Caspase-5活性测定试剂盒,索莱宝,BC3850-50T

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索莱宝

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD,与ICE51%的同源性,在过量表达时可诱导凋亡发生。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide (Ac-WEHD-pNA),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定,吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。

 

适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-5活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-WEHD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

所需仪器:

酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

浓度
规格 50T
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Caspase-5活性测定试剂盒,索莱宝,BC3850-20T

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细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-5分子量47.7kD,与ICE51%的同源性,在过量表达时可诱导凋亡发生。试剂盒测定原理基于Caspase-5特异水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide (Ac-WEHD-pNA),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定,吸光度值对应于Caspase-5的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。

 

适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-5活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-WEHD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

所需仪器:

酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

浓度
规格 20T
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Caspase-6活性测定试剂盒,索莱宝,BC3860-100T

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Caspase-6也称Mch-2,其前体蛋白被granzyme B剪切后形成活化的caspase-6二聚体,可诱导细胞凋亡。

 

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-6也称Mch-2,其前体蛋白被granzyme B剪切后形成活化的caspase-6二聚体,可诱导细胞凋亡。Caspase-6可剪切凋亡的关键调节蛋白PARP,剪切核膜上关键蛋白Lamin A,其对于Lamin A的识别位点是VEID。试剂盒测定原理基于Caspase-6特异水解其多肽底物Ac-VEID-pNA (N-acetyl-Val-Glu-Ile-Asp-p-nitroanilide),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-6的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。

 

 

适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-6活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-VEID-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

所需仪器:

酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

浓度
规格 100T
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Caspase-6活性测定试剂盒,索莱宝,BC3860-50T

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Caspase-6也称Mch-2,其前体蛋白被granzyme B剪切后形成活化的caspase-6二聚体,可诱导细胞凋亡。

 

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-6也称Mch-2,其前体蛋白被granzyme B剪切后形成活化的caspase-6二聚体,可诱导细胞凋亡。Caspase-6可剪切凋亡的关键调节蛋白PARP,剪切核膜上关键蛋白Lamin A,其对于Lamin A的识别位点是VEID。试剂盒测定原理基于Caspase-6特异水解其多肽底物Ac-VEID-pNA (N-acetyl-Val-Glu-Ile-Asp-p-nitroanilide),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-6的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。

 

 

适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-6活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-VEID-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

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酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

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规格 50T
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Caspase-6也称Mch-2,其前体蛋白被granzyme B剪切后形成活化的caspase-6二聚体,可诱导细胞凋亡。

 

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-6也称Mch-2,其前体蛋白被granzyme B剪切后形成活化的caspase-6二聚体,可诱导细胞凋亡。Caspase-6可剪切凋亡的关键调节蛋白PARP,剪切核膜上关键蛋白Lamin A,其对于Lamin A的识别位点是VEID。试剂盒测定原理基于Caspase-6特异水解其多肽底物Ac-VEID-pNA (N-acetyl-Val-Glu-Ile-Asp-p-nitroanilide),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-6的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。

 

 

适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-6活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-VEID-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

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浓度
规格 20T
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Caspase-8活性测定试剂盒,索莱宝,BC3880-100T

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Caspase-8也称FLICEMACHMch5,通常以酶原的形式存在,凋亡时激活,被认为是细胞凋亡转导过程的上游caspase。在Fas-receptorTNFR-1介导的凋亡过程中caspase-8被激活形成二聚体,进而激活下游caspase-46910

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-8也称FLICEMACHMch5,通常以酶原的形式存在,凋亡时激活,被认为是细胞凋亡转导过程的上游caspase。在Fas-receptorTNFR-1介导的凋亡过程中caspase-8被激活形成二聚体,进而激活下游caspase-46910。试剂盒测定原理基于Caspase-8特异水解其多肽底物Ac-IETD-pNA (N-acetyl-Ile-Glu-Thr-Asp-p-nitroanilide),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-8的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。

 

