Thiolite Green硫醇化合物绿色荧光探针 货号21508-AAT Bioquest荧光染料

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Thiolite Green硫醇化合物绿色荧光探针  货号21508
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
5mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Thiolite Green硫醇化合物绿色荧光探针

Thiolite Green硫醇化合物绿色荧光探针  货号21508

简要概述

      Thiolite  Green硫醇化合物绿色荧光探针是美国AAT Bioquest生产的荧光探针,Thiolite Green是用于测量硫醇化合物的灵敏的传感器之一。与硫醇化合物(例如半胱氨酸)反应时,会生成绿色荧光加合物。它可用于定量蛋白质上的半胱氨酸数量。我们用它来荧光测量谷胱甘肽。与含硫醇的化合物反应后,其荧光增强> 200倍。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Thiolite  Green硫醇化合物绿色荧光探针。 

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产品说明书

操作步骤

1.准备Thiolite Green 工作溶液:

1.1在高品质无水DMSO中准备10至25 mM的Thiolite Green 储备溶液。储备溶液应及时使用;任何剩余的溶液均需等分并冷冻在-20℃。

注意:未使用的Thiolite Green储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在-20oC下避光保存。

1.2准备一个2X Thiolite 绿色 工作溶液:在实验的当天,要么溶解Thiolite 绿色 在DMSO或解冻的等分试样Thiolite 绿色 原液至室温。在pH值为20的20 mM Hepes缓冲液或您选择的缓冲液中,制备终浓度为100至250 µM的2X工作溶液,建议使用终浓度为50至100 µM的Thiolite Green 来测量硫醇溶液浓度。

 

2.在上清液中进行GSH分析:

2.1向GSH 标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50 µL 2X Thiolite Green 工作溶液(来自步骤1.2),使GSH 测定总体积为100 µL /孔。

注意:对于384孔板,将25 µL样品和25 µL GSH反应混合物加到每个孔中。

2.2在避光的条件下,将反应在室温下孵育10至60分钟。

2.3用荧光板读数器在Ex / Em = 490/525 nm处监测荧光的增加。

2.4使用空白孔(仅使用测定缓冲液)中的荧光作为对照,并通过硫醇反应从这些孔的值中减去。

多肽定制Cholecystokinin Octapeptide (1-6) (desulfated) 编码

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Cholecystokinin Octapeptide (1-6) (desulfated)
编码
别名 Cholecystokinin Octapeptide (1-6) (desulfated)
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) DYMGWM-OH
序列(三字母缩写) Asp-Tyr-Met-Gly-Trp-Met
基本描述
溶解度
分子量 0
化学式
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Cholecystokinin Octapeptide (1-6) (desulfated)          编码
Figures Cholecystokinin Octapeptide (1-6) (desulfated)          编码
Reference
C端
N端
化学桥

iFluor 488 炔烃 货号999-AAT Bioquest荧光染料

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iFluor 488 炔烃

iFluor 488 炔烃

iFluor 488 炔烃    货号999 货号 999 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 773.92 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:999

产品名称:iFluor 488 炔烃

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:773.92

溶剂:DMSO

激发波长(nm):491

发射波长(nm):516

 

产品介绍

iFluor 488 炔烃是美国AAT Bioquest生产的iFluor系列荧光染料。尽管FITC仍然是用于制备绿色荧光生物共轭物的流行的荧光标记染料,但是FITC存在某些限制,例如用于显微镜成像的严重光漂白和pH敏感荧光。与荧光素衍生物如FITC的缀合物相比,用iFluor 488染料(Ex / Em = 491nm / 520nm)制备的蛋白质缀合物要好得多。 iFluor 488缀合物比荧光素缀合物明显更亮,并且光稳定性更高。此外,iFluor 488的荧光不受pH(4-10)的影响。这种pH不敏感性是对荧光素的主要改进,荧光素仅在高于9的pH下发出其大荧光。iFluor 488炔烃染料相当稳定并且对于点击化学应用(CuAAC)表现出良好的反应性和选择性。 iFluor 488染料是具有相同光谱特性的Alexa Fluor染料的替代品(AlexaFluor®是Invitrogen的商标)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 488 炔烃。 

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  • 锦囊:iFluor 系列染料大集合

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 Cat#1023
iFluor 488酰肼 Cat#1082
iFluor 488马来酰亚胺 Cat#1062

说明书
iFluor 488 炔烃.pdf

多肽定制Cholecystokinin Octapeptide (2-8) (desulfated); CCK7,Cholecystokinin, CCK (27-33) 编码 [47910-79-2]

