日度归档：2022年6月17日

Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒 货号10087-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒

Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒

Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒 货号10087 货号 10087 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 5244
Ex (nm) 540 Em (nm) 590
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。α-酮戊二酸（α-酮戊二酸）是克雷布斯循环中的关键分子，其决定了生物体的柠檬酸循环的总体速率。作为谷氨酸和谷氨酰胺的前体，α-酮戊二酸也是胃肠道细胞的代谢燃料。它可以降低蛋白质分解代谢并增加蛋白质合成，从而增强骨骼肌中的骨组织形成，并可用于临床应用。 α-酮戊二酸用于肾脏疾病;肠道和胃部疾病，包括感染;肝脏问题;白内障;和反复发酵的酵母菌感染。它还用于接受血液透析的肾病患者处理蛋白质的方式。 AAT Bioquest的Amplite™比色α-酮戊二酸定量试剂盒提供灵敏的比色分析，用于定量生物样品中的α-酮戊二酸。它利用酶偶联反应释放过氧化氢，可通过Amplite™Red在吸光度酶标仪中在570 nm处检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒。 

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 540nm
发射： 590nm
cutoff： 570nm
推荐孔板： 黑色底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的α-酮戊二酸标准品（50μL）
2.加入等体积的α-酮戊二酸工作液（50μL）
3.在37°C孵育60-90分钟
4.监测570nm处的吸光度强度

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（200X）：
将50μLDMSO（组分E）加入到Amplite Red（组分A）的小瓶中以制备200X储备溶液。

 

2.标准溶液

2.1α-酮戊二酸标准
将10μL10mMα-酮戊二酸标准品（组分D）加入990μLPBS中，得到100μMα-酮戊二酸标准溶液（AKG7）。 然后进行1：2连续稀释以获得连续稀释的α-酮戊二酸标准品（AKG6-AKG1）。

 

3.工作溶液

3.1将5 mL测定缓冲液（组分C）加入一个酶混合物1瓶（组分B1）中并充分混合。

3.2将100μLDdH2O加入一个酶混合物2小瓶（组分B2）中并充分混合。

3.3将整个小瓶（100μL）的酶混合物2和25μL的200X Amplite Red储备溶液转移到小瓶混合物1的小瓶中并充分混合以制备α-酮戊二酸的工作溶液。 注意：5mLα-酮戊二酸工作溶液足以容纳一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中α-酮戊二酸标准品和测试样品的布局。 AKG =α-酮戊二酸标准品（AKG1-AKG7,0.1至30μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
AKG1 AKG1 … …
AKG2 AKG2 … …
AKG3 AKG3    
AKG4 AKG4    
AKG5 AKG5    
AKG6 AKG6    
AKG7 AKG7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
AKG1-AKG7 50ul 连续稀释液（0.1至30μM）
BL 50ul 分析缓冲液（组分C）
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备α-酮戊二酸标准品（AKG），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向α-Ketoglutarate标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLα-酮戊二酸测定工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLα-酮戊二酸工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.将反应在37℃孵育30-60分钟。

4.用Ex / Em = 540 / 590nm（截止值= 570nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

 

参考文献

Dietary alpha-ketoglutarate promotes higher protein and lower triacylglyceride levels and induces oxidative stress in larvae and young adults but not in middle-aged Drosophila melanogaster
Authors: Bayliak MM, Lylyk MP, Shmihel HV, Sorochynska OM, Semchyshyn OI, Storey JM, Storey KB, Lushchak VI.
Journal: Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol (2017): 28

Loss of Nardilysin, a Mitochondrial Co-chaperone for alpha-Ketoglutarate Dehydrogenase, Promotes mTORC1 Activation and Neurodegeneration
Authors: Yoon WH, Sandoval H, Nagarkar-Jaiswal S, Jaiswal M, Yamamoto S, Haelterman NA, Putluri N, Putluri V, Sreekumar A, Tos T, Aksoy A, Donti T, Graham BH, Ohno M, Nishi E, Hunter J, Muzny DM, Carmichael J, Shen J, Arboleda VA, Nelson SF, Wangler MF, Karaca E, Lupski JR, Bellen HJ.
Journal: Neuron (2017): 115

The facial triad in the alpha-ketoglutarate dependent oxygenase FIH: A role for sterics in linking substrate binding to O2 activation
Authors: Hangasky JA, Taabazuing CY, Martin CB, Eron SJ, Knapp MJ.
Journal: J Inorg Biochem (2017): 26

alpha-Ketoglutarate Accelerates the Initial Differentiation of Primed Human Pluripotent Stem Cells
Authors: TeSlaa T, Chaikovsky AC, Lipchina I, Escobar SL, Hochedlinger K, Huang J, Graeber TG, Braas D, Teitell MA.
Journal: Cell Metab (2016): 485

Alpha-Ketoglutarate as a Molecule with Pleiotropic Activity: Well-Known and Novel Possibilities of Therapeutic Use
Authors: Zdzisinska B, Zurek A, Kandefer-Szerszen M.
Journal: Arch Immunol Ther Exp (Warsz). (2016)

alpha-Ketoglutarate dehydrogenase complex moonlighting: ROS signalling added to the list: An Editorial highlight for ‘Reductions in the mitochondrial enzyme alpha-ketoglutarate dehydrogenase complex in neurodegenerative disease – beneficial or detrimental?’
Authors: Fernandez E, Bolanos JP.
Journal: J Neurochem (2016): 689

