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- 产品货号:
- BN24133
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- 中文名称:
- DTT溶液(0.1%)
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- 品牌:
- Biorigin
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货号
产品规格
售价
备注
-
BN24133-500ml
500ml
¥150.00
产品描述
货号
产品规格
售价
备注
BN24133-500ml
500ml
¥150.00
产品描述
货号
产品规格
售价
备注
BN20353-10ml
10ml
¥110.00
产品描述
货号
产品规格
售价
备注
BN20154-1ml
1ml
¥20.00
BN20154-5ml
5ml
¥80.00
产品描述
货号
产品规格
售价
备注
BN27020-10ml
10ml
¥110.00
BN27020-1ml
1ml
¥20.00
BN27020-25ml
25ml
¥180.00
产品描述
保存:-20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。
产品简介:
本产品适用于 SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为 SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完 全被 SDS 掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS 还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的 二级和三级结构。DTT 可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
使用说明:
1、请按每 40 微升蛋白样品加入 10 微升上样缓冲液的比例(5 倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热 5-10 分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm 离心 2-5 分钟,取上清直接上样电泳即可。
注意事项:
1、 聚丙烯酰胺凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在 30kd 左右,胶浓度为 12%时,约在 20kd 左右,胶浓度为 15%时,大概在 10kd。请根据自己目的条带来判断电泳时间。
2、 本试剂因含 DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH 值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
说明书下载.pdf货号
产品规格
售价
备注
BN20542-5ml
5ml
¥100.00
常用生化试剂
产品描述
货号
产品规格
售价
备注
JPB542-5ml
5ml
¥100.00
常用生化试剂
产品描述
货号
产品规格
售价
备注
JPM020-10ml
10ml
¥150.00
缓冲液
产品描述
货号:JPM020
规格:10ml
保存:-20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。
产品简介:本产品适用于 SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为 SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS 还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT 可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
使用说明:
1、 请按每 40 微升蛋白样品加入 10 微升上样缓冲液的比例(5 倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、 混匀后,100℃水浴加热 5-10 分钟,使蛋白变性。
3、 冷却至室温后,10000-14000rpm 离心 2-5 分钟,取上清直接上样电泳即可。
注意事项:
1、 聚丙烯酰胺凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在 30kd 左右,胶浓度为 12%时,约在 20kd 左右,胶浓度为 15%时,大概在 10kd。请根据自己目的条带来判断电泳时间。
2、 本试剂因含 DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH 值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
说明书下载.pdf上海金畔生物科技有限公司提供4×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1015-10ml,可以访问官网了解更多产品信息。
4×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1015-10ml
· 英文名称 : SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT)
· 储存条件 : -20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。
· 单位 : 支
产品简介:
本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
使用说明:
1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
注意事项:
1、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
| 浓度 | |
| 规格 | 10ml |
| 保存 | -20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。 |
上海金畔生物科技有限公司提供1M DTT溶液/二硫苏糖醇,索莱宝,D1070-5ml,可以访问官网了解更多产品信息。
1M DTT溶液/二硫苏糖醇,索莱宝,D1070-5ml
· 别名 : 二硫苏糖醇;1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-2,3-丁二醇;
· 英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol
· 分子式 : C4H10O2S2
· 分子量 : 154.25
· 储存条件 : -20 ºC保存 1年
· 纯度 : ≥97%(滴定)
· 外观(性状) : 白色针状或白色颗粒
· 单位 : 瓶
DTT即DL-Dithiothreitol,中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25,纯度>99%。常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近,但DTT价格略高一些。是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。
| 浓度 | |
| 规格 | 5ml |
| 保存 | -20 ºC保存 1年 |
上海金畔生物科技有限公司提供1M DTT溶液/二硫苏糖醇,索莱宝,D1070-1ml,可以访问官网了解更多产品信息。
1M DTT溶液/二硫苏糖醇,索莱宝,D1070-1ml
· 别名 : 二硫苏糖醇;1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-2,3-丁二醇;
· 英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol
· 分子式 : C4H10O2S2
· 分子量 : 154.25
· 储存条件 : -20 ºC保存 1年
· 纯度 : ≥97%(滴定)
· 外观(性状) : 白色针状或白色颗粒
· 单位 : 瓶
