Cell Meter 细胞活性检测试剂盒（活细胞/死细胞） *绿色/红色双重荧光*

	货号	22789	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	492	Em (nm)	515
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞活性检测试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter细胞活力检测试剂盒 *绿色/红色双重荧光* 使用两种非荧光性指示剂：Calcein AM，用于活细胞；一种非细胞渗透性的DNA结合染料，用于细胞膜不完整的死细胞。Calcein AM是一种疏水性复合物，可以轻易地渗透进入完整的活细胞，通过酯酶的水解作用，产生强烈的荧光。通过细胞内酯酶水解非荧光性Calcein AM，形成具有强烈荧光的亲水性Calcein，并且保留在细胞质中。这种酯酶的活性与活细胞数量成比例关系。DNA结合染料极性非常大，不能渗透进入具有完整细胞膜的活细胞，它只有在与死细胞的DNA结合的情况下才发出荧光。生长在培养板中的细胞可以被染料，且在不到两小时内就可以完成定量分析。本检测法比其它活细胞检测法更加强大、稳定。它可以用于许多荧光实验平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。本试剂盒提供所有必需组分和最佳检测方案。它适合于增殖型和非增殖型细胞，也可用于悬浮和贴壁细胞。96微孔板中，每孔用试剂100ul，本试剂盒提供的试剂足以进行100次检测；384微孔板中，每孔加试剂25ul，本试剂盒提供的试剂足以进行400次检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞活性检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞
2.加入相同体积的CytoCalcein Green / Propidium Iodide染料加工溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温或37°C孵育1小时
4.在强度下监测荧光（底部读取模式）Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）和540 / 620nm（截止= 590nm），带有FITC滤光片（细胞存活）的荧光显微镜和TRITC滤光片 （细胞死亡），或FL1和FL2通道的流式细胞仪。

溶液配制

1.储存溶液配制

        除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
CytoCalcein 绿色原液：
将20μLDMSO（组分C）加入到CytoCalcein Green（组分A）的小瓶中并充分混合以制备CytoCalcein Green原液。 避光。 注意：20μL的CytoCalcein Green原液足以用于一个平板。 存放时，密封管。

2.工作溶液配制

将全部内容物（20μL）的CytoCalcein Green储备溶液和20μL碘化丙啶（组分B）加入10mL测定缓冲液（组分C）中并充分混合以制备CytoCalcein Green /碘化丙锭染料 – 工作溶液。 CytoCalcein Green / Propidium Iodide染料加工溶液在室温下稳定至少2小时。 注意：如果CHO细胞等细胞含有导致荧光染料随时间泄漏的有机阴离子转运蛋白，应制备丙磺舒储备溶液，并加入到加样缓冲液中，最终孔内工作浓度范围为1到2.5 mM。 未使用的丙磺舒储备溶液可以在≤-20℃下储存。 由于最佳染色条件可能因细胞类型的不同而异，因此建议单独确定组分A和B的适当浓度。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.用酶标仪或荧光显微镜进行细胞活力测定：

1.1根据需要用测试化合物处理细胞。注意：在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后加入100μL/孔/ 96孔板和25μL/孔/ 384孔板的1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。

1.2加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的CytoCalcein TM Green / Propidium Iodide染料加工溶液。

1.3将板在室温或37°C孵育30分钟至1小时，避光。 （孵育时间可以从15分钟到过夜。我们得到了最佳结果，孵育时间少于4小时）。注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。装载后请勿清洗细胞。对于非粘附细胞，建议在孵育后以800rpm离心细胞板2分钟，然后关闭制动器。

1.4使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）和Ex / Em = 540 / 620nm（截止= 590nm，细胞死亡）或荧光下监测荧光强度用于活细胞的FITC过滤器或用于死细胞的TRITC过滤器的显微镜。

2.使用流式细胞仪进行细胞活力测定：

2.1用测试化合物处理细胞一段所需的时间。

2.1离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

2.3将细胞重悬于500μL的CytoCalcein™Green / Propidium Iodide染料加工溶液中。

2.4在室温或37°C孵育10至30分钟，避光。

可选：用HHBS或您选择的缓冲液清洗细胞。 将细胞重悬于500μLHHBS中，每管加入1-5×10⁵个细胞。

2.5用流式细胞仪在Ex / Em = 490 / 525nm和Ex / Em = 490 / 620nm（FL1和FL2通道）下监测荧光强度。

数据分析

参考文献

Effect of copper nanoparticles on physico-chemical properties of chitosan and gelatin-based scaffold developed for skin tissue engineering application
Authors: Shikha Kumari, Bhisham Narayan Singh, Pradeep Srivastava
Journal: 3 Biotech (2019): 102

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610

NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1–8

Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88

Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1–8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287

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Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

	货号	22798	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	500	Em (nm)	522
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白，CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中，例如亨廷顿综合症，caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性，其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2-R110作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割R110肽产生强绿色荧光，其发射光在520 nm和530 nm之间，激发光为480 nm和500 nm之间。这种特性使得试剂盒能适合于FITC滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和最佳操作流程。该实验结果稳定，快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加（截止= 515 nm）

