green JJ98 染料

添加 2 µL 碘化丙啶染料

轻轻涡旋，在 37°C 下孵育 15-30 分钟

使用 530/30 nm 和 576/26 nm 滤光片通过流式细胞仪进行分析

注：在打开小瓶之前，让组分升温至室温。碘化丙啶易与核酸结合，应将其视为潜在的诱变剂并小心处理。处理 DMSO 原液时应特别小心，因为已知 DMSO 有助于有机分子进入组织。

操作步骤

以下方案仅用作为参考使用，具体请根据自己的实验进行调整

1.以~ 10⁶个细胞/ mL的浓度制备含1mL悬浮液的酵母样品。

2.在每管实验样品中加入 1 µL MycoLight™ Green JJ98（组分 A）和 2 µL 碘化丙啶（组分 B）。对于未染色的对照，将 1 组试管放在一边，不添加染料。对于单色 MycoLight™ Green JJ98 对照，将 1 µL MycoLight™ Green JJ98 添加到一管未经处理的细胞和一管死细胞中。对于单色碘化丙啶对照，将 1 μL 碘化丙啶添加到一管未经处理的细胞和一管死细胞中。请注意，根据您的具体应用，可能需要调整两种染料的比例以获得最佳响应。

3.轻轻涡旋每个管。然后将所有样品在室温下孵育 15 至 30 分钟，避光。

4.使用配备 488 nm 激光、530/30 nm 过滤器和 575/26 nm 过滤器（FITC 和 PE 通道）的流式细胞仪检测荧光。

注意     要使用荧光显微镜分析样品，请在载玻片和盖玻片之间捕获 5 µL 染色酵母悬浮液。使用 FITC 和 Cy3 滤光片组在显微镜下观察。

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 蓝色荧光

	货号	22600	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	1944
	Ex (nm)	346	Em (nm)	434
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细胞的试剂盒，我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于对细胞功能进行荧光显微镜检查。 细胞的有效标记为研究细胞事件提供了一种有力的方法。 该特定试剂盒设计用于以蓝色荧光均匀标记固定的哺乳动物细胞，以进行长期的显微镜检查。 该试剂盒使用了专有的蓝色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料具有很好的光稳定性，因此可以重复检查图像。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用HHBS制备样品（0.5 mL /分析）
2.替换为HHBS
3.将Stain It 添加到细胞悬浮液中
4.在室温或37°C下染色细胞20-60分钟
5.洗净细胞
6.固定细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

操作步骤

表1.用于流式细胞术分析的荧光光谱特性和激发光

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It NIR荧光储备液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO₂的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞（参见表1）。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

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	货号	22601	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
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	Ex (nm)	491	Em (nm)	516
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细胞的试剂盒，我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于对细胞功能进行荧光显微镜检查。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 该特定试剂盒设计用于以蓝色荧光均匀标记固定的哺乳动物细胞，以进行长期的显微镜检查。 该试剂盒使用了专有的蓝色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料具有很好的光稳定性，因此可以重复检查图像。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用HHBS制备样品（0.5 mL /分析）
2.替换为HHBS
3.将Stain It 添加到细胞悬浮液中
4.在室温或37°C下染色细胞20-60分钟
5.洗净细胞
6.固定细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

操作步骤

表1.用于流式细胞术分析的荧光光谱特性和激发光

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It NIR荧光储备液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO₂的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞（参见表1）。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

相关产品

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒 橙色荧光

	货号	22602	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	1944
	Ex (nm)	557	Em (nm)	570
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Live or Dead 固定化死细胞标记试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细胞的试剂盒，我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于对细胞功能进行荧光显微镜检查。 细胞的有效标记为研究细胞事件提供了一种有力的方法。 该特定试剂盒设计用于以蓝色荧光均匀标记固定的哺乳动物细胞，以进行长期的显微镜检查。 该试剂盒使用了专有的蓝色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料具有很好的光稳定性，因此可以重复检查图像。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用HHBS制备样品（0.5 mL /分析）
2.替换为HHBS
3.将Stain It 添加到细胞悬浮液中
4.在室温或37°C下染色细胞20-60分钟
5.洗净细胞
6.固定细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

操作步骤

表1.用于流式细胞术分析的荧光光谱特性和激发光

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It 储备液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO₂的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞（参见表1）。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

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Live或Dead 细胞活性检测试剂盒 绿色/红色双荧光

