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NADPH-细胞色素C还原酶（NCR）检测试剂盒,索莱宝,BC2720-50管/48样

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NADPH-细胞色素C还原酶（NCR）检测试剂盒,索莱宝,BC2720-50管/48样

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索莱宝
  • 英文名称 : NADPH-cytochrome C Reductase Assay Kit
  • 别名 : NADPH-细胞色素C还原酶试剂盒 NCR Kit NADPH-细胞色素C还原酶（NCR）试剂盒 氨基比林-N-去甲基化酶（AND）测试盒
  • 检测方法 : 可见分光光度法

    • 浓度
    规格 50管/48样
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    NADPH-细胞色素C还原酶（NCR）检测试剂盒 微量法,索莱宝,BC2725- 100管/96样

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    NADPH-细胞色素C还原酶（NCR）检测试剂盒 微量法,索莱宝,BC2725- 100管/96样

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    索莱宝

    ·  英文名称 : Micro NADPH-cytochrome C Reductase Assay Kit

    ·  别名 : NADPH-细胞色素C还原酶试剂盒 NCR Kit NADPH-细胞色素C还原酶（NCR）试剂盒 NADPH-细胞色素C还原酶（NCR）测试盒

    ·  检测方法 : 微量法

     

    测定意义：细胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的同工酶，在外源物质代谢中具有重要作用，尤其是药物和毒物的代谢。NCR作为P450酶系的重要一员，催化氧化型P450还原再生

    测定原理：NCR催化NADPH还原氧化型细胞色素C，还原型细胞色素C在550nm处有特征吸收峰；通过测定550nm吸光度的增加速率，来计算NCR活性。

    需要的仪器，耗材:普通离心机，超速离心机、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

    浓度
    规格 100管/96样
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    还原型辅酶Ⅱ四钠，NADPH-Na4,索莱宝,N8100-1g CAS : 2646-71-1

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    上海金畔生物科技有限公司提供还原型辅酶Ⅱ四钠，NADPH-Na4,索莱宝,N8100-1g CAS : 2646-71-1，可以访问官网了解更多产品信息。
    还原型辅酶Ⅱ四钠，NADPH-Na4,索莱宝,N8100-1g CAS : 2646-71-1

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    索莱宝

    ·  别名 : 还原辅酶Ⅱ四钠盐；phosphate tetrasodium;CoenzymeⅡreduced form tetrasodium salt；Dihydronicotinamide ademine dinucleotide;NADPH2-Na4；TPNH2-Na4

    ·  英文名称 : NADPH-Na4

    ·  CAS : 2646-71-1

    ·  分子式 : C21H26N7Na4O17P3 · xH2O

    ·  分子量 : 833.4

    ·  储存条件 : -20℃

    ·  纯度 : >98%

    ·  外观（性状） : 白色或类白色无定形粉末

    ·  单位 : 支

     

    还原型辅酶Ⅱ四钠主要用于生化研究。

    浓度
    规格 1g
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    还原型辅酶Ⅱ四钠，NADPH-Na4,索莱宝,N8100-100mg CAS : 2646-71-1

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    还原型辅酶Ⅱ四钠，NADPH-Na4,索莱宝,N8100-100mg CAS : 2646-71-1

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    ·  别名 : 还原辅酶Ⅱ四钠盐；phosphate tetrasodium;CoenzymeⅡreduced form tetrasodium salt；Dihydronicotinamide ademine dinucleotide;NADPH2-Na4；TPNH2-Na4

    ·  英文名称 : NADPH-Na4

    ·  CAS : 2646-71-1

    ·  分子式 : C21H26N7Na4O17P3 · xH2O

    ·  分子量 : 833.4

    ·  储存条件 : -20℃

    ·  纯度 : >98%

    ·  外观（性状） : 白色或类白色无定形粉末

    ·  单位 : 支

     

    还原型辅酶Ⅱ四钠主要用于生化研究。

    浓度
    规格 100mg
    保存 -20℃

    还原型辅酶Ⅱ四钠，NADPH-Na4,索莱宝,N8100-25mg CAS : 2646-71-1

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    上海金畔生物科技有限公司提供还原型辅酶Ⅱ四钠，NADPH-Na4,索莱宝,N8100-25mg CAS : 2646-71-1，可以访问官网了解更多产品信息。
    还原型辅酶Ⅱ四钠，NADPH-Na4,索莱宝,N8100-25mg CAS : 2646-71-1

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    索莱宝

    ·  别名 : 还原辅酶Ⅱ四钠盐；phosphate tetrasodium;CoenzymeⅡreduced form tetrasodium salt；Dihydronicotinamide ademine dinucleotide;NADPH2-Na4；TPNH2-Na4

    ·  英文名称 : NADPH-Na4

    ·  CAS : 2646-71-1

    ·  分子式 : C21H26N7Na4O17P3 · xH2O

    ·  分子量 : 833.4

    ·  储存条件 : -20℃

    ·  纯度 : >98%

    ·  外观（性状） : 白色或类白色无定形粉末

    ·  单位 : 支

     

    还原型辅酶Ⅱ四钠主要用于生化研究。

    浓度
    规格 25mg
    保存 -20℃

    NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274-AAT Bioquest荧光染料

    发表于由

    上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

    • 产品参数
    • 产品详情

    NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274
    级别 :
    超纯、高纯
    含量 :
    95%
    产品规格 :
    250 Tests
    品牌 :
    AAT Bioquest
    用途范围 :
    AAT Bioquest生产的荧光染料
    特色服务 :
    包邮

    产品详情

    Product details

    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法)

    NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274

    简要概述

            Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒 （比色法）是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）和NADP是细胞中发现的两种重要的辅酶。 NADH（NADPH）是NAD（NADP）的还原形式，NAD（NADP）是NADH（NADPH）的氧化形式。 NAD或NADP在氧化还原反应中起辅助因子的作用，在细胞反应中转移电子。 氧化形式和还原形式之间的平衡是NAD / NADH（NADP / NADPH）比率。 该比率是指示细胞氧化还原状态的重要组分，并且它是反映代谢活性和细胞健康的测量。 在健康的哺乳动物组织中，游离NAD和NADH之间的比率的估计可以高达700。相反，NADP / NADPH比率通常为约0.005，因此NADPH是该辅酶的主要形式。

            该Amplite 比色NADP / NADPH比率分析试剂盒提供了一种比色法，用于测量培养细胞中细胞内总NADP / NADPH量和NADP / NADPH比率。 在该测定中，裂解物中的NADPH可以用NADPH提取溶液提取，然后通过NADPH探针识别，在反应后得到黄色染料，其在460nm处具有吸光度。 产生的染料量与细胞裂解物中NADP或NADPH的浓度成正比，可用作细胞NADP / NADPH浓度的指示剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的NADP/NADPH检测试剂盒。 

    NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274

    产品说明书

    96孔板检测示例

    概述

    准备25μLNADPH标准品和/或测试样品

    加入25μLNADPH提取液

    在室温下孵育15分钟

    加入25μL中和溶液

    加入75μLNADPP/ NADPH反应混合物在室温下孵育15分钟至2小时监测 在460nm处的吸光度

    注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

    操作步骤

    1.准备NADPH原液：

    将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品（组分C）的小瓶中，得到1mM（1nmol / L）NADPH储备溶液。

    注意：未使用的NADPH原液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

    2.制备NADP / NADPH反应混合物：

    2.1将8mL NADPH探针缓冲液（组分B-II）加入到NADP / NADPH回收酶混合物（组分A）的瓶中，并充分混合。

    2.2将2 mL NADPH探针（组分B-I）加入上述瓶中（来自步骤2.1）并充分混合。

    注意：这种NADP / NADPH反应混合物足以进行125~200次分析。 未使用的NADP / NADPH反应混合物应分成一次性等分试样并储存在-20℃。

    3.准备连续稀释的NADPH标准品（0至2μM）：

    3.1将2L 1mM NADPH储备溶液（来自步骤1）加入998L PBS缓冲液（pH7.4）中，产生2M（2 pmols / L）NADPH标准溶液。

    注意：稀释的NADPH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

    3.2取200μL2MNADPH标准溶液（来自步骤3.1）进行1：2连续稀释，得到1，0.5,0.25,0.125,0.0625,0.0313和0M系列稀释的NADPH标准品。

