标签归档：atp

叶绿体ATP合酶相关抗体

发表于由

叶绿体ATP合酶相关抗体

叶绿体ATP合酶相关抗体（植物抗体专家PhytoAB）

引自-植物科学z前沿

ATP合酶在光合作用过程中通过电子传递链释放的能量，将质子穿过膜至ATP合成。其中ATP合酶包括9种蛋白：AtpA, AtpB, AtpC, AtpD, AtpE, AtpI, AtpF, AtpG, AtpH。它由两个复合物组成：CF1, CF0。其中，CF1包含α, β, γ, δ, ε五个亚基，分别由atpA,atpB, atpC, atpD, atpE基因编码；CF0包含IV/a, I/b, II/b’, III/c 四个亚基，分别由atpI, atpF, atpG, atpH基因编码。

在高等植物叶绿体中，atp基因定位于质体基因组和核基因组，并且被分为两个不同的clusters，分别是：the large atp operons 和 the small atp operons。

一、针对AtpA, AtpB, AtpC蛋白研究，我们研发了以下植物抗体：

注：Western Blot结果如上。PHY0010为AtpA抗体，免疫原为拟南芥AtpA (ATCG00120)靠近C端的多肽序列。上样蛋白：拟南芥类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.1 μg, 0.25 μg, 0.5 μg，用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

PHY0311为AtpA抗体，免疫原为拟南芥AtpA (ATCG00120)全长的重组蛋白。上样蛋白，上样量以及PAGE胶与PHY0010相同。

注：Western Blot结果如上。PHY0011A为AtpB抗体，免疫原为拟南芥AtpB (ATCG00480)靠近N端的多肽序列。上样蛋白：拟南芥类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.25μg, 0.5μg, 0.75μg，用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

PHY0312为AtpB抗体，免疫原为拟南芥AtpB (ATCG00480)全长的重组蛋白。上样蛋白：拟南芥类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg；用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

注：Western Blot结果如上。PHY0161为AtpC抗体，免疫原为拟南芥AtpC1 (AT4G04640)靠近N端的14个氨基酸多肽，此序列与AtpC2 (AT1G15700)同源性为93%。上样蛋白：1-3泳道为野生型拟南芥类囊体膜蛋白，4泳道为拟南芥突变体的类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg，4泳道上样量为0.5ug，用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

PHY0359为AtpC2抗体，免疫原为拟南芥AtpC2 (AT1G15700)靠近C端的多肽序列。上样蛋白：拟南芥类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg；用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

二、针对AtpD, AtpE, AtpG, AtpF, AtpH, AtpI蛋白研究，我们研发了以下的植物抗体：

注：Western Blot结果如上。PHY0314为AtpD抗体，免疫原为拟南芥AtpD (AT4G09650)全长的重组蛋白。上样蛋白：拟南芥类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg，用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

PHY0315为AtpE抗体，免疫原为免疫原为拟南芥AtpE (ATCG00470)全长的重组蛋白。上样蛋白：拟南芥类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.5μg, 1.25μg, 2μg；用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

PHY0170S为AtpG抗体，免疫原为拟南芥AtpG (AT4G32260)靠近N端的多肽序列。上样蛋白：1-3泳道为野生型拟南芥类囊体膜蛋白，4泳道为拟南芥突变体的类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg，4泳道上样量为0.5ug；用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

注：Western Blot结果如上。PHY0316为AtpF抗体，免疫原为拟南芥AtpF (ATCG00130)全长的重组蛋白。上样蛋白：拟南芥类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.1 μg, 0.25 μg, 0.5 μg，用15% SDS-Urea-PAGE电泳。

PHY0114A为AtpH抗体，免疫原为拟南芥AtpH (ATCG00140)的多肽序列。上样蛋白：拟南芥类囊体膜蛋白；1-3泳道上样量分别是0.25 μg, 0.5 μg, 1 μg，用Tricine-SDS-PAGE电泳。

Na+k+――ATP酶检测试剂盒,索莱宝,BC0060-50管/24样

发表于由

上海金畔生物科技有限公司提供Na+k+――ATP酶检测试剂盒,索莱宝,BC0060-50管/24样，可以访问官网了解更多产品信息。
Na+k+――ATP酶检测试剂盒,索莱宝,BC0060-50管/24样

询价
索莱宝

·  英文名称 : Na+K+——ATPase Assay KitAMP Content Assay Kit

·  别名 : Na+k+――ATP酶试剂盒 谷氨酸合成酶（GOGAT）测试盒,Na+k+――ATP酶测试盒

·  检测方法 : 可见分光光度法

 

 Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
      Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。
自备的仪器和用品：
      可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

浓度
规格 50管/24样
保存

ATP含量检测试剂盒,索莱宝,BC0300-100管/48样

发表于由

上海金畔生物科技有限公司提供ATP含量检测试剂盒,索莱宝,BC0300-100管/48样，可以访问官网了解更多产品信息。
ATP含量检测试剂盒,索莱宝,BC0300-100管/48样

询价
索莱宝

·  英文名称 : ATP Content Assay Kit

·  别名 : ATP含量测定试剂盒 ATP含量测试盒

·  检测方法 : 可见分光光度法

 

测定意义：ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。
测定原理：测定ATP 含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。肌酸激酶催化肌酸和ATP 反应生成磷酸肌酸，可在700nm 下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量，以此反应ATP 含量。
自备仪器和用品：分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL 石英比色皿、研钵和蒸馏水。

浓度
规格 100管/48样
保存

Na+k+ ――ATP酶检测试剂盒 微量法,索莱宝,BC0065-100管/48样

发表于由

上海金畔生物科技有限公司提供Na+k+ ――ATP酶检测试剂盒 微量法,索莱宝,BC0065-100管/48样，可以访问官网了解更多产品信息。
Na+k+ ――ATP酶检测试剂盒 微量法,索莱宝,BC0065-100管/48样

询价
索莱宝

·  英文名称 : Micro Na+K+——ATPase Assay Kit

·  别名 : Na+k+――ATP酶试剂盒 Na+k+ ――ATP酶测试盒

·  检测方法 : 微量法

 

