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简要概述
产品基本信息
货号：214
产品名称：6-NED琥珀酰亚胺酯
规格：1 mg
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：12个月
产品物理化学光谱特性
分子量：417.44
外观：固体
溶剂：DMSO
Ex(nm):336
Em(nm):455
产品介绍
EDANS是开发基于FRET的核酸探针（例如分子信标）和蛋白酶底物的受欢迎的供体者之一。在基于FRET的探针中，EDANS通常与DABCYL或DABSYL配对。它的荧光对环境敏感。EDANS C5马来酰亚胺是硫醇反应性的EDANS衍生物。它是水溶性的，并且具有与EDANS相同的光谱特性。
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简要概述
产品基本信息
货号：2404
产品名称：BXQ-1马来酰亚胺
规格：1mg
储存条件：保存在冰箱-15℃干燥
保质期：12个月
产品物理化学光谱特性
分子量：626.67
溶剂：DMSO
吸收（nm）:522
产品介绍
Black Hole Quencher 染料（BHQ®）是非荧光染料，主要用于制备FRET寡核苷酸（Black Hole Quencher 和BHQ®是Biosearch的商标）。它们几乎是无荧光的，具有中等的消光系数。这些暗猝灭剂 常用于分子信标探针，其中FRET对它们的荧光猝灭贡献 小，因此，对供体-受体光谱重叠的依赖性与其他FRET探针（如FRET肽）无关。BHQ染料可以淬灭各种荧光团，特别是荧光素衍生物，例如FAM，HEX，TET，NED和JOE。这可能反映出BHQ与荧光团形成稳定的非荧光络合物的能力。BXQ-1在化学上等同于BHQ-1。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的BXQ-1马来酰亚胺。
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简要概述
产品基本信息
货号：280
产品名称：Cy5,NHS酯,钾盐
规格：1mg
储存条件：-15℃干燥
保质期：12个月
产品物理化学光谱特性
分子量：791.97
外观：蓝色固体
溶剂：DMSO
激发波长(nm)：649
发射波长(nm)：665
产品介绍
Cy5 NHS酯,钾盐是美国AAT Bioquest生产的Cy系列染料，这种Cy5®染料与GE的单反应性Cy5®NHS酯相同。它容易与氨基反应。我们的Cy5®Fluor经过全面QC测试，可确保高水平的发色团和活性染料含量。单活性染料适用于蛋白质和寡核苷酸的靶向，精确标记，双活性染料更适合于一般标记。建议使用NHS酯染料标记胺基，建议使用马来酰亚胺染料标记硫醇基团。各种花青5（Cy5®）染料已用于标记生物分子，用于荧光成像和其他基于荧光的生化分析。它们广泛用于标记肽，蛋白质和寡核苷酸等.Cy5®染料是 常见的红色荧光团中的一种。这些多功能荧光团可以耐受3-10的pH范围，用于生物相关pH的各种应用。该染料还具有DMSO耐受性和光稳定性，能够在不损失性能的情况下从储存转移至分析。水溶性消除了在分析缓冲液中对有机溶剂的需要。 Cy5®是GE Healthcare的商标。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cy5 NHS酯,钾盐。
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| 货号 | 241 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 5 mg | ||
| Ex (nm) | 533 | Em (nm) | 559 |
| 分子量 | 620.05 | 溶剂 | DMSO |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
产品基本信息
货号：241
产品名称：6-HEX炔烃
规格：5mg
储存条件：-15℃干燥
保质期：12个月
产品物理化学光谱特性
分子量：620.05
溶剂：DMSO
激发波长(nm)：533
发射波长(nm)：550
产品介绍
6-HEX炔烃是美国AAT Bioquest生产的荧光染料，6-HEX广泛用于核酸测序和相关研究。 6-HEX炔烃通过众所周知的点击化学提供了标记叠氮化物修饰的寡核苷酸的便利方法。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的6-HEX炔烃。
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产品基本信息
简要概述
货号：359
产品名称：6-羧基四甲基罗丹明
规格：5mg
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：12个月
产品物理化学光谱特性
分子量：700.58
溶剂：DMSO
激发波长（nm）：544
发射波长（nm）：575
产品介绍
6-羧基四甲基罗丹明是美国AAT Bioquest生产的罗丹明染料。6-羧基四甲基罗丹明是产生TAMRA生物偶联物的基础，TAMRA是使用的多种生物偶联物种受欢迎的具有明亮橙色荧光的生物共轭物之一。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的6-羧基四甲基罗丹明。