Alpha-ketoglutarate enhances milk protein synthesis by porcine mammary epithelial cells
Authors: Jiang Q, He L, Hou Y, Chen J, Duan Y, Deng D, Wu G, Yin Y, Yao K.
Journal: Amino Acids (2016): 2179

alpha-ketoglutarate is associated with delayed wound healing in diabetes
Authors: Tan Q, Wang W, Yang C, Zhang J, Sun K, Luo HC, Mai LF, Lao Y, Yan L, Ren M.
Journal: Clin Endocrinol (Oxf) (2016): 54

Alpha-ketoglutarate promotes skeletal muscle hypertrophy and protein synthesis through Akt/mTOR signaling pathways
Authors: Cai X, Zhu C, Xu Y, Jing Y, Yuan Y, Wang L, Wang S, Zhu X, Gao P, Zhang Y, Jiang Q, Shu G.
Journal: Sci Rep (2016): 26802

Alpha-ketoglutarate reduces ethanol toxicity in Drosophila melanogaster by enhancing alcohol dehydrogenase activity and antioxidant capacity
Authors: Bayliak MM, Shmihel HV, Lylyk MP, Storey KB, Lushchak VI.
Journal: Alcohol (2016): 23

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 比色法α-酮戊二酸定量试剂盒 Cat#10085
Amplite 乙醇定量试剂盒 Cat#40001
Amplite 胆固醇定量试剂盒 Cat#40006

说明书
Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒.pdf

多肽定制P69 (522-534), M. leprae 编码

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上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽，可以访问官网了解更多产品信息。

名称 P69 (522-534), M. leprae
编码
别名 P69 (522-534), M. leprae
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） PEKTAAPASDPTG
序列（三字母缩写） Pro-Glu-Lys-Thr-Ala-Ala-Pro-Ala-Ser-Asp-Pro-Thr-Gly
基本描述
溶解度
分子量 1241.33
化学式 C52H84N14O21
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents P69 (522-534), M. leprae 编码
Figures P69 (522-534), M. leprae 编码
Reference
C端
N端
化学桥

酶显色底物ADP-ribose-pNP 货号11700-AAT Bioquest荧光染料

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酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP

酶显色底物ADP-ribose-pNP 货号11700 货号 11700 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 405 Em (nm)
分子量 724.37 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

酶显色底物ADP-ribose-pNP是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂，ADP-核糖-pNP是用来评估多聚ADP-核糖聚合酶（PARP）活性的一种显色底物。在405nm处可检测释放的p-硝基酚吸光度。标准曲线的斜率通常用来转换产生的ADP-核糖-pNP比色底物的的吸光度。使用ADP-核糖-pNP作为显色底物，PARP-1具有最大Km和Vmax数值（分别为151 uM和1.30nmolmin-1mg-1），其次是Tankyrase-1(82uM和18pmolmin-1mg-l)和VPARP（46uM和2 pmolmin-1mg-l）。显色底物通常用来决定PARP-1,tankyrase-1和VPARP 的动力学参数，然后筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP小分子抑制剂。由于ADP-核糖-pNP连续实验分析比标准的非连续PARP试验更有优势，因此其可用于高通量筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP的活性以及相关抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的酶显色底物ADP-ribose-pNP。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收： 405nm
推荐孔板： 白色孔板

产品说明书

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 ADP-核糖-pNP原液：
在H2O中制备5-10mM的储备溶液。 注意：应立即使用原液。

 

2.工作溶液

ADP-核糖-pNP工作溶液：
通过用测定缓冲液（50mM Tris，10mM MgCl 2，pH 8.0）稀释储备溶液来制备0.25mM测定溶液。

 

样品操作步骤

1.将0.01mL /孔的样品溶液加入0.09mL /孔测定溶液中，使96孔透明板中的最终体积为0.1mL。

2.使用吸光度酶标仪在405nm处监测平板。

 

参考文献

A colorimetric substrate for poly(ADP-ribose) polymerase-1, VPARP, and tankyrase-1
Authors: Nottbohm AC, Dothager RS, Putt KS, Hoyt MT, Hergenrother PJ.
Journal: Angew Chem Int Ed Engl (2007): 2066

Pharmacological identification of P2X1, P2X4 and P2X7 nucleotide receptors in the smooth muscles of human umbilical cord and chorionic blood vessels
Authors: Valdecantos P, Briones R, Moya P, Germain A, Huidobro-Toro JP.
Journal: Placenta (2003): 17

Poly(ADP-ribose) polymerase as a key player in excitotoxicity and post-ischemic brain damage
Authors: Meli E, Pangallo M, Baronti R, Chiarugi A, Cozzi A, Pellegrini-Giampietro DE, Moroni F.
Journal: Toxicol Lett (2003): 153

Interactions of nucleotide cofactors with the Escherichia coli replication factor DnaC protein
Authors: Galletto R, Rajendran S, Bujalowski W.
Journal: Biochemistry (2000): 12959

Kinetic mechanism of nucleotide cofactor binding to Escherichia coli replicative helicase DnaB protein. stopped-flow kinetic studies using fluorescent, ribose-, and base-modified nucleotide analogues
Authors: Bujalowski W, Jezewska MJ.
Journal: Biochemistry (2000): 2106

Effects of caffeine and adenine nucleotides on Ca2+ release by the sarcoplasmic reticulum in saponin-permeabilized frog skeletal muscle fibres
Authors: Duke AM, Steele DS.
Journal: J Physiol (1998): 43

Adenine nucleotides regulate ADP-ribosylation of membrane-bound actin and actin-binding to membranes
Authors: Schroeder P, Just I, Aktories K.
Journal: Eur J Cell Biol (1994): 3

