Cell Meter BX520固定化细胞活性染料 货号22510-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter BX520固定化细胞活性染料

Cell Meter BX520固定化细胞活性染料

Cell Meter BX520固定化细胞活性染料    货号22510 货号 22510 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2472
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:22510

产品名称:Cell Meter BX520固色活性染料

规格:200 Tests

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:N/A

激发波长(nm):491

发射波长(nm):510

 

适用仪器


流式细胞仪  
激发: 480nm激光
发射: 530/30nm滤波片
滤波片: FITC滤波片组
荧光显微镜  
激发: FITC滤波片组
发射: FITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明

 

产品介绍 

从活细胞中区分和排除死细胞可以更清晰地分离和鉴定细胞群,Cell Meter BX520固定化细胞活性染料是细胞不可渗透的一类荧光活性染料,它们通过优化以匹配常见流式细胞仪的主要激发激光,例如350、405、488、633和647 nm。这些染料不渗入活细胞,但渗入膜受损的细胞。它们与含胺和硫醇的蛋白质以及其他细胞成分发生不可逆的反应。由于具有受损膜的死细胞或固定细胞更容易与Cell Meter BX520固定化细胞活性染料发生反应,因此比具有完整膜的活细胞的染色更亮,这些染料可用于评估哺乳动物细胞的活与死状态。使用这些染料时,需要考虑一些因素,例如,每种染料的滴定,以确保活细胞几乎没有染色。Cell Meter BX520固定化细胞活性染料通过优化,可以在488 nm的蓝色激发光中激发,并在520 nm(FITC通道)发射。与其他商业上类似的活性染料相比,这种可固定的活性染料更加耐用、稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter BX520固定化细胞活性染料。 

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图示

 

 

Cell Meter BX520固定化细胞活性染料    货号22510

图1.通过Cell Meter 固定化细胞活性染料检测Jurkat细胞活性。处理Jurkat细胞并用Cell Meter BX520(Cat#22510)染色,然后固定在3.7%甲醛中并通过流式细胞仪进行分析。带有FITC通道的死细胞群体(绿色)很容易与活细胞群体(红色)区分开,在固定之前和之后都获得了几乎相同的结果。

 

 

参考文献

CFSE dilution to study human T and NK cell proliferation in vitro.
Authors: Terrén, Iñigo and Orrantia, Ane and Vitallé, Joana and Zenarruzabeitia, Olatz and Borrego, Francisco
Journal: Methods in enzymology (2020): 239-255

Using Carboxy Fluorescein Succinimidyl Ester (CFSE) to Identify Quiescent Glioblastoma Stem-Like Cells.
Authors: Azari, Hassan and Deleyrolle, Loic P and Reynolds, Brent A
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2018): 59-67

Estimates and impact of lymphocyte division parameters from CFSE data using mathematical modelling.
Authors: Mazzocco, Pauline and Bernard, Samuel and Pujo-Menjouet, Laurent
Journal: PloS one (2017): e0179768

Analysis of CFSE time-series data using division-, age- and label-structured population models.
Authors: Hross, Sabrina and Hasenauer, Jan
Journal: Bioinformatics (Oxford, England) (2016): 2321-9

Assessment of lymphocyte proliferation for diagnostic purpose: Comparison of CFSE staining, Ki-67 expression and 3H-thymidine incorporation.
Authors: Lašťovička, Jan and Rataj, Michal and Bartůňková, Jiřina
Journal: Human immunology (2016): 1215-1222

Poor association of allergen-specific antibody, T- and B-cell responses revealed with recombinant allergens and a CFSE dilution-based assay.
Authors: Eckl-Dorna, J and Campana, R and Valenta, R and Niederberger, V
Journal: Allergy (2015): 1222-9

Quality control of extracorporeal photochemotherapy: Proliferation assay using CFSE validated according to ISO 15189:2007 standards.
Authors: Faivre, Lionel and Lecouflet, Lucie and Liu, Wang-Qing and Khadher, Isabelle and Lahaie, Camille and Vidal, Michel and Legouvello, Sabine and Beaumont, Jean-Louis and Bierling, Philippe and Rouard, Hélène and Birebent, Brigitte
Journal: Cytometry. Part B, Clinical cytometry (2015): 30-9

Mathematical models for CFSE labelled lymphocyte dynamics: asymmetry and time-lag in division.
Authors: Luzyanina, Tatyana and Cupovic, Jovana and Ludewig, Burkhard and Bocharov, Gennady
Journal: Journal of mathematical biology (2014): 1547-83

