细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 适合流式细胞检测 货号22810-AAT Bioquest荧光染料

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细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 适合流式细胞检测  货号22810
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 适合流式细胞检测

细胞内谷胱甘肽GSH检测试剂盒 适合流式细胞检测  货号22810

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量耗尽的抗氧化剂还原型谷胱甘肽(GSH)来检测细胞凋亡。 GSH参与许多细胞过程,包括清除自由基, 解毒,细胞信号传导和细胞增殖。细胞中GSH浓度的降低是许多细胞类型中对不同凋亡刺激物响应的细胞死亡进程的早期标志。我们的Cell Meter 细胞内GSH检测试剂盒为所有必需成分提供了优化的检测方法,用于检测GSH降低的细胞凋亡。该荧光测定法是基于使用我们专有的非荧光Thiolite Green染料检测细胞中GSH的结果,该染料与硫醇反应后会发出强烈的荧光。在正常细胞中,Thiolite Green主要在细胞质中积累,但在凋亡细胞中它会部分转移到线粒体中,而Thiolite Green的染色强度会降低。 Thiolite Green染色的细胞可以通过流式细胞仪观察。该试剂盒可与其他试剂配对,例如7-AAD(Cat#17501),碘化丙啶(Cat#17517),用于多参数研究细胞生存力和凋亡。该试剂盒经过优化,可通过流式细胞仪筛选凋亡激活剂和抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞

  2. 将5 µL 200X Thiolite Green加入1 mL细胞溶液中

  3. 将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育15至30分钟

  4. 沉淀细胞并将细胞重悬于1 mL生长培养基中

  5. 使用带有FL1通道的流式细胞仪分析细胞

溶液配制

储存溶液配制

1. Thiolite 绿色原液(200X):将500µL DMSO(组分C)加入小瓶Thiolite Green(组分A)中并充分混合,制成200X Thiolite Green储备液,避光。

实验步骤

1.对于每个样品,在1 mL温热培养基或自备缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞所需的时间以诱导凋亡。

3.向处理过的细胞中加入5µL 200X Thiolite Green储备溶液。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育15至30分钟。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与Thiolite Green染料上样溶液孵育之前,用含血清的培养基清洗细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.可选:将细胞以1000 rpm离心4分钟,然后将细胞重悬于1 mL的测定缓冲液(组分B)或自备缓冲液中。

6.使用带有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490/525 nm)检测荧光强度。

荧光法活细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适用于流式细胞仪 货号22860-AAT Bioquest荧光染料

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荧光法活细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适用于流式细胞仪   货号22860
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1kit
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Product details

Cell Meter 荧光法活细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适用于流式细胞仪

荧光法活细胞周期检测试剂盒 红色荧光 适用于流式细胞仪   货号22860

简要概述

细胞周期具有四个连续阶段:G0 / G1,S,G2和M。在细胞通过细胞周期的过程中,其DNA在S(合成)阶段复制,并在M(有丝分裂)阶段在两个子细胞之间平均分配。这两个阶段由两个间隙阶段分开:G0 / G1和G2。这两个间隙阶段为细胞提供了生长时间,并使它们的蛋白质和细胞器的质量增加了一倍。在进入下一阶段的细胞周期之前,细胞还可以使用它们来检测内部和外部条件。细胞通过细胞周期的传递受到许多不同调节蛋白的控制。该检测试剂盒旨在通过在活细胞中使用我们专有的Nuclear Red CCS2检测细胞周期进程和增殖。可以通过流式细胞术确定给定样品中处于G0 / G1,S和G2 / M期的细胞以及亚G1期处于凋亡之前的细胞的百分比。可以用流式细胞仪(PE-Texas Red通道)检测用Nuclear Red CCS2染色的细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 荧光法活细胞周期检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞

  2. 将1 µL 500X Nuclear Red CCS2添加到0.5 mL细胞溶液中

  3. 在37°C,5%CO2下孵育10-30分钟

  4. 使用带有PE-Texas Red通道的流式细胞仪分析细胞(Ex / Em = 488 nm / 615 nm)

实验步骤

1.对于每个样品,以0.5×105至1×106细胞/ mL的密度在0.5 mL温暖的培养基或自备缓冲液中制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段时间,以诱导细胞凋亡,细胞周期停滞或其他细胞周期功能。

3.在含有生长培养基的细胞中加入1 µL 500X Nuclear Red CCS2(组分A)。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育10至30分钟。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用Nuclear Red CCS2孵育之前用含血清的培养基洗涤一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。染色前无需固定细胞,因为Nuclear Red CCS2具有细胞渗透性。

5.可选:将细胞以1000 rpm的速度离心4分钟,然后将细胞重悬于0.5 mL的测定缓冲液(组分B)或自备的缓冲液中。

6.使用带有PE-Texas Red通道(Ex / Em = 488/615 nm)的流式细胞仪检测荧光强度。

通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测 货号22822-AAT Bioquest荧光染料

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通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测 货号22822
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超纯、高纯
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95%
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100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
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Cell Meter 通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测

通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测 货号22822

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量活细胞中的通用胱天蛋白酶(胱天蛋白酶-1,-3,-4,-5,-6,-7,-8和-9)激活来检测细胞凋亡。胱天蛋白酶激活被广泛认为是细胞凋亡的可靠指标。大多数胱天蛋白酶具有对肽序列Val-Ala-Asp(VAD)的底物选择性。该试剂盒使用TF5-VAD-FMK作为大多数半胱天冬酶活性的荧光指示剂。 TF5-VAD-FMK是细胞可渗透的,无毒的,并且与凋亡细胞中活化的casepase-1,-3,-4,-5,-6,-7,-8和-9不可逆地结合。一旦与胱天蛋白酶结合,红色荧光试剂将保留在细胞内。结合后阻止了胱天蛋白酶的进一步催化,但不会阻止凋亡的进行。添加到培养基中后的15分钟内,该试剂将开始与活性caspase酶反应。该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。它用于定量凋亡细胞中大多数激活的胱天蛋白酶活性,或筛选胱天蛋白酶抑制剂。红色荧光标记允许通过流式细胞仪直接检测凋亡细胞中激活的胱天蛋白酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 通用Caspase活性荧光法检测试剂盒。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞

  2. 将0.5 µL细胞溶液中加入1 µL 500X TF5-VAD-FMK

  3. 将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-4小时

  4. 沉淀细胞并将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液或生长培养基中

  5. 使用带有660/20 nm滤光片的流式细胞仪分析细胞(APC通道)

实验步骤

1.对于每个样品,在0.5mL温热培养基或自备缓冲液中以5×105至1×106cell/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段时间,以诱导细胞凋亡,并建立阳性和阴性对照。

3.向处理过的细胞中加入1µL 500X TF5-VAD-FMK(组分A)。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-4小时。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与TF5-VAD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.洗涤并旋转细胞两次。将细胞重悬于0.5 mL分析缓冲液(组分B)或生长培养基中。注意:TF5-VAD-FMK是荧光的;因此,重要的是洗净任何未结合的试剂以除去背景。

6.可选:用DNA染色剂标记细胞(例如绿色DCS标记死细胞,可以用530/30 nm滤光片(FITC通道)检测到。

7.可选:修复细胞。

8.使用带有660/20 nm滤光片(APC通道)的流式细胞仪检测荧光强度。

Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22826-AAT Bioquest荧光染料

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Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22826
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1kit
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测

Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22826

简要概述

        Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 *红色荧光 适合流式细胞检测*通过对磷脂酰丝氨酸(PS)进行检测,而实现细胞凋亡的检测。在凋亡细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)从胞内移位到胞外表面,因此PS出现在细胞的外表面可以作为细胞凋亡的起始或者中间阶段的通用指示器,也可以通过其形态学改变来测定。该试剂盒采用独有的红色荧光染料(Texas Red的优越替代物,使用Texas Red通道检测)标记的Annexin V检测凋亡细胞。试剂盒内组分经过特别优化,尤其适合于流式细胞分析。目前商业化各种Annexin V凋亡检测试剂盒一般是将Annexin V进行传统的荧光团(FITC、Cy3)标记后作为荧光探针,通过检测细胞凋亡早期细胞膜外翻的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS),从而实现对细胞凋亡的检测。然而目前的检测受到荧光颜色、荧光强度和检测灵敏度等因素的限制。Cell Meter Annexin V Binding Apoptosis Assay Kit系列产品分别采用了mFluor Violet和iFluor荧光染料,这种染料比传统的FITC、Cy3等具有更高的荧光强度、更低的荧光背景和更 的光稳定性,因此检测效果更灵敏稳定;而iFluor系列染料在保证上述优势的同时,均在405nm处激发,尤其适合用于多色分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(200μL/样品)制备细胞
2.添加Annexin V-iFluor 594检测溶液
3.在室温下孵育30-60分钟
4.使用具有Ex / Em = 590 / 620nm滤光片组的流式细胞仪或具有TRITC或Texas Red通道的荧光显微镜分析细胞

操作步骤

使用Annexin V-iFluor 594制备和孵育细胞:

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。

2.离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。

4.将2μL膜联蛋白V-iFluor 594(组分A)加入细胞中。

5.在室温下孵育30至60分钟,避光。

6.在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前,添加300μL分析缓冲液(组分B)以增加体积。

7.使用具有Ex / Em = 590 / 620nm滤光器组的流式细胞仪或具有TRITC或Texas Red通道的荧光显微镜监测荧光强度。

使用流式细胞仪分析:

使用流式细胞仪在Ex / Em = 590 / 620nm处定量膜联蛋白V-iFluor 594结合。 注意:粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而,Casciola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 

使用荧光显微镜分析:

1.孵育后移取细胞悬液,用测定缓冲液冲洗1-2次,然后用测定缓冲液重悬细胞。

2.将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。 注意:对于粘附细胞,建议直接在盖玻片上生长细胞。 与Annexin V-iFluor 594孵育后,用测定缓冲液冲洗1-2次,并将测定缓冲液加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并可视化细胞。 在与膜联蛋白V-iFluor 594孵育后,细胞也可以固定在2%甲醛中,并在显微镜下观察。

3.使用TRITC或Texas Red通道在荧光显微镜下用膜联蛋白V-iFluor 594分析凋亡细胞。 质膜上的橙色染色表明膜联蛋白V-iFluor 594与细胞表面上的PS结合。

数据分析

        在活的非凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 594检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。 在凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 594与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,导致染色强度增加。

Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22826

图1.用细胞仪膜联蛋白V结合细胞凋亡检测试剂盒染色的Costar黑壁/透明底96孔板中Jurkat细胞的图像*红色荧光*。 (左):未处理的对照细胞。 (右):用1μM星形孢菌素处理细胞5小时。

磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测 货号22832-AAT Bioquest荧光染料

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磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测 货号22832
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1kit
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测

磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测 货号22832

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。 该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸(PS)的转运来检测细胞凋亡。在细胞凋亡中,PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标,可以在观察形态变化之前进行检测。该试剂盒中使用的我们专有的Apopxin PS探针是基于小分子的PS探针。 与膜PS结合后具有红色荧光。 使用流式细胞仪在Cy5通道(红色荧光)优化了此特定的检测试剂盒,以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用测试化合物制备细胞(200 µL /样品)

  2. 添加Apopxin 深红色测定溶液

  3. 在室温下孵育30-60分钟

  4. 使用具有FL4通道(Ex / Em = 647/660 nm的流式细胞仪)分析细胞

实验步骤

1.用测试化合物处理细胞所需的时间(喜树碱处理过的Jurkat细胞需要4-6小时)以诱导凋亡。 

2.离心细胞以获得1-5×105细胞/管。

3.将细胞重悬于200 µL分析缓冲液(组分B)中。

4.向细胞中加入2 µL Apopxin 深红色溶液(组分A)。

5.避光保存,于室温下孵育30至60分钟。

6.可选:在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加200至300 µL分析缓冲液(组分B)以增加体积。

7.使用带有FL4通道的流式细胞仪(Ex / Em = 647/660 nm)检测荧光强度。

Cell Meter 细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪检测 货号16351-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

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Cell Meter 细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪检测 货号16351
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪橙色检测

Cell Meter 细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪检测 货号16351

货号 16351                       存储条件 f/l                      
规格                       100 Tests                         
Ex (nm) 552 Em (nm) 575
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

        Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 适合于酶标仪橙色检测 是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞内一氧化氮活性的试剂盒,一氧化氮(NO)是涉及许多生理和病理过程的重要生物调节剂。 改变的NO产生涉及各种免疫,心血管,神经变性和炎性疾病。 作为自由基,NO被快速氧化,并且体内存在相对低浓度的NO。 检测和了解NO在生物系统中的作用一直具有挑战性。 Cell Meter 荧光细胞内一氧化氮检测试剂盒提供了一种监测活细胞内细胞内NO水平的敏感工具。

        Nitrixyte 探针在我们的试剂盒中开发和使用,作为DAF-2的优异替代品,用于检测和成像细胞中的游离NO。 与常用的DAF-2探针相比,Nitrixyte 探针具有更好的光稳定性和增强的细胞渗透性。 该特殊试剂盒使用Nitrixyte Orange,可与NO反应生成亮橙色荧光产品,其光谱特性与Cy3®和TRITC相似。Nitrixyte Orange可以很容易地加载到活细胞中,使用Cy3®或TRITC过滤器可以方便地监测其荧光信号。该试剂盒针对荧光成像和酶标仪应用进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

样本实验方案

概述

1.准备细胞(0.5-1×106细胞/ mL)
2.将1 µL 500X Nitrixyte 橙色加入0.5 mL细胞悬液中
3.将细胞与测试化合物和Nitrixyte Orange在37°C下孵育
4.用流式细胞仪分析

溶液配制

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NONOate阳性对照储备溶液(50 mM):
将200 µL ddH2O加入小瓶NONOate阳性对照液(组分B)中,制成50 mM储备液。

2.工作溶液

2.1 NONOate阳性对照
用测定缓冲液(组分C)将NONOate阳性对照原液稀释至1-2 mM工作溶液。

点击查看细胞制备方案

样品操作及实验分析

1.向0.5 mL细胞悬液中加入1 µL 500X Nitrixyte 橙色(组分A)。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与Nitrixyte Orange孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

2.将细胞与测试化合物和Nitrixyte Orange在37°C下孵育所需的时间,以生成内源性或外源性NO。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物。优化每个实验的孵育时间。注意:我们已在37°C的细胞培养基中使用Raw 264.7细胞与1X Nitrixyte Orange,20 µg / mL脂多糖(LPS)和1 mM L-精氨酸(L-Arg)孵育16小时。

3.降低已经用Nitrixyte Orange预孵育30分钟的细胞。用1 mM DEA NONOate阳性对照工作溶液重悬细胞,并在37°C孵育30分钟。有关详细信息,请参见图1。

4.使用流式细胞仪监测FL2通道(Ex / Em = 488/590 nm)处的荧光强度。


aat bioqueCell Meter 细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪红色检测 货号16356-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

aat bioqueCell Meter 细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪红色检测 货号16356
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪红色检测

aat bioqueCell Meter 细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪红色检测 货号16356

货号 16356 存储条件 f/l
规格 100 Tests
Ex (nm) 586 Em (nm) 607
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

        Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 适合于酶标仪橙色检测 是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞内一氧化氮活性的试剂盒,一氧化氮(NO)是涉及许多生理和病理过程的重要生物调节剂。 改变的NO产生涉及各种免疫,心血管,神经变性和炎性疾病。 作为自由基,NO被快速氧化,并且体内存在相对低浓度的NO。 检测和了解NO在生物系统中的作用一直具有挑战性。 Cell Meter 荧光细胞内一氧化氮检测试剂盒提供了一种监测活细胞内细胞内NO水平的敏感工具。

        Nitrixyte 探针在我们的试剂盒中开发和使用,作为DAF-2的优异替代品,用于检测和成像细胞中的游离NO。 与常用的DAF-2探针相比,Nitrixyte 探针具有更好的光稳定性和增强的细胞渗透性。 该特殊试剂盒使用Nitrixyte Orange,可与NO反应生成亮橙色荧光产品,其光谱特性与Cy3®和TRITC相似。Nitrixyte Orange可以很容易地加载到活细胞中,使用Cy3®或TRITC过滤器可以方便地监测其荧光信号。该试剂盒针对荧光成像和酶标仪应用进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

样本实验方案

概述

1.准备细胞(0.5-1×106细胞/ mL)
2.添加1 µL 500X Nitrixyte 红色
3.将细胞与测试化合物和Nitrixyte Red在37ºC下孵育所需的时间
4.使用FL4通道的流式细胞仪分析细胞

 

溶液配制

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NONOate阳性对照治疗储备液(50 mM):
将200 uL ddH2O加入小瓶NONOate阳性对照(组分B)中,制成50 mM NONOacte阳性对照处理原液。

 

2.工作溶液

用测定缓冲液(组分C)稀释50 mM NONOate阳性对照治疗原液,制成1-2 mM NONOate阳性对照工作溶液。

点击查看细胞制备方案

 

样品操作及实验分析

1.对于每个样品,在0.5 mL温热培养基或您选择的缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定诱导NO的细胞密度。

2.向0.5 mL细胞悬液中加入1 µL 500X Nitrixyte Red(组分A)。注意:对于粘附细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与Nitrixyte Red孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

3.将细胞与测试化合物和Nitrixyte Red在37ºC下孵育所需的时间,以生成内源性或外源性NO。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物。优化每个实验的孵育时间。注意:我们已在37℃的细胞培养基中使用Raw 264.7细胞与Nitrixyte Red工作溶液,20μg/ mL脂多糖(LPS)和1 mM L-精氨酸(L-Arg)孵育16小时。

4.降低已经用Nitrixyte Red预孵育30分钟的细胞。用1 mM DEA NONOate阳性对照工作溶液重悬细胞,并在37ºC下再孵育30分钟。有关详细信息,请参见图1。

5.使用流式细胞仪监测FL4通道(Ex / Em = 630/660 nm)处的荧光强度。

 


荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22904-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22904
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪

简要概述

活性氧(ROS)是氧正常代谢的天然副产物,在细胞信号传导中起重要作用。但是,在与氧化应激相关的状态下,ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病,糖尿病,骨质疏松症,中风,炎性疾病,许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS检测将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒使用我们独特的Amplite ROS Green荧光定量活细胞中的ROS,Amplite ROS Green具有细胞渗透性。与ROS反应时会生成绿色荧光。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法,可在培养一小时后检测活细胞中的细胞内ROS。该试剂盒针对流式细胞仪应用进行了优化,其信号可以通过Ex / Em = 490/520 nm(FL1通道)进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备密度为0.5-1×106细胞/ mL的细胞
2.在0.5 mL细胞悬液中加入1 µL 500X Amplite ROS Green
3.在37℃下将细胞染色1小时
4.处理细胞以诱导ROS
5.使用带有FL1通道的流式细胞仪分析细胞(Ex / Em = 490/520 nm)

溶液配制

1.储备溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。

Amplite ROS绿色储备溶液(500X):将100 µL DMSO(组分C)添加到Amplite ROS Green(组分A)的小瓶中,并充分混合以制成500X Amplite ROS Green储备液。 避光。 注意:要存放,请密封管。有关细胞样品制备的指南,请点击查看。

操作步骤

1.对于每个样品,以0.5×105至1×106细胞/ mL的密度在0.5 mL测定缓冲液(组分B)或自备缓冲液中制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定诱导ROS的细胞密度。

2.将1 µL 500X Amplite ROS Green储备溶液加入0.5 mL细胞悬液中。

3.在37ºC下孵育1小时。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与Amplite ROS Green孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物,优化每个实验的孵育时间。

4.通过在所需的缓冲液(例如PBS或HBSS)中添加50 µL 11X测试化合物来处理细胞。对于对照孔(未处的细胞),添加相应量的缓冲液。

5.将细胞在37ºC下孵育,以诱导ROS(避光)。注意:我们在37℃下用100 µM TBHP(氢过氧化叔丁基)处理Jurkat细胞30分钟,以诱导ROS。有关详细信息,请参见图1。

6.使用具有FL1通道(Ex / Em = 490/520 nm)的流式细胞仪检测荧光强度。

荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22904

荧光法胞内总ROS检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22904

胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 货号12591-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
  • 产品详情

胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 货号12591
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒

胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 货号12591

简要概述

        Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测NADH/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平的增加与活性氧(ROS)和DNA损伤的异常产生有关。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,在生物系统中检测细胞内NAD(P)H具有挑战性。 Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒提供了一种监测活细胞内细胞内NAD(P)H水平的有效方法。 JZL1707 NAD(P)H传感器是一种 的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。探针结合NADH / NADPH以产生具有高灵敏度和特异性的强荧光信号。 JZL1707 NAD(P)H传感器可以很容易地加载到活细胞中,并且可以使用PE通道中的流式细胞仪方便地监测其荧光信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

实验示例

概述

1.准备细胞(0.5-1×106细胞/ mL)
2.将细胞与测试化合物和JZL1707 NAD(P)H传感器在37ºC下孵育30-60分钟
3.洗涤细胞并将其保存在测定缓冲液中
4.使用PE通道通过流式细胞仪分析细胞

操作步骤

1.对于每个样品,在0.5 mL无血清培养基或您选择的缓冲液中以1×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定细胞密度。对于粘附细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并用无血清培养基洗涤细胞一次。注意:JZL1707 NAD(P)H传感器对血清敏感,因此建议将细胞保存在您选择的无血清培养基或缓冲液中。或者,可以制备细胞并在常规完全培养基中处理。与JZL1707 NAD(P)H Sensor孵育时,请更改为无血清培养基或您选择的缓冲液。
在37ºC下将细胞与测试化合物一起孵育所需的时间,以刺激细胞内的NADH / NADPH。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物。优化每个实验的孵育时间。

2.将1 µL JZL1707 NAD(P)H传感器(组分A)加入0.5 mL细胞悬液中。在37ºC下孵育30-60分钟。注意:对于NADH / NADPH阳性对照处理:将Jurkat细胞与100 µM NADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,然后与JZL1707 NAD(P)H Sensor工作溶液在37ºC共同孵育30分钟。分钟。有关详细信息,请参见图1。

3.用所需的缓冲液洗涤细胞一次。将细胞保存在测定缓冲液(组分B)中。

4.使用流式细胞仪监测PE通道的荧光强度。

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*紫色激光兼容**流式细胞术* 货号22321-AAT Bioquest荧光染料

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Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*紫色激光兼容**流式细胞术*

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*紫色激光兼容**流式细胞术*

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*紫色激光兼容**流式细胞术*    货号22321 货号 22321 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 0
Ex (nm) Em (nm)
分子量 N/A 溶剂
产品详细介绍