Trimeric G-proteins of the trans-Golgi network are involved in the formation of constitutive secretory vesicles and immature secretory granules
Authors: Barr FA, Leyte A, Mollner S, Pfeuffer T, Tooze SA, Huttner WB.
Journal: FEBS Lett (1991): 239

Inhibition and labeling of the Ca2(+)-ATPase from sarcoplasmic reticulum by periodate oxidized ATP
Authors: Mignaco J, Scofano HM, Barrabin H.
Journal: Biochim Biophys Acta (1990): 305

说明书
酶显色底物ADP-ribose-pNP.pdf

带上磨口的减压层析柱,欣维尔,F384020M

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上海金畔生物科技有限公司提供带上磨口的减压层析柱,欣维尔,F384020M，可以访问官网了解更多产品信息。
带上磨口的减压层析柱,欣维尔,F384020M

询价
欣维尔

产品简介：上下磨口都为24/40。

技术参数：

带上磨口的减压层析柱,欣维尔,F384020M

材质 玻璃
规格（mm） 200
标准口 24/40
砂芯 G3
活塞

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC 货号11705-AAT Bioquest荧光染料

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葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC 货号11705 货号 11705 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 ug 价格 2604
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 1283.25 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：11705

产品名称：葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC

规格：100ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：1283.25

溶剂：水

激发波长(nm)：490

发射波长(nm)：514

 

产品介绍

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，尿苷-5′-二磷酸-1-α-D-葡萄糖（UDP-Glc）是碳水化合物代谢的关键中间体。 UDP-Glc作为糖原的前体，可以代谢成UDP-半乳糖和UDP-葡糖醛酸，然后可以将其作为半乳糖和葡糖醛酸掺入多糖中。 UDP-Glc用作蔗糖脂多糖和糖鞘脂的前体。 UDP-Glc是葡糖基转移酶使用的常见底物，包括某些细菌毒素，例如来自梭菌（Clostridium dicile）的毒素A和B. UDP-Glc的荧光类似物可用于研究葡糖基转移酶和梭菌毒素。 该荧光素UDP-Glc衍生物具有与FITC缀合物相同的光谱性质。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC。 

点击查看光谱

 

参考文献

cDNA cloning and characterization of UDP-glucose: anthocyanidin 3-O-glucosyltransferase in Freesia hybrida
Authors: Sui X, Gao X, Ao M, Wang Q, Yang D, Wang M, Fu Y, Wang L.
Journal: Plant Cell Rep (2011): 1209

Downregulation of putative UDP-glucose: flavonoid 3-O-glucosyltransferase gene alters flower coloring in Phalaenopsis
Authors: Chen WH, Hsu CY, Cheng HY, Chang H, Chen HH, Ger MJ.
Journal: Plant Cell Rep (2011): 1007

Functional analysis of a rice late pollen-abundant UDP-glucose pyrophosphorylase (OsUgp2) promoter
Authors: Huang Z, Gan Z, He Y, Li Y, Liu X, Mu H.
Journal: Mol Biol Rep (2011): 4291

Identification of a UDP-glucose pyrophosphorylase from cotton (Gossypium hirsutum L.) involved in cellulose biosynthesis in Arabidopsis thaliana
Authors: Wang Q, Zhang X, Li F, Hou Y, Liu X.
Journal: Plant Cell Rep (2011): 1303

Molecular analysis of a UDP-glucose: flavonoid 3-O-glucosyltransferase (UFGT) gene from purple potato (Solanum tuberosum)
Authors: Hu C, Gong Y, Jin S, Zhu Q.
Journal: Mol Biol Rep (2011): 561

Molecular cloning and analysis of the UDP-Glucose Pyrophosphorylase in Streptococcus equi subsp. zooepidemicus
Authors: Ma Z, Fan HJ, Lu CP.
Journal: Mol Biol Rep (2011): 2751

Regulation of UDP-glucose dehydrogenase is sufficient to modulate hyaluronan production and release, control sulfated GAG synthesis, and promote chondrogenesis
Authors: Clarkin CE, Allen S, Kuiper NJ, Wheeler BT, Wheeler-Jones CP, Pitsillides AA.
Journal: J Cell Physiol (2011): 749

An enzymatic method to distinguish tetrahydrobiopterin from oxidized biopterins using UDP-glucose:tetrahydrobiopterin glucosyltransferase
Authors: Kim HL, Kim do H, Lee YK, Park SO, Lee YW, Kwon OS, Park YS.
Journal: Anal Biochem (2010): 79

Functional characterization of a UDP-glucose:flavonoid 3-O-glucosyltransferase from the seed coat of black soybean (Glycine max (L.) Merr.)
Authors: Kovinich N, Saleem A, Arnason JT, Miki B.
Journal: Phytochemistry (2010): 1253

A chloroplastic UDP-glucose pyrophosphorylase from Arabidopsis is the committed enzyme for the first step of sulfolipid biosynthesis
Authors: Okazaki Y, Shimojima M, Sawada Y, Toyooka K, Narisawa T, Mochida K, Tanaka H, Matsuda F, Hirai A, Hirai MY, Ohta H, Saito K.
Journal: Plant Cell (2009): 892

说明书
葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC.pdf

多肽定制P75-TNFR Fragment 编码

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名称 P75-TNFR Fragment
编码
别名 P75-TNFR Fragment
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） SMAPGAVHLPQP
序列（三字母缩写） Ser-Met-Ala-Pro-Gly-Ala-Val-His-Leu-Pro-Gln-Pro
基本描述
溶解度
分子量 1204.42
化学式 C53H85N15O15S
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents P75-TNFR Fragment 编码
Figures P75-TNFR Fragment 编码
Reference
C端
N端
化学桥