DTT即DL-Dithiothreitol,中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25,纯度>99%。常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近,但DTT价格略高一些。是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。
| 浓度 | |
| 规格 | 1ml |
| 保存 | -20 ºC保存 1年 |
上海金畔生物科技有限公司提供二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-100g CAS : 3483-12-3,可以访问官网了解更多产品信息。
二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-100g CAS : 3483-12-3
· 别名 : 1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇; 1,4-二巯基-2,3-丁二醇;
· 英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol; Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol
· CAS : 3483-12-3
· 分子式 : C4H10O2S2
· 分子量 : 154.25
· 储存条件 : 2-8°C
· 纯度 : ≥97%(滴定)
· 外观(性状) : 白色针状或白色颗粒、粉末
· 单位 : 瓶
二硫苏糖醇是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。
| 浓度 | |
| 规格 | 100g |
| 保存 | 2-8°C |
上海金畔生物科技有限公司提供二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-25g CAS : 3483-12-3,可以访问官网了解更多产品信息。
二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-25g CAS : 3483-12-3
· 别名 : 1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇; 1,4-二巯基-2,3-丁二醇;
· 英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol; Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol
· CAS : 3483-12-3
· 分子式 : C4H10O2S2
· 分子量 : 154.25
· 储存条件 : 2-8°C
· 纯度 : ≥97%(滴定)
· 外观(性状) : 白色针状或白色颗粒、粉末
· 单位 : 瓶
二硫苏糖醇是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。
| 浓度 | |
| 规格 | 25g |
| 保存 | 2-8°C |
上海金畔生物科技有限公司提供二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-5g CAS : 3483-12-3,可以访问官网了解更多产品信息。
二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-5g CAS : 3483-12-3
· 别名 : 1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇; 1,4-二巯基-2,3-丁二醇;
· 英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol; Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol
· CAS : 3483-12-3
· 分子式 : C4H10O2S2
· 分子量 : 154.25
· 储存条件 : 2-8°C
· 纯度 : ≥97%(滴定)
· 外观(性状) : 白色针状或白色颗粒、粉末
· 单位 : 瓶
二硫苏糖醇是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。
| 浓度 | |
| 规格 | 5g |
| 保存 | 2-8°C |
上海金畔生物科技有限公司提供二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-1g CAS : 3483-12-3,可以访问官网了解更多产品信息。
二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-1g CAS : 3483-12-3
· 别名 : 1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇; 1,4-二巯基-2,3-丁二醇;
· 英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol; Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol
· CAS : 3483-12-3
· 分子式 : C4H10O2S2
· 分子量 : 154.25
· 储存条件 : 2-8°C
· 纯度 : ≥97%(滴定)
· 外观(性状) : 白色针状或白色颗粒、粉末
· 单位 : 瓶
二硫苏糖醇是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。
| 浓度 | |
| 规格 | 1g |
| 保存 | 2-8°C |
上海金畔生物科技有限公司提供2×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1018-10ml,可以访问官网了解更多产品信息。
2×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1018-10ml
· 别名 : 2×蛋白上样缓冲液(含DTT)
· 英文名称 : SDS-PAGE loading buffer,2×(with DTT)
· 储存条件 : -20℃保存
保存:-20℃保存,自发货之日起至少12个月有效。开封后建议分装冻存,避免反复冻融。
产品简介:
本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
使用说明:
1.请按每20微升蛋白样品加入20微升上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。
2.混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3.冷却至室温后,离心数秒后,混匀再离心30秒取上清直接上样即可。
注意事项:
1.聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度12%时,约在20kd左右,胶浓度15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2.本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
| 浓度 | |
| 规格 | 10ml |
| 保存 | -20℃保存 |
上海金畔生物科技有限公司提供5×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1040-10ml,可以访问官网了解更多产品信息。
5×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1040-10ml
· 英文名称 : SDS-PAGE loading buffer,5×(with DTT)
· 储存条件 : -20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。
· 单位 : 支
5×蛋白上样缓冲液(含DTT)产品简介:
本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
5×蛋白上样缓冲液(含DTT)使用说明:
1、请按每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
5×蛋白上样缓冲液(含DTT)注意事项:
1、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
| 浓度 | |
| 规格 | 10ml |
