上海金畔生物科技有限公司提供Recombinant Human Annexin A2/ANXA2,索莱宝,P00071-1mg，可以访问官网了解更多产品信息。
Recombinant Human Annexin A2/ANXA2,索莱宝,P00071-1mg
| 浓度 | |
| 规格 | 1mg |
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上海金畔生物科技有限公司提供Recombinant Human Annexin A2/ANXA2,索莱宝,P00071-500ug，可以访问官网了解更多产品信息。
Recombinant Human Annexin A2/ANXA2,索莱宝,P00071-500ug
| 浓度 | |
| 规格 | 500ug |
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Recombinant Human Annexin A2/ANXA2,索莱宝,P00071-50ug
| 浓度 | |
| 规格 | 50ug |
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上海金畔生物科技有限公司提供Recombinant Human Annexin A2/ANXA2,索莱宝,P00071-10ug，可以访问官网了解更多产品信息。
Recombinant Human Annexin A2/ANXA2,索莱宝,P00071-10ug
| 浓度 | |
| 规格 | 10ug |
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上海金畔生物科技有限公司提供Annexin A1 Antibody,索莱宝,K000157M-100ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Annexin A1 Antibody,索莱宝,K000157M-100ul
| 浓度 | |
| 规格 | 100ul |
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上海金畔生物科技有限公司提供Annexin A1 Antibody,索莱宝,K000157M-50ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Annexin A1 Antibody,索莱宝,K000157M-50ul
| 浓度 | |
| 规格 | 50ul |
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上海金畔生物科技有限公司提供Annexin VI Antibody,索莱宝,K000100M-100ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Annexin VI Antibody,索莱宝,K000100M-100ul
| 浓度 | |
| 规格 | 100ul |
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上海金畔生物科技有限公司提供Annexin VI Antibody,索莱宝,K000100M-50ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Annexin VI Antibody,索莱宝,K000100M-50ul
| 浓度 | |
| 规格 | 50ul |
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上海金畔生物科技有限公司提供Annexin V Antibody,索莱宝,K001492P-100ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Annexin V Antibody,索莱宝,K001492P-100ul
| 浓度 | |
| 规格 | 100ul |
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上海金畔生物科技有限公司提供Annexin V Antibody,索莱宝,K001492P-50ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Annexin V Antibody,索莱宝,K001492P-50ul
| 浓度 | |
| 规格 | 50ul |
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上海金畔生物科技有限公司提供Annexin V-HRP (HRP-Conjugate) Antibody,索莱宝,K001503P-100ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Annexin V-HRP (HRP-Conjugate) Antibody,索莱宝,K001503P-100ul
| 浓度 | |
| 规格 | 100ul |
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上海金畔生物科技有限公司提供Annexin V-HRP (HRP-Conjugate) Antibody,索莱宝,K001503P-50ul，可以访问官网了解更多产品信息。
Annexin V-HRP (HRP-Conjugate) Antibody,索莱宝,K001503P-50ul
| 浓度 | |
| 规格 | 50ul |
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上海金畔生物科技有限公司提供ANNEXIN V- FITC/PI 凋亡检测试剂盒,索莱宝,CA1020-100T，可以访问官网了解更多产品信息。
ANNEXIN V- FITC/PI 凋亡检测试剂盒,索莱宝,CA1020-100T
· 英文名称 : Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
· 储存条件 : 2-8°C，复检期为一年
· 单位 : 盒
细胞凋亡是细胞的基本特征之一，在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面都起到十分重要的作用。Annexin V 是一种分子量为35.8 KD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）高亲和力特异结合。FITC-Annexin V 结合到凋亡细胞后，在蓝色光的激发下，发出绿色荧光，区分出凋亡细胞与正常细胞。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）是一种核酸染料，它不能穿透完整细胞膜，但对凋亡晚期细胞和死细胞的破损细胞膜能够穿透，并使细胞核红染。将FITC-Annexin V 与PI 匹配使用，可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞区分开来。