    4.运行总NADP / NADPH分析（总共400个分析/试剂盒）：

    4.1如说明书中的表1和2中所述，将NADPH标准品和含有NADP / NADPH的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微孔板中。

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见，裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞。 （详见附录）。

    4.2将50μL的NADP / NADPH反应混合物（来自步骤2.2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品（来自步骤4.1）的每个孔中，以使总NADP / NADPH测定体积为100μL/孔。

    4.3在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

    4.4使用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。

    5.运行NADP / NADPH比率分析（总共250个分析/试剂盒）：

    5.1如说明书中的表3和4中所述，将连续稀释的NADPH标准品和/或含NADP / NADPH的测试样品加入白色/透明96孔微量培养板中。

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见，裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞。

    5.2对于NADPH提取（NADPH量）：将25μLNADPH提取溶液（组分D）加入含有NADP / NADPH的测试样品的孔中。在室温下孵育10至15分钟，然后加入25μL中和溶液（组分E）以中和NADPH提取物，如说明书中的表3和4中所述。

    对于总NADP和NADPH（总量）：将25μLNADPP/ NADPH对照溶液（组分F）加入NADPH标准品的孔和含有NADP / NADPH的测试样品中。在室温下孵育10至15分钟，然后如说明书中的表3和4中所述添加25μL提取对照溶液（组分F）。

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。为方便起见，裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞（详见附录）。

    5.3将75μL的NADP / NADPH反应混合物（来自步骤2.2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品（NADP / NADPH）的每个孔中，并测试样品（NADPH提取物）（来自步骤5.1）以使总量达到测定体积为150μL/孔。

    5.4在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

    5.5使用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。

     

    数据分析

            空白孔中的吸光度（仅PBS缓冲液）用作对照，并从具有NADPH反应的那些孔的值中减去。

    NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274

    图1. Amplite™比色NADP / NADPH比率分析试剂盒用于使用SpectraMax酶标仪（Molecular devices）测量白色/透明96孔微量培养板中的总NADP / NADPH量和NADP / NADPH比率。

    A-总NADPH和NADP剂量反应：孵育1小时可检测到低至0.03μM的总NADPH。

    B-NADP / NADPH比例：用或不用NADP提取溶液处理等量的NADP和NADPH混合物15分钟，然后在室温下用提取溶液中和。 在460nm读取信号。 NADP / NADPH摩尔比基于图1B中所示的吸光度计算。

    附录：使用组分G（NAD / NADH裂解缓冲液）的测试样品制剂

    1.植物细胞样品：

    用裂解缓冲液以200mg / mL均化，并以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测试。

    2.细菌样品：

    离心收集细菌细胞（（10,000 g，0°C，15 min）。使用约1亿至1千万细胞/ mL裂解缓冲液，将处理后的溶液在室温下保持15分钟。以2500 rpm离心5分钟， 用上清液进行试验。

    3.哺乳动物细胞样本：

    从平板孔中取出培养基，每1-5百万个细胞使用约100μL裂解缓冲液（或在96孔细胞培养板中使用50-100μL/孔），并将处理过的溶液在室温下保持15分钟。 直接使用细胞裂解液或以1500 rpm离心5分钟，使用上清液进行测试。

    4.组织样品：

    称取约20mg组织，用冷PBS洗涤。 在微量离心管中用400μl裂解缓冲液均化。 以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测定。

    ReadiUse 即用型NADPH再生回收试剂盒 货号15265-AAT Bioquest荧光染料

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    • 产品参数
    • 产品详情

    ReadiUse 即用型NADPH再生回收试剂盒 货号15265
    级别 :
    超纯、高纯
    含量 :
    95%
    产品规格 :
    1000 Tests
    品牌 :
    aat bioquest
    用途范围 :
    AAT Bioquest生产的荧光染料
    特色服务 :
    包邮

    产品详情

    Product details

    ReadiUse 即用型NADPH再生回收试剂盒

    ReadiUse 即用型NADPH再生回收试剂盒 货号15265

    货号 15265                            存储条件                     f/l                    
    规格                        1000 Tests
    Ex (nm) Em (nm)
    分子量 溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

            ReadiUse 即用型NADPH再生回收试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测NADPH的试剂盒，黄嘌呤是在大多数人体组织和液体中发现的嘌呤碱。 许多兴奋剂来源于黄嘌呤，包括氨茶碱，IBMX，旁黄嘌呤，己酮可可碱，可可碱和茶碱，它们可以刺激心率，收缩力，高浓度的心律失常。 因此，检测生物样品中的黄嘌呤变化对于疾病诊断和治疗监测是重要的。 Amplite 比色黄嘌呤测定试剂盒为测量黄嘌呤提供了一种快速且超灵敏的方法。 它可以用方便的96孔或384孔微量滴定板格式进行。 黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶存在下氧化成尿酸释放过氧化氢，用吸光度酶标仪在576nm处用Amplite Red进行特异性测定。 使用Amplite 比色黄嘌呤测定试剂盒，在100μL反应体积中检测到低至1.2μM的黄嘌呤。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的ReadiUse 即用型NADPH再生回收试剂盒。 

    NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15272-AAT Bioquest荧光染料

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    NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15272
    级别 :
    超纯、高纯
    含量 :
    95%
    产品规格 :
    400 Tests
    品牌 :
    AAT Bioquest
    用途范围 :
    AAT Bioquest生产的荧光染料
    特色服务 :
    包邮

    产品详情

    Product details

    Amplite NADPH检测试剂盒(比色法)

    简要概述

            Amplite NADPH检测试剂盒(比色法)是美国AAT Bioquest研发的检测NADPH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）和NADP +是细胞中发现的两种重要的辅因子。 NADH是NAD +的还原形式。传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定基于监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化。 NAD / NADH和NADP / NADPH测定的短紫外波长使得传统方法具有低灵敏度和高干扰。 AAT Bioquest的Amplite 比色NADPH检测试剂盒为检测NADPH提供了一种便捷的方法。 NADPH探针是一种生色传感器，在NADPH减少时具有460nm的 吸光度。 NADPH探针的吸收与溶液中NADPH的浓度成正比。 Amplite 比色NADPH检测试剂盒提供灵敏的检测方法，可在100μL检测体积中检测低至3μM的NADPH。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的NADH检测试剂盒。 

    产品说明书

    96孔板检测示例

     

    概述

    准备NADPH反应混合物（50μL）

    加入NADPH标准品或测试样品（50μL）

    在室温孵育或15分钟至2小时

    孵育460 nm处的监测吸光度

    注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

     

    操作步骤

    1.准备NADPH原液：

    将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品（组分C）的小瓶中以制备1mM（1nmol / L）NADH储备溶液。

    注意：未使用的NADH储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

     

    2.准备NADPH反应混合物：

    将1mL NADPH探针（组分A）加入4mL NADPH测定缓冲液（组分B）中，并充分混合。

    注意：5mL NADPH反应混合物用于一个96孔。 未使用的NADPH反应混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

     

    3.准备NADPH标准品的连续稀释液（0至100μM）：

    3.1将100μLNADPH储备溶液（来自步骤1）加入400μLPBS缓冲液（pH 7.4）中，以产生200μM（100pmol / L）NADPH标准溶液。

    注意：稀释的NADPH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

    3.2取200μL的200μMNADPH标准溶液进行1：2连续稀释，得到NADPH标准品的100,50,25,12.5,6.25,3.13和0μM连续稀释液。

    如表1和2中所述，将NADPH标准品和含有NADPH的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微量培养板中。

    注意：根据需要制备细胞或组织样品。 为方便起见，裂解缓冲液（组分D）可用于裂解细胞（详见附录）。

    表1在白色/透明底96孔微孔板中的NADPH标准品和测试样品的布局

    BL

    BL

    TS

    TS

    NS1

    NS1

    ….

