Cell Meter 细菌活性检测试剂盒

简要概述

        Cell Meter 细菌活力检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌活力的试剂盒，AAT Bioquest的Mycolight 细菌活力检测试剂盒提供革兰氏阳性和阴性细菌细胞中细菌活力的双色荧光检测。该试剂盒使用我们的绿色荧光核酸染色MycoLight Green和红色荧光核酸染色碘化丙啶的混合物。单独使用时，MycoLight Green染色剂通常标记人群中的所有细菌（活的和死的）。相比之下，碘化丙锭仅渗透膜受损的细菌，当存在两种染料时，导致MycoLight Green染色荧光减少。因此，使用MycoLight Green和碘化丙锭染料的适当混合物，具有完整细胞膜的活细菌发出绿色荧光，而具有受损膜的死亡或垂死细菌产生红色荧光。 Mycolight 细菌活力检测试剂盒是一种强大的工具，用于监测细菌群体的活力，作为细胞膜完整性的函数。可以在510-530nm（FITC滤光器）和600-660nm（德克萨斯红色滤光器）下荧光测量染色细胞，激发波长为常见的激发光源488nm。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 细菌活力检测试剂盒。 

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产品说明书

操作方法

溶液配制

染料工作溶液（250X）：
在微量离心管中加入等体积的MycoLight Green（组分A）和碘化丙啶（组分B）并充分混合。 注意：每次准备新鲜的工作溶液。

样品实验方案

1.在任何适当的培养基中培养细菌从对数期培养物中获得健康细菌的结果。在0.85％NaCl或适当的缓冲液中将细菌培养物稀释至~106至108个细胞/ mL。准备足够的悬浮液，为流式细胞仪每次测试提供500μL，或为96孔板提供每次测试100μL。注意：在染色细菌之前去除生长培养基的痕迹。单次洗涤步骤通常足以从细菌悬浮液中除去显着痕量的干扰介质组分。建议不要使用磷酸盐清洗缓冲液，因为它们会降低染色效率。

2.向每mL细菌悬浮液中加入4μL染料工作溶液（250X）。充分混合并在室温下孵育15分钟。避光。

3.可以通过荧光显微镜，荧光酶标仪或流式细胞术分析染色的细菌细胞。

4.来自活细菌和死细菌的荧光可以与任何标准荧光素长通滤光片组同时观察。或者，可以用荧光素和德克萨斯红过滤器组分别观察活的（绿色荧光的）和死的（红色荧光的）细胞。

数据分析

图1.用Cell Meter 细菌活力测定试剂盒（Cat＃22400）染色的大肠杆菌HST08的荧光图像。 具有完整细胞膜的活细菌显示绿色荧光（左），而具有受损膜的70％酒精杀死的死细菌（右）显示红色荧光。 活的和死的大肠杆菌细菌细胞也在混合群体中可视化（中）。

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 红色荧光

简要概述

我们的Cell Meter™检测试剂盒是一套用于监测细胞生存力的工具。有多种参数可用于监测细胞活力。该试剂盒使用专有的非荧光染料，进入活细胞后可增强红色荧光。该染料是疏水性化合物，易于渗透完整的活细胞。细胞内酯酶对非荧光底物的水解产生了强烈荧光的亲水产物，该产物被很好地保留在细胞质中。酯酶活性与活细胞的数量成正比，因此与由酯酶催化的荧光底物水解产生的产物的荧光强度直接相关。黑色壁板中生长的细胞可以在不到两个小时的时间内进行染色和定量。该测定比基于四唑鎓盐或基于Alarmar Blue™的测定更稳定。它可以很容易地适用于各种荧光平台中的高通量检测，例如微孔板检测，免疫细胞化学和流式细胞仪。它可用于多种研究，包括细胞粘附，趋化性，多药耐药性，细胞生存力，细胞凋亡和细胞毒性。该套件为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。它适用于增殖和非增殖细胞，可用于悬浮细胞和贴壁细胞。荧光指示剂具有与Cy3 / TRITC滤光片组兼容的光谱特性。

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产品说明书

简要概述

1. 用测试化合物进行细胞准备工作

2. 去掉培养基

3. 加入CytoCalcein™Red AM工作溶液（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）

