Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 蓝色荧光 货号22614-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 蓝色荧光

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 蓝色荧光

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 蓝色荧光    货号22614 货号 22614 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 406 Em (nm) 445
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒,我们的Cell Explorer 荧光成像试剂盒是一套用于标记细胞的工具,用于细胞功能的荧光显微镜检查。细胞的有效标记为在空间和时间背景下研究细胞提供了有力的方法。该特定试剂盒旨在以红色荧光均匀标记活细胞。该试剂盒使用专有的非荧光染料,在进入活细胞后变为强荧光。染料是一种疏水化合物,很容易渗透完整的活细胞。通过细胞内酯酶水解非荧光底物产生强烈红色的荧光亲水产物,其在细胞质中良好地保留。在黑色板中生长的细胞可以在不到两小时内染色和定量。该测定比四唑盐或基于Alarmar Blue 的测定更稳定。它可以很容易地适用于各种荧光平台的高通量测定,例如微孔板测定,免疫细胞化学和流式细胞术。它可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒提供所有必需组件和优化的细胞标记方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Explorer 活细胞标记试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405 nm激光
发射: 450/40 nm滤波片
通道: Pacific Blue通道
荧光显微镜  
激发: DAPI滤波片
发射: DAPI滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中准备细胞
2.去除生长培养基
3.加入CytoCalcein Violet 450工作溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
4.将细胞在37°C下染色30分钟至1小时
5.清洗细胞
6.在带有DAPI滤波片的荧光显微镜下或带有450/40 nm滤波片的流式细胞仪(Pacific Blue通道)中检测样品。

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 CytoCalcein Violet 450储备溶液:
在CytoCalcein Violet 450(组分A)小瓶中加入20 µL DMSO,并充分混合以制成CytoCalcein Violet 450储备液。 避光。 注意:20 µL CytoCalcein Violet 450储备液足以装满1个板。

 

2.工作溶液配制

将20 µL CytoCalcein Violet 450储备溶液添加到10 mL HHBS(组分B)中,并充分混合以制成CytoCalcein Violet 450工作溶液。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

1.除去生长培养基。

2.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的CytoCalcein Violet 450工作溶液加入细胞板。

3.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育30分钟至1小时。

4.从细胞中取出CytoCalcein Violet 450工作溶液,用HHBS(组分B)洗涤细胞2至3次,然后更换为HHBS。

5.使用带有DAPI滤光片组的荧光显微镜或带有450/40 nm滤光片(Pacific Blue通道)的流式细胞仪分析细胞。

 
参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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产品名称 货号
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 红色荧光 Cat#22609
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 蓝色荧光 Cat#22606
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22615

说明书
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 蓝色荧光.pdf

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 绿色荧光,在405nm激发 货号22615-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 绿色荧光,在405nm激发

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 绿色荧光,在405nm激发

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 绿色荧光,在405nm激发     货号22615 货号 22615 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 420 Em (nm) 505
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒,我们的Cell Explorer 荧光成像试剂盒是一套用于标记细胞的工具,用于细胞功能的荧光显微镜研究。细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。该特定试剂盒设计用于均匀标记活细胞,以便用紫激光(405 nm激发)对活细胞进行流式细胞分析。该试剂盒使用一种专有染料,当进入活细胞时,该染料会增强荧光。该染料是疏水性化合物,易于渗透完整的活细胞。细胞内酯酶对弱荧光底物的水解产生了强烈荧光的亲水性产物,该产物被很好地保留在细胞质中。它可以很容易地适应流式细胞仪的应用。试剂盒中使用的荧光染料已被紫激光(405 nm激发)充分激发到〜510 nm的荧光。该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。它可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞生存力,细胞凋亡和细胞毒性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Explorer 活细胞标记试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405 nm激光
发射: 525/40 nm滤波片
通道: AmCyan通道
荧光显微镜  
激发: 紫色滤波片
发射: 紫色滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中准备细胞
2.去除生长培养基
3.加入CytoCalcein Violet 450工作溶液(对于96孔板为100 µL /孔,对于384孔板为25 µL /孔)
4.将细胞在37°C下染色30分钟至1小时
5.清洗细胞
6.在紫色滤波片组的荧光显微镜下或在带有525/40 nm滤波片(AmCyan通道)的流式细胞仪上检测样品

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1. CytoCalcein Violet 500储备溶液:
在CytoCalcein Violet 500(组分A)小瓶中加入20 µL DMSO,并充分混合以制成CytoCalcein Violet 500储备液,避光。 注意:20 µL CytoCalcein Violet 500储备液足以装满1个板。

 

2.工作溶液配制

将20 µL CytoCalcein Violet 500储备溶液添加到10 mL HHBS(组分B)中,并充分混合以制成CytoCalcein Violet 500工作溶液。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

1.除去生长培养基。

2.将100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的CytoCalcein™Violet 500工作溶液加入细胞板。

3.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育30分钟至1小时。

4.从细胞中取出CytoCalcein™Violet 500工作溶液,用HHBS(组分B)洗涤细胞2至3次,然后更换为HHBS。

5.在紫色滤波片组的荧光显微镜下或在带有525/40 nm滤波片(AmCyan通道)的流式细胞仪上检测样品

 
参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 红色荧光 Cat#22609
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 蓝色荧光 Cat#22606
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22615

说明书
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 绿色荧光,在405nm激发 .pdf

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 橙色荧光,在405nm激发 货号22616-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 橙色荧光,在405nm激发

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 橙色荧光,在405nm激发

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 橙色荧光,在405nm激发     货号22616 货号 22616 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 398 Em (nm) 545
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒,Cell Explorer荧光成像试剂盒是一类细胞标记工具,用于荧光显微法细胞功能的研究。Cell Explorer系列标记试剂盒提供最全的细胞及相关细胞器荧光标记方案,包括固定化死细胞标记、活细胞标记、细胞示踪等多种产品,每种检测方案均能提供蓝色/绿色/红色/橙色等不同荧光检测方法。这种高效的细胞标签为从空间上和时间上研究发生的细胞活动提供了一种十分有力的方法。Cell Explorer活细胞标记试剂盒 *橙色荧光,在405nm处激发* 可以使活细胞带上相同的标签,在紫罗兰激光(405nm)激发下,用于流式细胞分析中。本试剂盒使用一种特殊的橙色荧光染料,一旦进入活细胞,其荧光强度增强。这种染料是一种疏水性复合物,它可轻易地渗透进入活细胞。通过细胞内酯酶的水解这种弱荧光底物,形成具有高强度荧光的亲水性产物,并且该产物能够在细胞质中积累。它可以用于流式细胞分析中。本试剂盒使用的荧光染料在405nm处被紫罗兰激光激发,荧光发射最高峰在550 nm处。本试剂盒提供所有检测的必需组分和最佳的细胞标记方案。它适用于增殖型和非增殖型细胞的标记,也可以用于标记悬浮和贴壁细胞。它在许多研究都非常有用,包括细胞粘附性、趋化性、多药物抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Explorer 活细胞标记试剂盒。 

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405 nm激光
发射: 525/50 nm滤波片
通道: Pacific Orange通道
荧光显微镜  
激发: 405nm
发射: 545/25nm滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

操作方法

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.去除生长培养基
3.添加CytoCalcein Violet 550工作溶液(100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板)
4.将细胞在37℃下染色30分钟至1小时
5.清洗细胞
6.在带有545/25nm滤波片的荧光显微镜下或带有525/50nm滤波片的流式细胞仪(Pacific Orange通道)下检测样品

 

溶液制备

1.制备储备溶液

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. CytoCalcein Violet 550原液:
将20μLDMSO加入到CytoCalcein Violet 550(组分A)的小瓶中并充分混合以制备CytoCalcein Violet 550原液。 避光。 注意:20μL的CytoCalcein Violet 550原液足以容纳1个平板。

2.制备工作溶液

        将20μLCytoCalcein Violet 550原液添加到10 mL HHBS(组分B)中并充分混合,制成CytoCalcein Violet 550工作溶液。有关细胞样品制备的指南,请点击查看

 

样品实验方案

1.去除生长培养基。

2.将100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的CytoCalcein Violet 550工作溶液加入细胞板中。

3.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至1小时。

4.从细胞中取出CytoCalcein Violet 550工作溶液,用HHBS(组分B)洗涤细胞2至3次,并用HHBS替换。

5.在带有545/25nm滤波片的荧光显微镜下或带有525/50nm滤波片的流式细胞仪(Pacific Orange通道)下检测样品。

 

数据分析

Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 橙色荧光,在405nm激发     货号22616

图1.在Costar黑壁/透明底96孔板中用CytoCalcein Violet 550染色的HeLa细胞的荧光图像(Ex / Em = 405 / 545nm,用于激发的405紫色滤光片)。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 绿色荧光,在405nm激发 Cat#22615
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 蓝色荧光,在405nm激发 Cat#22614
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 红色荧光 Cat#22609

说明书
Cell Explorer 活细胞标记试剂盒 橙色荧光,在405nm激发 .pdf

Cell Explorer 活细胞示踪试剂盒 深红色荧光 货号22624-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Explorer 活细胞示踪试剂盒 深红色荧光

Cell Explorer 活细胞示踪试剂盒 深红色荧光

Cell Explorer 活细胞示踪试剂盒 深红色荧光     货号22624 货号 22624 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 637 Em (nm) 650
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Explorer 活细胞示踪试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒,我们的Cell Explorer 荧光成像试剂盒是一套用于标记细胞的工具,用于细胞功能的荧光显微镜研究。细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。该特定试剂盒设计用于在深红色荧光中均匀标记活细胞,用于需要将荧光标签分子保留在细胞中相对较长时间的研究。该试剂盒使用带有细胞保留部分的荧光染料。染料被捕获在活细胞内,从而在相对较长的时间内提供稳定的荧光信号。该染料是疏水性化合物,易于渗透完整的活细胞。需要最少的动手时间。它可以很容易地适应各种荧光平台,例如微孔板检测,免疫细胞化学和流式细胞仪。它可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞生存力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Explorer 活细胞标记试剂盒。

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 640nm激光
发射: 660/20 nm滤波片
通道: APC通道
荧光显微镜  
激发: Cy5滤波片
发射: Cy5滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备样品
2.从培养箱中取出细胞板
3.添加10X Track It 深红色工作溶液(10 µL /孔)
4.在37℃下将细胞染色15分钟至1小时
5.清洗细胞
6.在荧光显微镜下用Cy5滤光片或流式细胞仪在Ex / Em = 630/650 nm下检查标本

 

溶液配制

1.工作溶液配制

将500X Track It 深红色DMSO储备溶液(组分A)稀释到测定缓冲液(组分B)中,制成10至25X Track It 深红色工作溶液。 对于所有孔,应以适当的浓度以10 µL /孔制备足够的工作溶液。 例如,要获得一块96孔微孔板的TrackIt 深红色最终浓度为10X,可将20 µL 500X Track It 深红色DMSO储备溶液稀释到1 mL分析缓冲液(组分B)中,制成1 mL 10X Track It 深红色工作解决方案。 注意:对于不同的细胞类型和/或实验条件,应凭经验确定Track It 深红色工作溶液的最终浓度。 建议以至少十倍以上的浓度进行测试。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

1.向细胞孔中添加10X Track It 深红色工作溶液,该溶液应等于细胞培养基体积的1/10。 例如,对于96孔板,将10μL/孔的10X Track It 深红色工作溶液添加到细胞中。

2.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育15分钟至1小时。

3.用Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或适当的缓冲液洗涤细胞。

4.用生长培养基填充细胞孔。

5.使用带有Cy5滤光片的荧光显微镜或流式细胞仪在Ex / Em = 630/650 nm处分析细胞。

Cell Explorer 活细胞示踪试剂盒 深红色荧光     货号22624

图1.在Costar黑色墙壁/透明底部96孔板上用Cell Explorer 活细胞跟踪试剂盒染色的HeLa细胞图像。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

Differential detection of tumor cells using a combination of cell rolling, multivalent binding, and multiple antibodies
Authors: Ja Hye Myung, Khyati A Gajjar, Jihua Chen, Robert E Molokie, Seungpyo Hong
Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

Versatile fabrication of nanoscale sol–gel bioactive glass particles for efficient bone tissue regeneration
Authors: Bo Lei, Xiaofeng Chen, Xue Han, Jiaan Zhou
Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