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名称 Cholecystokinin Octapeptide (2-8) (desulfated); CCK7,Cholecystokinin, CCK (27-33)
编码 [47910-79-2]
别名 Cholecystokinin Octapeptide (2-8) (desulfated); CCK7,Cholecystokinin, CCK (27-33)
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) YMGWMDF-NH2
序列(三字母缩写) Tyr-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2
基本描述
溶解度
分子量 948.1
化学式 C45H57N9O10S2
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Cholecystokinin Octapeptide (2-8) (desulfated); CCK7,Cholecystokinin, CCK (27-33)          编码     [47910-79-2]
Figures Cholecystokinin Octapeptide (2-8) (desulfated); CCK7,Cholecystokinin, CCK (27-33)          编码     [47910-79-2]
Reference P.W. Schiller et al., BBRC, ?85, 1332 (1978)
C端
N端
化学桥

Cy3 双酸 货号137-AAT Bioquest荧光染料

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Cy3 双酸 货号137
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
5mg
CAS :
146368-13-0
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
用于标记生物分子
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cy3 双酸

Cy3 双酸 货号137 货号 137 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg
Ex (nm) 555 Em (nm) 569
分子量 830.88 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:137

产品名称:Cy3 双酸

规格:5mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:830.88

溶剂:DMSO

激发波长(nm):555

发射波长(nm):565

 

产品介绍

Cy3 双酸是美国AAT Bioquest生产的花菁染料,各种花青3(Cy3)染料已用于标记生物分子,用于荧光成像和其他基于荧光的生化分析。 它们广泛用于标记肽,蛋白质和寡核苷酸等。Cy3染料在与蛋白质结合后具有增强的荧光。该Cy3染料具有两个可用作交联剂的羧基。 金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cy3 双酸。 

iFluor 488 叠氮化物 货号1000-AAT Bioquest荧光染料

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iFluor 488 叠氮化物

iFluor 488 叠氮化物

iFluor 488 叠氮化物    货号1000 货号 1000 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 716.57 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

iFluor 488 叠氮化物是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料,FITC是用于制备绿色荧光生物共轭物的流行的荧光标记染料,但是FITC存在某些限制,例如用于显微镜成像的严重光漂白和pH敏感荧光。与荧光素衍生物如FITC的缀合物相比,用iFluor 488染料(Ex / Em = 491nm / 520nm)制备的蛋白质缀合物要好得多。iFluor 488缀合物比荧光素缀合物明显更亮,并且光稳定性更高。此外,iFluor 488的荧光不受pH(4-10)的影响。这种pH不敏感性是对荧光素的主要改进,荧光素仅在高于9.9的pH下发出其大荧光。iFluor 488叠氮化物染料相当稳定并且对于点击化学应用显示出与炔基的良好反应性和选择性。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的荧光标记染料。

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产品说明书

操作方案

标记寡核苷酸

1.准备以下试剂:

200mMTHPTA [tris(3-羟丙基三唑基甲基)胺]水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰的低聚水溶液(尽可能浓缩,> 10 mg / mL)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)

2.在反应前将CuSO4与THPTA以1:2的比例混合并充分涡旋几分钟。该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的低聚物溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为2-5当量)。

4.加入5当量的THPTA / CuSO4工作溶液(来自步骤1)。

5.加入10-30当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.乙醇通过所需方法(例如HPLC)沉淀或纯化寡聚物。

 

标记肽

1.准备以下试剂:

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰肽水溶液或DMF溶液(取决于您的肽溶解度,> 10 mg / mL)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)

2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃修饰的肽溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为5-10当量)。

4.加入5-10当量的THPTA / CuSO4

5.加入10-20当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过HPLC纯化您想要的肽。

 

标记炔烃有机小分子

1.准备以下试剂:

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃化合物水溶液或DMF溶液(取决于您的化合物溶解度,> 10mg / mL,)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)。

2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。当冷冻时,该溶液可稳定数周。

3.向炔烃溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为5-10当量)。

4.加入25当量的THPTA / CuSO4

5.加入50当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌反应混合物30-60分钟。

7.通过色谱或其他方法纯化您想要的分子。

 

标记生物聚合物

1.准备以下试剂:

200mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃改性的水中生物聚合物(尽可能浓缩,例如> 5毫克/毫升)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)。

2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的生物聚合物溶液中加入过量的染料叠氮化物(负载比:5-20染料叠氮化物/炔烃)。