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简要概述
固定介质是通常在盖玻片下嵌入样品的溶液。像水或甘油这样的简单液体也可以被视为固定介质。好的固定介质的特性包括：与样品无反应性，随时间变化而不会结晶，变暗或改变折射率的稳定性，在样品所制备的介质中的溶解度，以及不会导致样品污渍褪色或浸出的特性。我们所有的ReadiUse 试剂都需要 少的动手时间。
产品说明书
操作步骤
1.预热安装溶液：从冰箱中取出安装溶液。 将小瓶加热至室温，避光。
2.施加安装溶液：清除样品中多余的液体。 向样品中加入一滴固定溶液。 如果样品在载玻片或组织培养皿上，请小心地将盖玻片放在液滴上，以免产生气泡。 如果样品在盖玻片上，请将盖玻片倒在干净的玻璃载玻片上。 去除多余的防褪色成分。
3.准备用于成像的样品：固定溶液应孵育2小时至过夜。 要长期保存，请用指甲油或塑料密封剂将盖玻片密封在玻片上。 已安装的载玻片应在黑暗中于4ºC存放，以实现的样品寿命。 荧光成像将保持稳定数周。 样品可以在安装后立即成像。
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简要概述
具有DAPI的FluoroQuest 是一种水性固定介质，用于保留组织和细胞涂片的荧光。这种封固剂含有抗褪色剂以降低染料的光漂白速率，并以DAPI强化，DAPI是DNA的复染剂。用于原位杂交技术或需要荧光法进行DNA染色的其他方法。DAPI在360 nm处激发并在460 nm处发射，产生蓝色荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的FluoroQuest 防褪色固定介质。
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产品说明书
样品实验方案
以下是我们推荐的方案，仅提供指导。具体实验应根据您的特定需求进行修改。
预热溶液：从冰箱中取出安装溶液。将瓶子加热至室温，避光。
添加溶液：清除样品中多余的液体。向样品中加一滴固定溶液。如果样品在载玻片或组织培养皿上，请小心地将盖玻片放在液滴上，以免产生气泡。如果样品在盖玻片上，请将盖玻片倒在干净的玻璃载玻片上。去除多余的防褪色成分。
准备用于成像的样品：固定溶液应孵育2小时至过夜。要长期存放，请用指甲油或塑料密封剂将盖玻片密封在玻片上。已安装的载玻片应在黑暗中于4°C存放，荧光成像将保持稳定数周，样品可以在安装后立即成像。
图示
图1. 甲醛固定，石蜡包埋的人肺腺癌阳性组织的荧光IHC 。用兔抗EpCam抗体对人肺腺癌阳性组织切片进行染色，然后分别与iFluor 488 Styramide （Cat＃45020）染色的聚HRP标记的羊抗兔IgG二抗一起孵育。将组织固定在带有DAPI（Cat#20005）的FluoroQuest 抗褪色固定介质中。
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简要概述
Cyber Green 染料是美国AAT Bioquest生产的一种绿色荧光核酸染料，具有使染料可用于多种应用的功能，包括qPCR，熔解曲线分析，嗜热解旋酶依赖性扩增（tHDA）的实时监测，常规溶液DNA定量和结晶染料的激发和发射光谱与荧光素（FAM）或SYBR®GreenI的激发和发射光谱非常接近，使染料与配备488 nm氩激光器或任何可见光激发波长的仪器兼容。 Green 染料在热和水解方面都非常稳定，在日常处理过程中提供了便利。染料本身基本上是非荧光的，但在与dsDNA结合后变得高度荧光.Cyber Green 染料的独特性质使其在定量实时PCR（qPCR）应用中特别有用。与广泛使用的SYBR Green I相比，Cyber Green 对PCR的抑制作用较小，不太可能引起非特异性扩增。因此，Cyber Green 可以比SYBR Green我高得多的染料浓度使用，从而产生更强大的PCR信号。更重要的是，定量PCR允许的较高的CYber Green 浓度消除了“染料再分布”问题，这可能在PCR后DNA融解曲线分析期间与SYBR Green一起发生。
Cyber Green 20X水溶液专为qPCR使用而配制。可以使用现有的SYBR Green I或FAM光学设置在任何商业实时PCR循环仪上监测PCR反应。下面提供的qPCR协议用于使用常规非热启动Taq的PCR。使用热启动Taq可能需要在离子强度和pH方面对PCR缓冲液组成进行一些调整，以利用Cyber Green 。例如，化学修饰的Taq，例如AmpliTaq Gold，可能更喜欢不含KCl的和较高的的Tris浓度（高达50mM的）。此外，经常加入水溶性溶剂如DMSO或甘油以稳定主混合物。可能需要根据所用的酶优化这些组分和pH值。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cyber Green 核酸凝胶染料。
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产品说明书
染色方案
建议将以下方案用于非热启动Taq酶。
1.设置PCR反应如下：
5μL不含Mg+2的10倍的聚合酶缓冲液
2.5μL50mMMgCl2
每种5mM的2mM dNTP
2.5μL20XCyber Green
1-5单位的Taq DNA聚合酶
每种引物0.1-1μM（ 终浓度）
双蒸水至终体积为50μL。
2.在热循环荧光计上进行实时PCR，并在退火或延伸步骤记录荧光信号。
注意：使用ABI序列检测系统时，请确保在WELL INSPECTOR选项卡下为被动参考选择NONE。