测定意义：Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP水解生成ADP和无机磷。

测定原理：Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。

需要的仪器，耗材:可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

浓度
规格 100管/48样
保存

Na+k+――ATP酶检测试剂盒,索莱宝,BC0060-50管/24样

发表于由

上海金畔生物科技有限公司提供Na+k+――ATP酶检测试剂盒,索莱宝,BC0060-50管/24样，可以访问官网了解更多产品信息。
Na+k+――ATP酶检测试剂盒,索莱宝,BC0060-50管/24样

询价
索莱宝

·  英文名称 : Na+K+——ATPase Assay KitAMP Content Assay Kit

·  别名 : Na+k+――ATP酶试剂盒 谷氨酸合成酶（GOGAT）测试盒,Na+k+――ATP酶测试盒

·  检测方法 : 可见分光光度法

 

 Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
      Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。
自备的仪器和用品：
      可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

浓度
规格 50管/24样
保存

线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性检测试剂盒（ATP合酶） 微量法,索莱宝,BC1445-100管/48样

发表于由

上海金畔生物科技有限公司提供线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性检测试剂盒（ATP合酶） 微量法,索莱宝,BC1445-100管/48样，可以访问官网了解更多产品信息。
线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性检测试剂盒（ATP合酶） 微量法,索莱宝,BC1445-100管/48样

询价
索莱宝

·  英文名称 : Micro Mitochondrial Respiratory Chain ComplexⅤActivity Assay Kit

·  别名 : 线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性测定试剂盒（ATP合酶） 线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性测试盒

·  检测方法 : 微量法

 

测定意义：线粒体复合体Ⅴ又称F1F0-ATP合酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，由F1和F0两个亚单位组成。该酶利用呼吸链产生的质子电化学梯度催化ATP合成，也可逆过程水解ATP。此外，复合体Ⅴ还存在于叶绿体、异养菌和光合细菌中。复合体Ⅴ是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化合成ATP的关键酶。

测定原理：复合体Ⅴ水解ATP产生ADP和Pi，通过测定Pi增加速率来测定复合体Ⅴ活性。

需要的仪器，耗材:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

浓度
规格 100管/48样
保存

PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒 货号21617-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒 货号21617
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒

简要概述

        PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，ATP在细胞能量，代谢调节和细胞信号传导中起着基本作用。它被称为细胞内能量转移的“货币分子单位”，以驱动活细胞中的许多过程和化学合成。 ATP也是细胞通讯的信号分子，在DNA和RNA合成中起重要作用。 AAT Bioquest提供了多种生物发光测定试剂盒，可通过重组萤火虫荧光素酶（目录号21610和21609）确定ATP的纳摩尔（nM）范围。这些试剂盒需要酶标仪，通常用于细胞活力或细胞毒性测定。 PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒基于一系列ATP诱导的酶偶联反应，产生过氧化氢，用我们的Amplite 红色底物在OD 570 nm处进行分光光度法定量。该测定法可在100 µL反应体积中检测到约3 µM ATP，而不受ADP和AMP的干扰。它为测定生物样品中的ATP水平提供了一种强大，简单且方便的测定方法。 PhosphoWorks 比色ATP分析是我们基于荧光素酶的ATP分析试剂盒的补充。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备ATP工作溶液（50 µL）
2.添加ATP标准液或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测570 nm处的吸光度

溶液配制

1.制备储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1Amplite 红色底物储备液（200X）：
将30 µL DMSO（组分E）加入小瓶AmpliteTM Red Substrate（组分A）中，制成200X AmpliteTM Red Substrate储备液。

1.2ATP标准溶液（10mM）：
将0.5 mL的ddH2O加入到ATP标准溶液（组分D）的小瓶中，制成10 mM ATP标准溶液。

2.制备标准溶液

ATP标准

将10 µL的10 mM ATP标准溶液添加到990 µL 1X PBS缓冲液中，以生成100 µM ATP标准溶液（AS7）。 取100 µM ATP标准溶液（AS7），并按1：2进行系列稀释，以用1X PBS缓冲液获得系列稀释的ATP标准溶液（AS6-AS1）。

3.制备工作溶液

3.1将5ml测定缓冲液（组分C）添加到酶混合瓶（组分B）中，并充分混合。

3.2将25 µL 200X Amplite Red Substrate储备溶液添加到Enzyme Mix瓶中，并充分混合以制成ATP工作溶液。

样品示例及操作

表1.透明底部96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 AS = ATP标准品（AS1-AS7，1.56至100 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1 … …
AS2 AS2 … …
AS3 AS3
AS4 AS4
AS5 AS5
AS6 AS6
AS7 AS7

表2.每个孔的试剂组成。

孔 容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释（1.56至100 µM）
BL 50ul 1 X PBS缓冲液
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局，准备ATP标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂，而不是50 µL。

2.将50 µL ATP工作溶液添加到ATP标准液，空白对照和测试样品的每个孔中，以使ATP总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL ATP工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.用吸光度板读数器在570 nm的OD值处监测吸光度的增加。

PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒 货号21617

PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒 货号21617

发光法ATP检测试剂盒 *明亮发光* 货号21610-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

发光法ATP检测试剂盒 *明亮发光* 货号21610
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1 Plate
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒 *明亮发光*

发光法ATP检测试剂盒 *明亮发光* 货号21610

简要概述

      PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒 *明亮发光*是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，（ATP）在细胞能量生成，代谢调节和细胞信号传导中起着基本作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供了一种快速，简单且均一的发光检测方法，用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。 该测定可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行。 此测定法的高灵敏度允许在许多生物系统，环境样品和食品中检测ATP。 该PhosphoWorks ATP分析试剂盒每孔可检测低至10个细胞。 它具有稳定的发光，无需混合或分离，并且配方具有 小的动手时间。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒 *明亮发光*。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100 µL / 96孔板或25 µL / 384孔板）制备细胞（样品）
2.加入等体积的ATP工作溶液（100 µL / 96孔板或25 µL / 384孔板）
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监控发光强度

