日度归档：2022年8月5日

多肽定制Corazonin, American Cockroach, Periplaneta americana; [Arg7]-Corazonin 编码

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名称 Corazonin, American Cockroach, Periplaneta americana; [Arg7]-Corazonin
编码
别名 Corazonin, American Cockroach, Periplaneta americana; [Arg7]-Corazonin
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） PYRTFQYSRGWTN-NH2
序列（三字母缩写） Pyr-Thr-Phe-Gln-Tyr-Ser-Arg-Gly-Trp-Thr-Asn-NH2
基本描述
溶解度
分子量 1369.49
化学式 C62H86N18O19
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Corazonin, American Cockroach, Periplaneta americana; [Arg7]-Corazonin 编码
Figures Corazonin, American Cockroach, Periplaneta americana; [Arg7]-Corazonin 编码
Reference
C端
N端
化学桥

JJ Green核酸染料 货号TJ1704-AAT Bioquest荧光染料

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JJ Green核酸染料

JJ Green核酸染料

货号 TJ1704 存储条件 建议在低于-15℃温度下冷冻保存
规格 500 ul 价格 500
Ex (nm) 497 Em (nm) 520
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

JJ Green是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。在游离状态下，JJ Green发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强。因此，JJ Green的荧光信号强度与双链DNA的数量相关，可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。JJ Green的吸收波长约为497nm，发射波长约为520nm。

 

JJ Green是高灵敏的DNA荧光染料，适用于各种电泳分析，操作简单：无须脱色或冲洗。至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。JJ Green 与dsDNA 结合荧光信号会增强800-1000倍，用JJ Green染色的凝胶样品荧光信号强，背景信号低。可适用于多种电泳分析。

JJ Green 适合于多种凝胶电泳方法：琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶电泳，脉冲电场凝胶电泳，和毛细管电泳等。

JJ Green 与双链DNA的亲和力非常高，因此可以用做电泳前染色，对分子生物学中常用的酶（如：Taq 酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等）没有抑制作用。另外，JJ Green 与EB相比，诱变能力大大降低。

JJ Green 核酸凝胶染液(JJ Green Nucleic Acid Gel Stains)是一种高敏感性的荧光染液，用于检测琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中的双链DNA和寡核苷酸。当染液与核酸结合后，JJ Green 核酸凝胶染液的荧光信号会明显增强，因此经JJ Green 核酸凝胶染液染色的凝胶显示出非常好的信躁比，没有背景荧光。为获得结果，凝胶在跑胶后再进行染色。JJ Green 核酸凝胶染液用于低含量的PCR产物，凋亡研究及异源双链分析中少量DNA的检测较为理想。可应用于：DNA和RNA的检测；SSCP及异源双链分析。

产品说明书

实验方案

1.JJ Green预染方法

1.1该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳

1.2工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的JJ Green稀释10000倍，即为JJ Green工作液。JJ Green工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。

1.3制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。

1.4样品染色：向分析样品中加入JJ Green工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使JJ Green与样品中DNA充分结合。JJ Green工作液加入量为总上样量的1/10。

1.5DNA Marker染色：将5μL DNA Marker和1μL JJ GreenⅠ工作液混匀，室温放置5分钟，使JJ Green与DNA充分结合。

1.6上样、电泳：按常规操作。

 

2.JJ Green后染方法

2.1按照常规方法进行电泳。

2.2用PH 7.0 – 8.5 的缓冲液（如：TAE，TBE 或 TE），按照3300：1的比例稀释JJ Green浓缩液，混匀，制成3X染色溶液。

2.3将3X染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上，让工作液均匀地覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）。

2.4用蓝光透照仪观测。蓝光可透过玻璃，观测聚丙烯酰胺凝胶时，可直接将托有凝胶的玻璃平皿放入蓝光透照仪内观测。

 

3.JJ Green使用注意事项

3.1在”JJ Green预染色方法”中，电泳时间不要超过2小时，否则JJ Green会从DNA上分离出来，会产生弥散状条带。

3.2在常规用酒精沉淀核酸的过程中，JJ Green 可以全部从双链核酸上去掉。

3.3如果想对用 JJ Green 染过的胶进行 Southern blots，建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%- 0.3% 的SDS。

3.4在紫外照射透视下，与双链 DNA 接合的 JJ Green 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。

3.4JJ Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,2000ml

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上海金畔生物科技有限公司提供梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,2000ml，可以访问官网了解更多产品信息。
梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,2000ml

询价
宁波群安
梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,2000ml
材质 高硼硅玻璃
规格（mL） 2000ml
颜色 无

荧光法次氯酸检测试剂盒 货号13846-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
  • 产品详情

荧光法次氯酸检测试剂盒 货号13846
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
200 Tests
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Amplite 荧光法次氯酸检测试剂盒