    ….

    NS2             

    NS2            

    NS3

    NS3

    NS4

    NS4

    NS5

    NS5

    NS6

    NS6

    NS7

    NS7

    注意：NS = NADPH标准，BL =空白对照，TS =测试样品

    表2每个孔的试剂组成

    NADPH Standard

    Blank Control

    Test Sample

    Serial Dilutions*: 50 μL

    PBS: 50 μL

    50 μL 

    *注意：将连续稀释的NADPH标准品（3.13μM至200μM）加入NS1至NS7的孔中，一式两份

    4.在上清液反应中运行NADPH测定：

    4.1将50μLNADPH反应混合物（来自步骤2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3.3），使总NADPH测定体积为100μL/孔

    注1：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLNADPH反应混合物。

    注2：根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见，裂解缓冲液（组分D）可用于裂解细胞（详见附录）。

    4.2在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

    4.3用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。

     

    数据分析

            空白孔中的吸光度（仅用PBS缓冲液）用作对照，并从具有NADPH反应的那些孔的值中减去.NADPH标准曲线如图1所示。

    NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15272

    图1使用SpectraMax酶标仪（Molecular devices），在96孔白色/透明底板中用Amplite 比色NADPH测定试剂盒测量NADPH剂量反应。 孵育30分钟（n = 3）可以检测到低至3μM的NAPDH，在460nm处测量吸光度。

    附录：使用组分D（裂解缓冲液）的测试样品制剂

    1.植物细胞样品：用200mg / mL的裂解缓冲液均质化，并以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测试。

    2.细菌细胞样品：离心收集细菌细胞（（10,000 g，0°C，15 min）。使用约1亿至1千万细胞/ mL裂解缓冲液，将处理后的溶液在室温下保持15分钟.2500℃离心 转速5分钟，并用上清液进行试验。

    3.哺乳动物细胞样品：从平板孔中取出培养基，每1-5百万个细胞使用约100μL裂解缓冲液（或在96孔细胞培养板中使用50-100μL/孔），并将处理过的溶液保持在室温下 15分钟。 直接使用细胞裂解液或以1500 rpm离心5分钟，使用上清液进行测试。

    4.组织样品：称取约20mg组织，用冷PBS洗涤。 在微量离心管中用400μl裂解缓冲液均化。 以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测定。

    NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15272

    细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光 货号15296-AAT Bioquest荧光染料

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    细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光 货号15296
    级别 :
    超纯、高纯
    含量 :
    95%
    产品规格 :
    100 Tests
    品牌 :
    AAT Bioquest
    用途范围 :
    科研试剂
    特色服务 :
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    Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光

    细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光 货号15296

    简要概述

          Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒，细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和药发现是重要的。通常，氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢，糖酵解，三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD（P）H水平升高与活性氧（ROS）和DNA损伤的异常产生有关。然而，由于缺乏敏感的NAD（P）H探针，检测细胞内NAD具有挑战性。（P）H在生物系统中。Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒提供了一种监测远光谱活细胞中细胞内NAD（P）H水平的有效方法，可与其他应用如GFP表达细胞或MitoTracker的应用相结合。JJ1902 NAD（P）H探针是一种 的荧光探针，用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。该荧光探针结合NADH / NADPH，产生高灵敏度和特异性的强荧光信号。JJ1902 NAD（P）H探针可以很容易地加载到活细胞中，并且可以使用APC通道中的流式细胞仪方便地监测其荧光信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒。 

    产品说明书

    实验样品示例

    概述

    1.准备细胞（0.5  –  1×106细胞/ mL）

    2.将含有测试化合物和JJ1902 NAD（P）H探针的细胞在37℃孵育20-30分钟

    3.将细胞洗净并保持在测定缓冲液中

    4.使用APC通道用流式细胞仪分析细胞

    注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

    操作方法

    1.对于每个样品，将细胞制备在0.5 mL无血清培养基或您选择的缓冲液中，密度为1×105至1×106个细胞/ mL。

    注意1：应对每个细胞系进行单独测评，以确定细胞密度。 对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并用无血清培养基洗涤细胞一次。

    注意2：JJ1902 NAD（P）H探针在血清存在的情况下也兼容。

    2.将细胞与测试化合物在37℃孵育所需的一段时间以刺激细胞内NADH / NADPH。

    注意：适当的孵育时间取决于单个细胞类型和使用的测试化合物。 优化每个实验的孵育时间。

    3.将1μL JJ1902NAD（P）H探针（组分A）加入0.5 mL细胞悬浮液中。在37℃下孵育30-60分钟。

    注意对于NADH / NADPH阳性对照处理：将Jurkat细胞与100μMNADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟，并与JJ1902 NAD（P）H探针工作溶液在37℃下共温育30分钟。 详细信息请参见说明书中的图1。

    4.用所需的缓冲液（如HHBS或DPBS）洗涤细胞一次。将细胞保存在分析缓冲液（组分B）中。

    5.使用流式细胞仪监测APC通道的荧光强度。

    Amplite NADP NADPH比率检测试剂盒比色法 货号15274-AAT Bioquest荧光染料

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    Amplite NADP NADPH比率检测试剂盒比色法 货号15274
    级别 :
    超纯、高纯
    含量 :
    95%
    产品规格 :
    250 Tests
    品牌 :
    aat bioquest
    用途范围 :
    AAT Bioquest生产的荧光染料
    特色服务 :
    包邮

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    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法)

    Amplite NADP NADPH比率检测试剂盒比色法 货号15274

    货号 15274 存储条件 F/L
    规格 250 Tests
    Ex (nm) 460 Em (nm)
    分子量 溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

            Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒 （比色法）是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒，。 NADH（NADPH）是NAD（NADP）的还原形式，NAD（NADP）是NADH（NADPH）的氧化形式。 NAD或NADP在氧化还原反应中起辅助因子的作用，在细胞反应中转移电子。 氧化形式和还原形式之间的平衡是NAD / NADH（NADP / NADPH）比率。 该比率是指示细胞氧化还原状态的重要组分，并且它是反映代谢活性和细胞健康的测量。 在健康的哺乳动物组织中，游离NAD和NADH之间的比率的估计可以高达700。相反，NADP / NADPH比率通常为约0.005，因此NADPH是该辅酶的主要形式。

    Amplite NADPH检测试剂盒荧光法 红色荧光 货号15262-AAT Bioquest荧光染料

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    Amplite NADPH检测试剂盒荧光法 红色荧光 货号15262
    级别 :
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    含量 :
    95%
    产品规格 :
    400 Tests
    品牌 :
    aat bioquest
    用途范围 :
    AAT Bioquest生产的荧光染料
    特色服务 :
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    Amplite NADPH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光

    货号 15262 存储条件 f/l                   
    规格                      400 Tests                      
    Ex (nm) 571                       Em (nm) 585
    分子量 溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

            Amplite NADPH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光是美国AAT Bioquest研发的检测NADPH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）和NADP +是细胞中发现的两种重要的辅因子。 NADH是NAD +的还原形式，NAD +是NADH的氧化形式。。 在叶绿体中，NADP是在光合作用的初步反应中重要的氧化剂。 通过光合作用产生的NADPH用作卡尔文光合作用循环中生物合成反应的还原能力。 传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定通过监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化来完成。 该方法具有低灵敏度和高干扰，因为该测定在需要昂贵的石英微孔板的UV范围内进行。