溶液配制

工作溶液配制

1.将全部反应缓冲液（组分C，10 mL）转移到ATP传感器（组分B）中，并充分混合。

2.将20 µL ATP监测酶（组分A）添加到组分B + C的瓶子中，并充分混合以制成ATP工作溶液。 注意：避免来自外源性生物来源的潜在ATP污染。

点击查看细胞制备方案

样品操作

1.运行ATP分析：

1.1通过在所需化合物缓冲液中加入10 µL的10X化合物（用于96孔板）或5 µL的5X化合物（用于384孔板）来用测试化合物处理细胞（或样品）。对于空白孔（没有细胞的培养基），添加相应量的化合物缓冲液。

1.2将细胞板在37°C，5％CO2培养箱中孵育所需的时间，例如24、48或96小时。

1.3向每个孔中添加100 µL（96孔板）或25 µL（384孔板）的ATP工作溶液。

1.4在室温下孵育10-20分钟。

1.5使用标准发光计监控发光强度。

2.生成标准ATP校准曲线：

如果需要计算样品中ATP的 dui量，则应与上述测定法一起生成ATP标准曲线。

2.1通过包含不含ATP的样品（作为对照）来测量背景发光，在含0.1％BSA的PBS缓冲液中稀释一系列ATP。注意：通常，ATP浓度从1 nM到10 µM是合适的。

2.2将相同量的稀释的ATP溶液添加到一个空板中（对于96孔板是100 µL，对于384孔板是25 µL）。

2.3加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的ATP工作溶液。

2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。

2.5使用标准发光计监控发光强度。

2.6生成ATP标准曲线。

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒 *温和发光* 货号21609-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒 *温和发光* 货号21609
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1 Plate
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒 *温和发光*

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒 *温和发光* 货号21609

简要概述

        PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，（ATP）在细胞能量学，代谢调节和细胞信号传导中起重要作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供快速，简单和均匀的发光检测，用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。 可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行测定。 该测定的高灵敏度允许在许多生物系统，环境样品和食物中检测ATP。 这种PhosphoWorks ATP检测试剂盒具有长达4小时的稳定发光信号。 它具有稳定的发光，不需要混合或分离，并配制成具有 小的手动操作时间。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒。 

产品说明书

操作步骤

简要概述

1.用测试化合物（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）制备细胞（样品）
2.加入等体积的ATP工作溶液（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度

溶液制备

1.将整瓶10 mL反应缓冲液（组分C）转移到ATP（组分B）中并充分混合。

2.将20μLATP监测酶（组分A）加入到组分B + C的瓶中并充分混合以制备ATP工作溶液。 注意：避免来自外源生物来源的潜在污染。

有关细胞样品制备的指南（点击查看）

样品试验方案

1运行ATP测定：

1.1用测试化合物处理细胞（或样品），在96孔板中加入10μL10X化合物，或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。

1.2将细胞板在37℃，5％CO 2培养箱中孵育所需的一段时间，例如24,48或96小时。

1.3向每个孔中加入100μL（96孔板）或25μL（384孔板）的ATP工作溶液。

1.4在室温下孵育10-20分钟。

1.5用标准发光计监测发光强度。

2.生成标准ATP校准曲线：

        如果需要计算样品中ATP的量，则应与上述分析一起生成ATP标准曲线。

2.1通过包含不含ATP的样品（作为对照）用于测量背景发光，在含有0.1％BSA的PBS缓冲液中制备一系列ATP稀释液。注意：通常ATP浓度从1 nM到10μM是合适的。

2.2将相同量的稀释的ATP溶液加入空板中（对于96孔板为100μL或对于384孔板为25μL）。

2.3加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的ATP工作溶液。

2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。

2.5用标准光度计监测发光强度。

2.6生成ATP标准曲线。

数据分析

        从空白标准孔获得的读数（RLU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算ATP样品。 我们建议使用在线线性回归计算器，该计算器可在以下位置找到：

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒 *温和发光* 货号21609

图1.使用PhosphoWorks发光ATP检测试剂盒测量ATP剂量反应。 以1秒间隔监测10μM至0.1nM的ATP浓度长达5小时。

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free* 货号21612-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free* 货号21612
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1 plate
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free*

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free* 货号21612

联系电话：

简要概述

        PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，（ATP）在细胞能量学，代谢调节和细胞信号传导中起重要作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供快速，简单和均匀的发光检测，用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。 可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行测定。 该测定的高灵敏度允许在许多生物系统，环境样品和食物中检测ATP。 该PhosphoWorks ATP检测试剂盒不使用DTT，并且具有长达4小时的稳定发光信号。 它具有稳定的发光，不需要混合或分离，并配制成具有 小的手动操作时间。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒。 

产品说明书

操作步骤

简要概述

1.用测试化合物（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）制备细胞（样品）
2.加入等体积的ATP工作溶液（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度

制备工作溶液

1.将10 mL反应缓冲液（组分C）转移到ATP传感器（组分B）中并充分混合。

2.将20μLATP监测酶（组分A）加入到组分B + C的瓶中并充分混合以制备ATP工作溶液。 注意：避免来自外源生物来源的潜在ATP污染。

有关细胞样品制备的指南（点击查看）

样品实验方案

1.运行ATP测定：

1.1用测试化合物处理细胞（或样品），在96孔板中加入10μL10X化合物，或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。

1.2将细胞板在37℃，5％CO 2培养箱中孵育所需的一段时间，例如24,48或96小时。

1.3向每个孔中加入100μL（96孔板）或25μL（384孔板）的ATP工作溶液。

1.4在室温下孵育10-20分钟。

1.5用标准发光计监测发光强度。

2.生成标准ATP校准曲线：

        如果需要计算样品中ATP的jue对量，则应与上述分析一起生成ATP标准曲线。

2.1通过包含不含ATP的样品（作为对照）在含有0.1％BSA的PBS缓冲液中制备ATP系列稀释液以测量背景发光。注意：通常ATP浓度范围为0.1 nM至1μM是合适的。

2.2将相同量的稀释的ATP溶液加入空板中（对于96孔板为100μL或对于384孔板为25μL）。

2.3加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的ATP工作溶液。

2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。

2.5用标准发光计记录发光强度。

2.6生成ATP标准曲线。

数据分析

        从空白标准孔获得的读数（RLU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算ATP样品。 我们建议使用在线线性回归计算器，该计算器可在以下位置找到：

