Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合微孔板检测

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。可以使用多种参数。该特定试剂盒旨在通过测量线粒体膜电位（MMP）的消失来检测细胞凋亡。 MMP的凋亡与线粒体通透性过渡孔的开放相吻合，导致细胞色素C释放到细胞质中，进而触发了细胞凋亡级联反应中的其他下游事件。我们的Cell Meter 线粒体膜电位测定试剂盒可通过优化的测定方法提供所有基本成分。荧光测定法使用我们专有的阳离子MitoTell Red检测MMP消失的细胞凋亡。在正常细胞中，当MitoTell Red堆积在线粒体中时，红色荧光强度会增加。但是，在凋亡细胞中，MMP凋亡后，MitoTell Red的荧光强度降低。 MitoTell Red染色的细胞可以通过荧光显微镜Cy5通道或荧光酶标仪读取。该试剂盒经过优化，可通过荧光酶标仪读取凋亡激活剂和抑制剂。而且该测定可以以方便的96孔和384孔荧光酶标仪进行检测，而无需清洗步骤。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 准备细胞

2. 添加测试化合物

3. 添加MitoTell Red工作溶液（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）

4. 将板在5％CO₂、37°C的培养箱中孵育30分钟

5. 添加测定缓冲液B（50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板）

6. 在Ex / Em = 610/650 nm（截止= 630 nm）或使用Cy5滤光片的荧光显微镜下检测荧光增加（底部读取模式）

溶液配制

将50 µL的200X MitoTell Red（组分A）添加到10 mL的测定缓冲液A（组分B）中，并充分混合以制成MitoTell Red工作溶液，避光。

实验步骤

1.用测试化合物处理细胞一段时间，以诱导细胞凋亡，并建立平行对照实验。注意：我们用20 µM CCCP处理HeLa细胞15分钟，以改变线粒体膜电位。CCCP或FCCP可以与MitoTell Red同时添加。为了获得结果，可能需要为每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。

2.将100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板的MitoTell Red工作溶液加入细胞板。

3.在避光的条件下，将板在37ºC下孵育15-30分钟。注意：适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。

4.将50 µL /孔/ 96孔板或12.5 µL /孔/ 384孔板的测定缓冲液B（组分C）添加到细胞板中。注意：加载后请勿洗涤细胞。对于非贴壁细胞，建议在加入测定缓冲液B（组分C）后，以800 rpm离心细胞板2分钟，然后制动。

5.加入测定缓冲液B（组分C）后10到30分钟，用荧光酶标仪（Ext / Em = 610/650 nm（截止= 630 nm））检测荧光强度，或在荧光下用带Cy5滤镜的显微镜观察荧光信号。

线粒体膜电位荧光探针罗丹明B

简要概述

产品基本信息

货号：22211

产品名称：罗丹明B

规格：10mg

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：627.17

溶剂：DMSO

激发波长（nm）：556

发射波长（nm）：578

产品介绍

        罗丹明B是美国AAT Bioquest生产的罗丹明染料，带正电荷的罗丹明染料（如罗丹明酯和罗丹明）选择性地定位于线粒体中，因此它们广泛用于标记活细胞的线粒体。这种特殊的罗丹明酯以荧光染色线粒体橙色。其光谱特性与TRITC相似，使得罗丹明B己酯的使用非常方便。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的罗丹明B

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 橙色荧光 适合流式细胞检测

简要概述

        Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于线粒体膜电位检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter线粒体膜电位检测试剂盒 *橙色荧光 适合流式细胞检测* 专门通过检测线粒体跨膜电势的减少来检测细胞凋亡。线粒体跨膜电势瓦解与线粒体渗透转运孔的开放相一致，导致细胞色素C释放到胞浆中，它是下游凋亡级联反应的触发器。该荧光实验方案利用我们独有的MitoLite Orange来检测凋亡细胞中线粒体跨膜电势的减少。在正常细胞中，当MitoLite Orange积聚于线粒体时，红色荧光增加。然而在凋亡细胞中，MitoLite Orange随着线粒体跨膜电位的塌陷而减少。被MitoLite Orange染色的细胞可以通过488n的激发光（FL2 通道）来观察。该试剂盒可以与其它Cell Meter检测试剂盒同时检测细胞的活性和凋亡，该试剂盒已被优化，可用于流式细胞法筛选凋亡激活剂或抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用密度为5×10⁵到1×10⁶个细胞/ mL的测试化合物制备细胞
2.将2μL500XMitoTell Orange加入1 mL细胞溶液中
3.将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育15-30分钟
4.将细胞沉淀，并将细胞重悬于1mL生长培养基中
5.使用具有FL2通道的流式细胞仪分析细胞

