上海金畔生物科技有限公司提供玻璃表面皿,宁波群安,90mm，可以访问官网了解更多产品信息。
玻璃表面皿,宁波群安,90mm
| 材质 | 玻璃 |
| 规格（mm） | 80mm |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
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货号 | 1141 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 5 mg | 价格 | 3924 | |
| Ex (nm) | 412 | Em (nm) | 505 | |
| 分子量 | ~500 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
AAT Bioquest的mFluor 染料专门针对多色流式细胞仪的应用而开发。这些染料具有较大的斯托克斯位移，并且可以通过流式细胞仪的激光线（例如405 nm，488 nm和633 nm）很好地激发。 mFluor Violet 510染料的荧光激发和发射值分别为〜405 nm和〜510 nm。 这些光谱特性使其成为Pacific Orange 标记染料的替代品。 mFluor Violet 510酸是稳定的，并且是制造各种mFluor Violet 510衍生物的常见前体。
点击查看光谱
产品说明书
操作方法
注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。 您需根据您的实际情况而定。
1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：
将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml）混合至100μL，以得到1 mL蛋白质标记原液。
注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记，叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得标记结果。
注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得标记效率，建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液（溶液B）：
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。
3.确定染料/蛋白质比例（可选）：
注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。
3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。
3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。
3.6检测上述4种结合物，确定的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。
4.运行结合反应：
4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。
注意：溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。
5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。
注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。
注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
| 产品名称 | 货号 |
| mFluor Violet 450 马来酰亚胺 | Cat#1600 |
| mFluor Violet 540 酸 | Cat#1142 |
| 荧光标记染料 mFluor Violet 510 酸 | Cat#1141 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽，可以访问官网了解更多产品信息。
| 名称 | CJC1295 (Without DAC) |
| 编码 | |
| 别名 | CJC1295 (Without DAC) |
| 纯度 | 80%，90%，95%，98%，99% |
| 重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
| 序列（单字母缩写） | YaDAIFTQSYRKVLAQLSARKLLQDILSR-NH2 |
| 序列（三字母缩写） | Tyr-D-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Gln-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Leu-Ser-Arg-NH2 |
| 基本描述 | |
| 溶解度 | |
| 分子量 | 3369.1 |
| 化学式 | C152H251N43O43 |
| 存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
| 注释 | |
| Documents |  |
| Figures |  |
| Reference | |
| C端 | |
| N端 | |
| 化学桥 |
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简要概述
产品基本信息
货号：25303
产品名称：Cy3DIGE NHS ester
规格：100nmoles
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：24个月
产品物理化学光谱特性
分子量：709.67
Ex:555nm
Em:569nm
溶剂：DMSO
产品介绍
Cy3DIGE NHS酯等同于Cy3®NHS酯基本染料，是用于标记DIGE蛋白分析的主要染料之一。Cy3DIGE通常与Cy2DIGE和Cy5DIGE一起使用。Cy2DIGE，C3DIGE和Cy5DIGE是专为精确比较两个或三个裂解液样品中蛋白质表达而设计的。匹配迁移率和明亮的染料荧光使2D凝胶电泳能够有效检测和微量蛋白质的高分辨率分离。Cy2DIGE，C3DIGE和Cy5DIGE与所有能够检测Cy2，Cy3和Cy5的染料成像仪兼容。Cy2DIGE，C3DIGE和Cy5DIGE标记的凝胶是规格匹配、电荷匹配的荧光染料，用于检测二维荧光差异凝胶电泳（DIGE）中的蛋白质丰度差异。Cy2DIGE C3DIGE和Cy5DIGE在同一2-D电泳凝胶上 多可检测三个预先标记的蛋白质样品和标准品。规格和电荷匹配的染料可以使标记的样品在凝胶内共迁移。它们在标记的蛋白质上很亮，可以在标记、分离和扫描过程中将信号损失降至 低。这些染料的光谱重叠很少，可将通常导致高背景的串扰降至 低。它们对pH值不敏感的荧光使DIGE可以在较宽的pH范围内运行。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cy3DIGE NHS ester。
上海金畔生物科技有限公司提供Anti-COLEC12 Polyclonal Antibod,索莱宝,K001990P-30ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Anti-COLEC12 Polyclonal Antibod,索莱宝,K001990P-30ul
| 浓度 | |
| 规格 | 30ul |
| 保存 |
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货号 | 1142 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 5 mg | 价格 | 3924 | |
| Ex (nm) | 402 | Em (nm) | 535 | |
| 分子量 | ~1600 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