简要概述

        Amplite 荧光法次氯酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测次氯酸的试剂盒，次氯酸根阴离子（ClO-）及其质子化形式，次氯酸（HClO）是生物系统中的关键活性氧（ROS）。不受控制的次氯酸盐（次氯酸）的产生可导致组织损伤和疾病，包括关节炎和癌症。此外，NaClO已广泛用作日常生活中表面清洁，除臭和水消毒的漂白剂。Amplite 荧光次氯酸盐（次氯酸）检测试剂盒提供灵敏的荧光检测，用于测量高特异性的次氯酸盐（次氯酸）。在与次氯酸盐（次氯酸盐）选择性反应后，弱荧光的Oxirite 次氯酸盐传感器产生强荧光产物，可提供超过100倍的荧光增强。荧光信号可以通过荧光酶标仪在Ex / Em = 540 / 590nm下测量。使用这种荧光次氯酸盐（次氯酸）检测试剂盒，在100μL反应体积中检测到低至3μM的次氯酸盐。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法次氯酸检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备次氯酸盐工作溶液（50 µL）
2.添加次氯酸盐标准液或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的荧光强度

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1. Oxirite 次氯酸盐传感器储备溶液（200X）：
将50 µL DMSO（组分D）添加到Oxirite 次氯酸盐传感器（组分A）的小瓶中，制成200X储备溶液。 避光。

2.标准溶液配制

次氯酸盐标准
将50 µL次氯酸盐标准溶液（组分C）添加到450 µL测定缓冲液（组分B）中，得到100 mM次氯酸盐标准溶液（H7）。 取100 mM（H7）次氯酸盐标准溶液，并在测定缓冲液（组分B）中进行1:10系列稀释，以得到10、1、0.1和0.01 mM系列次氯酸盐标准品（H6-H3）。 然后，使用0.01 mM次氯酸盐标准品（H3），并在测定缓冲液（组分B）中进行1：3的比例，以得到0.003和0.001 mM的次氯酸盐标准品稀释液（H2-H1）。

3.工作溶液配制

将25 µL 200X Oxirite 次氯酸盐传感器储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成次氯酸盐工作溶液。 注意：这种次氯酸盐工作溶液足以用于一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。

样品操作及实验分析

表1. 96孔黑色实心微孔板中次氯酸盐标准品和测试样品的布局。 H =次氯酸盐标准品（H1-H7，0.001至100 mM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
H1 H1 … …
H2 H2 … …
H3 H3
H4 H4
H5 H5
H6 H6
H7 H7

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
H1-H7 50ul 连续稀释液（0.001至100 mM）
BL 50ul 分析缓冲液
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局，准备次氯酸盐标准品（H），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL次氯酸盐工作溶液添加到次氯酸盐标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使次氯酸盐总测定体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL次氯酸盐工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.使用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处监视荧光的增加。

荧光法次氯酸检测试剂盒 货号13846

多肽定制Corticostatin, human 编码

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名称 Corticostatin, human
编码
别名 Corticostatin, human
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） VCSCRLVFCRRTELRVGNCLIGGVSFTYCCTRV
序列（三字母缩写） Val-Cys-Ser-Cys-Arg-Leu-Val-Phe-Cys-Arg-Arg-Thr-Glu-Leu-Arg-Val-Gly-Asn-Cys-Leu-Ile-Gly-Gly-Val-Ser-Phe-Thr-Tyr-Cys-Cys-Thr-Arg-Val
基本描述
溶解度
分子量 3715.47
化学式 C157H261N49O43S6
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Corticostatin, human 编码
Figures Corticostatin, human 编码
Reference
C端
N端
化学桥

AF 488胺 等同于Alexa Fluor 488 货号1705-AAT Bioquest荧光染料

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AF 488胺 等同于Alexa Fluor 488

AF 488胺 等同于Alexa Fluor 488

货号 1705 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 499 Em (nm) 520
分子量 719.83 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Alpha Fluor 488胺与AlexaFluor®488C5胺的分子相同。荧光染料胺是可用于向含有羰基的生物分子添加荧光标记的反应性分子。Alpha Fluor 488胺与羧酸，醛和酮反应。它是开发Alpha Fluor 488探针的非常有用的构建模块。

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产品说明书

操作方案

标记寡核苷酸

1.准备以下试剂：

200mMTHPTA [tris（3-羟丙基三唑基甲基）胺]水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰的低聚水溶液（尽可能浓缩，例如> 10 mg / mL）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）

2.在反应前将CuSO4与THPTA以1：2的比例混合并充分涡旋几分钟。该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的低聚物溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为2-5当量）。

4.加入5当量的THPTA / CuSO4工作溶液（来自步骤1）。

5.加入10-30当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.乙醇通过所需方法（例如HPLC）沉淀或纯化寡聚物。