工作溶液配制

将50μLCaspase8底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意：Caspasae 8工作液不稳定，请及时使用。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间（对于用喜树碱或星形孢菌素处理的Jurkat细胞，4-6小时）以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 8工作溶液。

4.将板在室温下孵育30分钟至1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂，以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.以800rpm离心细胞板（特别是对于非贴壁细胞）2分钟（制动关闭）。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）下监测荧光增加。

数据分析

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

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Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

	货号	22799	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	500	Em (nm)	522
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 9的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 9是CED-3亚家族中的一员。活化的Caspase 9能切割下游caspases,例如caspase-3,-6和-7，起始caspase级联反应。在正常发育的中枢神经系统中，活化的Caspase 9是凋亡所必需的。Caspase 9已证明具有底物的选择性，其基序为Leu-Glu-His-Asp (LEHD)。本试剂盒利用(Ac-IETD)2-R110作为荧光指示器来检测caspas-9的活性。通过caspas-9的切割R110肽产生强绿色荧光，其发射光在520 nm和530 nm之间，激发光为480 nm和500 nm·之间。本试剂盒提供所有必需组分和最佳操作流程。该实验结果稳定，快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-9的活性还能筛选caspas-9的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞
2.加入等体积的Caspase 9工作溶液
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.在Ex / Em = 490 / 525nm处监测荧光

工作溶液配制

将50μLCaspase9底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。 对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的半胱天冬酶9工作溶液。

4.将工作溶液板在室温下孵育至少1小时，避光。 注意：如果需要，在室温下加入测定加样溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-LEHD-CHO caspase 9抑制剂，以确认对caspase 9样活性的抑制。

5.将细胞板（特别是非贴壁细胞）以800rpm离心2分钟（关闭制动器）。

6.监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

数据分析

参考文献

Discovery of 1-benzoyl-3-cyanopyrrolo[1,2-a]quinolines as a new series of apoptosis inducers using a cell- and caspase-based high-throughput screening assay. 2: Structure-activity relationships of the 4-, 5-, 6-, 7- and 8-positions
Authors: Kemnitzer W, Kuemmerle J, Jiang S, Sirisoma N, Kasibhatla S, Crogan-Grundy C, Tseng B, Drewe J, Cai SX.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2009): 3481

Discovery of substituted N’-(2-oxoindolin-3-ylidene)benzohydrazides as new apoptosis inducers using a cell- and caspase-based HTS assay
Authors: Sirisoma N, Pervin A, Drewe J, Tseng B, Cai SX.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2009): 2710

Selective identification of cooperatively binding fragments in a high-throughput ligation assay enables development of a picomolar caspase-3 inhibitor
Authors: Schmidt MF, El-Dahshan A, Keller S, Rademann J.
Journal: Angew Chem Int Ed Engl (2009): 6346

A dual-step fluorescence resonance energy transfer-based quenching assay for screening of caspase-3 inhibitors
Authors: Valanne A, Malmi P, Appelblom H, Niemela P, Soukka T.
Journal: Anal Biochem (2008): 71

Discovery of (naphthalen-4-yl)(phenyl)methanones and N-methyl-N-phenylnaphthalen-1-amines as new apoptosis inducers using a cell- and caspase-based HTS assay
Authors: Jiang S, Crogan-Grundy C, Drewe J, Tseng B, Cai SX.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2008): 5725

Discovery of 4-aryl-4H-chromenes as a new series of apoptosis inducers using a cell- and caspase-based high throughput screening assay. 4. Structure-activity relationships of N-alkyl substituted pyrrole fused at the 7,8-positions
Authors: Kemnitzer W, Drewe J, Jiang S, Zhang H, Crogan-Grundy C, Labreque D, Bubenick M, Attardo G, Denis R, Lamothe S, Gourdeau H, Tseng B, Kasibhatla S, Cai SX.
Journal: J Med Chem (2008): 417

Liver apoptosis following normothermic ischemia-reperfusion: in vivo evaluation of caspase activity by FLIVO assay in rats
Authors: Cursio R, Colosetti P, Auberger P, Gugenheim J.
Journal: Transplant Proc (2008): 2038

Modified caspase-3 assay indicates correlation of caspase-3 activity with immunity of nonhuman primates to Yersinia pestis infection
Authors: Welkos S, Norris S, Adamovicz J.
Journal: Clin Vaccine Immunol (2008): 1134

Discovery of 4-aryl-4H-chromenes as a new series of apoptosis inducers using a cell- and caspase-based high-throughput screening assay. 3. Structure-activity relationships of fused rings at the 7,8-positions
Authors: Kemnitzer W, Drewe J, Jiang S, Zhang H, Zhao J, Crogan-Grundy C, Xu L, Lamothe S, Gourdeau H, Denis R, Tseng B, Kasibhatla S, Cai SX.
Journal: J Med Chem (2007): 2858