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级别 :
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超纯、高纯
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含量 :
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95%
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产品规格 :
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1mg
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CAS :
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11016-15-2
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品牌 :
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AAT Bioquest
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用途范围 :
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AAT Bioquest生产的荧光染料
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特色服务 :
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包邮
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简要概述
产品基本信息
分子量：~264,000
Ex(nm):616
Ex(nm):647
荧光量子产率（QY）：0.81
产品介绍
藻胆蛋白[包括B-藻红蛋白（B-PE），R-藻红蛋白（R-PE）和别藻蓝蛋白（APC）]是用于生物学检测的超灵敏荧光染料。 它们比传统的有机荧光团灵敏度高100倍。 即使在诸如流式细胞术和免疫测定的实际应用中，藻胆蛋白缀合的抗体的灵敏度通常远大于相应的基于有机分子的缀合物的灵敏度。 Phycobiliproteins是亮的荧光标签，具有多个位点，可与许多生物和合成材料形成稳定的结合。
藻红蛋白（B-PE）具有三个吸收带，在545nm处具有大吸收。 B-PE的亚基结构类似于R-PE，但亚基的发色团含量不同，导致吸收峰的相对强度不同：α和β亚基仅含有PEB，而γ亚基含有PEB和PUB。 B-PE存在于蓝细菌和红藻中。 B-PE的强烈粉红色和橙色荧光几乎与肉眼无法区分的R-PE。别藻蓝蛋白在主要的藻胆蛋白中是不稳定的，在低浓度下易于解离，包括进行某些测定的浓度。 出于这个原因，许多研究人员更喜欢使用在α和β亚基之间化学交联的CL-APC，并且比APC更稳定。
藻红蛋白（R-PE）从红藻中分离。其主要吸收峰位于565nm，第二峰位于496nm和545nm。 次生峰的相对突出性在来自不同物种的R-PE之间显着不同。R-PE具有三种类型的亚基：α（~20,000道尔顿），β（~20,000道尔顿）和γ（~30,000道尔顿）。已发现完整R-PE的分子量为约240,000道尔顿，并且已确定（αβ）6γ的亚基结构。R-PE的α亚基仅含有藻红蛋白（PEB）发色团，而β和γ亚基含有PEB和藻蓝蛋白（PUB）。来自不同物种的R-PE的吸收光谱的可变性反映了亚基的PEB / PUB比率的差异。R-PE和密切相关的B-PE是强荧光的藻胆蛋白，其量子效率可能超过90％，并且在任何中等浓度的溶液中，其橙色荧光很容易被肉眼看到。
C-藻蓝蛋白（C-PC）在许多蓝细菌中作为主要的藻胆蛋白发生，在一些红藻中作为次生的藻胆蛋白发生。该颜料在615和620nm之间具有单个可见吸收大值，在~650nm处具有大荧光发射。其分子量在70,000至110,000道尔顿之间。颜料由两个亚基α和β组成，它们以相同的数量出现，但构成分子的α和β对的确切数目可能因物种而异。α和β亚基都仅含有PCB发色团。 除了直接吸收光之外，这种强烈的蓝色颜料通过荧光能量转移接受来自藻红蛋白的量子，其中存在PE的生物体。C-PC的红色荧光转移到别藻蓝蛋白。AAT Bioquest研发的RPE、APC试剂及试剂盒被国内外科研人员灵活运用，达到不俗的科研成果。
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| 货号 | 2301 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 1 mg | ||
| Ex (nm) | 577 | Em (nm) | 601 |
| 分子量 | 599.72 | 溶剂 | DMSO |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
Tide Fluor 4炔烃是美国AAT Bioquest生产的Tide Fluor系列染料，TF4被设计为ROX和TexasRed®的优异荧光团替代品。TF4有（a）荧光强度更强; （b）更高的共轭产量; （c）保质期更长。此外，它们的荧光与pH值无关，从pH 3到11.这些特性使这种新型染料系列成为ROX和TexasRed®的优质替代品。在与我们的Tide Quencher 4（TQ4）配对时，可以开发多种FRET肽和核苷酸，用于检测具有增强的灵敏度和稳定性的蛋白酶和分子信标。该TF4产品对叠氮化物具有反应性，可用于点击化学。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Tide Fluor 4炔烃。