 

标记肽

1.准备以下试剂：

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰肽水溶液或DMF溶液（取决于您的肽溶解度，如果可能，> 10 mg / mL）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）

2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃修饰的肽溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。

4.加入5-10当量的THPTA / CuSO4。

5.加入10-20当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过HPLC纯化您想要的肽。

 

标记炔烃有机小分子

1.准备以下试剂：

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃化合物水溶液或DMF溶液（取决于您的化合物溶解度，如果可能，> 10mg / mL，）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。

2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。当冷冻时，该溶液可稳定数周。

3.向炔烃溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。

4.加入25当量的THPTA / CuSO4。

5.加入50当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌反应混合物30-60分钟。

7.通过色谱或其他方法纯化您想要的分子。

 

标记生物聚合物

1.准备以下试剂：

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃改性的水中生物聚合物（尽可能浓缩，例如> 5毫克/毫升）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。

2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的生物聚合物溶液中加入过量的染料叠氮化物（负载比：5-20染料叠氮化物/炔烃）。

4.加入5摩尔当量（参考染料叠氮化物）的THPTA / CuSO 4。

5.加入10当量的抗坏血酸钠（参见染料叠氮化物）。

6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过凝胶过滤或透析纯化您想要的分子。

 

标记细胞，细胞裂解物或生物样品

1.准备以下试剂：

水性缓冲液或100mM THPTA配体水溶液

20mM CuSO4水溶液

300mM抗坏血酸钠水溶液

2.5mM炔烃或叠氮化物标记试剂水溶液或DMSO溶液

2.对于每个叠氮化物或炔烃修饰的细胞或细胞裂解物样品，将以下试剂加入1.5 mL微量离心管中，然后短暂涡旋混合。

50μL细胞或细胞裂解液样品

50μLPBS缓冲液

50μL5mM相应的染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（或染料炔烃）检测试剂

3.加入10μL100mM THPTA溶液，短暂涡旋混合。

4.加入10μL20mM CuSO4溶液，短暂涡旋振荡。

5.加入10μL300mM抗坏血酸钠溶液以引发点击反应，短暂涡旋混合。

6.保护点击反应不受光照，使其在室温下孵育30分钟。

7.点击标记细胞或细胞裂解物并准备用于下游处理和/或分析。

 

参考文献

Development of new hCaM-Alexa Fluor(R) biosensors for a wide range of ligands
Authors: Velazquez-Lopez, I.; Leon-Cruz, E.; Pardo, J. P.; Sosa-Peinado, A.; Gonzalez-Andrade, M.
Journal: Anal Biochem (2017): 13-22

Synthetic Protocol for AFCS: A Biologically Active Fluorescent Castasterone Analog Conjugated to an Alexa Fluor 647 Dye
Authors: Winne, J. M.; Irani, N. G.; Van den Begin, J.; Madder, A.
Journal: Methods Mol Biol (2017): 21-Sep

Alteration of AMPA Receptor-Mediated Synaptic Transmission by Alexa Fluor 488 and 594 in Cerebellar Stellate Cells
Authors: Maroteaux, M.; Liu, S. J.
Journal: eNeuro (2016)

Alexa fluor-labeled fluorescent cellulose nanocrystals for bioimaging solid cellulose in spatially structured microenvironments
Authors: Grate, J. W.; Mo, K. F.; Shin, Y.; Vasdekis, A.; Warner, M. G.; Kelly, R. T.; Orr, G.; Hu, D.; Dehoff, K. J.; Brockman, F. J.; Wilkins, M. J.
Journal: Bioconjug Chem (2015): 593-601

A mouse monoclonal antibody against Alexa Fluor 647
Authors: Wuethrich, I.; Guillen, E.; Ploegh, H. L.
Journal: Monoclon Antib Immunodiagn Immunother (2014): 109-20

In vivo visualization of GL261-luc2 mouse glioma cells by use of Alexa Fluor-labeled TRP-2 antibodies
Authors: Fenton, K. E.; Martirosyan, N. L.; Abdelwahab, M. G.; Coons, S. W.; Preul, M. C.; Scheck, A. C.
Journal: Neurosurg Focus (2014): E12

Green tea catechins quench the fluorescence of bacteria-conjugated Alexa fluor dyes
Authors: Zhao, L.; Li, W.; Zhu, S.; Tsai, S.; Li, J.; Tracey, K. J.; Wang, P.; Fan, S.; Sama, A. E.; Wang, H.
Journal: Inflamm Allergy Drug Targets (2013): 308-14

Volume labeling with Alexa Fluor dyes and surface functionalization of highly sensitive fluorescent silica (SiO2) nanoparticles
Authors: Wang, W.; Nallathamby, P. D.; Foster, C. M.; Morrell-Falvey, J. L.; Mortensen, N. P.; Doktycz, M. J.; Gu, B.; Retterer, S. T.
Journal: Nanoscale (2013): 10369-75

