Amplite 乙醇定量试剂盒 货号40001-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 乙醇定量试剂盒

Amplite 乙醇定量试剂盒

Amplite 乙醇定量试剂盒    货号40001 货号 40001 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 乙醇定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于乙醇检测的试剂盒,在生命科学研究,临床评估以及食品和药物工业中,非常需要快速进行乙醇定量测量的能力。 该非放射性乙醇测定基于醇氧化酶对乙醇的氧化。 该试剂盒使用我们的Amplite Red,使该套件可以双模式记录,无论是荧光测量还是比色读数。 该试剂盒为所有必需组分提供优化的分析方案。 该测定是稳定的,灵敏的,并且可以容易地适用于需要测量乙醇的各种应用中的高通量测定。 该测定可在30分钟内完成。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 乙醇定量试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 576 ± 5 nm
推荐孔板: 透明底板
荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备乙醇工作溶液(50μL)
添加乙醇标准品或测试样品(50μL)
在室温下孵育5-30分钟
监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度(截止= 570 nm)

 

溶液制备

1.储备溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. 1Amplite 乙醇试剂原液(250X):
将40μLDMSO(组分D)加入到Amplite 乙醇试剂(组分A)的小瓶中以制备250X Amplite 乙醇试剂储备溶液。 应立即使用原液。 注意:Amplite 乙醇试剂在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下不稳定。 反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite 乙醇试剂在高pH(> 8.5)下也不稳定。 因此,反应应在pH 7-8下进行。推荐提供的测定缓冲液(pH 7.4)。

1.2乙醇酶混合物(100X):
将100μL测定缓冲液(组分B)加入到乙醇酶混合物(组分C)的小瓶中并充分混合以制备100X乙醇酶混合物。

 

2.标准溶液配制

2.1乙醇标准溶液配制
通过将适量的100%乙醇标准品(组分E)稀释到H 2 O中来制备乙醇标准品,以产生0%至0.1%的乙醇浓度。 包含0%乙醇对照作为空白对照。 最终的乙醇浓度应低两倍(即0%至0.05%)。

 

3.工作溶液配制

将20μL250XAmplite 乙醇试剂储备溶液和50μL100X乙醇酶混合物加入5mL分析缓冲液(组分B)中以制备乙醇工作溶液。

 

操作步骤

表1.实心黑色96孔微孔板中乙醇标准品和测试样品的布局。

ES =乙醇标准品(ES1-ES7,0.0001%至0.1%),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
ES1 ES1
ES2 ES2
ES3 ES3    
ES4 ES4    
ES5 ES5    
ES6 ES3    
ES7 ES7    

表2.每个孔的试剂组成

规格 试剂
ES1-ES7 50ul 连续稀释液(0.0001%至0.1%)
BL 50ul
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备乙醇标准品(ES),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。注意:高浓度的乙醇(例如0.5%终浓度)可能会由于Amplite 乙醇试剂的过度氧化(导致非荧光产物)而导致荧光信号降低。

2.向乙醇标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL乙醇工作溶液,使总乙醇测定体积为100μL/孔。对于384孔板,在每个孔中加入25μL乙醇工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应5至30分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm,发射= 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm),截止= 570nm监测荧光强度。注意:也可以将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算EtOH样品。 点击使用在线线性回归计算器。

 

Amplite 乙醇定量试剂盒    货号40001

图1.使用Gemini荧光酶标仪(Molecular Devices),在固体黑色96孔板上用Amplite 乙醇定量试剂盒测量乙醇剂量响应。

 

参考文献

TAT-surface modified acyclovir-loaded albumin nanoparticles as a novel ocular drug delivery system
Authors: Panita Suwannoi, Mullika Chomnawang, Amolnat Tunsirikongkon, Angsuma Phongphisutthinan, Christel C Müller-Goymann, Narong Sarisuta
Journal: Journal of Drug Delivery Science and Technology (2019)

Development of Acyclovir-Loaded Albumin Nanoparticles and Improvement of Acyclovir Permeation Across Human Corneal Epithelial T Cells
Authors: Panita Suwannoi, Mullika Chomnawang, Narong Sarisuta, Stephan Reichl, Christel C Müller-Goymann
Journal: Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics (2017)

Enhancement of the antioxidant and starch hydrolase inhibitory activities of king coconut water (Cocos nucifera var. aurantiaca) by fermentation with kombucha ‘tea fungus’
Authors: Mindani I Watawana, Nilakshi Jayawardena, Chaminie B Gunawardhana, Viduranga Y Waisundara
Journal: International Journal of Food Science & Technology (2016): 490–498

On the dynamics of kefir volatome
Authors: Jie-Bi Hu, Sampath Gunathilake, Yu-Chie Chen, Pawel L Urban
Journal: RSC Advances (2014): 28865–28870

pH-Responsive nanoparticle vaccines for dual-delivery of antigens and immunostimulatory oligonucleotides
Authors: John T Wilson, Salka Keller, Matthew J Manganiello, Connie Cheng, Chen-Chang Lee, Chinonso Opara, Anthony Convertine, Patrick S Stayton
Journal: ACS nano (2013): 3912–3925

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 胆固醇定量试剂盒 Cat#40006
Amplite 胆碱定量试剂盒 Cat#40007

说明书
Amplite 乙醇定量试剂盒.pdf

Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒 货号40004-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒

Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒

Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒    货号40004 货号 40004 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

葡萄糖是一种单糖,是生物学中最重要的碳水化合物。它是细胞生长的能量和代谢的中间产物。作为光合作用的主要产物之一,葡萄糖在原核生物和真核生物中都开始细胞呼吸。葡萄糖水平是许多代谢性疾病例如糖尿病的关键诊断参数。该Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒提供了一种快速,灵敏的葡萄糖测量方法。它使用基于葡萄糖氧化酶的酶偶联反应通过产生过氧化氢来检测葡萄糖,该过氧化氢由我们的Amplite Red过氧化物酶底物进行检测。 Amplite Red过氧化物酶底物可通过酶标仪在约570 nm处读取。该测定可以轻松适用于需要测量葡萄糖的多种应用。该测定法具有非常低的背景,因为它在红色可见光范围内运行,可明显降低来自生物样品的干扰。使用Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒,可以检测低至3 µM D-葡萄糖。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 570nm
推荐孔板: 白色或黑色,透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备并添加葡萄糖标准品和/或测试样品(50μL)
准备并添加葡萄糖分析工作溶液(50μL)
在37°C孵育10-30分钟
检测OD值=570nm左右的吸光度

 

溶液配制

1.储备溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1Amplite 红色储备液(250X):
将100μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red底物(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。注意:避免反复冻融循环。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的分析缓冲液(pH 7.4)。

1.2辣根过氧化物酶(HRP)储备液(10 U / mL):
将1mL测定缓冲液(组分B)加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。注意:未使用的HRP溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20℃。

1.3葡萄糖氧化酶溶液(100 U / mL):
将1mL测定缓冲液(组分B)加入葡萄糖氧化酶(组分D)的小瓶中。注意:未使用的葡萄糖氧化酶溶液应分为一次性等分试样并储存在-20℃。

1.4葡萄糖原液(800mM):
将1mL测定缓冲液(组分B)加入葡萄糖小瓶(组分F)中。注意:未使用的葡萄糖溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

2.标准溶液配制

2.1葡萄糖标准溶液配制
通过将适量的800mM葡萄糖储备溶液稀释到测定缓冲液(组分B)中来制备葡萄糖标准品,以产生30μM的葡萄糖浓度。 然后在测定缓冲液(组分B)中进行1:3连续稀释,得到约10,3,1,0.3,0.1和0.03μM连续稀释的葡萄糖标准品。 包括非葡萄糖缓冲液对照作为空白对照。

 

3.工作溶液配制

表1.一个透明底96孔微孔板的分析工作溶液(2X)

组分 容积
Amplite 红色储备液(250x) 20ul
HRP储备液(10 U / mL) 100ul
葡萄糖氧化酶溶液(100 U / mL) 100ul
分析缓冲液 4.78ml
总容积 5ml

 

操作步骤

表2.固体黑色96孔微孔板中葡萄糖标准品和测试样品的布局。

GS =葡萄糖标准品(GS1-GS7); BL =空白对照; TS =测试样品。

 

BL BL TS TS
GS1 GS1
GS2 GS2
GS3 GS3    
GS4 GS4    
GS5 GS5    
GS6 GS6    
GS7 GS7    

 

表3.每个孔的试剂组成

葡萄糖标准溶液 空白对照 测试样品
连续稀释:50μL 测定缓冲液(化合物B):50μL 50ul

注意:由于Amplite 红色底物(对非荧光产物)的过氧化,高浓度的葡萄糖(例如测试样品或标准品中的100μM)可能导致荧光信号减少。

 

葡萄糖测定

1.如表2和3中所述,将葡萄糖标准品和含葡萄糖的测试样品加入96孔黑色微孔板中。

2.将50μL葡萄糖测定工作溶液添加到葡萄糖标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(表2),以使总葡萄糖测定体积为100μL/孔。 注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.将反应在37℃孵育10至30分钟,避光。

4.用荧光板读数器在Ex / Em = 530-570nm / 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm)监测荧光强度。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算葡萄糖样品。 点击使用在线线性回归计算器。

Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒    货号40004

图1.使用Gemini酶标仪(Molecular Devices),在96孔黑色平板上用Amplite 荧光葡萄糖定量试剂盒测量葡萄糖剂量反应。

 

参考文献

Glucose metabolism ontogenesis in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) in the light of the recently sequenced genome: new tools for intermediary metabolism programming
Authors: Lucie Marandel, Vincent Véron, Anne Surget, Elisabeth Plagnes-Juan, Stéphane Panserat
Journal: Journal of Experimental Biology (2016): 734–743