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free* 货号21612

图1.使用NOVOstar板读数器（BMG Labtech）在96孔白板上用PhosphoWorks TM发光ATP测定试剂盒* DTT-Free *测量ATP剂量响应。 该试剂盒可在20分钟内检测到（3 pmole /孔）0.03 nM ATP。 积分时间为1秒。 半衰期超过2小时。

ATP检测试剂盒 货号21601-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

ATP检测试剂盒 货号21601
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒

简要概述

        Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，（ATP）在细胞能量学，代谢调节和细胞信号传导中起着重要作用。 ATP的定量可用于各种生物应用。由于ATP是几乎所有活生物体的能源，在缺乏有生物体的情况下它们迅速降解，因此其存在可用于识别活生物体的存在。 ATP的测量已用于细胞毒性，表面细菌的检测，水中细菌的定量，培养中的体细胞和食品质量。使用萤火虫生物发光来测量ATP 初是由McElroy提出的，他发现ATP对于轻量生产至关重要。萤火虫萤光素酶是单体61kD酶，其催化荧光素的两步氧化，其在560nm处产生光。 AAT Bioquest的ReadiUse 快速发光测定ATP分析试剂盒（不含DTT）带有即用型所有必需组分。它为监测哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性提供了一种快速，简单和均匀的发光测定法。该测定基于使用萤火虫萤光素酶来催化ATP和萤光素释放光的ATP的检测。它可以在化学发光酶标仪上以便利的96孔或384孔微量滴定板格式进行。该测定非常灵敏，可以检测50个细胞/孔。它具有稳定的半衰期超过2小时的发光信号。此ReadiUse 快速发光测定ATP测定试剂盒不含DTT。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒。 

产品说明书

操作步骤

简要概述
1.用测试化合物（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）制备细胞（样品）
2.添加等量即用型ReadiUse 快速发光检测ATP检测试剂（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度

注意：为达到效果，建议使用白色孔板。 在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

制备

为方便起见，请使用在线稀释计算器

用ddH2O或适当的缓冲液制备1mM ATP储备溶液，然后进行连续稀释以达到10 pM至10μM的ATP浓度。

有关细胞样品制备的指南（点击查看）

样品实验方案

表1.白色96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 SD = ATP标准，BL =空白对照，TS =测试样品

BL BL TS TS
SD1 SD1 … …
SD2 SD2 … …
SD3 SD3 … …
SD4 SD4 … …
SD5 SD5 … …
SD6 SD6 … …
SD7 SD7 … …

表2.每个孔的试剂组成

孔板 规格 试剂
SD1-SD7 100ul 连续稀释ATP（例如10 pM至10μM）
BL 100ul ATP分析缓冲液（组分A）
TS 100ul 样品

1.用测试化合物处理细胞（或样品），在96孔板中加入10μL10X化合物，或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。 对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。
2.将细胞板在37℃，5％CO2培养箱中孵育所需的时间段，例如24,48或96小时。
3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的ReadiUse 快速发光测定ATP测定试剂。
4.在室温下孵育10-20分钟。 注意：将未使用的ReadiUse 快速发光测定ATP测定试剂等分并保存在-20 ℃，避免反复冻融循环。
5.用标准光度计监测发光强度。
 
数据分析
 
        从空白标准孔获得的读数（RLU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算细胞样本。 我们建议使用在线线性回归计算器，该计算器可在以下位置找到：
ATP检测试剂盒 货号21601

图1.细胞数与发光信号相关。 使用ClaiStar板读数器（BMG Labtech）在96孔白板中使用ReadiUse Rapid Luminometric ATP Assay Kit测量不同的Jurkat细胞数（2倍稀释）。 该试剂盒可检测低至50个细胞。 在孵育15分钟或2小时后，发光信号和细胞数之间存在线性关系（r2> 0.99）。 发光信号的半衰期超过2小时。

Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒 货号23015-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒

Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒

Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒 货号23015 货号 23015 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 4224
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量、代谢调节和细胞信号传导中起着基本作用。它被称为细胞内能量转移的“货币分子单位”，以驱动活细胞中的许多生物过程和化学合成。 ATP也是细胞通讯的信号分子，在DNA和RNA合成中起着重要作用。它位于发生细胞呼吸的线粒体中。 ATP水平可用于测量细胞增殖和细胞周期动态。 Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒使研究人员可以使用检测细胞ATP的渗透型红色荧光成像探针ATP Red 来检测活细胞中的ATP水平。 ATP Red 旨在检测活细胞线粒体中的ATP浓度。该探针与AMP，ADP，CMP，CDP，CTP，UMP，UDP，UTP，GMP，GDP或GTP的交叉反应性最小。

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： Cy3/TRITC滤波片组
发射： Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板： 黑色透明孔板

产品说明书

实验方案

概述

在生长培养基中准备细胞
将细胞与ATP Red 工作溶液在37°C下孵育15-30分钟
去掉ATP Red 工作溶液
使用Cy3 / TRITC滤波片组的荧光显微镜进行检测

 

准备细胞

对于贴壁细胞
在96孔板的生长培养基中以10,000至40,000个细胞/孔/ 90μL平板培养细胞过夜，而对于384孔板则以2,500至10,000个细胞/孔/ 20μL平板培养过夜。

对于悬浮细胞
离心培养液中的细胞，然后将细胞沉淀以50,000-100,000细胞/孔/ 90 µL的浓度悬浮于96孔聚D赖氨酸平板中，或10,000-25,000细胞/孔/ 20 / L以获得384孔中的悬浮液 聚-D赖氨酸板。 实验前，将板以800 rpm的速度离心2分钟。
注意：应该对每个细胞系进行单独评估，以确定最佳细胞密度。

 

溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。

ATP Red 储备溶液配制（500X）
将50 µL DMSO（组分C）添加到小瓶ATP Red （组分A）中，制成500X储备液。
注意：50 µL的500X ATP Red 储备溶液足以容纳一个96孔板。 可以将未使用的ATP Red 储备溶液分装，并在≤-20°C下以较小的等分试样存储。 避光，并避免重复的冻融循环。

 

