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活性氧 ROS Brite HPF 货号16051-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite HPF

活性氧 ROS Brite HPF

活性氧 ROS Brite HPF 货号16051 货号 16051 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1944
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 424.40 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

ROS Brite 活性氧荧光探针HPF是美国AAT Bioquest研发的检测活性氧的荧光探针，活性氧（ROS）是含氧的化学反应性分子（如超氧化物，羟基，单线态氧和过氧化物）。由于存在不成对的价电子，ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物，并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如，UV或热暴露）期间，ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地，这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下，ROS产生显着增加，导致随后膜脂，蛋白质和核酸的改变。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件有关，包括动脉粥样硬化，致癌作用，缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病。细胞渗透性ROS Brite™APF和HPF试剂是非荧光的并且在与羟基自由基或过氧亚硝酸根阴离子反应时产生亮绿色荧光（激发/发射= 490 / 515nm），APF也将与次氯酸根阴离子（OCl-）反应。此外，APF和HPF在过氧化物酶存在下也与过氧化氢反应。可以使用荧光成像，高内容成像，微孔板荧光测定法或流式细胞术测量所得荧光。 APF和HPF显示出对光诱导氧化的相对高的抗性。 APF和HPF在与羟基或过氧亚硝酸根阴离子反应之前是非荧光的。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的ROS检测探针。

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活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 530/30nm滤波片
通道： FITC通道
荧光显微镜  
激发： FITC滤波片
发射： FITC滤波片
推荐孔板： 黑色透明孔板
荧光酶标仪  
激发： 490nm
发射： 525nm
cutoff： 515nm
推荐孔板： 黑色孔板

产品说明书

ROS Brite 染料的分析方案

该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。在制备ROS Brite 工作溶液之前，根据需要处理细胞。

 

1）在DMSO中制备10至20mM ROS Brite APF（或HPF）储备溶液。通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液（HHBS）的Hanks溶液中，制备1至10μM的工作溶液。

2）根据需要处理细胞（例如，用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时）。

3）用ROS Brite APF（或HPF）（1-10μM，步骤＃1）在37℃孵育细胞20-60分钟。

4）用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。

5）用适当的荧光仪器在Ex / Em = 490 / 525mm（截止= 515nM）下用底部读取模式分析细胞（例如，用于荧光显微镜的FITC滤光片，用于流式细胞仪的FL1滤光片）。

注意：BSA和酚红会影响荧光，应谨慎使用。 APF和HPF均可用于溶液测定或细胞内测量。

 

参考文献

Developmental toxicity evaluation of three hexabromocyclododecane diastereoisomers on zebrafish embryos
Authors: Du M, Zhang D, Yan C, Zhang X.
Journal: Aquat Toxicol (2012): 1

MAPK inhibitors and siRNAs differentially affect cell death and ROS levels in arsenic trioxide-treated human pulmonary fibroblast cells
Authors: Park WH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1611

MG132, a proteasome inhibitor, induces human pulmonary fibroblast cell death via increasing ROS levels and GSH depletion
Authors: Park WH, Kim SH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1284

beta-Lapachone induces heart morphogenetic and functional defects by promoting the death of erythrocytes and the endocardium in zebrafish embryos
Authors: Wu YT, Lin CY, Tsai MY, Chen YH, Lu YF, Huang CJ, Cheng CM, Hwang SP.
Journal: J Biomed Sci (2011): 70

Enhancement of gallic acid-induced human pulmonary fibroblast cell death by N-acetyl cysteine and L-buthionine sulfoximine
Authors: You BR, Park WH.
Journal: Hum Exp Toxicol (2011): 992

Gallic acid-induced lung cancer cell death is accompanied by ROS increase and glutathione depletion
Authors: You BR, Kim SZ, Kim SH, Park WH.
Journal: Mol Cell Biochem (2011): 295

MAPK inhibitors differentially affect gallic acid-induced human pulmonary fibroblast cell growth inhibition
Authors: Park WH.
Journal: Mol Med Report (2011): 193

Mitogen-activated protein kinase inhibitors differently affect the growth inhibition and death of a proteasome inhibitor, MG132-treated human pulmonary fibroblast cells
Authors: Park WH.
Journal: Hum Exp Toxicol (2011): 1945

Proteasome inhibition by MG132 induces growth inhibition and death of human pulmonary fibroblast cells in a caspase-independent manner
Authors: You BR, Park WH.
Journal: Oncol Rep (2011): 1705

Effects of arsenic trioxide on cell death, reactive oxygen species and glutathione levels in different cell types
Authors: Han YH, Moon HJ, You BR, Kim SZ, Kim SH, Park WH.
Journal: Int J Mol Med (2010): 121

 

相关产品

产品名称 货号
ROS Brite 活性氧荧光探针570 Cat#16000
ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 Cat#16004
ROS Brite 活性氧荧光探针APF Cat#16050

说明书
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活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580 货号16052-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580

活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580

活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580 货号16052 货号 16052 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 500 Tests 价格 2604
Ex (nm) 500 Em (nm) 582
分子量 N/A 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

MitoROS 线粒体活性氧荧光探针580是美国AAT Bioquest生产的用于检测线粒体活性氧的荧光探针，活性氧（ROS）是含氧的化学反应性分子。实例包括超氧化物，羟基，单线态氧和过氧化物。由于存在不成对的价电子，ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物，并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如，UV或热暴露）期间，ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地，这被称为氧化应激。 MitoROS 580是一种超氧化物敏感染料，在加载到活细胞后定位于线粒体。超氧化物氧化MitoROS 580会产生红色荧光。 MitoROS 580可用荧光显微镜或荧光流式细胞仪监测线粒体中的超氧化物。 MitoROS 580试剂渗透活细胞，选择性地靶向线粒体。它被超氧化物迅速氧化。它不太可能被其他活性氧（ROS）和活性氮物质（RNS）氧化。氧化产物在细胞中高度荧光。 MitoROS 580为研究各种病理中的氧化应激提供了有价值的工具。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的MitoROS 线粒体活性氧荧光探针580。 