Advanced glycation end-products increase IL-6 and ICAM-1 expression via RAGE, MAPK and NF-$kappa$B pathways in human gingival fibroblasts
Authors: K Nonaka, Y Kajiura, M Bando, E Sakamoto, Y Inagaki, JH Lew, K Naruishi, T Ikuta, K Yoshida, T Kobayashi
Journal: Journal of Periodontal Research

 

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说明书
Cell Explorer 活细胞示踪试剂盒 深红色荧光 .pdf

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发 货号22651-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发    货号22651 货号 22651 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 405 Em (nm) 505
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em = 405 / 520nm处以大斯托克斯位移的绿色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂,一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被困在溶酶体内。进入溶酶体后,其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 405nm
发射: 480nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: 紫色滤波片

产品说明书

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 405 / 480nm(紫外滤光片组)处进行分析

 

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1解冻 Lysolite VLG26(组分A)至室温。

1.2通过将20μLLysolite VLG26(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μLLysolite VLG26(组分A)就足够了。 将未使用的Lysolite VLG26(组分A)等分并储存在<-20℃。 避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的最佳浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞:

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Violet滤光片组(Ex / Em = 405 / 480nm)的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,然后加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Violet滤光片组(Ex / Em = 405 / 480nm)的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色(见步骤2.1)。

 Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发    货号22651

图1.使用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色的U2OS细胞图像使用Costar黑色96孔板进行405 nm激发的绿色荧光

 

参考文献

Increasing Uptake of Silica Nanoparticles with Electroporation: From Cellular Characterization to Potential Applications
Authors: Erick Phonesouk, Séverine Lechevallier, Audrey Ferrand, Marie-Pierre Rols, Christine Bezombes, Marc Verelst, Muriel Golzio
Journal: Materials (2019): 179

Clathrin-mediated endocytosis is a candidate entry sorting mechanism for Bombyx mori cypovirus
Authors: Fei Chen, Liyuan Zhu, Yiling Zhang, Dhiraj Kumar, Guangli Cao, Xiaolong Hu, Zi Liang, Sulan Kuang, Renyu Xue, Chengliang Gong
Journal: Scientific reports (2018): 7268

Staphylococcus aureus from atopic dermatitis skin accumulates in the lysosomes of keratinocytes with induction of IL-1α secretion via TLR 9
Authors: Masaya Moriwaki, Kazumasa Iwamoto, Yoshie Niitsu, Ayako Matsushima, Yuhki Yanase, Junzo Hisatsune, Motoyuki Sugai, Michihiro Hide
Journal: Allergy (2018)

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

说明书
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发.pdf

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 红色荧光 货号22664-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 红色荧光

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 红色荧光

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 红色荧光    货号22664 货号 22664 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 588 Em (nm) 604
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是一套荧光工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体和细胞核等。活细胞区的选择性标记提供了一种研究空间细胞事件的有效方法。

该特定试剂盒用于标记橙色荧光中固定细胞的F-肌动蛋白。该试剂盒使用橙色荧光鬼笔环肽缀合物,其选择性结合F-肌动蛋白。橙色荧光鬼笔环肽缀合物具有Ex / Em = 583 / 603nm。 缀合物对荧光成像也具有良好的光稳定性。 它是一种高亲和力探针,用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片,细胞培养或无细胞实验中的F-肌动蛋白。Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是美国AAT Bioquest 研发的产品。

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: Texas Red通道
发射: Texas Red通道
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品分析 

概述

准备样品(微孔板孔)从板上取下液体

加入100μL/孔的iFluor 594-鬼笔环肽溶液

在室温下染色细胞15到60分钟洗涤细胞

在显微镜下观察样品(Ex / Em = 583/603 nm)

注意:打开前将所有组件加热至室温

 

操作步骤

1.准备1X iFluor 594-鬼笔环肽工作溶液:

将10μL的iFluor 594-鬼笔环肽(组分A)加入10mL标记缓冲液(组分B)中。

注意1:未使用的1X iFluor 594-鬼笔环肽原液应等分并保存在-20 ℃,避光。

注意2:不同的细胞类型可能染色不同。 应相应地制备iFluor 594-鬼笔环肽工作溶液的浓度。

 

2.染色细胞:

2.1执行甲醛固定。 在室温下用3.0-4.0%甲醛的PBS孵育细胞10-30分钟。

注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。

2.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。

2.4将100μL/孔(96孔板)的iFluor 594-鬼笔环肽工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2或2.3),并在室温下将细胞染色15至60分钟。

2.5用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以去除多余的染料,然后进行板密封和成像。

 

试剂应用文献

Mussel-inspired conductive nanofibrous membranes repair myocardial infarction by enhancing cardiac function and revascularization

Authors: Yutong He, Genlan Ye, Chen Song, Chuangkun Li, Weirong Xiong, Lei Yu, Xiaozhong Qiu, Leyu Wang
Journal: Theranostics. 2018; 8(18): 5159–5177.

 

参考文献

Porous Li-containing biphasic calcium phosphate scaffolds fabricated by three-dimensional plotting for bone repair
Authors: Xiaoheng Guo, Huichang Gao, Xiao Liu, Jingjing Diao, Xuetao Shi, Naru Zhao, Yingjun Wang
Journal: RSC Advances (2017): 34508–34516

Preparation, characterization and in vitro cell performance of anti-washout calcium phosphate cement modified by sodium polyacrylate
Authors: Xingmei Li, Fupo He, Jiandong Ye
Journal: RSC Advances (2017): 32842–32849

miR-29b-Loaded Gold Nanoparticles Targeting to the Endoplasmic Reticulum for Synergistic Promotion of Osteogenic Differentiation
Authors: Ting Pan, Wenjing Song, Huichang Gao, Tianjie Li, Xiaodong Cao, Shizhen Zhong, Yingjun Wang
Journal: ACS Applied Materials & Interfaces (2016): 19217–19227

Osteogenic and tenogenic induction of hBMSCs by integrated nanofibrous scaffold with chemical and structural mimic to bone-ligament connection
Authors: Zifeng Lin, Xiujuan Zhao, Si Chen, Chang Du
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2016)

The stimulation of the differentiation of pheochromocytoma (PC12-L) cells into neuron-like cells by electrically conductive nanofibre mesh
Authors: Huishang Yang, Guanglin Zhu, Yicheng Huang, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Applied Materials Today (2016): 215–222

Distinct mechanical behavior of HEK293 cells in adherent and suspended states
Authors: Seyed Mohammad Ali Haghparast, Takanori Kihara, Jun Miyake
Journal: PeerJ (2015): e1131

The preparation and characterization of polycaprolactone/graphene oxide biocomposite nanofiber scaffolds and their application for directing cell behaviors
Authors: Juqing Song, Huichang Gao, Guanglin Zhu, Xiaodong Cao, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Carbon (2015): 1039–1050

Actin-based biomechanical features of suspended normal and cancer cells
Authors: Seyed Mohammad Ali Haghparast, Takanori Kihara, Yuji Shimizu, Shunsuke Yuba, Jun Miyake
Journal: Journal of bioscience and bioengineering (2013): 380–385

 

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Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22661
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Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 橙色荧光 Cat#22663

说明书
Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 红色荧光.pdf

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 货号22784-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发     货号22784 货号 22784 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 406 Em (nm) 445
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

该试剂盒有多种参数可用于监控细胞活力。试剂盒中使用的专有的紫色激光激发荧光染料是一种疏水性化合物,可轻松渗透完整的活细胞,并在进入活细胞后获得增强的荧光。细胞内酯酶对非荧光底物的水解产生了强烈的蓝色荧光产物,该产物很好地保留在细胞质中。通过非荧光底物的酯酶水解产生的蓝色荧光团具有荧光素的光谱特性。当在405 nm激发时,荧光团在〜450 nm处发出强烈的蓝色荧光。该试剂盒提供了所有必需成分,并具有用于荧光微孔板检测的优化的细胞标记方案。此Cell Meter 细胞活力分析试剂盒为荧光流式细胞术,微孔板和细胞功能的显微镜研究提供了标记细胞的有效工具。它可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞生存力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒适用于增殖和非增殖细胞。

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适用仪器


光吸收酶标仪  
激发: 405nm
发射: 460nm
cutoff: 435nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞
  2. 加入相同体积的CytoCalcein™Violet 450,AM工作溶液(100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板)
  3. 在室温或37°C下孵育1小时
  4. 监测Ex / Em = 405/460 nm(截止= 435 nm)的荧光强度(底部读取模式)

溶液配制

储备溶液配制

CytoCalcein™Violet 450,AM储备溶液:

将20 µL DMSO(组分B)添加到CytoCalcein™Violet 450,AM(组分A)的小瓶中,并充分混合以制成CytoCalcein™Violet 450,AM储备溶液。注意:20 µL CytoCalcein™Violet 450,AM储备液足以装满一块板。避光。为了存放,请将管子紧紧密封。

工作溶液配制

将CytoCalcein™Violet 450,AM储备溶液的全部内容物(20 µL)加入10 mL的测定缓冲液(组分C)中,并充分混合以制成CytoCalcein™Violet 450,AM工作溶液。该CytoCalcein™Violet 450,AM工作溶液在室温下至少可稳定2小时。注意:如果诸如CHO细胞之类的细胞含有能促进荧光染料随时间渗漏的有机阴离子转运蛋白,则应制备丙磺舒储备溶液并以最终孔内工作浓度范围为1至1的浓度添加到上样缓冲液中。 2.5毫米 分装并保存未使用的丙磺舒储备溶液于≤-20°C。

 

操作步骤

  1. 根据需要用测试化合物处理细胞。注意:添加化合物之前不必洗涤细胞。但是,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在添加化合物之前将生长培养基和血清因子吸掉。加入100 µL /孔(96孔板)和25 µL /孔(384孔板)的1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或抽吸后选择的缓冲液。或者,细胞可以在无血清培养基中生长。
  2. 加入100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的CytoCalcein™Violet 450,AM工作溶液。
  3. 在避光的条件下,于室温或37°C下孵育平板1小时。(孵育时间可能是15分钟到过夜。孵育时间少于4小时,我们获得了最佳结果)。 注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。 注意: 加载后请勿洗涤细胞。 注意: 对于非贴壁细胞,建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟,然后制动。
  4. 使用荧光板读数器(底部读取模式)在Ex / Em = 405/460 nm(截止= 435 nm)下监控荧光强度。

 

参考文献

Functional evidence that the self-renewal gene NANOG regulates esophageal squamous cancer development
Authors: Li, Deng and Xiang, Xiaocong and Yang, Fei and Xiao, Dongqin and Liu, Kang and Chen, Zhu and Zhang, Ruolan and Feng, Gang
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Wang, Jingjing and Fa, Jingjing and Wang, Pengyun and Jia, Xinzhen and Peng, Huixin and Chen, Jing and Wang, Yifan and Wang, Chenhui and Chen, Qiuyun and Tu, Xin and others
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Liu, Peixi and Zhou, Yingjie and An, Qingzhu and Song, Yaying and Chen, Xi and Yang, Guo-Yuan and Zhu, Wei
Journal: MEDICINE (2016): 1–8

Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Thiebes, Anja Lena and Reddemann, Manuel Armin and Palmer, Johannes and Kneer, Reinhold and Jockenhoevel, Stefan and Cornelissen, Christian Gabriel
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Bogert, Nicolai V and Werner, Isabella and Kornberger, Angela and Meybohm, Patrick and Moritz, Anton and Keller, Till and Stock, Ulrich A and Beiras-Fern and ez, Andres
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Alharbi, Hattan A and Saunders, David MV and Al-Mousa, Ahmed and Alcorn, Jane and Pereira, Alberto S and Martin, Jonathan W and Giesy, John P and Wiseman, Steve B
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88

Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Brett, Marie-Elena and Crampton, Alex and ra L and Wood, David K
Journal: Technology (2016): 1–8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Alharbi, Hattan A and Alcorn, Jane and Al-Mousa, Ahmed and Giesy, John P and Wiseman, Steve B
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Thiebes, Anja Lena and Albers, Stefanie and Klopsch, Christian and Jockenhoevel, Stefan and Cornelissen, Christian G
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287