mFluor Violet 540 酸是美国AAT Bioquest生产的mFluor系列荧光染料。AAT Bioquest的mFluor 染料专为针对多色流式细胞仪的应用而开发。 这些染料具有较大的斯托克斯位移，并且可以被流式细胞仪的激光线（例如405nm，488nm和633nm）很好地激发。 mFluor Violet 540染料的荧光激发和发射值分别为〜405 nm和〜540 nm。 这些光谱特性使其成为Pacific Orange 标记染料的替代品。 mFluor Violet 540酸是稳定的，并且是制备各种mFluor Violet 540衍生物的常见前体。
点击查看光谱
产品说明书
操作方法
注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。 您需根据您的实际情况而定。
1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：
将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml）混合至100μL，以得到1 mL蛋白质标记原液。
注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记，叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得标记结果。
注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得标记效率，建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液（溶液B）：
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。
3.确定染料/蛋白质比例（可选）：
注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。
3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。
3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。
3.6检测上述4种结合物，确定的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。
4.运行结合反应：
4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。
注意：溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。
5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。
注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。
注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
| 产品名称 | 货号 |
| mFluor Violet 450 马来酰亚胺 | Cat#1600 |
| mFluor Violet 540 酸 | Cat#1142 |
| 荧光标记染料 mFluor Violet 510 酸 | Cat#1141 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
简要概述
我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于细胞功能的荧光显微镜研究。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 这种特殊的试剂盒设计用于在绿色荧光中均匀标记固定的哺乳动物细胞，以便通过紫激光激发在流式细胞仪中使用。 该试剂盒使用专有的绿色荧光染料，该染料在与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料已被紫激光（405 nm激发）充分激发到510 nm的荧光。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的工具，也可用于荧光流式细胞仪应用。
胞术分析。
上海金畔生物科技有限公司提供玻璃表面皿,宁波群安,80mm，可以访问官网了解更多产品信息。
玻璃表面皿,宁波群安,80mm
| 材质 | 玻璃 |
| 规格（mm） | 80mm |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽，可以访问官网了解更多产品信息。
| 名称 | CK1tide |
| 编码 | |
| 别名 | CK1tide |
| 纯度 | 80%，90%，95%，98%，99% |
| 重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
| 序列（单字母缩写） | HAAIGDDDDAYSITS-NH2 |
| 序列（三字母缩写） | His-Ala-Ala-Ile-Gly-Asp-Asp-Asp-Asp-Ala-Tyr-Ser-Ile-Thr-Ser-NH2 |
| 基本描述 | |
| 溶解度 | |
| 分子量 | 1549.58 |
| 化学式 | C64H96N18O27 |
| 存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
| 注释 | |
| Documents |  |
| Figures |  |
| Reference | |
| C端 | |
| N端 | |
| 化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司提供HE 琼脂,北京陆桥,CP210 250g，可以访问官网了解更多产品信息。
HE 琼脂,北京陆桥,CP210 250g
| 规格 | 250g |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
 |
货号 | 1144 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 5 mg | 价格 | 3924 | |
| Ex (nm) | 525 | Em (nm) | 623 | |
| 分子量 | 584.53 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
mFluor Green 620 酸是美国AAT Bioquest生产的mFluor系列荧光染料。mFluor Green 620染料是一种独特的染料，可被532 nm的绿色激光充分激发，产生红色荧光。 mFluor Green 620染料是水溶性的，用mFluor Green 620染料制备的蛋白质偶联物，斯托克斯位移约为80 nm。 mFluor Green 620染料和偶联物是出色的绿色激光试剂，适用于流式细胞术研究和荧光成像应用。
点击查看光谱
产品说明书
操作方法
注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。 您需根据您的实际情况而定。
1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：
将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml）混合至100μL，以得到1 mL蛋白质标记原液。
注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记，叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得标记结果。
注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得标记效率，建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液（溶液B）：
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。
3.确定染料/蛋白质比例（可选）：
注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。
3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。