4.加入5摩尔当量(参考染料叠氮化物)的THPTA / CuSO4

5.加入10当量的抗坏血酸钠(参见染料叠氮化物)。

6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过凝胶过滤或透析纯化您想要的分子。

 

标记细胞,细胞裂解物或生物样品

1.准备以下试剂:

水性缓冲液或100mM THPTA配体水溶液

20mM CuSO4水溶液

300mM抗坏血酸钠水溶液

2.5mM炔烃或叠氮化物标记试剂水溶液或DMSO溶液

2.对于每个叠氮化物或炔烃修饰的细胞或细胞裂解物样品,将以下试剂加入1.5 mL微量离心管中,然后短暂涡旋混合。

50μL细胞或细胞裂解液样品

50μLPBS缓冲液

50μL5mM相应的染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(或染料炔烃)检测试剂

3.加入10μL100mM THPTA溶液,短暂涡旋混合。

4.加入10μL20mM CuSO4溶液,短暂涡旋振荡。

5.加入10μL300mM抗坏血酸钠溶液以引发点击反应,短暂涡旋混合。

6.保护点击反应不受光照,使其在室温下孵育30分钟。

7.点击标记细胞或细胞裂解物并准备用于下游处理和分析。

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 Cat#1023
iFluor 488酰肼 Cat#1082
iFluor 488马来酰亚胺 Cat#1062

说明书
iFluor 488 叠氮化物.pdf

iFluor 405琥珀酰亚胺酯 货号1021-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 405琥珀酰亚胺酯

iFluor 405琥珀酰亚胺酯

iFluor 405琥珀酰亚胺酯    货号1021 货号 1021 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 403 Em (nm) 427
分子量 755.58 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

iFluor 405琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记性能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的极便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特性相匹配。

琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。

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iFluor 405琥珀酰亚胺酯    货号1021

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产品说明书

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。

注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注3:不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白(BSA)抗体或明胶不会被很好的标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得标记结果。

注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得标记效率,建议极终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。

注意:溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 405 胺 Cat#1071
iFluor 405酰肼 Cat#1081
iFluor 405马来酰亚胺 Cat#1053

说明书
iFluor 405琥珀酰亚胺酯.pdf

多肽定制Cholecystokinin Octapeptide (desulfated)|Cholecystokinin, CCK Octapeptide (26-33), Non-Sulfated form 编码 [25679-24-7]

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Cholecystokinin Octapeptide (desulfated)|Cholecystokinin, CCK Octapeptide (26-33), Non-Sulfated form
编码 [25679-24-7]
别名 Cholecystokinin Octapeptide (desulfated)|Cholecystokinin, CCK Octapeptide (26-33), Non-Sulfated form
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) DYMGWMDF-NH2
序列(三字母缩写) H-Asp-Tyr-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2
基本描述
溶解度
分子量 1063.2
化学式 C49H62N10O13S2
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Cholecystokinin Octapeptide (desulfated)|Cholecystokinin, CCK Octapeptide (26-33), Non-Sulfated form          编码     [25679-24-7]
Figures Cholecystokinin Octapeptide (desulfated)|Cholecystokinin, CCK Octapeptide (26-33), Non-Sulfated form          编码     [25679-24-7]
Reference
C端
N端
化学桥

链霉亲和素偶联物 iFluor 555-标记 货号16989-AAT Bioquest荧光染料

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链霉亲和素偶联物 iFluor 555-标记 货号16989
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1 mg
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

链霉亲和素偶联物 iFluor 555-标记

链霉亲和素偶联物 iFluor 555-标记 货号16989

简要概述

产品基本信息

货号:16989

产品名称:链霉亲和素偶联物 iFluor 555-标记

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

溶剂:水

激发波长(nm):556

发射波长(nm):569

 