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简要概述
产品基本信息
货号：22009
产品名称：钙橙素双乙酸盐
规格：1mg
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：24个月
产品物理化学光谱特性
分子量：877.24
溶剂：DMSO
激发波长(nm)：525
发射波长(nm)：550
产品介绍
钙橙素双乙酸盐是美国AAT Bioquest生产的细胞活力测定试剂，钙黄绿素AM是流行的荧光探针之一，用于标记和监测活细胞的细胞功能。但是，钙黄绿素AM的单色使得无法在多色应用中使用这种有价值的试剂。例如，由于与GFP相同的颜色，不可能在结合GFP的细胞中使用钙黄绿素AM。为了解决钙黄绿素AM的颜色限制，我们开发了钙黄绿橙 ，钙黄绿 和钙黄绿 。这些新的Calcein AM类似物与Calcein AM结合使用，可以对活细胞进行多色标记和功能分析。AAT Bioquest还提供Calcein Orange 作为Calcein Orange diacetate的参考染料。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的钙橙素双乙酸盐。
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简要概述
产品基本信息
货号：21150
产品名称：钙离子荧光探针腔肠素
规格：250ug
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：24个月
产品物理化学光谱特性
分子量：423.46
溶剂：乙醇
激发波长(nm)：429
发射波长(nm)：466
产品介绍
钙离子荧光探针腔肠素是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，钙测量对于许多生物学研究至关重要。水母发光蛋白复合物包含22kD的载水母发光蛋白，分子氧和发光体腔肠素。水母发光蛋白的生物发光对Ca2 +浓度的大约三次方依赖性，可以在〜0.1 µM至> 100 µM的宽检测范围内测量Ca2 +浓度。与荧光Ca2 +指示剂不同，可以检测Ca2 +结合的水母发光蛋白而无需照亮样品，从而消除了自发荧光的干扰。天然腔肠素及其衍生物赋予水母发光蛋白复合物不同的Ca2 +亲和力和光谱性质。据报道，用腔肠素hcp重组的重组载脂蛋白水泡蛋白总体上具有好的发光，同时具有高量子产率和快速响应时间。但是，腔肠素类似物在细胞内重建水母发光蛋白可能相对较慢。含有腔肠素的cp，f或h形式的水母发光蛋白显示的发光强度是用天然腔肠素重构的脱辅基水母发光蛋白的发光强度的10-20倍。腔肠素h和cp已用于GPCR的HTS筛选测定中。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针腔肠素。
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简要概述
Readilink™蛋白标记技术是制备用于荧光成像和流式细胞仪应用的荧光抗体缀合物的强大，方便的工具之一。ReadiLink™AF750抗体快速标记试剂盒为制造AlexaFluor®750标记的抗体缀合物提供了便捷的工具（AlexaFluor®是ThermoFisher Scientific的商标）。此ReadiLink™试剂盒中使用的AF750染料相当稳定，并且对蛋白质氨基具有良好的反应性和选择性。该试剂盒具有用于标记〜2×50 ug抗体的所有基本组分。试剂盒中提供的两个AF750染料小瓶中的每一个均经过优化，可标记约50 µg抗体。制备的AF750缀合物（与试剂盒一起使用）无需进一步纯化即可直接用于荧光成像和流式细胞术。它提供了制备AF750标记抗体的便捷方法。
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产品说明书
样品分析方案
工作溶液配制
蛋白质工作溶液（溶液A）
为了标记50 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将5 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与50 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：如果蛋白质浓度不同，请相应地调整蛋白质体积，以使〜50 µg蛋白质可用于标记反应。
注意：要标记100 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将10 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：蛋白质应溶于1X磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.2-7.4；如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，则必须使用1X PBS（pH 7.2-7.4）进行透析，或使用10 kDa的Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜（密理博公司的产品目录UFC501008）去除游离的胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注意：抗体的纯度非常重要。