简要概述

检测细胞增殖是评估细胞活力、细胞周期和遗传毒性的最可靠的方法之一。 该试剂盒采用的是检测细胞增殖的一种基本方法,它是在细胞生长的S期过程中,在存在胸腺嘧啶核苷的情况下检测DNA的合成。 Bucculite 流式细胞术XdU细胞增殖测定试剂盒使用XdU,该XdU在DNA合成过程中被掺入细胞DNA中。 固定细胞后,将掺入的XdU用mFluor Violet 450叠氮化物标记。 在Pacific Blue通道中观察mFluor 紫罗兰色450标记的DNA。 Bucculite 流式细胞术XdU细胞增殖检测试剂盒是抗BrdU抗体的检测和EdU点击化学检测的的完美替代品。 它的灵敏度非常高,可用于在单细胞水平上检测活性DNA的合成。

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 405nm laser
发射: 450/40nm 滤波片组
通道: Pacific Blue通道

产品说明书

样品实验方案

概述

准备细胞
使用XdU工作溶液处理细胞3小时
固定细胞
透化细胞
用Bucculite 工作溶液处理细胞30分钟
在流式细胞仪中使用450/40 nm滤光片组观察荧光

 

溶液配制

1.储备溶液配制

1.1 XdU储备溶液(100X)
将XdU(组分A)溶于200 µL DMSO中制成XdU储备溶液。
注意:可以将剩余的XdU储备溶液以较小的等分试样在-20°C下存储。
注意:避免光线直射,并避免重复的冻融循环。

1.2mFluor 紫色450-叠氮化物储备溶液(200 X)
将mFluor 紫色450-叠氮化物(组分B)溶于100 µL DMSO中,制成mFluor 紫色450-叠氮化物储备溶液。
注意:可以将剩余的mFluor 紫色450叠氮化物储备溶液以较小的等分试样在-20°C下存储。
注意:避免光线直射,并避免重复的冻融循环。

1.3XdU反应添加剂储备溶液(20X)
将XdU反应添加剂(组分E)溶于1 mL去离子水中,制成XdU反应添加剂储备溶液。
注意:剩余的XdU反应添加剂储备溶液可以在-20°C下保存。

 

2.工作溶液配制

2.1XdU工作溶液配制
在1 mL细胞培养基中加入10 µL 100X XdU储备溶液,制成XdU工作溶液。
注意:1 mL的工作溶液足以进行5次检测。
注意:此100X浓度是使用优化的XdU浓度在HeLa和Jurkat细胞中测试的。 生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记。 我们建议检测一系列XdU浓度,以确定最佳浓度以及是否适合您的细胞等因素。

2.2Bucculite 工作溶液
按以下顺序混合并充分涡旋
①905 µL染色缓冲液(组分C)
②40 µL CuSO4(组分D)
③5 µL mFluor 紫色450叠氮化物储备溶液
④50 µL XdU反应添加剂储备溶液
注意:1 mL的Bucculite 工作溶液足以进行5次检测。

 

操作步骤

1.用XdU标记细胞
考虑到细胞在200 µL细胞培养基中,请向细胞中加入200 µL XdU工作溶液。
在适合细胞类型的最佳条件下,将细胞孵育3小时。 XdU在细胞中的时间可以直接检测细胞DNA的合成。 孵育时间取决于细胞生长速率。

 

2.细胞固定
孵育后,除去培养基,并用PBS洗涤细胞一次。
注意:清洗步骤后,如果使用贴壁细胞,请使用ReadiUse 细胞分离缓冲液(#60010)分离它们。
向每个试管中加入200 µL的固定缓冲液(含3.7%甲醛的PBS溶液,未提供),并在室温下孵育15-20分钟。
除去固定液,并用PBS清洗每个试管中的细胞两次。

 

3.细胞通透性处理
向每个试管中加入200 µL透化缓冲液(0.5%Triton®X-100的PBS溶液,未提供),并在室温下孵育10-20分钟。
除去通透缓冲液,并用PBS清洗每个试管中的细胞两次。

 

4.细胞染色
在试管中加入200 µL Bucculite 工作溶液。 在室温避光下,将Bucculite 工作溶液在室温下孵育细胞30分钟。
除去每个管中的Bucculite 工作溶液。
用PBS洗涤细胞两次,洗涤后加入200 µL PBS。
在流式细胞仪中使用450/40 nm滤光片观察细胞中的荧光信号。

 

图示

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*紫色激光兼容**流式细胞术*    货号22321

图1.用Buccutite XdU细胞增殖检测试剂盒(Cat#22321)检测到的S期Jurkat细胞的流式细胞仪中的反应。 将Jurkat细胞以50,000个细胞/孔/ 100μL的浓度接种在6孔黑色板上过夜。 按照说明书,将细胞在37℃下用XdU处理3小时,固定并透化。 然后将细胞在染色缓冲液中用mFluor 紫色450-叠氮化物染色30分钟,并用PBS洗涤3次。 使用Pacific Blue通道,通过NovoCyte流式细胞仪检测荧光响应。

说明书
Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*紫色激光兼容**流式细胞术*.pdf

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*蓝色激光兼容**流式细胞术* 货号22323-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*蓝色激光兼容**流式细胞术*

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*蓝色激光兼容**流式细胞术*

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*蓝色激光兼容**流式细胞术*    货号22323 货号 22323 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 6060
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

检测细胞增殖是评估细胞活力、细胞周期和遗传毒性的最可靠的方法之一。 该试剂盒采用的是检测细胞增殖的一种基本方法,它是在细胞生长的S期过程中,在存在胸腺嘧啶核苷的情况下检测DNA的合成。 Bucculite 流式细胞术XdU细胞增殖测定试剂盒使用XdU,该XdU在DNA合成过程中被掺入细胞DNA中。 固定细胞后,将掺入的XdU用iFluor 488叠氮化物标记。 在FITC通道中观察iFluor 488标记的DNA。 Bucculite 流式细胞术XdU细胞增殖检测试剂盒是抗BrdU抗体的检测和EdU点击化学检测的的完美替代品。 它的灵敏度非常高,可用于在单细胞水平上检测活性DNA的合成。

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 488nm laser
发射: 530/30nm 滤波片组
通道: FITC通道

产品说明书

样品实验方案

概述

准备细胞
使用XdU工作溶液处理细胞3小时
固定细胞
透化细胞
用Bucculite 工作溶液处理细胞30分钟
在流式细胞仪中使用530/30 nm滤光片组观察荧光

 

溶液配制

1.储备溶液配制

1.1 XdU储备溶液(100X)
将XdU(组分A)溶于200 µL DMSO中制成XdU储备溶液。
注意:可以将剩余的XdU储备溶液以较小的等分试样在-20°C下存储。
注意:避免光线直射,并避免重复的冻融循环。

1.2iFluor 488叠氮化物储备溶液(200 X)
将iFluor 488叠氮化物(组分B)溶于100 µL DMSO中,制成iFluor 488叠氮化物储备溶液。
注意:可以将剩余的iFluor 488叠氮化物储备溶液以较小的等分试样在-20°C下存储。
注意:避免光线直射,并避免重复的冻融循环。

1.3XdU反应添加剂储备溶液(20X)
将XdU反应添加剂(组分E)溶于1 mL去离子水中,制成XdU反应添加剂储备溶液。
注意:剩余的XdU反应添加剂储备溶液可以在-20°C下保存。

 

2.工作溶液配制

2.1XdU工作溶液配制
在1 mL细胞培养基中加入10 µL 100X XdU储备溶液,制成XdU工作溶液。
注意:1 mL的工作溶液足以进行5次检测。
注意:此100X浓度是使用优化的XdU浓度在HeLa和Jurkat细胞中测试的。 生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记。 我们建议检测一系列XdU浓度,以确定最佳浓度以及是否适合您的细胞等因素。