The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Wu, Shuai and Huang, Zhuoyao and Yue, Jianhui and Liu, Di and Wang, Ting and Ezanno, Pierre and Ruan, Changshun and Zhao, Xiaoli and Lu, William W and Pan, Haobo
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295–303

 

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Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 Cat#22784
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Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光 Cat#22786

说明书
Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 .pdf

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 橙色荧光,适合酶标仪检测 货号22794-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 橙色荧光,适合酶标仪检测

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 橙色荧光,适合酶标仪检测

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 橙色荧光,适合酶标仪检测     货号22794 货号 22794 存储条件 在2-8度冷藏保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 554 Em (nm) 578
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸(PS)的转运来检测细胞凋亡。在细胞凋亡中,PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指标,可以在观察形态变化之前进行检测。该试剂盒使用我们专有的橙色荧光Apopxin PS传感器,该传感器特异性结合PS,其亲和力远高于Annexin V(Kd <10 nM)。该试剂盒中使用的PS传感器与膜PS结合后具有橙色荧光。它的光谱性质几乎与Cy3®或AlexaFluor®555的光谱性质相同,使其易于用配备有Cy3®或AlexaFluor®555光源和滤光片的普通荧光仪器(Cy3®或AlexaFluor®555分别是GE Healthcare和Invitrogen的商标)进行实验。由于它对PS的亲和力大大增强,因此该试剂盒比仅与显微镜或流式细胞仪平台一起使用的其他基于膜联蛋白V的商业化凋亡试剂盒更为强大。除显微镜和流式细胞仪平台外,该试剂盒还可与荧光酶标仪一起使用。

点击查看细胞样品配制

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色透明
读取模式: 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物制备细胞(100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板)
  2. 加入等量的Apopxin Orange工作溶液
  3. 在室温下孵育1小时
  4. 在Ex / Em = 540/590 nm(截止= 570 nm)或使用Cy3滤光片的荧光显微镜下检测荧光强度(底部读取模式)

 

溶液配制

工作溶液配制

将10μL的100X Apopxin 橙色(组分A)添加到1 mL的测定缓冲液(组分B)中,并充分混合以制成Apopxin Orange工作溶液。 注意: 100μLApopxin Orange工作溶液足以用于一个孔。现用现配避免长时间放置。

 

操作步骤

1.通过向PBS或所需的缓冲液中加入10ul /孔(96孔板)或2.5 µL /孔(384孔板)的10X测试化合物储备溶液来处理细胞。 对于空白孔(不含细胞的培养基),添加相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5%CO2、37°C的培养箱中孵育(对于喜树碱处理过的Jurkat细胞,需要4-6小时)以诱导凋亡。

3.在每个孔中添加100 µL /孔(96孔板)或25 µL /孔(384孔板)的Apopxin Orange工作溶液。

4.在避光条件下,于室温下孵育细胞板至少1小时。

5.以800 rpm的速度离心细胞板(特别是非贴壁细胞)2分钟(制动)。

6.使用荧光酶标仪(Ext / Em = 540/590 nm(截止= 570 nm))或使用带有Cy3®滤光片的荧光显微镜对图像进行荧光强度检测。

 

图示

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 橙色荧光,适合酶标仪检测     货号22794

图1.用Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒染色的Costar黑色96孔板中Jurkat细胞的荧光图像。 不使用(左)/使用20 µM喜树碱(右)处理Jurkat细胞5小时。 使用具有通道的荧光显微镜测量荧光强度。

 

参考文献

Physiological effects of the herbicide glyphosate on the cyanobacterium Microcystis aeruginosa
Authors: Wu, Liang and Qiu, Zhihao and Zhou, Ya and Du, Yuping and Liu, Chaonan and Ye, Jing and Hu, Xiaojun
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 72–79

Tumor-selective mitochondrial network collapse induced by atmospheric gas plasma-activated medium.
Authors: Saito, Kosuke and Asai, Tomohiko and Fujiwara, Kyoko and Sahara, Junki and Koguchi, Haruhisa and Fukuda, Noboru and Suzuki-Karasaki, Miki and Soma, Masayoshi and Suzuki-Karasaki, Yoshihiro
Journal: Oncotarget (2016)

Inhibition of malignant phenotypes of human osteosarcoma cells by a gene silencer, a pyrrole–imidazole polyamide, which targets an E-box motif
Authors: Taniguchi, Masashi and Fujiwara, Kyoko and Nakai, Yuji and Ozaki, Toshinori and Koshikawa, Nobuko and Toshio, Kojima and Kataba, Motoaki and Oguni, Asako and Matsuda, Hiroyuki and Yoshida, Yukihiro and others
Journal: FEBS open bio (2014): 328–334

Detection of apoptosis based on the interaction between annexin V and phosphatidylserine
Authors: Liu T, Zhu W, Yang X, Chen L, Yang R, Hua Z, Li G.
Journal: Anal Chem (2009): 2410

Evaluation of cell surface expression of phosphatidylserine in ovarian carcinoma effusions using the annexin-V/7-AAD assay: clinical relevance and comparison with other apoptosis parameters
Authors: Dong HP, Holth A, Kleinberg L, Ruud MG, Elstr and MB, Trope CG, Davidson B, Risberg B.
Journal: Am J Clin Pathol (2009): 756

Mobilization of lysosomal calcium regulates the externalization of phosphatidylserine during apoptosis
Authors: Mirnikjoo B, Balasubramanian K, Schroit AJ.
Journal: J Biol Chem (2009): 6918

Peptidic targeting of phosphatidylserine for the MRI detection of apoptosis in atherosclerotic plaques
Authors: Burtea C, Laurent S, Lancelot E, Ballet S, Murariu O, Rousseaux O, Port M, V and er Elst L, Corot C, Muller RN.
Journal: Mol Pharm (2009): 1903

Suicidal membrane repair regulates phosphatidylserine externalization during apoptosis
Authors: Mirnikjoo B, Balasubramanian K, Schroit AJ.
Journal: J Biol Chem (2009): 22512

Trivalent methylated arsenical-induced phosphatidylserine exposure and apoptosis in platelets may lead to increased thrombus formation
Authors: Bae ON, Lim KM, Noh JY, Chung SM, Kim SH, Chung JH.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol (2009): 144

Discovery of a phosphatidylserine-recognizing peptide and its utility in molecular imaging of tumour apoptosis
Authors: Thapa N, Kim S, So IS, Lee BH, Kwon IC, Choi K, Kim IS.
Journal: J Cell Mol Med (2008): 1649

说明书
Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 橙色荧光,适合酶标仪检测 .pdf

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测 货号22804-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测     货号22804 货号 22804 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 546 Em (nm) 575
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于线粒体膜电位检测的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter线粒体膜电位检测试剂盒 *橙色荧光 适合流式细胞检测* 专门通过检测线粒体跨膜电势的减少来检测细胞凋亡。线粒体跨膜电势瓦解与线粒体渗透转运孔的开放相一致,导致细胞色素C释放到胞浆中,它是下游凋亡级联反应的触发器。该荧光实验方案利用我们独有的MitoLite Orange来检测凋亡细胞中线粒体跨膜电势的减少。在正常细胞中,当MitoLite Orange积聚于线粒体时,红色荧光增加。然而在凋亡细胞中,MitoLite Orange随着线粒体跨膜电位的塌陷而减少。被MitoLite Orange染色的细胞可以通过488n的激发光(FL2 通道)来观察。该试剂盒可以与其它Cell Meter检测试剂盒同时检测细胞的活性和凋亡,该试剂盒已被优化,可用于流式细胞法筛选凋亡激活剂或抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm 或 532nm激发
发射: 575/26nm滤波片
通道: PE通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用密度为5×105到1×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞
2.将2μL500XMitoTell Orange加入1 mL细胞溶液中
3.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育15-30分钟
4.将细胞沉淀,并将细胞重悬于1mL生长培养基中
5.使用具有FL2通道的流式细胞仪分析细胞

 

操作步骤

1.对于每个样品,将细胞制备在1 mL温热培养基或您选择的缓冲液中,密度为5×105至1×106个细胞/ mL。注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段所需的时间以诱导细胞凋亡,并建立平行对照实验。

3.对于阴性对照:仅用载体处理细胞。

4.对于阳性对照:使用FCCP或CCCP以5-50μM在37℃,5%CO2培养箱中处理细胞15至30分钟。注意:CCCP或FCCP可与MitoTell Orange同时添加。为了获得最佳结果,可能需要对每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。

5.将2μL500XMitoTell 橙(组分A)加入处理过的细胞中。

6.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育15至30分钟。注意:对于粘附细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用MitoTell Orange染料加载溶液孵育之前用含有血清的培养基洗涤细胞一次。

7.将细胞以1000rpm离心4分钟,然后将细胞重悬于1mL的分析缓冲液(组分B)或您选择的缓冲液中。

8.使用具有FL2通道(Ex / Em = 540 / 590nm)的流式细胞仪监测荧光强度。

 

数据分析

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测     货号22804

图1.在Jurkat细胞中添加FCCP后MitoTell Orange的荧光强度降低。 将Jurkat细胞单独加载MitoTell Orange(蓝色)或在30μMFCCP(红色)存在下加载15分钟。 使用FL2通道,用FACSCalibur(Becton Dickinson,San Jose,CA)流式细胞仪测量MitoTell Orange的荧光强度。

 

参考文献

Safranine O as a fluorescent probe for mitochondrial membrane potential studied on the single particle level and in suspension
Authors: Perevoshchikova IV, Sorochkina AI, Zorov DB, Antonenko YN.
Journal: Biochemistry (Mosc) (2009): 663

Computer-assisted live cell analysis of mitochondrial membrane potential, morphology and calcium handling
Authors: Koopman WJ, Distelmaier F, Esseling JJ, Smeitink JA, Willems PH.
Journal: Methods (2008): 304

Determination of high mitochondrial membrane potential in spermatozoa loaded with the mitochondrial probe 5,5′,6,6′-tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethylbenzimidazolyl-carbocyanine iodide (JC-1) by using fluorescence-activated flow cytometry
Authors: Guthrie HD, Welch GR.
Journal: Methods Mol Biol (2008): 89

Effects of eprosartan on mitochondrial membrane potential and H2O2 levels in leucocytes in hypertension
Authors: Labios M, Martinez M, Gabriel F, Guiral V, Ruiz-Aja S, Beltran B, Munoz A.
Journal: J Hum Hypertens (2008): 493

How DASPMI reveals mitochondrial membrane potential: fluorescence decay kinetics and steady-state anisotropy in living cells
Authors: Ramadass R, Bereiter-Hahn J.
Journal: Biophys J (2008): 4068

Life cell quantification of mitochondrial membrane potential at the single organelle level
Authors: Distelmaier F, Koopman WJ, Testa ER, de Jong AS, Swarts HG, Mayatepek E, Smeitink JA, Willems PH.
Journal: Cytometry A (2008): 129

Mitochondrial membrane potential in axons increases with local nerve growth factor or semaphorin signaling
Authors: Verburg J, Hollenbeck PJ.
Journal: J Neurosci (2008): 8306

The mitochondrial membrane potential and Ca2+ oscillations in smooth muscle
Authors: Chalmers S, McCarron JG.
Journal: J Cell Sci (2008): 75

[Evaluation of sperm mitochondrial membrane potential by JC-1 fluorescent staining and flow cytometry]
Authors: Xia XY, Wu YM, Hou BS, Yang B, Pan LJ, Shi YC, Jin BF, Shao Y, Cui YX, Huang YF.
Journal: Zhonghua Nan Ke Xue (2008): 135

Cyclosporin A-induced oxidative stress is not the consequence of an increase in mitochondrial membrane potential
Authors: van der Toorn M, Kauffman HF, van der Deen M, Slebos DJ, Koeter GH, Gans RO, Bakker SJ.
Journal: Febs J (2007): 3003

 

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Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测 .pdf

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测 货号22824-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测     货号22824 货号 22824 存储条件 避免光照, 在2-8度冷藏保存
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞凋亡检测试剂盒,我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸(PS)的转运来监测细胞凋亡。在凋亡中,PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标,可以在观察到形态变化之前进行检测。该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS,使用带有FITC通道的流式细胞仪(绿色荧光)优化了此特定的检测试剂盒,以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm
通道: FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

