蒸发球瓶,欣维尔,F791100 100ml

上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791100 100ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791100 100ml

询价
欣维尔

产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。

技术参数:

蒸发球瓶,欣维尔,F791100 100ml

材质 玻璃
颜色 无色
容积 100ml

多肽定制Neuromedin U-23, rat 编码 [117505-80-3]

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Neuromedin U-23, rat
编码 [117505-80-3]
别名 Neuromedin U-23, rat
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) YKVNEYQGPVAPSGGFFLFRPRN-NH2
序列(三字母缩写) H-Tyr-Lys-Val-Asn-Glu-Tyr-Gln-Gly-Pro-Val-Ala-Pro-Ser-Gly-Gly-Phe-Phe-Leu-Phe-Arg-Pro-Arg-Asn-NH2?(trifluoroacetate salt)
基本描述 Endogenous neurotensin-like neuropeptide from porcine spinal cord that exhibits contractile activity on guinea-pig ileum and induces hypotension in rats. It also acts as a potent modulator of dopamine D2 receptor agonist binding.
溶解度
分子量 2643
化学式 C124H180N34O31
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Neuromedin U-23, rat          编码     [117505-80-3]
Figures Neuromedin U-23, rat          编码     [117505-80-3]
Reference N. Minamino et al., BBRC, 156, 685 (1984)
C端
N端
化学桥

核酸染料 LDS 751 CAS 181885-68-7 货号17567-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

核酸染料 LDS 751 CAS 181885-68-7

核酸染料 LDS 751 CAS 181885-68-7

核酸染料 LDS 751 CAS 181885-68-7    货号17567 货号 17567 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 1164
Ex (nm) 561 Em (nm) 712
分子量 471.98 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号:17567

产品名称:核酸染料LDS 751

CAS:181885-68-7

规格:5mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:471.98

外观:深绿色粉末

溶剂:水或DMSO

激发波长(nm):543

发射波长(nm):712

 

产品介绍

LDS 751是一种渗透性细胞核酸染料,它在dsDNA上在〜543 nm处具有峰值激发,但可以用488 nm激光很好地激发。它是DRAQ 5 的替代产品,由于其最大的最大波长发射波长(〜712 nm),可用于多色分析。与LDS 751的dsDNA结合后,荧光增强程度约为20倍。LDS-751不进入细胞核,并与线粒体膜结合。因此,当使用LDS 751分析活细胞和使用LDS-751探针检测细胞时需要清楚,它不可用于细胞核检测。噻唑橙(RNA染料)和LDS-751(DNA染料)组合物已被用于将网织红细胞与其他细胞群分离。 LDS 751也已用于从有核细胞中分离红细胞。

点击查看光谱

 

参考文献

Exciton-controlled fluorescence: application to hybridization-sensitive fluorescent DNA probe
Authors: Okamoto A, Ikeda S, Kubota T, Yuki M, Yanagisawa H.
Journal: Nucleic Acids Symp Ser (Oxf) (2009): 49

Hybridization-sensitive fluorescent probe for long-term monitoring of intracellular RNA
Authors: Kubota T, Ikeda S, Yanagisawa H, Yuki M, Okamoto A.
Journal: Bioconjug Chem (2009): 1256

Interaction of LDS-751 with the drug-binding site of P-glycoprotein: a Trp fluorescence steady-state and lifetime study
Authors: Lugo MR, Sharom FJ.
Journal: Arch Biochem Biophys (2009): 17

Flow cytometric assessment of homeostatic aging of reticulocytes in rats
Authors: Wiczling P, Krzyzanski W.
Journal: Exp Hematol (2008): 119

Comparison of sample fixation and the use of LDS-751 or anti-CD45 for leukocyte identification in mouse whole blood for flow cytometry
Authors: Maes ML, Davidson LB, McDonagh PF, Ritter LS.
Journal: J Immunol Methods (2007): 79

Determination of the formation of dark state via depleted spontaneous emission in a complex solvated molecule
Authors: Guo X, Wang S, Xia A, Su H.
Journal: J Phys Chem A (2007): 5800

Cell cycle synchronization of Cupriavidus necator by continuous phasing measured via flow cytometry
Authors: Fritsch M, Starruss J, Loesche A, Mueller S, Bley T.
Journal: Biotechnol Bioeng (2005): 635