High glucose potentiates L-FABP mediated fibrate induction of PPARα in mouse hepatocytes
Authors: Anca D Petrescu, Avery L McIntosh, Stephen M Storey, Huan Huang, Gregory G Martin, Danilo Landrock, Ann B Kier, Friedhelm Schroeder
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2013): 1412–1425

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒 Cat#40004
Amplite 荧光法蛋白定量试剂盒 橙色荧光 Cat#11105
Amplite 马来酰亚胺定量试剂盒(荧光法)绿色荧光 Cat#5523

说明书
Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒.pdf

Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒 货号40005-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒

Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒

Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒    货号40005 货号 40005 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于葡萄糖定量的试剂盒,葡萄糖是一种单糖,是生物学中最重要的碳水化合物。它是细胞生长的能量和代谢中间体的来源。葡萄糖是光合作用的主要产物之一,并在原核生物和真核生物中开始细胞呼吸。葡萄糖水平是许多代谢紊乱的关键诊断参数。该葡萄糖测定试剂盒提供了用于测量各种生物样品(例如血清,血浆,体液,食物,生长培养基等)中的葡萄糖的快速且灵敏的方法。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物,使该试剂盒可以在双重荧光测定或比色读数中进行记录。该试剂盒为所有必需组分提供优化的分析方案。该测定是稳健的,并且可以容易地适用于需要测量葡萄糖的各种应用中的高通量测定。例如,该测定可能适合于监测发酵过程中的葡萄糖水平和蛋白质表达过程中的葡萄糖摄取。它也可用于监测葡萄糖转运蛋白。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备并添加葡萄糖标准品和/或测试样品(50μL)
准备并添加葡萄糖分析工作溶液(50μL)
在37°C孵育10-30分钟
在Ex / Em = 540 / 590nm处检测荧光强度

 

溶液配制

1.储备溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1Amplite 红色储备液(250X):
将100μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red底物(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。注意:避免反复冻融循环。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的分析缓冲液(pH 7.4)。

1.2辣根过氧化物酶(HRP)储备液(10 U / mL):
将1mL测定缓冲液(组分B)加入到辣根过氧化物酶(组分C)的小瓶中。注意:未使用的HRP溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20℃。

1.3葡萄糖氧化酶溶液(100 U / mL):
将1mL测定缓冲液(组分B)加入葡萄糖氧化酶(组分D)的小瓶中。注意:未使用的葡萄糖氧化酶溶液应分为一次性等分试样并储存在-20℃。

1.4葡萄糖原液(800mM):
将1mL测定缓冲液(组分B)加入葡萄糖小瓶(组分F)中。注意:未使用的葡萄糖溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

2.标准溶液配制

2.1葡萄糖标准溶液配制
通过将适量的800mM葡萄糖储备溶液稀释到测定缓冲液(组分B)中来制备葡萄糖标准品,以产生30μM的葡萄糖浓度。 然后在测定缓冲液(组分B)中进行1:3连续稀释,得到约10,3,1,0.3,0.1和0.03μM连续稀释的葡萄糖标准品。 包括非葡萄糖缓冲液对照作为空白对照。

 

3.工作溶液配制

表1.一个透明底96孔微孔板的分析工作溶液(2X)

组分 容积
Amplite 红色储备液(250x) 20ul
HRP储备液(10 U / mL) 100ul
葡萄糖氧化酶溶液(100 U / mL) 100ul
分析缓冲液 4.78ml
总容积 5ml

 

操作步骤

表2.固体黑色96孔微孔板中葡萄糖标准品和测试样品的布局。

GS =葡萄糖标准品(GS1-GS7); BL =空白对照; TS =测试样品。

 

BL BL TS TS
GS1 GS1
GS2 GS2
GS3 GS3    
GS4 GS4    
GS5 GS5    
GS6 GS6    
GS7 GS7    

 

表3.每个孔的试剂组成

葡萄糖标准溶液 空白对照 测试样品
连续稀释:50μL 测定缓冲液(化合物B):50μL 50ul

注意:由于Amplite 红色底物(对非荧光产物)的过氧化,高浓度的葡萄糖(例如测试样品或标准品中的100μM)可能导致荧光信号减少。

 

葡萄糖测定

1.如表2和3中所述,将葡萄糖标准品和含葡萄糖的测试样品加入96孔黑色微孔板中。

2.将50μL葡萄糖测定工作溶液添加到葡萄糖标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(表2),以使总葡萄糖测定体积为100μL/孔。 注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.将反应在37℃孵育10至30分钟,避光。

4.用荧光板读数器在Ex / Em = 530-570nm / 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm)监测荧光强度。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算葡萄糖样品。 点击使用在线线性回归计算器。

Amplite 荧光法葡萄糖定量试剂盒    货号40005

图1.使用Gemini酶标仪(Molecular Devices),在96孔黑色平板上用Amplite 荧光葡萄糖定量试剂盒测量葡萄糖剂量反应。

 

参考文献

Glucose metabolism ontogenesis in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) in the light of the recently sequenced genome: new tools for intermediary metabolism programming
Authors: Lucie Marandel, Vincent Véron, Anne Surget, Elisabeth Plagnes-Juan, Stéphane Panserat
Journal: Journal of Experimental Biology (2016): 734–743

High glucose potentiates L-FABP mediated fibrate induction of PPARα in mouse hepatocytes
Authors: Anca D Petrescu, Avery L McIntosh, Stephen M Storey, Huan Huang, Gregory G Martin, Danilo Landrock, Ann B Kier, Friedhelm Schroeder
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Amplite 比色法葡萄糖定量试剂盒 Cat#40004
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说明书
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Amplite 胆固醇定量试剂盒 货号40006-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Amplite 胆固醇定量试剂盒

Amplite 胆固醇定量试剂盒

Amplite 胆固醇定量试剂盒    货号40006 货号 40006 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 胆固醇定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测胆固醇的试剂盒,胆固醇是建立和维持细胞膜的重要因素之一。它在生理温度范围内调节膜流动性。在细胞内,胆固醇是几种生化途径中的前体分子。胆固醇也是合成维生素D和类固醇激素的重要前体分子,包括肾上腺激素皮质醇和醛固酮以及性激素黄体酮,雌激素,睾酮及其衍生物。 Amplite 胆固醇定量检测试剂盒是量化胆固醇最敏感的方法之一。该试剂盒使用Amplite Red来量化胆固醇浓度,这与胆固醇氧化酶介导的酶偶联反应中胆固醇存在时过氧化氢的产生有关。胆固醇的量与酶偶联反应循环中形成的过氧化氢的浓度成比例。在存在过氧化物酶的情况下,Amplite Red的荧光强度与转化为胆固醇浓度的过氧化氢浓度成比例。用荧光酶标仪可以容易地读取测定法。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 胆固醇定量试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

准备胆固醇检测工作溶液(50μL)
添加胆固醇标准品和/或测试样品(50μL)
在37°C孵育30分钟
在Ex / Em = 540 / 590nm处监测荧光强度

 

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液(250X):
将40μLDMSO(组分E)加入到Amplite Red底物(组分A)的小瓶中。应立即使用原液。任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。注意:避免反复冻融循环。注意:在硫醇如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇存在下,Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的最终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的分析缓冲液(pH 7.4)。

1.2胆固醇标准储备液(20μM):
将10μL胆固醇标准品(组分D)加入990μL测定缓冲液(组分B)中并充分混合。

 

2.标准溶液配制

2.1胆固醇标准溶液配制
准备胆固醇标准品(20μM)。 然后在测定缓冲液(组分B)中进行1:3连续稀释,得到约10,3,1,0.3,0.1,0.03和0.01μM系列稀释的胆固醇标准品。 包括非胆固醇缓冲液对照作为空白对照。

 

3.工作溶液配制

胆固醇工作溶液配制:
将5mL测定缓冲液(组分B)加入胆固醇酶混合物(组分C)的瓶中,并充分混合。 在胆固醇酶混合瓶中加入20μLDipiteRed 储备液(250X)。

 

操作步骤

表1.固体黑色96孔微孔板中胆固醇标准品和测试样品的布局。

CS =胆固醇标准(CS1-CS7); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
CS1 CS1
CS2 CS2
CS3 CS3    
CS4 CS4    
CS5 CS5    
CS6 CS6    
CS7 CS7    

 

表2.每个孔的试剂组成

胆固醇标准溶液 空白对照 测试样品
连续稀释:50μL 测定缓冲液(化合物B):50μL 50μL

 

胆固醇测定

1.如表1和2中所述,将胆固醇标准品和含有胆固醇的测试样品加入到96孔黑色微孔板中。

2.将50μL胆固醇测定工作溶液加入胆固醇标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(表2),使总胆固醇测定体积为100μL/孔。 注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.将反应在37℃孵育30分钟,避光。

4.用荧光板读数器在Ex / Em = 530-570nm / 590-600nm(最佳Ex / Em = 540 / 590nm)监测荧光强度。 注意:也可以将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RFU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算胆固醇样品。 点击使用在线线性回归计算器。

Amplite 胆固醇定量试剂盒    货号40006

图1.使用Gemini荧光酶标仪(分子装置),在黑色96孔板中用Amplite 荧光胆固醇定量试剂盒测量胆固醇剂量反应。 孵育30分钟可检测到低至0.03μM的胆固醇(n = 3)。

 

参考文献

Viperin inhibits rabies virus replication via reduced cholesterol and sphingomyelin and is regulated upstream by TLR4
Authors: Hai-Bo Tang, Zhuan-Ling Lu, Xian-Kai Wei, Tao-Zhen Zhong, Yi-Zhi Zhong, Ling-Xuan Ouyang, Yang Luo, Xing-Wei Xing, Fang Liao, Ke-Ke Peng
Journal: Scientific Reports (2016)