Discovery of 5-(4-hydroxy-6-methyl-2-oxo-2H-pyran-3-yl)-7-phenyl-(E)-2,3,6,7-tetrahydro -1,4-thiazepines as a new series of apoptosis inducers using a cell- and caspase-based HTS assay
Authors: Drewe J, Kasibhatla S, Tseng B, Shelton E, Sperandio D, Yee RM, Litvak J, Sendzik M, Spencer JR, Cai SX.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2007): 4987

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简要概述

Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒 *蓝色荧光* 是通过测量Caspase 9的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 9是CED-3亚家族中的一员。活化的Caspase 9能切割下游caspases,例如caspase-3,-6和-7，起始Caspase级联反应。在正常发育的中枢神经系统中，活化的Caspase 9是凋亡所必需的。Caspase 9具有底物的选择性，其识别底物基序为Leu-Glu-His-Asp (LEHD)。本试剂盒利用Ac-LEHD-ProRed 作为荧光指示器来检测caspas-9的活性。通过caspas-9的切割ProRed 产生强蓝色荧光，EX/Em = 350/450 nm。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分。该实验稳定、快速且适应高通量筛选的需求。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-9的活性还能筛选caspas-9的抑制剂。很多实验室利用本试剂盒进行高通量抑制剂的筛选。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Caspase 9活性细胞凋亡检测试剂盒。 

点击查看光谱

产品说明书

样本实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温下孵育1小时
4.在Ex / Em = 535/620 nm（截止= 610 nm）监测荧光强度（顶部或底部读取模式）

工作溶液配制

将5μL的200X Ac-LEHD-ProRed 储备溶液（组分A）加入1mL的分析缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 9工作溶液。 避光。 注意：Caspase 9工作液不稳定，请及时使用。 1 mL Caspase 9工作溶液足以进行10次分析。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384-板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37℃，5％CO₂，培养箱中孵育所需的一段时间（对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞3-4小时）以诱导细胞凋亡。

3.添加100μL/孔/ 96孔或25μL/孔/ 384孔板的Caspase 9工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 9工作溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-LEHD-CHO caspase 9抑制剂，以确认抑制caspase 9样活性。

5.在Ex / Em = 540 / 620nm（cutoff= 610nm）下用荧光酶标仪（顶部或底部读取模式）监测荧光强度。注意：有时，底部读数会提供更好的信号背景比。如果使用底部读取模式，则以800rpm离心细胞板（特别是对于非贴壁细胞）2分钟 。

数据分析

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
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Journal: Biochimie (2015): 85–93

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Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

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	货号	22971	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	540	Em (nm)	590
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低中等水平的超氧化物的产生对于许多重要细胞过程的适当调节至关重要，这些过程包括基因表达，信号转导和肌肉对耐力运动训练的适应性。不受控制的线粒体超氧化物的产生会触发细胞氧化损伤，从而导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂来定量活细胞中的超氧化物水平。MitoROS 580具有活细胞渗透性，可以快速，选择性地靶向线粒体中的超氧化物。与超氧化物反应时会生成红色荧光。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的线粒体超氧化物。该试剂盒可用于荧光酶标仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 在生长培养基中准备细胞
2. 用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
3. 添加MitoROS 580工作溶液
4. 在37°C下将细胞染色30-60分钟
5. 检测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处的荧光增加（底部读取模式）或使用配备TRITC滤光片的荧光显微镜

 

溶液配制

储备溶液配制

1. MitoROS 580储备溶液（500X）：将50 µL DMSO（组分C）添加到MitoROS 580（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成500X MitoROS 580储备液，避光。 注意：25 µL 500X MitoROS 580储备溶液足以用于1个板。 为了存放，请将管子紧紧密封。

 

工作溶液配制

将25μL的500X MitoROS 580储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成MitoROS 580工作溶液。 注意：此MitoROS 580工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

 

实验步骤

1. 在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

2. 为了诱导超氧化物，将细胞板在37°C下孵育所需的时间，避光。 注意：我们在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理HeLa细胞30分钟，以诱导超氧化物。 有关详细信息，请参见图1。

3. 将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的MitoROS 580工作溶液添加到细胞板中。

4. 将细胞在37°C下孵育30至60分钟。

5. 使用荧光酶标仪（Ext / Em = 540/590 nm（Cutoff = 570 m））检测荧光强度，或者使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜观察细胞。

 

图示

 

图1.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）在HeLa细胞中测量超氧化物的荧光图像。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 AMA处理：将细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟，然后与MitoROS 580孵育1小时。 未经处理的对照：HeLa细胞与MitoROS 580在37°C下孵育1小时，未经AMA处理。 使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜检测荧光信号。

图2.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）检测HeLa细胞中的细胞内超氧化物。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 将细胞与50 µM绿脓素（Pyo）孵育； 50 µM抗霉素A（AMA）或未经处理（对照）在37ºC下放置30分钟。 然后将细胞与MitoROS 580在37℃孵育1小时。 使用CLARIOstar酶标仪（BMG Labtech）以底部读取模式在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）下检测荧光信号。