Fluorescence of Alexa fluor dye tracks protein folding
Authors: Lindhoud, S.; Westphal, A. H.; Visser, A. J.; Borst, J. W.; van Mierlo, C. P.
Journal: PLoS One (2012): e46838

a Luo-acupoint) in the rat: a double-labeling study of cholera toxin subunit B conjugated with Alexa Fluor 488 and 594]
Authors: Cui, J. J.; Zhu, X. L.; Ji, C. F.; Jing, X. H.; Bai, W. Z., [Neuroanatomical basis of clinical joint application of “Jinggu” (BL 64, a source-acupoint) and “Dazhong” (KI 4
Journal: Zhen Ci Yan Jiu (2011): 262-7

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 488 胺 Cat#1072
iFluor 405 胺 Cat#1071
AF 488炔烃 等同于Alexa Fluor 488 Cat#1700

说明书
AF 488胺 等同于Alexa Fluor 488.pdf

梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,1000ml

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梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,1000ml

询价
宁波群安
梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,1000ml
材质 高硼硅玻璃
规格（mL） 1000ml
颜色 无色

链霉亲和素偶联物 iFluor 568-标记 货号16960-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
  • 产品详情

链霉亲和素偶联物 iFluor 568-标记 货号16960
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
200 ug
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

链霉亲和素偶联物 iFluor 568-标记

链霉亲和素偶联物 iFluor 568-标记 货号16960

货号 16960 存储条件                 f/l
规格                        200 ug                     价格                
Ex (nm) 568 Em (nm) 587
分子量 ~52000 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：16960

产品名称：链霉亲和素偶联物 iFluor 568-标记

规格：200ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：水

激发波长(nm)：568

发射波长(nm)：587

产品介绍

        链霉亲和素偶联物 iFluor 568-标记是美国AAT Bioquest生产的链霉亲和素，链霉亲和素缀合物与生物素缀合物一起广泛用于特异性检测多种蛋白质，蛋白质基序，核酸和其他分子，因为链霉亲和素对生物素具有非常高的结合亲和力。该iFluor 568-链霉亲和素偶联物包含链霉亲和素（作为生物素结合蛋白），并共价连接了iFluor 568（作为荧光标记）。当与生物素化的一抗结合使用时，通常用作间接免疫荧光染色的试剂。iFluor 568-链霉亲和素偶联物的荧光激发和发射值与AlexaFluor®568偶联物基本相同。这些光谱特性使其成为AlexaFluor®568-链霉亲和素偶联物（AlexaFluor®是Invitrogen的商标）的替代品。对于基于生物素-链霉亲和素的生物学测定和测试，它是非常有价值的工具。在我们测试的相同条件下，iFluor 568-链霉亲和素偶联物比相应的AlexaFluo®568偶联物更亮，更光稳定。这些光谱和标记特性使iFluor 568染料系列成为AlexaFluor®568的替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的链霉亲和素偶联物 iFluor 568-标记。

AF 594胺 等同于 Alexa Fluor 594 货号1715-AAT Bioquest荧光染料

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AF 594胺 等同于 Alexa Fluor 594

AF 594胺 等同于 Alexa Fluor 594

货号 1715 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 590 Em (nm) 618
分子量 908.14 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Alpha Fluor 594胺与AlexaFluor®594C5胺的分子相同。荧光染料胺是可用于向含有羰基的生物分子添加荧光标记的反应性分子。Alpha Fluor 594胺与羧酸，醛和酮反应。它是开发Alpha Fluor 594探针的非常有用的构建模块。

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产品说明书

操作方案

标记寡核苷酸

1.准备以下试剂：

200mMTHPTA [tris（3-羟丙基三唑基甲基）胺]水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰的低聚水溶液（尽可能浓缩，例如> 10 mg / mL）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）

2.在反应前将CuSO4与THPTA以1：2的比例混合并充分涡旋几分钟。该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的低聚物溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为2-5当量）。

4.加入5当量的THPTA / CuSO4工作溶液（来自步骤1）。

5.加入10-30当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.乙醇通过所需方法（例如HPLC）沉淀或纯化寡聚物。

 

标记肽

1.准备以下试剂：

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰肽水溶液或DMF溶液（取决于您的肽溶解度，如果可能，> 10 mg / mL）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）

2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃修饰的肽溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。

4.加入5-10当量的THPTA / CuSO4。

5.加入10-20当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过HPLC纯化您想要的肽。

 

标记炔烃有机小分子

1.准备以下试剂：

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃化合物水溶液或DMF溶液（取决于您的化合物溶解度，如果可能，> 10mg / mL，）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。