Hypermethylation of the TGF-β target, ABCA1 is associated with poor prognosis in ovarian cancer patients
Authors: Tim HM Huang, Jacqueline Shay, Yi-Hui Lai, Kenneth P Nephew, Hung-Cheng Lai, Michael WY Chan, Rui-Lan Huang, Tai-Kuang Chao, Pearlly S Yan, Yen-Ling Lai
Journal: (2015)

Antigenically shielded universal red blood cells by polydopamine-based cell surface engineering
Authors: Ben Wang, Guangchuan Wang, Binjie Zhao, Jiajun Chen, Xueyun Zhang, Ruikang Tang
Journal: Chemical Science (2014): 3463–3468

 

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产品名称 货号
Amplite 乙醇定量试剂盒 Cat#40001
Amplite 胆碱定量试剂盒 Cat#40007

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Amplite 胆碱定量试剂盒 货号40007-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 胆碱定量试剂盒

Amplite 胆碱定量试剂盒

Amplite 胆碱定量试剂盒    货号40007 货号 40007 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

胆碱及其代谢产物在细胞膜的结构完整性和信号传导以及胆碱能神经传递(乙酰胆碱合成)中起着重要作用。它是通过其代谢产物三甲基甘氨酸参与S-腺苷甲硫氨酸合成途径而获得甲基的主要来源。胆碱缺乏症可能导致肝脏疾病,动脉粥样硬化以及可能的神经系统疾病。尽管胆碱在中枢神经系统中作为乙酰胆碱和膜磷脂酰胆碱的前体具有重要作用,但胆碱在精神疾病中的作用尚未得到研究。该Amplite 胆碱定量试剂盒提供了最灵敏的胆碱定量方法之一。该试剂盒使用Amplite Red量化胆碱的浓度,这与胆碱氧化酶介导的酶偶联反应中过氧化氢的产生有关。胆碱的量与在酶偶联反应循环中形成的过氧化氢的浓度成比例。在存在过氧化物酶的情况下,Amplite Red的荧光强度与过氧化氢的形成成比例,该过氧化氢转化为胆碱的浓度。该测定可以容易地用荧光酶标仪读取,或者也可以使用光吸收酶标仪在〜570 nm处读取测定值。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 胆碱定量试剂盒。

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 准备并添加胆碱标准品和/或测试样品(50 µL)
  2. 准备并添加胆碱测定工作溶液(50 µL)
  3. 在室温下孵育15-60分钟
  4. 检测Ex / Em = 540/590nm时的荧光强度

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Amplite Red储备液(250X):将40 µL DMSO(组分E)添加到Amplite Red底物(组分A)的小瓶中,应立即使用储备溶液。应将所有剩余的溶液等分,并在-20oC重新冷冻。注意1:避免重复冻融循环。注意2:在存在硫醇(例如二硫苏糖醇(DTT)和2-巯基乙醇)的情况下,Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的终浓度应不高于10 µM。Amplite Red底物在高pH(> 8.5)下也不稳定。因此,反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的测定缓冲液(pH 7.4)。

2.胆碱标准储备液(50 mM):将400 µL ddH2O加入胆碱标准液(组分C)的小瓶中,并充分混合。注意:未使用的胆碱储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在-20oC下储存。

 

标准溶液配制

将20 µL胆碱标准储备液(50mM)加到980 µL分析缓冲液(组分D)中,生成1000 µM标准溶液。注意:  稀释的胆碱标准溶液不稳定,应在4小时内使用。将30 µL的1000 µM标准溶液加到970 µL的测定缓冲液(组分D)中以生成30 µM胆碱标准溶液,然后进行1:3系列稀释,以得到10、3、1、0.3、0.1、0.03和0 µM胆碱标准。

 

工作溶液配制

胆碱测定工作溶液:
将5 mL测定缓冲液(组分D)添加到胆碱探针瓶(组分B)中,并充分混合。在胆碱探针中加入20 µL Amplite Red 储备溶液(250X)。

 

实验步骤

表1.黑色96孔板中胆碱标准品和测试样品的布局。CS =胆碱标准(CS1-CS7);BL =空白对照;TS =测试样品。

BL BL TS TS
CS1 CS1
CS2 CS2
CS3 CS3    
CS4 CS4    
CS5 CS5    
CS6 CS6    
CS7 CS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
CS1 – CS7 50 µL 连续稀释 (0.03 to 30 µM)
BL 50 µL 缓冲液 (组分 D)
TS 50 µL 测试样品

胆碱测定:

1.如表1和表2所述,将胆碱标准品和含胆碱的测试样品添加到黑色96孔板中。

2.在胆碱标准液,空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL胆碱测定工作溶液(表2),使总胆碱测定体积为100 µL /孔。 注意:对于384孔板,将25 µL样品和25 µL测定反应混合物加到每个孔中。

3.避光保存,室温下孵育反应15至60分钟。

4.使用荧光酶标仪在Ex / Em = 530-570 nm / 590-600 nm(最佳Ex / Em = 540/590 nm)处检测荧光强度。

 

图示

Amplite 胆碱定量试剂盒    货号40007

图1.使用Gemini荧光酶标仪(Molecular Devices)在黑色96孔板上用Amplite 胆碱定量试剂盒获得胆碱剂量响应。 30分钟的孵育时间(n = 3)可以检测到低至100 nM(10皮摩尔/孔)的胆碱。

 

 

参考文献

Structural snapshots of the catalytic cycle of the phosphodiesterase Autotaxin
Authors: Hausmann, Jens and Keune, Willem-Jan and Ederveen, Agnes L Hipgrave and van Zeijl, Leonie and Joosten, Robbie P and Perrakis, Anastassis
Journal: Journal of structural biology (2016)

Real-time multiplex PCR assay for genotyping of three apolipoprotein E alleles and two choline acetyltransferase alleles with three hybridization probes
Authors: Park HD, Park KU, Kim KW, Song J, Chang HE, Heo SR, Lee HJ, Kim JQ.
Journal: Clin Chem Lab Med (2007): 346

[Methyl-3H]-choline incorporation into MCF-7 cells: correlation with proliferation, choline kinase and phospholipase D assay
Authors: Al-Saeedi F, Smith T, Welch A.
Journal: Anticancer Res (2007): 901

A simple and rapid radiochemical choline acetyltransferase (ChAT) assay screening test
Authors: Shiba K, Ogawa K, Kinuya S, Yajima K, Mori H.
Journal: J Neurosci Methods (2006): 98

Rapid high-throughput detection of peroxide with an acridinium-9-carboxamide: a homogeneous chemiluminescent assay for plasma choline
Authors: Adamczyk M, Brashear RJ, Mattingly PG.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2006): 2407

Comparison of different sperm detection methods: amplification of fragment 3 of amelogenin gene (AMY 3), acid phosphatase detection, microcristalline choline assay and microscopic examination
Authors: Rydzewska MJ, Janica J, Pepinski W, Skawronska M, Niemcunowicz-Janica A.
Journal: Rocz Akad Med Bialymst (2000): 63

Rapid assay of choline in foods using microwave hydrolysis and a choline biosensor
Authors: Panfili G, Manzi P, Compagnone D, Scarciglia L, Palleschi G.
Journal: J Agric Food Chem (2000): 3403

Establishment of an efficient enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of human choline acetyltransferase
Authors: Poethke R, Tumani H, Felgenhauer K, Mader M.
Journal: J Neuroimmunol (1997): 206

Assay, Purification, and Partial Characterization of Choline Monooxygenase from Spinach
Authors: Burnet M, Lafontaine PJ, Hanson AD.
Journal: Plant Physiol (1995): 581

Ion-exchange liquid chromatography method with indirect UV detection for the assay of choline in pharmaceutical preparations
Authors: Leroy P, Barbaras M, Colin JL, Nicolas A.
Journal: J Pharm Biomed Anal (1995): 581

说明书
Amplite 胆碱定量试剂盒.pdf

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒 货号22405-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒    货号22405 货号 22405 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 450 Em (nm) 630
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,CTC流式细胞术活菌分析试剂盒提供了一种简便的方法,可根据呼吸活动评估细菌的健康和活力。 CTC本身是非荧光的,一旦被活细菌细胞表面的电子转移系统还原,就会形成红色和不溶性荧光CTC甲maz,可以用流式细胞仪检测到。 不能呼吸的死细菌或以较低频率呼吸的不健康细菌将不产生或产生很少的带有CTC染色的红色荧光,因此可对细菌种群的健康状况进行半定量测量。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒。 

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488 nm 激光
发射: 610/20 nm 滤波片
通道: PE-Texas Red通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备10倍染料储备液
2.准备细菌样本
3.将细菌样品与CTC在37°C孵育30分钟
4.PE-Texas Red通道通过流式细胞仪分析样品

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1. CTC储备溶液(10倍):
将1 mL蒸馏水加到CTC(组分A)小瓶中,制成10X储备液。 注意:原液在-20°C稳定2周。 避光。

 

操作步骤

1.准备细菌样品,浓度为106细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重悬于适量的PBS中。注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液,然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液(组分B)中,以使处理后样品中的细菌浓度与活菌浓度相同。注意:开始治疗之前,请确定细菌培养物的浓度。注意:死细菌可以作为阴性对照。建议用70%乙醇杀死细菌30分钟,然后煮沸60分钟。

3.将10 µL 10X CTC储备溶液加到90 µL细菌样品中。

4.充分混合,然后在黑暗中于37°C孵育30分钟。

5.在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加400 µL分析缓冲液(组分B)以增加体积。

6.用流式细胞仪通过PE-Taxes Red通道(Ex / Em = 488/615 nm)监测细菌的荧光。注意:要排除杂物,建议将流式细胞仪的阈值设置为以下值:FSC> 10,000,SSC> 5,000。注意:CTC的效率高度依赖菌株,因此会相应优化染色条件。

 