操作步骤

1.对于每个样品，将细胞制备在1 mL温热培养基或您选择的缓冲液中，密度为5×10⁵至1×10⁶个细胞/ mL。注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定诱导细胞凋亡的佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段所需的时间以诱导细胞凋亡，并建立平行对照实验。

3.对于阴性对照：仅用载体处理细胞。

4.对于阳性对照：使用FCCP或CCCP以5-50μM在37℃，5％CO₂培养箱中处理细胞15至30分钟。注意：CCCP或FCCP可与MitoTell Orange同时添加。为了获佳结果，可能需要对每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。

5.将2μL500XMitoTell 橙（组分A）加入处理过的细胞中。

6.将细胞在37℃，5％CO₂培养箱中孵育15至30分钟。注意：对于粘附细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在用MitoTell Orange染料加载溶液孵育之前用含有血清的培养基洗涤细胞一次。

7.将细胞以1000rpm离心4分钟，然后将细胞重悬于1mL的分析缓冲液（组分B）或您选择的缓冲液中。

8.使用具有FL2通道（Ex / Em = 540 / 590nm）的流式细胞仪监测荧光强度。

数据分析

Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞功能的工具。可以使用多种参数。该特定试剂盒旨在通过测量线粒体膜电位（MMP）的丢失来检测细胞凋亡。线粒体膜电位的凋亡与线粒体通透性过渡孔的开放相吻合，导致细胞色素C释放到细胞质中，进而触发凋亡级联反应中的其他下游事件。该荧光测定法使用我们专有的阳离子MitoLite red检测细胞中线粒体膜电位的变化。在正常细胞中，当线粒体中积累了MitoLite red时，红色荧光强度会增加。但是，在凋亡细胞中，MMP凋亡后，MitoLite red的荧光强度降低。可以对用MitoLite red染色的细胞进行荧光检测。我们的Cell Meter 红色线粒体膜电位测定试剂盒可通过优化的测定方法提供所有必需成分。该试剂盒可用于筛选凋亡激活剂和抑制剂。该试剂盒可以使用流式细胞仪在APC或Cy5通道上观察用MitoTell Red染色的细胞。该试剂盒经过优化，可通过流式细胞仪筛选凋亡激活剂和抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 线粒体膜电位检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 用5×10⁵至1×10⁶细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞

2. 在0.5 mL细胞溶液中加入1 µL 500X MitoTell Red

3. 将细胞在37°C，5％CO₂培养箱中孵育15-30分钟

4. 沉淀细胞，然后将细胞重悬于0.5 mL检测缓冲液中

5. 使用带有APC或Cy5通道的流式细胞仪分析细胞

实验步骤

1.对于每个样品，在0.5 mL温暖的培细胞/ mL的密度制备细胞。注意：应单独评估每种细胞系，以确定诱导凋亡的细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段时间，以诱导细胞凋亡，并建立平行对照实验。注意：我们在37ºC下用20µM CCCP处理Jurkat细胞15分钟，以改变线粒体膜电位。CCCP或FCCP可以与MitoTell Red同时添加。为了获得结果，可能需要为每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。

3.向处理过的细胞中加入1 µL 500X MitoTell Red（组分A）。

4.将细胞在37°C，5％CO₂培养箱中孵育15至30分钟。注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在与MitoTell Red孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

5.以800 rpm的速度离心细胞4分钟，然后将细胞重悬于0.5 mL的测定缓冲液（组分B）或自备的缓冲液中。

6.使用流式细胞仪通过APC或Cy5通道检测荧光强度。