	货号	22760	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	1000 Tests	价格	10548
	Ex (nm)	492	Em (nm)	515
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞活性检测试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter细胞活力检测试剂盒 *绿色/红色双重荧光* 使用两种非荧光性指示剂：Calcein AM，用于活细胞；一种非细胞渗透性的DNA结合染料，用于细胞膜不完整的死细胞。Calcein AM是一种疏水性复合物，可以轻易地渗透进入完整的活细胞，通过酯酶的水解作用，产生强烈的荧光。通过细胞内酯酶水解非荧光性Calcein AM，形成具有强烈荧光的亲水性Calcein，并且保留在细胞质中。这种酯酶的活性与活细胞数量成比例关系。DNA结合染料极性非常大，不能渗透进入具有完整细胞膜的活细胞，它只有在与死细胞的DNA结合的情况下才发出荧光。生长在培养板中的细胞可以被染料，且在不到两小时内就可以完成定量分析。本检测法比其它活细胞检测法更加强大、稳定。它可以用于许多荧光实验平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂100ul，本试剂盒提供的试剂足以进行100次检测；384微孔板中，每孔加试剂25ul，本试剂盒提供的试剂足以进行400次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞活性检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞
2.加入相同体积的CytoCalcein Green / Propidium Iodide染料加工溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温或37°C孵育1小时
4.在强度下监测荧光（底部读取模式）Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）和540 / 620nm（截止= 590nm），带有FITC滤光片（细胞存活）的荧光显微镜和TRITC滤光片 （细胞死亡），或FL1和FL2通道的流式细胞仪。

溶液配制

1.储存溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
CytoCalcein 绿色原液：
将20μLDMSO（组分C）加入到CytoCalcein Green（组分A）的小瓶中并充分混合以制备CytoCalcein Green原液。 避光。 注意：20μL的CytoCalcein Green原液足以用于一个平板。 存放时，密封管。

2.工作溶液配制

将全部内容物（20μL）的CytoCalcein Green储备溶液和20μL碘化丙啶（组分B）加入10mL测定缓冲液（组分C）中并充分混合以制备CytoCalcein Green /碘化丙锭染料 – 工作溶液。 CytoCalcein Green / Propidium Iodide染料加工溶液在室温下稳定至少2小时。 注意：如果CHO细胞等细胞含有导致荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白，应制备丙磺舒储备溶液，并加入到加样缓冲液中，最终孔内工作浓度范围为1到2.5 mM。 未使用的丙磺舒储备溶液可以在≤-20℃下储存。 由于最佳染色条件可能因细胞类型的不同而异，因此建议单独确定组分A和B的适当浓度。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.用酶标仪或荧光显微镜进行细胞活力测定：

1.1根据需要用测试化合物处理细胞。注意：在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔/ 96孔板和25μL/孔/ 384孔板的1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。

1.2加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein TM Green / Propidium Iodide染料加工溶液。

1.3将板在室温或37°C孵育30分钟至1小时，避光。 （孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到了最佳结果，孵育时间少于4小时）。注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。装载后请勿清洗细胞。对于非粘附细胞，建议在孵育后以800rpm离心细胞板2分钟，然后关闭制动器。

1.4使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）和Ex / Em = 540 / 620nm（截止= 590nm，细胞死亡）或荧光下监测荧光强度用于活细胞的FITC过滤器或用于死细胞的TRITC过滤器的显微镜。

2.使用流式细胞仪进行细胞活力测定：

2.1用测试化合物处理细胞一段所需的时间。

2.1离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

2.3将细胞重悬于500μL的CytoCalcein™Green / Propidium Iodide染料加工溶液中。

2.4在室温或37°C孵育10至30分钟，避光。

可选：用HHBS或您选择的缓冲液清洗细胞。 将细胞重悬于500μLHHBS中，每管加入1-5×10⁵个细胞。

2.5用流式细胞仪在Ex / Em = 490 / 525nm和Ex / Em = 490 / 620nm（FL1和FL2通道）下监测荧光强度。

数据分析

图1. 使用Cell Meter Cell Viability Assay Kit测量Jurkat细胞对皂苷诱导的细胞死亡的影响。 用或不用0.5％皂苷处理2×10 6个细胞/ mL的Jurkat细胞5分钟。 离心细胞，用新鲜培养基替换上清液。 将100uL未处理的细胞（A），各50μL未处理和处理的细胞（B），25uL未处理的和75uL处理的细胞（C）和100uL的0.5％皂苷处理的细胞（D）接种在 96孔黑色墙壁/透明底部聚-D-赖氨酸板。 将细胞与100μL/孔的CytoCalcein Green / Propidium Iodide染料 – 工作溶液在37℃下孵育1小时。 使用NOVOstar仪器（BMG Labtech）在底部读取模式下在Ex / Em = 490 / 525nm和540 / 650nm下测量荧光强度。 如所示（n = 6）显示活细胞和死细胞上490 / 525nm与540 / 650nm荧光强度的比率。

参考文献

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