Live or Dead 酵母活力检测试剂盒 货号22475-AAT Bioquest荧光染料

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Live or Dead 酵母活力检测试剂盒

Live or Dead 酵母活力检测试剂盒

货号 22475 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 4140
Ex (nm) Em (nm)
分子量 N/A 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Live or Dead 酵母活力检测试剂盒是一种可靠且稳定的检测方法,研究人员可以使用流式细胞术在数分钟内定量区分活酵母和死酵母。该试剂盒包含两种即用型核酸染料:MycoLight Green JJ98(SYTO 9 的替代品)和碘化丙啶。 MycoLight Green JJ98 是一种绿色荧光核酸染料,可标记所有酵母菌群 – 具有完整细胞膜的活酵母和具有受损细胞膜的死酵母。相比之下,碘化丙啶仅对细胞膜受损的死酵母染色。在两种染料都存在的死酵母中,由于碘化丙啶的 FRET,MycoLight Green JJ98 的荧光显着降低。结果,具有完整膜的活酵母将染成荧光绿色,而具有受损膜的死酵母将染成荧光红色。

产品说明书

样品分析方案

概述

准备酵母样品

添加 1 µL MycoLight Green JJ98 染料

添加 2 µL 碘化丙啶染料

轻轻涡旋,在 37°C 下孵育 15-30 分钟

使用 530/30 nm 和 576/26 nm 滤光片通过流式细胞仪进行分析

注:在打开小瓶之前,让组分升温至室温。碘化丙啶易与核酸结合,应将其视为潜在的诱变剂并小心处理。处理 DMSO 原液时应特别小心,因为已知 DMSO 有助于有机分子进入组织。

 

操作步骤

以下方案仅用作为参考使用,具体请根据自己的实验进行调整

1.以~ 106个细胞/ mL的浓度制备含1mL悬浮液的酵母样品。

2.在每管实验样品中加入 1 µL MycoLight™ Green JJ98(组分 A)和 2 µL 碘化丙啶(组分 B)。对于未染色的对照,将 1 组试管放在一边,不添加染料。对于单色 MycoLight™ Green JJ98 对照,将 1 µL MycoLight™ Green JJ98 添加到一管未经处理的细胞和一管死细胞中。对于单色碘化丙啶对照,将 1 μL 碘化丙啶添加到一管未经处理的细胞和一管死细胞中。请注意,根据您的具体应用,可能需要调整两种染料的比例以获得最佳响应。

3.轻轻涡旋每个管。然后将所有样品在室温下孵育 15 至 30 分钟,避光。

4.使用配备 488 nm 激光、530/30 nm 过滤器和 575/26 nm 过滤器(FITC 和 PE 通道)的流式细胞仪检测荧光。

注意     要使用荧光显微镜分析样品,请在载玻片和盖玻片之间捕获 5 µL 染色酵母悬浮液。使用 FITC 和 Cy3 滤光片组在显微镜下观察。

说明书
Live or Dead 酵母活力检测试剂盒.pdf