参考文献

Production of Superoxide in Bacteria Is Stress- and Cell State-Dependent: A Gating-Optimized Flow Cytometry Method that Minimizes ROS Measurement Artifacts with Fluorescent Dyes
Authors: M. E. McBee
Journal: Front Microbiol (2017): 459

Effect of extremely low frequency electromagnetic fields on bacterial membrane
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Simple and rapid preparation of red fluorescence and red color S. aureus derived nanobioparticles for pathogen detection
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Reduction of biofilm formation on titanium surface with ultraviolet-C pre-irradiation
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Journal: J Biomater Appl (2014): 161-171

A novel staining protocol for multiparameter assessment of cell heterogeneity in Phormidium populations (cyanobacteria) employing fluorescent dyes
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Journal: PLoS One (2013): e55283

Method for the direct observation and quantification of survival of bacteria attached to negatively or positively charged surfaces in an aqueous medium
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Journal: Environ Sci Technol (2011): 8345-51

Potential action of copper surfaces on meticillin-resistant Staphylococcus aureus
Authors: L. Weaver
Journal: J Appl Microbiol (2010): 2200-5

Carbonate crystals precipitated by freshwater bacteria and their use as a limestone consolidant
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Journal: Appl Environ Microbiol (2009): 5981-90

Effects of long-term starvation on a host bivalve (Codakia orbicularis, Lucinidae) and its symbiont population
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Rapid Detection of Starved Escherichia coli with Respiratory Activity in Potable Water by Signal-Amplified in situ Hybridization Following Formazan Reduction
Authors: N. Yamaguchi
Journal: Microbes Environ (2009): 286-90

说明书
MycoLight 荧光CTC活细菌定量试剂盒.pdf

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒 货号22407-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒    货号22407 货号 22407 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 498 Em (nm) 526
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,MycoLight流式细胞术活菌分析试剂盒提供了一种简便的方法,可根据细胞内酯酶活性评估细菌活力。 MycoLight™520是一种非荧光酯酶底物,可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。 通过细菌细胞内非特异性酯酶水解后,会产生绿色荧光产物,并在细菌内积累。 与常用的酯酶底物CFDA和CFDA-AM相比,该试剂盒可提供更明亮,更稳定的信号,具有更低的背景和更容易的染色方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 流式细胞计数活细菌检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488 nm 激光
发射: 530/30 nm 滤波片
通道: FITC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备100X染料储备溶液。
2.准备细菌样品。
3.将细菌样品与MycoLight 520在黑暗中于37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟。
4.通过带有FITC通道的流式细胞仪分析样品。

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1MycoLight 520储备液(100X):
将100 µL DMSO(组分C)加入一小瓶MycoLight 520(组分A)中,制成100X储备液。

 

样品示例及操作

1.准备细菌样品,浓度范围为106到108个细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分B)中。注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液,然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液(组分B)中,以使处理后样品中的细菌浓度与活菌浓度相同。注意:开始治疗之前,请确定细菌培养物的浓度。注意:死细菌可以作为阴性对照,建议使用70%乙醇杀死细菌30分钟,然后煮沸60分钟。

3.活/死细菌混合物制备示例:混合7种不同比例的细菌悬液,如表1所示,每个样品的总体积为200 µL。

4.将2 µL 100X MycoLight 520储备液加到200 µL Assay Buffer中的细菌样品中。

5.充分混合并在黑暗中于37°C孵育5-10分钟,或在室温孵育60分钟,以获得最佳染色效果。

6.在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加300 µL分析缓冲液(组分C)以增加体积。

7.用流式细胞仪通过FITC通道(488/530 nm)监测细菌的荧光。注意:要排除杂物,建议将流式细胞仪的阈值设置为以下值:FSC> 10,000,SSC> 5,000。注意:MycoLight 520的效率高度依赖菌株,因此应相应优化染色条件。

 

表1.混合以达到各种活/死比的活样本和死样本的示例体积

活细胞比例 样品死亡µL 活样品µL
0:100 0 200
10:90 20 180
30:70 60 140
50:50 100 100
90:10 180 20
100:0 200 0

 

参考文献

Seminal plasma affects the survival rate and motility pattern of raw llama spermatozoa
Authors: F. G. Fumuso
Journal: Anim Reprod Sci (2018): 99-106

New fluorescein precursors for live bacteria detection
Authors: C. Guilini
Journal: Anal Chem (2015): 8858-66

Protective effects of antithrombin on free groin flaps after secondary venous stasis in the rat model
Authors: J. Wallmichrath
Journal: J Plast Reconstr Aesthet Surg (2014): 707-11

Comparison of different live/dead stainings for detection and quantification of adherent microorganisms in the initial oral biofilm
Authors: P. N. Tawakoli
Journal: Clin Oral Investig (2013): 841-50

A multiplexed immunofluorescence method identifies Phakopsora pachyrhizi Urediniospores and determines their viability
Authors: R. Vittal
Journal: Phytopathology (2012): 1143-52

Rapid flow cytometric method for viability determination of solventogenic clostridia
Authors: M. Linhova
Journal: Folia Microbiol (Praha) (2012): 307-11

Expansion of chondrocytes in a three-dimensional matrix for tracheal tissue engineering
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Journal: Ann Thorac Surg (2004): 444-8; discussion 448-9

Functional changes and motility characteristics of Japanese Black bull spermatozoa separated by Percoll
Authors: K. Suzuki
Journal: Anim Reprod Sci (2003): 157-72

Validation of flow cytometry for assessment of viability and acrosomal integrity of dog spermatozoa and for evaluation of different methods of cryopreservation
Authors: A. I. Pena
Journal: J Reprod Fertil Suppl (2001): 371-6

Kinetic and temporal factors influence chilling injury to germinal vesicle and mature bovine oocytes
Authors: Y. Zeron
Journal: Cryobiology (1999): 35-42

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MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒 货号22409-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒    货号22409 货号 22409 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 498 Em (nm) 526
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,MycoLight 活细菌荧光成像套件提供了一种简便方法,可通过荧光显微镜可视化活细菌。 MycoLight 520是一种非荧光酯酶底物,可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。 通过细菌细胞内非特异性酯酶水解后,会产生绿色荧光产物,并在细菌内积累。 与常用的酯酶底物CFDA和CFDA-AM相比,该试剂盒可提供更明亮,更稳定的信号,具有更低的背景和更容易的染色方案。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 488nm
发射: 530nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备100X染料储备溶液
2.准备细菌样品
3.添加MycoLight 520
4.将细菌样品与MycoLight 520信号增强剂在黑暗中于37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟
5.通过带有FITC滤光片组的荧光显微镜分析样品

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1MycoLight 520储备液(100X):
将100 uL DMSO(组分D)添加到MycoLight 520(组分A)小瓶中,制成100X储备液。

 

样品示例及操作

1.准备细菌样品,浓度范围为106到108个细胞/ ml。在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。通过以10,000 x g离心10分钟除去培养基,然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分C)中。注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ ml。

2.根据需要用测试化合物处理细胞。通过以10,000 x g离心10分钟来去除处理液,然后将沉淀物重新悬浮在适量的测定缓冲液(组分C)中,以使处理过的样品中细菌的浓度与活菌浓度相同。注意:开始治疗之前,请确定细菌培养物的浓度。注意:死细菌可以作为阴性对照,建议使用70%乙醇杀死细菌30分钟,然后煮沸60分钟。

3.将1 µL 100X MycoLight 520储备液和10 µL 10X Signal Enhancer(组分B)加到90 µL的测定缓冲液细菌样品中。

4.充分混合并在黑暗中于37°C孵育5-10分钟,或在室温孵育60分钟,以获得最佳染色效果。

5.使用荧光显微镜通过FITC(Ex / Em = 488/530 nm)通道监控细菌的荧光。注意:相同的方案也可用于酶标仪检测。

 

参考文献

Raman spectroscopic analysis of Lactobacillus rhamnosus GG in response to dehydration reveals DNA conformation changes
Authors: Myintzu Hlaing, M.; Wood, B.; McNaughton, D.; Ying, D.; Augustin, M. A.
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Antibacterial and antigelatinolytic effects of Satureja hortensis L. essential oil on epithelial cells exposed to Fusobacterium nucleatum
Authors: Zeidan-Chulia, F.; Keskin, M.; Kononen, E.; Uitto, V. J.; Soderling, E.; Moreira, J. C.; Gursoy, U. K.
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Inactivation of Cronobacter sakazakii in reconstituted infant formula by combination of thymoquinone and mild heat
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Fourier transform infra-red spectroscopy and flow cytometric assessment of the antibacterial mechanism of action of aqueous extract of garlic (Allium sativum) against selected probiotic Bifidobacterium strains
Authors: Booyens, J.; Thantsha, M. S.
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Deposition and survival of Escherichia coli O157:H7 on clay minerals in a parallel plate flow system
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Observation of injured E. coli population resulting from the application of high-pressure throttling treatments
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Behaviors of physiologically active bacteria in water environment and chlorine disinfection
Authors: Sawaya, K.; Kaneko, N.; Fukushi, K.; Yaguchi, J.
Journal: Water Sci Technol (2008): 1343-8

Long-term survival of Legionella pneumophila in the viable but nonculturable state after monochloramine treatment
Authors: Alleron, L.; Merlet, N.; Lacombe, C.; Frere, J.
Journal: Curr Microbiol (2008): 497-502

