蛋白上样缓冲液(含DTT) 5X 货号: BN27020

蛋白上样缓冲液(含DTT) 5X
蛋白上样缓冲液(含DTT) 5X       货号: BN27020蛋白上样缓冲液(含DTT) 5X       货号: BN27020蛋白上样缓冲液(含DTT) 5X       货号: BN27020

  • 产品货号:
    BN27020
  • 中文名称:
    蛋白上样缓冲液(含DTT) 5X
  • 品牌:
    Biorigin

  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • BN27020-10ml

    10ml

    ¥110.00

  • BN27020-1ml

    1ml

    ¥20.00

  • BN27020-25ml

    25ml

    ¥180.00

产品描述

保存:-20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。

产品简介:

本产品适用于 SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为 SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完 全被 SDS 掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS 还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的 二级和三级结构。DTT 可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。

使用说明: 

1、请按每 40 微升蛋白样品加入 10 微升上样缓冲液的比例(5 倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。 

2、混匀后,100℃水浴加热 5-10 分钟,使蛋白变性。 

3、冷却至室温后,10000-14000rpm 离心 2-5 分钟,取上清直接上样电泳即可。

注意事项: 

1、 聚丙烯酰胺凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在 30kd 左右,胶浓度为 12%时,约在 20kd 左右,胶浓度为 15%时,大概在 10kd。请根据自己目的条带来判断电泳时间。 

2、 本试剂因含 DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

3、 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH 值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。

  • 蛋白上样缓冲液(含DTT) 5X       货号: BN27020 说明书下载.pdf

5×蛋白上样缓冲液(含DTT) 货号: DEM020

5×蛋白上样缓冲液(含DTT)
5×蛋白上样缓冲液(含DTT)       货号: JPM0205×蛋白上样缓冲液(含DTT)       货号: JPM0205×蛋白上样缓冲液(含DTT)       货号: JPM020

  • 产品货号:
    JPM020
  • 中文名称:
    5×蛋白上样缓冲液(含DTT)
  • 品牌:
    Jinpan

  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • JPM020-10ml

    10ml

    ¥150.00

    缓冲液

产品描述

货号:JPM020

规格:10ml

保存:-20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。

产品简介:本产品适用于 SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为 SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS 可与蛋白质结合使蛋白质-SDS 复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS 还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT 可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。

使用说明:

1、 请按每 40 微升蛋白样品加入 10 微升上样缓冲液的比例(5 倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。

2、 混匀后,100℃水浴加热 5-10 分钟,使蛋白变性。

3、 冷却至室温后,10000-14000rpm 离心 2-5 分钟,取上清直接上样电泳即可。

注意事项:

1、 聚丙烯酰胺凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在 30kd 左右,胶浓度为 12%时,约在 20kd 左右,胶浓度为 15%时,大概在 10kd。请根据自己目的条带来判断电泳时间。

2、 本试剂因含 DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、 蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH 值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。

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4×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1015-10ml

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4×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1015-10ml

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索莱宝

·  英文名称 : SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT)

·  储存条件 : -20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。

·  单位 : 支

 

产品简介:

本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDSDTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。

使用说明:

1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。

2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。

3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。

注意事项:

1、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。

2、本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。

浓度
规格 10ml
保存 -20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。

1M DTT溶液/二硫苏糖醇,索莱宝,D1070-5ml

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索莱宝

·  别名 : 二硫苏糖醇;1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-2,3-丁二醇;

·  英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol

·  分子式 : C4H10O2S2

·  分子量 : 154.25

·  储存条件 : -20 ºC保存 1

·  纯度 : ≥97%(滴定)

·  外观(性状) : 白色针状或白色颗粒

·  单位 : 瓶

 

DTT即DL-Dithiothreitol,中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25,纯度>99%。常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近,但DTT价格略高一些。是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。

浓度
规格 5ml
保存 -20 ºC保存 1年

1M DTT溶液/二硫苏糖醇,索莱宝,D1070-1ml

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索莱宝

·  别名 : 二硫苏糖醇;1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-2,3-丁二醇;

·  英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol;Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol

·  分子式 : C4H10O2S2

·  分子量 : 154.25

·  储存条件 : -20 ºC保存 1

·  纯度 : ≥97%(滴定)

·  外观(性状) : 白色针状或白色颗粒

·  单位 : 瓶

 

DTT即DL-Dithiothreitol,中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25,纯度>99%。常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近,但DTT价格略高一些。是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。

浓度
规格 1ml
保存 -20 ºC保存 1年

二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-100g CAS : 3483-12-3

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二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-100g CAS : 3483-12-3

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索莱宝

·  别名 : 1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇; 1,4-二巯基-2,3-丁二醇;

·  英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol; Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol

·  CAS : 3483-12-3

·  分子式 : C4H10O2S2

·  分子量 : 154.25

·  储存条件 : 2-8°C

·  纯度 : ≥97%(滴定)

·  外观(性状) : 白色针状或白色颗粒、粉末

·  单位 : 瓶

 