用测试化合物(200μL/样品)制备细胞
添加Annexin V-iFluor 488原液
在室温下孵育30-60分钟
使用FL1通道的流式细胞仪分析细胞(Ex / Em = 490/525 nm)

 

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段时间(用喜树碱处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。注意:膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而,Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。和van Engelend等人。

2.离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。

4.将2μL膜联蛋白V-iFluor 488(组分A)加入细胞中。

5.可选:加入2μL100X碘化丙啶(成分C)用于坏死细胞。

6.在室温下孵育30至60分钟,避光。

7.可选:在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加200至300μL的测定缓冲液(组分B)以增加体积。

8.使用具有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490 / 525nm)监测膜联蛋白V-iFluor 488的荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时,使用FL2通道测量细胞活力。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 488检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。 在凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 488与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,因此导致染色强度增加。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测     货号22824

图1.检测膜联蛋白V-iFluor 488和磷脂酰丝氨酸在Jurkat细胞中的结合活性。 Jurkat细胞在37℃,5%CO2培养箱中不用(蓝色)或用20μM喜树碱(红色)处理4-5小时,然后用Annexin V-iFluor 488染色30分钟。 使用FL1通道用FACSCalibur(Becton Dickinson)流式细胞仪测量膜联蛋白V-iFluor 488的荧光强度。

 

参考文献

Combined Treatments of Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia with Doxorubicin Promotes Synergistic Anti-Tumoral Activity.
Authors: D Hajj Diab El, P Clerc, N Serhan, D Fourmy, V Gigoux
Journal: Nanomaterials (Basel, Switzerland) (2018)

In situ polymerizable hydrogel incorporated with specific pathogen-free porcine platelet-rich plasma for the reconstruction of the corneal endothelium
Authors: Yung-Kai Lin, Ruchi Sharma, Hsu Ma, Wen-Shyan Chen, Chao-Ling Yao
Journal: Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers (2017)

Novel regulations of MEF2-A, MEF2-D, and CACNA1S in the functional incompetence of adipose-derived mesenchymal stem cells by induced indoxyl sulfate in chronic kidney disease
Authors: Duyen Thi Do, Nam Nhut Phan, Chih-Yang Wang, Zhengda Sun, Yen-Chang Lin
Journal: Cytotechnology (2016): 2589–2604

Shear stress-induced alteration of epithelial organization in human renal tubular cells
Authors: Damien Maggiorani, Romain Dissard, Marcy Belloy, Jean-Sébastien Saulnier-Blache, Audrey Casemayou, Laure Ducasse, Sandra Grès, Julie Bellière, Cécile Caubet, Jean-Loup Bascands
Journal: PloS one (2015): e0131416

Targeting a G-protein-coupled receptor overexpressed in endocrine tumors by magnetic nanoparticles to induce cell death
Authors: Claire Sanchez, Darine El Hajj Diab, Vincent Connord, Pascal Clerc, Etienne Meunier, Bernard Pipy, Bruno Payré, Reasmey P Tan, Michel Gougeon, Julian Carrey
Journal: Acs Nano (2014): 1350–1363

 

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Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测 .pdf

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 货号22828-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发     货号22828 货号 22828 存储条件 避免光照, 在2-8度冷藏保存
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 406 Em (nm) 445
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒,我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸(PS)的转运来监测细胞凋亡。在凋亡中,PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标,可以在观察到形态变化之前进行检测。该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS,使用带有Pacific Blue滤波片的流式细胞仪,对该特定的测定试剂盒进行了优化,以监测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405nm激光
发射: 450/40nm滤波片
通道: Pacific Blue通道
荧光显微镜  
激发: DAPI滤波片
发射: DAPI滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(200μL/样品)制备细胞
2.添加Annexin V-mFluor Violet 450检测溶液
3.在室温下孵育30-60分钟
4.使用具有Ex / Em = 405 / 450nm滤光器组的流式细胞仪或具有Violet滤光器的荧光显微镜分析细胞

 

操作步骤

使用膜联蛋白V-mFluor Violet 450制备和孵育细胞:

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。

2.离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。

4.将2μL膜联蛋白V-mFluor Violet 450(组分A)加入细胞中。

5.可选:将2μL100X碘化丙啶(组分C)加入细胞中,用于坏死细胞。

6.在室温下孵育30至60分钟,避光。

7.在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前,添加300μL分析缓冲液(组分B)以增加体积。

8.使用具有Ex / Em = 405 / 450nm滤光片组的流式细胞仪或具有Violet滤光片的荧光显微镜监测荧光强度。

 

使用流式细胞仪分析:

1.使用流式细胞仪在Ex / Em = 405 / 450nm处定量膜联蛋白V-mFluor Violet 450结合。 当碘化丙啶加入细胞时,使用FL2通道测量细胞活力。 注意:粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而,Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。

 

使用荧光显微镜分析:

1.孵育后移取细胞悬液,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后用测定缓冲液重悬细胞。

2.将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。 注意:对于粘附细胞,建议直接在盖玻片上生长细胞。 与V-mFluor Violet 450孵育后,用测定缓冲液冲洗1-2次,并将化验缓冲液加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并可视化细胞。 在与V-mFluor Violet 450一起温育后,细胞也可以固定在2%甲醛中,并在显微镜下观察。

3.使用Violet通道在荧光显微镜下用V-mFluor Violet 450分析凋亡细胞。 当碘化丙啶加入细胞时,使用TRITC通道测量细胞活力。 质膜上的蓝色染色表明V-mFluor Violet 450与细胞表面上的PS结合。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中,膜联蛋白V-mFluor Violet 450检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。 在凋亡细胞中,膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,导致染色强度增加。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发     货号22828

图1.在Jurkat细胞中检测膜联蛋白V-mFluor Violet 450和磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃,5%CO2培养箱中在没有(蓝色)或1μM星形孢菌素(红色)的情况下处理5小时,然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分钟。 使用FACSCalibur(Becton Dickinson)流式细胞仪,使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下测量膜联蛋白V-mFluor Violet 450的荧光强度。

 

参考文献

In situ polymerizable hydrogel incorporated with specific pathogen-free porcine platelet-rich plasma for the reconstruction of the corneal endothelium
Authors: Yung-Kai Lin, Ruchi Sharma, Hsu Ma, Wen-Shyan Chen, Chao-Ling Yao
Journal: Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers (2017)

Novel regulations of MEF2-A, MEF2-D, and CACNA1S in the functional incompetence of adipose-derived mesenchymal stem cells by induced indoxyl sulfate in chronic kidney disease
Authors: Duyen Thi Do, Nam Nhut Phan, Chih-Yang Wang, Zhengda Sun, Yen-Chang Lin
Journal: Cytotechnology (2016): 2589–2604

Shear stress-induced alteration of epithelial organization in human renal tubular cells
Authors: Damien Maggiorani, Romain Dissard, Marcy Belloy, Jean-Sébastien Saulnier-Blache, Audrey Casemayou, Laure Ducasse, Sandra Grès, Julie Bellière, Cécile Caubet, Jean-Loup Bascands
Journal: PloS one (2015): e0131416

Targeting a G-protein-coupled receptor overexpressed in endocrine tumors by magnetic nanoparticles to induce cell death
Authors: Claire Sanchez, Darine El Hajj Diab, Vincent Connord, Pascal Clerc, Etienne Meunier, Bernard Pipy, Bruno Payré, Reasmey P Tan, Michel Gougeon, Julian Carrey
Journal: Acs Nano (2014): 1350–1363

 

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Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 405nm激发 .pdf

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 405nm激发 货号22829-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 405nm激发

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 405nm激发

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 405nm激发     货号22829 货号 22829 存储条件 避免光照, 在2-8度冷藏保存
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 410 Em (nm) 501
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。 有多种参数可用于检测细胞活力。 该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸(PS)的转运来检测细胞凋亡。 在细胞凋亡中,PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标,可以在观察形态变化之前进行检测。该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。 已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS。 使用带有525/40发射滤光片组的405激光器的流式细胞仪,对该特定的测定试剂盒进行了优化,以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405nm激光
发射: 525/40nm滤波片
通道: AmCyan通道
荧光显微镜  
激发: 紫色滤波片
发射: 紫色滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物制备细胞(200 µL /样品)
  2. 添加膜联蛋白V-mFluor Violet 500分析溶液
  3. 在室温下孵育30-60分钟
  4. 使用带有525/40 nm滤光片(AmCyan通道)的流式细胞仪或带有紫色滤光片组的荧光显微镜分析细胞

 

实验步骤

1.用膜联蛋白V-mFluor Violet 500制备和孵育细胞:

1.1用测试化合物处理细胞一段时间(对于用星形孢菌素处理过的Jurkat细胞,需要4-6小时)以诱导细胞凋亡。

1.2离心细胞以获得1-5×105细胞/管。

1.3将细胞重悬于200 µL分析缓冲液(组分B)中。

1.4在细胞中加入2 µL Annexin V-mFluor Violet 500(组分A)。

1.5可选:向坏死的细胞中加入2 µL 100X碘化丙啶(组分C)。

1.6避光保存,于室温下孵育30至60分钟。

1.7在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前,添加300 µL分析缓冲液(组分B)以增加体积。

1.8使用带有525/40 nm滤光片的流式细胞仪(AmCyan通道)或带有紫色滤光片组的荧光显微镜检测荧光强度。

2.通过使用流式细胞仪进行分析:

2.1使用带有525/40 nm滤光片的流式细胞仪(AmCyan通道)定量膜联蛋白V-mFluor Violet 500结合。 将碘化丙啶加入细胞后,使用610/20 nm滤光片(PE-德克萨斯红通道)测量细胞活力。 注意:对贴壁细胞的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经过常规测试,因为在细胞分离或收获过程中可能会发生特定的膜损伤。 

3.通过使用荧光显微镜进行分析:

3.1孵育后用移液管吸移细胞悬液,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后用测定缓冲液重悬细胞。

3.2将细胞添加到载玻片盖玻片的载玻片上。注意:对于贴壁细胞,建议直接在盖玻片上生长细胞。与膜联蛋白V-mFluor Violet 500一起孵育后,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后将测定缓冲液加到盖玻片上。将玻片上的盖玻片倒置并可视化细胞。与膜联蛋白V-mFluor Violet 500孵育后,还可以将细胞固定在2%甲醛中,并在显微镜下观察。

3.3使用紫罗兰滤光片组在荧光显微镜下用膜联蛋白V-mFluor Violet 500分析凋亡细胞。当碘化丙锭添加到细胞中时,使用TRITC通道测量细胞活力。质膜上的绿色染色表明膜联蛋白V-mFluor Violet 500与细胞表面的PS结合。

 

参考文献

In situ polymerizable hydrogel incorporated with specific pathogen-free porcine platelet-rich plasma for the reconstruction of the corneal endothelium
Authors: Lin, Yung-Kai and Sharma, Ruchi and Ma, Hsu and Chen, Wen-Shyan and Yao, Chao-Ling
Journal: Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers (2017)

Novel regulations of MEF2-A, MEF2-D, and CACNA1S in the functional incompetence of adipose-derived mesenchymal stem cells by induced indoxyl sulfate in chronic kidney disease
Authors: Do, Duyen Thi and Phan, Nam Nhut and Wang, Chih-Yang and Sun, Zhengda and Lin, Yen-Chang
Journal: Cytotechnology (2016): 2589–2604

Shear stress-induced alteration of epithelial organization in human renal tubular cells
Authors: Maggiorani, Damien and Dissard, Romain and Belloy, Marcy and Saulnier-Blache, Jean-Sébastien and Casemayou, Audrey and Ducasse, Laure and Grès, S and ra and Bellière, Julie and Caubet, Cécile and Basc and s, Jean-Loup and others
Journal: PloS one (2015): e0131416

Targeting a G-protein-coupled receptor overexpressed in endocrine tumors by magnetic nanoparticles to induce cell death
Authors: Sanchez, Claire and El Hajj Diab, Darine and Connord, Vincent and Clerc, Pascal and Meunier, Etienne and Pipy, Bernard and Payré, Bruno and Tan, Reasmey P and Gougeon, Michel and Carrey, Julian and others
Journal: Acs Nano (2014): 1350–1363

