Amplite 比色法丙二醛（MDA）定量试剂盒

	货号	10070	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	4584
	Ex (nm)	695	Em (nm)
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 比色法丙二醛（MDA）定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛（MDA）是脂质过氧化的天然副产物，被广泛用作确定氧化应激和自由基形成的关键指标。 历史上，MDA的测量依赖于与硫代巴比妥酸（TBA）的反应，得到可以在532nm下比色测量或在Ex / Em = 530nm / 550nm下荧光测定的化合物。 但该测定不是MDA特异性的，也是在90-100℃的酸性条件下进行的。 已经有许多商业ELISA试剂盒，这使得它更加昂贵和繁琐。 Amplite 比色丙二醛（MDA）定量试剂盒提供了快速，方便的MDA测量方法，无需TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应生成蓝色产物，用吸光度酶标仪在695nm处测量。 该测定法对MDA非常快速且特异，几乎不受其他醛的干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法丙二醛（MDA）定量试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的MDA标准品（50μL）
2.添加MDA Blue 原液（10μL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液（40μL）
5.监测OD增加至695nm

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. MDA标准溶液（100 mM）：
将100μLDdH2O加入MDA标准小瓶（组分C）中以制备100mM MDA储备溶液。

2.标准溶液

2.1MDA标准
将4μL100mMMDA标准品加入996μL稀释缓冲液（组分B）中，得到400μMMDA溶液（MDA7）。 然后在稀释缓冲液中进行1：2连续稀释，得到连续稀释的MDA标准品（MDA6-MDA1）。

样品分析

表1. 96孔透明底微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品（MDA1-MDA7,6.25至400μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备MDA标准品（MDA），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.将10μLMDABlue （组分A）溶液加入MDA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中。 对于384孔板，每孔使用5μLMDABlue 溶液。

3.将反应混合物在室温下孵育10-30分钟。

4.加入40μL反应溶液（组分D），使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，使用20μL反应溶液，总测定体积为50μL/孔。

5.将最终反应混合物在室温下孵育30-60分钟。

6.用吸光度板读数器监测吸光度增加，在OD为695~700nm时进行路径校正校正。

参考文献

Assessment of lipid peroxidation by measuring malondialdehyde (MDA) and relatives in biological samples: Analytical and biological challenges.
Authors: Tsikas D.
Journal: Anal Biochem (2016)

Development, validation and biomedical applications of stable-isotope dilution GC-MS and GC-MS/MS techniques for circulating malondialdehyde (MDA) after pentafluorobenzyl bromide derivatization: MDA as a biomarker of oxidative stress and its relation to 15(S)-8-iso-prostaglandin F2alpha and nitric oxide (NO)
Authors: Tsikas D, Rothmann S, Schneider JY, Suchy MT, Trettin A, Modun D, Stuke N, Maassen N, Frolich JC.
Journal: J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci (2016): 95

Formation of Malondialdehyde, 4-Hydroxynonenal, and 4-Hydroxyhexenal during in Vitro Digestion of Cooked Beef, Pork, Chicken, and Salmon
Authors: Steppeler C, Haugen JE, Rodbotten R, Kirkhus B.
Journal: J Agric Food Chem (2016): 487

Plasma malondialdehyde as biomarker of lipid peroxidation: effects of acute exercise
Authors: Spirlandeli AL, Deminice R, Jordao AA.
Journal: Int J Sports Med (2014): 14

A specific, accurate, and sensitive measure of total plasma malondialdehyde by HPLC
Authors: Moselhy HF, Reid RG, Yousef S, Boyle SP.
Journal: J Lipid Res (2013): 852

Antioxidant properties of Krebs cycle intermediates against malonate pro-oxidant activity in vitro: a comparative study using the colorimetric method and HPLC analysis to determine malondialdehyde in rat brain homogenates
Authors: Puntel RL, Roos DH, Grotto D, Garcia SC, Nogueira CW, Rocha JB.
Journal: Life Sci (2007): 51

Malondialdehyde as biomarker of oxidative damage to lipids caused by smoking
Authors: Lykkesfeldt J.
Journal: Clin Chim Acta (2007): 50

Rapid quantification of malondialdehyde in plasma by high performance liquid chromatography-visible detection
Authors: Grotto D, Santa Maria LD, Boeira S, Valentini J, Charao MF, Moro AM, Nascimento PC, Pomblum VJ, Garcia SC.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2007): 619

[Glaucoma and oxidative stress. Determination of malondialdehyde–a product of lipid peroxidation]
Authors: Faschinger C, Schmut O, Wachswender C, Mossbock G.
Journal: Ophthalmologe (2006): 953

Salivary thiobarbituric acid reacting substances and malondialdehyde–their relationship to reported smoking and to parodontal status described by the papillary bleeding index
Authors: Celec P, Hodosy J, Celecova V, Vodrazka J, Cervenka T, Halcak L, Bozek P, Kopani M, Kudela M.
Journal: Dis Markers (2005): 133

相关产品

Amplite 荧光法丙二醛（MDA）定量试剂盒

	货号	10071	存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照
	规格	200 Tests	价格	4584
	Ex (nm)	365	Em (nm)	435
	分子量		溶剂
	产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法法丙二醛（MDA）定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。丙二醛（MDA）和4-羟基壬烯醛（4-HNE）是脂质过氧化的天然副产物。 作为脂质过氧化受欢迎和可靠的生物标志物，MDA已被广泛用于确定临床情况下的氧化应激多年。 因此，MDA的量化对于评估病理生理过程中的氧化应激是必不可少的。 Amplite 荧光丙二醛（MDA）定量试剂盒提供了一种快速方便的方法来测量MDA，无需加热步骤，而这些步骤是其他供应商提供的商业MDA检测试剂盒所必需的。 Monoaldelite Blue本身几乎不发荧光，但在与MDA反应时会产生强烈的蓝色荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法法丙二醛（MDA）定量试剂盒。 

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加MDA标准品或测试样品（50μL）
2.准备并添加MDA工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育10至30分钟
4.加入反应溶液（25μL）
5.在室温下孵育30至60分钟
6.监测Ex / Em = 365 / 435nm处的荧光强度

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 MDA标准溶液（100 mM）：
将100μLddH2 O加入到MDA标准品（组分C）的小瓶中以制备100mM MDA标准溶液。

1.2 Monoaldelite Blue原液（250X）：
将20μLDMSO（组分E）加入一小瓶Monoaldelite Blue（组分A）中以制备Monoaldelite Blue原液。 注意：这种Monoaldelite Blue原液足以容纳一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。

2.标准溶液

2.1MDA标准
将10μL的100mM MDA标准溶液加入990μL的测定缓冲液（组分B）中以产生1000μM的MDA标准溶液（MDA7）。 取1000μMMDA标准溶液（MDA7）并进行1：3连续稀释，得到连续稀释的MDA标准品（MDA6-MDA1）和分析缓冲液（组分B）。

3.工作溶液

Monoaldelite 蓝色：
将20μL250XMonoaldelite Blue储备溶液加入5 mL分析缓冲液（组分B）中并充分混合。

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准品（MDA1-MDA7,1.37至1000μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局添加MDA标准品（MDA），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向MDA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLMDA工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLMDA工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10-30分钟。

4.向每个孔中加入25μL反应溶液（组分D），使总测定体积为125μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入12.5μL反应溶液（组分D），总体积为62.5μL/孔。

5.在室温下孵育反应30-60分钟。

6.用Ex / Em = 365 / 435nm（截止= 420nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

相关产品