二硫苏糖醇是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。

浓度
规格 100g
保存 2-8°C

二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-25g CAS : 3483-12-3

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二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-25g CAS : 3483-12-3

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索莱宝

·  别名 : 1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇; 1,4-二巯基-2,3-丁二醇;

·  英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol; Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol

·  CAS : 3483-12-3

·  分子式 : C4H10O2S2

·  分子量 : 154.25

·  储存条件 : 2-8°C

·  纯度 : ≥97%(滴定)

·  外观(性状) : 白色针状或白色颗粒、粉末

·  单位 : 瓶

 

二硫苏糖醇是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。

浓度
规格 25g
保存 2-8°C

二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-5g CAS : 3483-12-3

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二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-5g CAS : 3483-12-3

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索莱宝

·  别名 : 1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇; 1,4-二巯基-2,3-丁二醇;

·  英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol; Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol

·  CAS : 3483-12-3

·  分子式 : C4H10O2S2

·  分子量 : 154.25

·  储存条件 : 2-8°C

·  纯度 : ≥97%(滴定)

·  外观(性状) : 白色针状或白色颗粒、粉末

·  单位 : 瓶

 

二硫苏糖醇是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。

浓度
规格 5g
保存 2-8°C

二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-1g CAS : 3483-12-3

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二硫苏糖醇 DTT,索莱宝,D8220-1g CAS : 3483-12-3

询价
索莱宝

·  别名 : 1,4-二硫代-DL-苏糖醇;1,4-二巯基-DL-苏糖醇; 1,4-二巯基-2,3-丁二醇;

·  英文名称 : 1,4-Dithio-DL-threitol; Threo-1,4-dimercapto-2,3-butandiol

·  CAS : 3483-12-3

·  分子式 : C4H10O2S2

·  分子量 : 154.25

·  储存条件 : 2-8°C

·  纯度 : ≥97%(滴定)

·  外观(性状) : 白色针状或白色颗粒、粉末

·  单位 : 瓶

 

二硫苏糖醇是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。

浓度
规格 1g
保存 2-8°C

2×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1018-10ml

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2×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1018-10ml

询价
索莱宝

·  别名 : 2×蛋白上样缓冲液(含DTT

·  英文名称 : SDS-PAGE loading buffer,2×(with DTT)

·  储存条件 : -20℃保存

 

保存:-20℃保存,自发货之日起至少12个月有效。开封后建议分装冻存,避免反复冻融。

产品简介:    

本产品适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDSDTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。

使用说明:    

1.请按每20微升蛋白样品加入20微升上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。    

2.混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。    

3.冷却至室温后,离心数秒后,混匀再离心30秒取上清直接上样即可。 

 注意事项:    

1.聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度12%时,约在20kd左右,胶浓度15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。    

2.本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。

浓度
规格 10ml
保存 -20℃保存

5×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1040-10ml

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5×蛋白上样缓冲液(含DTT),索莱宝,P1040-10ml

询价
索莱宝

·  英文名称 : SDS-PAGE loading buffer,5×(with DTT)

·  储存条件 : -20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。

·  单位 : 支

 

5×蛋白上样缓冲液(含DTT)产品简介:
本产品适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDSDTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异;SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
5×蛋白上样缓冲液(含DTT)使用说明:
1、请按每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高,可用双蒸水稀释。
2、混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。
3、冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
5×蛋白上样缓冲液(含DTT)注意事项:
1、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右, 胶浓度为12%时,约在20kd左右,胶浓度为15%时,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
2、本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂,PH值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液可能会呈现深棕色,不影响产品使用。

浓度
规格 10ml
保存 -20℃保存,建议分装冻存,避免反复冻融,自发货之日起至少 12 个月有效。

DTT 二硫苏糖醇 货号: 1758-9030

DTT 二硫苏糖醇
DTT 二硫苏糖醇       货号: 1758-9030DTT 二硫苏糖醇       货号: 1758-9030DTT 二硫苏糖醇       货号: 1758-9030

  • 产品货号:
    1758-9030
  • 中文名称:
    DTT 二硫苏糖醇
  • 英文名称:
    DTT
  • CAS号:
    27565-41-9
  • 品牌:
    INALCO

  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • 1758-9030-100g原装

    100g原装

    ¥3150.00

    常用生化试剂

  • 1758-9030-25g原装

    25g原装

    ¥1050.00

    常用生化试剂

  • 1758-9030-1g原装

    1g原装

    ¥80.00

    常用生化试剂

  • 1758-9030-10g原装

    10g原装

    ¥450.00

    常用生化试剂

  • 1758-9030-5g原装

    5g原装

    ¥260.00

    常用生化试剂

产品描述

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free* 货号21612-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free*  货号21612
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1 plate
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free*

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free*  货号21612

联系电话:

简要概述

        PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒,(ATP)在细胞能量学,代谢调节和细胞信号传导中起重要作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供快速,简单和均匀的发光检测,用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。 可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行测定。 该测定的高灵敏度允许在许多生物系统,环境样品和食物中检测ATP。 该PhosphoWorks ATP检测试剂盒不使用DTT,并且具有长达4小时的稳定发光信号。 它具有稳定的发光,不需要混合或分离,并配制成具有 小的手动操作时间。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒。 