 

 

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.
Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides
Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.
Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water
Authors: Zhang J, Yang X.
Journal: Analyst (2013): 434

Analysis of the germination kinetics of individual Bacillus subtilis spores treated with hydrogen peroxide or sodium hypochlorite
Authors: Setlow B, Yu J, Li YQ, Setlow P.
Journal: Lett Appl Microbiol (2013): 259

Comparative antimicrobial activities of aerosolized sodium hypochlorite, chlorine dioxide, and electrochemically activated solutions evaluated using a novel standardized assay
Authors: Thorn RM, Robinson GM, Reynolds DM.
Journal: Antimicrob Agents Chemother (2013): 2216

Effect of hypochlorite-based disinfectants on inactivation of murine norovirus and attempt to eliminate or prevent infection in mice by addition to drinking water
Authors: Takimoto K, Taharaguchi M, Sakai K, Takagi H, Tohya Y, Yamada YK.
Journal: Exp Anim (2013): 237

Green synthesis of carbon dots with down- and up-conversion fluorescent properties for sensitive detection of hypochlorite with a dual-readout assay
Authors: Yin B, Deng J, Peng X, Long Q, Zhao J, Lu Q, Chen Q, Li H, Tang H, Zhang Y, Yao S.
Journal: Analyst (2013): 6551

Use of pyrogallol red and pyranine as probes to evaluate antioxidant capacities towards hypochlorite
Authors: Perez-Cruz F, Cortes C, Atala E, Bohle P, Valenzuela F, Olea-Azar C, Speisky H, Aspee A, Lissi E, Lopez-Alarcon C, Bridi R.
Journal: Molecules (2013): 1638

A novel flow-injection analysis system for evaluation of antioxidants by using sodium dichloroisocyanurate as a source of hypochlorite anion
Authors: Ichiba H, Hanami K, Yagasaki K, Tanaka M, Ito H, Fukushima T.
Journal: Drug Discov Ther (2012): 44

Colorimetric determination of hypochlorite with unmodified gold nanoparticles through the oxidation of a stabilizer thiol compound
Authors: Zhang J, Wang X, Yang X.
Journal: Analyst (2012): 2806

Cell Meter 比色细胞细胞毒性检测试剂盒

	货号	22779	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	5000 Tests	价格	10548
	Ex (nm)	575	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞毒性检测的试剂盒，Cell Navigator荧光成像试剂盒是一类荧光成像工具，用来标记亚细胞，细胞器；例如细胞膜、溶酶体、线粒体和细胞核等。Cell Navigator系列细胞器或亚细胞结构标记试剂盒提供最全的细胞及相关细胞器荧光标记方案，每种检测方案均能提供蓝色/绿色/红色/橙色等不同荧光检测方法。这种高效的细胞标签为从空间上和时间上研究发生的细胞活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter比色法细胞毒性检测试剂盒 使用可溶于水的四唑染料。在电子载体（PMS）存在的细胞还原性条件下，该染料能产生水溶性的甲瓒。四唑盐经细胞脱氢酶变成橙色的甲瓒产物，它在培养基是可溶的。一定数目甲瓒产物与一定数目活细胞成比例。我们的试剂盒比其他基于四唑细胞毒性检测试剂盒（如MTT、XTT）提供更强有力操作方案。不需要预混合，我们试剂盒四唑盐染料直接加入细胞。此外，我们的试剂盒比其他四唑细胞毒性检测试剂盒（如MTT、XTT）具有更高的灵敏度。能广泛的使用多种设备平台。适应于多种的研究，例如细胞粘附、细胞趋化、多耐药性、细胞生存能力、凋亡和细胞毒性等。该试剂盒具备最佳的组分和实验操作流程，适合于增殖或者不增殖的细胞，并能用于悬浮细胞或者贴壁细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 比色法细胞毒性检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或50μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.添加1/5体积的分析溶液（组分A）
3.将细胞在37℃，5％CO 2培养箱中孵育1-24小时
4.监测A570nm / A605nm的吸光度比

操作步骤

1.在具有黑色壁和透明底部的组织培养微孔板中每孔100至10,000个细胞。 将测试化合物添加到细胞中，并在37℃，5％CO 2培养箱中孵育所需的一段时间（例如24,48或96小时）。 对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。 对于96孔板，建议的总体积为100μL，对于384孔板，建议的总体积为50μL。

2.对照设置
2.1阳性对照：含有细胞和已知的增殖或细胞毒性诱导剂。

2.2阴性对照：含有细胞但不含有测试化合物。

2.3载体对照：含有细胞和用于递送测试化合物的载体。

2.4非细胞对照：含有不含细胞的生长培养基。

2.5测试化合物对照：含有用于递送测试化合物[Hank’s平衡盐溶液（HBSS）或磷酸盐缓冲盐水（PBS）]和测试化合物的载体对照。 一些测试化合物具有强自发荧光并且可能产生假阳性结果。 注意：对于96孔板，将所有对照的总体积与100μL匹配，对于具有生长培养基的384孔板，将所有对照的总体积与50μL相匹配。

