Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 红色荧光,适合微孔板检测

简要概述

Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 *红色荧光,适合微孔板检测*是通过检测PS的翻转来测定细胞凋亡。在凋亡细胞中，PS从胞内移位到胞外表面，因此PS出现在细胞的外表面可以作为细胞凋亡的起始或者中间阶段的通用指示器，也可以通过其形态学改变来测定。该试剂盒使用我们独有的红色荧光Apopxin PS传感器特异性的结合PS，其亲和性高于Annexin V(Kd<10nM)。该试剂盒使用的PS传感器结合膜上的PS后，发出红色的荧光。因为与PS的高亲和性，该试剂盒比其它基于Annexin-V，仅能用荧光显微镜和流式检测凋亡的试剂盒更稳定，并且本试剂盒除上述两种仪器外还能使用荧光酶标仪。

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
2.加入等量的Apopxin™Red工作溶液
3.在室温下孵育1小时
4.监视Ex / Em = 590/630 nm（截止= 610 nm）的荧光强度（底部读取模式）或使用带有Texas Red滤光片的荧光显微镜

溶液配制

工作溶液配制

将10 µL Apopxin™Red（组分A）加入1 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成Apopxin™Red工作溶液。

操作步骤

1.通过向PBS或所需的缓冲液中加入10X /孔（96孔板）或2.5 µL /孔（384孔板）的10X测试化合物储备溶液来处理细胞。 对于空白孔（不含细胞的培养基），添加相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO2、37°C的培养箱中孵育所需的时间（对于喜树碱处理过的Jurkat细胞，需要4-6小时）以诱导凋亡。

3.在每个孔中加入100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Apopxin™Red工作溶液。

4.在避光条件下，于室温下孵育细胞板至少1小时。

5.以800 rpm的速度离心细胞板（特别是非粘附细胞）2分钟（制动）。

6.使用荧光酶标仪（Ext / Em = 590/630 nm（截止= 610 nm））或使用带有TexasRed®滤光片的荧光显微镜对图像池进行荧光强度监测。

图示

图1.用Cell Meter™磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒染色的Costar黑壁/透明底部96孔板中Jurkat细胞的荧光图像。 不使用（左）或用20μM喜树碱（右）处理Jurkat细胞5小时。 使用具有Texas Red通道的荧光显微镜测量荧光强度。

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 绿色荧光 适合于流式细胞检测

简要概述

        Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞凋亡检测试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 *绿色荧光 适合于流式细胞检测*通过对磷脂酰丝氨酸(PS)进行检测，而实现细胞凋亡的检测。在凋亡细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）从胞内移位到胞外表面，因此PS出现在细胞的外表面可以作为细胞凋亡的起始或者中间阶段的通用指示器，也可以通过其形态学改变来测定。本试剂盒实验使用我们独有的Apopxin PS传感器，它是一种小分子PS传感器。一旦与膜上PS结合，发出绿色荧光。这种特殊的检测试剂盒 适合通过流式细胞仪的FITC通道（绿色荧光）检测细胞凋亡。目前商业化各种Annexin V凋亡检测试剂盒一般是将Annexin V进行传统的荧光团（FITC、Cy3）标记后作为荧光探针，通过检测细胞凋亡早期细胞膜外翻的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS），从而实现对细胞凋亡的检测。然而目前的检测受到荧光颜色、荧光强度和检测灵敏度等因素的限制。Cell Meter Phosphatidylserine Apoptosis Assay Kit则采用Apopxin PS Sensor代替了传统的Annexin V，前者能特异性的结合PS，并且其亲和力高于Annexin V，因此其稳定性和灵敏度更高，同时其偶联的荧光基团具有更好的光稳定性和强度，因此检测效果更灵敏快捷，尤其适合自动化和高通量分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
2.添加Apopxin Green检测溶液
3.在室温下孵育20-60分钟
4.使用FL1通道的流式细胞仪分析细胞（Ex / Em = 490/525 nm）