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产品说明书

使用MitoROS 580分析方案

该协议仅提供指南，应根据您的具体需求进行修改。在制作MitoROS 580工作溶液之前，根据需要处理细胞。

 

溶液配制

1）MitoROS 580 原液 (1000X)配制

将 13 µL DMSO 添加到 MitoROS 580 小瓶中并充分混合。注意：未使用的原液可以储存在 -20 oC，避光保存。

2）MitoROS 580 工作溶液（2X）配制

用 20 mM Hepes 缓冲液 (HHBS) 将 DMSO 原液稀释到 Hanks 溶液中，制成 2X 工作溶液。注意：2X MitoROS 580 工作液不稳定，请及时使用。

 

操作步骤

1.细胞培养

2.将细胞（例如 96 孔板中的 100 µL/孔）与等体积的 2X MitoROS 580 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟，避光。 注意：MitoROS 580 的最终细胞浓度不应超过 1 X。浓度超过 1 X 会产生细胞毒性效应，包括线粒体形态改变和荧光重新分布到细胞核和细胞质中。 注意：不同细胞对 MitoROS 580 的反应不同，请相应调整工作浓度。

3.轻轻清洗细胞 3 次，并用 HHBS 缓冲液替换。

4.使用适当的荧光仪器 (例如, 荧光显微镜、流式细胞仪) 观察细胞。（Ex/Em = 510/580 nm）

 

参考文献

Intracellular Fenton Reaction based on Mitochondria-Targeted Copper (Ⅱ)-Peptide Complex for Induced Apoptosis
Authors: Xia Li, Sijia Hao, Ailing Han, Yayu Yang, Guozhen Fang, Jifeng Liu, Shuo Wang
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2019)

The contribution of oxidative stress to platelet senescence during storage
Authors: Li Wang, Rufeng Xie, Zhijia Fan, Jie Yang, Wei Liang, Qiang Wu, Mei X Wu, Zhicheng Wang, Yuan Lu
Journal: Transfusion (2019)

Carbon monoxide poisoning–induced delayed encephalopathy accompanies decreased in microglial cell numbers: distinctive pathophysiological features from hypoxemia–induced brain damage
Authors: Keisuke Sekiya, Tasuku Nishihara, Naoki Abe, Amane Konishi, Hideyuki Nandate, Taisuke Hamada, Keizo Ikemune, Yasushi Takasaki, Junya Tanaka, Migiwa Asano
Journal: Brain research (2018)

说明书
活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580.pdf

活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒 货号16055-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒

活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒

活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒 货号16055 货号 16055 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 576 Em (nm) 598
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于线粒体检测的试剂盒，细胞内羟基自由基的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响至关重要。羟基（HO·）是与其他分子高度反应的活性氧（ROS）之一，以实现稳定性。通常，羟基被认为是氧化代谢的有害副产物，其可以在生命系统中引起分子损伤。它显示平均寿命为10-9秒，可以与几乎所有生物分子如核DNA，线粒体DNA，蛋白质和膜脂质发生反应。 AAT Bioquest的Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒经过优化，可用于检测线粒体中的ROS。 MitoROS OH580是活细胞渗透探针，可以快速和选择性地靶向活细胞中的羟基自由基。当它与OH·反应时产生红色荧光，并且可以在Ex / Em = 540 / 590nm处容易地读取。 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒提供灵敏的荧光探针，可在孵育1小时后检测活细胞中的OH·。该试剂盒可用于荧光酶标仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒。 

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： Cy3/TRITC滤波片
发射: Cy3/TRITC滤波片
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 540nm
发射: 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板： 黑色透明

产品说明书

96孔板分析示例

概述

准备细胞用MitoROS OH580工作溶液

在37ºC孵育细胞60分钟

用测试化合物孵育细胞（诱导OH·）

在Ex / Em = 540/590 nm处检测荧光增加

注意：使用前在室温下解冻所有组件。

 

操作步骤

1.准备细胞：

1.1对于贴壁细胞：在生长培养基中将细胞过夜，10,000至40,000个细胞/孔/90μL用于96孔板或2,500至10,000个细胞/孔/20μL用于384孔板。

1.2对于非贴壁细胞：从培养基中离心细胞，将细胞沉淀悬浮于培养基中，100,000-200,000细胞/孔/90μL，96孔poly-D赖氨酸平板或25,000-50,000细胞/孔/ 对于384孔聚-D赖氨酸板，20μL。 在实验之前，在制动器关闭的情况下以800rpm离心板2分钟。

注意：应对每个细胞系进行单独评估，以确定最佳细胞密度。

 

2.准备MitoROS OH580方案：

2.1Prepare MitoROS OH580储备液（500X）：将50μLDMSO（组分C）加入MitoROS OH580（组分A）的小瓶中，并充分混合。

注意：25μL重组的MitoROS OH580原液足以容纳1个平板。 如果管子密封并且避光，可以将未使用的部分等分并在≤-20℃下储存超过一个月。避免反复冻融循环。

2.2准备MitoROS OH580工作溶液：将25μL500XDMSO重构的MitoROS OH580储备溶液（来自步骤2.1）加入10 mL分析缓冲液（组分B）中，并充分混合。 该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