Quality control of extracorporeal photochemotherapy: Proliferation assay using CFSE validated according to ISO 15189:2007 standards.
Authors: Lionel, Faivre and Lucie, Lecouflet and Wang-Qing, Liu and Isabelle, Khadher and Camille, Lahaie and Michel, Vidal and Sabine, Legouvello and Jean-Louis, Beaumont and Philippe, Bierling and Hélène, Rouard and Brigitte, Birebent
Journal: Cytometry. Part B, Clinical cytometry (2014)

Asymmetry of Cell Division in CFSE-Based Lymphocyte Proliferation Analysis.
Authors: Bocharov, Gennady and Luzyanina, Tatyana and Cupovic, Jovana and Ludewig, Burkhard
Journal: Frontiers in immunology (2013): 264

说明书
Cell Meter BX520固定化细胞活性染料.pdf

Cell Meter 活细胞Caspase 2结合检测试剂盒 绿色荧光 货号20111-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 活细胞Caspase 2结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 2结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 2结合检测试剂盒 绿色荧光     货号20111 货号 20111 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 Tests 价格 3924
Ex (nm) 493 Em (nm) 517
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 活细胞胱天蛋白酶活性测定试剂盒基于胱天蛋白酶的荧光FMK抑制剂。 这些抑制剂是细胞可渗透的和无细胞毒性的。 一旦进入细胞,胱天蛋白酶抑制剂就与活性胱天蛋白酶共价结合。 此Cell Meter™活细胞caspase 2活性测定试剂盒旨在通过测量活细胞中的caspase 2活化来检测细胞凋亡。 它用于定量凋亡细胞中活化的caspase 2活性,或用于筛选caspase 2抑制剂。 FAM-VDVAD-FMK(绿色标记试剂)可通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的胱天蛋白酶2。 该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 见表1
发射: 见表1
荧光显微镜  
激发: 见表1
发射: 见表1
推荐孔板: 黑色透明
荧光酶标仪  
激发: 见表1
发射: 见表1
通道: 黑色透明
读取模式: 底读模式

表1:用于流式细胞仪和荧光显微镜的荧光强度检测。

  FAM-VDVAD-FMK 碘化丙啶 hoechst 染料
流式细胞仪 FL1 通道 FL2通道 FL1通道
荧光显微镜 FITC 通道 TRITC 通道 DAPI通道
荧光酶标仪 490/525nm 535/635nm 350/461nm

产品说明书

分离细胞的检测方案

概述

用密度为5×105到2×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞

将FAM-YVAD-FMK以1:150的比例加入到细胞溶液中

在室温下孵育1小时

将细胞沉淀,用缓冲液或生长培养基洗涤并重悬细胞

在Ex / Em = 490 / 525nm处分析细胞

注:使用前将所有部件在室温下解冻。

 

操作方法

1.根据您的特异性诱导方案,将细胞培养至最适于细胞凋亡诱导的密度,但不超过2 x 106个细胞/ mL。同时,对于每种标记条件,以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。以下是一些诱导悬浮培养细胞凋亡的例子:

1)用2μg/ ml喜树碱处理Jurkat细胞3小时。

2)用1μM星形孢菌素处理Jurkat细胞3小时。

3)用4μg/ ml喜树碱处理HL-60细胞4小时。

4)用1μM星形孢菌素处理HL-60细胞4小时。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的最佳细胞密度。

2.通过向FAM-YVAD-FMK(组分A)的小瓶中加入50μLDMSO制备150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液。

3.将150×FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液(来自步骤1)以1:150的比例添加到细胞溶液中,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育1小时。

注1:对于FAM-YVAD-FMK标记,细胞可以浓缩至~5×10 6个细胞/ mL。 未使用的150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

注2:对于粘附细胞,用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用FAM-YVAD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注3:适当的孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

4.将细胞以约200g旋转5分钟,并用1mL洗涤缓冲液(组分B)洗涤细胞两次。 将细胞重悬于所需量的洗涤缓冲液中。

注1:FAM-YVAD-FMK是荧光的,因此清除任何未结合的试剂以消除背景非常重要。

注2:对于分离的细胞,应将细胞浓度调节至每个微量滴定板孔中2-5×10 5个细胞/100μL等分试样,用于步骤6。

5.如果需要,用DNA染色标记细胞(如用于死细胞的碘化丙锭,或用于细胞核染色的整个群体的Hoechst)。

6.通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm处检测荧光强度(对于碘化丙锭,Ex / Em = 535/635 nm;对于Hoechst染料,Ex / Em = 350 / 461纳米)。