适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-8活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-IETD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

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酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

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规格 100T
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Caspase-8活性测定试剂盒,索莱宝,BC3880-50T

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Caspase-8也称FLICEMACHMch5,通常以酶原的形式存在,凋亡时激活,被认为是细胞凋亡转导过程的上游caspase。在Fas-receptorTNFR-1介导的凋亡过程中caspase-8被激活形成二聚体,进而激活下游caspase-46910

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-8也称FLICEMACHMch5,通常以酶原的形式存在,凋亡时激活,被认为是细胞凋亡转导过程的上游caspase。在Fas-receptorTNFR-1介导的凋亡过程中caspase-8被激活形成二聚体,进而激活下游caspase-46910。试剂盒测定原理基于Caspase-8特异水解其多肽底物Ac-IETD-pNA (N-acetyl-Ile-Glu-Thr-Asp-p-nitroanilide),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-8的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。

 

适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-8活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-IETD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

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工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

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Caspase-8活性测定试剂盒,索莱宝,BC3880-20T

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Caspase-8也称FLICEMACHMch5,通常以酶原的形式存在,凋亡时激活,被认为是细胞凋亡转导过程的上游caspase。在Fas-receptorTNFR-1介导的凋亡过程中caspase-8被激活形成二聚体,进而激活下游caspase-46910

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-8也称FLICEMACHMch5,通常以酶原的形式存在,凋亡时激活,被认为是细胞凋亡转导过程的上游caspase。在Fas-receptorTNFR-1介导的凋亡过程中caspase-8被激活形成二聚体,进而激活下游caspase-46910。试剂盒测定原理基于Caspase-8特异水解其多肽底物Ac-IETD-pNA (N-acetyl-Ile-Glu-Thr-Asp-p-nitroanilide),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-8的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。

 

适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-8活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-IETD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

所需仪器:

酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

浓度
规格 20T
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Caspase-9活性测定试剂盒,索莱宝,BC3890-100T

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Caspase-9也称ICE-LAP6Mch6,可与细胞色素cApaf1形成复合物被激活,并进一步激活细胞凋亡的最关键酶caspase-3,从而触发凋亡级联反应。因此,Caspase-9是细胞凋亡信号转导过程中重要的上游caspase

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-9也称ICE-LAP6Mch6,可与细胞色素cApaf1形成复合物被激活,并进一步激活细胞凋亡的最关键酶caspase-3,从而触发凋亡级联反应。因此,Caspase-9是细胞凋亡信号转导过程中重要的上游caspase。其激活可以通过磷酸化进行调控。试剂盒测定原理基于Caspase-9特异水解其多肽底物Ac-LEHD-pNA (N-acetyl-Leu-Glu-His-Asp-p-nitroanilide),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-9的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-9活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-LEHD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

所需仪器:

酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

浓度
规格 100T
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Caspase-9活性测定试剂盒,索莱宝,BC3890-50T

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Caspase-9也称ICE-LAP6Mch6,可与细胞色素cApaf1形成复合物被激活,并进一步激活细胞凋亡的最关键酶caspase-3,从而触发凋亡级联反应。因此,Caspase-9是细胞凋亡信号转导过程中重要的上游caspase

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-9也称ICE-LAP6Mch6,可与细胞色素cApaf1形成复合物被激活,并进一步激活细胞凋亡的最关键酶caspase-3,从而触发凋亡级联反应。因此,Caspase-9是细胞凋亡信号转导过程中重要的上游caspase。其激活可以通过磷酸化进行调控。试剂盒测定原理基于Caspase-9特异水解其多肽底物Ac-LEHD-pNA (N-acetyl-Leu-Glu-His-Asp-p-nitroanilide),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-9的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-9活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-LEHD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

所需仪器:

酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

浓度
规格 50T
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Caspase-9活性测定试剂盒,索莱宝,BC3890-20T