 

3.进行羟基自由基测定：

3.1取出培养基，加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的MitoROS OH580工作溶液（步骤2.2）到细胞板中。将细胞在37ºC孵育1小时。

3.2为了诱导羟基自由基，用37℃的所需缓冲液（如PBS或HHBS）中的文本化合物处理细胞一段所需的时间，避光。

注意1：我们用芬顿反应（10μMCuCl2和100μMH2O2）在37℃处理HeLa细胞1小时，以诱导外源性羟基自由基。详细信息请参见图1。

注意2：我们用生长培养基中的PMA（佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯）在37℃下处理RAW 264.7细胞4小时，以刺激内源性羟基自由基。详细信息请参见图2。

3.3用HHBS或DPBS将细胞洗涤2-3次，并向每个孔中加入100μL测定缓冲液（组分B）。

3.4使用具有TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号，或使用荧光酶标仪在Ex / Em = 540 / 590nm（截止= 570nm）下以底部读取模式测量荧光增加。

 

数据分析

活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒 货号16055

图1.使用MitoROS OH580（Cat＃16055）在HeLa细胞中测量羟基自由基的荧光图像。 将HeLa细胞与MitoROS OH580工作溶液在37℃下孵育1小时，然后用HHBS洗涤一次。 芬顿反应：然后将细胞用10μMCuCl2和100μMH2O2在1X HBSS缓冲液中于37℃处理1小时。 对照：将HeLa细胞保持在1X HBSS缓冲液中而不进行处理。 用HHBS洗涤3次后，使用具有TRITC过滤器组（红色）的荧光显微镜测量HeLa细胞。 细胞核用Hoechst 33342（Cat＃17530，Blue）染色。

 

活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒 货号16055

图2.使用MitoROS OH580（Cat＃16055）检测RAW 264.7细胞中的细胞内羟基自由基。 将细胞与MitoROS OH580工作溶液在37℃下孵育1小时，然后用HHBS洗涤一次。 然后将细胞在没有或与PMA（佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯，10-500ng / mL）在生长培养基中于37℃温育4小时。 用HHBS洗涤3次后，使用具有TRITC过滤器组的荧光显微镜测量HeLa细胞。

 

参考文献

Oxyl and hydroxyl radical transfer in mitochondrial amidoxime reducing component-catalyzed nitrite reduction
Authors: Yang J, Giles LJ, Ruppelt C, Mendel RR, Bittner F, Kirk ML.
Journal: J Am Chem Soc (2015): 5276

Arbutin, an intracellular hydroxyl radical scavenger, protects radiation-induced apoptosis in human lymphoma U937 cells
Authors: Wu LH, Li P, Zhao QL, Piao JL, Jiao YF, Kadowaki M, Kondo T.
Journal: Apoptosis (2014): 1654

Chloroplast-located BjFer1 together with anti-oxidative genes alleviate hydrogen peroxide and hydroxyl radical injury in cytoplasmic male-sterile Brassica juncea
Authors: Yang J, Liu S, Yang X, Zhang M.
Journal: Mol Biol Rep (2012): 4169

Hydroxyl radical (.OH) played a pivotal role in oridonin-induced apoptosis and autophagy in human epidermoid carcinoma A431 cells
Authors: Yu Y, Fan SM, Song JK, Tashiro S, Onodera S, Ikejima T.
Journal: Biol Pharm Bull (2012): 2148

Excess no predisposes mitochondrial succinate-cytochrome c reductase to produce hydroxyl radical
Authors: Chen J, Chen CL, Alevriadou BR, Zweier JL, Chen YR.
Journal: Biochim Biophys Acta (2011): 491

Postresuscitation syndrome: potential role of hydroxyl radical-induced endothelial cell damage
Authors: Huet O, Dupic L, Batteux F, Matar C, Conti M, Chereau C, Lemiale V, Harrois A, Mira JP, Vicaut E, Cariou A, Duranteau J.
Journal: Crit Care Med (2011): 1712

Endogenous 3,4-dihydroxyphenylalanine and dopaquinone modifications on protein tyrosine: links to mitochondrially derived oxidative stress via hydroxyl radical
Authors: Zhang X, Monroe ME, Chen B, Chin MH, Heibeck TH, Schepmoes AA, Yang F, Petritis BO, Camp DG, 2nd, Pounds JG, Jacobs JM, Smith DJ, Bigelow DJ, Smith RD, Qian WJ.
Journal: Mol Cell Proteomics (2010): 1199

Hyperglycemia induces apoptosis in rat liver through the increase of hydroxyl radical: new insights into the insulin effect
Authors: Frances DE, Ronco MT, Monti JA, Ingaramo PI, Pisani GB, Parody JP, Pellegrino JM, Sanz PM, Carrillo MC, Carnovale CE.
Journal: J Endocrinol (2010): 187

Acarbose reduces myocardial infarct size by preventing postprandial hyperglycemia and hydroxyl radical production and opening mitochondrial KATP channels in rabbits
Authors: Minatoguchi S, Zhang Z, Bao N, Kobayashi H, Yasuda S, Iwasa M, Sumi S, Kawamura I, Yamada Y, Nishigaki K, Takemura G, Fujiwara T, Fujiwara H.
Journal: J Cardiovasc Pharmacol (2009): 25

Endogenous activation of mitochondrial KATP channels protects human failing myocardium from hydroxyl radical-induced stunning
Authors: Maack C, Dabew ER, Hohl M, Schafers HJ, Bohm M.
Journal: Circ Res (2009): 811