ATP Red 工作溶液配制
将5 µL 500X储备溶液（组分A）添加到1 mL细胞培养基中，并充分混合。
注意：ATP Red 探针与我们检测的大多数细胞系的细胞培养基兼容。 可以根据特定的细胞类型修改染色条件。

 

操作步骤

1.在生长培养基中准备细胞。
2.在细胞板中加入等体积的[100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）]。
注意：ATP Red 的最佳浓度因具体应用而异。
3.在避光的条件下，将细胞在37°C下孵育15-30分钟。
4.从每个孔中除去工作溶液。 用测定缓冲液（组分B）或您选择的缓冲液洗涤细胞两次。
5.使用带有Cy3 / TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

 

图示

Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒 货号23015

图1. HeLa细胞与ATP Red 和MitoLite Green FM共染色的荧光图像在96孔黑色透明底板。 HeLa细胞用ATP Red 染色15分钟，然后与100 nM MitoLite Green FM（Cat＃22695）孵育30分钟。 成像前用测定缓冲液洗涤两次。 ATP Red 和MitoLite ATP Red 信号重叠良好。使用带有Cy3 / TRITC和FITC滤光片的荧光显微镜对细胞成像。

 

参考文献

Metabolic co-dependence of the oocyte and cumulus cells: essential role in determining oocyte developmental competence.
Authors: Richani, Dulama and Dunning, Kylie R and Thompson, Jeremy G and Gilchrist, Robert B
Journal: Human reproduction update (2021): 27-47

Mitochondrial C3a Receptor Activation in Oxidatively Stressed Epithelial Cells Reduces Mitochondrial Respiration and Metabolism.
Authors: Ishii, Masaaki and Beeson, Gyda and Beeson, Craig and Rohrer, Bärbel
Journal: Frontiers in immunology (2021): 628062

Cell-penetrating and mitochondrion-targeting molecules.
Authors: Appiah Kubi, George and Pei, Dehua
Journal: Methods in enzymology (2020): 311-328

Combinatorial roles of mitochondria and cGMP/PKG pathway in the generation of neuronal free Zn2+ under the presence of nitric oxide.
Authors: Yang, De-Ming and Huang, Chien-Chang and Chang, Yu-Fen
Journal: Journal of the Chinese Medical Association : JCMA (2020): 357-366

Dynamic regulation of subcellular mitochondrial position for localized metabolite levels.
Authors: Alshaabi, Haya and Heininger, Meara and Cunniff, Brian
Journal: Journal of biochemistry (2020): 109-117

Engineering a Reversible Fluorescent Probe for Real-Time Live-Cell Imaging and Quantification of Mitochondrial ATP.
Authors: Ren, Tian-Bing and Wen, Si-Yu and Wang, Lu and Lu, Peng and Xiong, Bin and Yuan, Lin and Zhang, Xiao-Bing
Journal: Analytical chemistry (2020): 4681-4688

Heat stress induces apoptosis through disruption of dynamic mitochondrial networks in dairy cow mammary epithelial cells.
Authors: Chen, Kun-Lin and Wang, Hui-Li and Jiang, Lin-Zheng and Qian, Yong and Yang, Cai-Xia and Chang, Wei-Wei and Zhong, Ji-Feng and Xing, Guang-Dong
Journal: In vitro cellular & developmental biology. Animal (2020): 322-331

Intracellular ATP levels influence cell fates in Dictyostelium discoideum differentiation.
Authors: Hiraoka, Haruka and Nakano, Tadashi and Kuwana, Satoshi and Fukuzawa, Masashi and Hirano, Yasuhiro and Ueda, Masahiro and Haraguchi, Tokuko and Hiraoka, Yasushi
Journal: Genes to cells : devoted to molecular & cellular mechanisms (2020): 312-326

Measurement of ATP concentrations in mitochondria of living cells using luminescence and fluorescence approaches.
Authors: Morciano, Giampaolo and Imamura, Hiromi and Patergnani, Simone and Pedriali, Gaia and Giorgi, Carlotta and Pinton, Paolo
Journal: Methods in cell biology (2020): 199-219

Mitochondria transfer enhances proliferation, migration, and osteogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cell and promotes bone defect healing.
Authors: Guo, Yusi and Chi, Xiaopei and Wang, Yifan and Heng, Boon Chin and Wei, Yan and Zhang, Xuehui and Zhao, Han and Yin, Ying and Deng, Xuliang
Journal: Stem cell research & therapy (2020): 245

说明书
Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒.pdf

Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒 货号23015-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒 货号23015
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
科研试剂
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

简要概述

ATP在细胞能量、代谢调节和细胞信号传导中起着基本作用。它被称为细胞内能量转移的“货币分子单位”，以驱动活细胞中的许多生物过程和化学合成。 ATP也是细胞通讯的信号分子，在DNA和RNA合成中起着重要作用。它位于发生细胞呼吸的线粒体中。 ATP水平可用于测量细胞增殖和细胞周期动态。 Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒使研究人员可以使用检测细胞ATP的渗透型红色荧光成像探针ATP Red 来检测活细胞中的ATP水平。 ATP Red 旨在检测活细胞线粒体中的ATP浓度。该探针与AMP，ADP，CMP，CDP，CTP，UMP，UDP，UTP，GMP，GDP或GTP的交叉反应性 小。

 

适用仪器

荧光酶标仪
激发： Cy3/TRITC滤波片组
发射： Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板： 黑色透明孔板

产品说明书

实验方案

概述

在生长培养基中准备细胞
将细胞与ATP Red 工作溶液在37°C下孵育15-30分钟
去掉ATP Red 工作溶液
使用Cy3 / TRITC滤波片组的荧光显微镜进行检测

 

准备细胞

对于贴壁细胞
在96孔板的生长培养基中以10,000至40,000个细胞/孔/ 90μL平板培养细胞过夜，而对于384孔板则以2,500至10,000个细胞/孔/ 20μL平板培养过夜。

对于悬浮细胞
离心培养液中的细胞，然后将细胞沉淀以50,000-100,000细胞/孔/ 90 µL的浓度悬浮于96孔聚D赖氨酸平板中，或10,000-25,000细胞/孔/ 20 / L以获得384孔中的悬浮液 聚-D赖氨酸板。 实验前，将板以800 rpm的速度离心2分钟。
注意：应该对每个细胞系进行单独评估，以确定细胞密度。