保存：贮存于 2-8°C，复检期为一年。建议Annexin V-FITC 打开后，分装成小份冻存于-20°C。
| 浓度 | |
| 规格 | 100T |
| 保存 | 2-8°C，复检期为一年 |
上海金畔生物科技有限公司提供ANNEXIN V- FITC/PI 凋亡检测试剂盒,索莱宝,CA1020-50T，可以访问官网了解更多产品信息。
ANNEXIN V- FITC/PI 凋亡检测试剂盒,索莱宝,CA1020-50T
· 英文名称 : Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
· 储存条件 : 2-8°C，复检期为一年
· 单位 : 盒
细胞凋亡是细胞的基本特征之一，在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面都起到十分重要的作用。Annexin V 是一种分子量为35.8 KD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）高亲和力特异结合。FITC-Annexin V 结合到凋亡细胞后，在蓝色光的激发下，发出绿色荧光，区分出凋亡细胞与正常细胞。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）是一种核酸染料，它不能穿透完整细胞膜，但对凋亡晚期细胞和死细胞的破损细胞膜能够穿透，并使细胞核红染。将FITC-Annexin V 与PI 匹配使用，可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞区分开来。
保存：贮存于 2-8°C，复检期为一年。建议Annexin V-FITC 打开后，分装成小份冻存于-20°C。
| 浓度 | |
| 规格 | 50T |
| 保存 | 2-8°C，复检期为一年 |
上海金畔生物科技有限公司提供ANNEXIN V- FITC/PI 凋亡检测试剂盒,索莱宝,CA1020-20T，可以访问官网了解更多产品信息。
ANNEXIN V- FITC/PI 凋亡检测试剂盒,索莱宝,CA1020-20T
· 英文名称 : Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
· 储存条件 : 2-8°C，复检期为一年
· 单位 : 盒
细胞凋亡是细胞的基本特征之一，在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面都起到十分重要的作用。Annexin V 是一种分子量为35.8 KD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）高亲和力特异结合。FITC-Annexin V 结合到凋亡细胞后，在蓝色光的激发下，发出绿色荧光，区分出凋亡细胞与正常细胞。碘化丙啶（Propidium iodide，PI）是一种核酸染料，它不能穿透完整细胞膜，但对凋亡晚期细胞和死细胞的破损细胞膜能够穿透，并使细胞核红染。将FITC-Annexin V 与PI 匹配使用，可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞区分开来。
保存：贮存于 2-8°C，复检期为一年。建议Annexin V-FITC 打开后，分装成小份冻存于-20°C。
| 浓度 | |
| 规格 | 20T |
| 保存 | 2-8°C，复检期为一年 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
简要概述
Annexin V，PacBlue缀合物是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。 在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的膜联蛋白V结合物是一组监测细胞功能的工具，旨在通过测量磷脂酰丝氨酸的易位来监测细胞凋亡。
膜联蛋白V结合物在Ca2+存在下与凋亡细胞表面上的PS结合，它也可以通过坏死细胞膜或死细胞并与细胞内部的PS结合。 因此，我们建议将细胞不可渗透的核染色与膜联蛋白V结合物结合使用，以区分死细胞和凋亡细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Annexin V，PacBlue缀合物。
产品说明书
分析方案
概述
用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
添加Annexin V结合物测定溶液
室温孵育30-60分钟
用流式细胞仪或荧光显微镜分析
1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞：
1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl2，pH 7.4。
1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。
1.3离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。
1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。
1.5在细胞中加入2μL膜联蛋白V结合物。
可选：在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭，用于坏死细胞。
1.6在室温下孵育30至60分钟，避光。
1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，加入300μL膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）以增加体积（参见下面的步骤1.8）。
1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度（参见下面的步骤2或3）。
2.使用流式细胞仪分析：
通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白V缀合物。
注意：粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van Engelend等人（见参考文献1和2）。
3.使用荧光显微镜分析：