2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。当冷冻时，该溶液可稳定数周。

3.向炔烃溶液中加入过量的染料叠氮化物（摩尔比为5-10当量）。

4.加入25当量的THPTA / CuSO4。

5.加入50当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌反应混合物30-60分钟。

7.通过色谱或其他方法纯化您想要的分子。

 

标记生物聚合物

1.准备以下试剂：

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃改性的水中生物聚合物（尽可能浓缩，例如> 5毫克/毫升）

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（有关推荐的溶剂，请参阅我们的网站）。

2.在反应前几分钟以1：2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的生物聚合物溶液中加入过量的染料叠氮化物（负载比：5-20染料叠氮化物/炔烃）。

4.加入5摩尔当量（参考染料叠氮化物）的THPTA / CuSO 4。

5.加入10当量的抗坏血酸钠（参见染料叠氮化物）。

6.在室温下搅拌，涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过凝胶过滤或透析纯化您想要的分子。

 

标记细胞，细胞裂解物或生物样品

1.准备以下试剂：

水性缓冲液或100mM THPTA配体水溶液

20mM CuSO4水溶液

300mM抗坏血酸钠水溶液

2.5mM炔烃或叠氮化物标记试剂水溶液或DMSO溶液

2.对于每个叠氮化物或炔烃修饰的细胞或细胞裂解物样品，将以下试剂加入1.5 mL微量离心管中，然后短暂涡旋混合。

50μL细胞或细胞裂解液样品

50μLPBS缓冲液

50μL5mM相应的染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液（或染料炔烃）检测试剂

3.加入10μL100mM THPTA溶液，短暂涡旋混合。

4.加入10μL20mM CuSO4溶液，短暂涡旋振荡。

5.加入10μL300mM抗坏血酸钠溶液以引发点击反应，短暂涡旋混合。

6.保护点击反应不受光照，使其在室温下孵育30分钟。

7.点击标记细胞或细胞裂解物并准备用于下游处理和/或分析。

 

参考文献

Development of new hCaM-Alexa Fluor(R) biosensors for a wide range of ligands
Authors: Velazquez-Lopez, I.; Leon-Cruz, E.; Pardo, J. P.; Sosa-Peinado, A.; Gonzalez-Andrade, M.
Journal: Anal Biochem (2017): 13-22

Synthetic Protocol for AFCS: A Biologically Active Fluorescent Castasterone Analog Conjugated to an Alexa Fluor 647 Dye
Authors: Winne, J. M.; Irani, N. G.; Van den Begin, J.; Madder, A.
Journal: Methods Mol Biol (2017): 21-Sep

Alteration of AMPA Receptor-Mediated Synaptic Transmission by Alexa Fluor 488 and 594 in Cerebellar Stellate Cells
Authors: Maroteaux, M.; Liu, S. J.
Journal: eNeuro (2016)

Alexa fluor-labeled fluorescent cellulose nanocrystals for bioimaging solid cellulose in spatially structured microenvironments
Authors: Grate, J. W.; Mo, K. F.; Shin, Y.; Vasdekis, A.; Warner, M. G.; Kelly, R. T.; Orr, G.; Hu, D.; Dehoff, K. J.; Brockman, F. J.; Wilkins, M. J.
Journal: Bioconjug Chem (2015): 593-601

A mouse monoclonal antibody against Alexa Fluor 647
Authors: Wuethrich, I.; Guillen, E.; Ploegh, H. L.
Journal: Monoclon Antib Immunodiagn Immunother (2014): 109-20

In vivo visualization of GL261-luc2 mouse glioma cells by use of Alexa Fluor-labeled TRP-2 antibodies
Authors: Fenton, K. E.; Martirosyan, N. L.; Abdelwahab, M. G.; Coons, S. W.; Preul, M. C.; Scheck, A. C.
Journal: Neurosurg Focus (2014): E12

Green tea catechins quench the fluorescence of bacteria-conjugated Alexa fluor dyes
Authors: Zhao, L.; Li, W.; Zhu, S.; Tsai, S.; Li, J.; Tracey, K. J.; Wang, P.; Fan, S.; Sama, A. E.; Wang, H.
Journal: Inflamm Allergy Drug Targets (2013): 308-14

Volume labeling with Alexa Fluor dyes and surface functionalization of highly sensitive fluorescent silica (SiO2) nanoparticles
Authors: Wang, W.; Nallathamby, P. D.; Foster, C. M.; Morrell-Falvey, J. L.; Mortensen, N. P.; Doktycz, M. J.; Gu, B.; Retterer, S. T.
Journal: Nanoscale (2013): 10369-75