 

溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。

ATP Red 储备溶液配制（500X）
将50 µL DMSO（组分C）添加到小瓶ATP Red （组分A）中，制成500X储备液。
注意：50 µL的500X ATP Red 储备溶液足以容纳一个96孔板。 可以将未使用的ATP Red 储备溶液分装，并在≤-20°C下以较小的等分试样存储。 避光，并避免重复的冻融循环。

 

ATP Red 工作溶液配制
将5 µL 500X储备溶液（组分A）添加到1 mL细胞培养基中，并充分混合。
注意：ATP Red 探针与我们检测的大多数细胞系的细胞培养基兼容。 可以根据特定的细胞类型修改染色条件。

 

操作步骤

1.在生长培养基中准备细胞。
2.在细胞板中加入等体积的[100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）]。
注意：ATP Red 的浓度因具体应用而异。
3.在避光的条件下，将细胞在37°C下孵育15-30分钟。
4.从每个孔中除去工作溶液。 用测定缓冲液（组分B）或您选择的缓冲液洗涤细胞两次。
5.使用带有Cy3 / TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

 

图示

Cell Meter 活细胞ATP检测试剂盒 货号23015

图1. HeLa细胞与ATP Red 和MitoLite Green FM共染色的荧光图像在96孔黑色透明底板。 HeLa细胞用ATP Red 染色15分钟，然后与100 nM MitoLite Green FM（Cat＃22695）孵育30分钟。 成像前用测定缓冲液洗涤两次。 ATP Red 和MitoLite ATP Red 信号重叠良好。使用带有Cy3 / TRITC和FITC滤光片的荧光显微镜对细胞成像。

 

PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒 货号21620-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒 货号21620
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒

简要概述

        PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，ATP在细胞能量，代谢调节和细胞信号传导中起着基本作用。它被称为细胞内能量转移的“货币分子单位”，以驱动活细胞中的许多过程和化学合成。 ATP也是细胞通讯的信号分子，在DNA和RNA合成中起重要作用。 AAT Bioquest提供了多种生物发光测定试剂盒，可通过重组萤火虫荧光素酶（目录号21610和21609）确定ATP的纳摩尔（nM）范围。这些试剂盒需要酶标仪，通常用于细胞活力或细胞毒性测定。 PhosphoWorks 荧光ATP分析试剂盒基于一系列ATP诱导的酶偶联反应，产生过氧化氢，该过氧化氢用我们的Amplite Red底物通过分光光度法定量。该测定法可在100 µL反应体积中检测到约0.4 µM ATP，而不受ADP和AMP的干扰。它为测定生物样品中的ATP水平提供了一种强大，简单且方便的测定方法。 PhosphoWorks 荧光ATP分析是我们基于荧光素酶的ATP分析试剂盒的补充。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备ATP工作溶液（50 µL）
2.添加ATP标准液或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的荧光增加

溶液配制

1.制备储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1Amplite 红色底物储备液（200X）：
将30 µL DMSO（组分E）加入小瓶Amplite Red Substrate（组分A）中，制成200X Amplite Red Substrate储备液。

1.2ATP标准溶液（10mM）：
将0.5 mL的ddH2O加入到ATP标准溶液（组分D）的小瓶中，制成10 mM ATP标准溶液。

2.制备标准溶液

ATP标准

将10 µL的10 mM ATP标准溶液添加到990 µL 1X PBS缓冲液中，以生成100 µM ATP标准溶液（AS7）。 取100 µM ATP标准溶液（AS7）并进行1：3连续稀释，以使用1X PBS缓冲液获得系列稀释的ATP标准溶液（AS6-AS1）。

3.制备工作溶液

3.1将5毫升测定缓冲液（组分C）添加到酶混合瓶（组分B）中，并充分混合。

3.2在Enzyme Mix瓶中加入25 µL 200X AmpliteTM Red Substrate储备液，充分混合以制成APT工作溶液。

样品示例及操作

表1.黑色96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 AS = ATP标准品（AS1-AS7，0.14至100 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1 … …
AS2 AS2 … …
AS3 AS3
AS4 AS4
AS5 AS5
AS6 AS6
AS7 AS7

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释（0.14至100 µM）
BL 50ul 1 X PBS缓冲液
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局，准备ATP标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂，而不是50 µL。

2.将50 µL ATP工作溶液添加到ATP标准液，空白对照和测试样品的每个孔中，以使ATP总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL ATP工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.使用荧光酶标仪在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处监视荧光增加。

PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒 货号21620

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒 货号21601-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒 货号21601 货号 21601 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 1272
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量学，代谢调节和细胞信号传导中起着重要作用。 ATP的定量可用于各种生物应用。由于ATP是几乎所有活生物体的能源，在缺乏有生物体的情况下它们迅速降解，因此其存在可用于识别活生物体的存在。 ATP的测量已用于细胞毒性，表面细菌的检测，水中细菌的定量，培养中的体细胞和食品质量。使用萤火虫生物发光来测量ATP最初是由McElroy提出的，他发现ATP对于轻量生产至关重要。萤火虫萤光素酶是单体61kD酶，其催化荧光素的两步氧化，其在560nm处产生光。第一步涉及通过ATP活化蛋白质以产生反应性混合酸酐中间体。在第二步中，活性中间体与氧反应产生一过性二氧杂环丁烷，其迅速分解为氧化产物oxyluciferin和二氧化碳以并放出光。当ATP是限制性成分时，光的强度与ATP的浓度成比例。因此，光强度的测量可以用于使用发光计来量化ATP。 AAT Bioquest的ReadiUse 快速发光测定ATP分析试剂盒（不含DTT）带有即用型所有必需组分。它为监测哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性提供了一种快速，简单和均匀的发光测定法。该测定基于使用萤火虫萤光素酶来催化ATP和萤光素释放光的ATP的检测。它可以在化学发光酶标仪上以便利的96孔或384孔微量滴定板格式进行。该测定非常灵敏，可以检测50个细胞/孔。它具有稳定的半衰期超过2小时的发光信号。此ReadiUse 快速发光测定ATP测定试剂盒不含DTT。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒。 

 