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Caspase-9也称ICE-LAP6Mch6,可与细胞色素cApaf1形成复合物被激活,并进一步激活细胞凋亡的最关键酶caspase-3,从而触发凋亡级联反应。因此,Caspase-9是细胞凋亡信号转导过程中重要的上游caspase

细胞凋亡属于程序化细胞死亡,可见于各种器官和细胞,在正常发育、生理、病理过程中对细胞和器官的稳态具有十分重要的调节作用。Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。Caspase-9也称ICE-LAP6Mch6,可与细胞色素cApaf1形成复合物被激活,并进一步激活细胞凋亡的最关键酶caspase-3,从而触发凋亡级联反应。因此,Caspase-9是细胞凋亡信号转导过程中重要的上游caspase。其激活可以通过磷酸化进行调控。试剂盒测定原理基于Caspase-9特异水解其多肽底物Ac-LEHD-pNA (N-acetyl-Leu-Glu-His-Asp-p-nitroanilide),释放出游离的硝基苯胺pNA,后者呈黄色在405 nm具有最大吸收峰,用可见光分光光度比色方法测定。其吸光度值对应于Caspase-9的水解活性。反应体系100微升,试剂盒提供的试剂,除标准曲线外可进行50100次样品测定。适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-9活性。

 

组成与储存:

1. 裂解缓冲液: 20 ml 4 ºC

2. 反应缓冲液: 10 ml 4 ºC

3. 2 mM Ac-LEHD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光

4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光

以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。

 

所需仪器:

酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。

工作波长:最大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。

浓度
规格 20T
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胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA 货号13422-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA 货号13422
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
5mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA 货号13422

简要概述

        胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,一种含有苄氧羰酰基(Z)的Caspase 3显色底物,一种蛋白酶,当细胞暴露在细胞凋亡的条件下时具有快速催化活性;会切断多聚(ADP-ribose)聚合酶。这种七-氨基-4氟甲基香豆素衍生物比七-氨基-4甲基香豆素衍生物具有更好的膜渗透性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA。

产品说明书

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 货号13472-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 货号13472
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
25 Tests
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 货号13472

货号 13472 存储条件 f/l
规格                           25 Tests                                         
Ex (nm) 557 Em (nm) 576                    
分子量 874.01 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

        胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂,SRB-VAD是一种红色荧光细胞渗透性polycaspase抑制剂,可靶向caspase 1,2,3,6,8,9或10.一旦进入细胞内,该抑制剂与活性caspase共价结合,产生绿色荧光。当添加到细胞群中时,SRB-VAD-FMK探针进入每个细胞并共价结合位于活性胱天蛋白酶异二聚体的大亚基上的反应性半胱氨酸残基,从而抑制进一步的酶活性。结合的标记试剂保留在细胞内,而任何未结合的试剂将扩散出细胞并被洗掉。绿色荧光信号是添加试剂时细胞中存在的活性半胱天冬酶量的直接量度。可以通过基于96孔板的荧光测定法,荧光显微术或流式细胞术分析含有结合的标记试剂的细胞。该探针具有与Cy3®和TRITC类似的光谱特性,因此Cy3®和TRITC的滤光片组可以方便地与流式细胞仪或显微镜一起使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂 SRB-VAD-FMK(Sulforhodamine B-VAD-FMK)。 

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产品说明书

样品操作及分析

以下协议仅提供指导,应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光,或使用酶标仪监测吸光度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度


胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA 货号13405-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
  • 产品详情

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA 货号13405
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
5mg
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA 货号13405

简要概述

        Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的,在发育和成年生活的大多数其他阶段,并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类型:引发剂和效应剂。 启动子半胱天冬酶(例如,CASP2,CASP8,CASP9和CASP10)切割效应半胱天冬酶的无活性前体形式,从而激活它们。效应子半胱天冬酶(例如,CASP3,CASP6,CASP7)依次切割细胞内的其他蛋白质底物,以触发细胞凋亡过程。该级联反应的起始受半胱天冬酶抑制剂的调节。

