Live or Dead 细胞活性检测试剂盒 *红/蓝双色荧光*

	货号	22788	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	3924
	Ex (nm)	360; 550	Em (nm)	450; 570
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Live or Dead 细胞活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞活性检测试剂盒，AAT Bioquest的Mycolight 细菌活力测定试剂盒可在革兰氏阳性和阴性细菌中提供细菌活力的双色荧光测定。该试剂盒利用我们的绿色荧光核酸染色剂MycoLight Green和红色荧光核酸染色碘化丙啶的混合物。单独使用时，MycoLight 绿色污渍通常会标记群体中的所有细菌（活的和死的）。相比之下，碘化丙锭只穿透膜受损的细菌，当两种染料都存在时，导致MycoLight 绿色染料荧光的减少。因此，使用MycoLight 绿色和碘化丙啶的适当混合物，具有完整细胞膜的活细菌发出绿色荧光，而具有损伤膜的死亡或濒死的细菌 产生红色荧光。Mycolight 细菌活力测定试剂盒是监测细菌种群活力的强大工具，可作为细胞膜完整性的函数。可以在510-530nm（FITC滤光片）和600-660nm（德克萨斯红色滤光片光片）处以488nm处（最常见的激发光源）激发荧光测定染色的细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Live or Dead 细胞活性检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞
2.添加染料加工溶液
3.在室温或37°C孵育30分钟至1小时
4.在Ex / Em = 610/650 nm（截止= 630 nm，红色）和Ex / Em = 360/450 nm（截止= 420 nm，蓝色）或在荧光显微镜下观察（Texas red/Cy5通道   活细胞），（DAPI通道  死细胞）

工作溶液配制

将5μL的200X Cellbrite Red（组分A）和5μL的200X Nuclear Blue DCS1（组分C）加入1mL的测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备染料 – 工作溶液。 该染料加工溶液在室温下稳定至少1小时。 注意：由于最佳染色条件可能因细胞类型的不同而异，因此建议单独确定组分A和C的适当浓度。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.根据标准方案准备细胞。 注意：我们用星形孢菌素（SS）在37℃下处理HeLa细胞4小时以诱导细胞凋亡。 详细信息请参见图1。

2.用100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的染料加工溶液替换生长培养基。

3.将染料加工溶液板在室温或37°C孵育30分钟至1小时，避光。

4.用HHBS，PBS或您选择的缓冲液洗涤细胞两次。

5.向细胞中加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的测定缓冲液（组分B）。

6.用荧光显微镜监测荧光信号，用德克萨斯红或Cy5过滤器检测活细胞，用DAPI过滤死细胞。 还可以使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 610 / 650nm（截止= 630nm，红色）和Ex / Em = 360 / 450nm（截止= 420nm，蓝色）下分析荧光强度。

数据分析

参考文献

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
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NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
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Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
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Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
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Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
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Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1–8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287

The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295–303

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	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是用于标记细胞的一组工具，用于细胞功能的荧光显微镜研究。 细胞的有效标记为研究时空背景下的细胞事件提供了一种有力的方法。 该特定试剂盒设计用于在红色荧光中均匀标记固定的哺乳动物细胞，以用于蓝色或绿色激发光激发的流式细胞仪应用。 该试剂盒使用专有的红色荧光染料，与细胞成分结合后会发出更多的荧光。 试剂盒中使用的荧光染料被蓝色（488 nm）和绿色激光（532 nm）充分激发到620 nm的荧光。 该试剂盒为所有基本组件提供了优化的细胞标记方案。 它是保存特定细胞荧光图像的极佳工具，也可用于荧光流式细胞仪应用。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在HHBS中制备样品（0.5 mL /测定）
2.替换为HHBS
3.将Stain It 反应性染料添加到细胞悬液中
4.在室温或37°C下将细胞染色20-60分钟
5.清洗细胞
6.修复细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Stain It 活性染料原液（500X）：
将200 µL DMSO（组分B）添加到Stain It 反应性染料（组分A）的小瓶中，以得到500X Stain It 反应性染料储备液。

点击查看细胞制备方案

样品示例及操作

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It 活性染料储备液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO₂的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定最佳的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞。

参考文献

Autophagy proteins are not universally required for phagosome maturation
Authors: Marija Cemma, Sergio Grinstein, John H Brumell
Journal: Autophagy (2016): 1440–1446

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Journal: Analytical chemistry (2014): 6088–6094

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Journal: Journal of Materials Chemistry (2012): 16906–16913

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Journal: Journal of Periodontal Research

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