适用仪器

发光酶标仪  
推荐孔板： 白色孔板

产品说明书

操作步骤

简要概述
1.用测试化合物（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）制备细胞（样品）
2.添加等量即用型ReadiUse 快速发光检测ATP检测试剂（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度

注意：为达到最佳效果，建议使用白色孔板。 在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

制备

为方便起见，请使用在线稀释计算器

用ddH2O或适当的缓冲液制备1mM ATP储备溶液，然后进行连续稀释以达到10 pM至10μM的ATP浓度。

有关细胞样品制备的指南（点击查看）

 

样品实验方案

表1.白色96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 SD = ATP标准，BL =空白对照，TS =测试样品

BL BL TS TS
SD1 SD1 … …
SD2 SD2 … …
SD3 SD3 … …
SD4 SD4 … …
SD5 SD5 … …
SD6 SD6 … …
SD7 SD7 … …

 

表2.每个孔的试剂组成

孔板 规格 试剂
SD1-SD7 100ul 连续稀释ATP（例如10 pM至10μM）
BL 100ul ATP分析缓冲液（组分A）
TS 100ul 样品

 

1.用测试化合物处理细胞（或样品），在96孔板中加入10μL10X化合物，或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。 对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。
2.将细胞板在37℃，5％CO2培养箱中孵育所需的时间段，例如24,48或96小时。
3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的ReadiUse 快速发光测定ATP测定试剂。
4.在室温下孵育10-20分钟。 注意：将未使用的ReadiUse 快速发光测定ATP测定试剂等分并保存在-20 ℃，避免反复冻融循环。
5.用标准光度计监测发光强度。
 
数据分析
 
        从空白标准孔获得的读数（RLU）用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。 然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算细胞样本。 我们建议使用在线线性回归计算器，该计算器可在以下位置找到：
Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒 货号21601
图1.细胞数与发光信号相关。 使用ClaiStar板读数器（BMG Labtech）在96孔白板中使用ReadiUse Rapid Luminometric ATP Assay Kit测量不同的Jurkat细胞数（2倍稀释）。 该试剂盒可检测低至50个细胞。 在孵育15分钟或2小时后，发光信号和细胞数之间存在线性关系（r2> 0.99）。 发光信号的半衰期超过2小时。
 
 
参考文献

High throughput cell-based assay for identification of glycolate oxidase inhibitors as a potential treatment for Primary Hyperoxaluria Type 1
Authors: Mengqiao Wang, Miao Xu, Yan Long, Sonia Fargue, Noel Southall, Xin Hu, John C McKew, Christopher J Danpure, Wei Zheng
Journal: Scientific Reports (2016)

NT1014, a novel biguanide, inhibits ovarian cancer growth in vitro and in vivo
Authors: Lu Zhang, Jianjun Han, Amanda L Jackson, Leslie N Clark, Joshua Kilgore, Hui Guo, Nick Livingston, Kenneth Batchelor, Yajie Yin, Timothy P Gilliam
Journal: Journal of Hematology & Oncology (2016): 91

The Different Effects of Atorvastatin and Pravastatin on Cell Death and PARP Activity in Pancreatic NIT-1 Cells
Authors: Ya-Hui Chen, Yi-Chun Chen, Chin-San Liu, Ming-Chia Hsieh
Journal: Journal of Diabetes Research (2016)

BPA-induced DNA hypermethylation of the master mitochondrial gene PGC-1α contributes to cardiomyopathy in male rats
Authors: Ying Jiang, Wei Xia, Jie Yang, Yingshuang Zhu, Huailong Chang, Juan Liu, Wenqian Huo, Bing Xu, Xi Chen, Yuanyuan Li
Journal: Toxicology (2015): 21–31

Glutamine promotes ovarian cancer cell proliferation through the mTOR/S6 pathway
Authors: Lingqin Yuan, Xiugui Sheng, Adam K Willson, Dario R Roque, Jessica E Stine, Hui Guo, Hannah M Jones, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Endocrine-related cancer (2015): 577–591

JQ1 suppresses tumor growth through downregulating LDHA in ovarian cancer
Authors: Haifeng Qiu, Amanda L Jackson, Joshua E Kilgore, Yan Zhong, Leo Li-Ying Chan, Paola A Gehrig, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Oncotarget (2015): 6915

Loss of histone deacetylase Hdac1 disrupts metabolic processes in intestinal epithelial cells
Authors: Alexis Gonneaud, Naomie Turgeon, Frančois-Michel Boisvert, Frančois Boudreau, Claude Asselin
Journal: FEBS letters (2015): 2776–2783

A neutrophil intrinsic impairment affecting Rab27a and degranulation in cystic fibrosis is corrected by CFTR potentiator therapy
Authors: Kerstin Pohl, Elaine Hayes, Joanne Keenan, Michael Henry, Paula Meleady, Kevin Molloy, Bakr Jundi, David A Bergin, Cormac McCarthy, Oliver J McElvaney
Journal: Blood (2014): 999–1009

Fluorescence lifetime imaging unravels C. trachomatis metabolism and its crosstalk with the host cell
Authors: Márta Szaszák, Philipp Steven, Kensuke Shima, Regina Orzekowsky-Schroder, Gereon Huttmann, Inke R Konig, Werner Solbach, Jan Rupp
Journal: PLoS pathogens (2011): e1002108

G protein coupled receptor kinase 2 interacting protein 1 (GIT1) is a novel regulator of mitochondrial biogenesis in heart
Authors: Jinjiang Pang, Xiangbin Xu, Michael R Getman, Xi Shi, Stephen L Belmonte, Heidi Michaloski, Amy Mohan, Burns C Blaxall, Bradford C Berk
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2011): 769–776