Glycogen synthase kinase-3 and Omi/HtrA2 induce annexin A2 cleavage followed by cell cycle inhibition and apoptosis
Authors: Wang CY, Lin YS, Su WC, Chen CL, Lin CF.
Journal: Mol Biol Cell (2009): 4153

Gold fluorescent annexin A5 as a novel apoptosis detection tool
Authors: Kurschus FC, Pal PP, Baumler P, Jenne DE, Wiltschi B, Budisa N.
Journal: Cytometry A (2009): 626

Detection of apoptosis induced by new type gosling viral enteritis virus in vitro through fluorescein annexin V-FITC/PI double labeling
Authors: Chen S, Cheng AC, Wang MS, Peng X.
Journal: World J Gastroenterol (2008): 2174

Evaluation of annexin V and Calcein-AM as markers of mononuclear cell apoptosis during human immunodeficiency virus infection
Authors: Palma PF, Baggio GL, Spada C, Silva RD, Ferreira SI, Treitinger A.
Journal: Braz J Infect Dis (2008): 108

Measurement of annexin V uptake and lactadherin labeling for the quantification of apoptosis in adherent Tca8113 and ACC-2 cells
Authors: Hu T, Shi J, Jiao X, Zhou J, Yin X.
Journal: Braz J Med Biol Res (2008): 750

Rhodamine B isothiocyanate doped silica-coated fluorescent nanoparticles (RBITC-DSFNPs)-based bioprobes conjugated to Annexin V for apoptosis detection and imaging
Authors: Shi H, He X, Wang K, Yuan Y, Deng K, Chen J, Tan W.
Journal: Nanomedicine (2007): 266

说明书
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 405nm激发 .pdf

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 货号22840-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光    货号22840 货号 22840 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3264
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光是美国AAT Bioquest研发的用于细胞凋亡和坏死检测的试剂盒,该特定试剂盒旨在同时检测细胞凋亡,坏死和健康。细胞凋亡是一种自主细胞拆解的活跃程序化过程,可避免引发炎症。在细胞凋亡中,磷脂酰丝氨酸(PS)被转移到质膜的外部小叶。作为细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指标,可以在观察到形态变化之前检测细胞表面上磷脂酰丝氨酸的出现。该试剂盒中使用的PS传感器在与膜PS结合后具有绿色荧光(Ex / Em = 490 / 525nm)。坏死已被描述为由于环境扰动导致的被动,意外细胞死亡,其中炎性细胞内容物不受控制地释放。如通过膜不可渗透的7-AAD(Ex / Em = 546 / 647nm)标记细胞核的能力所证明的,质膜完整性的丧失代表了证明晚期细胞凋亡和坏死的直接方法。此外,该试剂盒还提供活细胞质标记染料,CytoCalcein Violet 450(Ex / Em = 405/450 nm),用于标记活细胞的细胞质。该试剂盒经过优化,可用流式细胞仪或荧光显微镜同时检测细胞凋亡(绿色),坏死(绿色和/或红色)和健康细胞(蓝色)。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的细胞凋亡和坏死检测试剂盒。

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405nm,488nm激光
发射: 450/40 nm, 530/30 nm, 670/14 nm滤波片
通道: Pacific Blue, FITC, PE-Cy5通道
荧光显微镜  
激发: DAPI, FITC, Texas Red滤波片
发射: DAPI, FITC, Texas Red滤波片
推荐孔板: 黑色透明

产品说明书

样品分析方案

概述

用测试化合物(200μL/样品)制备细胞

添加Apopxin Green测定溶液

在室温下孵育30-60分钟

用流式细胞仪或荧光显微镜分析

在Ex / Em = 490 / 525nm(细胞凋亡),550 / 650nm(坏死)和405 / 450nm(健康细胞)

 

操作步骤

1.用Apopxin Green制备和孵育细胞:

1.1用测试化合物将细胞维持一段所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。

1.2离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。

1.3将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。

1.4将2μLApopxin Green(组分A)加入细胞中。

可选1:将1μL的200X 7-AAD(组分C)加入细胞中用于坏死细胞。

可选2:将100μLDMSO加入到CytoCalcein Violet 450(组分D)的小瓶中,得到200X CytoCalcein Violet 450原液,然后向细胞中加入1μL进行健康细胞染色。

1.5在室温下孵育30至60分钟(避光)。

1.6在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前,加入300μL测定缓冲液(组分B)以增加体积(参见下面的步骤1.7)。

1.7使用流式细胞仪或荧光显微镜观察Ex / Em = 490 / 525nm处荧光强度的细胞凋亡,550 / 650nm处坏死,以及405/450nm处的健康细胞(参见下面的步骤2或3)。

 

2.使用流式细胞仪分析细胞:

使用FL1通道(Ex / Em = 490/525 nm)定量Apopxin Green结合,并在添加7-AAD时使用FL3通道(Ex / Em = 490/650 nm)测量细胞活力,和/或 当将CytoCalcein Violet 450加入细胞中时,使用Ex / Em = 405 / 450nm。

注意:Apopxin 与贴壁细胞结合的流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而,Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van Engelend等人(见参考文献1和2)。

 

3.使用荧光显微镜分析细胞:

3.1从步骤1.5中移取细胞悬液,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后用测定缓冲液重悬细胞。将细胞添加到载玻片盖玻片或黑色墙壁/透明底96孔微孔板的载玻片上。

注意:对于贴壁细胞,建议直接在盖玻片(或黑墙/透明底96孔微孔板)上培养细胞。与Apopxin Green孵育(步骤1.5)后,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后将测定缓冲液加回到盖玻片(或黑色壁/透明底96孔微孔板)中。在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。在与Apopxin Green温育后,细胞也可以固定在2%甲醛中,并在显微镜下观察。

3.2使用FITC通道在荧光显微镜下用Apopxin Green分析凋亡细胞。当添加7-AAD时使用德克萨斯红色通道测量细胞活力,和当将CytoCalcein Violet 450添加到细胞中时测量/或紫色通道。质膜上的绿色染色表明Apopxin Green与细胞表面的PS结合。

 

数据分析

        在活的非凋亡细胞中,Apopxin Green检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。在凋亡细胞中,Apopxin Green与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,导致染色强度增加。

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光    货号22840

图1.在Jurkat细胞中检测Apopxin Green与磷脂酰丝氨酸的结合活性。 A.在37℃,5%CO 2培养箱中不用(A.蓝色)或用1μM星形孢菌素(A.Red)处理Jurkat细胞5小时,然后加载Apopxin Green 30分钟。使用FL1通道,用FACSCalibur(Becton Dickinson,San Jose,CA)流式细胞仪测量Apopxin Green的荧光强度。 B和C:荧光图像显示活细胞(蓝色,CytoCalcein Violet 450染色),细胞凋亡(绿色,Apopxin Green染色)和Jurkat细胞坏死(红色,7-AAD染色指示)用1μM星形孢菌素处理3小时。用Olympus荧光显微镜分别通过Violet,FITC和TRITC通道拍摄细胞的荧光图像。如上所示,合并来自相同细胞群的每个通道的各个图像。 B:非诱导对照细胞; C:星形孢菌素诱导的细胞的三重染色。

 

参考文献

Anthocyanin-rich blackcurrant extract inhibits proliferation of the MCF10A healthy human breast epithelial cell line through induction of G0/G1 arrest and apoptosis
Authors: Naoki Nanashima, Kayo Horie, Mitsuru Chiba, Manabu Nakano, Hayato Maeda, Toshiya Nakamura
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 6134–6141

Clusterin signals via ApoER2/VLDLR and induces meiosis of male germ cells
Authors: Muhammad Assad Riaz, Angelika Stammler, Mareike Borgers, Lutz Konrad
Journal: American Journal of Translational Research (2017): 1266

Detecting Apoptosis, Autophagy, and Necrosis
Authors: Jack Coleman, Rui Liu, Kathy Wang, Arun Kumar
Journal: Apoptosis Methods in Toxicology (2016): 77–92

 

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产品名称 货号
Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 Cat#22843

说明书
Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光.pdf

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测 货号22841-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测     货号22841 货号 22841 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 503 Em (nm) 527
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞周期的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。在正常细胞中,DNA密度的改变与细胞生长、分化、休眠等细胞功能相关。细胞周期通过许多不同的细胞周期调控因子相互作用来调节。这些调控因子的激活因子,可以与DNA结合,开启或关闭那些能引起细胞分裂的蛋白质合成。在这个调控级联反应中,任何一步的错误都会引起细胞非正常地增殖,这是一种潜在的病理状态,例如肿瘤的形成。活细胞研究的潜在应用是对细胞DNA含量的测定和细胞周期进行检测,为了对细胞的生长模式的变化进行检测,对细胞凋亡进行监测,对肿瘤细胞活动和抑制剂基因机制进行研究。Cell Meter荧光法细胞周期检测试剂盒 *绿色荧光 适合于流式细胞检测* 是设计用来检测细胞周期进程和增殖的,在活细胞、经通透性处理的细胞和固定化细胞中使用我们独特的Nuclear Green CCS1对细胞周期进程和增殖进行监测。在所给样品的不同细胞中,有G0/G1, S 和G2/M 期以及细胞凋亡之前的亚-G1期等,可以通过流式细胞仪检测。经过Nuclear Green CC1染色的细胞可以通过流式细胞仪在Ex/Em = 490 nm/520 nm(FL1 通道)进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

用测试化合物制备细胞,密度为5×105至1×106个细胞/ mL
将2.5μL200XNuclear Green CCS1加入0.5 mL细胞溶液中
在37°C,5%CO2培养箱中孵育30-60分钟
使用FL1通道用流式细胞仪分析细胞((Ex / Em = 490/525 nm)

 

操作步骤

1.对于每个样品,将细胞制备在0.5 mL温热培养基或您选择的缓冲液中,密度为5×105至1×106个细胞/ mL。注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段所需的时间以诱导细胞凋亡或其他细胞周期功能。

3.将2.5μL的200X Nuclear Green CCS1(组分A)加入处理过的细胞中。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育30至60分钟。注意:对于粘附细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与Nuclear Green CCS1孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。由于Nuclear Green CCS1是细胞可渗透的,因此不必在DNA染色之前固定细胞。

5.可选:将细胞以1000 rpm离心4分钟,然后将细胞重新悬浮于0.5 mL测定缓冲液(组分B)或您选择的缓冲液中。

6.使用具有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490 / 525nm)监测荧光强度。

 

数据分析

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测     货号22841

图1生长和诺考达唑处理的Jurkat细胞中的DNA谱。 Jurkat细胞在37℃,5%CO2培养箱中不用(A)或用100ng / ml诺考达唑(B)处理24小时,然后用Nuclear Green CCS1染色30分钟。 使用具有FITC通道的ACEA NovoCyte流式细胞仪测量Nuclear Green CCS1的荧光强度。 在生长Jurkat细胞(A)中,用Nuclear Green CCS1染色的核显示出G1,S和G2期。 在Nocodazole处理G2阻滞细胞(B)后,G2细胞频率急剧增加,G1期,S期频率明显下降。

 

参考文献

Cell cycle synchronization of Escherichia coli using the stringent response, with fluorescence labeling assays for DNA content and replication
Authors: Ferullo DJ, Cooper DL, Moore HR, Lovett ST.
Journal: Methods (2009): 8

DNA replication, cell cycle progression and the targeted gene repair reaction
Authors: Engstrom JU, Kmiec EB.
Journal: Cell Cycle (2008): 1402

Morin inhibits the growth of human leukemia HL-60 cells via cell cycle arrest and induction of apoptosis through mitochondria dependent pathway
Authors: Kuo HM, Chang LS, Lin YL, Lu HF, Yang JS, Lee JH, Chung JG.
Journal: Anticancer Res (2007): 395

Direct control of cell cycle gene expression by proto-oncogene product ACTR, and its autoregulation underlies its transforming activity
Authors: Louie MC, Revenko AS, Zou JX, Yao J, Chen HW.
Journal: Mol Cell Biol (2006): 3810

Cell cycle markers for live cell analyses
Authors: Easwaran HP, Leonhardt H, Cardoso MC.
Journal: Cell Cycle (2005): 453