说明书
MycoLight 活细菌荧光成像试剂盒.pdf

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒 货号22411-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒    货号22411 货号 22411 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 5244
Ex (nm) 488/540 Em (nm) 530/620
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒,AAT Bioquest的MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒提供双色荧光检测,通过荧光显微镜观察活细菌和死细菌。MycoLight 520是一种非荧光酯酶底物,可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。在细菌细胞内非特异性酯酶水解后,产生绿色荧光产物并在细菌内积累。相比之下,碘化丙锭是一种红色荧光核酸染色剂,只能穿透受损膜的细菌。因此,使用MycoLight 520和碘化丙锭染料的适当混合物,具有完整细胞膜的活细菌发出绿色荧光,而具有受损膜的死细菌产生红色荧光。MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒是一种用于对活/死细菌进行成像的强大工具。可以在Ex / Em = 488 / 525nm(FITC滤光器组)和540 / 620nm(TRITC滤光器组)下荧光测量染色细胞,分别用于活细菌和死细菌。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒。 

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 488nm / 540nm
发射: 530nm / 620nm
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC / TRITC滤波片组

产品说明书

染色样品示例

概述

1.准备100X MycoLight 520原液
2.准备细菌样本
3.加入MycoLight 520和碘化丙锭
4.将细菌样品与MycoLight 520和碘化丙啶在37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟
5.用FITC和TRITC滤光片组通过荧光显微镜分析样品
注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分

操作步骤

        在没有额外说明的情况下,所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C,避免反复冻融循环。


1.MycoLight 520原液(100X):
将100μLDMSO(组分D)加入MycoLight 520(组分A)的小瓶中。
注意:将储备溶液储存在-20°C,避免光照,反复冻融。

2.制备浓度为106至108个细胞/ mL的细菌样品。 在适当的培养基中将细菌培养到对数晚期。

注意:测量波长= 600 nm(OD600)的细菌培养物的光密度以确定细胞数。 对于大肠杆菌培养物,OD 600 = 1.0等于8×108个细胞/ ml。

3.通过以10,000xg离心10分钟除去培养基,并将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分C)中。

4.通过用70%乙醇处理30分钟,然后煮沸60分钟,可以制备死细菌。
 
5.染色
        以下是推荐的方案,应根据不同的细菌菌株或其他特定需求进行优化。 如果观察到更高的背景,可以在成像之前添加任选的洗涤步骤。
 
5.1将1μL100XMycoLight 520原液和1μL100X碘化丙啶(组分B)加入到100μL测定缓冲液中的细菌样品中。
5.2充分混合并在37℃下在黑暗中孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟以获得最佳染色结果。
5.3通过FITC(Ex / Em = 488 / 530nm)和TRITC(Ex / Em = 540 / 620nm)通道用荧光显微镜监测细菌的荧光。
 
染色结果
 
MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒    货号22411
图1.用MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒染色活的和死的枯草芽孢杆菌的混合群体。 具有活性细胞内酯酶的活细菌显示绿色荧光,而具有受损膜的70%酒精杀死的死细菌显示红色荧光。
 
参考文献

Raman spectroscopic analysis of Lactobacillus rhamnosus GG in response to dehydration reveals DNA conformation changes
Authors: Myintzu Hlaing, M.; Wood, B.; McNaughton, D.; Ying, D.; Augustin, M. A.
Journal: J Biophotonics (2017): 589-597

Antibacterial and antigelatinolytic effects of Satureja hortensis L. essential oil on epithelial cells exposed to Fusobacterium nucleatum
Authors: Zeidan-Chulia, F.; Keskin, M.; Kononen, E.; Uitto, V. J.; Soderling, E.; Moreira, J. C.; Gursoy, U. K.
Journal: J Med Food (2015): 503-6

Inactivation of Cronobacter sakazakii in reconstituted infant formula by combination of thymoquinone and mild heat
Authors: Shi, C.; Jia, Z.; Chen, Y.; Yang, M.; Liu, X.; Sun, Y.; Zheng, Z.; Zhang, X.; Song, K.; Cui, L.; Baloch, A. B.; Xia, X.
Journal: J Appl Microbiol (2015): 1700-6

Fourier transform infra-red spectroscopy and flow cytometric assessment of the antibacterial mechanism of action of aqueous extract of garlic (Allium sativum) against selected probiotic Bifidobacterium strains
Authors: Booyens, J.; Thantsha, M. S.
Journal: BMC Complement Altern Med (2014): 289

Deposition and survival of Escherichia coli O157:H7 on clay minerals in a parallel plate flow system
Authors: Cai, P.; Huang, Q.; Walker, S. L.
Journal: Environ Sci Technol (2013): 1896-903

Observation of injured E. coli population resulting from the application of high-pressure throttling treatments
Authors: De Lamo-Castellvi, S.; Toledo, R.; Frank, J. F.
Journal: J Food Sci (2013): M582-6

Effect of air drying on bacterial viability: A multiparameter viability assessment
Authors: Nocker, A.; Fernandez, P. S.; Montijn, R.; Schuren, F.
Journal: J Microbiol Methods (2012): 86-95

patients and environment
Authors: Lindback, T.; Rottenberg, M. E.; Roche, S. M.; Rorvik, L. M., The ability to enter into an avirulent viable but non-culturable (VBNC) form is widespread among Listeria monocytogenes isolates from salmon
Journal: Vet Res (2010): 8

Behaviors of physiologically active bacteria in water environment and chlorine disinfection
Authors: Sawaya, K.; Kaneko, N.; Fukushi, K.; Yaguchi, J.
Journal: Water Sci Technol (2008): 1343-8

Long-term survival of Legionella pneumophila in the viable but nonculturable state after monochloramine treatment
Authors: Alleron, L.; Merlet, N.; Lacombe, C.; Frere, J.
Journal: Curr Microbiol (2008): 497-502

说明书
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MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒 货号22415-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒

MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒

MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒    货号22415 货号 22415 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 650 Em (nm) 669
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的染色细菌的试剂盒,AAT Bioquest的MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒提供了一种新颖的一步荧光测定法,用于确定活菌中的革兰氏菌。革兰氏染色是在临床和研究环境中对细菌进行分类的重要且广泛使用的方法。原始方法涉及很多步骤,例如热固定,两步染色方案,酒精提取和复染。这些步骤可能会导致不一致的染色。 AAT Bioquest的一站式工具包消除了更多步骤,从而克服了出现的问题。该试剂盒使用了荧光标记的伴刀豆球蛋白A(ConA),这是一种凝集素,可选择性地与暴露于革兰氏阳性细菌表面的N-乙酰氨基葡糖结合。当革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌用荧光标记的ConA共轭物染色时,只有革兰氏阳性菌发出红色荧光。染色的细菌可以通过荧光监测。因为与其他现有染料相比,我们试剂盒中使用的荧光标记ConA共轭物显示出更高的亮度和光稳定性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的MycoLight 快速荧光革兰氏阳性细菌染色试剂盒。 

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: 650nm
发射: 669nm滤波片
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备细菌样本
2.准备并添加IF647-ConA
3.在黑暗中于室温下将细菌样品与IF647-ConA孵育5-15分钟
4.去除IF647-ConA染色溶液并重悬于测定缓冲液中
5.使用Cy5滤光片组通过荧光显微镜分析样品

 

溶液制备

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1IF647-ConA储备溶液(100X):
向IF647-ConA小瓶(组分A)中加入100 µL测定缓冲液(组分B),并充分混合。 注意:将储备溶液储存在-20ºC,避免光照,并以较小的等分试样储存,以避免重复的冻融循环。

 

样品示例及操作

1.细菌样品的制备

1.1在适当的培养基中使细菌生长到对数后期。 准备细菌样品,浓度范围为106到108个细胞/ mL。 注意:在波长= 600 nm(OD600)处测量细菌培养物的光密度,以确定细胞数。 对于大肠杆菌培养,OD600 = 1.0等于8 x 108细胞/ mL。

1.2通过以10,000 x g离心5分钟除去培养基,然后将沉淀重新悬浮在测定缓冲液(组分B)中。

 

2.染色方案

2.1向100 µL细菌样品中加入1 µL IF647-ConA储备溶液(100X)。

2.2充分混合,然后在室温下于黑暗中孵育5-15分钟。

2.3以10,000 x g离心5分钟,然后除去IF647-ConA染色溶液。

2.4重悬于100 µL分析缓冲液(组分B)中。

2.5使用荧光显微镜通过Cy5(Ex / Em = 650/669 nm)通道监控细菌的荧光。 注意:该协议仅提供指导,应根据不同的细菌菌株或其他特定需求进行优化。 如果观察到更高的背景,则可以在成像之前添加一个可选的检测缓冲液(组分B)洗涤步骤。

 

参考文献

Antibacterial activity of synthetic 1,3-bis(aryloxy)propan-2-amines against Gram-positive bacteria
Authors: M. S. M. Serafim
Journal: Microbiologyopen (2019): e814

Antibacterial Potential of Aloe weloensis (Aloeacea) Leaf Latex against Gram-Positive and Gram-Negative Bacteria Strains
Authors: Y. K. Emiru
Journal: Int J Microbiol (2019): 5328238

Bacteriocins of Gram-positive bacteria having activity spectra extending beyond closely-related species
Authors: S. D. Todorov
Journal: Benef Microbes (2019): 1-14

Butenolide, a Marine-Derived Broad-Spectrum Antibiofilm Agent Against Both Gram-Positive and Gram-Negative Pathogenic Bacteria
Authors: Q. Yin
Journal: Mar Biotechnol (NY) (2019): 88-98

Coriander essential oil and linalool – interactions with antibiotics against Gram-positive and Gram-negative bacteria
Authors: P. Aelenei
Journal: Lett Appl Microbiol (2019): 156-164

Depletion of Gram-Positive Bacteria Impacts Hepatic Biological Functions During the Light Phase
Authors: H. Y. P. Oh
Journal: Int J Mol Sci (2019): se name=”22415.enl” path=”C:WebsiteReferencesR Files22415.enl”>22415.enlEndNote3317Oh, H. Y. P.Ellero-Simatos, S.Manickam, R.Tan, N. S.Guillou, H.Wahli, W.Interdisciplinary Graduate School, NTU Institute for Health Technologies, Nanyang Technological