            这种Amplite 荧光NADPH检测试剂盒为检测NADPH提供了一种便捷的方法。 系统中的酶特异性识别酶再循环反应中的NADPH。 此外，该测定具有非常低的背景，因为其在红色可见范围内运行，这显着降低了来自生物样品的干扰。

    Amplite NADPH检测试剂盒荧光法 红色荧光 货号15262

            Amplite 荧光NADPH检测试剂盒提供灵敏的一步法检测，在100μL检测体积（1μM;图1）中检测少至100皮摩尔的NADPH。 该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。 其信号可通过Ex / Em = 540/590 nm的荧光酶标仪或~576 nm的吸光度酶标仪轻松读取。 该测定试剂盒已用于筛选使用NADP / NADPH作为辅因子的酶活性。 它还被用于在基于细胞的测定中灵敏检测NADPH。 与其他商业试剂盒相比，该试验具有更高的信号/背景比。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的NADPH检测试剂盒。 

    产品说明书

    96孔板测定示例

    概述

    准备NADPH反应混合物（50μL）

    加入NADPH标准品或测试样品（50μL）

    在室温下孵育15分钟 –  2小时在Ex / Em = 540/590 nm处

    监测荧光增加

    注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

    操作方法

    1.准备NADPH原液：

    将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品（组分C）的小瓶中以制备1mM（1nmol / L）NADPH储备溶液。

    注意：未使用的NADPH原液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

    2.准备NADPH反应混合物：

    将10mL Amplite™NADPH测定缓冲液（组分B）加入NADPH回收酶混合物（组分A）的瓶中，并充分混合。

    注意：这种NADPH反应混合物足以用于两个96孔板。 未使用的NADPH反应混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

    3.准备NADPH标准品的连续稀释液（0至100μM）：

    3.1将50μLNADPH储备液（来自步骤1）加入450μLPBS缓冲液（pH 7.4）中，得到100μM（100pmol / L）NADPH标准溶液。

    注意：稀释的NADPH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

    3.2取200μL100μMNADPH标准溶液，进行1：3连续稀释，得到30,10,3,1,0.3,0.1和0μM的NADPH标准品系列稀释液。

    3.3如表1和2中所述，将NADPH标准品和含有NADPH的测试样品的系列稀释液加入到实心黑色96孔微量培养板中。

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。

    表1实心黑色96孔微孔板中NADPH标准品和测试样品的布局

    BL

    BL

    TS

    TS

    NS1

    NS1

    ….

    ….

    NS2

    NS2

    NS3

    NS3

    NS4

    NS4

    NS5               

    NS5                

    NS6

    NS6

    NS7

    NS7

    注意：NS = NADPH标准，BL =空白对照，TS =测试样品

    表2每个孔的试剂组成

    NADPH Standard

    Blank Control

    Test Sample

    Serial Dilutions*: 50 μL

    PBS: 50 μL

    50 μL 

    *注意：将连续稀释的NADPH标准品（0.1μM至100μM）加入NS1至NS7的孔中，一式两份

    4.在上清液反应中运行NADPH测定：

    4.1将50μLNADPH反应混合物（来自步骤2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3.3），使总NADPH测定体积为100μL/孔。

    注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLNADPH反应混合物。

    4.2在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

    4.3在Ex / Em = 530-570 / 590-600nm（（Ex / Em = 540 / 590nm）下用荧光板读数器监测荧光增加。

    注意1：平板的内容物也可以转移到白色透明底板上，用吸光度酶标仪在576±5nm波长下读数。 与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

    注意2：对于基于细胞的NADPH测量，建议使用ReadiUse™哺乳动物细胞裂解缓冲液* 5X *（cat＃20012）裂解细胞。

    数据分析

            空白孔中的荧光（仅用PBS缓冲液）用作对照，并从具有NADPH反应的那些孔的值中减去。 NADPH标准曲线如图1所示。

            注意：荧光背景随时间增加，因此减去每个数据点的空白孔的荧光强度值是很重要的。

    Amplite NADPH检测试剂盒荧光法 红色荧光 货号15262

    图1.使用NOVOStar酶标仪（BMG Labtech），在96孔黑色板中用Amplite 荧光NADPH测定试剂盒测量NADPH剂量反应。 低至1μM（100pmol /孔）可以在孵育1小时（n = 3）时检测到NADPH，而NADP没有响应。

    Amplite NADPH检测试剂盒 货号15272-AAT Bioquest荧光染料

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    Amplite NADPH检测试剂盒 货号15272
    级别 :
    超纯、高纯
    含量 :
    95%
    产品规格 :
    400 Tests
    品牌 :
    aat bioquest
    用途范围 :
    AAT Bioquest生产的荧光染料
    特色服务 :
    包邮

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    Amplite NADPH检测试剂盒(比色法)

    货号 15272 存储条件 F/L
    规格 400 Tests
    Ex (nm) 460 Em (nm)
    分子量 溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

            Amplite NADPH检测试剂盒(比色法)是美国AAT Bioquest研发的检测NADPH的试剂盒， NADH是NAD +的还原形式。 NAD形成NADP，。传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定基于监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化。 NAD / NADH和NADP / NADPH测定的短紫外波长使得传统方法具有低灵敏度和高干扰。 AAT Bioquest的Amplite 比色NADPH检测试剂盒为检测NADPH提供了一种便捷的方法。 NADPH探针是一种生色传感器，在NADPH减少时具有460nm的 吸光度。 NADPH探针的吸收与溶液中NADPH的浓度成正比。 Amplite 比色NADPH检测试剂盒提供灵敏的检测方法，可在100μL检测体积中检测低至3μM的NADPH。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的NADH检测试剂盒。 

    Amplite NADPH检测试剂盒 货号15272

    Amplite NADPH检测试剂盒 货号15272

    胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 货号12591-AAT Bioquest荧光染料

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    胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 货号12591
    级别 :
    超纯、高纯
    含量 :
    95%
    产品规格 :
    100 Tests
    品牌 :
    aat bioquest
    用途范围 :
    AAT Bioquest生产的荧光染料
    特色服务 :
    包邮

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    Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒

    胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 货号12591

    简要概述

            Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测NADH/NADPH的试剂盒，细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断发现是重要的。通常，氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢，糖酵解，三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD（P）H水平的增加与活性氧（ROS）和DNA损伤的异常产生有关。然而，由于缺乏敏感的NAD（P）H探针，在生物系统中检测细胞内NAD（P）H具有挑战性。 Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒提供了一种监测活细胞内细胞内NAD（P）H水平的有效方法。 JZL1707 NAD（P）H传感器是一种 的荧光探针，用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。探针结合NADH / NADPH以产生具有高灵敏度和特异性的强荧光信号。 JZL1707 NAD（P）H传感器可以很容易地加载到活细胞中，并且可以使用PE通道中的流式细胞仪方便地监测其荧光信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒。 

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    产品说明书

    实验示例

    概述

    1.准备细胞（0.5-1×106细胞/ mL）
    2.将细胞与测试化合物和JZL1707 NAD（P）H传感器在37ºC下孵育30-60分钟
    3.洗涤细胞并将其保存在测定缓冲液中
    4.使用PE通道通过流式细胞仪分析细胞

    操作步骤

    1.对于每个样品，在0.5 mL无血清培养基或您选择的缓冲液中以1×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意：应单独评估每个细胞系，以确定细胞密度。对于粘附细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并用无血清培养基洗涤细胞一次。注意：JZL1707 NAD（P）H传感器对血清敏感，因此建议将细胞保存在您选择的无血清培养基或缓冲液中。或者，可以制备细胞并在常规完全培养基中处理。与JZL1707 NAD（P）H Sensor孵育时，请更改为无血清培养基或您选择的缓冲液。
    在37ºC下将细胞与测试化合物一起孵育所需的时间，以刺激细胞内的NADH / NADPH。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物。优化每个实验的孵育时间。