        AAT Bioquest提供一组蓝色,绿色和红色荧光底物,用于监测caspase活性。AMC-,AFC-,R110-和ProRed – 衍生的蛋白酶底物是无色和非荧光的。通过半胱天冬酶切割阻断蛋白酶可切割的肽残基分别产生强烈的蓝色,绿色或红色荧光,其可以通过荧光仪器监测。我们专有的ProRed 衍生的半胱氨酸蛋白酶底物是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的 敏感的红色指示剂。通常,R110和ProRed 底物比基于AMC-,AFC-的底物灵敏得多。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA。 

产品说明书

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

Cell Meter 活细胞Caspase 3 7结合检测试剂盒 红色荧光 货号20101-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
  • 产品详情

Cell Meter 活细胞Caspase 3  7结合检测试剂盒 红色荧光 货号20101
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
25 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter 活细胞Caspase 3/7结合检测试剂盒 红色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 3  7结合检测试剂盒 红色荧光 货号20101

简要概述

        我们的Cell Meter 活细胞半胱天冬酶活性检测试剂盒基于半胱天冬酶的荧光抑制剂。这些抑制剂具有细胞渗透性和非细胞毒性。一旦进入细胞,半胱天冬酶抑制剂与活性半胱天冬酶共价结合。胱天蛋白酶3/7的激活对于细胞凋亡的起始是重要的。已经证明胱天蛋白酶3/7对肽序列Asp-Glu-Val-Asp(DEVD)具有底物选择性。该试剂盒使用TF3-DEVD-FMK作为半胱天冬酶3/7活性的荧光指示剂。TF3-DEVD-FMK在凋亡细胞中不可逆地结合活化的胱天蛋白酶3/7。一旦与胱天蛋白酶3/7结合,荧光试剂保留在细胞内。结合抑制caspase 3/7,但不会阻止细胞凋亡的进行。

        有多种参数可用于监测细胞凋亡。这种Cell Meter 活细胞半胱天冬酶3/7活性测定试剂盒旨在通过测量活细胞中胱天蛋白酶3/7的活化来检测细胞凋亡。它用于定量凋亡细胞中活化的caspase 3/7活性,或用于筛选caspase 3/7抑制剂。TF3-DEVD-FMK,红色标记试剂,允许通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的半胱天冬酶3/7。该试剂盒为所有必需组分提供优化的分析方案。

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产品说明书

分离细胞的检测方案

概述

用测试化合物制备细胞,密度为5×105至2×106个细胞/ mL

将TF3-DEVD-FMK以1:150的比例加入细胞溶液中

在室温下孵育1小时

沉淀细胞,用缓冲液或生长培养基洗涤并重悬细胞

在Ex / Em = 550 / 595nm处分析细胞

注:使用前将所有部件在室温下解冻。

操作方法

1.根据您的特异性诱导方案,将细胞培养至 适于细胞凋亡诱导的密度,但不超过2 x 106个细胞/ mL。同时,对于每种标记条件,以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。以下是一些诱导悬浮培养细胞凋亡的例子:

1)用2μg/ ml喜树碱处理Jurkat细胞3小时。

2)用1μM星形孢菌素处理Jurkat细胞3小时。

3)用4μg/ ml喜树碱处理HL-60细胞4小时。

4)用1μM星形孢菌素处理HL-60细胞4小时。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的细胞密度。

2.通过向TF3-DEVD-FMK(组分A)的小瓶中加入50μLDMSO制备150X TF3-DEVD-FMK DMSO储备溶液。 将150×TF3-DEVD-FMK以1:150的比例加入细胞溶液中,并将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育1小时。

注1:对于TF3-DEVD-FMK标记,细胞可以浓缩至~5×10 6个细胞/ mL。 未使用的150X TF3-DEVD-FMK DMSO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

注2:对于粘附细胞,用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用TF3-DEVD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注3:适当的孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