注意：为获得标记效率，建议 终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。
重要：在打开之前，将所有组分加热并短暂离心小瓶，并在开始缀合之前立即准备所需的溶液。以下方案仅供参考。
操作步骤
进行缀合反应
将蛋白质工作溶液（溶液A）添加到一个小瓶标记染料（AF750-组分A）中，并通过将小瓶涡旋几秒钟将其充分混合。
注意：如果要标记100 µg的蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg的蛋白质分成2 x 50 µg的蛋白质，并使每个50 µg的蛋白质与一小瓶的标记染料反应。然后合并两个小瓶，用于下一步。
将缀合反应混合物在室温下放置30-60分钟。
注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。
停止缀合反应
将5 µL（对于50 µg蛋白质）或10 µL（对于100 µg蛋白质）添加到结合反应混合物中，占TQ™染色猝灭缓冲液（组分C）总反应体积的10％；混合均匀。
在室温下孵育10分钟。标记的蛋白（抗体）现在可以使用了。
蛋白质结合物的储存
蛋白质缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间，可以将蛋白质结合物冻干或分成单份使用，并存储在≤–20°C下。
图示
图1.HeLa细胞的免疫荧光分析，先用ReadiLink™快速AF750抗体标记试剂盒（＃1279）制备，然后用或不用小鼠抗微管蛋白染色，然后用Alpha Fluor™750山羊抗小鼠IgG缀合物染色。
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细胞膜荧光探针DiD标记液
简要概述
细胞膜荧光探针DiD标记液是美国AAT Bioquest生产的用于细胞膜检测的荧光探针，DiA，DiI，DiO，DiD和DiR染料是用于标记细胞膜和其他疏水结构的亲脂性荧光染料家族。当掺入膜中或与亲脂性生物分子如蛋白质结合时，这些对环境敏感的染料的荧光大大增强，尽管它们在水中是弱荧光的。它们具有高消光系数，极性依赖性荧光和短激发态寿命。一旦应用于细胞，这些染料在细胞质膜内横向扩散，导致整个细胞以其浓度均匀染色。 DiI（橙色荧光），DiO（绿色荧光），DiD（红色荧光）和DiR（深红色荧光）的独特荧光颜色为活细胞的多色成像和流式细胞分析提供了便利的工具。 DiO和DiI可分别与标准FITC和TRITC过滤器一起使用。其中DiD受633 nm He-Ne激光器的激发，并且具有比DiI更长的激发和发射波长，为标记具有显着内在荧光的细胞和组织提供了有价值的替代方案。 DiR可能对体内成像或追踪有用，因为红外光通过细胞和组织的有效传播和低水平的红外线范围内的自发荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的细胞膜荧光探针DiD标记液。
产品说明书
操作方法
1.准备DiO，DiI，DiD，DiS或DiR膜染色溶液：
1.1制备DMSO或EtOH储备溶液：储备溶液应在DMSO或EtOH中以1-5mM制备。
注意：储备溶液的未使用部分应储存在-20 ℃。 避免反复冻/融循环。
1.2准备工作溶液：将储备溶液（步骤1.1）稀释到合适的缓冲液中，如无血清培养基，HBSS或PBS制备1至5μM的工作溶液。
注意：对于不同的细胞类型和/或实验条件，应根据经验确定工作溶液的 终浓度。 建议在至少超过十倍范围的浓度下进行测试。
2.将细胞染成悬浮液：
2.1在染料工作溶液中悬浮细胞密度为1×106 / mL（来自步骤1.2）。
2.2在37°C孵育2-20分钟。 孵育时间取决于细胞类型。 首先孵育20分钟，然后根据需要进行优化以获得均匀的标记。
2.3将标记的悬浮管以1000至1500rpm离心5分钟。
2.4取出上清液，轻轻地将细胞重新悬浮在预热（37°C）的生长培养基中。
2.5按步骤2.3和2.4洗涤两次。
3.染色贴壁细胞：
3.1在无菌玻璃盖玻片上培养贴壁细胞。
3.2从生长培养基中取出盖玻片，轻轻地排出多余的培养基。 将盖玻片放在湿度箱中。
3.3将100μL染料工作溶液（来自步骤1.2）吸移到盖玻片的角落，轻轻搅拌直至所有细胞都被覆盖。
3.4将盖玻片在37°C孵育2-20分钟。 孵育时间取决于细胞类型。 首先孵育20分钟，然后根据需要进行优化以获得均匀的标记。
3.5排出染料工作溶液，用生长培养基清洗盖玻片2-3次。每个洗涤循环用预热的生长培养基覆盖细胞，孵育5-10分钟后排出培养基。
4.显微镜检测：
4.1说明书中的表1总结了DiD，DiO，DiI，DiS和DiR滤波器组的选择。
4.2为了同时检测多种染料，可提供如下多波段滤波器组：
a）DiI和DiO = Omega XF52，Chroma 51004
b）DiI和DiD = Omega XF92，Chroma 51007
c）DiI，DiO和DiD = Omega XF93，Chroma 61005
5.流式细胞仪检测：
用DiO，DiI，DiD，DiS和DiR标记的细胞可分别使用常规FL1，FL2，FL3和FL4流式细胞仪检测通道进行分析。