    2.将1 µL JZL1707 NAD（P）H传感器（组分A）加入0.5 mL细胞悬液中。在37ºC下孵育30-60分钟。注意：对于NADH / NADPH阳性对照处理：将Jurkat细胞与100 µM NADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟，然后与JZL1707 NAD（P）H Sensor工作溶液在37ºC共同孵育30分钟。分钟。有关详细信息，请参见图1。

    3.用所需的缓冲液洗涤细胞一次。将细胞保存在测定缓冲液（组分B）中。

    4.使用流式细胞仪监测PE通道的荧光强度。

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15260-AAT Bioquest荧光染料

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    • 产品详情

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15260
    级别 :
    超纯、高纯
    含量 :
    95%
    产品规格 :
    400 Tests
    品牌 :
    aat bioquest
    用途范围 :
    AAT Bioquest生产的荧光染料
    特色服务 :
    包邮

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    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法)

    货号 15260 存储条件 f/l
    规格                       400 Tests                    价格                                            
    Ex (nm) 575 Em (nm)
    分子量 溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

            Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒（比色法）是AAT Bioquest研发的检测NADP+/NADPH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）和NADP +是细胞中发现的两种重要的辅因子。NADH是NAD +的还原形式，NAD +是NADH的氧化形式。。在叶绿体中，NADP是在光合作用的初步反应中重要的氧化剂。通过光合作用产生的NADPH用作卡尔文光合作用循环中生物合成反应的还原能力。传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定通过监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化来完成。该方法具有低灵敏度和高干扰，因为该测定在需要昂贵的石英微孔板的UV范围内进行。

            Amplite™比色总NADP和NADPH检测试剂盒为敏感检测NADP和NADPH提供了一种便捷的方法。 系统中的酶特异性识别酶循环反应中的NADP / NADPH，其显着提高了检测灵敏度。 此外，该测定具有非常低的背景，因为其在较长波长范围内运行，这显著降低了来自生物样品的干扰。 该实验证明了高灵敏度和低干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒。

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15260

    Amplite™比色总NADP和NADPH分析试剂盒提供灵敏的一步法分析，可在100μL分析体积（100 nM）内检测少至10皮摩尔的NADP（H）。 该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且容易适应自动化而无需分离步骤。 其信号可通过吸光度酶标仪在~575nm或~570nm至~605nm的吸光度比下轻松读取，以提高测定灵敏度。 如果需要更高的灵敏度，建议使用Cat#15259或15264。

    产品说明书

    96孔板测定示例

    概述

    准备NADP / NADPH反应混合物（50μL）

    加入NADPH标准品或测试样品（50μL）

    在室温下孵育15分钟–2小时

    监测575±5nm处的吸光度强度

    注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

     

    操作方法

    1.准备NADPH原液：

    将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品（组分C）的小瓶中，得到1mM（1nmol / L）NADPH储备溶液。

    注意：未使用的NADPH原液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

    2.制备NADP / NADPH反应混合物：

    将10mL NADP / NADPH传感器缓冲液（组分B）加入NADP / NADPH再循环酶混合物（组分A）的瓶中，并充分混合。

    注意：这种NADP / NADPH反应混合物足以用于两个96孔板。 未使用的NADP / NADPH混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

    3.准备NADPH标准品的连续稀释液（0至10μM）：

    3.1将10μLNADPH储备溶液（来自步骤1）加入990L PBS缓冲液中以产生10M（10pmol / L）NADPH标准溶液。

    注意：稀释的NADPH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

    3.2取200μL10μMNADPH标准溶液进行1：3连续稀释，得到NADPH标准品的3,1,0.3,0.1,0.03,0.01,0.003和0μM连续稀释液。

    3.3如表1和表2所述，将NADPH标准品和含有NADP / NADPH的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微孔板中

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。

    表1在白色/透明底96孔微孔板中的NADPH标准品和测试样品的布局

    BL

    BL                    

    TS                  

    TS                         

    NS1               

    NS1

    ….

    ….

    NS2

    NS2

    NS3

    NS3

    NS4

    NS4

    NS5

    NS5

    NS6

    NS6

    NS7

    NS7

    注意：NS = NADPH标准，BL =空白对照，TS =测试样品。

    表2.每个孔的试剂组成

    NADPH Standard

    Blank Control

    Test Sample

    Serial Dilutions*: 50 μL

    PBS: 50 μL

    50 μL 

    注意：将连续稀释的NADPH标准品从0.003μM至3μM加入NS1至NS7的孔中，一式两份。 高浓度的NADPH（例如，>100μM，浓度）可能由于NADPH传感器的过度氧化而导致信号降低。

    4.在上清液中运行NADP / NADPH测定：

    4.1将50μLNADPH反应混合物（来自步骤2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3.3），使总NADPH测定体积为100μL/孔。

    注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLNADPH反应混合物。

    4.2在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

    4.3用吸光度读数仪在575±5 nm或~570 nm至~605 nm的吸光度比下观察吸光度的增加，以提高检测灵敏度。

    注意1：对于NADP / NADPH比率测量，建议使用试剂盒15263。

    注意2：对于基于细胞的NADP / NADPH测量，建议使用ReadiUse™哺乳动物细胞裂解缓冲液* 5X *（Cat#20012）裂解细胞。

    数据分析

            空白孔中的吸光度（仅用PBS缓冲液）用作对照，并从NADPH反应孔的值中减去。 NADPH标准曲线如图1所示。

            注意：吸光度背景随时间增加，因此减去每个数据点的空白孔的吸光度非常重要。

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15260

    图1.使用NOVOStar酶标仪（BMG Labtech），在白色/透明底96孔板中用Amplite™比色总NADP和NADPH测定试剂盒测量NADPH剂量反应。 在孵育1小时（n = 3）时可以检测到低至100nM（10pmol /孔）的NADPH，而NADH没有响应。

    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274-AAT Bioquest荧光染料

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    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法)

    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法)

    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274 货号 15274 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
    规格 250 Tests 价格 4584
    Ex (nm) 460 Em (nm)
    分子量 溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒 （比色法）是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）是细胞中发现的两种重要的辅酶。 NAD形成NADP，通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的2’位置。 NADH（NADPH）是NAD（NADP）的还原形式，NAD（NADP）是NADH（NADPH）的氧化形式。 NAD或NADP在氧化还原反应中起辅助因子的作用，在细胞反应中转移电子。 氧化形式和还原形式之间的平衡是NAD / NADH（NADP / NADPH）比率。 该比率是指示细胞氧化还原状态的重要组分，并且它是反映代谢活性和细胞健康的测量。 在健康的哺乳动物组织中，游离NAD和NADH之间的比率的估计可以高达700。相反，NADP / NADPH比率通常为约0.005，因此NADPH是该辅酶的主要形式。

    该Amplite 比色NADP / NADPH比率分析试剂盒提供了一种比色法，用于测量培养细胞中细胞内总NADP / NADPH量和NADP / NADPH比率。 在该测定中，裂解物中的NADPH可以用NADPH提取溶液提取，然后通过NADPH探针识别，在反应后得到黄色染料，其在460nm处具有吸光度。 产生的染料量与细胞裂解物中NADP或NADPH的浓度成正比，可用作细胞NADP / NADPH浓度的指示剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的NADP/NADPH检测试剂盒。 

    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274

     

    适用仪器

    光吸收酶标仪  
    吸收： 460nm
    推荐孔板： 透明底板

    产品说明书

    96孔板检测示例

    概述

    准备25μLNADPH标准品和/或测试样品

    加入25μLNADPH提取液

    在室温下孵育15分钟

    加入25μL中和溶液

    加入75μLNADPP/ NADPH反应混合物在室温下孵育15分钟至2小时监测 在460nm处的吸光度

    注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

     