3.将细胞以约200g旋转5分钟,并用1mL洗涤缓冲液(组分B)洗涤细胞两次。 将细胞重悬于所需量的洗涤缓冲液中。

注1:TF3-DEVD-FMK是荧光的,因此清除任何未结合的试剂以消除背景非常重要。

注2:对于分离的细胞,应将细胞浓度调节至每个微量滴定板孔中2-5×10 5个细胞/100μL等分试样,用于步骤5。

4.如果需要,用DNA染色标记细胞(例如用于死细胞的Nuclear Green DCS1,或用于细胞核染色的整个群体的Hoechst)。

5.通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪在Ex / Em = 550/595 nm处检测荧光强度(对于Nuclear Green DCS1,Ex / Em = 490/525 nm,对于Hoechst染料,Ex / Em = 350/461 nm)

5.1对于流式细胞仪,使用Ex / Em = 550/595 nm(用于Nuclear Green DCS1染色的FL1通道)的通道监测荧光强度。

5.2用于荧光显微镜和荧光酶标仪。 将100μL细胞悬浮液置于96孔黑色微量滴定板的每个孔中。

注意:如果需要平衡细胞浓度,调整诱导细胞的悬浮体积以接近非诱导细胞群的细胞密度。 如果您的细胞治疗不会导致受刺激细胞群数量的显着损失,则此调整步骤是可选的。

5.3使用TRITC通道(用于Nuclear Green DCS1染色的FITC通道,用于Hoechst染色的DAPI通道)在荧光显微镜下观察细胞。

5.4使用荧光酶标仪,使用Ex / Em = 550/595 nm(在570 nm处截止)底部读取模式监测荧光强度。

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿 货号13407-AAT Bioquest荧光染料

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  • 产品参数
  • 产品详情

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿 货号13407
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Product details

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿 货号13407

简要概述

        胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,激活的caspases在凋亡中占有主导地位,FITC-C6-LEHD-FMK能提供简便灵敏的方法对活细胞中对激活的caspase-9进行检测。FITC-C6-LEVD-FMK在凋亡细胞中具有通透性,无毒性和不可逆结合激活的caspase-9的特点,是带有FITC标记的特异性Caspase 9抑制剂。FITC标记能直接通过荧光显微镜,流式细胞仪或者荧光酶标仪测定激活的Caspase 9。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿。

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产品说明书

操作方法

以下协议仅提供指导,应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光,或使用酶标仪监测吸光度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

胱天蛋白酶Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO 货号13403-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

胱天蛋白酶Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO 货号13403
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
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产品详情

Product details

胱天蛋白酶Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO

胱天蛋白酶Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO 货号13403

货号 13403 存储条件                  f/l
规格                       1 mg                              
Ex (nm) Em (nm)
分子量 502.47 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

        Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的,在发育和成年生活的大多数其他阶段,并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类型:引发剂和效应剂。 启动子半胱天冬酶(例如,CASP2,CASP8,CASP9和CASP10)切割效应半胱天冬酶的无活性前体形式,从而激活它们。效应子半胱天冬酶(例如,CASP3,CASP6,CASP7)依次切割细胞内的其他蛋白质底物,以触发细胞凋亡过程。该级联反应的起始受半胱天冬酶抑制剂的调节。

        AAT Bioquest提供一组蓝色,绿色和红色荧光底物,用于监测caspase活性。AMC-,AFC-,R110-和ProRed – 衍生的蛋白酶底物是无色和非荧光的。通过半胱天冬酶切割阻断蛋白酶可切割的肽残基分别产生强烈的蓝色,绿色或红色荧光,其可以通过荧光仪器监测。我们专有的ProRed 衍生的半胱氨酸蛋白酶底物是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的 敏感的红色指示剂。通常,R110和ProRed 底物比基于AMC-,AFC-或的底物灵敏得多。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO。 

产品说明书

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

Cell Meter 活细胞Caspase 13结合检测试剂盒 绿色荧光 货号20125-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