带上磨口的减压层析柱,欣维尔,F384020C

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上海金畔生物科技有限公司提供带上磨口的减压层析柱,欣维尔,F384020C，可以访问官网了解更多产品信息。
带上磨口的减压层析柱,欣维尔,F384020C

询价
欣维尔

产品简介：上下磨口都为24/40。

技术参数：

带上磨口的减压层析柱,欣维尔,F384020C

材质 玻璃
规格（mm） 200
标准口 24/40
砂芯 G2
活塞

多肽定制PA (224-233), Influenza 编码

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名称 PA (224-233), Influenza
编码
别名 PA (224-233), Influenza
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） SSLENFRAYV
序列（三字母缩写） Ser-Ser-Leu-Glu-Asn-Phe-Arg-Ala-Tyr-Val
基本描述
溶解度
分子量 1185.31
化学式 C53H80N14O17
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents PA (224-233), Influenza 编码
Figures PA (224-233), Influenza 编码
Reference
C端
N端
化学桥

减压层析柱,欣维尔,F238540M

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减压层析柱,欣维尔,F238540M

询价
欣维尔

产品简介：右端小咀用于抽真空，下端为24/40 哨。

技术参数：

减压层析柱,欣维尔,F238540M

材质 玻璃
规格（mm） 400
标准口 24/40
砂芯 G3
活塞

D-荧光素 游离酸 CAS 2591-17-5 货号12501-AAT Bioquest荧光染料

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D-荧光素 游离酸 CAS 2591-17-5

D-荧光素 游离酸 CAS 2591-17-5

D-荧光素 游离酸 CAS 2591-17-5 货号12501 货号 12501 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 25 mg 价格 1008
Ex (nm) 328 Em (nm) 533
分子量 280.32 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

D-荧光素是最流行的多功能生物发光底物。萤火虫荧光素酶/荧光素生物发光系统存在于萤火虫（Photinus pyralis）和其他几种甲虫中。荧光素酶通过二氧杂环丁酮中间体氧化ATP进行活化荧光素。萤火虫荧光素酶通过荧光素的ATP依赖性氧化产生光。来自该反应的560nm化学发光在数秒内达到峰值，当荧光素和ATP过量存在时，光输出与荧光素酶活性成比例。萤火虫荧光素酶长期以来与抗体结合，并在荧光素作为检测底物的免疫测定中用作标记物。与HRP和碱性磷酸酶相比，荧光素酶对化学修饰的耐受性较差。该酶的一个特别优点是除了其高灵敏度之外，在哺乳动物组织中存在低内源荧光素酶活性。荧光素酶的另一个重要用途是卫生监测领域，荧光素酶/荧光素系统可用于检测污染，因为存在于所有生物体中的ATP需要发光，这种ATP生物发光的主要应用是通过测试食品加工厂中的表面来确定质量，以确定是否存在设备或产品的污染。D-荧光素 游离酸 D-Luciferin 是美国AAT Bioquest 的产品。

D-荧光素钾盐及D-荧光素使用中的常见问题

金畔问号：荧光素酶到底该如何检测？

产品说明书

操作方法 

以下方案是钾盐和钠盐制备的一个例子，它可以适用于大多数细胞类型和体内动物用途。

1.用于体外生物发光图像测定的实施方案

1.1在无菌水中制备100mM（100-200X）荧光素原液，混合均匀。随配随用，或使用等分试样，其他等分储存在-20°C，避免冻融循环，避免暴露在光线下。

1.2在预热的组织培养基中制备0.5-1mM D-荧光素的工作溶液。

1.3从培养的细胞中分离培养基。

1.4将荧光素工作溶液加入细胞中，并在成像前将细胞在37°C孵育5-10分钟。

 

2.用于体内生物发光图像测定的实施方案

2.1在DPBS中制备15mg / mL荧光素储备溶液，不含Mg2+和Ca2+。 混合均匀。

2.2通过0.2μm过滤器过滤灭菌溶液。随配随用或单独使用等分试样，其余等分储存在-20°C，避免冻融循环，避免暴露在光线下。

2.3在动物体重150mg / kg（或10μL/ g荧光素储备溶液）成像前10-15分钟在腹膜内（i.p.）注射荧光素。

注意：应对每种动物模型进行荧光素的动力学研究，以确定峰值信号时间。

 

3.荧光素报告分析分子测定的实施方案

3.1在无菌水中制备100mM荧光素储备溶液。 随配随用或单独使用等分试样，其余等分储存在-20°C，避免冻融循环，避免暴露在光线下。

3.2制备1mM D-荧光素的工作溶液，其中含有3mM ATP，1mM DTT和15mM MgSO4的25mM tricine缓冲液，pH7.8。

3.3将5-10μl细胞裂解液移入微孔板中。使用不含裂解液的裂解试剂或缓冲液作为空白对照。

3.4根据制造商的说明，使用荧光素工作溶液的普利光度计。

3.5注入200μl荧光素工作溶液。

 

注意1：D-荧光素钾盐溶于无菌水和缓冲液，溶解度可高达25mg/mL。一般使用浓度为3-15 mg/mL。溶液的pH值、溶液中的氧气和保存时间对其保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的pH<6.5（发生水解作用）或>7.5（发生消旋化作用，D型转化为L型）的情况下，D-荧光素钾盐相对不稳定。如果溶液中存在少量的氧气，将加速D-荧光素钾的降解速度。储备溶液可以在不含ATP的水中制备，并在-20°C下避光储存。必须用适当的碱中和游离酸溶解。