说明书
活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒.pdf

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒 货号16060-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒 货号16060 货号 16060 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 513 Em (nm) 537
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 线粒体过氧化物活性检测试剂盒 绿色荧光 是美国AAT Bioquest生产的用于检测线粒体的试剂盒，线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低至中等水平的超氧化物的产生对于许多基本细胞过程的适当调节是至关重要的，包括基因表达，信号转导和肌肉适应耐力运动训练。不受控制的线粒体超氧化物产生可引发细胞氧化损伤，其导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。细胞内线粒体超氧化物的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响非常重要。Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂MitoROS 520来量化活细胞中的超氧化物水平.MitoROS 520具有细胞渗透性，能够快速，有选择地检测线粒体中的超氧化物。它在与超氧化物反应时产生绿色荧光，并且在Ex / Em = 490 / 520nm处可以容易地读取所得荧光。Cell Meter 荧光线粒体超氧化物活性测定试剂盒提供灵敏的一步荧光测定法，用于检测活细胞中的线粒体超氧化物，孵育1小时。该试剂盒可用于流式细胞仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 线粒体过氧化物活性检测试剂盒。 

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活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射: 530/30nm滤波片
通道： FITC通道
荧光显微镜  
激发： FITC滤波片
发射: FITC滤波片
推荐孔板： 黑色透明

产品说明书

样本实验方案

概述

适用于荧光显微镜：

1.在生长培养基中制备细胞

2.用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物

3.添加MitoROS™520工作解决方案

4.将细胞在37°C染色60分钟

5.监测Ex / Em = 490 / 530nm处的荧光增加

 

适用于流式细胞仪：

1.在生长培养基中制备细胞

2.用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物

3.在37°C下染色细胞60分钟

4.用流式细胞仪监测荧光强度

 

操作步骤

对于荧光显微镜/ 96孔微孔板：

1.用10μL10X测试化合物（96孔板）或5μL5X测试化合物（384孔板）在培养基或所需缓冲液（例如PBS或HHBS）中处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。

2.为了诱导超氧化物，将细胞在37℃下孵育一段所需的时间，避光。

注意：我们用5μM抗霉素A（AMA）在37°C处理RAW 264.7巨噬细胞2小时以诱导超氧化物。 

3.将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的MitoROS™520工作溶液加入到细胞板中。

4.将细胞在37°C孵育1小时，并使用荧光显微镜和FITC过滤器拍摄图像。

 

对于流式细胞仪：

1.根据需要处理细胞。

2.为了诱导超氧化物，将细胞在37℃下孵育一段所需的时间，避光。

注意我们用50μM抗霉素A（AMA）在37℃处理Jurkat细胞2小时以诱导超氧化物。

3.将1μL/ 0.5 mL MitoROS™520原液（500X）细胞加入细胞中。

4.将细胞在5％CO 2,37℃培养箱中孵育1小时，并使用FITC通道中的流式细胞仪监测荧光强度（Ex / Em = 488 / 530nm）。

 

参考文献

Comparison of the detrimental features of microglia and infiltrated macrophages in traumatic brain injury: A study using a hypnotic bromovalerylurea
Authors: Naoki Abe, Mohammed E Choudhury, Minori Watanabe, Shun Kawasaki, Tasuku Nishihara, Hajime Yano, Shirabe Matsumoto, Takehiro Kunieda, Yoshiaki Kumon, Toshihiro Yorozuya
Journal: Glia (2018)

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于流式细胞仪 Cat#22970
Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪 Cat#22971

说明书
活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒.pdf

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22970-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于流式细胞仪

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于流式细胞仪

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22970 货号 22970 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3924
Ex (nm) 540 Em (nm) 590
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低中等水平的超氧化物的产生对于许多重要细胞过程的适当调节至关重要，这些过程包括基因表达，信号转导和肌肉对耐力运动训练的适应性。不受控制的线粒体超氧化物的产生会触发细胞氧化损伤，从而导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂来定量活细胞中的超氧化物水平。MitoROS 580具有活细胞渗透性，可以快速，选择性地靶向线粒体中的超氧化物。与超氧化物反应时会生成红色荧光。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的线粒体超氧化物。该试剂盒针对流式细胞仪应用进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488nm激光
发射： 575/26nm滤波片
通道： PE通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 准备细胞密度为0.5-1×10 6细胞/ mL
  2. 用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
  3. 将1 µL 500X MitoROS 580加到0.5 mL细胞悬液中
  4. 将细胞在37°C染色1小时
  5. 使用带有FL2通道的流式细胞仪检测荧光强度

 

溶液配制

储备溶液配制

1. MitoROS 580储备溶液（500X）：将100 µL DMSO（组分C）添加到MitoROS 580（组分A）小瓶中，并充分混合以制成500X MitoROS 580储备溶液。避光。注意：请密闭存放。

 

实验步骤

  1. 对于每个样品，在自备的0.5 mL生长培养基或缓冲液中制备细胞，密度为5×10 5至1×10 6个细胞/ mL。注意：应单独评估每种细胞系，以确定超氧化物诱导的最佳细胞密度。
  2. 在分析缓冲液（组分B）或自备的缓冲液（例如PBS）中用25 µL 20X测试化合物处理细胞以诱导超氧化物。对于对照细胞（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。
  3. 将细胞在37°C孵育至少30分钟。注意：将 Jurkat细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟以诱导超氧化物。有关详细信息，请参见图1。
  4. 将0.5 µL细胞悬浮液中加入1 µL 500X MitoROS 580储备液。
  5. 在37°C下孵育1小时。注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在MitoROS 580孵育之前用含血清的培养基洗涤一次。适当的孵育时间取决于单个细胞的类型和测试使用的化合物。
  6. 使用带有FL2通道的流式细胞仪（Ex / Em = 488/590 nm）检测荧光强度。