4. 室温下孵育30min-1h

5. 监测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的荧光强度（底部读取模式）

储备溶液配制
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1. CytoCalcein™Red AM储备溶液：
向CytoCalcein™Red AM小瓶（组分A）中加入20 µL DMSO（组分B），并充分混合以制成CytoCalcein™Red AM储备液。 注意：20 µL CytoCalcein™Red AM储备液足以装满一块板。 避光。 为了存放，请将管子紧紧密封。 注意：如果试管密封严密，可将未使用的CytoCalcein™Red储备液分装并在<-20℃下保存1个月。 避免重复冻融循环。

工作溶液配制
将全部内容物（20 µL）的CytoCalcein™Red AM储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分C）中，并充分混合以制成CytoCalcein™Red AM工作溶液。 注意：此CytoCalcein™Red AM工作溶液不稳定，请立即使用。 注意：如果这些细胞（例如CHO细胞）含有会导致荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白，则应准备丙磺舒储备溶液并以 终孔内工作浓度1加入到缓冲液中 -2.5毫米 分装并保存未使用的丙磺舒储备溶液于≤-20 ℃。

操作步骤

1. 根据需要用测试化合物处理细胞。 注意：添加化合物之前不必洗涤细胞。 但是，如果测试的化合物对血清敏感，则可以在添加化合物之前将生长培养基和血清因子吸掉。 加入100 µL /孔（96孔板）和25 µL /孔（384孔板）的1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或抽吸后选择的缓冲液。 或者，细胞可以在无血清培养基中生长。

2. 去除生长培养基

3. 加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的CytoCalcein™Red AM工作溶液。

4. 在避光的条件下，在室温或37°C下孵育板30分钟至1小时。 注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 对于非贴壁细胞，建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟。

5. 使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）下监控荧光强度。

数据分析

从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值即可得到基线校正值。 然后，绘制标准读数，以获得标准曲线和方程式。 此方程式可用于计算HeLa细胞样品。 我们建议您使用在线线性回归计算器，该计算器可在以下网址找到：https://www.aatbio.com/tools/linear-logarithmic-semi-log-regression-online-calculator

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒 绿色荧光

简要概述

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活性检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter细胞活性检测试剂盒 绿色荧光 使用一种专属型染料，一旦进入活细胞中，其荧光强度增强。这种染料是一种疏水性复合物，可以轻易地进入完整的活细胞。通过细胞内酯酶水解弱荧光性底物，产生具有强烈荧光的亲水性产物，并且可以在保持在细胞质中。这种酯酶的活性与活细胞数量成比例关系，因此酯酶水解荧光底物形成的产物的荧光强度与活细胞数量相关。生长在培养板中的细胞可以被染料，且在不到两小时内就可以完成定量分析。本检测法比四唑盐或者基于Alarmar Blue的检测更加强大、稳定。它可以用于许多荧光实验平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。它在许多研究中非常有用，包括细胞粘附性、趋化作用、药抗性、细胞活性、细胞凋亡和细胞毒性研究。本试剂盒提供所有必需组分和检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂100ul，本试剂盒提供的试剂足以进行500次检测；384微孔板中，每孔加试剂25ul，本试剂盒提供的试剂足以进行2000次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 细胞活性检测试剂盒。 

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样品实验方案

简要概述

用测试化合物制备细胞
添加相同体积的CytoCalcein Green，AM工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
在室温或37°C孵育1小时
检测荧光强度

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
CytoCalcein Green，AM原液：
将20μLDMSO（组分B）加入到CytoCalcein green，AM（组分A）的小瓶中，并充分混合以制备CytoCalcein green，AM储备溶液。 注意：20μL的CytoCalcein green，AM原液足以用于一个平板。 避光。 存放时，密封管。

2.工作溶液配制

将全部内容物（20μL）的CytoCalcein green，AM储备溶液加入10mL测定缓冲液（组分C）中，并充分混合以制备CytoCalcein green，AM工作溶液。 这种CytoCalcein green，AM工作溶液在室温下稳定至少2小时。 注意：如果CHO细胞等细胞含有促进荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白，应制备丙磺舒储备溶液，并加入到加样缓冲液中， 终孔内工作浓度范围为1到2.5 mM。 将未使用的丙磺舒储备溶液等分并储存在≤-20℃。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.根据需要用测试化合物处理细胞。注意：在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔（96孔板）和25μL/孔（384孔板）的1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。