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| 货号 | 13472 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 25 Tests | ||
| Ex (nm) | 557 | Em (nm) | 576 |
| 分子量 | 874.01 | 溶剂 | DMSO |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂，SRB-VAD是一种红色荧光细胞渗透性polycaspase抑制剂，可靶向caspase 1,2,3,6,8,9或10.一旦进入细胞内，该抑制剂与活性caspase共价结合，产生绿色荧光。当添加到细胞群中时，SRB-VAD-FMK探针进入每个细胞并共价结合位于活性胱天蛋白酶异二聚体的大亚基上的反应性半胱氨酸残基，从而抑制进一步的酶活性。结合的标记试剂保留在细胞内，而任何未结合的试剂将扩散出细胞并被洗掉。绿色荧光信号是添加试剂时细胞中存在的活性半胱天冬酶量的直接量度。可以通过基于96孔板的荧光测定法，荧光显微术或流式细胞术分析含有结合的标记试剂的细胞。该探针具有与Cy3®和TRITC类似的光谱特性，因此Cy3®和TRITC的滤光片组可以方便地与流式细胞仪或显微镜一起使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)。
点击查看光谱
产品说明书
样品操作及分析
以下协议仅提供指导，应根据您的特定需求进行修改。
使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定
1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。
2.如下准备2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。
3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。
4.使用荧光酶标仪监测荧光，或使用酶标仪监测吸光度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定
1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。
2.根据需要处理细胞。
3.通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）在Hanks中稀释DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X渗透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。
4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合（来自步骤2.3），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。
5.用HHBS清洗细胞至少一次。
6.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。
使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定（仅适用于＃13470-13476）
1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。
2.根据需要处理细胞。
3.以1：250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中（例如2 µL至500 µL细胞），并将细胞在37°C，5％CO2的培养箱中孵育1小时。
4.用HHBS清洗细胞至少一次。
5.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度
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简要概述
Readilink™蛋白标记技术是制备用于荧光成像和流式细胞仪应用的荧光抗体缀合物的强大，方便的工具之一。ReadiLink™AF594抗体快速标记试剂盒为制造AlexaFluor®594标记的抗体缀合物提供了便捷的工具（AlexaFluor®是ThermoFisher Scientific的商标）。此ReadiLink™试剂盒中使用的AF594染料相当稳定，并且对蛋白质氨基具有良好的反应性和选择性。该试剂盒具有用于标记〜2×50 ug抗体的所有基本组分。试剂盒中提供的两个AF594染料小瓶中的每一个均经过优化，可标记约50 µg抗体。制备的AF594缀合物（与试剂盒一起使用）无需进一步纯化即可直接用于荧光成像和流式细胞术。它提供了制备AF594标记抗体的便捷方法。
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产品说明书
样品分析方案
工作溶液配制
蛋白质工作溶液（溶液A）
为了标记50 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将5 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与50 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：如果蛋白质浓度不同，请相应地调整蛋白质体积，以使〜50 µg蛋白质可用于标记反应。