3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。
3.6检测上述4种结合物，确定的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。
4.运行结合反应：
4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。
注意：溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。
5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。
注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。
注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
相关产品
| 产品名称 | 货号 |
| mFluor Violet 450 马来酰亚胺 | Cat#1600 |
| mFluor Violet 540 酸 | Cat#1142 |
| 荧光标记染料 mFluor Violet 510 酸 | Cat#1141 |
上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽，可以访问官网了解更多产品信息。
| 名称 | CKS-17 |
| 编码 | |
| 别名 | CKS-17 |
| 纯度 | 80%，90%，95%，98%，99% |
| 重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
| 序列（单字母缩写） | LQNRRGLDLLFLKEGGL-OH |
| 序列（三字母缩写） | Leu-Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Asp-Leu-Leu-Phe-Leu-Lys-Glu-Gly-Gly-Leu |
| 基本描述 | |
| 溶解度 | |
| 分子量 | 0 |
| 化学式 | |
| 存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
| 注释 | |
| Documents |  |
| Figures |  |
| Reference | |
| C端 | |
| N端 | |
| 化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司提供玻璃搅拌棒,宁波群安,40cm，可以访问官网了解更多产品信息。
玻璃搅拌棒,宁波群安,40cm
| 直径 | 7mm |
| 长度 | 40cm |
| 包装 |
上海金畔生物科技有限公司提供Anti-EMB Polyclonal Antibody,索莱宝,K001991P-100ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Anti-EMB Polyclonal Antibody,索莱宝,K001991P-100ul
| 浓度 | |
| 规格 | 100ul |
| 保存 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
简要概述
Annexin V-Cy3标记是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。 在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的膜联蛋白V结合物是一组监测细胞功能的工具，旨在通过测量磷脂酰丝氨酸的易位来监测细胞凋亡。
膜联蛋白V结合物在Ca2+存在下与凋亡细胞表面上的PS结合，它也可以通过坏死细胞膜或死细胞并与细胞内部的PS结合。 因此，我们建议将细胞不可渗透的核染色与膜联蛋白V结合物结合使用，以区分死细胞和凋亡细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Annexin V-Cy3检测试剂。
产品说明书
分析方案
概述
用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
添加Annexin V结合物测定溶液
室温孵育30-60分钟
用流式细胞仪或荧光显微镜分析
1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞：
1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl2，pH 7.4。
1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。
1.3离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。
1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。
1.5在细胞中加入2μL膜联蛋白V结合物。
可选：在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭，用于坏死细胞。
1.6在室温下孵育30至60分钟，避光。
1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，加入300μL膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）以增加体积（参见下面的步骤1.8）。
1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度（参见下面的步骤2或3）。
2.使用流式细胞仪分析：
通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白V缀合物。
注意：粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van Engelend等人（见参考文献1和2）。
3.使用荧光显微镜分析：
3.1移取步骤1.6的细胞悬液，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，然后用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）重悬细胞。 将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。
注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与膜联蛋白V缀合物孵育（步骤1.6）后，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，并将膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。 在与膜联蛋白V缀合物孵育后，细胞也可以在2％甲醛中固定，并在显微镜下观察。
3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白V缀合物的凋亡细胞
数据分析
下图是使用流式细胞仪检测膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸在Jurkat细胞凋亡中的结合活性的实例。 在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。
图1.在Jurkat细胞中检测膜联蛋白VmFluor Violet 450和磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃，5％CO2培养箱中不用（蓝色）或用1μM星形孢菌素（红色）处理5小时，然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分钟。 使用FACSCalibur（Becton Dickinson，San Jose，CA）流式细胞仪，使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下测量膜联蛋白V-mFluor Violet 450的荧光强度
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