2.2Bucculite 工作溶液
按以下顺序混合并充分涡旋
①905 µL染色缓冲液(组分C)
②40 µL CuSO4(组分D)
③5 µL iFluor 488叠氮化物储备溶液
④50 µL XdU反应添加剂储备溶液
注意:1 mL的Bucculite 工作溶液足以进行5次检测。

 

操作步骤

1.用XdU标记细胞
考虑到细胞在200 µL细胞培养基中,请向细胞中加入200 µL XdU工作溶液。
在适合细胞类型的最佳条件下,将细胞孵育3小时。 XdU在细胞中的时间可以直接检测细胞DNA的合成。 孵育时间取决于细胞生长速率。

 

2.细胞固定
孵育后,除去培养基,并用PBS洗涤细胞一次。
注意:清洗步骤后,如果使用贴壁细胞,请使用ReadiUse 细胞分离缓冲液(#60010)分离它们。
向每个试管中加入200 µL的固定缓冲液(含3.7%甲醛的PBS溶液,未提供),并在室温下孵育15-20分钟。
除去固定液,并用PBS清洗每个试管中的细胞两次。

 

3.细胞通透性处理
向每个试管中加入200 µL透化缓冲液(0.5%Triton®X-100的PBS溶液,未提供),并在室温下孵育10-20分钟。
除去通透缓冲液,并用PBS清洗每个试管中的细胞两次。

 

4.细胞染色
在试管中加入200 µL Bucculite 工作溶液。 在室温避光下,将Bucculite 工作溶液在室温下孵育细胞30分钟。
除去每个管中的Bucculite 工作溶液。
用PBS洗涤细胞两次,洗涤后加入200 µL PBS。
在流式细胞仪中使用530/30 nm滤光片观察细胞中的荧光信号。

 

图示

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*蓝色激光兼容**流式细胞术*    货号22323

图1.用Buccutite XdU细胞增殖检测试剂盒(Cat#22323)检测到的S期Jurkat细胞的流式细胞仪中的反应。 将Jurkat细胞以50,000个细胞/孔/ 100μL的浓度接种在6孔黑色板上过夜。 按照说明书,将细胞在37℃下用XdU处理3小时,固定并透化。 然后将细胞在染色缓冲液中用iFluor 488叠氮化物染色30分钟,并用PBS洗涤3次。 使用FITC通道,通过NovoCyte流式细胞仪检测荧光响应。

说明书
Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*蓝色激光兼容**流式细胞术*.pdf

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*红色荧光兼容**流式细胞术* 货号22325-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*红色荧光兼容**流式细胞术*

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*红色荧光兼容**流式细胞术*

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*红色荧光兼容**流式细胞术*    货号22325 货号 22325 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 6060
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

检测细胞增殖是评估细胞活力、细胞周期和遗传毒性的最可靠的方法之一。 该试剂盒采用的是检测细胞增殖的一种基本方法,它是在细胞生长的S期过程中,在存在胸腺嘧啶核苷的情况下检测DNA的合成。 Bucculite 流式细胞术XdU细胞增殖测定试剂盒使用XdU,该XdU在DNA合成过程中被掺入细胞DNA中。 固定细胞后,将掺入的XdU用iFluor 647叠氮化物标记。 在APC通道中观察iFluor 647标记的DNA。 Bucculite 流式细胞术XdU细胞增殖检测试剂盒是抗BrdU抗体的检测和EdU点击化学检测的的完美替代品。 它的灵敏度非常高,可用于在单细胞水平上检测活性DNA的合成。

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 633/640nm laser
发射: 660/20nm 滤波片组
通道: APC通道

产品说明书

样品实验方案

概述

准备细胞
使用XdU工作溶液处理细胞3小时
固定细胞
透化细胞
用Bucculite 工作溶液处理细胞30分钟
在流式细胞仪中使用660/20 nm滤光片组观察荧光

 

溶液配制

1.储备溶液配制

1.1 XdU储备溶液(100X)
将XdU(组分A)溶于200 µL DMSO中制成XdU储备溶液。
注意:可以将剩余的XdU储备溶液以较小的等分试样在-20°C下存储。
注意:避免光线直射,并避免重复的冻融循环。

1.2iFluor 647叠氮化物储备溶液(200 X)
将iFluor 647叠氮化物(组分B)溶于100 µL DMSO中,制成iFluor 647叠氮化物储备溶液。
注意:可以将剩余的iFluor 647叠氮化物储备溶液以较小的等分试样在-20°C下存储。
注意:避免光线直射,并避免重复的冻融循环。

1.3XdU反应添加剂储备溶液(20X)
将XdU反应添加剂(组分E)溶于1 mL去离子水中,制成XdU反应添加剂储备溶液。
注意:剩余的XdU反应添加剂储备溶液可以在-20°C下保存。

 

2.工作溶液配制

2.1XdU工作溶液配制
在1 mL细胞培养基中加入10 µL 100X XdU储备溶液,制成XdU工作溶液。
注意:1 mL的工作溶液足以进行5次检测。
注意:此100X浓度是使用优化的XdU浓度在HeLa和Jurkat细胞中测试的。 生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记。 我们建议检测一系列XdU浓度,以确定最佳浓度以及是否适合您的细胞等因素。

2.2Bucculite 工作溶液
按以下顺序混合并充分涡旋
①905 µL染色缓冲液(组分C)
②40 µL CuSO4(组分D)
③5 µL iFluor 647叠氮化物储备溶液
④50 µL XdU反应添加剂储备溶液
注意:1 mL的Bucculite 工作溶液足以进行5次检测。

 

操作步骤

1.用XdU标记细胞
考虑到细胞在200 µL细胞培养基中,请向细胞中加入200 µL XdU工作溶液。
在适合细胞类型的最佳条件下,将细胞孵育3小时。 XdU在细胞中的时间可以直接检测细胞DNA的合成。 孵育时间取决于细胞生长速率。

 

2.细胞固定
孵育后,除去培养基,并用PBS洗涤细胞一次。
注意:清洗步骤后,如果使用贴壁细胞,请使用ReadiUse 细胞分离缓冲液(#60010)分离它们。
向每个试管中加入200 µL的固定缓冲液(含3.7%甲醛的PBS溶液,未提供),并在室温下孵育15-20分钟。
除去固定液,并用PBS清洗每个试管中的细胞两次。

 

3.细胞通透性处理
向每个试管中加入200 µL透化缓冲液(0.5%Triton®X-100的PBS溶液,未提供),并在室温下孵育10-20分钟。
除去通透缓冲液,并用PBS清洗每个试管中的细胞两次。

 

4.细胞染色
在试管中加入200 µL Bucculite 工作溶液。 在室温避光下,将Bucculite 工作溶液在室温下孵育细胞30分钟。
除去每个管中的Bucculite 工作溶液。
用PBS洗涤细胞两次,洗涤后加入200 µL PBS。
在流式细胞仪中使用660/20 nm滤光片观察细胞中的荧光信号。

 

图示

Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*红色荧光兼容**流式细胞术*    货号22325

图1.用Buccutite XdU细胞增殖检测试剂盒(Cat#22325)检测到的S期Jurkat细胞的流式细胞仪中的反应。 将Jurkat细胞以50,000个细胞/孔/ 100μL的浓度接种在6孔黑色板上过夜。 按照说明书,将细胞在37℃下用XdU处理3小时,固定并透化。 然后将细胞在染色缓冲液中用iFluor 647叠氮化物染色30分钟,并用PBS洗涤3次。 使用APC通道,通过NovoCyte流式细胞仪检测荧光响应。