Fluorescence of Alexa fluor dye tracks protein folding
Authors: Lindhoud, S.; Westphal, A. H.; Visser, A. J.; Borst, J. W.; van Mierlo, C. P.
Journal: PLoS One (2012): e46838

a Luo-acupoint) in the rat: a double-labeling study of cholera toxin subunit B conjugated with Alexa Fluor 488 and 594]
Authors: Cui, J. J.; Zhu, X. L.; Ji, C. F.; Jing, X. H.; Bai, W. Z., [Neuroanatomical basis of clinical joint application of “Jinggu” (BL 64, a source-acupoint) and “Dazhong” (KI 4
Journal: Zhen Ci Yan Jiu (2011): 262-7

 

相关产品

产品名称 货号
AF 488胺 等同于Alexa Fluor 488 Cat#1705

说明书
AF 594胺 等同于 Alexa Fluor 594.pdf

多肽定制Corticostatin, human 编码

发表于由

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽，可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Corticostatin, human
编码
别名 Corticostatin, human
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） VCSCRLVFCRRTELRVGNCLIGGVSFTYCCTRV (C2&C30 bridge , C4&C19 bridge , C9&C29 bridge)
序列（三字母缩写） Val-Cys-Ser-Cys-Arg-Leu-Val-Phe-Cys-Arg-Arg-Thr-Glu-Leu-Arg-Val-Gly-Asn-Cys-Leu-Ile-Gly-Gly-Val-Ser-Phe-Thr-Tyr-Cys-Cys-Thr-Arg-Val(Cys2&Cys30 bridge , Cys4&Cys19 bridge , Cys9&Cys29 bridge)
基本描述 Heptapeptide.
溶解度
分子量 3709.5
化学式 C157H255N49O43S6
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Corticostatin, human 编码
Figures Corticostatin, human 编码
Reference
C端
N端
化学桥 (Cys2&Cys30 bridge , Cys4&Cys19 bridge , Cys9&Cys29 bridge)

梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,500ml

发表于由

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梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,500ml

询价
宁波群安
梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,500ml
材质 高硼硅玻璃
规格（mL） 500ml
颜色 无色

Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22797-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

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  • 产品参数
  • 产品详情

Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22797
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光

Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22797

简要概述

Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒，我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于监测细胞生存力的工具。有多种参数可用于监测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量Caspase 3的激活来监测细胞凋亡。由于caspase-3（CPP32 / apopain）的激活对于细胞凋亡的启动很重要，因此caspase 3被公认为是细胞凋亡的可靠指标。半胱天冬酶3具有对肽序列Asp-Glu-Val-Asp（DEVD）的底物选择性。该试剂盒使用Z-DEVD-ProRed 作为caspase-3活性的荧光指示剂。半胱天冬酶3对ProRed DEVD封闭肽残基的切割产生强红色荧光的ProRed ，该荧光在〜620 nm处以荧光光谱法进行监测，激发波长约为530 nm。该试剂盒可提供所有必需成分，并具有优化的测定方案，该测定适用于高通量测定。该试剂盒以96孔板每孔使用100 uL试剂，可提供足够的试剂来执行100次测定。该试剂盒以384孔板每孔使用25 uL试剂，可提供足够的试剂来执行400次测定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

样本实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 3/7工作溶液
3.在室温下孵育1小时
4.监测Ex / Em = 540/620 nm处的荧光强度（截止= 610 nm）

溶液配制

储备溶液配制

1.Z-DEVD-ProRed 储备溶液（200X）：将65 µL DMSO加到Z-DEVD-ProRed （组分A）的小瓶中，制成200X Z-DEVD-ProRed 储备液，避光储存。

工作溶液配制

将50μL的200X Z-DEVD-ProRed 储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成Caspase 3/7底物工作溶液。 注意：分装并在-20℃下存储未使用的Z-DEVD-ProRed 储备溶液（来自步骤2.2）和测定缓冲液（组分B）。 避免重复冻结/解冻循环。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.准备细胞：

1.1 对于贴壁细胞：将细胞在生长培养基中以20,000个细胞/孔/ 90 uL接种96孔，或以5,000个细胞/孔/ 20 uL接种384孔，过夜培养。

1.2 对于非贴壁细胞：从培养基中离心细胞，然后将细胞沉淀以80,000至200,000个细胞/孔/ 90 uL悬浮在培养基中，用于96孔；或20,000至50,000个细胞/孔/ 20 uL用于384个细胞。 实验前，将板以800 rpm的速度离心2分钟。 注意：应单独评估每种细胞系，以确定诱导凋亡的细胞密度。

2.通过向PBS或所需的缓冲液中加入10 µL /孔的10X测试化合物（96孔板）或5 µL /孔的5X测试化合物（384孔板）来处理细胞。对于空白孔（不含细胞的培养基），添加相同量的化合物缓冲液。

3.将细胞板在37°C，5％CO2的培养箱中孵育（对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞为3-4小时）以诱导凋亡。

