CytoFix 溶酶体红色探针

简要概述

溶酶体是含有酸性水解酶的细胞器，它通过自噬来分解废物和细胞碎片。 AAT Bioquest提供CytoFix 溶酶体红色探针，可选择性地对溶酶体染色。 即使固定后，CytoFix 溶酶体红色探针也可以很好地保留在溶酶体中。 该探针会渗透完整的活细胞，并保留在溶酶体内。 这种染料在溶酶体中产生的荧光至少可以保留1周，使其成为极好的溶酶体示踪染料。 该探针的主要特征是其高染色效率，固定后可长时间保留并减少了人工操作时间。 CytoFix 溶酶体红色探针可与GFP表达的细胞或其他细胞器染色剂一起使用，进行多色分析。 它既可用于悬浮细胞，也可用于贴壁细胞，并易于适应各种荧光平台。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的CytoFix 溶酶体红色探针。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 在生长培养基中准备细胞

2. 除去生长培养基

3. 将细胞与CytoFix LysoRed工作溶液在37°C下孵育20-30分钟

4. 去除CytoFix LysoRed工作溶液

5. 使用Cy3 / TRITC滤光片组在荧光显微镜下分析

溶液配制 

工作溶液配制

CytoFix LysoRed工作溶液：将20 µL储备溶液添加到10 mLHanks缓冲液和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或自备缓冲液中，并充分混合。

注意：20 µL储备液足以进行一次96孔板分析。 可以根据特定的细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来改变染色条件。

注意 未使用的CytoFix LysoRed储备溶液可以分装，并在≤-20°C下以较小的等分试样存储。 避光并避免重复的冻融循环。

实验步骤

1.在生长培养基中准备细胞。

2.去除细胞培养基并洗涤两次（可选）

3.在细胞培养板中加入100 µL /孔（96孔板）或50 µL /孔（384孔板）的CytoFix LysoRed工作溶液

（注意细胞膜探针的浓度因具体应用而异。）

4.避光保存，在37°C下孵育细胞20-30分钟。

5.除去每个孔中的工作溶液。 用HHBS或您自备缓冲液洗涤细胞一次（可选）。

6.可选：在室温下用4％甲醛将细胞固定20分钟。 洗涤细胞两次以除去任何固定液。

7.使用带有Cy3 / TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

 图示

图1.在黑色96孔板上用CytoFix LysoRed染色的HeLa细胞的荧光图像。 在室温下用4％甲醛定影（左）和（右）定影20分钟后获取图像。 使用带有Cy3 / TRITC滤光片的荧光显微镜对细胞成像。