chimerx新产品NXT Taq PCR试剂盒

chimerx新产品NXT Taq PCR试剂盒

 

chimerx新产品NXT Taq PCR试剂盒

CHIMERx现在提供了一个热启动PCR试剂盒,旨在缩短PCR循环时间而又不影响产量或性能。NXT Taq PCR Kit包含现成的预混液,其中包括Hot Start NXT Taq DNA聚合酶,反应缓冲液,MgCl2和dNTP。还包括无核酸酶的水和10X彩色加载溶液。NXT Taq PCR Kit可以与任何热循环仪一起使用。

NXT Taq PCR试剂盒

chimerx 1108

 

$ 56.00

    快速概述

    热启动PCR试剂盒,设计用于在任何热循环仪上进行快速循环PCR,而不会影响产量或性能

    细节

    提供的试剂

    NXT  Taq PCR预混液(2x)包含:

    • 热启动NXT Taq DNA聚合酶 
    • 反应缓冲液
    • 氯化镁2
    • dNTPs

    水,无核酸酶的
    10X彩色溶液

    描述

    •  llows以获得宽范围的PCR产物的至多4个kb和从附加型或复杂的基因组DNA为10kb,分别
    • 即用型溶液,包含热启动  NXT  Taq DNA聚合酶,反应缓冲液,MgCl 2  和dNTP
    • 专为任何热循环仪上的快速循环PCR设计
    • 缩短PCR循环时间而不会影响产量或PCR性能
    • 不需要重新设计引物
    • 随附10X Color Load溶液,可直接在凝胶上加载PCR反应
    • 在72°C下复制DNA,并在95°C下显示40分钟的半衰期
    • 包含5'→3'核酸外切酶活性
    • 缺乏3'→5'核酸外切酶活性
    • 在3'末端添加额外的“ A”
    • 抗Taq抗体在中等温度下抑制聚合酶活性
    • 在初始变性步骤中,聚合酶活性得以恢复。

    应用领域

    • Taq DNA聚合酶和抗Taq抗体之间形成复合物,构成了热启动PCR的基础,可方便地进行室温反应。
    • 与常规PCR组装方法相比,热启动PCR可以提高PCR反应的特异性,灵敏度和产率。

    笔记

    • 不要使用大于20μl的反应体积,因为这会干扰获得成功结果所需的宜温度梯度
    • 使用前解冻,轻轻涡旋并短暂离心NXT Taq PCR Master Mix(2x),引物,DNA模板,以避免盐浓度的局部差异
    • 退火和延伸步骤每100 bp分别需要5 s和3 s
    • 在室温下设置PCR反应
    • 底漆可以单独添加,也可以作为预先准备的底漆混合物添加
    • 涡旋样品并短暂旋转
    • 反应可以在室温下放入热循环仪中
    • 使用10X Color Load Solution可使PCR反应直接加载到凝胶上,而无需事先添加凝胶加载缓冲液。10X Color Load Solution包含凝胶加载试剂和两种在电泳过程中分离的跟踪染料(红色染料和黄色染料)。在1%琼脂糖凝胶中,红色染料的迁移速率与600 bp DNA片段的迁移速率相同,而黄色染料的迁移速率高于20 bp。该染料不干扰大多数下游酶的应用,但是建议在酶操作之前纯化PCR产物。
    • 在大多数情况下,无需在PCR反应中添加添加剂。对于某些困难的目标,例如:富含GC的序列,可以添加具有复杂二级结构添加剂的序列(例如DMSO)以改善扩增。使用浓度为2-8%的DMSO。如果需要,建议的起始DMSO浓度为3%
    • 作为使用多少模板DNA的一般指南,请从少10 4  个目标序列拷贝开始,以25-35个周期获得信号(即1μg1 kb ds DNA等于9.1 x 10 11分子,1μg的大肠杆菌基因组DNA等于2 x 10 8分子,1μg人基因组DNA等于3 x 10 5分子)

    储存条件

    在-20°C下储存
    产品在干冰上运输

    分类目录

    聚合酶,嗜热DNA聚合酶