说明书
Bucculite XdU细胞增殖检测试剂盒*红色荧光兼容**流式细胞术*.pdf

CytoWatch 多路复用缓冲液*流式细胞仪* *100X * 货号37010-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

CytoWatch 多路复用缓冲液*流式细胞仪* *100X *

CytoWatch 多路复用缓冲液*流式细胞仪* *100X *

货号 37010 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 924
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:37010

产品名称:CytoWatch 多路复用缓冲液*流式细胞仪* *100X *

规格:100 Tests

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

外观:液体

溶剂:水

 

产品介绍

荧光抗体缀合物在紧密接触时趋于聚集,由于FRET和不同缀合物之间的其他能量转移现象,扭曲了多色染色细胞的分析结果,使荧光染料相互作用会导致染色伪影,从而让数据复杂化。 CytoWatch 多路复用缓冲液是为细胞的多色流式细胞分析而研发的缓冲液。 CytoWatch多路复用缓冲液是一种浓缩溶液,可在染色细胞之前直接添加到某些荧光抗体缀合物或其他荧光试剂的染色溶液中。 它可用于增强或改进利用两种或更多种不同染色试剂(例如,与BV染料或Qdot缀合的抗体)的多色流式细胞术实验。

 

参考文献

Adsorption of Remazol Brilliant Violet-5R Textile Dye from Aqueous Solutions by Using Eggshell Waste Biosorbent.
Authors: Rápó, Eszter and Aradi, László Előd and Szabó, Ábel and Posta, Katalin and Szép, Robert and Tonk, Szende
Journal: Scientific reports (2020): 8385

Azo dyes decolorization under high alkalinity and salinity conditions by Halomonas sp. in batch and packed bed reactor.
Authors: Montañez-Barragán, B and Sanz-Martín, J L and Gutiérrez-Macías, P and Morato-Cerro, A and Rodríguez-Vázquez, R and Barragán-Huerta, B E
Journal: Extremophiles : life under extreme conditions (2020): 239-247

Process optimization and filtration performance of an anaerobic dynamic membrane bioreactor treating textile wastewaters.
Authors: Yurtsever, Adem and Basaran, Erkan and Ucar, Deniz
Journal: Journal of environmental management (2020): 111114

Adsorptive Removal of Remazol Brilliant Violet-5R Dye from Aqueous Solutions using Calcined Eggshell as Biosorbent.
Authors: Rápó, Eszter and Posta, Katalin and Suciu, Maria and Szép, Robert and Tonk, Szende
Journal: Acta chimica Slovenica (2019): 648-658

Diet-induced microbial autofluorescence confounds flow cytometry of ex vivo isolated fecal microbes.
Authors: Denu, Lidiya and Lubin, Jean-Bernard and Douglas, Bonnie and Tuluc, Florin and Silverman, Michael A
Journal: European journal of immunology (2019): 2252-2254

Fluorochrome choices for multi-color flow cytometry.
Authors: Flores-Montero, Juan and Kalina, Tomas and Corral-Mateos, Alba and Sanoja-Flores, Luzalba and Pérez-Andrés, Martin and Martin-Ayuso, Marta and Sedek, Lukasz and Rejlova, Katerina and Mayado, Andrea and Fernández, Paula and van der Velden, Vincent and Bottcher, Sebastian and van Dongen, Jaques J M and Orfao, Alberto
Journal: Journal of immunological methods (2019): 112618

Remediation of complex remazol effluent using biochar derived from green seaweed biomass.
Authors: Gokulan, Ravindiran and Prabhu, Ganapathy Ganesh and Jegan, Josephraj
Journal: International journal of phytoremediation (2019): 1179-1189

Simultaneous Polychromatic Immunofluorescent Staining of Tissue Sections and Consecutive Imaging of up to Seven Parameters by Standard Confocal Microscopy.
Authors: Schmidt, Alfonso J and Mayer, Johannes U and Wallace, Paul K and Ronchese, Franca and Price, Kylie M
Journal: Current protocols in cytometry (2019): e64

A protocol for generating induced T cells by reprogramming B cells in vivo.
Authors: Weng, Qitong and Hu, Fangxiao and Zhang, Mengyun and Dong, Yong and Lv, Cui and Wang, Ying and Liu, Xiaofei and Wang, Jinyong
Journal: Cell regeneration (London, England) (2018): 7-15

Adsorption of basic and reactive dyes from aqueous solution onto Intsia bijuga sawdust-based activated carbon: batch and column study.
Authors: Khasri, Azduwin and Ahmad, Mohd Azmier
Journal: Environmental science and pollution research international (2018): 31508-31519

说明书
CytoWatch 多路复用缓冲液*流式细胞仪* *100X *.pdf

CytoWatch 多路复用缓冲液*流式细胞仪* *100X * 货号37011-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

CytoWatch 多路复用缓冲液*流式细胞仪* *100X *

CytoWatch 多路复用缓冲液*流式细胞仪* *100X *

货号 37011 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1000 Tests 价格 3612
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:37011

产品名称:CytoWatch 多路复用缓冲液*流式细胞仪* *100X *

规格:1000 Tests

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

外观:液体

溶剂:水

 

产品介绍

荧光抗体缀合物在紧密接触时趋于聚集,由于FRET和不同缀合物之间的其他能量转移现象,扭曲了多色染色细胞的分析结果,使荧光染料相互作用会导致染色伪影,从而让数据复杂化。 CytoWatch 多路复用缓冲液是为细胞的多色流式细胞分析而研发的缓冲液。 CytoWatch多路复用缓冲液是一种浓缩溶液,可在染色细胞之前直接添加到某些荧光抗体缀合物或其他荧光试剂的染色溶液中。 它可用于增强或改进利用两种或更多种不同染色试剂(例如,与BV染料或Qdot缀合的抗体)的多色流式细胞术实验。

 

参考文献

Adsorption of Remazol Brilliant Violet-5R Textile Dye from Aqueous Solutions by Using Eggshell Waste Biosorbent.
Authors: Rápó, Eszter and Aradi, László Előd and Szabó, Ábel and Posta, Katalin and Szép, Robert and Tonk, Szende
Journal: Scientific reports (2020): 8385

Azo dyes decolorization under high alkalinity and salinity conditions by Halomonas sp. in batch and packed bed reactor.
Authors: Montañez-Barragán, B and Sanz-Martín, J L and Gutiérrez-Macías, P and Morato-Cerro, A and Rodríguez-Vázquez, R and Barragán-Huerta, B E
Journal: Extremophiles : life under extreme conditions (2020): 239-247

Process optimization and filtration performance of an anaerobic dynamic membrane bioreactor treating textile wastewaters.
Authors: Yurtsever, Adem and Basaran, Erkan and Ucar, Deniz
Journal: Journal of environmental management (2020): 111114

Adsorptive Removal of Remazol Brilliant Violet-5R Dye from Aqueous Solutions using Calcined Eggshell as Biosorbent.
Authors: Rápó, Eszter and Posta, Katalin and Suciu, Maria and Szép, Robert and Tonk, Szende
Journal: Acta chimica Slovenica (2019): 648-658

Diet-induced microbial autofluorescence confounds flow cytometry of ex vivo isolated fecal microbes.
Authors: Denu, Lidiya and Lubin, Jean-Bernard and Douglas, Bonnie and Tuluc, Florin and Silverman, Michael A
Journal: European journal of immunology (2019): 2252-2254

Fluorochrome choices for multi-color flow cytometry.
Authors: Flores-Montero, Juan and Kalina, Tomas and Corral-Mateos, Alba and Sanoja-Flores, Luzalba and Pérez-Andrés, Martin and Martin-Ayuso, Marta and Sedek, Lukasz and Rejlova, Katerina and Mayado, Andrea and Fernández, Paula and van der Velden, Vincent and Bottcher, Sebastian and van Dongen, Jaques J M and Orfao, Alberto
Journal: Journal of immunological methods (2019): 112618