3.将测定溶液（组分A）预热至37°C。 在开始实验之前彻底混合。

4.向每个孔中加入20μL（96孔板）或10μL（384孔板）的测定溶液（组分A）。 轻轻摇动平板30秒，混合试剂。

5.将细胞在37°C，5％CO₂培养箱中孵育1-24小时，避光。 注意：适当的孵育时间取决于单个细胞类型的代谢率和使用的细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 不推荐极长的孵育时间，因为指示剂可以转化为无色化合物。

6.用吸光度读板仪在OD比率A570nm / A605nm下监测吸光度的增加。 OD₅₇₀与OD₆₀₅的比率用于确定每个孔中的细胞活力。 注意：细胞存活率与OD₅₇₀增加和OD₆₀₅减少成正比。

数据分析

        从含有细胞的那些孔的值中减去从非细胞对照孔读取的背景吸光度。注意：空白孔的背景吸光度可以根据生长培养基或微量滴定板的来源而变化。

        每个孔中的吸光度读数表示孔中的细胞数。

根据以下公式计算样品和对照的细胞活力百分比：
％细胞活力= 100×（Rsample – Ro）/（Rctrl – Ro）
Rsample是在测试化合物存在下OD570 / OD605的吸光度比。
Rctrl是不存在测试化合物（载体对照）时OD570 / OD605的吸光度比。
Ro是OD570 / OD605的平均背景（非细胞对照）吸光度比。

        从空白标准孔获得的读数（Abs）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算细胞数/孔样品。

图1.用Cell Meter 比色细胞细胞毒性测定试剂盒测量CHO-K1细胞数量反应。 将1至10个细胞/孔/100μL的CHO-K1细胞在Costar黑壁/透明底96孔板中接种过夜。 将细胞与20μL/孔的测定溶液（组分A）在37℃下孵育3小时。用SpectraMax plus（Molecular Devices）在570nm和605nm下测量吸光度强度。 OD570 / OD605的比例与所示的细胞数成比例。

参考文献

Detection of thalidomide embryotoxicity by in vitro embryotoxicity testing based on human iPS cells
Authors: Nobuo Aikawa, Atsushi Kunisato, Kenji Nagao, Hideaki Kusaka, Katsumi Takaba, Kinya Ohgami
Journal: Journal of pharmacological sciences (2014): 201–207

相关产品

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合微孔板检测

	货号	22800	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	500 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	508	Em (nm)	524
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒 适合微孔板检测 是美国AAT Bioquest研发的用于检测线粒体膜电位的试剂盒，JC-1在许多实验室中被广泛使用，但其水溶性差导致极大的不便。即使在1μM浓度下，JC-1也倾向于在水性缓冲液中沉淀。当需要高染料浓度时，JC-10被开发成为JC的优异替代品。与JC-1相比，JC-10具有更好的水溶性。 JC-10能够选择性地进入线粒体，并随着膜电位的增加可逆地将其颜色从绿色变为橙色。该性质是由于膜极化时JC-10聚集体的可逆形成导致发射光从520nm（即JC-10单体形式的发射）向570nm（即J-聚集体形式的发射）的移动。当在490nm处激发时，随着线粒体膜变得更加极化，JC-10的颜色从绿色橙色可逆地变为绿色橙色。使用通常安装在所有流式细胞仪中的过滤器可以检测两种颜色。可以在荧光通道1（FL1）中分析绿色发射，在通道2（FL2）中分析绿色橙色发射。除了用于流式细胞仪外，它还可用于荧光成像和荧光微孔板平台。这种Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒使研究人员能够以酶标仪的形式运行JC-10检测，并为监测线粒体膜电位变化提供了最强大的检测方法。

这种Cell Meter JC-10线粒体膜电位检测试剂盒使研究人员能够以酶标仪的形式运行JC-10检测，并为监测线粒体膜电位变化提供了最可靠的检测方法。该试剂盒基于阳离子亲脂性JC-10染料检测细胞中线粒体膜电位的变化。在正常细胞中，JC-10浓缩在线粒体基质中，在那里形成红色荧光聚集体。然而，在凋亡和坏死细胞中，JC-10扩散出线粒体。它变成单体形式并以绿色荧光染色细胞。该试剂盒可用于筛选凋亡激活剂和抑制剂。可以以方便的96孔和384孔荧光微量滴定板形式进行测定。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的线粒体膜电位荧光探针。