注意：要标记100 µg蛋白质（假设目标蛋白质浓度为1 mg / mL），请将10 µL（反应总体积的10％）反应缓冲液（组分B）与100 µL目标蛋白质溶液混合。
注意：蛋白质应溶于1X磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.2-7.4；如果蛋白质溶解在甘氨酸缓冲液中，则必须使用1X PBS（pH 7.2-7.4）进行透析，或使用10 kDa的Amicon Ultra-0.5，Ultracel-10膜（密理博公司的产品目录UFC501008）去除游离的胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注意：抗体的纯度非常重要。
注意：为获得标记效率，建议 终蛋白质浓度范围为1-2 mg / mL。
重要：在打开之前，将所有组分加热并短暂离心小瓶，并在开始缀合之前立即准备所需的溶液。以下方案仅供参考。
操作步骤
进行缀合反应
将蛋白质工作溶液（溶液A）添加到一个小瓶标记染料（AF594-组分A）中，并通过将小瓶涡旋几秒钟将其充分混合。
注意：如果要标记100 µg的蛋白质，请使用两个小瓶（组分A），将100 µg的蛋白质分成2 x 50 µg的蛋白质，并使每个50 µg的蛋白质与一小瓶的标记染料反应。然后合并两个小瓶，用于下一步。
将缀合反应混合物在室温下放置30-60分钟。
注意：如果需要，可以旋转或摇动缀合反应混合物更长的时间。
停止缀合反应
将5 µL（对于50 µg蛋白质）或10 µL（对于100 µg蛋白质）添加到结合反应混合物中，占TQ™染色猝灭缓冲液（组分C）总反应体积的10％；混合均匀。
在室温下孵育10分钟。标记的蛋白（抗体）现在可以使用了。
蛋白质结合物的储存
蛋白质缀合物应在载体蛋白（例如0.1％牛血清白蛋白）存在下以> 0.5 mg / mL的浓度存储。为了更长的存储时间，可以将蛋白质结合物冻干或分成单份使用，并存储在≤–20°C下。
图示
图1.分别用和不用小鼠抗微管蛋白染色的HeLa细胞，然后用ReadiLink™Rapid AF594抗体标记试剂盒（#1277）制备的Alpha Fluor™594山羊抗小鼠IgG结合物的免疫荧光分析。
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简要概述
Mabtech的经过仔细验证的ELISAPRO试剂盒提供了所有必需的试剂，以方便，可靠，特异的方式方便地定量测定血清，血浆和细胞培养上清液中的分析物。
ELISA测定原理
ELISAPRO试剂盒随附有预先涂有（mAb）。样品中的分析物被包被的mAb捕获，并被生物素化的检测mAb和链霉亲和素-HRP（SA-HRP）检测。
血清和血浆样品分析
ELISAPRO试剂盒包括Apo ELISA缓冲液，一种可防止假阳性信号的缓冲液。缓冲液可阻止嗜异性抗体交联测定抗体。嗜异性抗体通常存在于人血清/血浆中，也可以存在于其他物种中。缓冲液已使用来自健康人类献血者的血清/血浆样品进行了验证。
所需材料
酶标仪可在450 nm读取
ELISA平板清洗器；自动或手动（例如，多移液管或喷射瓶）、精密移液管，吸头和量筒
用于标准和样品稀释的试管
蒸馏水或去离子水
安全信息
Stop溶液0.18 M H2SO4（<1％）对眼睛和皮肤有刺激性，应小心处理。由于不知道暴露的影响，因此应仔细处理该标准。溶液中的缓冲液和试剂含有防腐剂Kathon CG（0.002％），这是一种潜在的过敏原，可能通过皮肤接触引起过敏。人和动物样品应被视为潜在危险的生物材料。所有材料应按照当地法规进行处理。有关更多信息，请查阅我们网站上的《安全数据表》。
制备
在开始测定之前，让板和测定试剂达到室温（TMB底物除外，使用冷底物）。
计划板布局，使其一式两份，包括标准曲线，样品和测定背景对照。每孔的体积不应超过100μl。
产品说明书
样品实验方案
储备溶液配制
1.洗涤缓冲液
将50 ml洗涤缓冲液浓缩液添加到950 ml蒸馏水或去离子水中（足以完成1个板的所有洗涤步骤）。如果在20倍浓缩物中形成了晶体，则将其升至室温并轻轻混合以溶解。
2. Apo ELISA缓冲液
用蒸馏水或去离子水将Apo ELISA缓冲液浓缩液稀释5倍，以制备所需体积的Apo ELISA缓冲液。对于每个板，将30 ml Apo ELISA缓冲液浓缩液添加到120 ml水中。
3.样品
所有样品均应在Apo ELISA缓冲液中稀释至少2倍。除去可见的沉淀物并在聚丙烯管/板中稀释，应在样品之前添加缓冲液。高度溶血和高血脂的样品可能会导致定量结果不准确。为防止不同的LDL粒径干扰，所有血清/血浆来源的样品均应在Triton X-100缓冲液中稀释2倍，然后涡旋振荡5秒钟。Triton X稀释对于细胞系产生的样品不是必需的，并且不会干扰其他载脂蛋白的分析。避免冻融循环，因为它会导致信号降低。
4.人血清/血浆稀释指南
根据对空腹健康受试者的反复分析，我们建议稀释系数为5000X。精确的移液非常重要，在稀释步骤之间更换吸头，并使用新鲜制成的稀释液。试剂的数量足以重复使用。
5. ELISA标准
apoB标准品是由50％甘油稳定的纯化LDL。浓度为125μg/ ml。无需分装标准液，因为高含量的甘油可使标准液保持液态。储存在-20°C。
6.编制标准曲线
如图所示，稀释标准储备溶液以创建标准曲线。试剂的数量足以重复使用。 后一个样品瓶用作测定背景对照，即应省略标准液。在使用30分钟内准备标准曲线。
工作溶液配制
1.检测抗体
使用后15分钟内，将检测抗体在Apo ELISA缓冲液中稀释至1μg/ ml的浓度。对于每个板，在12 ml Apo ELISA缓冲液中稀释12μl检测抗体。
2.链霉亲和素