Design and synthesis of biaryloxazolidinone derivatives containing a rhodanine or thiohydantoin moiety as novel antibacterial agents against Gram-positive bacteria
Authors: Y. Wu
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2019): 496-502

Design, Synthesis and Biological Evaluation of Novel DNA Gyrase-Inhibiting Spiropyrimidinetriones as Potent Antibiotics for Treatment of Infections Caused by Multidrug-Resistant Gram-Positive Bacteria
Authors: C. Shi
Journal: J Med Chem (2019): se name=”22415.enl” path=”C:WebsiteReferencesR Files22415.enl”>22415.enlEndNote9917Shi, C.Zhang, Y.Wang, T.Lu, W.Zhang, S.Guo, B.Chen, Q.Luo, C.Zhou, X. L.Yang, Y.Design, Synthesis and Biological Evaluation of Novel DNA Gyrase-Inhibiting Spiropyrimidi

Discovery of small molecule antibiotics against a unique tRNA-mediated regulation of transcription in Gram-positive bacteria
Authors: K. M. Frohlich
Journal: ChemMedChem (2019): se name=”22415.enl” path=”C:WebsiteReferencesR Files22415.enl”>22415.enlEndNote8817Frohlich, K. M.Weintraub, S.Bell, J. T.Todd, G. C.Vare, V. Y.Schneider, R.Kloos, Z. A.Tabe, E. S.Cantara, W. A.Stark, C.Onwuanaibe, U.Duffy, B. C.Basanta-Sanchez, M.Kit

Highly-branched poly(N-isopropyl acrylamide) functionalised with pendant Nile red and chain end vancomycin for the detection of Gram-positive bacteria
Authors: T. Swift
Journal: Acta Biomater (2019): se name=”22415.enl” path=”C:WebsiteReferencesR Files22415.enl”>22415.enlEndNote7717Swift, T.Katsikogianni, M.Hoskins, R.Teratarantorn, P.Douglas, I.MacNeil, S.Rimmer, S.Polymer and Biomaterials Chemistry Laboratories, School of Chemistry and Bioscienc

说明书
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Cell Meter 细胞内谷胱甘肽检测试剂盒(适用于流式细胞仪,激发光:405nm) 货号22809-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter 细胞内谷胱甘肽检测试剂盒(适用于流式细胞仪,激发光:405nm)

Cell Meter 细胞内谷胱甘肽检测试剂盒(适用于流式细胞仪,激发光:405nm)

Cell Meter 细胞内谷胱甘肽检测试剂盒(适用于流式细胞仪,激发光:405nm)    货号22809 货号 22809 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) 415 Em (nm) 499
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞内谷胱甘肽检测试剂盒是一种具有多种参数可监测细胞凋亡的试剂盒。该试剂盒通过测量还原型谷胱甘肽(GSH)的减少来检测细胞凋亡。GSH对于维持细胞的氧化还原水平很重要,它参与许多细胞过程,包括清除自由基,药物解毒,细胞信号传导和细胞增殖等。细胞中GSH浓度的降低是许多细胞死亡的早期标志。我们的Cell Meter 细胞内GSH检测试剂盒使用我们专有的ThiolTrace Violet500,当与硫醇(包括细胞中的GSH)反应时,它会发出强烈的荧光。在正常细胞中,该探针是高度荧光的,而在凋亡细胞中,染色强度会大幅度降低。用ThiolTrace Violet染色的细胞可以用流式细胞仪(Pacific Orange 滤光片组)观察。该试剂盒可与其他试剂(例如7-AAD(#17501)一起使用,用于细胞活力和凋亡的多参数研究。该试剂盒经过优化,可通过流式细胞仪筛选凋亡激活剂和抑制剂。

点击查看光谱

点击查看细胞样品制备指南

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405nm激发
发射: 525/50nm滤波片
通道: Pacific Orange通道

产品说明书

实验方案

简要概述

用5×105到1×106细胞/ mL 的密度制备含测试化合物的细胞

准备ThiolTrace Violet 500工作溶液并将其添加到细胞中

在37℃孵育20至30分钟

在Ex / Em = 405/525 nm处读取荧光强度(Pacific Orange滤光片组)

 

溶液配制

储备溶液配制

ThiolTrace Violet 500储备液(500X):
在ThiolTrace Violet 500 的小瓶中加入200 µL DMSO(组分C)。注意:分装并在-20℃储存未使用的ThiolTrace Violet 500,避免反复冷冻/解冻循环。

 

工作溶液配制

ThiolTrace Violet 500工作溶液(1X):
将2 µL ThiolTrace Violet 500储备溶液添加到1 mL的测定缓冲液(组分B)或您自备的缓冲液中,并充分混合。注意:ThiolTrace Violet 500 工作溶液可以在含有血清的细胞培养基中制备。

 

操作步骤

  1. 对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,在使用ThiolTrace Violet 500工作溶液孵育之前,用含血清的培养基洗涤细胞一次。 注意:最佳孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。
  2. 将细胞以1000 rpm的速度离心4分钟,然后用1 mL缓冲液(可选)洗涤细胞。
  3. 将细胞重悬于1 mL ThiolTrace Violet 500工作溶液中,并在37℃的培养箱中孵育20至30分钟。
  4. 使用Pacific Orange滤光片组(Ex / Em = 405/525 nm),用流式细胞仪检测荧光强度。

 

图示

Cell Meter 细胞内谷胱甘肽检测试剂盒(适用于流式细胞仪,激发光:405nm)    货号22809

图1.在HL-60细胞中加入喜树碱后,ThiolTrace Violet 500的荧光强度降低。 将HL-60细胞在37℃,5%CO2培养箱中在无(红线)或20μM喜树碱(绿线)下处理6小时,然后用ThiolTrace Violet 500染色20分钟。 使用带有Pacific Orange通道的ACEA NovoCyte 3000流式细胞仪测量荧光强度。

 

参考文献

Cell-based assay using glutathione-depleted HepaRG and HepG2 human liver cells for predicting drug-induced liver injury
Authors: Xu, J., Oda, S., Yokoi, T.
Journal: Toxicol In Vitro (2018): 286-301

 

相关产品

产品名称

 
货号 规格

 
Cell Meter 细胞内谷胱甘肽检测试剂盒(适用于流式细胞仪) 22809 499
Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒(适用于流式细胞仪) 22810 525

说明书
Cell Meter 细胞内谷胱甘肽检测试剂盒(适用于流式细胞仪,激发光:405nm).pdf

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG 货号45205-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG    货号45205 货号 45205 存储条件 Multiple
规格 100 Tests 价格 6564
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更高效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 488 Styramide是Alexa Fluor 488酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 488 Styramide PSA成像试剂盒。

点击查看光谱

点击查看iFluor系列光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: FITC滤波片组
发射: FITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的Styramide 缀合物(组分A)的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2溶液(100X):向9 mL的ddH2O中添加1 mL的3%过氧化氢(组分E)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2 储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需的100 µL Styramide 工作溶液,提供的Styramide 足以进行100次测试。注意: 必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:在含1%BSA的PBS中以1:100稀释100X二级抗体-HRP储备溶液。注意:  此试剂盒中提供的二抗HRP足以用于100μL HRP工作溶液/盖玻片或96孔板中的每孔进行100次测试。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的最佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

 

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG    货号45205

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG    货号45205

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG    货号45205

图3.使用iFluor PSA 成像试剂盒对甲醛固定,对石蜡包埋的人肺腺癌进行顺序免疫染色。用兔抗EpCam抗体和带有山羊抗兔IgG的iFluor 488 PSA 成像试剂盒标记EpCam,然后洗涤。Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗体标记、iFluor 555 PSA 成像试剂盒带有山羊抗小鼠IgG标记。细胞核用DAPI标记。在共聚焦显微镜上采集图像。

 

说明书
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iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗兔IgG 货号45220-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗兔IgG

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗兔IgG

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗兔IgG    货号45220 货号 45220 存储条件 Multiple
规格 100 Tests 价格 6564
Ex (nm) 557 Em (nm) 570
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更高效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 555 PSA试剂盒是基于Alexa Fluor 555酪酰胺的试剂盒或其他光谱相似的荧光酪酰胺或TSA试剂盒的出色替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 555 Styramide PSA试剂盒。

点击查看光谱

点击查看iFluor系列光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy3/TRITC滤波片组
发射: Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy3/TRITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的Styramide 缀合物(组分A)的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2溶液(100X):向9 mL的ddH2O中添加1 mL的3%过氧化氢(组分E)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2 储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需的100 µL Styramide 工作溶液,提供的Styramide 足以进行100次测试。注意: 必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:在含1%BSA的PBS中以1:100稀释100X二级抗体-HRP储备溶液。注意:  此试剂盒中提供的二抗HRP足以用于100μL HRP工作溶液/盖玻片或96孔板中的每孔进行100次测试。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的最佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

 

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗兔IgG    货号45220

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗兔IgG    货号45220

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗兔IgG    货号45220

图3.使用iFluor PSA 成像试剂盒对甲醛固定,对石蜡包埋的人肺腺癌进行顺序免疫染色。用兔抗EpCam抗体和带有山羊抗兔IgG的iFluor 488 PSA 成像试剂盒标记EpCam,然后洗涤。Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗体标记、iFluor 555 PSA 成像试剂盒带有山羊抗小鼠IgG标记。细胞核用DAPI标记。在共聚焦显微镜上采集图像。

 

说明书
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iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG 货号45240-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG    货号45240 货号 45240 存储条件 Multiple
规格 100 Tests 价格 6564
Ex (nm) 656 Em (nm) 670
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更高效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 647 PSA试剂盒是基于Alexa Fluor 647酪酰胺的试剂盒或其他光谱相似的荧光酪酰胺或TSA试剂盒的出色替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 647 Styramide PSA试剂盒。