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产品说明书

96孔板样品分析

概述

准备细胞

添加测试化合物

添加JC-10染料加载溶液（50μL/孔/ 96孔板或12.5μL/孔/ 384孔板）

在37℃，5％CO2培养箱中孵育30至60分钟

添加测定 缓冲液B（50μL/孔/ 96孔板或12.5μL/孔/ 384孔板）

在Ex / Em = 490/525和540/590 nm处监测荧光强度

操作步骤

1.准备细胞：
1.1对于贴壁细胞：在生长培养基中将细胞以20,000至80,000个细胞/孔/90μL过夜，96孔板或5,000至20,000个细胞/孔/20μL，用于384孔板。
1.2对于非粘附细胞：从培养基中离心细胞，然后将细胞沉淀悬浮于100,000-200,000细胞/孔/90μL的培养基中，用于96孔poly-D赖氨酸平板或25,000-50,000细胞/孔 /20μL，用于384孔聚-D赖氨酸板。 在实验之前，在制动器关闭的情况下以800rpm离心板2分钟。
注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.准备JC-10染料加载溶液：
2.1使用前在室温下清洗所有套件组件。
2.2将50μL100XJC-10（组分A）加入5mL测定缓冲液A（组分B）中，充分混合。
注意：将未使用的100X JC-10（组分A）等分并保存在-20 oC。 避免反复冻/融循环。

3.运行JC-10测定：
3.1通过向所需缓冲液（例如PBS或HHBS）中加入10μL10X测试化合物（96孔板）或5μL5X测试化合物（384-板）来处理细胞。
注意：在添加化合物之前不必洗涤细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可在添加化合物之前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后将相同体积的HHBS添加到孔中（例如对于96孔板为90μL或对于384孔板为20μL）。或者，细胞可以在无血清培养基中生长。
3.2在室温或37℃，5％CO2培养箱中培养细胞板至少15分钟或所需的时间（对于Jurkat细胞，用喜树碱4-6小时或用星形孢菌素处理3-5小时）到诱导细胞凋亡
3.3将50μL/孔（96孔板）或12.5μL/孔（384孔板）的JC-10染料加载溶液（来自步骤2.2）加入细胞板（来自步骤3.2）。
3.4将染料加载板在37℃，5％CO2培养箱中孵育30-60分钟，避光。
注意：适当的孵育时间取决于所使用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
3.5在读取荧光强度之前，将50μL/孔（96孔板）或12.5μL/孔（384孔板）的测定缓冲液B（组分C）加入染料加载板（来自步骤3.4）。
注1：装载后请勿清洗电池。
注2：对于非粘附细胞，建议在加入分析缓冲液B（组分C）后，以800rpm离心细胞板2分钟，同时停止制动。
3.6使用底部读取模式监测Ex / Em = 490 / 525nm（在515nm处截止）和540 / 590nm（在570nm处截止）的荧光强度以进行比率分析。

数据分析

Em在525/590处的荧光强度比率用于数据分析。

图1.在Jurkat细胞中用JC-10和JC-1测量了喜树碱诱导的线粒体膜电位变化。 用喜树碱（10mM）处理Jurkat细胞4小时后，向孔中加入JC-1和JC-10染料上样溶液并孵育30分钟。 使用NOVOstar酶标仪（BMG Labtech）在Ex / Em = 490 / 525nm和490 / 590nm下测量J-聚集体和单体形式的JC-1和JC-10的荧光强度。

参考文献

Determination of Hepatotoxicity in iPSC-Derived Hepatocytes by Multiplexed High Content Assays
Authors: Oksana Sirenko, Evan F Cromwell
Journal: (2018): 339–354

Inhibitors of Aβ42-induced endoplasmic reticular unfolded protein response (UPRER), in yeast, also rescue yeast cells from Aβ42-mediated apoptosis
Authors: Asma Derf, Ramesh Mudududdla, Sandip B Bharate, Bhabatosh Chaudhuri
Journal: European Journal of Pharmaceutical Sciences (2018)

Knockout of Mpv17-Like Protein (M-LPH) Gene in Human Hepatoma Cells Results in Impairment of mtDNA Integrity through Reduction of TFAM, OGG1, and LIG3 at the Protein Levels
Authors: Reiko Iida, Misuzu Ueki, Toshihiro Yasuda
Journal: Oxidative Medicine and Cellular Longevity (2018)

Role of Mcl-1 in regulation of cell death in human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes in vitro
Authors: Liang Guo, Sandy Eldridge, Michael Furniss, Jodie Mussio, Myrtle Davis
Journal: Toxicology and Applied Pharmacology (2018)

Boosted Membrane Potential as Bioenergetic Response to Anoxia in Dinoroseobacter shibae
Authors: Christian Kirchhoff, Heribert Cypionka
Journal: Frontiers in Microbiology (2017): 695

Evaluation of anticancer properties of a new α-methylene-δ-lactone DL-249 on two cancer cell lines
Authors: Dorota K Pomorska, Katarzyna Gach-Janczak, Rafal Jakubowski, Tomasz Janecki, Jacek Szymański, Anna Janecka
Journal: Open Life Sciences (2017): 178–189

In vitro cardiotoxicity assessment of environmental chemicals using an organotypic human induced pluripotent stem cell-derived model
Authors: Oksana Sirenko, Fabian A Grimm, Kristen R Ryan, Yasuhiro Iwata, Weihsueh A Chiu, Frederick Parham, Jessica A Wignall, Blake Anson, Evan F Cromwell, Mamta Behl
Journal: Toxicology and Applied Pharmacology (2017)