    操作步骤

    1.准备NADPH原液：

    将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品（组分C）的小瓶中，得到1mM（1nmol / L）NADPH储备溶液。

    注意：未使用的NADPH原液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

     

    2.制备NADP / NADPH反应混合物：

    2.1将8mL NADPH探针缓冲液（组分B-II）加入到NADP / NADPH回收酶混合物（组分A）的瓶中，并充分混合。

    2.2将2 mL NADPH探针（组分B-I）加入上述瓶中（来自步骤2.1）并充分混合。

    注意：这种NADP / NADPH反应混合物足以进行125~200次分析。 未使用的NADP / NADPH反应混合物应分成一次性等分试样并储存在-20℃。

     

    3.准备连续稀释的NADPH标准品（0至2μM）：

    3.1将2L 1mM NADPH储备溶液（来自步骤1）加入998L PBS缓冲液（pH7.4）中，产生2M（2 pmols / L）NADPH标准溶液。

    注意：稀释的NADPH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

    3.2取200μL2MNADPH标准溶液（来自步骤3.1）进行1：2连续稀释，得到1，0.5,0.25,0.125,0.0625,0.0313和0M系列稀释的NADPH标准品。

     

    4.运行总NADP / NADPH分析（总共400个分析/试剂盒）：

    4.1如说明书中的表1和2中所述，将NADPH标准品和含有NADP / NADPH的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微孔板中。

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见，裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞。 （详见附录）。

    4.2将50μL的NADP / NADPH反应混合物（来自步骤2.2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品（来自步骤4.1）的每个孔中，以使总NADP / NADPH测定体积为100μL/孔。

    4.3在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

    4.4使用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。

     

    5.运行NADP / NADPH比率分析（总共250个分析/试剂盒）：

    5.1如说明书中的表3和4中所述，将连续稀释的NADPH标准品和/或含NADP / NADPH的测试样品加入白色/透明96孔微量培养板中。

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。 为方便起见，裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞。

    5.2对于NADPH提取（NADPH量）：将25μLNADPH提取溶液（组分D）加入含有NADP / NADPH的测试样品的孔中。在室温下孵育10至15分钟，然后加入25μL中和溶液（组分E）以中和NADPH提取物，如说明书中的表3和4中所述。

    对于总NADP和NADPH（总量）：将25μLNADPP/ NADPH对照溶液（组分F）加入NADPH标准品的孔和含有NADP / NADPH的测试样品中。在室温下孵育10至15分钟，然后如说明书中的表3和4中所述添加25μL提取对照溶液（组分F）。

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。为方便起见，裂解缓冲液（组分G）可用于裂解细胞（详见附录）。

     

    5.3将75μL的NADP / NADPH反应混合物（来自步骤2.2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品（NADP / NADPH）的每个孔中，并测试样品（NADPH提取物）（来自步骤5.1）以使总量达到测定体积为150μL/孔。

    5.4在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

    5.5使用吸光度读板仪在460 nm处检测吸光度的增加。

     

    数据分析

            空白孔中的吸光度（仅PBS缓冲液）用作对照，并从具有NADPH反应的那些孔的值中减去。

    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法) 货号15274

    图1. Amplite™比色NADP / NADPH比率分析试剂盒用于使用SpectraMax酶标仪（Molecular devices）测量白色/透明96孔微量培养板中的总NADP / NADPH量和NADP / NADPH比率。

    A-总NADPH和NADP剂量反应：孵育1小时可检测到低至0.03μM的总NADPH。

    B-NADP / NADPH比例：用或不用NADP提取溶液处理等量的NADP和NADPH混合物15分钟，然后在室温下用提取溶液中和。 在460nm读取信号。 NADP / NADPH摩尔比基于图1B中所示的吸光度计算。

     

    附录：使用组分G（NAD / NADH裂解缓冲液）的测试样品制剂

    1.植物细胞样品：

    用裂解缓冲液以200mg / mL均化，并以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测试。

     

    2.细菌样品：

    离心收集细菌细胞（（10,000 g，0°C，15 min）。使用约1亿至1千万细胞/ mL裂解缓冲液，将处理后的溶液在室温下保持15分钟。以2500 rpm离心5分钟， 用上清液进行试验。

     

    3.哺乳动物细胞样本：

    从平板孔中取出培养基，每1-5百万个细胞使用约100μL裂解缓冲液（或在96孔细胞培养板中使用50-100μL/孔），并将处理过的溶液在室温下保持15分钟。 直接使用细胞裂解液或以1500 rpm离心5分钟，使用上清液进行测试。

     

    4.组织样品：

    称取约20mg组织，用冷PBS洗涤。 在微量离心管中用400μl裂解缓冲液均化。 以2500rpm离心5-10分钟，使用上清液进行测定。

     

    试剂应用文献

    Impact of Genetic Reduction of NMNAT2 on Chemotherapy-Induced Losses in Cell Viability In Vitro and Peripheral Neuropathy In Vivo
    Authors:     Slivicki, Richard A and Ali, Yousuf O and Lu, Hui-Chen and Hohmann, Andrea G
    Journal:     PloS one (2016): e0147620

    NMNAT2: HSP90 Complex Mediates Proteostasis in Proteinopathies
    Authors: Ali, Yousuf O and Allen, Hunter M and Yu, Lei and Li-Kroeger, David and Bakhshizadehmahmoudi, Dena and Hatcher, Asante and McCabe, Cristin and Xu, Jishu and Bjorklund, Nicole and Taglialatela, Giulio and others
    Journal: PLoS Biol (2016): e1002472

    ACLY and ACC1 Regulate Hypoxia-Induced Apoptosis by Modulating ETV4 via α-ketoglutarate
    Authors: Keenan, Melissa M and Liu, Beiyu and Tang, Xiaohu and Wu, Jianli and Cyr, Derek and Stevens, Robert D and Ilkayeva, Olga and Huang, Zhiqing and Tollini, Laura A and Murphy, Susan K and others
    Journal: PLoS Genet (2015): e1005599

    Analysis of the nicotinamide phosphoribosyltransferase family provides insight into vertebrate adaptation to different oxygen levels during the water-to-land transition
    Authors: Fang, Chengchi and Guan, Lihong and Zhong, Zaixuan and Gan, Xiaoni and He, Shunping
    Journal: FEBS journal (2015): 2858–2878

    Metformin-induced energy deficiency leads to the inhibition of lipogenesis in prostate cancer cells
    Authors: Loubière, Camille and Goiran, Thomas and Laurent, Kathiane and Djabari, Zied and Tanti, Jean-Frančois and Bost, Frédéric
    Journal: Oncotarget (2015): 15652

    Prediction of intracellular metabolic states from extracellular metabolomic data
    Authors: Aurich, Maike K and Paglia, Giuseppe and Rolfsson, Ottar and Hrafnsdóttir, Sigrún and Magnúsdóttir, Manuela and Stefaniak, Magdalena M and Palsson, Bernhard O and Fleming, Ronan MT and Thiele, Ines
    Journal: Metabolomics (2015): 603–619

     

    参考文献

    Enhanced metabolic activities for ATP production and elevated metabolic flux via pentose phosphate pathway contribute for better CIK cells expansion
    Authors: Weiwei Zhang, Huimin Huang, Haibo Cai, Wen-Song Tan
    Journal: Cell proliferation (2019)

    Soluble α-Klotho treatment protects adenine-induced uremia rats from sciatic nerve damage
    Authors: Yingdan Zhao, Jun Ma, Bo Gu, Yang Yi, Hanqing Wang, Zhiyong Guo
    Journal: Biomedical Research (2018)

    Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
    Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
    Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

    Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
    Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
    Journal: Fermentation (2017): 61

    Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
    Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
    Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

    MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
    Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
    Journal: Oncogene (2017)

    Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
    Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
    Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

    Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
    Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
    Journal: Biochemistry (2017)

    Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
    Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
    Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

    A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
    Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
    Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

     

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    说明书
    Amplite NADP/NADPH比率检测试剂盒(比色法).pdf

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15260-AAT Bioquest荧光染料

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    上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法)

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法)

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15260 货号 15260 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
    规格 400 Tests 价格 3924
    Ex (nm) 575 Em (nm)
    分子量 溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒（比色法）是AAT Bioquest研发的检测NADP+/NADPH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP +）是细胞中发现的两种重要的辅因子。NADH是NAD +的还原形式，NAD +是NADH的氧化形式。 NAD形成NADP，通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的2’位置。NADP用于合成代谢生物反应，例如脂肪酸和核酸合成，其需要NADPH作为还原剂。在叶绿体中，NADP是在光合作用的初步反应中重要的氧化剂。通过光合作用产生的NADPH用作卡尔文光合作用循环中生物合成反应的还原能力。传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定通过监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化来完成。该方法具有低灵敏度和高干扰，因为该测定在需要昂贵的石英微孔板的UV范围内进行。

    Amplite™比色总NADP和NADPH检测试剂盒为敏感检测NADP和NADPH提供了一种便捷的方法。 系统中的酶特异性识别酶循环反应中的NADP / NADPH，其显着提高了检测灵敏度。 此外，该测定具有非常低的背景，因为其在较长波长范围内运行，这显著降低了来自生物样品的干扰。 该实验证明了高灵敏度和低干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒。

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15260

    Amplite™比色总NADP和NADPH分析试剂盒提供灵敏的一步法分析，可在100μL分析体积（100 nM）内检测少至10皮摩尔的NADP（H）。 该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且容易适应自动化而无需分离步骤。 其信号可通过吸光度酶标仪在~575nm或~570nm至~605nm的吸光度比下轻松读取，以提高测定灵敏度。 如果需要更高的灵敏度，建议使用Cat#15259或15264。

     

    适用仪器

    光吸收酶标仪  
    推荐孔板： 透明底板

    产品说明书

    96孔板测定示例

    概述

    准备NADP / NADPH反应混合物（50μL）

    加入NADPH标准品或测试样品（50μL）

    在室温下孵育15分钟–2小时

    监测575±5nm处的吸光度强度

    注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

     

    操作方法

    1.准备NADPH原液：

    将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品（组分C）的小瓶中，得到1mM（1nmol / L）NADPH储备溶液。

    注意：未使用的NADPH原液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

    2.制备NADP / NADPH反应混合物：

    将10mL NADP / NADPH传感器缓冲液（组分B）加入NADP / NADPH再循环酶混合物（组分A）的瓶中，并充分混合。

    注意：这种NADP / NADPH反应混合物足以用于两个96孔板。 未使用的NADP / NADPH混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

    3.准备NADPH标准品的连续稀释液（0至10μM）：

    3.1将10μLNADPH储备溶液（来自步骤1）加入990L PBS缓冲液中以产生10M（10pmol / L）NADPH标准溶液。

    注意：稀释的NADPH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

    3.2取200μL10μMNADPH标准溶液进行1：3连续稀释，得到NADPH标准品的3,1,0.3,0.1,0.03,0.01,0.003和0μM连续稀释液。

    3.3如表1和表2所述，将NADPH标准品和含有NADP / NADPH的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微孔板中

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。

     

    表1在白色/透明底96孔微孔板中的NADPH标准品和测试样品的布局

    BL

    BL

    TS

    TS

    NS1

    NS1

    ….

    ….

    NS2

    NS2

     

     

    NS3

    NS3

     

     

    NS4

    NS4

     

     

    NS5

    NS5

     

     

    NS6

    NS6

     

     

    NS7

    NS7

     

    		  

    注意：NS = NADPH标准，BL =空白对照，TS =测试样品。

     

    表2.每个孔的试剂组成

    NADPH Standard

    Blank Control

    Test Sample

    Serial Dilutions*: 50 μL

    PBS: 50 μL

    50 μL 

    注意：将连续稀释的NADPH标准品从0.003μM至3μM加入NS1至NS7的孔中，一式两份。 高浓度的NADPH（例如，>100μM，最终浓度）可能由于NADPH传感器的过度氧化而导致信号降低。

     

    4.在上清液中运行NADP / NADPH测定：

    4.1将50μLNADPH反应混合物（来自步骤2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3.3），使总NADPH测定体积为100μL/孔。

    注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLNADPH反应混合物。

    4.2在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

    4.3用吸光度读数仪在575±5 nm或~570 nm至~605 nm的吸光度比下观察吸光度的增加，以提高检测灵敏度。

    注意1：对于NADP / NADPH比率测量，建议使用试剂盒15263。

    注意2：对于基于细胞的NADP / NADPH测量，建议使用ReadiUse™哺乳动物细胞裂解缓冲液* 5X *（Cat#20012）裂解细胞。

     

    数据分析

            空白孔中的吸光度（仅用PBS缓冲液）用作对照，并从NADPH反应孔的值中减去。 NADPH标准曲线如图1所示。

            注意：吸光度背景随时间增加，因此减去每个数据点的空白孔的吸光度非常重要。

    Amplite NADP+/NADPH检测试剂盒(比色法) 货号15260

    图1.使用NOVOStar酶标仪（BMG Labtech），在白色/透明底96孔板中用Amplite™比色总NADP和NADPH测定试剂盒测量NADPH剂量反应。 在孵育1小时（n = 3）时可以检测到低至100nM（10pmol /孔）的NADPH，而NADH没有响应。

     

    参考文献

    Comparative transcriptome analysis of a long-time span two-step culture process reveals a potential mechanism for astaxanthin and biomass hyper-accumulation in Haematococcus pluvialis JNU35
    Authors: Luodong Huang, Baoyan Gao, Manman Wu, Feifei Wang, Chengwu Zhang
    Journal: Biotechnology for Biofuels (2019): 18

    Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
    Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
    Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

    Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
    Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
    Journal: Fermentation (2017): 61

    Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
    Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
    Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

    MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
    Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
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    Journal: Biochemistry (2017)

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    Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
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    A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
    Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
    Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

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    Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
    Journal: Aging cell (2016): 416–427

     

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    Amplite NADPH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15262-AAT Bioquest荧光染料

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    Amplite NADPH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光

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    Ex (nm) 571 Em (nm) 585
    分子量 溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

    Amplite NADPH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光是美国AAT Bioquest研发的检测NADPH的试剂盒，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP +）是细胞中发现的两种重要的辅因子。 NADH是NAD +的还原形式，NAD +是NADH的氧化形式。 NAD形成NADP，通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的2’位置。 NADP用于合成代谢生物反应，例如脂肪酸和核酸合成，其需要NADPH作为还原剂。 在叶绿体中，NADP是在光合作用的初步反应中重要的氧化剂。 通过光合作用产生的NADPH用作卡尔文光合作用循环中生物合成反应的还原能力。 传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定通过监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化来完成。 该方法具有低灵敏度和高干扰，因为该测定在需要昂贵的石英微孔板的UV范围内进行。

    这种Amplite 荧光NADPH检测试剂盒为检测NADPH提供了一种便捷的方法。 系统中的酶特异性识别酶再循环反应中的NADPH。 此外，该测定具有非常低的背景，因为其在红色可见范围内运行，这显着降低了来自生物样品的干扰。

    Amplite NADPH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15262

    Amplite 荧光NADPH检测试剂盒提供灵敏的一步法检测，在100μL检测体积（1μM;图1）中检测少至100皮摩尔的NADPH。 该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。 其信号可通过Ex / Em = 540/590 nm的荧光酶标仪或~576 nm的吸光度酶标仪轻松读取。 该测定试剂盒已用于筛选使用NADP / NADPH作为辅因子的酶活性。 它还被用于在基于细胞的测定中灵敏检测NADPH。 与其他商业试剂盒相比，该试验具有更高的信号/背景比。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的NADPH检测试剂盒。 