 图示

 

 

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于流式细胞仪 货号22970

图1.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒检测Jurkat细胞中的超氧化物。AMA处理（红色）：将细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟，然后与MitoROS 580孵育1小时。对照（蓝色）：在未经AMA处理的情况下，将细胞与MitoROS 580在37°C孵育1小时。使用流式细胞仪（BD FACSCalibur）在FL2通道检测上荧光信号。

 

 

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.
Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides
Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.
Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water
Authors: Zhang J, Yang X.
Journal: Analyst (2013): 434

Analysis of the germination kinetics of individual Bacillus subtilis spores treated with hydrogen peroxide or sodium hypochlorite
Authors: Setlow B, Yu J, Li YQ, Setlow P.
Journal: Lett Appl Microbiol (2013): 259

Comparative antimicrobial activities of aerosolized sodium hypochlorite, chlorine dioxide, and electrochemically activated solutions evaluated using a novel standardized assay
Authors: Thorn RM, Robinson GM, Reynolds DM.
Journal: Antimicrob Agents Chemother (2013): 2216

Effect of hypochlorite-based disinfectants on inactivation of murine norovirus and attempt to eliminate or prevent infection in mice by addition to drinking water
Authors: Takimoto K, Taharaguchi M, Sakai K, Takagi H, Tohya Y, Yamada YK.
Journal: Exp Anim (2013): 237

Green synthesis of carbon dots with down- and up-conversion fluorescent properties for sensitive detection of hypochlorite with a dual-readout assay
Authors: Yin B, Deng J, Peng X, Long Q, Zhao J, Lu Q, Chen Q, Li H, Tang H, Zhang Y, Yao S.
Journal: Analyst (2013): 6551

Use of pyrogallol red and pyranine as probes to evaluate antioxidant capacities towards hypochlorite
Authors: Perez-Cruz F, Cortes C, Atala E, Bohle P, Valenzuela F, Olea-Azar C, Speisky H, Aspee A, Lissi E, Lopez-Alarcon C, Bridi R.
Journal: Molecules (2013): 1638

A novel flow-injection analysis system for evaluation of antioxidants by using sodium dichloroisocyanurate as a source of hypochlorite anion
Authors: Ichiba H, Hanami K, Yagasaki K, Tanaka M, Ito H, Fukushima T.
Journal: Drug Discov Ther (2012): 44

Colorimetric determination of hypochlorite with unmodified gold nanoparticles through the oxidation of a stabilizer thiol compound
Authors: Zhang J, Wang X, Yang X.
Journal: Analyst (2012): 2806

说明书
活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于流式细胞仪 .pdf

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪 货号22971-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪 货号22971 货号 22971 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 540 Em (nm) 590
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低中等水平的超氧化物的产生对于许多重要细胞过程的适当调节至关重要，这些过程包括基因表达，信号转导和肌肉对耐力运动训练的适应性。不受控制的线粒体超氧化物的产生会触发细胞氧化损伤，从而导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂来定量活细胞中的超氧化物水平。MitoROS 580具有活细胞渗透性，可以快速，选择性地靶向线粒体中的超氧化物。与超氧化物反应时会生成红色荧光。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的线粒体超氧化物。该试剂盒可用于荧光酶标仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 540nm
发射： 590nm
cutoff： 570nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 在生长培养基中准备细胞
  2. 用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
  3. 添加MitoROS 580工作溶液
  4. 在37°C下将细胞染色30-60分钟
  5. 检测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处的荧光增加（底部读取模式）或使用配备TRITC滤光片的荧光显微镜

 

溶液配制

储备溶液配制

  1. MitoROS 580储备溶液（500X）：将50 µL DMSO（组分C）添加到MitoROS 580（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成500X MitoROS 580储备液，避光。 注意：25 µL 500X MitoROS 580储备溶液足以用于1个板。 为了存放，请将管子紧紧密封。

 

工作溶液配制

将25μL的500X MitoROS 580储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成MitoROS 580工作溶液。 注意：此MitoROS 580工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

 

实验步骤

  1. 在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

  2. 为了诱导超氧化物，将细胞板在37°C下孵育所需的时间，避光。 注意：我们在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理HeLa细胞30分钟，以诱导超氧化物。 有关详细信息，请参见图1。

  3. 将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的MitoROS 580工作溶液添加到细胞板中。

  4. 将细胞在37°C下孵育30至60分钟。

  5. 使用荧光酶标仪（Ext / Em = 540/590 nm（Cutoff = 570 m））检测荧光强度，或者使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜观察细胞。

 

图示

 

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪 货号22971

图1.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）在HeLa细胞中测量超氧化物的荧光图像。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 AMA处理：将细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟，然后与MitoROS 580孵育1小时。 未经处理的对照：HeLa细胞与MitoROS 580在37°C下孵育1小时，未经AMA处理。 使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜检测荧光信号。
活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒 适合于酶标仪 货号22971

图2.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）检测HeLa细胞中的细胞内超氧化物。 将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 将细胞与50 µM绿脓素（Pyo）孵育； 50 µM抗霉素A（AMA）或未经处理（对照）在37ºC下放置30分钟。 然后将细胞与MitoROS 580在37℃孵育1小时。 使用CLARIOstar酶标仪（BMG Labtech）以底部读取模式在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）下检测荧光信号。

 

 

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.
Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides
Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.
Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water
Authors: Zhang J, Yang X.
Journal: Analyst (2013): 434