Dynamic relocalization of hOGG1 during the cell cycle is disrupted in cells harbouring the hOGG1-Cys326 polymorphic variant
Authors: Luna L, Rolseth V, Hildrestrand GA, Otterlei M, Dantzer F, Bjoras M, Seeberg E.
Journal: Nucleic Acids Res (2005): 1813

Dynamics of relative chromosome position during the cell cycle
Authors: Essers J, van Cappellen WA, Theil AF, van Drunen E, Jaspers NG, Hoeijmakers JH, Wyman C, Vermeulen W, Kanaar R.
Journal: Mol Biol Cell (2005): 769

Cell cycle regulation of the murine 8-oxoguanine DNA glycosylase (mOGG1): mOGG1 associates with microtubules during interphase and mitosis
Authors: Conlon KA, Zharkov DO, Berrios M.
Journal: DNA Repair (Amst) (2004): 1601

Description of a flow cytometry approach based on SYBR-14 staining for the assessment of DNA content, cell cycle analysis, and sorting of living normal and neoplastic cells
Authors: Nunez R, Garay N, Villafane C, Bruno A, Lindgren V.
Journal: Exp Mol Pathol (2004): 29

Differential roles of STAT1alpha and STAT1beta in fludarabine-induced cell cycle arrest and apoptosis in human B cells
Authors: Baran-Marszak F, Feuillard J, Najjar I, Le Clorennec C, Bechet JM, Dusanter-Fourt I, Bornkamm GW, Raphael M, Fagard R.
Journal: Blood (2004): 2475

 

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Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测 货号22842-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测     货号22842 货号 22842 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 537 Em (nm) 618
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞活力和增殖的工具。有多种参数可用于监测细胞活力和增殖。在正常细胞中,DNA密度根据细胞的生长,分裂,静止执行其正常功能而变化。细胞周期的进程受各种细胞周期调节因子之间复杂的相互作用控制。这些调节剂激活转录因子,该转录因子与DNA结合并开启或关闭导致细胞分裂的蛋白质的产生。这种调节级联中的任何失误都会导致异常细胞增殖,这是许多病理状况(例如肿瘤形成)的基础。活细胞研究的潜在应用是确定细胞DNA含量和细胞周期分布,以检测生长模式的变化,检测凋亡,评估肿瘤细胞的行为和抑制基因的机制。该特定试剂盒旨在使用Nuclear Red CCS1(固定细胞中的细胞周期染色剂)检测细胞周期进程和增殖。染料穿过透化的膜并插入细胞DNA中。试剂盒中提供的RNase降解RNA后,Nuclear Red CCS1的信号强度与DNA含量成正比。可以使用流式细胞仪(FL2通道)检测给定样品中处于G0 / G1,S和G2 / M期的细胞百分比,以及处于凋亡之前的sub-G1期的细胞百分比。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 610/20nm滤波片
通道: PE-Texas Red通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106cell/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
  2. 用70%乙醇固定细胞
  3. 将0.5 µL 100X Nuclear Red CCS1和5 µL RNase A加入0.5 mL细胞溶液中
  4. 在室温下孵育30-60分钟
  5. 使用带有FL2通道的流式细胞仪分析细胞

 

实验步骤

1.用测试化合物处理细胞,以诱导凋亡或其他细胞周期功能。

2.对于每个样品,用0.5 mL PBS制备细胞,密度为5×105至1×106细胞/ mL。

2.1对于贴壁细胞:将细胞用胰蛋白酶消化,悬浮在10%FBS培养基中,离心(1000 rpm,5分钟),然后将沉淀重悬于PBS中。

2.2对于悬浮细胞:将细胞离心(1000 rpm,5分钟),并将沉淀物悬浮在PBS(1 mL)中。 注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的最佳细胞密度。

3.用70%乙醇固定细胞:

3.1将0.5 mL细胞悬液吸移至1.2 mL无水乙醇中(最终浓度约为70%)。

3.2在冰上孵育细胞至少2小时(或在-20°C过夜)。在染色之前,细胞可以在-20°C下保存2年。注意:在用单克隆抗体染色细胞表面抗原后,通常将乙醇用于固定,而在用单克隆抗体染色细胞内抗原后,通常将甲醇用于固定。在此过程中,将固定并分析整个细胞。由于仍然存在整个细胞团,因此通常包括使用RNase来消除任何双链RNA。尽管已经对整个细胞进行了分析,但尝试检测与DNA结合的某些细胞内抗原的尝试可能会失败,因为蛋白质会从透化的细胞中漏出(例如绿色荧光蛋白)。在这些情况下,在酒精固定之前,用PBS中的1%低聚甲醛进行短暂的预固定(在4-6°C下10分钟),将有助于将蛋白质保留在细胞中。

4.用Nuclear Red CCS1染色细胞:

4.1以1000 rpm的速度沉淀细胞5分钟,并用冷PBS至少洗涤一次。

4.2将沉淀物悬浮在0.5 mL测定缓冲液(组分C)中。

4.3加入5 µL 100X Nuclear Red CCS1(组分A)和5 µL 100X RNase A(组分B)。

4.4在室温下孵育细胞30至60分钟。 注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

4.5可选:将细胞以1000 rpm离心5分钟,然后将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液(组分B)或自备缓冲液中。

4.6使用FL2通道(Ex / Em = 490/620 nm),通过流式细胞仪检测荧光强度。 

 

参考文献 

Cell cycle synchronization of Escherichia coli using the stringent response, with fluorescence labeling assays for DNA content and replication
Authors: Ferullo DJ, Cooper DL, Moore HR, Lovett ST.
Journal: Methods (2009): 8

DNA replication, cell cycle progression and the targeted gene repair reaction
Authors: Engstrom JU, Kmiec EB.
Journal: Cell Cycle (2008): 1402

Morin inhibits the growth of human leukemia HL-60 cells via cell cycle arrest and induction of apoptosis through mitochondria dependent pathway
Authors: Kuo HM, Chang LS, Lin YL, Lu HF, Yang JS, Lee JH, Chung JG.
Journal: Anticancer Res (2007): 395

Direct control of cell cycle gene expression by proto-oncogene product ACTR, and its autoregulation underlies its transforming activity
Authors: Louie MC, Revenko AS, Zou JX, Yao J, Chen HW.
Journal: Mol Cell Biol (2006): 3810

Cell cycle markers for live cell analyses
Authors: Easwaran HP, Leonhardt H, Cardoso MC.
Journal: Cell Cycle (2005): 453

Dynamic relocalization of hOGG1 during the cell cycle is disrupted in cells harbouring the hOGG1-Cys326 polymorphic variant
Authors: Luna L, Rolseth V, Hildrestr and GA, Otterlei M, Dantzer F, Bjoras M, Seeberg E.
Journal: Nucleic Acids Res (2005): 1813

Dynamics of relative chromosome position during the cell cycle
Authors: Essers J, van Cappellen WA, Theil AF, van Drunen E, Jaspers NG, Hoeijmakers JH, Wyman C, Vermeulen W, Kanaar R.
Journal: Mol Biol Cell (2005): 769

Cell cycle regulation of the murine 8-oxoguanine DNA glycosylase (mOGG1): mOGG1 associates with microtubules during interphase and mitosis
Authors: Conlon KA, Zharkov DO, Berrios M.
Journal: DNA Repair (Amst) (2004): 1601

Description of a flow cytometry approach based on SYBR-14 staining for the assessment of DNA content, cell cycle analysis, and sorting of living normal and neoplastic cells
Authors: Nunez R, Garay N, Villafane C, Bruno A, Lindgren V.
Journal: Exp Mol Pathol (2004): 29

Differential roles of STAT1alpha and STAT1beta in fludarabine-induced cell cycle arrest and apoptosis in human B cells
Authors: Baran-Marszak F, Feuillard J, Najjar I, Le Clorennec C, Bechet JM, Dusanter-Fourt I, Bornkamm GW, Raphael M, Fagard R.
Journal: Blood (2004): 2475

说明书
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Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22844-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 红色荧光    货号22844 货号 22844 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 50 Tests 价格 3924
Ex (nm) 549 Em (nm) 648
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞凋亡的试剂盒,DNA片段化代表晚期细胞凋亡的特征。凋亡细胞中的DNA断裂可通过末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测。 TUNEL测定法依赖于DNA中存在的缺口,该缺口可通过TdT进行鉴定,TdT是一种酶,该酶催化添加标记物的dUTP的添加。现有的所有TUNEL分析均包含剧毒的椰油酸钠,这可能会诱导细胞凋亡并降低DNA的产生和DNA链。我们的Cell Meter™TUNEL细胞凋亡测定试剂盒使用了不含甲藻酸钠的专有缓冲系统。该试剂盒基于将我们独特的专有荧光染料掺入凋亡过程中形成的DNA片段中。该测定法经过优化,可在不使用抗体的情况下直接检测分离的或附着的细胞中的细胞凋亡。该试剂盒可提供所有必需成分,并具有优化的测定方案。适用于荧光酶标仪,荧光显微镜或流式细胞仪。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供最优质的细胞凋亡检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 620/20nm滤波片
通道: PE-Cy5通道
荧光显微镜  
激发: TRITC滤波片
发射: TRITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 550nm滤波片
发射: 590-650nm滤波片
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞。
  2. 与TUNEL工作溶液在37°C下孵育30分钟至1小时。
  3. 洗涤细胞。
  4. 用4%甲醛(可选)固定细胞。
  5. 用带FITC滤光片的荧光显微镜或带FITC通道的流式细胞仪。读取Ex / Em = 490/525 nm(截止= 515 nm)处的荧光强度。

 

溶液配制 

工作溶液配制

将0.5μL的100X Tunnelyte Green(组分A)添加到50μL的反应缓冲液(组分B)中,使总体积为50.5μL的TUNEL工作溶液。 避光。 注意:应单独评估每个细胞系,以确定最佳细胞密度。

 

实验步骤

1.根据您的特定协议,将细胞培养至最佳密度以诱导凋亡。 对于在96孔板培养物中生长的贴壁细胞,我们建议大约30,000至50,000个细胞/孔,对于非贴壁细胞,建议大约1至2 x 106细胞/ mL。 同时,在每种标记条件下,用诱导群体相同的密度培养非诱导阴性对照细胞群体。 注意:我们用100 nM-1 µM星形孢菌素处理HeLa细胞4小时,以诱导细胞凋亡。

2.染色和固色:

2.1取出细胞培养基。
2.2向每个样品中添加50µL TUNEL工作溶液。
2.3在37°C下孵育30-60分钟。
2.4除去TUNEL工作溶液,并用200 µL /孔的PBS洗涤细胞1-2次。
2.5向每个样品中添加100uL反应缓冲液(组分B)。
2.6使用Ex / Em = 550/590-650 nm(Cut off= 570 nm)的荧光酶标仪,带TRITC滤光片的荧光显微镜或带FL3通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.7可选:从步骤5中移出反应缓冲液,并向每个孔中添加100 µL /孔/ 96孔板的4%甲醛固定缓冲液(未提供)。注意:对于非贴壁细胞,请添加所需量(例如2X106细胞/ mL)的4%甲醛固定液。
2.8在室温下将平板孵育20至30分钟。
2.9去除固定剂。
2.10用PBS洗涤细胞2-3次,并用100µL PBS /孔/ 96孔板替换。
2.11使用Ex / Em = 550/590-650nm(Cut off= 570 nm)的荧光酶标仪,带TRITC滤光片的荧光显微镜或带FL3通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.12可选:用1X Hoechst(组分C)在Ex / Em = 350/460 nm处染色细胞核,以进行图像分析

 

参考文献

Vaccarin alleviates hypertension and nephropathy in renovascular hypertensive rats
Authors: Cai, Weiwei and Zhang, Zhenpeng and Huang, Yiqi and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Experimental and Therapeutic Medicine (2018): 924–932

CO-releasing molecules-2 attenuates ox-LDL-induced injury in HUVECs by ameliorating mitochondrial function and inhibiting Wnt/β-catenin pathway
Authors: Sun, Hai-Jian and Xu, Dong-Yan and Sun, Yi-Xin and Xue, Tong and Zhang, Chen-Xing and Zhang, Zhi-Xuan and Lin, Wei and Li, Ke-Xue
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Salusin-β mediates high glucose-induced endothelial injury via disruption of AMPK signaling pathway
Authors: Zhu, Xuexue and Zhou, Yuetao and Cai, Weiwei and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Vaccarin protects human microvascular endothelial cells from apoptosis via attenuation of HDAC1 and oxidative stress
Authors: Zhu, Xuexue and Lei, Yueyue and Tan, Fanggen and Gong, Leilei and Gong, Haifeng and Yang, Wei and Chen, Ting and Zhang, Zhixuan and Cai, Weiwei and Hou, Bao and others
Journal: European Journal of Pharmacology (2017)