Study of the relationship between AGEs and oxidative stress damage to trophoblast cell mitochondria
Authors: Lingling Jiang, Jianying Yan, Lixiang Wu
Journal: Ginekologia Polska (2017): 372–378

13-Methyl-palmatrubine induces apoptosis and cell cycle arrest in A549 cells in vitro and in vivo
Authors: Jingxian Chen, Xingang Lu, Chenghua Lu, Chunying Wang, Haizhu Xu, Xiaoli Xu, Haixin Gou, Bing Zhu, Wangchun Du
Journal: Oncology Reports (2016): 2526–2534

Anti-proliferation effects, efficacy of cyasterone in vitro and in vivo and its mechanism
Authors: XinGang Lu, HongFu Qiu, Liu Yang, JieYing Zhang, ShuJie Ma, Lan Zhen
Journal: Biomedicine & Pharmacotherapy (2016): 330–339

相关产品

Cell Meter 核细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光

	货号	22811	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	100 Tests	价格	2604
	Ex (nm)	503	Em (nm)	527
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量凋亡染色质浓缩来监测细胞凋亡。与健康细胞相比，凋亡细胞的染色质紧密结合更多数量的核染料。我们的Cell Meter 核细胞凋亡测定试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方法，可用于检测核浓缩细胞的凋亡。这种荧光测定法是基于使用我们专有的非荧光染料对细胞中DNA含量的检测，该染料在与DNA结合后会发出强烈的荧光。在正常细胞中，Nuclear Green 不具有细胞渗透性，但是在凋亡细胞中，质膜受损或细胞代谢受损/没有细胞代谢的细胞无法阻止染料进入细胞。染料一旦进入细胞，便会与细胞内DNA结合，产生高度荧光的复合物，从而将细胞鉴定为无活力的细胞。核绿色染色；可以使用流式细胞仪（FL1通道）或荧光显微镜（FITC滤波片组）测量DCS1。该试剂盒可与我们的其他凋亡试剂一起使用，例如我们的Cell Meter NIR线粒体膜电位检测试剂盒（Cat＃22802），用于细胞存活率和凋亡的多参数研究。该试剂盒经过优化，可筛选凋亡激活剂和抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 核细胞凋亡检测试剂盒。

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产品说明书

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光

	货号	22812	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 tests	价格	2604
	Ex (nm)	341	Em (nm)	441
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 *蓝色荧光* 是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白，CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中，例如亨廷顿综合症，caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性，其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2-AMC作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割AMC肽产生强蓝色荧光（eX/eM = 350/450 NM）。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和最佳操作流程。该实验结果稳定，快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.监测Ex / Em = 370/450 nm处的荧光增加（截止= 420 nm）

工作溶液配制

将50μLCaspase8底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意：Caspase 8工作液不稳定，请及时使用。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间（对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 8工作溶液。

4.将Caspase 8工作溶液板在室温下孵育30至60分钟，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂，以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.以800rpm离心细胞板（特别是对于非贴壁细胞）2分钟（制动关闭）。

6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 370 / 450nm（截止= 420nm）下监测荧光增加。

数据分析

参考文献

Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13–26

Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)

microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
Journal: Laboratory Investigation (2016): 317–324

Promotion of osteointegration under diabetic conditions by tantalum coating-based surface modification on 3-dimensional printed porous titanium implants
Authors: Lin Wang, Xiaofan Hu, Xiangyu Ma, Zhensheng Ma, Yang Zhang, Yizhao Lu, Xiang Li, Wei Lei, Yafei Feng
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2016): 440–452

Role of delta-like ligand-4 in chemoresistance against docetaxel in MCF-7 cells
Authors: Q Wang, Y Shi, HJ Butler, J Xue, G Wang, P Duan, H Zheng
Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006

Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668–675

IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139–3148

Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85–93

LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391–L402

t-BHQ Provides Protection against Lead Neurotoxicity via Nrf2/HO-1 Pathway
Authors: Fang Ye, Xiaoyi Li, Lili Li, Jing Yuan, Jun Chen
Journal: Oxidative medicine and cellular longevity (2015)

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Cell Meter 线粒体自噬荧光成像试剂盒*红色荧光*

	货号	22998	存储条件	Multiple
	规格	100 Tests	价格	3924
	Ex (nm)		Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：22998

产品名称：Cell Meter 线粒体自噬荧光成像试剂盒

规格：100 Tests

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

试剂盒成分

组分A：Mitophagy Red 1小瓶
组分B：染色缓冲液1瓶（50毫升）
组分C：DMSO 1小瓶（50 µL）

 

适用仪器

---

荧光显微镜
激发：	Cy3/TRITC滤波片组
发射：	Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板：	黑色透明
滤波片：	Cy3/TRITC滤波片组

 