注意2：D-荧光素可与任何现有的文献或ATP分析系统一起使用。

注意3：如果检测ATP，请戴上手套并使用无ATP容器，尽量减少所有可能的ATP污染源。仅使用无菌无ATP水和试剂。使用高压灭菌水进行所有试剂制备。

 

参考文献

C3-Luc Cells Are an Excellent Model for Evaluation of Cellular Immunity following HPV16L1 Vaccination
Authors: Li-Li Li, He-Rong Wang, Zhi-Yi Zhou, Jing Luo, Xiao-Li Wang, Xiang-Qian Xiao, Yu-Bai Zhou, Yi Zeng
Journal: PloS one (2016): e0149748

Genome-wide microRNA analysis identifies miR-188-3p as novel prognostic marker and molecular factor involved in colorectal carcinogenesis
Authors: Martin Pichler, Verena Stiegelbauer, Petra Vychytilova-Faltejskova, Cristina Ivan, Hui Ling, Elke Winter, Xinna Zhang, Matthew Goblirsch, Annika Wulf-Goldenberg, Masahisa Ohtsuka
Journal: American Association for Cancer Research (2016): clincanres–0497

Identification of a Novel Protein Kinase A Inhibitor by Bioluminescence-Based Screening
Authors: Tetsuya Ishimoto, Kenji Azechi, Hisashi Mori
Journal: Biological and Pharmaceutical Bulletin (2015): 1969–1974

Discovery of novel adenylyl cyclase inhibitor by cell-based screening
Authors: Hiroki Mano, Tetsuya Ishimoto, Takuya Okada, Naoki Toyooka, Hisashi Mori
Journal: Biological and Pharmaceutical Bulletin (2014): 1689–1693

说明书
D-荧光素 游离酸 CAS 2591-17-5.pdf

D-荧光素 游离酸 CAS 2591-17-5 货号12502-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

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D-荧光素 游离酸 CAS 2591-17-5

D-荧光素 游离酸 CAS 2591-17-5

D-荧光素 游离酸 CAS 2591-17-5 货号12502 货号 12502 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 mg 价格 1272
Ex (nm) 328 Em (nm) 533
分子量 280.32 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

D-荧光素是最流行的多功能生物发光底物。萤火虫荧光素酶/荧光素生物发光系统存在于萤火虫（Photinus pyralis）和其他几种甲虫中。荧光素酶通过二氧杂环丁酮中间体氧化ATP进行活化荧光素。萤火虫荧光素酶通过荧光素的ATP依赖性氧化产生光。来自该反应的560nm化学发光在数秒内达到峰值，当荧光素和ATP过量存在时，光输出与荧光素酶活性成比例。萤火虫荧光素酶长期以来与抗体结合，并在荧光素作为检测底物的免疫测定中用作标记物。与HRP和碱性磷酸酶相比，荧光素酶对化学修饰的耐受性较差。该酶的一个特别优点是除了其高灵敏度之外，在哺乳动物组织中存在低内源荧光素酶活性。荧光素酶的另一个重要用途是卫生监测领域，荧光素酶/荧光素系统可用于检测污染，因为存在于所有生物体中的ATP需要发光，这种ATP生物发光的主要应用是通过测试食品加工厂中的表面来确定质量，以确定是否存在设备或产品的污染。D-荧光素 游离酸 D-Luciferin 是美国AAT Bioquest 的产品。

D-荧光素钾盐及D-荧光素使用中的常见问题

金畔问号：荧光素酶到底该如何检测？

产品说明书

操作方法 

以下方案是钾盐和钠盐制备的一个例子，它可以适用于大多数细胞类型和体内动物用途。

1.用于体外生物发光图像测定的实施方案

1.1在无菌水中制备100mM（100-200X）荧光素原液，混合均匀。随配随用，或使用等分试样，其他等分储存在-20°C，避免冻融循环，避免暴露在光线下。

1.2在预热的组织培养基中制备0.5-1mM D-荧光素的工作溶液。

1.3从培养的细胞中分离培养基。

1.4将荧光素工作溶液加入细胞中，并在成像前将细胞在37°C孵育5-10分钟。

 

2.用于体内生物发光图像测定的实施方案

2.1在DPBS中制备15mg / mL荧光素储备溶液，不含Mg2+和Ca2+。 混合均匀。

2.2通过0.2μm过滤器过滤灭菌溶液。随配随用或单独使用等分试样，其余等分储存在-20°C，避免冻融循环，避免暴露在光线下。

2.3在动物体重150mg / kg（或10μL/ g荧光素储备溶液）成像前10-15分钟在腹膜内（i.p.）注射荧光素。

注意：应对每种动物模型进行荧光素的动力学研究，以确定峰值信号时间。

 

3.荧光素报告分析分子测定的实施方案

3.1在无菌水中制备100mM荧光素储备溶液。 随配随用或单独使用等分试样，其余等分储存在-20°C，避免冻融循环，避免暴露在光线下。

3.2制备1mM D-荧光素的工作溶液，其中含有3mM ATP，1mM DTT和15mM MgSO4的25mM tricine缓冲液，pH7.8。

3.3将5-10μl细胞裂解液移入微孔板中。使用不含裂解液的裂解试剂或缓冲液作为空白对照。

3.4根据制造商的说明，使用荧光素工作溶液的普利光度计。

3.5注入200μl荧光素工作溶液。

 