4.加入Caspase 3/7底物工作溶液（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板。）

5.在避光的条件下，在室温下孵育平板至少1小时。注意：如果需要，在室温下添加Caspase 3/7工作溶液之前10分钟，向选定的样品中添加1 µL 1 mM Ac-DEVD-CHO caspase 3/7抑制剂，以确认对caspase 3 / 7-like的抑制活动。

6.使用荧光酶标仪（Ex / Em = 540/620 nm（截止= 610 nm））监控荧光强度。注意：有时，底部读取可提供更好的信噪比。如果使用底部读取模式，则以800 rpm的速度离心细胞板（特别是非粘附细胞）2分钟（制动）。

图示

Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22797

图1. Jurkat细胞中Caspase 3/7活性的检测。 当天，将Jurkat细胞以200,000个细胞/ 90 µL /孔的密度接种在Costar黑色96孔板中。 用或不用1 µM星形孢菌素处理细胞5小时。 加入半胱天冬酶3/7工作溶液（100 µL /孔）并在室温下孵育1小时。 使用FlexStation荧光酶标仪（Molecular Devices）在Ex / Em = 540/620 nm（截止= 610 nm）下测量荧光强度。

AF 488 NHS酯 等同于Alexa Fluor 488 货号1812-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

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AF 488 NHS酯 等同于Alexa Fluor 488

AF 488 NHS酯 等同于Alexa Fluor 488

货号 1812 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 499 Em (nm) 520
分子量 643.40 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：1812

产品名称：Alpha Fluor 488 NHS酯

规格：1mg

储存条件：保存在冰箱-15℃干燥

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：643.40

外观：固体

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：499

发射波长(nm)：520

 

产品介绍

Alpha Fluor 488 NHS酯（琥珀酰亚胺酯）与AlexaFluor®488NHS酯相同（AlexaFluor®是ThermoFisher的商标）。它是一种明亮的绿色荧光染料，最适合与488 nm氩激光器配合使用。Alpha Fluor 488染料在pH 4至pH 10下是水溶性和pH不敏感的。Alpha Fluor 488的NHS酯（或琥珀酰亚胺基酯）是最方便的胺反应形式，用于将该染料与蛋白质或抗体结合。

点击查看光谱

点击查看实验方案

 

参考文献

Development of new hCaM-Alexa Fluor(R) biosensors for a wide range of ligands
Authors: Velazquez-Lopez, I.; Leon-Cruz, E.; Pardo, J. P.; Sosa-Peinado, A.; Gonzalez-Andrade, M.
Journal: Anal Biochem (2017): 13-22

Synthetic Protocol for AFCS: A Biologically Active Fluorescent Castasterone Analog Conjugated to an Alexa Fluor 647 Dye
Authors: Winne, J. M.; Irani, N. G.; Van den Begin, J.; Madder, A.
Journal: Methods Mol Biol (2017): 21-Sep

Alteration of AMPA Receptor-Mediated Synaptic Transmission by Alexa Fluor 488 and 594 in Cerebellar Stellate Cells
Authors: Maroteaux, M.; Liu, S. J.
Journal: eNeuro (2016)

Alexa fluor-labeled fluorescent cellulose nanocrystals for bioimaging solid cellulose in spatially structured microenvironments
Authors: Grate, J. W.; Mo, K. F.; Shin, Y.; Vasdekis, A.; Warner, M. G.; Kelly, R. T.; Orr, G.; Hu, D.; Dehoff, K. J.; Brockman, F. J.; Wilkins, M. J.
Journal: Bioconjug Chem (2015): 593-601

A mouse monoclonal antibody against Alexa Fluor 647
Authors: Wuethrich, I.; Guillen, E.; Ploegh, H. L.
Journal: Monoclon Antib Immunodiagn Immunother (2014): 109-20

In vivo visualization of GL261-luc2 mouse glioma cells by use of Alexa Fluor-labeled TRP-2 antibodies
Authors: Fenton, K. E.; Martirosyan, N. L.; Abdelwahab, M. G.; Coons, S. W.; Preul, M. C.; Scheck, A. C.
Journal: Neurosurg Focus (2014): E12

Green tea catechins quench the fluorescence of bacteria-conjugated Alexa fluor dyes
Authors: Zhao, L.; Li, W.; Zhu, S.; Tsai, S.; Li, J.; Tracey, K. J.; Wang, P.; Fan, S.; Sama, A. E.; Wang, H.
Journal: Inflamm Allergy Drug Targets (2013): 308-14

Volume labeling with Alexa Fluor dyes and surface functionalization of highly sensitive fluorescent silica (SiO2) nanoparticles
Authors: Wang, W.; Nallathamby, P. D.; Foster, C. M.; Morrell-Falvey, J. L.; Mortensen, N. P.; Doktycz, M. J.; Gu, B.; Retterer, S. T.
Journal: Nanoscale (2013): 10369-75