Exciton mobility and trapping in a MALDI matrix
Authors: Setz PD, Knochenmuss R.
Journal: J Phys Chem A (2005): 4030

Interaction of LDS-751 and rhodamine 123 with P-glycoprotein: evidence for simultaneous binding of both drugs
Authors: Lugo MR, Sharom FJ.
Journal: Biochemistry (2005): 14020

Quantitative evaluation of isothiocyanates as substrates and inhibitors of P-glycoprotein
Authors: Barecki-Roach M, Wang EJ, Johnson WW.
Journal: J Pharm Pharmacol (2003): 1251

说明书
核酸染料 LDS 751 CAS 181885-68-7.pdf

多肽定制Neuron Specific Peptide 编码

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Neuron Specific Peptide
编码
别名 Neuron Specific Peptide
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) DVSDGSAERRPYTRMGSGGLKLHCVHPANCPGGLMVT (Cys24 and 30 bridge)
序列(三字母缩写) H-Asp-Val-Ser-Asp-Gly-Ser-Ala-Glu-Arg-Arg-Pro-Tyr-Thr-Arg-Met-Gly-Ser-Gly-Gly-Leu-Lys-Leu-His-Cys-Val-His-Pro-Ala-Asn-Cys-Pro-Gly-Gly-Leu-Met-Val-Thr-OH (trifluoroacetate salt)(Cys24 and 30 bridge)
基本描述
溶解度
分子量 3870.5
化学式 C161H262N52O51S4
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Neuron Specific Peptide          编码
Figures Neuron Specific Peptide          编码
Reference L.B. Buck et al., Cell, 51, 127 (1987)
C端
N端
化学桥 (Cys24 and 30 bridge)

蒸发球瓶,欣维尔,F792450 50ml

上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F792450 50ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F792450 50ml

询价
欣维尔

产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。

技术参数:

蒸发球瓶,欣维尔,F792450 50ml

材质 玻璃
颜色 无色
容积 50ml

iFluor 660琥珀酰亚胺酯 货号71511-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 660琥珀酰亚胺酯

iFluor 660琥珀酰亚胺酯

iFluor 660琥珀酰亚胺酯    货号71511 货号 71511 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 9180
Ex (nm) 663 Em (nm) 678
分子量 1281.66 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

iFluor 660琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有异的水溶。它们的亲水使有机溶剂的使用小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特相匹配。

琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的佳试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应和选择。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。

点击查看光谱

点击查看实验方案

iFluor 660琥珀酰亚胺酯    货号71511

  • AAT Bioquest iFluor 染料干货锦集 你想了解的都在这里
  • 锦囊:iFluor 系列染料大集合

产品说明书

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。

注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得标记结果。

注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得标记效率,建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。

注意:溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 Cat#1023
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 Cat#1031
iFluor 594琥珀酰亚胺酯 Cat#1029

说明书
iFluor 660琥珀酰亚胺酯.pdf

蒸发球瓶,欣维尔,F791950 50ml

上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791950 50ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791950 50ml

询价
欣维尔

产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。

技术参数:

蒸发球瓶,欣维尔,F791950 50ml

材质 玻璃
颜色 无色
容积 50ml

多肽定制Neuron Specific Peptide 编码

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Neuron Specific Peptide
编码
别名 Neuron Specific Peptide
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) DVSDGSAERRPYTRMGSGGLKLHC VHPANCPGGLMVT
序列(三字母缩写) Asp-Val-Ser-Asp-Gly-Ser-Ala-Glu-Arg-Arg-Pro-Tyr-Thr-Arg-Met-Gly-Ser-Gly-Gly-Leu-Lys-Leu-His-Cys- Val-His-Pro-Ala-Asn-Cys-Pro-Gly-Gly-Leu-Met-Val-Thr
基本描述
溶解度
分子量 3996.7
化学式 C166H268N54O53S4
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Neuron Specific Peptide          编码
Figures Neuron Specific Peptide          编码
Reference
C端
N端
化学桥

iFluor 660琥珀酰亚胺酯 货号71561-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 660琥珀酰亚胺酯

iFluor 660琥珀酰亚胺酯

iFluor 660琥珀酰亚胺酯    货号71561 货号 71561 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mg 价格 15300
Ex (nm) 663 Em (nm) 678
分子量 1281.66 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

iFluor 660琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有 异的水溶 。它们的亲水 使有机溶剂的使用 小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记 能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显 于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的 便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特 相匹配。

琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的 试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应 和选择 。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活 染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应 试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。

点击查看光谱

点击查看实验方案

iFluor 660琥珀酰亚胺酯    货号71561

  • AAT Bioquest iFluor 染料干货锦集 你想了解的都在这里
  • 锦囊:iFluor 系列染料大集合

产品说明书

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。

注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得 标记结果。

注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得 标记效率,建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定 染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定 染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定 的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。

注意:溶液B /溶液的 摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 Cat#1023
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 Cat#1031
iFluor 594琥珀酰亚胺酯 Cat#1029

说明书
iFluor 660琥珀酰亚胺酯.pdf

多肽定制Neuron Specific Peptide 编码

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Neuron Specific Peptide
编码
别名 Neuron Specific Peptide
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) DVSDGSAERRPYTRMGSGGLKLHCVHPANCPGGLMVT(Cys24&Cys30 bridge)
序列(三字母缩写) Asp-Val-Ser-Asp-Gly-Ser-Ala-Glu-Arg-Arg-Pro-Tyr-Thr-Arg-Met-Gly-Ser-Gly-Gly-Leu-Lys-Leu-His-Cys-Val-His-Pro-Ala-Asn-Cys-Pro-Gly-Gly-Leu-Met-Val-Thr(Cys24&Cys30 bridge)
基本描述 Brain peptide that possesses both gastrointestinal and vasoconstrictor properties.
溶解度
分子量 3870.5
化学式 C161H262N52O51S4
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Neuron Specific Peptide          编码
Figures Neuron Specific Peptide          编码
Reference L.B. Buck et al., Cell, 51, 127 (1987)
C端
N端
化学桥 (Cys24&Cys30 bridge)

蒸发球瓶,欣维尔,F791450 50ml

上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791450 50ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791450 50ml

询价
欣维尔

产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。

技术参数:

蒸发球瓶,欣维尔,F791450 50ml

材质 玻璃
颜色 无色
容积 50ml

iFluor 750琥珀酰亚胺酯 货号71565-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 750琥珀酰亚胺酯

iFluor 750琥珀酰亚胺酯

iFluor 750琥珀酰亚胺酯    货号71565 货号 71565 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mg 价格 15300
Ex (nm) 757 Em (nm) 779
分子量 1416.83 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

iFluor 750琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记性能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的极便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特性相匹配。

琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。

iFluor 750琥珀酰亚胺酯    货号71565

点击查看光谱

点击查看实验方案

  • AAT Bioquest iFluor 染料干货锦集 你想了解的都在这里
  • 锦囊:iFluor 系列染料大集合

产品说明书

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。

注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得 标记结果。

注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得 标记效率,建议极终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定 染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定 染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定 的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。

注意:溶液B /溶液的 摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 750马来酰亚胺 Cat#1068
iFluor 750酰肼 Cat#1088
iFluor 750 胺 Cat#1079

说明书
iFluor 750琥珀酰亚胺酯.pdf

多肽定制Neuronostatin-13 (human, canine, porcine) 编码

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Neuronostatin-13 (human, canine, porcine)
编码
别名 Neuronostatin-13 (human, canine, porcine)
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) LRQFLQKSLAAAA-NH2
序列(三字母缩写) Leu-Arg-Gln-Phe-Leu-Gln-Lys-Ser-Leu-Ala-Ala-Ala-Ala-NH2
基本描述
溶解度
分子量 0
化学式
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Neuronostatin-13 (human, canine, porcine)          编码
Figures Neuronostatin-13 (human, canine, porcine)          编码
Reference
C端
N端
化学桥

蒸发球瓶,欣维尔,F792425 25ml

上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F792425 25ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F792425 25ml

询价
欣维尔

产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。

技术参数:

蒸发球瓶,欣维尔,F792425 25ml

材质 玻璃
颜色 无色
容积 25ml

iFluor 610琥珀酰亚胺酯 货号71516-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 610琥珀酰亚胺酯

iFluor 610琥珀酰亚胺酯

iFluor 610琥珀酰亚胺酯    货号71516 货号 71516 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 9180
Ex (nm) 610 Em (nm) 628
分子量 1253.52 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

iFluor 610琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有异的水溶。它们的亲水使有机溶剂的使用小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特相匹配。

琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的佳试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应和选择。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。

点击查看光谱

点击查看实验方案

iFluor 610琥珀酰亚胺酯    货号71516

  • AAT Bioquest iFluor 染料干货锦集 你想了解的都在这里
  • 锦囊:iFluor 系列染料大集合

产品说明书

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。

注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得 标记结果。

注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得 标记效率,建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定 染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定 染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定 的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。

注意:溶液B /溶液的 摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 Cat#1023
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 Cat#1031
iFluor 594琥珀酰亚胺酯 Cat#1029

说明书
iFluor 610琥珀酰亚胺酯.pdf

蒸发球瓶,欣维尔,F791925 25ml

上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791925 25ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791925 25ml

询价
欣维尔

产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。

技术参数:

蒸发球瓶,欣维尔,F791925 25ml

材质 玻璃
颜色 无色
容积 25ml

多肽定制Neuronostatin-13 (mouse, rat) 编码

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Neuronostatin-13 (mouse, rat)
编码
别名 Neuronostatin-13 (mouse, rat)
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) LRQFLQKSLAAAT-NH2
序列(三字母缩写) Leu-Arg-Gln-Phe-Leu-Gln-Lys-Ser-Leu-Ala-Ala-Ala-Thr-NH2
基本描述
溶解度
分子量 0
化学式
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Neuronostatin-13 (mouse, rat)          编码
Figures Neuronostatin-13 (mouse, rat)          编码
Reference
C端
N端
化学桥

iFluor 610琥珀酰亚胺酯 货号71566-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

iFluor 610琥珀酰亚胺酯

iFluor 610琥珀酰亚胺酯

iFluor 610琥珀酰亚胺酯    货号71566 货号 71566 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mg 价格 15300
Ex (nm) 610 Em (nm) 628
分子量 1253.52 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

iFluor 610琥珀酰亚胺酯是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。与常规的染料(如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7)相比,iFluor 染料具有更好的标记性能。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸的极便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特性相匹配。

琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。

点击查看光谱

点击查看实验方案

iFluor 610琥珀酰亚胺酯    货号71566

  • AAT Bioquest iFluor 染料干货锦集 你想了解的都在这里
  • 锦囊:iFluor 系列染料大集合

产品说明书

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。

注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注3:不纯抗体、牛血清白蛋白(BSA)或明胶稳定的抗体不会被很好标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得 标记结果。

注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得 标记效率,建议极终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。

 

3.确定 染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定 染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定 的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行结合反应:

4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。

注意:溶液B /溶液的 摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

 

相关产品

产品名称 货号
iFluor 488琥珀酰亚胺酯 Cat#1023
iFluor 647琥珀酰亚胺酯 Cat#1031
iFluor 594琥珀酰亚胺酯 Cat#1029

说明书
iFluor 610琥珀酰亚胺酯.pdf

蒸发球瓶,欣维尔,F791425 25ml

上海金畔生物科技有限公司提供蒸发球瓶,欣维尔,F791425 25ml,可以访问官网了解更多产品信息。
蒸发球瓶,欣维尔,F791425 25ml

询价
欣维尔

产品简介:短粗型“不倒翁”设计,既具有三角瓶的可直接放置桌上的优点,又可以抽真空,可用在旋蒸仪上作为蒸发瓶,同时该设计易于用钢铲从瓶底取出固体物质。

技术参数:

蒸发球瓶,欣维尔,F791425 25ml

材质 玻璃
颜色 无色
容积 25ml

多肽定制Neuronostatin-19 (human, canine, porcine) 编码

上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽,可以访问官网了解更多产品信息。

名称 Neuronostatin-19 (human, canine, porcine)
编码
别名 Neuronostatin-19 (human, canine, porcine)
纯度 80%,90%,95%,98%,99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列(单字母缩写) APSDPRLRQFLQKSLAAAA-NH2
序列(三字母缩写) Ala-Pro-Ser-Asp-Pro-Arg-Leu-Arg-Gln-Phe-Leu-Gln-Lys-Ser-Leu-Ala-Ala-Ala-Ala-NH2
基本描述
溶解度
分子量 0
化学式
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents Neuronostatin-19 (human, canine, porcine)          编码
Figures Neuronostatin-19 (human, canine, porcine)          编码
Reference
C端
N端
化学桥