Cell Meter 活细胞Caspase 13结合检测试剂盒 绿色荧光  货号20125
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
25 Tests
品牌 :
aat bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
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Product details

Cell Meter 活细胞Caspase 13结合检测试剂盒 绿色荧光

Cell Meter 活细胞Caspase 13结合检测试剂盒 绿色荧光  货号20125

简要概述

        我们的Cell Meter 活细胞胱天蛋白酶活性测定试剂盒基于胱天蛋白酶的荧光FMK抑制剂。 这些抑制剂是细胞可渗透的和无细胞毒性的。 一旦进入细胞,胱天蛋白酶抑制剂就与活性胱天蛋白酶共价结合。 此Cell Meter 活细胞caspase 13活性测定试剂盒旨在通过测量活细胞中的caspase 13活化来检测细胞凋亡。 它用于定量凋亡细胞中活化的caspase 13活性,或用于筛选caspase 13抑制剂。 FAM-LEED-FMK,绿色标记试剂,可通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪直接检测凋亡细胞中活化的胱天蛋白酶13。 该试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方案。

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产品说明书

分离细胞的检测方案

概述

用密度为5×105到2×106个细胞/ mL的测试化合物制备细胞

将FAM-YVAD-FMK以1:150的比例加入到细胞溶液中

在室温下孵育1小时

将细胞沉淀,用缓冲液或生长培养基洗涤并重悬细胞

在Ex / Em = 490 / 525nm处分析细胞

注:使用前将所有部件在室温下解冻。

操作方法

1.根据您的特异性诱导方案,将细胞培养至于细胞凋亡诱导的密度,但不超过2 x 106个细胞/ mL。同时,对于每种标记条件,以与诱导群体相同的密度培养非诱导的阴性对照细胞群。以下是一些诱导悬浮培养细胞凋亡的例子:

1)用2μg/ ml喜树碱处理Jurkat细胞3小时。

2)用1μM星形孢菌素处理Jurkat细胞3小时。

3)用4μg/ ml喜树碱处理HL-60细胞4小时。

4)用1μM星形孢菌素处理HL-60细胞4小时。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定诱导细胞凋亡的细胞密度。

2.通过向FAM-YVAD-FMK(组分A)的小瓶中加入50μLDMSO制备150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液。

3.将150×FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液(来自步骤1)以1:150的比例添加到细胞溶液中,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育1小时。

注1:对于FAM-YVAD-FMK标记,细胞可以浓缩至~5×10 6个细胞/ mL。 未使用的150X FAM-YVAD-FMK DMSO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

注2:对于粘附细胞,用0.5mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用FAM-YVAD-FMK孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。

注3:适当的孵育时间取决于所用的细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。

4.将细胞以约200g旋转5分钟,并用1mL洗涤缓冲液(组分B)洗涤细胞两次。 将细胞重悬于所需量的洗涤缓冲液中。

注1:FAM-YVAD-FMK是荧光的,因此清除任何未结合的试剂以消除背景非常重要。

注2:对于分离的细胞,应将细胞浓度调节至每个微量滴定板孔中2-5×10 5个细胞/100μL等分试样,用于步骤6。

5.如果需要,用DNA染色标记细胞(如用于死细胞的碘化丙锭,或用于细胞核染色的整个群体的Hoechst)。

6.通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm处检测荧光强度(对于碘化丙锭,Ex / Em = 535/635 nm;对于Hoechst染料,Ex / Em = 350 / 461纳米)。

6.1对于流式细胞仪,使用FL1通道监测荧光强度(FL2通道用于碘化丙锭染色)。

6.2用于荧光显微镜和荧光酶标仪。将100μL细胞悬浮液置于96孔黑壁/微量滴定板透明底部的每个孔中。

注意:如果需要平衡细胞浓度,调整诱导细胞的悬浮体积以接近非诱导细胞群的细胞密度。如果您的细胞治疗不会导致受刺激细胞群数量的显着损失,则此调整步骤是可选的。

6.3使用FITC通道在荧光显微镜下观察细胞(用于碘化丙啶染色的TRITC通道,用于Hoechst染色的DAPI通道)。

6.4使用荧光酶标仪,使用Ex / Em = 490 / 525nm(在515nm处截止)底部读取模式监测荧光强度

Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22819-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