产品介绍

线粒体自噬（也称为“有丝分裂”）似乎与阿尔茨海默病和帕金森病有关，主要是由去极化线粒体的积累引起的。有丝分裂是一个清除系统，它清除由氧化应激和DNA损伤引起的功能失调的线粒体，使其与自身噬菌体隔离，然后与溶酶体融合并被降解。Cell Meter 线粒体自噬荧光成像试剂盒使用Mitophagy Red 作为有丝分裂探针，它能使线粒体在多种哺乳动物细胞类型上迅速而均匀地染色，并在有丝分裂诱导时转移到溶酶体。Cell Meter 线粒体自噬荧光成像试剂盒提供了一种可以检测线粒体的优秀的方法，可作为悬浮或附着活细胞有丝分裂吞噬的指标。Mitophagy Red在活细胞中是足够稳定的，它提供了许多时间来研究大多数活细胞的动力学，实验条件与细胞培养基相适应。Mitophagy Red的激发/发射光线非常适合使用Cy3/TRITC滤波器组，可以很容易地与GFP表达细胞系结合。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 线粒体自噬荧光成像试剂盒。 

 

图示

 

图1. 在96孔板中，与Mitophagy Red 和Hoechst 33342（Cat＃17535）共染色的HeLa细胞的荧光图像。 在添加CCCP（10 uM）1分钟之前（左侧）和之后（右侧）获取图像。 使用带有Cy3 / TRITC滤光片的荧光显微镜对细胞成像。

图2. HeLa细胞与Mitophagy Red 和MitoLite Green FM（Cat＃22695）共染色的荧光图像，位于96孔板中。 在添加CCCP（10 uM）1分钟之前（左侧）和之后（右侧）获取图像。 使用荧光显微镜对细胞进行成像，荧光显微镜具有用于Mitophagy Red 的Cy3 / TRITC滤波片和用于MitoLite Green FM的FITC滤波片，并且彼此重叠。

 

Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒

	货号	15900	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	405	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂盒，活性氧（ROS）在细胞信号传导和维持生理细胞代谢中是重要的。 过量的ROS损害细胞成分，这些成分与多种疾病相关，包括癌症，代谢紊乱，神经退行性疾病等。产生抗氧化剂，包括酶，大分子和小分子，以对抗ROS诱导的生物体内的损伤。 体液，组织和细胞中抗氧化活性的定量分析提供了重要的生物信息。 我们的Amplite™比色抗氧化检测试剂盒使用ABTS作为抗氧化活性的比色指示剂，基于观察到抗氧化剂能够阻止ABTS（2,2′-连氮基 – 双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）氧化的能力 ABTS +通过辣根过氧化物酶（HRP）和过氧化氢（H2O2）ABTS +，一种可溶性色原，可以在405nm处用分光光度法监测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备样品/ Trolox（10 µL）
2.添加HRP（20 µL）
3.添加ReadiUse ABTS底物溶液（150 µL）
4.在室温下孵育5分钟
5.监控405 nm处的吸光度

溶液配制

1.储存溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 辣根过氧化物酶（HRP）储备溶液（2000X）：
向辣根过氧化物酶（组分A）的小瓶中加入1 mL分析缓冲液（组分B）。

1.2 Trolox标准溶液（100毫米）：
将100 µL DMSO加到Trolox瓶中（组分D）。

2.标准溶液配制

Trolox标准
通过使用稀释因子= 2和最高浓度= 1 mM在测定缓冲液（Componenet B）中稀释100 mM Trolox标准溶液来制备Trolox标准溶液。

3.工作溶液配制

将2.5 uL的2000X HRP储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液（组分B）中，制成1X HRP工作溶液。

样品操作及实验分析

表1.在透明的96孔微孔板中的Trolox标准品和测试样品的布局。 SD = trolox标准品（SD1-SD7，0.0156至1 mM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和表1中的布局，准备trolox标准品（SD），空白对照（BL）和测试样品（TS）（如有必要，在测定缓冲液中稀释样品，使抗氧化剂水平与Trolox处于同一范围内），表2。

2.在Trolox标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入20 µL HRP工作溶液，使总体积为30 µL /孔。

3.向每个孔中加入150 µL ReadiUse ABTS底物溶液（组分C），总体积为180 µL /孔。 注意：避免光照，并在聚丙烯容器中使用。

4.在室温下孵育5分钟。 注意：这5分钟的保温时间是一个指导原则。 可以改变孵育时间以获得更合适的吸光度。

5.使用酶标仪读取405 nm处的吸光度。

参考文献

Fluorescent real-time quantitative measurements of intracellular peroxynitrite generation and inhibition
Authors: Zhen Luo, Qin Zhao, Jixiang Liu, Jinfang Liao, Ruogu Peng, Yunting Xi, Zhenjun Diwu
Journal: Analytical biochemistry (2017): 44–48

Gene silencing of endothelial von Willebrand Factor attenuates angiotensin II-induced endothelin-1 expression in porcine aortic endothelial cells
Authors: Anar Dushpanova, Silvia Agostini, Enrica Ciofini, Manuela Cabiati, Valentina Casieri, Marco Matteucci, Silvia Del Ry, Aldo Clerico, Sergio Berti, Vincenzo Lionetti
Journal: Scientific Reports (2016)

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