Axl is required for TGF-β2-induced dormancy of prostate cancer cells in the bone marrow
Authors: Yumoto, Kenji and Eber, Matthew R and Wang, Jingcheng and Cackowski, Frank C and Decker, Ann M and Lee, Eunsohl and Nobre, Ana Rita and Aguirre-Ghiso, Julio A and Jung, Younghun and Taichman, Russell S
Journal: Scientific Reports (2016)

Growth Arrest-Specific 6 (GAS6) Promotes Prostate Cancer Survival by G1 Arrest/S Phase Delay and Inhibition of Apoptotic Pathway During Chemotherapy in Bone Marrow
Authors: Lee, Eunsohl and Decker, Ann M and Cackowski, Frank C and Kana, Lulia A and Yumoto, Kenji and Jung, Younghun and Wang, Jingcheng and Buttitta, Laura and Morgan, Todd M and Taichman, Russell S
Journal: Journal of cellular biochemistry (2016)

RFX1–dependent activation of SHP-1 induces autophagy by a novel obatoclax derivative in hepatocellular carcinoma cells
Authors: Su, Jung-Chen and Tseng, Ping-Hui and Hsu, Cheng-Yi and Tai, Wei-Tien and Huang, Jui-Wen and Ko, Ching-Huai and Lin, Mai-Wei and Liu, Chun-Yu and Chen, Kuen-Feng and Shiau, Chung-Wai
Journal: Oncotarget (2014): 4909

In situ detection of apoptosis by the TUNEL assay: an overview of techniques
Authors: Loo DT.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 3

Testicular apoptosis after dietary zinc deficiency: ultrastructural and TUNEL studies
Authors: Kumari D, Nair N, Bedwal RS.
Journal: Syst Biol Reprod Med (2011): 233

In situ localization of apoptosis using TUNEL
Authors: Hewitson TD, Darby IA.
Journal: Methods Mol Biol (2010): 161

 

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说明书
Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 红色荧光.pdf

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发 货号22845-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发

Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒 405nm激发     货号22845 货号 22845 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 401 Em (nm) 460
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

细胞周期具有四个连续阶段:G0 / G1,S,G2和M。在细胞通过细胞周期的过程中,其DNA在S(合成)阶段复制,并在M(有丝分裂)阶段在两个子细胞之间平均分配。这两个阶段由两个间隙阶段分开:G0 / G1和G2。这两个间隙相为细胞提供了生长时间,并使它们的蛋白质和细胞器的质量增加了一倍。在进入下一阶段的细胞周期之前,细胞还将它们用于检测内部和外部条件。细胞通过细胞周期的传递受到许多不同调节蛋白的控制。该特定试剂盒旨在通过在活细胞中使用我们专有的Nuclear Violet 检测细胞周期的进程和增殖。可以通过流式细胞术确定给定样品中处于G0 / G1,S和G2 / M期的细胞以及亚G1期处于凋亡之前的细胞的百分比。可以用流式细胞仪(PacificBlue®通道)检测用Nuclear Violet 染色的细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法细胞周期检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405 nm激光
发射: 450/40 nm滤波片
通道: Pacific Blue通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
  2. 在0.5 mL细胞溶液中加入1 µL 500X Nuclear Violet
  3. 在室温下孵育30-60分钟
  4. 使用405nm紫色光激发流式细胞仪进行分析

 

实验步骤

1.对于每个样品,请在0.5 mL的温暖培养基或自备缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞,以诱导凋亡或其他细胞周期功能。

3.向含有生长培养基的细胞中加入1µL 500X Nuclear Violet (组分A),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞30至60分钟。注意:对于贴壁细胞,用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用Nuclear Violet 孵育之前用含血清的培养基洗涤一次。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。注意:DNA染色前无需固定细胞,因为Nuclear Violet 具有细胞渗透性。

4.可选:以1000 rpm离心细胞4分钟,然后将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液(组分B)或自备缓冲液中。

5.使用405 nm紫色激光(Ex / Em = 405/445 nm)通过流式细胞仪检测荧光强度。

 

参考文献

Cell cycle synchronization of Escherichia coli using the stringent response, with fluorescence labeling assays for DNA content and replication
Authors: Ferullo DJ, Cooper DL, Moore HR, Lovett ST.
Journal: Methods (2009): 8

DNA replication, cell cycle progression and the targeted gene repair reaction
Authors: Engstrom JU, Kmiec EB.
Journal: Cell Cycle (2008): 1402

Morin inhibits the growth of human leukemia HL-60 cells via cell cycle arrest and induction of apoptosis through mitochondria dependent pathway
Authors: Kuo HM, Chang LS, Lin YL, Lu HF, Yang JS, Lee JH, Chung JG.
Journal: Anticancer Res (2007): 395

Direct control of cell cycle gene expression by proto-oncogene product ACTR, and its autoregulation underlies its transforming activity
Authors: Louie MC, Revenko AS, Zou JX, Yao J, Chen HW.
Journal: Mol Cell Biol (2006): 3810

Cell cycle markers for live cell analyses
Authors: Easwaran HP, Leonhardt H, Cardoso MC.
Journal: Cell Cycle (2005): 453

Dynamic relocalization of hOGG1 during the cell cycle is disrupted in cells harbouring the hOGG1-Cys326 polymorphic variant
Authors: Luna L, Rolseth V, Hildrestr and GA, Otterlei M, Dantzer F, Bjoras M, Seeberg E.
Journal: Nucleic Acids Res (2005): 1813

Dynamics of relative chromosome position during the cell cycle
Authors: Essers J, van Cappellen WA, Theil AF, van Drunen E, Jaspers NG, Hoeijmakers JH, Wyman C, Vermeulen W, Kanaar R.
Journal: Mol Biol Cell (2005): 769

Cell cycle regulation of the murine 8-oxoguanine DNA glycosylase (mOGG1): mOGG1 associates with microtubules during interphase and mitosis
Authors: Conlon KA, Zharkov DO, Berrios M.
Journal: DNA Repair (Amst) (2004): 1601

Description of a flow cytometry approach based on SYBR-14 staining for the assessment of DNA content, cell cycle analysis, and sorting of living normal and neoplastic cells
Authors: Nunez R, Garay N, Villafane C, Bruno A, Lindgren V.
Journal: Exp Mol Pathol (2004): 29

Differential roles of STAT1alpha and STAT1beta in fludarabine-induced cell cycle arrest and apoptosis in human B cells
Authors: Baran-Marszak F, Feuillard J, Najjar I, Le Clorennec C, Bechet JM, Dusanter-Fourt I, Bornkamm GW, Raphael M, Fagard R.
Journal: Blood (2004): 2475

说明书
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Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光 货号22846-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒 三色荧光

Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒  三色荧光     货号22846 货号 22846 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 6564
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具,可以使用多种参数。该特定试剂盒旨在同时检测凋亡,坏死和健康细胞。细胞凋亡是一种主动的程序化的细胞自发解体过程,可避免引起炎症。在凋亡中,磷脂酰丝氨酸(PS)被转移到质膜的外部小叶。作为细胞凋亡初始/中间阶段的通用指标,在观察形态变化之前,可以检测到磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现。 PS指示剂Annexin V-iFluor 488共轭物与膜PS结合后具有绿色荧光。膜不透性的Nuclear Blue DCS1(Ex / Em = 350/461 nm)标记细胞核的能力证明,质膜完整性的丧失代表了显示凋亡和坏死晚期的直接方法。此外,该试剂盒还提供了活细胞标记染料Cellbrite Red(Ex / Em = 613/631 nm),用于标记非凋亡健康细胞。该试剂盒经过优化,可通过荧光显微镜同时检测细胞凋亡(绿色),坏死(蓝色和/或绿色)和健康细胞(红色)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 细胞凋亡和细胞坏死检测试剂盒。

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 494 nm (凋亡) / 350 nm (坏死) / 613 nm (活)
发射: 520 nm (凋亡) / 461 nm (坏死) / 631 nm (活)
推荐孔板: 黑色透明
通道: FITC滤波片 (凋亡) / DAPI滤波片(坏死) / Cy5滤波片 (活)

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞
  2. 加入三重荧光工作溶液(100 µL /样品)
  3. 在室温或37℃下孵育30-60分钟
  4. 用荧光显微镜在FITC通道(凋亡),DAPI通道(坏死)或Texas Red / Cy5通道(健康细胞)处进行分析

 

溶液配制

工作溶液配制

将10 µL的100X Annexin V-iFluor 488偶联物(组分A),5 µL的200X Nuclear Blue DCS1(组分C)和5 µL的200X Cellbrite Red(组分D)添加到1 mL的测定缓冲液(组分B)中 )。 三重荧光测定溶液在室温下稳定至少1小时。 注意:由于最佳染色条件可能会因细胞类型而异,因此建议分别确定组分A,C和D的适当浓度。

 

实验步骤

1.处理后除去细胞培养基并检测化合物。

2.加入100 µL /孔(96孔板)或50 µL /孔(384孔板)的三重荧光分析溶液。 在避光条件下,于37℃孵育30至60分钟。

3.用HBSS,PBS或自备缓冲液洗涤细胞两次。

4.在带有FITC滤光片的荧光显微镜下,用Annexin V-iFluor 488偶联物分析凋亡细胞。 质膜上的绿色染色(Ex / Em = 494/520 nm)表明膜联蛋白V-iFluor 488缀合物与细胞表面的PS结合。 使用荧光显微镜用DAPI滤光片(Ex / Em = 350/461 nm)检测坏死的荧光强度,使用Texas Red或Cy5滤光片(Ex / Em = 613/631 nm)检测活细胞的荧光强度。

 

参考文献

Anthocyanin-rich blackcurrant extract inhibits proliferation of the MCF10A healthy human breast epithelial cell line through induction of G0/G1 arrest and apoptosis
Authors: Nanashima, Naoki and Horie, Kayo and Chiba, Mitsuru and Nakano, Manabu and Maeda, Hayato and Nakamura, Toshiya
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 6134–6141

Clusterin signals via ApoER2/VLDLR and induces meiosis of male germ cells
Authors: Riaz, Muhammad Assad and Stammler, Angelika and Borgers, Mareike and Konrad, Lutz
Journal: American Journal of Translational Research (2017): 1266

Detecting Apoptosis, Autophagy, and Necrosis
Authors: Coleman, Jack and Liu, Rui and Wang, Kathy and Kumar, Arun
Journal: Apoptosis Methods in Toxicology (2016): 77–92

A pharmaceutical preparation of Salvia miltiorrhiza protects cardiac myocytes from tumor necrosis factor-induced apoptosis and reduces angiotensin II-stimulated collagen synthesis in fibroblasts
Authors: Ling S, Luo R, Dai A, Guo Z, Guo R, Komesaroff PA.
Journal: Phytomedicine (2009): 56

Agmatine protects cultured retinal ganglion cells from tumor necrosis factor-alpha-induced apoptosis
Authors: Hong S, Kim CY, Lee JE, Seong GJ.
Journal: Life Sci (2009): 28

Concurrent induction of necrosis, apoptosis, and autophagy in ischemic preconditioned human livers formerly treated by chemotherapy
Authors: Domart MC, Esposti DD, Sebagh M, Olaya N, Harper F, Pierron G, Franc B, Tanabe KK, Debuire B, Azoulay D, Brenner C, Lemoine A.
Journal: J Hepatol (2009): 881

Down-regulation of myeloid cell leukemia 1 by epigallocatechin-3-gallate sensitizes rheumatoid arthritis synovial fibroblasts to tumor necrosis factor alpha-induced apoptosis
Authors: Ahmed S, Silverman MD, Marotte H, Kwan K, Matuszczak N, Koch AE.
Journal: Arthritis Rheum (2009): 1282