2.添加100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein green，AM工作溶液。

3.将板在室温或37°C孵育1小时，避光。 （孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到了结果，孵育时间少于4小时）。注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。注意：装载后请勿清洗电池。注意：对于非粘附细胞，建议在孵育后以800 rpm的速度离心细胞板2分钟。

4.用Ex / Em = 490 / 525nm的荧光板读数器监测荧光强度。

Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒

简要概述

        Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的脂肪酸检测试剂盒，脂肪酸摄取是治疗许多人类疾病的重要治疗靶标。 Screen Quest 荧光脂肪酸摄取分析试剂盒为测量含有脂肪酸转运蛋白的细胞中的脂肪酸提供了一种简单而灵敏的方法。 该试剂盒使用专有的十二烷酸荧光脂肪酸底物。 该脂肪酸摄取测定试剂盒可在具有底读模式或FITC通道的任何荧光酶标仪上进行。 该测定可以在96孔或384孔微量滴定板中以简单的混合和读取程序进行，并且易于适应高通量筛选应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法脂肪酸摄取检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中培养细胞4-6小时
2.将细胞转移到无血清培养基中1小时，并根据需要处理细胞
3.加入100μL/孔的脂肪酸染料加载溶液
4.监测荧光增加在Ex / Em = 485/515 nm处立即进行动力学或在孵育60分钟后进行终点读数（底部读取模式）

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
TF2-C12脂肪酸原液：
将20μLDMSO（组分C）加入到TF2-C12脂肪酸（组分A）的小瓶中并充分混合。 注意：20μL荧光脂肪酸底物原液足以用于一个平板。 如果将管密封并避光，可以将未使用的荧光脂肪酸底物储备溶液等分并在<-20℃下储存长达两个月。 避免反复冻融循环

2.工作溶液配制

脂肪酸染料加载溶液：
将20μLTF2-C12脂肪酸储备溶液加入10mL分析缓冲液（组分B）中并充分混合。 注意：10毫升脂肪酸染料加载溶液足以用于一个平板; 为每个平板做准备并进行实验。

操作步骤

1.根据需要用测试化合物处理细胞。

2.从培养箱中取出化合物处理的细胞板，加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）（包括空白孔）的脂肪酸染料加载溶液。

3.使用底部读取模式，使用荧光酶标仪在Ex / Em = 485 / 515nm（在495nm处截止）测量荧光信号。 注意：对于动力学读数：立即以20秒间隔读取荧光强度30-60分钟。 注意：对于终点读数：读取30-60分钟孵育结束时的荧光强度。

数据分析

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒（活细胞/死细胞） *绿色/红色双重荧光*

简要概述

        Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞活性检测试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter细胞活力检测试剂盒 *绿色/红色双重荧光* 使用两种非荧光性指示剂：Calcein AM，用于活细胞；一种非细胞渗透性的DNA结合染料，用于细胞膜不完整的死细胞。Calcein AM是一种疏水性复合物，可以轻易地渗透进入完整的活细胞，通过酯酶的水解作用，产生强烈的荧光。通过细胞内酯酶水解非荧光性Calcein AM，形成具有强烈荧光的亲水性Calcein，并且保留在细胞质中。这种酯酶的活性与活细胞数量成比例关系。DNA结合染料极性非常大，不能渗透进入具有完整细胞膜的活细胞，它只有在与死细胞的DNA结合的情况下才发出荧光。生长在培养板中的细胞可以被染料，且在不到两小时内就可以完成定量分析。本检测法比其它活细胞检测法更加强大、稳定。它可以用于许多荧光实验平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。本试剂盒提供所有必需组分和检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂100ul，本试剂盒提供的试剂足以进行100次检测；384微孔板中，每孔加试剂25ul，本试剂盒提供的试剂足以进行400次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 细胞活性检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞
2.加入相同体积的CytoCalcein Green / Propidium Iodide染料加工溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温或37°C孵育1小时
4.在强度下监测荧光（底部读取模式）Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）和540 / 620nm（截止= 590nm），带有FITC滤光片（细胞存活）的荧光显微镜和TRITC滤光片 （细胞死亡），或FL1和FL2通道的流式细胞仪。