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货号 | 1146 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 5 mg | 价格 | 3924 | |
| Ex (nm) | 680 | Em (nm) | 695 | |
| 分子量 | 1994.41 | 溶剂 | DMSO | |
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
mFluor Red 700 酸是美国AAT Bioquest生产的mFluor系列荧光染料。mFluor Red 700染料是APC-AlexaFluor®700双色膜的替代品，因为它们的光谱特性与APC-AlexaFluor®700共轭物相同。 mFluor Red 700染料是水溶性的，用mFluor Red 700染料制备的蛋白质共轭物在633 nm处被激发，产生红色荧光（与Cy5.5®滤光片兼容）。 mFluor Red 700染料和缀合物是用于流式细胞术研究的出色的红色激光试剂。 与APC-AlexaFluor®700染料相比，mFluor Red 700染料比光谱相似的APC双色膜具有更高的光稳定性，使其易于用于荧光成像应用。
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产品说明书
操作方法
注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。 您需根据您的实际情况而定。
1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：
将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml）混合至100μL，以得到1 mL蛋白质标记原液。
注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。
注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。
注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记，叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得标记结果。
注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得标记效率，建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
2.准备染料储备溶液（溶液B）：
将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。
注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。 避免冻融循环。
3.确定染料/蛋白质比例（可选）：
注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。
3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。
注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。
3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。
3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。
3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。
3.6检测上述4种结合物，确定的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。
4.运行结合反应：
4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。
注意：溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。
4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
5.纯化缀合物
以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。
5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。
5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。
5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。
5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。
注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。
注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。
参考文献
Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769
Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018
Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436
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上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽，可以访问官网了解更多产品信息。
| 名称 | CKs-17 |
| 编码 | [99273-04-8] |
| 别名 | CKs-17 |
| 纯度 | 80%，90%，95%，98%，99% |
| 重量 | 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g |
| 序列（单字母缩写） | LQNRRGLDLLFLKEGGL |
| 序列（三字母缩写） | H-Leu-Gln-Asn-Arg-Arg-Gly-Leu-Asp-Leu-Leu-Phe-Leu-Lys-Glu-Gly-Gly-Leu-OH (trifluoroacetate salt) |
| 基本描述 | |
| 溶解度 | |
| 分子量 | 1942.3 |
| 化学式 | C87H148N26O24 |
| 存储条件 | Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place. |
| 注释 | |
| Documents | ![CKs-17 编码 [99273-04-8]](http://www.saliva.com.cn/wp-content/uploads/2022/10/20221005_633d65b702806.png) |
| Figures | ![CKs-17 编码 [99273-04-8]](http://www.saliva.com.cn/wp-content/uploads/2022/10/20221005_633d65b75b9e4.jpg) |
| Reference | R. A. J. Oostendorp et al., Eur. J. Immunol., 22, 1505 (1992) |
| C端 | |
| N端 | |
| 化学桥 |
上海金畔生物科技有限公司提供玻璃搅拌棒,宁波群安,30cm，可以访问官网了解更多产品信息。
玻璃搅拌棒,宁波群安,30cm
| 直径 | 7mm |
| 长度 | 30cm |
| 包装 |
上海金畔生物科技有限公司提供Anti-EMB Polyclonal Antibody,索莱宝,K001991P-50ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Anti-EMB Polyclonal Antibody,索莱宝,K001991P-50ul
| 浓度 | |
| 规格 | 50ul |
| 保存 |