注意1：D-荧光素钾盐溶于无菌水和缓冲液，溶解度可高达25mg/mL。一般使用浓度为3-15 mg/mL。溶液的pH值、溶液中的氧气和保存时间对其保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的pH<6.5（发生水解作用）或>7.5（发生消旋化作用，D型转化为L型）的情况下，D-荧光素钾盐相对不稳定。如果溶液中存在少量的氧气，将加速D-荧光素钾的降解速度。储备溶液可以在不含ATP的水中制备，并在-20°C下避光储存。必须用适当的碱中和游离酸溶解。

注意2：D-荧光素可与任何现有的文献或ATP分析系统一起使用。

注意3：如果检测ATP，请戴上手套并使用无ATP容器，尽量减少所有可能的ATP污染源。仅使用无菌无ATP水和试剂。使用高压灭菌水进行所有试剂制备。

 

参考文献

C3-Luc Cells Are an Excellent Model for Evaluation of Cellular Immunity following HPV16L1 Vaccination
Authors: Li-Li Li, He-Rong Wang, Zhi-Yi Zhou, Jing Luo, Xiao-Li Wang, Xiang-Qian Xiao, Yu-Bai Zhou, Yi Zeng
Journal: PloS one (2016): e0149748

Genome-wide microRNA analysis identifies miR-188-3p as novel prognostic marker and molecular factor involved in colorectal carcinogenesis
Authors: Martin Pichler, Verena Stiegelbauer, Petra Vychytilova-Faltejskova, Cristina Ivan, Hui Ling, Elke Winter, Xinna Zhang, Matthew Goblirsch, Annika Wulf-Goldenberg, Masahisa Ohtsuka
Journal: American Association for Cancer Research (2016): clincanres–0497

Identification of a Novel Protein Kinase A Inhibitor by Bioluminescence-Based Screening
Authors: Tetsuya Ishimoto, Kenji Azechi, Hisashi Mori
Journal: Biological and Pharmaceutical Bulletin (2015): 1969–1974

Discovery of novel adenylyl cyclase inhibitor by cell-based screening
Authors: Hiroki Mano, Tetsuya Ishimoto, Takuya Okada, Naoki Toyooka, Hisashi Mori
Journal: Biological and Pharmaceutical Bulletin (2014): 1689–1693

说明书
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减压层析柱,欣维尔,F238540C

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上海金畔生物科技有限公司提供减压层析柱,欣维尔,F238540C，可以访问官网了解更多产品信息。
减压层析柱,欣维尔,F238540C

询价
欣维尔

产品简介：右端小咀用于抽真空，下端为24/40 哨。

技术参数：

减压层析柱,欣维尔,F238540C

材质 玻璃
规格（mm） 400
标准口 24/40
砂芯 G2
活塞

多肽定制PACAP (1-38), human, ovine, rat 编码 [124123-15-5]

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上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽，可以访问官网了解更多产品信息。

名称 PACAP (1-38), human, ovine, rat
编码 [124123-15-5]
别名 PACAP (1-38), human, ovine, rat
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） HSDGIFTDSYSRYRKQMAVKKYLAAVLGKRYKQRVKNK-NH2
序列（三字母缩写） H-His-Ser-Asp-Gly-Ile-Phe-Thr-Asp-Ser-Tyr-Ser-Arg-Tyr-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Ala-Ala-Val-Leu-Gly-Lys-Arg-Tyr-Lys-Gln-Arg-Val-Lys-Asn-Lys-NH2?(trifluoroacetate salt)
基本描述
溶解度
分子量 4534.4
化学式 C203H331N63O53S1
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents PACAP (1-38), human, ovine, rat 编码 [124123-15-5]
Figures PACAP (1-38), human, ovine, rat 编码 [124123-15-5]
Reference A. Miyata et al., BBRC, 164, 567 (1989) K. Ogi et al., BBRC, 173, 1271 (1990)
C端
N端
化学桥

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15257-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite NAD+/NADH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15257 货号 15257 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 400 Tests 价格 3924
Ex (nm) 571 Em (nm) 585
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光是AAT Bioquest研发的检测NAD+/NADH的试剂盒。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD +）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP +）是细胞中发现的两种重要的辅因子。NADH是NAD +的还原形式，NAD +是NADH的氧化形式。NAD形成NADP，通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的2’位置。NADP用于合成代谢生物反应，例如脂肪酸和核酸合成，其需要NADPH作为还原剂。 在叶绿体中，NADP是在光合作用的初步反应中重要的氧化剂。通过光合作用产生的NADPH用作卡尔文光合作用循环中生物合成反应的还原能力。

传统的NAD / NADH和NADP / NADPH测定通过监测340nm处NADH或NADPH吸收的变化来进行。 Amplite™荧光总NAD和NADH检测试剂盒为敏感检测NAD和NADH提供了一种便捷的方法。系统中的酶特异性识别酶循环反应中的NAD / NADH，其显着提高了检测灵敏度。此外，该测定具有非常低的背景，因为其在红色可见范围内运行，这显着降低了生物样品引起的干扰。该测定已证明在Ex / Em = 540 / 590nm处具有高灵敏度和低干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite NAD+/NADH检测试剂盒。

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15257

Amplite™荧光总NAD和NADH分析试剂盒提供灵敏的一步法分析，可在100μL分析体积（100nM;图1）中检测少至10皮摩尔的NAD（H）。 该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且容易适应自动化而无需分离步骤。 其信号可通过荧光酶标仪在Ex / Em = 530-570nm / 590-600nm（最大Ex / Em = 540 / 590nm）或吸光度酶标仪在~576nm处容易地读取。

产品说明书

96孔板测定示例

 

概述

准备NAD / NADH反应混合物（50μL）

添加NADH标准品或测试样品（50μL）

在室温下孵育15分钟–2小时

监测Ex / Em = 540 / 590nm处的荧光强度

 