溶液配制

1.储存溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
CytoCalcein 绿色原液：
将20μLDMSO（组分C）加入到CytoCalcein Green（组分A）的小瓶中并充分混合以制备CytoCalcein Green原液。 避光。 注意：20μL的CytoCalcein Green原液足以用于一个平板。 存放时，密封管。

2.工作溶液配制

将全部内容物（20μL）的CytoCalcein Green储备溶液和20μL碘化丙啶（组分B）加入10mL测定缓冲液（组分C）中并充分混合以制备CytoCalcein Green /碘化丙锭染料 – 工作溶液。 CytoCalcein Green / Propidium Iodide染料加工溶液在室温下稳定至少2小时。 注意：如果CHO细胞等细胞含有导致荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白，应制备丙磺舒储备溶液，并加入到加样缓冲液中， 终孔内工作浓度范围为1到2.5 mM。 未使用的丙磺舒储备溶液可以在≤-20℃下储存。 由于染色条件可能因细胞类型的不同而异，因此建议单独确定组分A和B的适当浓度。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.用酶标仪或荧光显微镜进行细胞活力测定：

1.1根据需要用测试化合物处理细胞。注意：在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔/ 96孔板和25μL/孔/ 384孔板的1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。

1.2加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein TM Green / Propidium Iodide染料加工溶液。

1.3将板在室温或37°C孵育30分钟至1小时，避光。 （孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到了结果，孵育时间少于4小时）。注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。装载后请勿清洗细胞。对于非粘附细胞，建议在孵育后以800rpm离心细胞板2分钟，然后关闭制动器。

1.4使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）和Ex / Em = 540 / 620nm（截止= 590nm，细胞死亡）或荧光下监测荧光强度用于活细胞的FITC过滤器或用于死细胞的TRITC过滤器的显微镜。

2.使用流式细胞仪进行细胞活力测定：

2.1用测试化合物处理细胞一段所需的时间。

2.1离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

2.3将细胞重悬于500μL的CytoCalcein™Green / Propidium Iodide染料加工溶液中。

2.4在室温或37°C孵育10至30分钟，避光。

可选：用HHBS或您选择的缓冲液清洗细胞。 将细胞重悬于500μLHHBS中，每管加入1-5×10⁵个细胞。

2.5用流式细胞仪在Ex / Em = 490 / 525nm和Ex / Em = 490 / 620nm（FL1和FL2通道）下监测荧光强度。

数据分析

Cell Meter 细胞自噬检测荧光成像试剂盒

简要概述

自噬是动物细胞内大分子降解的主要途径之一。 自噬过程涉及将细胞质和细胞内细胞器隔离在称为自噬体的膜结合液泡中，将自噬体与溶酶体融合，然后降解被隔离的物质。 Cell Meter 细胞自噬检测荧光成像试剂盒采用Autophagy Super Blue 作为特异性自噬标记物来分析自噬活性。 该测定法经过优化，可直接检测分离和粘附细胞中的自噬。 Cell Meter 细胞自噬检测荧光成像试剂盒针对荧光显微镜进行了优化。 它提供了比其他市售自噬探针更高的选择性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 细胞自噬检测荧光成像试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用您的测试化合物以1-2×10⁴个细胞/孔的密度制备细胞
2.添加自噬Super Blue 工作溶液
3.在37°C孵育15-60分钟
4.用洗涤缓冲液洗涤细胞
5.使用DAPI滤光片组检测在Ex / Em = 330/520 nm（截止= 475 nm）处的荧光

溶液配制

 工作溶液配制

将20μL500X自噬Super Blue （组分A）添加到10 mL染色缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成Autophagy Super Blue 工作溶液，避光。 注意：20μL500X自噬Super Blue （组分A）足以容纳一个96孔板。

实验步骤

1.根据您的特定诱导方案将细胞培养至 适合自噬诱导的密度（约1-2×10⁴细胞/孔/ 96孔板）。同时，在每种标记条件下，以与诱导种群相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞种群。

2.除去培养基。

3.在每孔中加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的自噬Super Blue 工作溶液。

4.将细胞在37°C，5％CO₂培养箱中孵育15至60分钟。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。