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用喜树碱处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。注意：对粘附细胞的Apopxin 结合流式细胞术分析不是常规检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。

2.离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。

4.将2μLApopxin Green（组分A）加入细胞中。

5.可选：将2μL100X碘化丙啶（组分C）加入细胞中，用于坏死细胞。

6.在室温下孵育20至60分钟，避光。

7.可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300μL的测定缓冲液（组分B）以增加体积。

8.使用具有FL1通道的流式细胞仪（Ex / Em = 490 / 525nm）监测荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时，使用FL2通道测量细胞活力。

数据分析

        在活的非凋亡细胞中，Apopxin Green检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，Apopxin Green与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。

Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合流式细胞检测

简要概述

        Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒 *红色荧光 适合流式细胞检测*通过对磷脂酰丝氨酸(PS)进行检测，而实现细胞凋亡的检测。在凋亡细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）从胞内移位到胞外表面，因此PS出现在细胞的外表面可以作为细胞凋亡的起始或者中间阶段的通用指示器，也可以通过其形态学改变来测定。该试剂盒采用独有的红色荧光染料（Texas Red的优越替代物，使用Texas Red通道检测）标记的Annexin V检测凋亡细胞。试剂盒内组分经过特别优化，尤其适合于流式细胞分析。目前商业化各种Annexin V凋亡检测试剂盒一般是将Annexin V进行传统的荧光团（FITC、Cy3）标记后作为荧光探针，通过检测细胞凋亡早期细胞膜外翻的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS），从而实现对细胞凋亡的检测。然而目前的检测受到荧光颜色、荧光强度和检测灵敏度等因素的限制。Cell Meter Annexin V Binding Apoptosis Assay Kit系列产品分别采用了mFluor Violet和iFluor荧光染料，这种染料比传统的FITC、Cy3等具有更高的荧光强度、更低的荧光背景和更 的光稳定性，因此检测效果更灵敏稳定；而iFluor系列染料在保证上述优势的同时，均在405nm处激发，尤其适合用于多色分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。 

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样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
2.添加Annexin V-iFluor 594检测溶液
3.在室温下孵育30-60分钟
4.使用具有Ex / Em = 590 / 620nm滤光片组的流式细胞仪或具有TRITC或Texas Red通道的荧光显微镜分析细胞

操作步骤

使用Annexin V-iFluor 594制备和孵育细胞：

1.用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。

2.离心细胞，得到1-5×105个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。

4.将2μL膜联蛋白V-iFluor 594（组分A）加入细胞中。

5.在室温下孵育30至60分钟，避光。

6.在使用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，添加300μL分析缓冲液（组分B）以增加体积。

7.使用具有Ex / Em = 590 / 620nm滤光器组的流式细胞仪或具有TRITC或Texas Red通道的荧光显微镜监测荧光强度。

使用流式细胞仪分析：

使用流式细胞仪在Ex / Em = 590 / 620nm处定量膜联蛋白V-iFluor 594结合。 注意：粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。 然而，Casciola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。 

使用荧光显微镜分析：

1.孵育后移取细胞悬液，用测定缓冲液冲洗1-2次，然后用测定缓冲液重悬细胞。

2.将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。 注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。 与Annexin V-iFluor 594孵育后，用测定缓冲液冲洗1-2次，并将测定缓冲液加回到盖玻片中。 在玻璃载玻片上翻转盖玻片并可视化细胞。 在与膜联蛋白V-iFluor 594孵育后，细胞也可以固定在2％甲醛中，并在显微镜下观察。

3.使用TRITC或Texas Red通道在荧光显微镜下用膜联蛋白V-iFluor 594分析凋亡细胞。 质膜上的橙色染色表明膜联蛋白V-iFluor 594与细胞表面上的PS结合。

数据分析

        在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白V-iFluor 594检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白V-iFluor 594与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，导致染色强度增加。