说明书
Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒.pdf

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒 货号21602-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒 货号21602 货号 21602 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1000 Tests 价格 5244
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量学，代谢调节和细胞信号传导中起着重要作用。 ATP的定量可用于各种生物应用。由于ATP是几乎所有活生物体的能源，在缺乏有生物体的情况下它们迅速降解，因此其存在可用于识别活生物体的存在。 ATP的测量已用于细胞毒性，表面细菌的检测，水中细菌的定量，培养中的体细胞和食品质量。使用萤火虫生物发光来测量ATP最初是由McElroy提出的，他发现ATP对于轻量生产至关重要。萤火虫萤光素酶是单体61kD酶，其催化荧光素的两步氧化，其在560nm处产生光。第一步涉及通过ATP活化蛋白质以产生反应性混合酸酐中间体。在第二步中，活性中间体与氧反应产生一过性二氧杂环丁烷，其迅速分解为氧化产物oxyluciferin和二氧化碳以并放出光。当ATP是限制性成分时，光的强度与ATP的浓度成比例。因此，光强度的测量可以用于使用发光计来量化ATP。 AAT Bioquest的ReadiUse 快速发光测定ATP分析试剂盒（不含DTT）带有即用型所有必需组分。它为监测哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性提供了一种快速，简单和均匀的发光测定法。该测定基于使用萤火虫萤光素酶来催化ATP和萤光素释放光的ATP的检测。它可以在化学发光酶标仪上以便利的96孔或384孔微量滴定板格式进行。该测定非常灵敏，可以检测50个细胞/孔。它具有稳定的半衰期超过2小时的发光信号。此ReadiUse 快速发光测定ATP测定试剂盒不使用DTT。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒。 

 

适用仪器

发光酶标仪  
推荐孔板： 白色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100 µL / 96孔板或25 µL / 384孔板）制备细胞（样品）
2.加入等体积的即用型ReadiUse 快速光度ATP分析试剂（100 µL / 96孔板或25 µL / 384孔板）
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监控发光强度

 

溶液配制

标准溶液配制

1.ATP标准

用ddH2O或适当的缓冲液制成1 mM ATP储备溶液，然后进行系列稀释以达到10 pM至10 µM的ATP浓度。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

表1.白色96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 SD = ATP标准液，BL =空白对照，TS =测试样品

BL BL TS TS
SD1 SD1 … …
SD2 SD2 … …
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
SD1-SD7 100ul ATP的连续稀释（例如10 pM至10 µM）
BL 100ul ATP测定缓冲液（组分A）
TS 100ul 样品

1.通过在所需化合物缓冲液中加入10 µL的10X化合物（用于96孔板）或5 µL的5X化合物（用于384孔板）来用测试化合物处理细胞（或样品）。 对于空白孔（没有细胞的培养基），添加相应量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37 oC，5％CO2培养箱中孵育所需的时间，例如24、48或96小时。

3.加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的ReadiUse 快速光度ATP分析试剂。

4.在室温下孵育10-20分钟。 注意：将未使用的ReadiUse 快速发光ATP分析试剂分装并储存在-20℃，并避免重复的冷冻/解冻循环。

5.使用标准发光计监控发光强度。

 

参考文献

High throughput cell-based assay for identification of glycolate oxidase inhibitors as a potential treatment for Primary Hyperoxaluria Type 1
Authors: Mengqiao Wang, Miao Xu, Yan Long, Sonia Fargue, Noel Southall, Xin Hu, John C McKew, Christopher J Danpure, Wei Zheng
Journal: Scientific Reports (2016)

NT1014, a novel biguanide, inhibits ovarian cancer growth in vitro and in vivo
Authors: Lu Zhang, Jianjun Han, Amanda L Jackson, Leslie N Clark, Joshua Kilgore, Hui Guo, Nick Livingston, Kenneth Batchelor, Yajie Yin, Timothy P Gilliam
Journal: Journal of Hematology & Oncology (2016): 91

The Different Effects of Atorvastatin and Pravastatin on Cell Death and PARP Activity in Pancreatic NIT-1 Cells
Authors: Ya-Hui Chen, Yi-Chun Chen, Chin-San Liu, Ming-Chia Hsieh
Journal: Journal of Diabetes Research (2016)

BPA-induced DNA hypermethylation of the master mitochondrial gene PGC-1α contributes to cardiomyopathy in male rats
Authors: Ying Jiang, Wei Xia, Jie Yang, Yingshuang Zhu, Huailong Chang, Juan Liu, Wenqian Huo, Bing Xu, Xi Chen, Yuanyuan Li
Journal: Toxicology (2015): 21–31

Glutamine promotes ovarian cancer cell proliferation through the mTOR/S6 pathway
Authors: Lingqin Yuan, Xiugui Sheng, Adam K Willson, Dario R Roque, Jessica E Stine, Hui Guo, Hannah M Jones, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Endocrine-related cancer (2015): 577–591

JQ1 suppresses tumor growth through downregulating LDHA in ovarian cancer
Authors: Haifeng Qiu, Amanda L Jackson, Joshua E Kilgore, Yan Zhong, Leo Li-Ying Chan, Paola A Gehrig, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Oncotarget (2015): 6915

Loss of histone deacetylase Hdac1 disrupts metabolic processes in intestinal epithelial cells
Authors: Alexis Gonneaud, Naomie Turgeon, Frančois-Michel Boisvert, Frančois Boudreau, Claude Asselin
Journal: FEBS letters (2015): 2776–2783

A neutrophil intrinsic impairment affecting Rab27a and degranulation in cystic fibrosis is corrected by CFTR potentiator therapy
Authors: Kerstin Pohl, Elaine Hayes, Joanne Keenan, Michael Henry, Paula Meleady, Kevin Molloy, Bakr Jundi, David A Bergin, Cormac McCarthy, Oliver J McElvaney
Journal: Blood (2014): 999–1009

Fluorescence lifetime imaging unravels C. trachomatis metabolism and its crosstalk with the host cell
Authors: Márta Szaszák, Philipp Steven, Kensuke Shima, Regina Orzekowsky-Schroder, Gereon Huttmann, Inke R Konig, Werner Solbach, Jan Rupp
Journal: PLoS pathogens (2011): e1002108

G protein coupled receptor kinase 2 interacting protein 1 (GIT1) is a novel regulator of mitochondrial biogenesis in heart
Authors: Jinjiang Pang, Xiangbin Xu, Michael R Getman, Xi Shi, Stephen L Belmonte, Heidi Michaloski, Amy Mohan, Burns C Blaxall, Bradford C Berk
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2011): 769–776

说明书
Readiuse 快速发光法ATP检测试剂盒.pdf