| 保存 | -20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。 |
货号
产品规格
售价
备注
1758-9030-100g原装
100g原装
¥3150.00
常用生化试剂
1758-9030-25g原装
25g原装
¥1050.00
常用生化试剂
1758-9030-1g原装
1g原装
¥80.00
常用生化试剂
1758-9030-10g原装
10g原装
¥450.00
常用生化试剂
1758-9030-5g原装
5g原装
¥260.00
常用生化试剂
产品描述
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

联系电话:
简要概述
PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒,(ATP)在细胞能量学,代谢调节和细胞信号传导中起重要作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供快速,简单和均匀的发光检测,用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。 可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行测定。 该测定的高灵敏度允许在许多生物系统,环境样品和食物中检测ATP。 该PhosphoWorks ATP检测试剂盒不使用DTT,并且具有长达4小时的稳定发光信号。 它具有稳定的发光,不需要混合或分离,并配制成具有 小的手动操作时间。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒。
产品说明书
操作步骤
简要概述
1.用测试化合物(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)制备细胞(样品)
2.加入等体积的ATP工作溶液(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度
制备工作溶液
1.将10 mL反应缓冲液(组分C)转移到ATP传感器(组分B)中并充分混合。
2.将20μLATP监测酶(组分A)加入到组分B + C的瓶中并充分混合以制备ATP工作溶液。 注意:避免来自外源生物来源的潜在ATP污染。
有关细胞样品制备的指南(点击查看)
样品实验方案
1.运行ATP测定:
1.1用测试化合物处理细胞(或样品),在96孔板中加入10μL10X化合物,或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相应量的化合物缓冲液。
1.2将细胞板在37℃,5%CO 2培养箱中孵育所需的一段时间,例如24,48或96小时。
1.3向每个孔中加入100μL(96孔板)或25μL(384孔板)的ATP工作溶液。
1.4在室温下孵育10-20分钟。
1.5用标准发光计监测发光强度。
2.生成标准ATP校准曲线:
如果需要计算样品中ATP的jue对量,则应与上述分析一起生成ATP标准曲线。
2.1通过包含不含ATP的样品(作为对照)在含有0.1%BSA的PBS缓冲液中制备ATP系列稀释液以测量背景发光。注意:通常ATP浓度范围为0.1 nM至1μM是合适的。
2.2将相同量的稀释的ATP溶液加入空板中(对于96孔板为100μL或对于384孔板为25μL)。
2.3加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的ATP工作溶液。
2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。
2.5用标准发光计记录发光强度。
2.6生成ATP标准曲线。
数据分析
从空白标准孔获得的读数(RLU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算ATP样品。 我们建议使用在线线性回归计算器,该计算器可在以下位置找到:

图1.使用NOVOstar板读数器(BMG Labtech)在96孔白板上用PhosphoWorks TM发光ATP测定试剂盒* DTT-Free *测量ATP剂量响应。 该试剂盒可在20分钟内检测到(3 pmole /孔)0.03 nM ATP。 积分时间为1秒。 半衰期超过2小时。
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
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货号 | 21612 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 1 Plate | 价格 | 1944 | |
| Ex (nm) | Em (nm) | |||
| 分子量 | 溶剂 | |||
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒,腺苷三磷酸(ATP)在细胞能量学,代谢调节和细胞信号传导中起重要作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供快速,简单和均匀的发光检测,用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。 可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行测定。 该测定的高灵敏度允许在许多生物系统,环境样品和食物中检测ATP。 该PhosphoWorks ATP检测试剂盒不使用DTT,并且具有长达4小时的稳定发光信号。 它具有稳定的发光,不需要混合或分离,并配制成具有最小的手动操作时间。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒。
适用仪器
| 发光酶标仪 | |
| 推荐孔板: | 白色孔板 |
产品说明书
操作步骤
简要概述
1.用测试化合物(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)制备细胞(样品)
2.加入等体积的ATP工作溶液(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度
制备工作溶液
1.将10 mL反应缓冲液(组分C)转移到ATP传感器(组分B)中并充分混合。
2.将20μLATP监测酶(组分A)加入到组分B + C的瓶中并充分混合以制备ATP工作溶液。 注意:避免来自外源生物来源的潜在ATP污染。
有关细胞样品制备的指南(点击查看)
样品实验方案
1.运行ATP测定:
1.1用测试化合物处理细胞(或样品),在96孔板中加入10μL10X化合物,或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相应量的化合物缓冲液。
1.2将细胞板在37℃,5%CO 2培养箱中孵育所需的一段时间,例如24,48或96小时。
1.3向每个孔中加入100μL(96孔板)或25μL(384孔板)的ATP工作溶液。
1.4在室温下孵育10-20分钟。
1.5用标准发光计监测发光强度。
2.生成标准ATP校准曲线:
如果需要计算样品中ATP的绝对量,则应与上述分析一起生成ATP标准曲线。
2.1通过包含不含ATP的样品(作为对照)在含有0.1%BSA的PBS缓冲液中制备ATP系列稀释液以测量背景发光。注意:通常ATP浓度范围为0.1 nM至1μM是合适的。
2.2将相同量的稀释的ATP溶液加入空板中(对于96孔板为100μL或对于384孔板为25μL)。
2.3加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的ATP工作溶液。
2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。
2.5用标准发光计记录发光强度。
2.6生成ATP标准曲线。
数据分析
从空白标准孔获得的读数(RLU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算ATP样品。 我们建议使用在线线性回归计算器,该计算器可在以下位置找到:

图1.使用NOVOstar板读数器(BMG Labtech)在96孔白板上用PhosphoWorks TM发光ATP测定试剂盒* DTT-Free *测量ATP剂量响应。 该试剂盒可在20分钟内检测到(3 pmole /孔)0.03 nM ATP。 积分时间为1秒。 半衰期超过2小时。
参考文献
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