Analysis of the germination kinetics of individual Bacillus subtilis spores treated with hydrogen peroxide or sodium hypochlorite
Authors: Setlow B, Yu J, Li YQ, Setlow P.
Journal: Lett Appl Microbiol (2013): 259

Comparative antimicrobial activities of aerosolized sodium hypochlorite, chlorine dioxide, and electrochemically activated solutions evaluated using a novel standardized assay
Authors: Thorn RM, Robinson GM, Reynolds DM.
Journal: Antimicrob Agents Chemother (2013): 2216

Effect of hypochlorite-based disinfectants on inactivation of murine norovirus and attempt to eliminate or prevent infection in mice by addition to drinking water
Authors: Takimoto K, Taharaguchi M, Sakai K, Takagi H, Tohya Y, Yamada YK.
Journal: Exp Anim (2013): 237

Green synthesis of carbon dots with down- and up-conversion fluorescent properties for sensitive detection of hypochlorite with a dual-readout assay
Authors: Yin B, Deng J, Peng X, Long Q, Zhao J, Lu Q, Chen Q, Li H, Tang H, Zhang Y, Yao S.
Journal: Analyst (2013): 6551

Use of pyrogallol red and pyranine as probes to evaluate antioxidant capacities towards hypochlorite
Authors: Perez-Cruz F, Cortes C, Atala E, Bohle P, Valenzuela F, Olea-Azar C, Speisky H, Aspee A, Lissi E, Lopez-Alarcon C, Bridi R.
Journal: Molecules (2013): 1638

A novel flow-injection analysis system for evaluation of antioxidants by using sodium dichloroisocyanurate as a source of hypochlorite anion
Authors: Ichiba H, Hanami K, Yagasaki K, Tanaka M, Ito H, Fukushima T.
Journal: Drug Discov Ther (2012): 44

Colorimetric determination of hypochlorite with unmodified gold nanoparticles through the oxidation of a stabilizer thiol compound
Authors: Zhang J, Wang X, Yang X.
Journal: Analyst (2012): 2806

说明书
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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 绿色荧光 货号22900-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 绿色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 绿色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 绿色荧光 货号22900 货号 22900 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 492 Em (nm) 520
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于ROS检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些高效的检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。活性氧分子（ROS）是氧正常代谢过程的固有副产品，在细胞信号及转导过程中扮演着重要的角色。然而，在氧化应激阶段，ROS水平显著增加。ROS的积聚导致细胞结构的重大破坏。氧化应激通常在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松，中风，炎症以及许多神经变性疾病和癌症中被被发现。ROS的测定能帮助我们理解氧化应激如何调节改变的胞内途径。Amplite ROS荧光法检测试剂盒使用我们独特的ROS指示器在活细胞中测定ROS。Amplite ROS Green是细胞通透的，当它与ROS反应时能产生绿色的荧光。本试剂盒具备优化的即用配制，能与高通量筛选的液体控制设备相配。Amplite ROS荧光法检测试剂盒能提供敏感的、一步荧光实验来检测活细胞中胞内的ROS，仅需一小时的孵育。本实验能在96孔或者384孔微孔板中进行，可以实现自动化无需分离步骤。它的信号能轻松被荧光酶标仪或者荧光显微镜读取。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。 

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： FITC滤波片
发射： FITC滤波片
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 490nm
发射： 525nm
cutoff: 515nm
推荐孔板： 黑色孔板
读取模式： 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.添加Amplite ROS绿色工作溶液（96孔板100μL/孔或384孔板25μL/孔）
3.将细胞在37℃下染色60分钟
4.用测试化合物处理细胞以诱导ROS
5.在Ex / Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）或带有FITC滤光片组的荧光显微镜下监测荧光增加（底部读取模式）

 

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. 1Amplite ROS Green原液（500X）：
将40μLDMSO（组分C）加入到Amplite ROS Green（组分A）的小瓶中并充分混合以制备500X Amplite  ROS Green原液。 避光。 注意：20μL的500X Amplite ROS Green原液足以容纳1个平板。 

 

2.制备工作溶液

将20μL500XAmplite ROS Green储备溶液加入10 mL分析缓冲液（组分B）中，充分混合，制成Amplite ROS Green工作溶液。 注意：此Amplite ROS Green工作溶液在室温下稳定至少2小时。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

 

操作步骤

1.将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Amplite ROS Green工作溶液加入细胞板中。

2.将细胞在5％CO2,37℃培养箱中孵育1小时。

3.用所需缓冲液（如PBS或HHBS）中的20μL11X测试化合物（96孔板）或10μL6X测试化合物（384孔板）处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。

4.为了诱导ROS，将细胞板在室温下或在5％CO2,37℃培养箱中孵育至少15分钟或所需的一段时间（对于用1mM H2O2处理的Hela细胞30分钟）。

5.使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）监测荧光增加，或使用具有FITC滤光器组的荧光显微镜观察细胞。

 

数据分析

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 绿色荧光 货号22900

图1.同时检测RAW 264.7巨噬细胞中细胞内一氧化氮（NO）和总ROS的荧光图像。 用Nitrixyte Orange（红色）和Amplite ROS Green（绿色）共染色细胞。 然后用或不用20μg/ mL脂多糖（LPS），1mM L-精氨酸（L-Arg）和50μM绿脓素（Pyo）在37℃处理细胞16小时。 使用配备有TRITC（Nitrixyte Orange，Red）和FITC（Amplite ROS Green，Green）过滤器组的荧光显微镜同时测量荧光信号。

 