  • 产品参数
  • 产品详情

Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22819
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

产品详情

Product details

Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光

Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22819

简要概述

        Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡检测的试剂盒,Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具,包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 蓝色荧光 是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白,CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中,例如亨廷顿综合症,caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性,其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2- ProRed 作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割 ProRed 肽产生强蓝色荧光(eX/eM = 530/620 NM)。这种特性使得试剂盒能适合于DAPI滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和操作流程。该实验结果稳定,快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒。 

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产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液(100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板)
3.在室温下孵育1小时
4.在Ex / Em = 535/620 nm(截止= 610 nm)监测荧光强度(顶部或底部读取模式)

储存溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Ac-IETD-ProRed 原液(200X):
将65μLDMSO加入到Ac-IETD-ProRed (组分A)的小瓶中并充分混合以制备200X Ac-IETD-ProRed 储备溶液。避光。

工作溶液配制

将50μL的200X Ac-IETD-ProRed 储备溶液加入10mL的分析缓冲液(组分B)中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意:Caspase 8工作液不稳定,请及时使用。有关细胞样品制备的指南,请点击查看。

操作步骤

1.通过将10μL/孔的10X测试化合物(96孔板)或5μL/孔的5X测试化合物(384孔板)加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔(没有细胞的培养基),加入相同量的化合物缓冲液。

2.将细胞板在37℃,5%CO2培养箱中孵育所需的一段时间(对于用星形孢菌素处理的Jurkat细胞3-4小时)以诱导细胞凋亡。

3.加入100μL/孔/ 96孔或25μL/孔/ 384孔板的Caspase 8工作溶液。

4.将板在室温下孵育至少1小时,避光。注意:如果需要,在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前,向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂,以确认对caspase 8样活性的抑制作用。

5.在Ex / Em = 535 / 620nm(截止= 610nm)下用荧光酶标仪(顶部或底部读取模式)监测荧光强度。注意:有时,如果使用底部读取模式,底部读数可提供更好的信号与背景比,离心细胞板(特别是非粘附细胞)在800 rpm下2分钟。

数据分析

Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒 红色荧光 货号22819

图1.使用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的Caspase 8活性 红色荧光 。 在Costar黑壁/透明底96孔板中以相同的一天以200,000个细胞/90μL/孔接种Jurkat细胞。 用或不用1μM星形孢菌素处理细胞5小时。 加入半胱天冬酶8工作溶液(100μL/孔)并在室温下温育1小时。 使用FlexStation荧光酶标仪(Molecular Devices)在Ex / Em = 540 / 620nm(截止值= 610nm)下测量荧光强度。

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK 货号13484-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK  货号13484
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
100 Tests
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Product details

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK  货号13484

简要概述

胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂,FAM-VAD是一种绿色荧光细胞渗透性polycaspase抑制剂靶向胱天蛋白酶1,2,3,6,8,9或10。一旦进入细胞,所述抑制剂共价结合于胱天蛋白酶活性,其产生绿色荧光。当加入到细胞群体中,FAM-VAD-FMK探针进入每个细胞和共价结合到驻留在胱天蛋白酶活性的异二聚体的大亚基,从而抑制进一步的酶活性的反应性半胱氨酸残基。结合的标记试剂被保留在细胞内,而任何未结合的试剂将扩散出细胞,并被冲走。绿色荧光信号的直接测量活性胱天蛋白酶的存在于细胞中的试剂加入的时间量。含有结合的标记试剂细胞可以通过96 – 孔板的基于荧光,荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK。 

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产品说明书

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 FAM-VAD-FMK储备溶液:
在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

样品操作及分析

1.根据需要处理细胞。

2.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液,制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

3.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。