3.1移取步骤1.6的细胞悬液，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，然后用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）重悬细胞。 将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。
注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与膜联蛋白V缀合物孵育（步骤1.6）后，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，并将膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。 在与膜联蛋白V缀合物孵育后，细胞也可以在2％甲醛中固定，并在显微镜下观察。
3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白V缀合物的凋亡细胞
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简要概述
Annexin V-iFluor 647标记是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。 在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的膜联蛋白V结合物是一组监测细胞功能的工具，旨在通过测量磷脂酰丝氨酸的易位来监测细胞凋亡。
膜联蛋白V结合物在Ca2+存在下与凋亡细胞表面上的PS结合，它也可以通过坏死细胞膜或死细胞并与细胞内部的PS结合。 因此，我们建议将细胞不可渗透的核染色与膜联蛋白V结合物结合使用，以区分死细胞和凋亡细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Annexin V-iFluor 647检测试剂。
产品说明书
分析方案
概述
用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
添加Annexin V结合物测定溶液
室温孵育30-60分钟
用流式细胞仪或荧光显微镜分析
1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞：
1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl2，pH 7.4。
1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。
1.3离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。
1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。
1.5在细胞中加入2μL膜联蛋白V结合物。
可选：在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭，用于坏死细胞。
1.6在室温下孵育30至60分钟，避光。
1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，加入300μL膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）以增加体积（参见下面的步骤1.8）。
1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度（参见下面的步骤2或3）。
2.使用流式细胞仪分析：
通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白V缀合物。
注意：粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 和van Engelend等人（见参考文献1和2）。
3.使用荧光显微镜分析：
3.1移取步骤1.6的细胞悬液，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，然后用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）重悬细胞。 将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。
注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与膜联蛋白V缀合物孵育（步骤1.6）后，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，并将膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。 在与膜联蛋白V缀合物孵育后，细胞也可以在2％甲醛中固定，并在显微镜下观察。
3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白V缀合物的凋亡细胞
数据分析
下图是使用流式细胞仪检测膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸在Jurkat细胞凋亡中的结合活性的实例。 在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。
图1.在Jurkat细胞中检测膜联蛋白VmFluor Violet 450和磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃，5％CO2培养箱中不用（蓝色）或用1μM星形孢菌素（红色）处理5小时，然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分钟。 使用FACSCalibur（Becton Dickinson，San Jose，CA）流式细胞仪，使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下测量膜联蛋白V-mFluor Violet 450的荧光强度。
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简要概述
Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，膜联蛋白V可以与包括APC的荧光染料缀合。这种形式保留了其对磷脂酰丝氨酸（PS）的高亲和力，因此可用作流式细胞仪分析正在经历细胞凋亡的细胞的敏感探针。由于PS的外化发生在细胞凋亡的早期阶段，APC膜联蛋白V染色可以在比基于核变化（例如DNA片段化）的测定更早的阶段鉴定细胞凋亡。 APC膜联蛋白V染色先于膜完整性的丧失，这伴随着由细胞凋亡或坏死过程引起的新细胞死亡阶段。因此，APC膜联蛋白V染色通常与重要染料如碘化丙啶（PI）或7-AAD联合使用，以使研究人员能够识别早期凋亡细胞（7-AAD阴性，APC）膜联蛋白V阳性）。具有完整膜的活细胞排除7-AAD，而死亡和受损细胞的膜对7-AAD是可渗透的。例如，被认为存活的细胞是APC膜联蛋白V和7-AAD阴性，而早期细胞凋亡的细胞是APC膜联蛋白V阳性和7-AAD阴性，而晚期凋亡或已经死亡的细胞都是APC膜联蛋白V和7-AAD阳性。该测定不区分经历凋亡性死亡的细胞与由于坏死途径而死亡的细胞，因为在任一情况下，死细胞将用APC膜联蛋白V和7-AAD染色。然而，当随时间测量细胞凋亡时，通常可以从APC膜联蛋白V和7-AAD阴性（存活或无可测量的细胞凋亡）追踪细胞，APC膜联蛋白V阳性和7-AAD阴性（早期细胞凋亡，膜完整性存在） ） 后到APC膜联蛋白V和7-AAD阳性（末期凋亡和死亡）。细胞通过这三个阶段的运动表明细胞凋亡。相比之下，单个观察结果表明细胞本身是APC膜联蛋白V和7-AAD阳性，它们揭示了关于细胞经历其死亡的过程的较少信息。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter APC-Annexin V细胞凋亡检测试剂盒。
点击查看光谱
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
2.加入APC-膜联蛋白V测定溶液
3.在室温下孵育20-60分钟
4.使用FL4通道的流式细胞仪分析细胞（Ex / Em = 635/660 nm）
储备溶液配制
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. APC-Annexin V原液（100X）：
将含有0.2％BSA的200μLPBS加入到APC-膜联蛋白V缀合物（组分A）的小瓶中并充分混合以制备100X APC-膜联蛋白V储备溶液。 注意：将重构的100X APC-Annexin V储备溶液储存在4 ℃。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。
操作步骤
1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。注意：膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。
2.离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。
3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。
4.向细胞中加入2μL100XAPC-膜联蛋白V原液。
5.可选：将2μL100X碘化丙啶（组分C）加入细胞中，用于坏死细胞。
6.在室温下孵育20至60分钟，避光。
7.可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300μL的测定缓冲液（组分B）以增加体积。
8.使用具有FL4通道的流式细胞仪（Ex / Em = 635 / 660nm）监测APC-膜联蛋白V的荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时，使用FL2通道测量细胞活力。
数据分析
在活的非凋亡细胞中，APC-膜联蛋白V检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，APC-膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外叶上，因此导致染色强度增加。
| 图1.使用Cell Meter APC-膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中APC-膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃，5％CO2培养箱中在没有（蓝色）或1μM星形孢菌素（红色）的情况下处理约4小时，然后用APC-膜联蛋白V染色30分钟。 使用FL4通道，用FACSCalibur（Becton Dickinson）流式细胞仪测量APC-膜联蛋白V的荧光强度。 |
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简要概述
Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 *蓝色荧光 405nm处激发* 通过对磷脂酰丝氨酸(PS)进行检测，而实现细胞凋亡的检测。在凋亡细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）从胞内移位到胞外表面，因此PS出现在细胞的外表面可以作为细胞凋亡的起始或者中间阶段的通用指示器，也可以通过其形态学改变来测定。该试剂盒采用独有的蓝色荧光染料（Pacific Blue的优越替代物，使用Pacific Blue通道检测）标记的Annexin V检测凋亡细胞，同时包含PI红色荧光染料用于对坏死细胞进行染色。目前商业化各种Annexin V凋亡检测试剂盒一般是将Annexin V进行传统的荧光团（FITC、Cy3）标记后作为荧光探针，通过检测细胞凋亡早期细胞膜外翻的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS），从而实现对细胞凋亡的检测。然而目前的检测受到荧光颜色、荧光强度和检测灵敏度等因素的限制。Cell Meter Annexin V Binding Apoptosis Assay Kit系列产品分别采用了mFluor Violet和iFluor荧光染料，这种染料比传统的FITC、Cy3等具有更高的荧光强度、更低的荧光背景和更 的光稳定性，因此检测效果更灵敏稳定；而iFluor系列染料在保证上述优势的同时，均在405nm处激发，尤其适合用于多色分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。
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产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
2.添加Annexin V-mFluor Violet 450检测溶液
3.在室温下孵育30-60分钟
4.使用具有Ex / Em = 405 / 450nm滤光器组的流式细胞仪或具有Violet滤光器的荧光显微镜分析细胞
操作步骤
使用膜联蛋白V-mFluor Violet 450制备和孵育细胞：