产品介绍

        链霉亲和素偶联物 iFluor 555-标记是美国AAT Bioquest生产的链霉亲和素,AAT 生物科技公司的 iFluor 染料在标记蛋白尤其是标记抗体是很好的。这些染料是非常明亮的并且耐光性好,在标记蛋白质时具有 小的荧光淬灭。他们可以很好的被现有的主要的激光荧光激发仪器(如350、405、488、555和633nm)激发。链霉亲和素轭合物是与生物素共轭广泛应用于特殊检测的多种蛋白质,蛋白质片段、核酸a和其他来自链霉亲和素的分子,与生物素具有很高的亲和力。众多的供应商提供各种各样的互补性生物素衍生物试剂。这一iFluor 555 -链霉亲和素是由包括链霉亲和素(如生物素结合的蛋白)和iFluor 555(如荧光标签)通过共价链接生成。用于与生物素结合的抗体时它常用作间接免疫荧光染色试剂。iFluor 555山羊抗-老鼠免疫球蛋白( (H+L)轭合物 的荧光激发波长和发射波长分别是 559nm 和 ~569 nm。这些 的性能使这一类 新探针家族成为 Alexa Fluor® 555山羊抗-老鼠免疫球蛋白( (H+L)轭合物(Alexa Fluor®是Invitrogee的产品)一个非常 的标记探针替代品。它是以生物素莲亲和素无基础的生物测定和实验的一个非常有价值的工具。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的链霉亲和素偶联物 iFluor 555-标记。

iFluor 514琥珀酰亚胺酯 货号1024-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 514琥珀酰亚胺酯

iFluor 514琥珀酰亚胺酯

iFluor 514琥珀酰亚胺酯    货号1024 货号 1024 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 511 Em (nm) 527
分子量 1013.95 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

iFluor 514琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。iFluor 染料也具有比经典荧光标记染料更好的标记性能,如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸而不包含性能的极便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特性相匹配。

琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。

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iFluor 514琥珀酰亚胺酯    货号1024

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  • 锦囊:iFluor 系列染料大集合

产品说明书

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。

注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注3:不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白(BSA)抗体或明胶不会被很好的标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得标记结果。

注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得标记效率,建议极终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。

注意:溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

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产品名称 货号
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 Cat#1023
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 Cat#1031
iFluor 594琥珀酰亚胺酯 Cat#1029

说明书
iFluor 514琥珀酰亚胺酯.pdf

多肽定制Cholecystokinin Octapeptide free acid (desulfated) 编码 [103974-46-5]

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Cholecystokinin Octapeptide free acid (desulfated)
编码 [103974-46-5]
别名 Cholecystokinin Octapeptide free acid (desulfated)
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) DYMGWMDF
序列(三字母缩写) Asp-Tyr-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe
基本描述
溶解度
分子量 1064.21
化学式 C49H61N9O13S2
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Cholecystokinin Octapeptide free acid (desulfated)           编码     [103974-46-5]
Figures Cholecystokinin Octapeptide free acid (desulfated)           编码     [103974-46-5]
Reference
C端
N端
化学桥

钙离子荧光探针Indo-1, AM 货号21036-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Indo-1, AM 货号21036
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
20*50ug
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

钙离子荧光探针Indo-1, AM

钙离子荧光探针Indo-1, AM 货号21036

简要概述

        钙离子荧光探针Indo-1, AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,在许多生物学研究中钙离子的测定非常重要。在与钙离子结合的条件下,荧光探针显现出光谱响应,这使研究者可以通过利用荧光显微镜、流式细胞仪、荧光分光镜和荧光分光仪等来研究细胞内部游离的Ca2+浓度的变化。在众多易受UV(紫外光)激发的钙离子指示剂中,Fura-2和Indo-1是 常使用的。当Indo-1 按比率发射时,Fura-2能按比例激发。Fura-2在按比例成像显微检测法中使用,在这里改变激发波长与改变发射光波长更有实用性。在与Ca2+结合的条件下,通过扫描300~400nm 的激发光谱发现Fura-2光吸收发生改变,当时监测到发射光在510 nm处。相对地,Indo-1在流式细胞术中作为染料使用,在这里用单一的激光器激发更有实际意义(通常使用光谱线位移在351?64 nm的氩离子激光器)。Indo-1的发射光从无游离Ca2+环境下的480nm转移到400 nm处(当与Ca2+)。Indo-1 AM是Indo-1的一种具有细胞渗透性的形式。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的钙离子荧光探针。

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点击查看实验方案

产品说明书

操作说明

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *储备液。
2.1Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *使用量:1 mg
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *与495.09μL无水DMSO混合。
 

3.使用10μMIndo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 * 4在HHBS中制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2mM Probenecid。
3.1 终孔内浓度为Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *:5μM
3.2Pluronic®F-127的 终井内浓度:0.04%
3.3 终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μLIndo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *,25.6μL10%Pluronic®F-127,和256μL25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议 终浓度为Indo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度 终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的 终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的 终浓度调节至以下:5μMIndo-1,AM * UltraPure Grade * * CAS 112926-02-0 *,0.04%Pluronic®F-127,1mM丙磺舒。

5.孵育染料

5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 346/475 nm运行实验。