在使用后的15分钟内，将抗生蛋白链菌素-HRP用抗生蛋白链菌素-HRP稀释剂稀释1000倍。对于每块板，在12 ml的链霉亲和素-HRP稀释液中稀释12μl的链霉亲和素-HRP。
操作步骤
用洗涤缓冲液（300μl/孔）洗涤板5次。 后一次洗涤后，将其倒置并用吸水纸吸水。然后立即进行下一步。
添加样品（至少稀释2倍），标准液和测定背景对照（100μl/孔）。敲击板混合。用粘性板盖覆盖板，并在室温下孵育2小时。
如上所述清洗板。
添加检测抗体（100ul/孔）。盖好板并在室温下孵育1小时。
如上所述清洗板。
加入抗生蛋白链菌素-HRP（100μl/孔）。盖好板并在室温下孵育1小时。
如上所述清洗板。
添加TMB底物（100ul/孔）。在避开直射光的室温下孵育15分钟。
如上所述清洗板。
在15分钟内测量450 nm处的吸光度。如果可能，请使用能够减去570至650 nm参考波长的酶标仪。
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货号 | 45066 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 100 Slides | |||
| Ex (nm) | 756 | Em (nm) | 779 | |
| 分子量 | 1062.40 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
产品基本信息
货号：45066
产品名称：Cy7 Styramide *Cy7 tyramide 的 替代品*
规格：100 Slides
储存条件：保存在冰箱-15℃干燥
保质期：12个月
产品物理化学光谱特性
分子量：1062.40
外观：固体
溶剂：DMSO
激发波长(nm)：756
发射波长(nm)：779
产品介绍
Power Styramide 信号放大 (PSA™) 系统是 灵敏的方法之一，可以检测细胞和组织中极低丰度的目标，其荧光信号比使用的酪胺 (TSA) 试剂高 10-50 倍。iFluor 染料标记的 Styramide 缀合物可以产生比标准 ICC/ IF/IHC 更高精确度和灵敏度（超过 100 倍）的荧光信号。 PSA 利用辣根过氧化物酶 (HRP) 的催化活性原位共价沉积荧光团。 PSA 自由基比酪胺自由基具有更高的反应性，这使得 PSA 系统比传统 TSA 试剂更快、更稳定、更灵敏。与酪胺试剂相比，Styramide 缀合物能够以更高的效率标记目标，从而产生明显更高的荧光信号。与标准直接之二号位方法或具有相同灵敏度水平的酪胺扩增相比，Styramide 缀合物还可以明显减少一抗的消耗。Cy7 Styramide经过优化，是 Cy7 酪胺 (Cy7 TSA) 或 Alexa Fluor® 750 酪胺或其他光谱相似的荧光酪胺缀合物或 TSA 试剂的 替代品。
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简要概述
人血清白蛋白（HSA）是人血浆中酸性的重要载体之一，并且可逆地结合大量不同的化合物。已为HSA确定了几个不同的配体结合位点。其中，Site I被确定为主要的结合位点之一。Amplite™人血清白蛋白（HSA）I位结合测定试剂盒是一种基于荧光的高通量测定法，用于确定小分子与HSA的结合。该测定法基于新型荧光探针HSA Blue™S1。它的特征是具有独特的光谱和结合特性，可与HSA的位点1结合。HSA Blue™S1在蛋白质结合状态和蛋白质未结合状态之间显示出较大的荧光强度差异。在HSA Blue™S1存在下，小分子竞争HSA结合会导致荧光强度低。该测定法可用作高通量筛选工具，以确定在站点I处与HSA的总结合。
产品说明书
样品分析方案
概述
在微孔板孔中制备样品
从样品中取出液体
添加鬼笔环肽-iFluor 488标记溶液（100μL/孔）
在室温下染色细胞20至90分钟
清洗细胞在显微镜下观察样品
注意：将小瓶加热至室温并在打开前短暂离心。
储备溶液配制
HSA Blue™S1储备溶液
将100 µL DMSO（组分D）加入HSA Blue™S1（组分A）中并充分混合。
注意：将未使用的HSA Blue™S1储备溶液分装成一小份保存在-20°C下，以避免冻融循环。
工作溶液配制
1. HSA Blue™S1工作溶液
将50 µL HSA Blue™S1储备溶液加入5 mL HSA分析缓冲液（组分B）中，并充分混合。
注意：HSA Blue™S1工作溶液不应储存，应立即使用。
注意：5 mL HSA Blue™S1工作溶液足以用于一个96孔板。
2. HSA工作溶液
将250 µL HSA溶液（组分C）加入5 mL HSA分析缓冲液（组分B）中并充分混合。
注意：5 mL HSA工作溶液足以用于一个96孔板。
3.试药工作液
使用HSA分析缓冲液（组分B）将原液在3X工作溶液中稀释至所需浓度。
注意：对于此处提到的方案，每孔的建议体积为50 µL。
操作步骤
以下方案可用作参考，实际应根据需要进行调整。
在孔中加入50 µL HSA Blue™S1工作溶液。
在孔中加入50 µL HSA工作溶液。
在各自的孔中加入50 µL工作溶液。（总体积= 150 µL /孔）。
将样品在室温下孵育30分钟。
使用荧光酶标仪在Ex / Em = 365/480 nm（截止= 435 nm）处检测荧光的增加。
图示
图1.使用Amplite™人血清白蛋白（HSA）I位结合测定试剂盒测量了华法林（Site-1）和布洛芬（Site-2）的反应。使用Spectramax Gemini XS（分子设备）以Ex / Em = 365/480 nm和截止= 435 nm检测数据。