1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。
2.离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。
3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。
4.将2μL膜联蛋白V-mFluor Violet 450（组分A）加入细胞中。
5.可选：将2μL100X碘化丙啶（组分C）加入细胞中，用于坏死细胞。
6.在室温下孵育30至60分钟，避光。
7.在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，添加300μL分析缓冲液（组分B）以增加体积。
8.使用具有Ex / Em = 405 / 450nm滤光片组的流式细胞仪或具有Violet滤光片的荧光显微镜监测荧光强度。
使用流式细胞仪分析：
1.使用流式细胞仪在Ex / Em = 405 / 450nm处定量膜联蛋白V-mFluor Violet 450结合。 当碘化丙啶加入细胞时，使用FL2通道测量细胞活力。 注意：粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。
使用荧光显微镜分析：
1.孵育后移取细胞悬液，用测定缓冲液冲洗1-2次，然后用测定缓冲液重悬细胞。
2.将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。 注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与V-mFluor Violet 450孵育后，用测定缓冲液冲洗1-2次，并将化验缓冲液加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并可视化细胞。 在与V-mFluor Violet 450一起温育后，细胞也可以固定在2％甲醛中，并在显微镜下观察。
3.使用Violet通道在荧光显微镜下用V-mFluor Violet 450分析凋亡细胞。 当碘化丙啶加入细胞时，使用TRITC通道测量细胞活力。 质膜上的蓝色染色表明V-mFluor Violet 450与细胞表面上的PS结合。
数据分析
在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白V-mFluor Violet 450与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。
| 图1.在Jurkat细胞中检测膜联蛋白V-mFluor Violet 450和磷脂酰丝氨酸的结合活性。 将Jurkat细胞在37℃，5％CO2培养箱中在没有（蓝色）或1μM星形孢菌素（红色）的情况下处理5小时，然后用Annexin V-mFluor Violet 450染色30分钟。 使用FACSCalibur（Becton Dickinson）流式细胞仪，使用紫外激光在Ex / Em = 405 / 450nm下测量膜联蛋白V-mFluor Violet 450的荧光强度。 |
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简要概述
我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。 有多种参数可用于检测细胞活力。 该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸（PS）的转运来检测细胞凋亡。 在细胞凋亡中，PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标，可以在观察形态变化之前进行检测。该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。 已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS。 使用带有525/40发射滤光片组的405激光器的流式细胞仪，对该特定的测定试剂盒进行了优化，以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
用测试化合物制备细胞（200 µL /样品）
添加膜联蛋白V-mFluor Violet 500分析溶液
在室温下孵育30-60分钟
使用带有525/40 nm滤光片（AmCyan通道）的流式细胞仪或带有紫色滤光片组的荧光显微镜分析细胞
实验步骤
1.用膜联蛋白V-mFluor Violet 500制备和孵育细胞：
1.1用测试化合物处理细胞一段时间（对于用星形孢菌素处理过的Jurkat细胞，需要4-6小时）以诱导细胞凋亡。
1.2离心细胞以获得1-5×105细胞/管。
1.3将细胞重悬于200 µL分析缓冲液（组分B）中。
1.4在细胞中加入2 µL Annexin V-mFluor Violet 500（组分A）。
1.5可选：向坏死的细胞中加入2 µL 100X碘化丙啶（组分C）。
1.6避光保存，于室温下孵育30至60分钟。
1.7在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，添加300 µL分析缓冲液（组分B）以增加体积。
1.8使用带有525/40 nm滤光片的流式细胞仪（AmCyan通道）或带有紫色滤光片组的荧光显微镜检测荧光强度。
2.通过使用流式细胞仪进行分析：
2.1使用带有525/40 nm滤光片的流式细胞仪（AmCyan通道）定量膜联蛋白V-mFluor Violet 500结合。 将碘化丙啶加入细胞后，使用610/20 nm滤光片（PE-德克萨斯红通道）测量细胞活力。 注意：对贴壁细胞的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经过常规测试，因为在细胞分离或收获过程中可能会发生特定的膜损伤。
3.通过使用荧光显微镜进行分析：
3.1孵育后用移液管吸移细胞悬液，用测定缓冲液冲洗1-2次，然后用测定缓冲液重悬细胞。
3.2将细胞添加到载玻片盖玻片的载玻片上。注意：对于贴壁细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。与膜联蛋白V-mFluor Violet 500一起孵育后，用测定缓冲液冲洗1-2次，然后将测定缓冲液加到盖玻片上。将玻片上的盖玻片倒置并可视化细胞。与膜联蛋白V-mFluor Violet 500孵育后，还可以将细胞固定在2％甲醛中，并在显微镜下观察。
3.3使用紫罗兰滤光片组在荧光显微镜下用膜联蛋白V-mFluor Violet 500分析凋亡细胞。当碘化丙锭添加到细胞中时，使用TRITC通道测量细胞活力。质膜上的绿色染色表明膜联蛋白V-mFluor Violet 500与细胞表面的PS结合。