操作方法

1.准备NADH储备溶液：

将200μLPBS缓冲液加入到NADH标准品（组分C）的小瓶中，得到1mM（1nmol / L）NADH储备溶液。

注意：未使用的NADH储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

2.准备NAD / NADH反应混合物：

将10mL NAD / NADH传感器缓冲液（组分B）加入NAD / NADH再循环酶混合物（组分A）的瓶中，并充分混合。

注意：NAD / NADH反应混合物足以用于两个96孔板。 未使用的NAD / NADH反应混合物应分成一次性等分试样并储存在-20℃。

3.准备NADH标准品的系列稀释液（0至10μM）：

3.1将10μL的NADH储备溶液（来自步骤1）加入到990L PBS缓冲液（pH 7.4）中，以产生10μM（10pmol / L）NADH标准溶液。

注意：稀释的NADH标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.2取200μL10μMNADH标准溶液进行1：3连续稀释，得到NADH标准品的3,1,0.3,0.1,0.03,0.01和0μM连续稀释液。

3.3如表1和2中所述，将含有NADH标准品和含NAD / NADH的测试样品的系列稀释液加入到固体黑色96孔微量培养板中。

注意：根据需要准备细胞或组织样本。

 

表1实心黑色96孔微孔板中NADH标准品和测试样品的布局

BL

BL

TS

TS

NS1

NS1

….

….

NS2

NS2

 

 

NS3

NS3

 

 

NS4

NS4

 

 

NS5

NS5

 

 

NS6

NS6

 

 

NS7

NS7

 

  

注意：NS = NADH标准，BL =空白对照，TS =测试样品。

 

表2.每个孔的试剂组成

NADH Standard

Blank Control

Test Sample

Serial Dilutions*: 50 μL

PBS: 50 μL

50 μL 

注意：将连续稀释的NADH标准品（0.01μM至10μM）加入NS1至NS7的孔中，一式两份。 高浓度的NADH（例如，>100μM，最终浓度）可能由于NADH传感器（对非荧光产物）的过度氧化而导致荧光信号降低。

 

4.在上清液反应中运行NAD / NADH测定：

4.1将50μL的NADH反应混合物（来自步骤2）加入NADH标准品，空白对照和测试样品（来自步骤3.3）的每个孔中，使得总NADH测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLNADH反应混合物。

4.2在室温下孵育反应15分钟至2小时，避光。

4.3用Ex / Em = 540 / 590nm的荧光板读数器监测荧光增加。

注1：也可将板的内容物转移到白色透明底板上，用吸光度酶标仪在576±5nm波长下读数。 与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

注意2：对于NAD / NADH比率测量，建议使用试剂盒15263。

注意3：对于基于细胞的NAD / NADH测量，建议使用ReadiUse™哺乳动物细胞裂解缓冲液* 5X *（目录号20012）裂解细胞。

 

数据分析

 

        空白孔中的荧光（仅用PBS缓冲液）用作对照，并从具有NADH反应的那些孔的值中减去。 NADH标准曲线如图1所示。

注意：荧光背景随时间增加，因此减去每个数据点的空白孔的荧光强度值是很重要的。

Amplite NAD+/NADH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 货号15257

图1.使用NOVOStar酶标仪（BMG Labtech），在固体黑色96孔板中用Amplite TM总NAD和NADH测定试剂盒测量NADH剂量反应。 在孵育1小时（n = 3）时可以检测到低至100nM（10pmol /孔）的NADH，而NADPH没有响应。

 

试剂应用文献

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase

Authors: Ling, Min and Huang, Peixin and Islam, Shamima and Heruth, Daniel P and Li, Xuanan and Zhang, Li Qin and Li, Ding-You and Hu, Zhaohui and Ye, Shui Qing
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

 

参考文献

Enhanced 1, 3-propanediol production in Klebsiella pneumoniae by a combined strategy of strengthening the TCA cycle and weakening the glucose effect
Authors: Xinyao Lu, Shunli Ren, Jingzheng Lu, Hong Zong, Jian Song, Bin Zhuge
Journal: Journal of applied microbiology (2018)

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

AMPK activation protects cells from oxidative stress-induced senescence via autophagic flux restoration and intracellular NAD+ elevation
Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
Journal: Aging cell (2016): 416–427

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite NAD+/NADH检测试剂盒(比色法) Cat#15258
Amplite NAD+/NADH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 Cat#15257
Amplite NADH检测试剂盒（荧光法） 红色荧光 Cat#15261

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多肽定制PACAP Related Peptide (1-29) (rat) 编码 [132769-35-8]

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名称 PACAP Related Peptide (1-29) (rat)
编码 [132769-35-8]
别名 PACAP Related Peptide (1-29) (rat)
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） DVAHEILNEAYRKVLDQLSARKYLQSMVA-OH
序列（三字母缩写） Asp-Val-Ala-His-Glu-Ile-Leu-Asn-Glu-Ala-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Asp-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Tyr-Leu-Gln-Ser-Met-Val-Ala
基本描述
溶解度
分子量 0
化学式
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents PACAP Related Peptide (1-29) (rat) 编码 [132769-35-8]
Figures PACAP Related Peptide (1-29) (rat) 编码 [132769-35-8]
Reference
C端
N端
化学桥