     

    适用仪器

    荧光酶标仪  
    激发： 540nm
    发射 590nm
    推荐孔板： 黑色孔板

    产品说明书

    96孔板测定示例

    概述

    准备NADPH反应混合物（50μL）

    加入NADPH标准品或测试样品（50μL）

    在室温下孵育15分钟 –  2小时在Ex / Em = 540/590 nm处

    监测荧光增加

    注意：在开始实验之前，在室温下解冻每个试剂盒组分中的一个。

     

    操作方法

    1.准备NADPH原液：

    将200μLPBS缓冲液加入到NADPH标准品（组分C）的小瓶中以制备1mM（1nmol / L）NADPH储备溶液。

    注意：未使用的NADPH原液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

     

    2.准备NADPH反应混合物：

    将10mL Amplite™NADPH测定缓冲液（组分B）加入NADPH回收酶混合物（组分A）的瓶中，并充分混合。

    注意：这种NADPH反应混合物足以用于两个96孔板。 未使用的NADPH反应混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

     

    3.准备NADPH标准品的连续稀释液（0至100μM）：

    3.1将50μLNADPH储备液（来自步骤1）加入450μLPBS缓冲液（pH 7.4）中，得到100μM（100pmol / L）NADPH标准溶液。

    注意：稀释的NADPH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

    3.2取200μL100μMNADPH标准溶液，进行1：3连续稀释，得到30,10,3,1,0.3,0.1和0μM的NADPH标准品系列稀释液。

    3.3如表1和2中所述，将NADPH标准品和含有NADPH的测试样品的系列稀释液加入到实心黑色96孔微量培养板中。

    注意：根据需要准备细胞或组织样本。

     

    表1实心黑色96孔微孔板中NADPH标准品和测试样品的布局

    BL

    BL

    TS

    TS

    NS1

    NS1

    ….

    ….

    NS2

    NS2

     

     

    NS3

    NS3

     

     

    NS4

    NS4

     

     

    NS5

    NS5

     

     

    NS6

    NS6

     

     

    NS7

    NS7

     

    		  

    注意：NS = NADPH标准，BL =空白对照，TS =测试样品

     

    表2每个孔的试剂组成

    NADPH Standard

    Blank Control

    Test Sample

    Serial Dilutions*: 50 μL

    PBS: 50 μL

    50 μL 

    *注意：将连续稀释的NADPH标准品（0.1μM至100μM）加入NS1至NS7的孔中，一式两份

     

    4.在上清液反应中运行NADPH测定：

    4.1将50μLNADPH反应混合物（来自步骤2）加入NADPH标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3.3），使总NADPH测定体积为100μL/孔。

    注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLNADPH反应混合物。

    4.2在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

    4.3在Ex / Em = 530-570 / 590-600nm（（最佳Ex / Em = 540 / 590nm）下用荧光板读数器监测荧光增加。

    注意1：平板的内容物也可以转移到白色透明底板上，用吸光度酶标仪在576±5nm波长下读数。 与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

    注意2：对于基于细胞的NADPH测量，建议使用ReadiUse™哺乳动物细胞裂解缓冲液* 5X *（cat＃20012）裂解细胞。

     

    数据分析

            空白孔中的荧光（仅用PBS缓冲液）用作对照，并从具有NADPH反应的那些孔的值中减去。 NADPH标准曲线如图1所示。

            注意：荧光背景随时间增加，因此减去每个数据点的空白孔的荧光强度值是很重要的。

    Amplite NADPH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15262

    图1.使用NOVOStar酶标仪（BMG Labtech），在96孔黑色板中用Amplite 荧光NADPH测定试剂盒测量NADPH剂量反应。 低至1μM（100pmol /孔）可以在孵育1小时（n = 3）时检测到NADPH，而NADP没有响应。

     

    参考文献

    Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
    Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
    Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

    Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
    Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
    Journal: Fermentation (2017): 61

    Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
    Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
    Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

    MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
    Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
    Journal: Oncogene (2017)

    Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
    Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
    Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

    Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
    Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
    Journal: Biochemistry (2017)

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    Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

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    Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
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    Authors: Kenichi Shimada, Miki Hayano, Nen C Pagano, Brent R Stockwell
    Journal: Cell chemical biology (2016): 225–235

     

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    ReadiUse 即用型NADPH再生试剂盒 货号15265-AAT Bioquest荧光染料

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    上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

    ReadiUse 即用型NADPH再生试剂盒

    ReadiUse 即用型NADPH再生试剂盒

    ReadiUse 即用型NADPH再生试剂盒 货号15265 货号 15265 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
    规格 1000 Tests 价格 3924
    Ex (nm) Em (nm)
    分子量 溶剂
    产品详细介绍

    简要概述

    ReadiUse 即用型NADPH再生试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测NADPH的试剂盒，黄嘌呤是在大多数人体组织和液体中发现的嘌呤碱。 许多兴奋剂来源于黄嘌呤，包括咖啡因，氨茶碱，IBMX，旁黄嘌呤，己酮可可碱，可可碱和茶碱，它们可以刺激心率，收缩力，高浓度的心律失常。 因此，检测生物样品中的黄嘌呤变化对于疾病诊断和治疗监测是重要的。 Amplite 比色黄嘌呤测定试剂盒为测量黄嘌呤提供了一种快速且超灵敏的方法。 它可以用方便的96孔或384孔微量滴定板格式进行。 黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶存在下氧化成尿酸释放过氧化氢，用吸光度酶标仪在576nm处用Amplite Red进行特异性测定。 使用Amplite 比色黄嘌呤测定试剂盒，在100μL反应体积中检测到低至1.2μM的黄嘌呤。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的ReadiUse 即用型NADPH再生试剂盒。 

    产品说明书

    样品实验方案 

    溶液配制

    1.储存溶液配制

    所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
    1.1 NADPH再生原液（2X）：
    通过将全部含量的测定缓冲液II（组分B）和500X葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（组分C）加入测定缓冲液I（组分A）中，制成2X NADPH再生原液。

     

    样品操作及实验分析

    将等体积的2X NADPH Regenerate储备溶液添加到所需的测定系统中。 注意：2.5毫升测定缓冲液I（组分A），2.5毫升测定缓冲液II（组分B）和10 µL 500X葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（组分C）足以用于1个板。

     

    参考文献

    Specialized Enzymes in Insect Lipid Metabolism
    Authors: Marina Ann MacLean
    Journal: (2019)

    Functional characterization of CYP4G11—a highly conserved enzyme in the western honey bee Apis mellifera
    Authors: Bernarda Calla, Marina MacLean, Ling-Hsiu Liao, Inderpreet Dhanjal, Claus Tittiger, Gary J Blomquist, May R Berenbaum
    Journal: Insect molecular biology (2018)

    exo-Brevicomin biosynthesis in the fat body of the mountain pine beetle, Dendroctonus ponderosae
    Authors: Minmin Song, Andrew Gorzalski, Trang T Nguyen, Xibei Liu, Christopher Jeffrey, Gary J Blomquist, Claus Tittiger
    Journal: Journal of chemical ecology (2014): 181–189

    exo-Brevicomin biosynthetic pathway enzymes from the Mountain Pine Beetle, Dendroctonus ponderosae
    Authors: Minmin Song, Patrick Delaplain, Trang T Nguyen, Xibei Liu, Leah Wickenberg, Christopher Jeffrey, Gary J Blomquist, Claus Tittiger
    Journal: Insect biochemistry and molecular biology (2014): 73–80

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    Authors: Yue Qiu, Claus Tittiger, Claude Wicker-Thomas, Gaelle Le Goff, Sharon Young, Eric Wajnberg, Thierry Fricaux, Nathalie Taquet, Gary J Blomquist, René Feyereisen
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