Fluorescence of Alexa fluor dye tracks protein folding
Authors: Lindhoud, S.; Westphal, A. H.; Visser, A. J.; Borst, J. W.; van Mierlo, C. P.
Journal: PLoS One (2012): e46838

a Luo-acupoint) in the rat: a double-labeling study of cholera toxin subunit B conjugated with Alexa Fluor 488 and 594]
Authors: Cui, J. J.; Zhu, X. L.; Ji, C. F.; Jing, X. H.; Bai, W. Z., [Neuroanatomical basis of clinical joint application of “Jinggu” (BL 64, a source-acupoint) and “Dazhong” (KI 4
Journal: Zhen Ci Yan Jiu (2011): 262-7

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 Cat#1023
AF 594 NHS酯 等同于Alexa Fluor 594 Cat#1830
AF 350 NHS酯 等同于Alexa Fluor 350 Cat#1800

说明书
AF 488 NHS酯 等同于Alexa Fluor 488.pdf

多肽定制Corticostatin, human 编码

发表于由

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽，可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Corticostatin, human
编码
别名 Corticostatin, human
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） VCSCRLVFCRRTELRVGNCLIGGVSFTYCCTRV (C2&C30 bridge, C4&C19 bridge, C9&C29 bridge)
序列（三字母缩写） H-Val-Cys-Ser-Cys-Arg-Leu-Val-Phe-Cys-Arg-Arg-Thr-Glu-Leu-Arg-Val-Gly-Asn-Cys-Leu-Ile-Gly-Gly-Val-Ser-Phe-Thr-Tyr-Cys-Cys-Thr-Arg-Val-OH (trifluoroacetate salt)(Cys2 and 30 bridge, Cys4 and 19 bridge, Cys9 and 29 bridge)
基本描述 Cationic arginine- and cysteine-rich peptide isolated from fetal and adult rabbit lung. Inhibitor of ACTH-stimulated corticosterone synthesis in rat adrenal cells in vitro.
溶解度
分子量 3709.5
化学式 C157H255N49O43S6
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Corticostatin, human 编码
Figures Corticostatin, human 编码
Reference
C端
N端
化学桥 (Cys2 and 30 bridge, Cys4 and 19 bridge, Cys9 and 29 bridge)

梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,250ml

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梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,250ml

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宁波群安
梨形分液漏斗 四氟活塞节门,宁波群安,250ml
材质 高硼硅玻璃
规格（mL） 250ml
颜色 无色

iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺 货号45045-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
  • 产品详情

iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺 货号45045
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Slides
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺的优异替代品*

iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺 货号45045

简要概述

Power Styramide 信号放大（PSA）系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一，其荧光信号强度比广泛使用的tyramide（TSA）试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时，iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度（超过100倍）的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶（HRP）来催化活性原位共价沉积荧光团，PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多，这使PSA系统比传统的TSA试剂更快，更耐用，更灵敏。与酪酰胺试剂相比，Styramide 缀合物具有更 率标记靶标的能力，因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比，Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 647 Styramide是Alexa Fluor 647酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的iFluor 647 Styramide。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织

  2. 在封闭缓冲液中添加一抗

  3. 加入结合HRP的二抗

  4. 准备Styramide工作溶液，并在室温下添加到细胞或组织中（5-10分钟）

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液（100X）：将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中，制成100X Styramide 储备溶液。注意：一次性使用等分试样，并将未使用的100X储备溶液在2-8 ℃的冰箱避光保存，并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液：将90 µL的ddH2O加入10 µL 3％过氧化氢中（未提供）。注意：在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液，做到现用现配。

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液（1X）：每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意：盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液，（提供的Styramide 足以进行100次测试。）注意：必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液，并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液：根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

实验步骤

（该步骤适用于细胞或组织染色）

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7％甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1％Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

组织固定，脱石蜡和补液

（根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。）

过氧化物酶标记

1.可选：通过在过氧化物酶淬灭溶液（例如3％过氧化氢）中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性，然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选：如果使用结合HRP的链霉亲和素，建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液（例如含1％BSA的PBS）封闭30分钟。

4.除去封闭溶液，并添加稀释好的一抗，在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中，并在室温下孵育60分钟。注意：孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液，并在室温下孵育5-10分钟。 注意：如果您观察到非特异性信号，则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间，或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂，如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

图示

iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺 货号45045

图1.Power Styramide 信号放大（PSA）系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标灵敏的方法之一，其荧光信号强度比广泛使用的tyramide（TSA）试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性，iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度（超过100倍）的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶（HRP）的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多，这使PSA系统比传统的TSA试剂更快，更耐用，更灵敏。

 iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺 货号45045

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide（左）或AlexaFluor 350酪酰胺（中和右）染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像，并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间（25毫秒）下，iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间（125毫秒）才能使染色可视化。