5.用洗涤缓冲液（组分C）洗涤细胞3-4次，然后向每个孔中添加100 µL洗涤缓冲液（组分C）。注意：建议增加标记浓度或孵育时间，使染料在细胞未充分染色的情况下积累。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 330/520 nm（Cutoff = 475 nm）上检测荧光强度，或使用带有DAPI滤光片组的荧光显微镜。

图示

图1.通过自噬在HeLa细胞中诱导自噬Super Blue 标记的囊泡。 将HeLa细胞在常规DMEM培养基（左：对照）中或在含5％血清的1X HBSS缓冲液中（右：自噬处理）孵育16小时。对照细胞和处理过的细胞均在37°C，5％CO2培养箱中与Autophagy Super Blue 工作溶液一起孵育20分钟，并用洗涤缓冲液洗涤3次。 立即在带有DAPI通道（蓝色）的荧光显微镜下对细胞成像。 细胞核用Nuclear Gree LCS1（绿色）染色。

简要概述

产品基本信息

货号：35000

产品名称：Cell Meter 荧光法细胞电位检测试剂盒

规格：100 Tests

保质期：12个月

适用仪器

产品介绍

几乎所有质膜在其上都具有电势，内部通常相对于外部为负。信号是通过打开或关闭膜上某一点的离子通道而产生的，从而在膜电位上产生局部变化。电场的这种变化会很快受到膜中相邻或较远的离子通道的影响。然后，由于电势变化，这些离子通道可以打开或关闭，从而产生信号。 Cell Meter 荧光细胞电位检测试剂盒使用FRET对（VSB 405和VSR 555）来检测细胞膜电位的变化。亲脂性VSB 405主要位于脂质膜的外层，而VSR 555的定位对细胞膜电位敏感。在静止状态下，的内层具有相对负的电势，从而使VSR 555主要位于细胞膜的外层附近，因此靠近蓝色荧光VSB405，从而导致从蓝色（VSB 405）到蓝色荧光的有效转移。红色（VSR 555）。当细胞去极化时，VSR 555易位到细胞膜的内层，从而分离FRET对并破坏FRET。蓝色/红色荧光比与细胞电位成正比。该检测法可用于筛选调节离子通道的化合物。

图示

图1.使用Cell Meter 荧光细胞电位检测试剂盒检测HeLa细胞中的膜电位。根据试剂盒说明对HeLa细胞进行染色，并用去极化溶液（164.5 mM KCl，2 mM CaCl2、1 mM MgCl2、10 mM葡萄糖，20 mM HEPES，pH 7.4）刺激。使用FlexStation 3（分子设备）记录响应。

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

简要概述

        Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 3/7的活性而用于细胞凋亡检测的。因为Caspase-3 (CPP32/apopain)在细胞凋亡的起始过程中发挥着重要作用，因此其作为一个值得信赖的细胞凋亡指示剂广泛地被大家所接受。Caspase 3具有特异性的底物多肽识别序列，即天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)。本试剂盒用Z-DEVD-Rh 110-DVED-Z作为Caspase-3活性的荧光指示剂。通过Caspase 3作用，断裂Rh 110多肽，产生具有强烈绿色荧光的Rh 110，检测其在520-530 nm处的荧光强度，其激发光波长在340~350nm处。本试剂盒提供所有必需组分和检测方案。本检测法强大、稳定，能够用于多种荧光研究平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。使用时96孔板时，每孔用100ul试剂，本试剂盒提供的试剂足够进行200次检测；用384微孔板时，每孔加25ul试剂，本试剂盒提供的试剂足够进行800次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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产品说明书

样本实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 3/7工作溶液
3.在室温下孵育1小时
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光强度（截止= 515 nm）

工作溶液配制

将50μLCaspase3/7底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 3/7工作溶液。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37℃，5％CO₂，培养箱中孵育所需的一段时间（对于用喜树碱处理的Jurkat细胞，4-6小时）以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 3/7工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 3/7工作溶液10分钟后，将1μL1mM Ac-DEVD-CHO caspase 3/7抑制剂加入到选定的样品中，以确认抑制半胱天冬酶3/7样活动。

5.以800rpm离心细胞板（特别是对于非贴壁细胞）2分钟（制动关闭）。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）下监测荧光强度。

数据分析