参考文献

Tyrosine kinase inhibitor conjugated quantum dots for non-small cell lung cancer (NSCLC) treatment
Authors: Nishant S Kulkarni, Vineela Parvathaneni, Snehal K Shukla, Leonard Barasa, Jeanette C Perron, Sabesan Yoganathan, Aaron Muth, Vivek Gupta
Journal: European Journal of Pharmaceutical Sciences (2019)

Activation of p53-Mediated Apoptosis Pathway in HSC3 Cancer Cell Irradiated by Atmospheric DBD Oxygen Plasma
Authors: Nobuya Hayashi, Yukie Miyamaru, Reona Aijima, Yoshio Yamashita
Journal: IEEE Transactions on Plasma Science (2018): 1–7

Role of GPx3 in PPARγ-induced protection against COPD-associated oxidative stress
Authors: Aravind T Reddy, Sowmya P Lakshmi, Asoka Banno, Raju C Reddy
Journal: Free Radical Biology and Medicine (2018)

Topiramate exhibits anti-tumorigenic and metastatic effects in ovarian cancer cells
Authors: Guangxu Xu, Ziwei Fang, Leslie H Clark, Wenchuan Sun, Yajie Yin, Rong Zhang, Stephanie A Sullivan, Arthur-Quan Tran, Weimin Kong, Jiandong Wang
Journal: Am J Transl Res (2018): 1663–1676

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Jianwei Ma, Takahiro Hiratsuka, Tsuyoshi Etoh, Junko Akada, Hajime Fujishima, Norio Shiraishi, Yoshio Yamaoka, Masafumi Inomata
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Chunlan Fan, Yuan Qiao, Minke Tang
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: J Zhang, HS Shi, JQ Liu, T Yu, ZH Shen, JD Ye
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Ping Patrick, Tulin O Price, Ana L Diogo, Nader Sheibani, William A Banks, Gul N Shah
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Sowmya P Lakshmi, Aravind T Reddy, Yingze Zhang, Frank C Sciurba, Rama K Mallampalli, Steven R Duncan, Raju C Reddy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kazuyuki Kawamura, Yukiko Kuroda, Masako Sogo, Miki Fujimoto, Toshio Inui, Takao Mitsui
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 深红色荧光 Cat#22903
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光 Cat#22901
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 橙色荧光 Cat#22902

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光 货号22901-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 红色荧光 货号22901 货号 22901 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 520 Em (nm) 605
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导中起重要作用。但是，在与氧化应激相关的状态下，ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎性疾病，许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Amplite 荧光ROS检测试剂盒使用我们独特的ROS指示剂来定量活细胞中的ROS。 Amplite ROS Red具有细胞渗透性。与ROS反应时会产生红色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”测定形式。 Amplite 荧光ROS测定试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在1-2小时的孵育中检测活细胞中的细胞内ROS。该测定可以以方便的96孔或384孔板形式进行，无需分离步骤即可轻松实现自动化。使用荧光酶标仪或荧光显微镜可以轻松读取其信号。它可用于定量ROS活性或筛选ROS抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： 520nm
发射： 605nm
推荐孔板： 黑色透明
滤波片： Texas Red滤波片组
荧光酶标仪  
激发： 520nm
发射： 605nm
cutoff: 590nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 在生长培养基中准备细胞
  2. 加入Amplite ROS Red工作溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）
  3. 在37°C下孵育细胞1小时
  4. 用测试化合物处理细胞以诱导ROS
  5. 在Ex / Em = 520/605 nm（截止= 590 nm）或安装Ex / Em = 520/605 nm滤光片的荧光显微镜下检测荧光增加（底部读取模式）

 

溶液配制

储备溶液配制

1. Amplite ROS Red储备液（500X）：将40 µL DMSO（组分C）添加到Amplite ROS Red（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成500X Amplite ROS Red储备液。 避光。 注意：20 µL 500X Amplite ROS Red储备液足以用于1个板。 注意：如果将试管紧密密封并避免光照，可以将未使用的部分等分并在<-20°C下保存超过一个月。 避免重复冻融循环。

 

工作溶液配制

将20 µL 500X Amplite ROS Red储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成Amplite ROS Red工作溶液。 注意：此Amplite ROS Red工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

 

实验步骤

1.将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Amplite ROS Red工作溶液添加到细胞板中。

2.将细胞在5％CO2、37°C的培养箱中孵育一小时。

3.在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用20µL 11X测试化合物（96孔板）或10 µL 6X测试化合物（384孔板）处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

4.要诱导ROS，请在室温下或在5％CO2、37°C的培养箱中孵育细胞板至少15分钟（对于用1 mM H2O2处理的Hela细胞为30分钟）。

5.在Ex / Em = 520/605 nm（截止= 590 nm）处使用荧光酶标仪（底部读取模式）检测荧光的增加，或在Ex / Em = 520/605 nm滤光片组（Texas Red）下使用荧光显微镜观察细胞）。

 

参考文献

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Ma, Jianwei and Hiratsuka, Takahiro and Etoh, Tsuyoshi and Akada, Junko and Fujishima, Hajime and Shiraishi, Norio and Yamaoka, Yoshio and Inomata, Masafumi
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Fan, Chunlan and Qiao, Yuan and Tang, Minke
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: Zhang, J and Shi, HS and Liu, JQ and Yu, T and Shen, ZH and Ye, JD
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Patrick, Ping and Price, Tulin O and Diogo, Ana L and Sheibani, Nader and Banks, William A and Shah, Gul N
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Lakshmi, Sowmya P and Reddy, Aravind T and Zhang, Yingze and Sciurba, Frank C and Mallampalli, Rama K and Duncan, Steven R and Reddy, Raju C
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kawamura, Kazuyuki and Kuroda, Yukiko and Sogo, Masako and Fujimoto, Miki and Inui, Toshio and Mitsui, Takao
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice
Authors: Nomura, Johji and Busso, Nathalie and Ives, Annette and Matsui, Chieko and Tsujimoto, Syunsuke and Shirakura, Takashi and Tamura, Mizuho and Kobayashi, Tsunefumi and So, Alex and er and Yamanaka, Yoshihiro
Journal: Scientific reports (2014): 4554