Remediation of complex remazol effluent using biochar derived from green seaweed biomass.
Authors: Gokulan, Ravindiran and Prabhu, Ganapathy Ganesh and Jegan, Josephraj
Journal: International journal of phytoremediation (2019): 1179-1189

Simultaneous Polychromatic Immunofluorescent Staining of Tissue Sections and Consecutive Imaging of up to Seven Parameters by Standard Confocal Microscopy.
Authors: Schmidt, Alfonso J and Mayer, Johannes U and Wallace, Paul K and Ronchese, Franca and Price, Kylie M
Journal: Current protocols in cytometry (2019): e64

A protocol for generating induced T cells by reprogramming B cells in vivo.
Authors: Weng, Qitong and Hu, Fangxiao and Zhang, Mengyun and Dong, Yong and Lv, Cui and Wang, Ying and Liu, Xiaofei and Wang, Jinyong
Journal: Cell regeneration (London, England) (2018): 7-15

Adsorption of basic and reactive dyes from aqueous solution onto Intsia bijuga sawdust-based activated carbon: batch and column study.
Authors: Khasri, Azduwin and Ahmad, Mohd Azmier
Journal: Environmental science and pollution research international (2018): 31508-31519

说明书
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线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测 货号22804-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
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线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测 货号22804
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
200 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测

线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测 货号22804

简要概述

        Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于线粒体膜电位检测的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter线粒体膜电位检测试剂盒 *橙色荧光 适合流式细胞检测* 专门通过检测线粒体跨膜电势的减少来检测细胞凋亡。线粒体跨膜电势瓦解与线粒体渗透转运孔的开放相一致,导致细胞色素C释放到胞浆中,它是下游凋亡级联反应的触发器。该荧光实验方案利用我们独有的MitoLite Orange来检测凋亡细胞中线粒体跨膜电势的减少。在正常细胞中,当MitoLite Orange积聚于线粒体时,红色荧光增加。然而在凋亡细胞中,MitoLite Orange随着线粒体跨膜电位的塌陷而减少。被MitoLite Orange染色的细胞可以通过488n的激发光(FL2 通道)来观察。该试剂盒可以与其它Cell Meter检测试剂盒同时检测细胞的活性和凋亡,该试剂盒已被优化,可用于流式细胞法筛选凋亡激活剂或抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用密度为5×105到1×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞
2.将2μL500XMitoTell Orange加入1 mL细胞溶液中
3.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育15-30分钟
4.将细胞沉淀,并将细胞重悬于1mL生长培养基中
5.使用具有FL2通道的流式细胞仪分析细胞

操作步骤

1.对于每个样品,将细胞制备在1 mL温热培养基或您选择的缓冲液中,密度为5×105至1×106个细胞/ mL。注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段所需的时间以诱导细胞凋亡,并建立平行对照实验。

3.对于阴性对照:仅用载体处理细胞。

4.对于阳性对照:使用FCCP或CCCP以5-50μM在37℃,5%CO2培养箱中处理细胞15至30分钟。注意:CCCP或FCCP可与MitoTell Orange同时添加。为了获佳结果,可能需要对每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。

5.将2μL500XMitoTell 橙(组分A)加入处理过的细胞中。

6.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育15至30分钟。注意:对于粘附细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用MitoTell Orange染料加载溶液孵育之前用含有血清的培养基洗涤细胞一次。

7.将细胞以1000rpm离心4分钟,然后将细胞重悬于1mL的分析缓冲液(组分B)或您选择的缓冲液中。

8.使用具有FL2通道(Ex / Em = 540 / 590nm)的流式细胞仪监测荧光强度。

数据分析

线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测 货号22804

图1.在Jurkat细胞中添加FCCP后MitoTell Orange的荧光强度降低。 将Jurkat细胞单独加载MitoTell Orange(蓝色)或在30μMFCCP(红色)存在下加载15分钟。 使用FL2通道,用FACSCalibur(Becton Dickinson,San Jose,CA)流式细胞仪测量MitoTell Orange的荧光强度。

Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测 货号22824-AAT Bioquest荧光染料

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Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测 货号22824
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1kit
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测

Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测 货号22824

简要概述

        Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞凋亡检测试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测 通过对磷脂酰丝氨酸(PS)进行检测,而实现细胞凋亡的检测。在凋亡细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)从胞内移位到胞外表面,因此PS出现在细胞的外表面可以作为细胞凋亡的起始或者中间阶段的通用指示器,也可以通过其形态学改变来测定。该试剂盒采用独有的绿色荧光染料(FITC的优越替代物,使用FITC通道检测)标记的Annexin V检测凋亡细胞,同时包含PI红色荧光染料用于对坏死细胞进行染色。试剂盒内组分经过特别优化,尤其适合于流式细胞分析。目前商业化各种Annexin V凋亡检测试剂盒一般是将Annexin V进行传统的荧光团(FITC、Cy3)标记后作为荧光探针,通过检测细胞凋亡早期细胞膜外翻的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS),从而实现对细胞凋亡的检测。然而目前的检测受到荧光颜色、荧光强度和检测灵敏度等因素的限制。Cell Meter Annexin V Binding Apoptosis Assay Kit系列产品分别采用了mFluor Violet和iFluor荧光染料,这种染料比传统的FITC、Cy3等具有更高的荧光强度、更低的荧光背景和更 的光稳定性,因此检测效果更灵敏稳定;而iFluor系列染料在保证上述优势的同时,均在405nm处激发,尤其适合用于多色分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。

点击查看光谱 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

用测试化合物(200μL/样品)制备细胞
添加Annexin V-iFluor 488原液
在室温下孵育30-60分钟
使用FL1通道的流式细胞仪分析细胞(Ex / Em = 490/525 nm)

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段时间(用喜树碱处理的Jurkat细胞4-6小时)以诱导细胞凋亡。注意:膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测,因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而,Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。和van Engelend等人。

2.离心细胞,得到1-5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液(组分B)中。

4.将2μL膜联蛋白V-iFluor 488(组分A)加入细胞中。

5.可选:加入2μL100X碘化丙啶(成分C)用于坏死细胞。

6.在室温下孵育30至60分钟,避光。

7.可选:在使用流式细胞仪分析细胞之前,添加200至300μL的测定缓冲液(组分B)以增加体积。

8.使用具有FL1通道的流式细胞仪(Ex / Em = 490 / 525nm)监测膜联蛋白V-iFluor 488的荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时,使用FL2通道测量细胞活力。

数据分析

        在活的非凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 488检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡,其通常为所有细胞的2-6%。 在凋亡细胞中,膜联蛋白V-iFluor 488与磷脂酰丝氨酸结合,磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上,因此导致染色强度增加。

Annexin V凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合流式细胞检测 货号22824

图1.检测膜联蛋白V-iFluor 488和磷脂酰丝氨酸在Jurkat细胞中的结合活性。 Jurkat细胞在37℃,5%CO2培养箱中不用(蓝色)或用20μM喜树碱(红色)处理4-5小时,然后用Annexin V-iFluor 488染色30分钟。 使用FL1通道用FACSCalibur(Becton Dickinson)流式细胞仪测量膜联蛋白V-iFluor 488的荧光强度。

线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22806-AAT Bioquest荧光染料

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线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22806
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测