6.1对于流式细胞仪,使用FL1通道监测荧光强度(FL2通道用于碘化丙锭染色)。

6.2用于荧光显微镜和荧光酶标仪。将100μL细胞悬浮液置于96孔黑壁/微量滴定板透明底部的每个孔中。

注意:如果需要平衡细胞浓度,调整诱导细胞的悬浮体积以接近非诱导细胞群的细胞密度。如果您的细胞治疗不会导致受刺激细胞群数量的显着损失,则此调整步骤是可选的。

6.3使用FITC通道在荧光显微镜下观察细胞(用于碘化丙啶染色的TRITC通道,用于Hoechst染色的DAPI通道)。

6.4使用荧光酶标仪,使用Ex / Em = 490 / 525nm(在515nm处截止)底部读取模式监测荧光强度。

 

参考文献

Helicobacter pylori Secreted Protein HP1286 Triggers Apoptosis in Macrophages via TNF-Independent and ERK MAPK-Dependent Pathways
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: Frontiers in Cellular and Infection Microbiology (2017): 58

Death receptor 3 mediates necroptotic cell death
Authors: Sebastian Bittner, Gertrud Knoll, Martin Ehrenschwender
Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2016): 1–12

Helicobacter pylori protein JHP0290 exhibits proliferative and anti-apoptotic effects in gastric epithelial cells
Authors: Raquel Tavares, Sushil Kumar Pathak
Journal: PloS one (2015): e0124407

 

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产品名称 货号
Cell Meter 活细胞Caspase 1结合检测试剂盒 绿色荧光 Cat#20108
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说明书
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Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 货号21225-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光     货号21225 货号 21225 存储条件 避免光照, 在2-8度冷藏保存
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 576 Em (nm) 597
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的吞噬检测试剂盒,吞噬作用定义为细胞对质膜内的颗粒的细胞摄取。通过吞噬和破坏入侵的微生物,吞噬作用的过程对先天免疫反应至关重要。通过清除凋亡小体,维持组织稳态和重塑也需要吞噬作用。吞噬作用的摄取机制取决于颗粒的大小,受体 – 配体相互作用和细胞骨架的参与。一旦内化,吞噬体与溶酶体融合形成用于消化的第二吞噬溶酶体,导致pH逐渐降低。我们的Cell Meter 荧光吞噬测定试剂盒使用独特的pH依赖性Protonex 600红色染料。与大多数现有荧光染料不同,Protonex 600染料在细胞外是非荧光的。然而,当它们在检测酸性区室如内体和溶酶体时,荧光会大幅度增加。这种特性使其易于使用而无需台盼蓝淬灭步骤和用于研究吞噬作用。 Cell Meter 荧光吞噬测定试剂盒还包括绿色荧光细胞活力染料,可通过荧光显微镜同时检测活细胞和吞噬作用过程。该测定还可以适用于荧光酶标仪和流式细胞术检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光显微镜  
推荐孔板: 黑色透明
仪器规格: Texas Red/FITC滤波片

产品说明书

操作步骤

1.将Cytochalasin D作为阳性对照或DMSO或您的测试化合物添加到每个孔中。 注意:测定中使用的细胞松弛素D的浓度应针对每个单独的细胞系进行优化。

2.将板在细胞培养箱中孵育30分钟。

3.每孔加入12.5μLProtonex 600 Red-Latex Beads Conjugate溶液(12X)。

4.将板在细胞培养箱中孵育4小时。 注意:每个细胞系的用户应优化孵育时间。

5.每孔加入12.5μLCytoTrace Green工作溶液(12X)。

6.将板在细胞培养箱中孵育30分钟。

7.用1X PBS洗涤板两次。

8.用Texas Red滤波片(Ex / Em = 570 / 600nm)和具有FITC滤波片的CytoTrace Green(Ex / Em = 490 / 525nm)观察细胞内的吞噬作用。

 

数据分析

Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光     货号21225

图示:使用Cell Meter 荧光吞噬作用测定试剂盒(Cat#21225)检测RAW 264.7细胞中的吞噬作用。 将RAW 264.7细胞与(B)或不用(A)细胞松弛素D孵育30分钟,然后加入Protonex 600 Red-Latex Beads在生长培养基中并孵育4小时,然后加入Cell Tracker并孵育30分钟。 使用Keyence荧光显微镜拍摄图像。

 

参考文献

PHD2 is a regulator for glycolytic reprogramming in macrophages
Authors: Annemarie Guentsch, Angelika Beneke, Lija Swain, Katja Farhat, Shunmugam Nagarajan, Ben Wielockx, Kaamini Raithatha, Jan Dudek, Peter Rehling, Anke Zieseniss
Journal: Molecular and Cellular Biology (2016): MCB–00236

说明书
Cell Meter 荧光法吞噬检测试剂盒 红色荧光 .pdf

Cell Meter™ Cell Proliferation Assay Kit 货号22505-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Cell Meter™ Cell Proliferation Assay Kit

Cell Meter™ Cell Proliferation Assay Kit

货号 22505 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2340
Ex (nm) 503 Em (nm) 527
分子量 N/A 溶剂
产品详细介绍

简要概述