Exaggerated up-regulation of tumor necrosis factor alpha-dependent apoptosis in the older mouse liver following reperfusion injury: targeting liver protective strategies to patient age
Authors: Selzner M, Selzner N, Chen L, Borozan I, Sun J, Xue-Zhong M, Zhang J, McGilvray ID.
Journal: Liver Transpl (2009): 1594

Increased apoptosis in HepG2.2.15 cells with hepatitis B virus expression by synergistic induction of interferon-gamma and tumour necrosis factor-alpha
Authors: Shi H, Guan SH.
Journal: Liver Int (2009): 349

Outside-to-inside signaling through transmembrane tumor necrosis factor reverses pathologic interleukin-1beta production and deficient apoptosis of rheumatoid arthritis monocytes
Authors: Meusch U, Rossol M, Baerwald C, Hauschildt S, Wagner U.
Journal: Arthritis Rheum (2009): 2612

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Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光 货号22849-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒 绿色荧光     货号22849 货号 22849 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 50 Tests 价格 3924
Ex (nm) 498 Em (nm) 522
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

DNA片段化代表晚期细胞凋亡的特征。凋亡细胞中的DNA断裂可以通过末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测。 TUNEL测定法依赖于DNA中存在的缺口,该缺口可通过TdT进行鉴定,TdT是一种酶,该酶催化添加标记物的dUTP。现有的所有TUNEL分析均包含剧毒的甲胂酸钠,这可能会诱导细胞凋亡并降低DNA的产生和DNA链。我们的Cell Meter TUNEL细胞凋亡测定试剂盒使用了不含甲胂酸钠的专有缓冲系统。该试剂盒基于将我们专有的荧光染料掺入凋亡过程中形成的DNA片段中。该测定法经过优化,可直接检测分离的或贴壁细胞中的细胞凋亡,而无需使用任何抗体。该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。适用于荧光酶标仪,荧光显微镜或流式细胞仪。在流行的FITC通道上可以轻松检测到其信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter TUNEL凋亡检测试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC滤波片
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片
发射: FITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物准备细胞。
  2. 与TUNEL工作溶液在37°C下孵育30分钟至1小时。
  3. 洗涤细胞。
  4. 用4%甲醛(可选)固定细胞。
  5. 用带FITC滤光片的荧光显微镜或带FITC通道的流式细胞仪。读取Ex / Em = 490/525 nm(截止= 515 nm)处的荧光强度。

 

溶液配制 

工作溶液配制

将0.5μL的100X Tunnelyte Green(组分A)添加到50μL的反应缓冲液(组分B)中,使总体积为50.5μL的TUNEL工作溶液。 避光。 注意:应单独评估每个细胞系,以确定最佳细胞密度。

 

实验步骤

1.根据您的特定协议,将细胞培养至最佳密度以诱导凋亡。 对于在96孔板培养物中生长的贴壁细胞,我们建议大约30,000至50,000个细胞/孔,对于非贴壁细胞,建议大约1至2 x 106细胞/ mL。 同时,在每种标记条件下,用诱导群体相同的密度培养非诱导阴性对照细胞群体。 注意:我们用100 nM-1 µM星形孢菌素处理HeLa细胞4小时,以诱导细胞凋亡。

2.染色和固色:

2.1取出细胞培养基。
2.2向每个样品中添加50µL TUNEL工作溶液。
2.3在37°C下孵育30-60分钟。
2.4除去TUNEL工作溶液,并用200 µL /孔的PBS洗涤细胞1-2次。
2.5向每个样品中添加100uL反应缓冲液(组分B)。
2.6使用Ex / Em = 490/525 nm(cut off= 515 nm)的荧光酶标仪,带有FITC滤光片组的荧光显微镜或带有FITC通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.7可选:从步骤5中移出反应缓冲液,并向每个孔中添加100 µL /孔/ 96孔板的4%甲醛固定缓冲液(未提供)。注意:对于非贴壁细胞,请添加所需量(例如2X106细胞/ mL)的4%甲醛固定液。
2.8在室温下将平板孵育20至30分钟。
2.9去除固定剂。
2.10用PBS洗涤细胞2-3次,并用100µL PBS /孔/ 96孔板替换。
2.11使用Ex / Em = 490/525 nm(cut off= 515 nm)的荧光酶标仪,带有FITC滤光片组的荧光显微镜或带有FITC通道的流式细胞仪检测荧光强度。
2.12可选:用1X Hoechst(组分C)在Ex / Em = 350/460 nm处染色细胞核,以进行图像分析

 

参考文献

Vaccarin alleviates hypertension and nephropathy in renovascular hypertensive rats
Authors: Cai, Weiwei and Zhang, Zhenpeng and Huang, Yiqi and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Experimental and Therapeutic Medicine (2018): 924–932

CO-releasing molecules-2 attenuates ox-LDL-induced injury in HUVECs by ameliorating mitochondrial function and inhibiting Wnt/β-catenin pathway
Authors: Sun, Hai-Jian and Xu, Dong-Yan and Sun, Yi-Xin and Xue, Tong and Zhang, Chen-Xing and Zhang, Zhi-Xuan and Lin, Wei and Li, Ke-Xue
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Salusin-β mediates high glucose-induced endothelial injury via disruption of AMPK signaling pathway
Authors: Zhu, Xuexue and Zhou, Yuetao and Cai, Weiwei and Sun, Haijian and Qiu, Liying
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017)

Vaccarin protects human microvascular endothelial cells from apoptosis via attenuation of HDAC1 and oxidative stress
Authors: Zhu, Xuexue and Lei, Yueyue and Tan, Fanggen and Gong, Leilei and Gong, Haifeng and Yang, Wei and Chen, Ting and Zhang, Zhixuan and Cai, Weiwei and Hou, Bao and others
Journal: European Journal of Pharmacology (2017)

Axl is required for TGF-β2-induced dormancy of prostate cancer cells in the bone marrow
Authors: Yumoto, Kenji and Eber, Matthew R and Wang, Jingcheng and Cackowski, Frank C and Decker, Ann M and Lee, Eunsohl and Nobre, Ana Rita and Aguirre-Ghiso, Julio A and Jung, Younghun and Taichman, Russell S
Journal: Scientific Reports (2016)

Growth Arrest-Specific 6 (GAS6) Promotes Prostate Cancer Survival by G1 Arrest/S Phase Delay and Inhibition of Apoptotic Pathway During Chemotherapy in Bone Marrow
Authors: Lee, Eunsohl and Decker, Ann M and Cackowski, Frank C and Kana, Lulia A and Yumoto, Kenji and Jung, Younghun and Wang, Jingcheng and Buttitta, Laura and Morgan, Todd M and Taichman, Russell S
Journal: Journal of cellular biochemistry (2016)

RFX1–dependent activation of SHP-1 induces autophagy by a novel obatoclax derivative in hepatocellular carcinoma cells
Authors: Su, Jung-Chen and Tseng, Ping-Hui and Hsu, Cheng-Yi and Tai, Wei-Tien and Huang, Jui-Wen and Ko, Ching-Huai and Lin, Mai-Wei and Liu, Chun-Yu and Chen, Kuen-Feng and Shiau, Chung-Wai
Journal: Oncotarget (2014): 4909

In situ detection of apoptosis by the TUNEL assay: an overview of techniques
Authors: Loo DT.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 3

Testicular apoptosis after dietary zinc deficiency: ultrastructural and TUNEL studies
Authors: Kumari D, Nair N, Bedwal RS.
Journal: Syst Biol Reprod Med (2011): 233

In situ localization of apoptosis using TUNEL
Authors: Hewitson TD, Darby IA.
Journal: Methods Mol Biol (2010): 161

说明书
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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22904-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪      货号22904 货号 22904 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 490 Em (nm) 520
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

活性氧(ROS)是氧正常代谢的天然副产物,在细胞信号传导中起重要作用。但是,在与氧化应激相关的状态下,ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病,糖尿病,骨质疏松症,中风,炎性疾病,许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS检测将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒使用我们独特的Amplite ROS Green荧光定量活细胞中的ROS,Amplite ROS Green具有细胞渗透性。与ROS反应时会生成绿色荧光。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法,可在培养一小时后检测活细胞中的细胞内ROS。该试剂盒针对流式细胞仪应用进行了优化,其信号可以通过Ex / Em = 490/520 nm(FL1通道)进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。 

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道: FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备密度为0.5-1×106细胞/ mL的细胞
2.在0.5 mL细胞悬液中加入1 µL 500X Amplite ROS Green
3.在37℃下将细胞染色1小时
4.处理细胞以诱导ROS
5.使用带有FL1通道的流式细胞仪分析细胞(Ex / Em = 490/520 nm)

 

溶液配制

1.储备溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。

Amplite ROS绿色储备溶液(500X):将100 µL DMSO(组分C)添加到Amplite ROS Green(组分A)的小瓶中,并充分混合以制成500X Amplite ROS Green储备液。 避光。 注意:要存放,请密封管。有关细胞样品制备的指南,请点击查看

 

操作步骤

1.对于每个样品,以0.5×105至1×106细胞/ mL的密度在0.5 mL测定缓冲液(组分B)或自备缓冲液中制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定诱导ROS的最佳细胞密度。

2.将1 µL 500X Amplite ROS Green储备溶液加入0.5 mL细胞悬液中。

3.在37ºC下孵育1小时。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与Amplite ROS Green孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物,优化每个实验的孵育时间。

4.通过在所需的缓冲液(例如PBS或HBSS)中添加50 µL 11X测试化合物来处理细胞。对于对照孔(未处的细胞),添加相应量的缓冲液。

5.将细胞在37ºC下孵育,以诱导ROS(避光)。注意:我们在37℃下用100 µM TBHP(氢过氧化叔丁基)处理Jurkat细胞30分钟,以诱导ROS。有关详细信息,请参见图1。

6.使用具有FL1通道(Ex / Em = 490/520 nm)的流式细胞仪检测荧光强度。

 

图示

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪      货号22904

图1.使用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒在TBHP处理后检测Jurkat细胞中的细胞内ROS。 将细胞与Amplite ROS Green在37°C孵育1小时。 然后将细胞在不使用(蓝色)或(红色)100 µM TBHP的情况下在37°C下处理30分钟。 使用流式细胞仪(BD FACSCalibur)在FL1通道处检测荧光信号。

 

参考文献

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Ma, Jianwei and Hiratsuka, Takahiro and Etoh, Tsuyoshi and Akada, Junko and Fujishima, Hajime and Shiraishi, Norio and Yamaoka, Yoshio and Inomata, Masafumi
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Fan, Chunlan and Qiao, Yuan and Tang, Minke
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: Zhang, J and Shi, HS and Liu, JQ and Yu, T and Shen, ZH and Ye, JD
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Patrick, Ping and Price, Tulin O and Diogo, Ana L and Sheibani, Nader and Banks, William A and Shah, Gul N
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Lakshmi, Sowmya P and Reddy, Aravind T and Zhang, Yingze and Sciurba, Frank C and Mallampalli, Rama K and Duncan, Steven R and Reddy, Raju C
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kawamura, Kazuyuki and Kuroda, Yukiko and Sogo, Masako and Fujimoto, Miki and Inui, Toshio and Mitsui, Takao
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice
Authors: Nomura, Johji and Busso, Nathalie and Ives, Annette and Matsui, Chieko and Tsujimoto, Syunsuke and Shirakura, Takashi and Tamura, Mizuho and Kobayashi, Tsunefumi and So, Alex and er and Yamanaka, Yoshihiro
Journal: Scientific reports (2014): 4554

High glucose-induced mitochondrial respiration and reactive oxygen species in mouse cerebral pericytes is reversed by pharmacological inhibition of mitochondrial carbonic anhydrases: implications for cerebral microvascular disease in diabetes
Authors: Shah, Gul N and Morofuji, Yoichi and Banks, William A and Price, Tulin O
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 354–358

Automatic flow injection based methodologies for determination of scavenging capacity against biologically relevant reactive species of oxygen and nitrogen
Authors: Magalhaes LM, Lucio M, Segundo MA, Reis S, Lima JL.
Journal: Talanta (2009): 1219

Diabetes and the impairment of reproductive function: possible role of mitochondria and reactive oxygen species
Authors: Amaral S, Oliveira PJ, Ramalho-Santos J.
Journal: Curr Diabetes Rev (2008): 46

 

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Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪 Cat#22904

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