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 适合于流式细胞检测

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。 该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸（PS）的转运来检测细胞凋亡。在细胞凋亡中，PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标，可以在观察形态变化之前进行检测。该试剂盒中使用的我们专有的Apopxin PS探针是基于小分子的PS探针。 与膜PS结合后具有红色荧光。 使用流式细胞仪在Cy5通道（红色荧光）优化了此特定的检测试剂盒，以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 磷脂酰丝氨酸细胞凋亡检测试剂盒。

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1. 用测试化合物制备细胞（200 µL /样品）

2. 添加Apopxin 深红色测定溶液

3. 在室温下孵育30-60分钟

4. 使用具有FL4通道（Ex / Em = 647/660 nm的流式细胞仪）分析细胞

实验步骤

1.用测试化合物处理细胞所需的时间（喜树碱处理过的Jurkat细胞需要4-6小时）以诱导凋亡。 

2.离心细胞以获得1-5×10⁵细胞/管。

3.将细胞重悬于200 µL分析缓冲液（组分B）中。

4.向细胞中加入2 µL Apopxin 深红色溶液（组分A）。

5.避光保存，于室温下孵育30至60分钟。

6.可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300 µL分析缓冲液（组分B）以增加体积。

7.使用带有FL4通道的流式细胞仪（Ex / Em = 647/660 nm）检测荧光强度。

Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 绿色荧光,适合微孔板检测

简要概述

Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些 的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒 *绿色荧光,适合微孔板检测*是通过检测PS的翻转来测定细胞凋亡。在凋亡细胞中，PS从胞内移位到胞外表面，因此PS出现在细胞的外表面可以作为细胞凋亡的起始或者中间阶段的通用指示器，也可以通过其形态学改变来测定。该试剂盒使用我们独有的绿色荧光Apopxin PS传感器特异性的结合PS，其亲和性高于Annexin V(Kd<10nM)。该试剂盒使用的PS传感器结合膜上的PS后，发出绿色的荧光。因为与PS的高亲和性，该试剂盒比其它基于Annexin-V，仅能用荧光显微镜和流式检测凋亡的试剂盒更稳定，并且本试剂盒除上述两种仪器外还能使用荧光酶标仪。

点击查看细胞样品制备

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞（100 µL /孔/ 96孔板或25 µL /孔/ 384孔板）
2.加入等量的Apopxin™Green工作溶液
3.在室温下孵育1小时
4.在Ex / Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）或带有FITC滤光片的荧光显微镜下监控荧光强度（底部读取模式）

溶液配制

工作溶液配制

将10 µL 100X Apopxin™Green（组分A）添加到1 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成Apopxin™Green工作溶液。

操作步骤

1.通过向细胞制备缓冲液中加入10XL /孔（96孔板）的10X测试化合物溶液，以所需的测试化合物处理细胞，总体积为100μL/孔。对于384孔板，请在细胞制备缓冲液中使用5 µL /孔的5X测试化合物溶液，总体积为25 µL /孔。对于空白孔（不含细胞的培养基），添加相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在5％CO2、37°C的培养箱中孵育所需的时间（对于喜树碱处理过的Jurkat细胞，需要4-6小时）以诱导凋亡。

3.在每个孔中添加100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Apopxin™Green工作溶液。

4.在避光条件下，于室温下孵育细胞板至少1小时。

5.以800 rpm的速度离心细胞板（特别是非粘附细胞）2分钟（制动）。

6.使用荧光酶标仪（Ext / Em = 490/525 nm（Cutoff = 515 nm））或使用带有FITC滤光片的荧光显微镜的图像池监控荧光强度。

图示

图1.在Costar黑色壁/透明底部96孔板中，用Cell Meter™磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒染色的Jurkat细胞图像。 A：未经处理的对照细胞。 B：用20 µM喜树碱处理5小时的细胞。