产品说明书

操作步骤

简要概述

1.用测试化合物(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)制备细胞(样品)
2.加入等体积的ATP工作溶液(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度

制备工作溶液

1.将10 mL反应缓冲液(组分C)转移到ATP传感器(组分B)中并充分混合。

2.将20μLATP监测酶(组分A)加入到组分B + C的瓶中并充分混合以制备ATP工作溶液。 注意:避免来自外源生物来源的潜在ATP污染。

有关细胞样品制备的指南(点击查看)

样品实验方案

1.运行ATP测定:

1.1用测试化合物处理细胞(或样品),在96孔板中加入10μL10X化合物,或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相应量的化合物缓冲液。

1.2将细胞板在37℃,5%CO 2培养箱中孵育所需的一段时间,例如24,48或96小时。

1.3向每个孔中加入100μL(96孔板)或25μL(384孔板)的ATP工作溶液。

1.4在室温下孵育10-20分钟。

1.5用标准发光计监测发光强度。

2.生成标准ATP校准曲线:

        如果需要计算样品中ATP的jue对量,则应与上述分析一起生成ATP标准曲线。

2.1通过包含不含ATP的样品(作为对照)在含有0.1%BSA的PBS缓冲液中制备ATP系列稀释液以测量背景发光。注意:通常ATP浓度范围为0.1 nM至1μM是合适的。

2.2将相同量的稀释的ATP溶液加入空板中(对于96孔板为100μL或对于384孔板为25μL)。

2.3加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的ATP工作溶液。

2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。

2.5用标准发光计记录发光强度。

2.6生成ATP标准曲线。

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RLU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算ATP样品。 我们建议使用在线线性回归计算器,该计算器可在以下位置找到:

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free*  货号21612

图1.使用NOVOstar板读数器(BMG Labtech)在96孔白板上用PhosphoWorks TM发光ATP测定试剂盒* DTT-Free *测量ATP剂量响应。 该试剂盒可在20分钟内检测到(3 pmole /孔)0.03 nM ATP。 积分时间为1秒。 半衰期超过2小时。

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free* 货号21612-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free*

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free*

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free*    货号21612 货号 21612 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 Plate 价格 1944
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒,腺苷三磷酸(ATP)在细胞能量学,代谢调节和细胞信号传导中起重要作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供快速,简单和均匀的发光检测,用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。 可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行测定。 该测定的高灵敏度允许在许多生物系统,环境样品和食物中检测ATP。 该PhosphoWorks ATP检测试剂盒不使用DTT,并且具有长达4小时的稳定发光信号。 它具有稳定的发光,不需要混合或分离,并配制成具有最小的手动操作时间。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒。 

 

适用仪器


发光酶标仪  
推荐孔板: 白色孔板

产品说明书

操作步骤

简要概述

1.用测试化合物(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)制备细胞(样品)
2.加入等体积的ATP工作溶液(100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板)
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度

 

制备工作溶液

1.将10 mL反应缓冲液(组分C)转移到ATP传感器(组分B)中并充分混合。

2.将20μLATP监测酶(组分A)加入到组分B + C的瓶中并充分混合以制备ATP工作溶液。 注意:避免来自外源生物来源的潜在ATP污染。

有关细胞样品制备的指南(点击查看)

 

样品实验方案

1.运行ATP测定:

1.1用测试化合物处理细胞(或样品),在96孔板中加入10μL10X化合物,或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相应量的化合物缓冲液。

1.2将细胞板在37℃,5%CO 2培养箱中孵育所需的一段时间,例如24,48或96小时。

1.3向每个孔中加入100μL(96孔板)或25μL(384孔板)的ATP工作溶液。

1.4在室温下孵育10-20分钟。

1.5用标准发光计监测发光强度。

 

2.生成标准ATP校准曲线:

        如果需要计算样品中ATP的绝对量,则应与上述分析一起生成ATP标准曲线。

2.1通过包含不含ATP的样品(作为对照)在含有0.1%BSA的PBS缓冲液中制备ATP系列稀释液以测量背景发光。注意:通常ATP浓度范围为0.1 nM至1μM是合适的。

2.2将相同量的稀释的ATP溶液加入空板中(对于96孔板为100μL或对于384孔板为25μL)。

2.3加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的ATP工作溶液。

2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。

2.5用标准发光计记录发光强度。

2.6生成ATP标准曲线。

 

数据分析

        从空白标准孔获得的读数(RLU)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算ATP样品。 我们建议使用在线线性回归计算器,该计算器可在以下位置找到:

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free*    货号21612

图1.使用NOVOstar板读数器(BMG Labtech)在96孔白板上用PhosphoWorks TM发光ATP测定试剂盒* DTT-Free *测量ATP剂量响应。 该试剂盒可在20分钟内检测到(3 pmole /孔)0.03 nM ATP。 积分时间为1秒。 半衰期超过2小时。

 

参考文献

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说明书
PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free*.pdf