减压层析柱,欣维尔,F238530M

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减压层析柱,欣维尔,F238530M

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欣维尔

产品简介：右端小咀用于抽真空，下端为24/40 哨。

技术参数：

减压层析柱,欣维尔,F238530M

材质 玻璃
规格（mm） 300
标准口 24/40
砂芯 G3
活塞

减压层析柱,欣维尔,F238530C

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减压层析柱,欣维尔,F238530C

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欣维尔

产品简介：右端小咀用于抽真空，下端为24/40 哨。

技术参数：

减压层析柱,欣维尔,F238530C

材质 玻璃
规格（mm） 300
标准口 24/40
砂芯 G2
活塞

Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒 绿色荧光 货号15270-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒 绿色荧光

Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒 绿色荧光

Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒 绿色荧光 货号15270 货号 15270 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3264
Ex (nm) 510 Em (nm) 525
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒 绿色荧光是美国AAT Bioquest生产的用于检测辅酶A的试剂盒，辅酶A（CoA）是所有形式的细胞生命中的通用和必需的辅因子，在许多生物合成，能量产生和降解途径中充当主要的酰基载体。它在脂肪酸，丙酮酸氧化和柠檬酸循环的合成和氧化中起重要作用。 CoA的测量是研究许多生物系统中的生物过程和事件的基本任务之一。有一些试剂或检测试剂盒可用于定量生物系统中的CoA含量。现有的商业套件要么缺乏灵敏度，要么程序繁琐。我们的Amplite 荧光CoA 定量分析试剂盒提供超灵敏荧光测定法，通过检测CoA中的-SH基团来定量CoA含量。我们在该试剂盒中使用的专有荧光CoA Green 染料在与-SH反应后变为强荧光。该测定试剂盒可在100μL测定体积（40nM）中检测少至4皮摩尔的CoA。它可以在方便的96孔或384孔微量滴定板格式下以Ex / Em = 490 / 520nm进行，并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 490nm
发射 520nm
推荐孔板： 黑色孔板

产品说明书

96孔板检测示例

概述

准备CoA测定混合物（50μL）

添加CoA标准品或测试样品（50μL）

在室温下孵育10分钟 –  1小时

监测Ex / Em = 490/520 nm处的荧光增加

注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分

 

操作步骤

1.准备CoA标准库存解决方案：

将200μlddH2O加入CoA标准小瓶（组分C）中以制备1mM（1nmol / L）储备溶液。

注意1：强烈建议使用已用氮气喷射的ddH2O去除氧气，以制备辅酶A原液。

注意2：水溶液不稳定，会迅速降解。 应储存在2-8℃，并在1天内使用。

 

2.准备100X CoA Green 原液：

将100μLDMSO（组分D）加入到小瓶CoA Green （组分A）中以制备100X储备溶液。

注意：未使用的CoA Green 原液应分成一次性使用的等分试样，保存在-20℃并避光。

 

3.准备CoA Assay混合物：

将50L 100X CoA Green 储备溶液（来自步骤2）加入5mL测定缓冲液（组分B）中，并充分混合。

 

4.准备CoA标准品的连续稀释液（0至30μM）：

4.1将30μLCoA标准储备溶液（来自步骤1）加入970L测定缓冲液（组分B）中以产生30μM（30pmol / L）CoA标准品。

注意：稀释的CoA标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

4.2取200μL30μMCoA标准溶液，用Assay缓冲液（组分B）进行1：3连续稀释，得到10,3,1,0.3,0.1,0.03,0.01和0μM连续稀释的CoA标准品。

4.3将CoA标准品和含CoA的测试样品加入到实心黑色96孔微孔板中，如说明书中的表1和2所示。

注意：根据需要处理细胞或组织样本。

 

5.运行CoA测定：

5.1将50μLCoA反应混合物（来自步骤3.1）添加至CoA标准品的每个孔，空白对照和测试样品（参见步骤4.3），以使总CoA测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLCoA反应混合物。

5.2在室温下孵育反应10分钟至1小时，避光。

5.3用荧光板读数器监测Ex / Em = 490 / 520nm处的荧光增加。

 

参考文献

Methods for measuring CoA and CoA derivatives in biological samples
Authors: Yugo Tsuchiya, Uyen Pham, Ivan Gout
Journal: Biochemical Society Transactions (2014): 1107–1111

说明书
Amplite 荧光法辅酶A定量试剂盒 绿色荧光 .pdf

多肽定制PACAP-27 (6-27), human, chicken, mouse, ovine, porcine, rat 编码 [136134-68-4]

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上海金畔生物科技有限公司可以定制不同序列多肽，可以访问官网了解更多产品信息。

名称 PACAP-27 (6-27), human, chicken, mouse, ovine, porcine, rat
编码 [136134-68-4]
别名 PACAP-27 (6-27), human, chicken, mouse, ovine, porcine, rat
纯度 80%，90%，95%，98%，99%
重量 1mg,5mg,10mg,50mg,100mg,1g
序列（单字母缩写） FTDSYSRYRKQMAVKKYLAAVL-NH2
序列（三字母缩写） H-Phe-Thr-Asp-Ser-Tyr-Ser-Arg-Tyr-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Ala-Ala-Val-Leu-NH2?(trifluoroacetate salt)
基本描述 Hypothalamic regulatory peptide.
溶解度
分子量 2638.2
化学式 C121H193N33O31S1
存储条件 Store at -20°C. Keep tightly closed. Store in a cool dry place.
注释
Documents PACAP-27 (6-27), human, chicken, mouse, ovine, porcine, rat 编码 [136134-68-4]
Figures PACAP-27 (6-27), human, chicken, mouse, ovine, porcine, rat 编码 [136134-68-4]
Reference P. Robberecht et al., FEBS Letters, 286, 133 (1991)
C端
N端
化学桥

减压层析柱,欣维尔,F238520M

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标准口 24/40
砂芯 G3
活塞