点击查看光谱

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy5滤波片组
发射: Cy5滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy5滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的Styramide 缀合物(组分A)的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2溶液(100X):向9 mL的ddH2O中添加1 mL的3%过氧化氢(组分E)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2 储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需的100 µL Styramide 工作溶液,提供的Styramide 足以进行100次测试。注意: 必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:在含1%BSA的PBS中以1:100稀释100X二级抗体-HRP储备溶液。注意:  此试剂盒中提供的二抗HRP足以用于100μL HRP工作溶液/盖玻片或96孔板中的每孔进行100次测试。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的最佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

 

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG    货号45240

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG    货号45240

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG    货号45240

图3.使用iFluor PSA 成像试剂盒对甲醛固定,对石蜡包埋的人肺腺癌进行顺序免疫染色。用兔抗EpCam抗体和带有山羊抗兔IgG的iFluor 488 PSA 成像试剂盒标记EpCam,然后洗涤。Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗体标记、iFluor 555 PSA 成像试剂盒带有山羊抗小鼠IgG标记。细胞核用DAPI标记。在共聚焦显微镜上采集图像。

 

说明书
iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含有山羊抗兔IgG.pdf

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG 货号45260-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45260 货号 45260 存储条件 Multiple
规格 100 Tests 价格 6564
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更高效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 488 PSA试剂盒是基于Alexa Fluor 488酪酰胺的试剂盒或其他光谱相似的荧光酪酰胺或TSA试剂盒的出色替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 488 Styramide PSA试剂盒。

点击查看光谱

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: FITC滤波片组
发射: FITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: FITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的Styramide 缀合物(组分A)的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2溶液(100X):向9 mL的ddH2O中添加1 mL的3%过氧化氢(组分E)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2 储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需的100 µL Styramide 工作溶液,提供的Styramide 足以进行100次测试。注意: 必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:在含1%BSA的PBS中以1:100稀释100X二级抗体-HRP储备溶液。注意:  此试剂盒中提供的二抗HRP足以用于100μL HRP工作溶液/盖玻片或96孔板中的每孔进行100次测试。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的最佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

 

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45260

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45260

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45260

图3.使用iFluor PSA 成像试剂盒对甲醛固定,对石蜡包埋的人肺腺癌进行顺序免疫染色。用兔抗EpCam抗体和带有山羊抗兔IgG的iFluor 488 PSA 成像试剂盒标记EpCam,然后洗涤。Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗体标记、iFluor 555 PSA 成像试剂盒带有山羊抗小鼠IgG标记。细胞核用DAPI标记。在共聚焦显微镜上采集图像。

 

说明书
iFluor 488 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG.pdf

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG 货号45270-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45270 货号 45270 存储条件 Multiple
规格 100 Tests 价格 6564
Ex (nm) 557 Em (nm) 570
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更高效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 555 PSA试剂盒是基于Alexa Fluor 555酪酰胺的试剂盒或其他光谱相似的荧光酪酰胺或TSA试剂盒的出色替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 555 Styramide PSA试剂盒。

点击查看光谱

点击查看iFluor系列光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy3/TRITC滤波片组
发射: Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy3/TRITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的Styramide 缀合物(组分A)的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2溶液(100X):向9 mL的ddH2O中添加1 mL的3%过氧化氢(组分E)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2 储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需的100 µL Styramide 工作溶液,提供的Styramide 足以进行100次测试。注意: 必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:在含1%BSA的PBS中以1:100稀释100X二级抗体-HRP储备溶液。注意:  此试剂盒中提供的二抗HRP足以用于100μL HRP工作溶液/盖玻片或96孔板中的每孔进行100次测试。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的最佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

 

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45270

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45270

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45270

图3.使用iFluor PSA 成像试剂盒对甲醛固定,对石蜡包埋的人肺腺癌进行顺序免疫染色。用兔抗EpCam抗体和带有山羊抗兔IgG的iFluor 488 PSA 成像试剂盒标记EpCam,然后洗涤。Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗体标记、iFluor 555 PSA 成像试剂盒带有山羊抗小鼠IgG标记。细胞核用DAPI标记。在共聚焦显微镜上采集图像。

 

说明书
iFluor 555 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG.pdf

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG 货号45280-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45280 货号 45280 存储条件 Multiple
规格 100 Tests 价格 6564
Ex (nm) 588 Em (nm) 604
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更高效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 594 PSA试剂盒是基于Alexa Fluor 594酪酰胺的试剂盒或其他光谱相似的荧光酪酰胺或TSA试剂盒的出色替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 594 Styramide PSA试剂盒。

点击查看光谱

点击查看iFluor系列光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy3/TRITC滤波片组
发射: Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy3/TRITC滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的Styramide 缀合物(组分A)的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2溶液(100X):向9 mL的ddH2O中添加1 mL的3%过氧化氢(组分E)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2 储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需的100 µL Styramide 工作溶液,提供的Styramide 足以进行100次测试。注意: 必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:在含1%BSA的PBS中以1:100稀释100X二级抗体-HRP储备溶液。注意:  此试剂盒中提供的二抗HRP足以用于100μL HRP工作溶液/盖玻片或96孔板中的每孔进行100次测试。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的最佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波片观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

 

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45280

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45280

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45280

图3.使用iFluor PSA 成像试剂盒对甲醛固定,对石蜡包埋的人肺腺癌进行顺序免疫染色。用兔抗EpCam抗体和带有山羊抗兔IgG的iFluor 488 PSA 成像试剂盒标记EpCam,然后洗涤。Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗体标记、iFluor 555 PSA 成像试剂盒带有山羊抗小鼠IgG标记。细胞核用DAPI标记。在共聚焦显微镜上采集图像。

 

说明书
iFluor 594 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG.pdf

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG 货号45290-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45290 货号 45290 存储条件 Multiple
规格 100 Tests 价格 6564
Ex (nm) 656 Em (nm) 670
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更高效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 647 PSA试剂盒是基于Alexa Fluor 647酪酰胺的试剂盒或其他光谱相似的荧光酪酰胺或TSA试剂盒的出色替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的iFluor 647 Styramide PSA试剂盒。

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适用仪器


荧光显微镜  
激发: Cy5滤波片组
发射: Cy5滤波片组
推荐孔板: 黑色透明
滤波片: Cy5滤波片组

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的Styramide 缀合物(组分A)的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2溶液(100X):向9 mL的ddH2O中添加1 mL的3%过氧化氢(组分E)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2 储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需的100 µL Styramide 工作溶液,提供的Styramide 足以进行100次测试。注意: 必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:在含1%BSA的PBS中以1:100稀释100X二级抗体-HRP储备溶液。注意:  此试剂盒中提供的二抗HRP足以用于100μL HRP工作溶液/盖玻片或96孔板中的每孔进行100次测试。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的最佳孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

 

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45290

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45290

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG    货号45290

图3.使用iFluor PSA 成像试剂盒对甲醛固定,对石蜡包埋的人肺腺癌进行顺序免疫染色。用兔抗EpCam抗体和带有山羊抗兔IgG的iFluor 488 PSA 成像试剂盒标记EpCam,然后洗涤。Pan-Keratin用小鼠抗Pan Keratin抗体标记、iFluor 555 PSA 成像试剂盒带有山羊抗小鼠IgG标记。细胞核用DAPI标记。在共聚焦显微镜上采集图像。

 

说明书
iFluor 647 Styramide超级信号放大成像试剂盒,含山羊抗小鼠IgG.pdf

Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒 货号17645-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒

Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒

Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒    货号17645 货号 17645 存储条件 Multiple
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 503 Em (nm) 527
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

DNA定量是DNA样品制备过程中的一项重要工作,Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒提供了一种用Helixyte Green BR快速测定dsDNA的方法。该测定法在三个数量级上是线性的,并且比紫外线吸收度读数灵敏度高几个数量级。Helixyte Green-BR与dsDNA结合后荧光增强,序列依赖性小,可准确测定基因组DNA、病毒DNA、miniprep-DNA或PCR扩增产物等多种来源的DNA样品。该方法对RNA上的双链DNA(dsDNA)具有高度的选择性,并且被优化以测量从10 pg/ul到10 ng/ul的DNA浓度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒。

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 530nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 准备dSDNA标准品,测试样品和染料工作溶液
  2. 添加DNA标准液或测试样品(50 uL)
  3. 添加Helixyte Green-BR工作溶液(50 uL)
  4. 在室温下孵育2分钟
  5. 检测Ex / Em = 490/530 nm的荧光强度

提示:操作前将所有组件加热到室温。暂时没有关于Helixyte Green dsDNA染色剂的致突变性或毒性的数据。由于该试剂与核酸结合,因此应将其视为潜在的诱变剂,应谨慎处理。DMSO储备溶液应特别小心,因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。

 

溶液配制

标准溶液配制

将100 uL的100 ug / mL dsDNA标准溶液(组分C)添加到400 uL的测定缓冲液(组分B)中,以生成20 ug / mL的dsDNA标准溶液。然后用测定缓冲液(组分B)进行1:3的系列稀释,以得到0至20 ug / mL的系列稀释的dsDNA标准品。

 

工作溶液配制

Helixyte Green BR工作溶液:将50 uL Helixyte Green BR(组分A)添加到5 mL的测定缓冲液(组分B)中,使总体积为5.050 mL。通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 注意:我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备该溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。为了获得最佳结果,应在准备后的几个小时内使用此溶液。

 

实验步骤

表1.  在透明底部96孔微孔板中的dsDNA标准品和测试样品的布局。DS = dsDNA标准品(DS1-DS7,20至0.027 ug / mL); BL =空白对照;TS =测试样品

BL

BL

TS

TS

DS1

DS1

DS2

DS2

DS3

DS3

 

 

DS4

DS4

 