线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测 货号22806

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞功能的工具。可以使用多种参数。该特定试剂盒旨在通过测量线粒体膜电位(MMP)的丢失来检测细胞凋亡。线粒体膜电位的凋亡与线粒体通透性过渡孔的开放相吻合,导致细胞色素C释放到细胞质中,进而触发凋亡级联反应中的其他下游事件。该荧光测定法使用我们专有的阳离子MitoLite red检测细胞中线粒体膜电位的变化。在正常细胞中,当线粒体中积累了MitoLite red时,红色荧光强度会增加。但是,在凋亡细胞中,MMP凋亡后,MitoLite red的荧光强度降低。可以对用MitoLite red染色的细胞进行荧光检测。我们的Cell Meter 红色线粒体膜电位测定试剂盒可通过优化的测定方法提供所有必需成分。该试剂盒可用于筛选凋亡激活剂和抑制剂。该试剂盒可以使用流式细胞仪在APC或Cy5通道上观察用MitoTell Red染色的细胞。该试剂盒经过优化,可通过流式细胞仪筛选凋亡激活剂和抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞

  2. 在0.5 mL细胞溶液中加入1 µL 500X MitoTell Red

  3. 将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育15-30分钟

  4. 沉淀细胞,然后将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液中

  5. 使用带有APC或Cy5通道的流式细胞仪分析细胞

实验步骤

1.对于每个样品,在0.5 mL温暖的培细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段时间,以诱导细胞凋亡,并建立平行对照实验。注意:我们在37ºC下用20µM CCCP处理Jurkat细胞15分钟,以改变线粒体膜电位。CCCP或FCCP可以与MitoTell Red同时添加。为了获得结果,可能需要为每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。

3.向处理过的细胞中加入1 µL 500X MitoTell Red(组分A)。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育15至30分钟。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与MitoTell Red孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

5.以800 rpm的速度离心细胞4分钟,然后将细胞重悬于0.5 mL的测定缓冲液(组分B)或自备的缓冲液中。

6.使用流式细胞仪通过APC或Cy5通道检测荧光强度。

细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪近红外检测 货号16360-AAT Bioquest荧光染料

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细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪近红外检测 货号16360
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪近红外检测

细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪近红外检测 货号16360

简要概述

        Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒 适合于酶标仪橙色检测 是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞内一氧化氮活性的试剂盒,一氧化氮(NO)是涉及许多生理和病理过程的重要生物调节剂。 改变的NO产生涉及各种免疫,心血管,神经变性和炎性疾病。 作为自由基,NO被快速氧化,并且体内存在相对低浓度的NO。 检测和了解NO在生物系统中的作用一直具有挑战性。 Cell Meter 荧光细胞内一氧化氮检测试剂盒提供了一种监测活细胞内细胞内NO水平的敏感工具。

        Nitrixyte 探针在我们的试剂盒中开发和使用,作为DAF-2的优异替代品,用于检测和成像细胞中的游离NO。 与常用的DAF-2探针相比,Nitrixyte 探针具有更好的光稳定性和增强的细胞渗透性。 该特殊试剂盒使用Nitrixyte Orange,可与NO反应生成亮橙色荧光产品,其光谱特性与Cy3®和TRITC相似。Nitrixyte Orange可以很容易地加载到活细胞中,使用Cy3®或TRITC过滤器可以方便地监测其荧光信号。该试剂盒针对荧光成像和酶标仪应用进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内一氧化氮(NO)活性检测试剂盒。 

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产品说明书

样本实验方案

概述

1.准备细胞(0.5-1×106细胞/ mL)
2.加入1 µL 500X Nitrixyte NIR
3.将细胞与测试化合物和Nitrixyte NIR在37ºC下孵育所需的时间
4.使用APC通道通过流式细胞仪分析细胞

溶液配制

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 NONOate阳性对照治疗储备液(50 mM):
将200 uL ddH2O加入小瓶NONOate阳性对照(组分B)中,制成50 mM NONOacte阳性对照处理原液。

2.工作溶液

用测定缓冲液(组分C)稀释50 mM NONOate阳性对照治疗原液,制成1-2 mM NONOate阳性对照工作溶液。

点击查看细胞制备方案

样品操作及实验分析

1.对于每个样品,在0.5 mL温热培养基或您选择的缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定诱导NO的细胞密度。

2.将1 µL 500X Nitrixyte NIR(组分A)加入0.5 mL细胞悬液中。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用Nitrixyte NIR孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

3.将细胞与测试化合物和Nitrixyte NIR在37ºC下孵育所需的时间,以生成内源性或外源性NO。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物。优化每个实验的孵育时间。注意:我们已在37°C的细胞培养基中将Raw 264.7细胞与Nitrixyte NIR工作溶液,20 µg / mL脂多糖(LPS)和1 mM L-精氨酸(L-Arg)孵育16小时。

4.旋转已用Nitrixyte NIR预孵育30分钟的细胞。用1 mM DEA NONOate阳性对照工作溶液重悬细胞,并在37ºC下再孵育30分钟。有关详细信息,请参见图1。

5.使用流式细胞仪监测APC通道(Ex / Em = 640/675 nm)的荧光强度。

细胞内NO活性检测试剂盒 适合于流式细胞仪近红外检测 货号16360

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪 货号11505-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪 货号11505
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
检测过氧化氢的试剂盒
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪

3192Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪 货号11505

货号 11505 存储条件 F/L
规格 100 Tests
Ex (nm) 405 Em (nm) 450
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

        Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多与动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具,并且它被优化用于流式细胞术。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测 货号22821-AAT Bioquest荧光染料

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通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测 货号22821
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测

通用Caspase活性荧光法检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测 货号22821

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量活细胞中的通用胱天蛋白酶(胱天蛋白酶-1,-3,-4,-5,-6,-7,-8和-9)激活来检测细胞凋亡。胱天蛋白酶激活被广泛认为是细胞凋亡的可靠指标。大多数胱天蛋白酶具有对肽序列Val-Ala-Asp(VAD)的底物选择性。该试剂盒使用TF2-VAD-FMK作为大多数半胱天冬酶活性的荧光指示剂。TF2-VAD-FMK是细胞渗透性的,无毒的,并且与凋亡细胞中活化的casepase-1,-3,-4,-5,-6,-7,-8和-9不可逆地结合。一旦与胱天蛋白酶结合,绿色荧光试剂将保留在细胞内。结合后阻止了胱天蛋白酶的进一步催化,但不会阻止凋亡的进行。添加到培养基中后的15分钟内,该试剂将开始与活性caspase酶反应。该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。它用于定量凋亡细胞中大多数激活的胱天蛋白酶活性,或筛选胱天蛋白酶抑制剂。绿色荧光标记允许通过流式细胞仪直接检测凋亡细胞中激活的胱天蛋白酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 通用Caspase活性荧光法检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞

  2. 将0.5 µL细胞溶液中加入1 µL 500X TF2-VAD-FMK

  3. 将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-4小时

  4. 沉淀细胞并将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液或生长培养基中

  5. 使用带有530/30 nm滤光片(FITC通道)的流式细胞仪分析细胞

实验步骤

1.对于每个样品,在0.5 mL温热培养基或自备缓冲液中以5×105至1×106cell/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段时间,以诱导细胞凋亡,并建立阳性和阴性对照。

3.向处理过的细胞中加入1µL 500X TF2-VAD-FMK(组分A)。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育1-4小时。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在与TF2-VAD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

5.洗涤并旋转细胞两次。将细胞重悬于0.5 mL分析缓冲液(组分B)或生长培养基中。注意:TF2-VAD-FMK是荧光的;因此,重要的是洗净任何未结合的试剂以除去背景。

6.可选:可以用DNA染色剂标记细胞(例如碘化丙啶或死细胞的7-AAD)。

7.可选:修复细胞。

8.使用带有530/30 nm滤光片的流式细胞仪(FITC通道)检测荧光强度。