DEAE-葡聚糖凝胶 A-25 货号: BN26040

JPAE-葡聚糖凝胶 A-25
JPAE-葡聚糖凝胶 A-25       货号: BN26040JPAE-葡聚糖凝胶 A-25       货号: BN26040JPAE-葡聚糖凝胶 A-25       货号: BN26040

  • 产品货号:
    BN26040
  • 中文名称:
    JPAE-葡聚糖凝胶 A-25
  • 英文名称:
    JPAE Sephadex A-25
  • 品牌:
    Biorigin

  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • BN26040-25g

    25g

    ¥820.00

  • BN26040-100g

    100g

    ¥2760.00

  • BN26040-500g

    500g

    ¥13000.00

产品描述

1 理化指标

                            JPAE-葡聚糖凝胶 A-25       货号: BN26040

                                                                          *HR 10/10 层析柱,5 cm 柱床高度

2 使用方法 

2.1 填料的准备 

     将干粉浸泡于纯水或缓冲液中,液体可以适当多加一些,室温下完全溶胀需 1-2 天,或者用 100℃纯水浸泡大约半个小时。完全溶胀后除去上清液以及上层少许漂浮物,用缓冲液彻底清洗填料。

2.2 装柱 

     (1)所有实验材料均需平衡至色谱层析操作的温度,所有的缓冲液进行脱气处理; 

     (2)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。 

     (3)用去离子水清洗掉 20%乙醇保存液,用缓冲液配成匀浆。 

     (4)将柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位,务必使底端无气泡。 

     (5)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。 

     (6)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填料最大耐压)。

2.3 平衡柱子 

     用上样的平衡缓冲液平衡柱子后即可上样。(当流出液的 pH 和电导值与起始缓冲液相同时层析柱即完全平衡)。

2.4 上样

     样品应溶解在起始平衡缓冲液中,或者通过透析或脱盐的方法进行缓冲液置换,将样品缓冲液转移至起始平衡缓冲液。样品的粘度不应超过平衡缓冲液,上样前必须使用 0.45um 微孔滤膜对样品进行过滤。 

     最常见的程序是让目标分子结合到离子交换柱上,其他杂质流出。然而,在一些情况下,离子交换柱结合杂质而使目标分子流出,这样的操作也是可以的。

     对于目标分子的吸附,选择具有适当 pH 的缓冲液是至关重要的,请参考下表。

     缓冲液的离子强度应保持较低,以免干扰样品结合,推荐的操作 pH 应在缓冲液 pKa 的 0.5 个单位内, 并且和目标分子的等电点(pI)相差至少一个 pH 单位。

                                                         Buffers for anion exchange chromatography

                         JPAE-葡聚糖凝胶 A-25       货号: BN26040

2.5 洗脱

     对于 JPAE 葡聚糖凝胶和 QAE 葡聚糖凝胶填料,一般使用盐浓度递增或 pH 值递减(线性或者阶梯梯 度)的方式来进行洗脱。 

2.6 再生 

     根据样品的性质,通常通过用高离子强度洗脱缓冲液,如 2M NaCl 对柱子进行洗涤,或降低缓冲液pH,然后在平衡缓冲液中重新平衡来进行再生。在一些应用中,诸如变性蛋白质或脂质的物质在再生过 程中洗脱不下来,则需要通过在位清洗程序 CIP 来清除。

2.7 在位清洗(CIP) 

     通过用 5 倍柱床体积的 2M NaCl 溶液来除去结合的蛋白质。 

     通过用 2 倍柱床体积的 0.1M NaOH 溶液清洗填料,随后立即用大量纯水彻底清洗直至中性,从而除去沉淀的蛋白质、疏水结合的蛋白质和脂蛋白。 

3 保存 未使用的填料,请室温密闭保存.使用完的填料,用纯水彻底冲洗,用然后保存在 20%乙醇中,4℃保存,不能冷冻。 

4 注意事项 

     (1)上样之前,样品必须经过膜过滤及去除色素,否则杂质及色素会被吸附到填料上,影响填料的 正常使用。所有的缓冲液均需要用 0.45um 的过滤器过滤。 

     (2)在使用过程中,避免使用高浓度的强酸强碱,酸和碱的浓度应低于 0.1 摩尔。碱会使流速变慢。 

     (3)不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行。 

     (4)离子交换介质在选择层析柱时,避免使用细长柱,会增加实验操作压力。

5 产品订购相关信息

                     JPAE-葡聚糖凝胶 A-25       货号: BN26040

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