 

DS5

DS5

 

 

DS6

DS6

 

 

DS7

DS7

 

 

表2.  每个孔的试剂组成

Well

Volume

Reagent

DS1-DS7

50 uL

连续稀释 (20 to 0.027 ug/mL)

BL

50 uL

缓冲液 (Component B)

TS

50 uL

实验样品

  1. 根据表1和表2提供的布局,制备dsDNA标准品(DS)、空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 uL试剂,而不是50 uL。注:根据需要处理细胞或组织样本。
  2. 添加50 uL Helixyte Green-BR染料工作液(2X)分别加入dsDNA标准液、空白对照液和供试品中,使总分析体积为100ul/孔。对于384孔板,添加25 uL的Helixyte Green-BR染料工作溶液,每孔总体积为50 uL/孔。
  3. 在室温下避光培养2分钟。
  4. 在Ex/Em=490/530 nm(截止=515nm)处用荧光酶标仪检测荧光强度。

 

图示

 

 

Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒    货号17645

图1.用Helixyte Green dsDNA定量试剂盒在96孔黑色孔板中测量了dsDNA剂量反应。

 

 

参考文献

A new reporter design based on DNA origami nanostructures for quantification of short oligonucleotides using microbeads
Authors: Choi, Y., Schmidt, C., Tinnefeld, P., Bald, I., Rodiger, S.
Journal: Sci Rep (2019): 4769

A universal fluorescence-based toolkit for real-time quantification of DNA and RNA nuclease activity
Authors: Sheppard, E. C., Rogers, S., Harmer, N. J., Chahwan, R.
Journal: Sci Rep (2019): 8853

Effects of Quantification Methods, Isolation Kits, Plasma Biobanking, and Hemolysis on Cell-Free DNA Analysis in Plasma
Authors: Streleckiene, G., Forster, M., Inciuraite, R., Lukosevicius, R., Skieceviciene, J.
Journal: Biopreserv Biobank (2019): ersion=”1.0″ encoding=”UTF-8″ ?>17645.enlEndNote1117Streleckiene, G.Forster, M.Inciuraite, R.Lukosevicius, R.Skieceviciene, J.1Institute for Digestive Research, Lithuanian University of Health Sciences, Kaunas, Lithuania. 2Institute of Clinical Molecu

Flat-top TIRF illumination boosts DNA-PAINT imaging and quantification
Authors: Stehr, F., Stein, J., Schueder, F., Schwille, P., Jungmann, R.
Journal: Nat Commun (2019): 1268

Molecular-Recognition-Based DNA Nanodevices for Enhancing the Direct Visualization and Quantification of Single Vesicles of Tumor Exosomes in Plasma Microsamples
Authors: He, D., Ho, S. L., Chan, H. N., Wang, H., Hai, L., He, X., Wang, K., Li, H. W.
Journal: Anal Chem (2019): 2768-2775

Quantification of fixed adherent cells using a strong enhancer of the fluorescence of DNA dyes
Authors: Ligasova, A., Koberna, K.
Journal: Sci Rep (2019): 8701

A fluorescent reporter for quantification and enrichment of DNA editing by APOBEC-Cas9 or cleavage by Cas9 in living cells
Authors: St Martin, A., Salamango, D., Serebrenik, A., Shaban, N., Brown, W. L., Donati, F., Munagala, U., Conticello, S. G., Harris, R. S.
Journal: Nucleic Acids Res (2018): e84

Accuracy of human sperm DNA oxidation quantification and threshold determination using an 8-OHdG immuno-detection assay
Authors: Vorilhon, S., Brugnon, F., Kocer, A., Dollet, S., Bourgne, C., Berger, M., Janny, L., Pereira, B., Aitken, R. J., Moazamian, A., Gharagozloo, P., Drevet, J., Pons-Rejraji, H.
Journal: Hum Reprod (2018): 553-562

Cell Type-Specific Quantification of Telomere Length and DNA Double-strand Breaks in Individual Lung Cells by Fluorescence In Situ Hybridization and Fluorescent Immunohistochemistry
Authors: van Batenburg, A. A., Kazemier, K. M., Peeters, T., van Oosterhout, M. F. M., van der Vis, J. J., Grutters, J. C., Goldschmeding, R., van Moorsel, C. H. M.
Journal: J Histochem Cytochem (2018): 485-495

Identification and Quantification of Heterogeneously-methylated DNA Fragments Using Epiallele-sensitive Droplet Digital Polymerase Chain Reaction (EAST-ddPCR)
Authors: Menschikowski, M., J and eck, C., Friedemann, M., Richter, S., Thiem, D., Lange, B. S., Suttorp, M.
Journal: Cancer Genomics Proteomics (2018): 299-312

说明书
Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒.pdf

Helixyte Green双链DNA定量检测试剂盒 货号17646-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Helixyte Green双链DNA定量检测试剂盒

Helixyte Green双链DNA定量检测试剂盒

Helixyte Green双链DNA定量检测试剂盒    货号17646 货号 17646 存储条件 Multiple
规格 1000 Tests 价格 6564
Ex (nm) 503 Em (nm) 527
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

DNA定量是DNA样品制备过程中的一项重要工作,Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒提供了一种用Helixyte Green BR快速测定dsDNA的方法。该测定法在三个数量级上是线性的,并且比紫外线吸收度读数灵敏度高几个数量级。Helixyte Green-BR与dsDNA结合后荧光增强,序列依赖性小,可准确测定基因组DNA、病毒DNA、miniprep-DNA或PCR扩增产物等多种来源的DNA样品。该方法对RNA上的双链DNA(dsDNA)具有高度的选择性,并且被优化以测量从10 pg/ul到10 ng/ul的DNA浓度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Helixyte 绿色双链DNA定量检测试剂盒。

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适用仪器


荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 530nm
cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色孔板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 准备dSDNA标准品,测试样品和染料工作溶液
  2. 添加DNA标准液或测试样品(50 uL)
  3. 添加Helixyte Green-BR工作溶液(50 uL)
  4. 在室温下孵育2分钟
  5. 检测Ex / Em = 490/530 nm的荧光强度

提示:操作前将所有组件加热到室温。暂时没有关于Helixyte Green dsDNA染色剂的致突变性或毒性的数据。由于该试剂与核酸结合,因此应将其视为潜在的诱变剂,应谨慎处理。DMSO储备溶液应特别小心,因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。

 

溶液配制

标准溶液配制

将100 uL的100 ug / mL dsDNA标准溶液(组分C)添加到400 uL的测定缓冲液(组分B)中,以生成20 ug / mL的dsDNA标准溶液。然后用测定缓冲液(组分B)进行1:3的系列稀释,以得到0至20 ug / mL的系列稀释的dsDNA标准品。

 

工作溶液配制

Helixyte Green BR工作溶液:将50 uL Helixyte Green BR(组分A)添加到5 mL的测定缓冲液(组分B)中,使总体积为5.050 mL。通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。 注意:我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备该溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。为了获得最佳结果,应在准备后的几个小时内使用此溶液。

 

实验步骤

表1.  在透明底部96孔微孔板中的dsDNA标准品和测试样品的布局。DS = dsDNA标准品(DS1-DS7,20至0.027 ug / mL); BL =空白对照;TS =测试样品

BL

BL

TS

TS

DS1

DS1

DS2

DS2

DS3

DS3

 

 

DS4

DS4

 

 

DS5

DS5

 

 

DS6

DS6

 

 

DS7

DS7

 

 

表2.  每个孔的试剂组成

Well

Volume

Reagent

DS1-DS7

50 uL

连续稀释 (20 to 0.027 ug/mL)

BL

50 uL

缓冲液 (Component B)

TS

50 uL

实验样品

  1. 根据表1和表2提供的布局,制备dsDNA标准品(DS)、空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 uL试剂,而不是50 uL。注:根据需要处理细胞或组织样本。
  2. 添加50 uL Helixyte Green-BR染料工作液(2X)分别加入dsDNA标准液、空白对照液和供试品中,使总分析体积为100ul/孔。对于384孔板,添加25 uL的Helixyte Green-BR染料工作溶液,每孔总体积为50 uL/孔。
  3. 在室温下避光培养2分钟。
  4. 在Ex/Em=490/530 nm(截止=515nm)处用荧光酶标仪检测荧光强度。

 

图示

 

 

Helixyte Green双链DNA定量检测试剂盒    货号17646

图1.用Helixyte Green dsDNA定量试剂盒在96孔黑色孔板中测量了dsDNA剂量反应。

 

 

参考文献

A new reporter design based on DNA origami nanostructures for quantification of short oligonucleotides using microbeads
Authors: Choi, Y., Schmidt, C., Tinnefeld, P., Bald, I., Rodiger, S.
Journal: Sci Rep (2019): 4769

A universal fluorescence-based toolkit for real-time quantification of DNA and RNA nuclease activity
Authors: Sheppard, E. C., Rogers, S., Harmer, N. J., Chahwan, R.
Journal: Sci Rep (2019): 8853

Effects of Quantification Methods, Isolation Kits, Plasma Biobanking, and Hemolysis on Cell-Free DNA Analysis in Plasma
Authors: Streleckiene, G., Forster, M., Inciuraite, R., Lukosevicius, R., Skieceviciene, J.
Journal: Biopreserv Biobank (2019): ersion=”1.0″ encoding=”UTF-8″ ?>17645.enlEndNote1117Streleckiene, G.Forster, M.Inciuraite, R.Lukosevicius, R.Skieceviciene, J.1Institute for Digestive Research, Lithuanian University of Health Sciences, Kaunas, Lithuania. 2Institute of Clinical Molecu

Flat-top TIRF illumination boosts DNA-PAINT imaging and quantification
Authors: Stehr, F., Stein, J., Schueder, F., Schwille, P., Jungmann, R.
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说明书
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