High glucose-induced mitochondrial respiration and reactive oxygen species in mouse cerebral pericytes is reversed by pharmacological inhibition of mitochondrial carbonic anhydrases: implications for cerebral microvascular disease in diabetes
Authors: Shah, Gul N and Morofuji, Yoichi and Banks, William A and Price, Tulin O
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 354–358

Automatic flow injection based methodologies for determination of scavenging capacity against biologically relevant reactive species of oxygen and nitrogen
Authors: Magalhaes LM, Lucio M, Segundo MA, Reis S, Lima JL.
Journal: Talanta (2009): 1219

Diabetes and the impairment of reproductive function: possible role of mitochondria and reactive oxygen species
Authors: Amaral S, Oliveira PJ, Ramalho-Santos J.
Journal: Curr Diabetes Rev (2008): 46

说明书
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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 橙色荧光 货号22902-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 橙色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 橙色荧光

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 橙色荧光 货号22902 货号 22902 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 2604
Ex (nm) 556 Em (nm) 566
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导中起重要作用。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎性疾病，许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 荧光细胞内总ROS活性测定试剂盒使用我们专有的ROS Brite 570指示剂来定量活细胞中的ROS。与ROS反应后，可渗透细胞且无荧光的ROS Brite 570表现出很强的荧光信号。 ROS Brite 570指示剂位于细胞质中。 ROS Brite 570指示剂的荧光信号可以通过荧光显微镜，高通量筛选，荧光酶标仪或流式细胞仪进行检测。 Cell Meter 荧光细胞内总ROS活性测定试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在孵育1小时内检测活细胞中的细胞内ROS（尤其是超氧化物和羟基自由基）。可以使用荧光酶标仪或带有TRITC滤光片的荧光显微镜以方便的96孔或384孔板形式进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 488 nm or 532 nm激光
发射： 575/26nm滤波片
通道： PE通道
荧光显微镜  
激发： TRITC滤波片
发射： TRITC滤波片
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 540nm
发射： 570nm
cutoff: 550nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

样品实验方案

简要概述

（适用于荧光显微镜、荧光酶标仪）

1.在生长培养基中准备细胞

2.用测试化合物处理细胞以诱导ROS

3.添加ROS Brite 570工作溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）

4.将细胞在37°C下染色30-60分钟

5.在Ex / Em = 540/570 nm（截止= 550 nm）或配备TRITC滤光片的荧光显微镜下检测荧光的增加（底部读取模式）

（流式细胞仪）

1.在生长培养基中准备细胞
2.用测试化合物处理细胞以诱导ROS
3.将ROS Brite 570与细胞一起孵育30-60分钟
4.使用带有FL2通道的流式细胞仪检测荧光强度

 

溶液配制

储备溶液配制

1. ROS Brite 570储备溶液（500X）：将40 µL DMSO（组分C）添加到ROS Brite 570（组分A）小瓶中，并充分混合以制成500X ROS Brite 570储备液，避光。 注意：20 µL 500X ROS Brite 570储备溶液足以用于1个板。 对于流式细胞仪，为方便起见，可以将5倍ROS Brite 570储备液稀释5倍至DMSO中的100倍。 为了存放，请将管子紧紧密封。

 

工作溶液配制

将20 µL的500X ROS Brite 570储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成ROS Brite 570工作溶液。 注意：此ROS Brite 570工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

 

实验步骤

1.针对荧光显微镜和荧光酶标仪：

1.1在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

1.2要诱导ROS，请在室温下或在5％CO2、37°C的培养箱中孵育细胞板（例如：用100 µM氢过氧化叔丁基（TBHP）处理Hela细胞30分钟）。

1.3将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的ROS Brite 570工作溶液添加到细胞板中。

1.4将细胞在5％CO2、37°C的培养箱中孵育30分钟至60分钟。

1.5使用荧光酶标仪（Ext / Em = 540/570 nm（截止= 550nm））检测荧光的增加，或使用带有TRITC滤光片组的荧光显微镜检测细胞。

2.针对流式细胞仪：

2.1准备从5×105到1×106细胞/ mL的密度的细胞。 注意：应根据个体情况评估每种细胞系，以确定诱导凋亡的最佳细胞密度。

2.2在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中用测试化合物处理细胞。 对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

2.3要诱导ROS，请在室温下或在5％CO2、37°C的培养箱中孵育细胞板至少30分钟（如对于用100 µM氢过氧化叔丁基（TBHP）处理的Hela细胞，则需30分钟） ）。

2.4向细胞培养基中加入1 µL / mL的500X ROS Brite 570储备液细胞或5 µL / mL的100X ROS Brite 570储备液细胞。

2.5将细胞在5％CO2、37°C的培养箱中孵育30至60分钟。

2.6使用带有FL2通道的流式细胞仪检测荧光强度。

 

参考文献

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Ma, Jianwei and Hiratsuka, Takahiro and Etoh, Tsuyoshi and Akada, Junko and Fujishima, Hajime and Shiraishi, Norio and Yamaoka, Yoshio and Inomata, Masafumi
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Fan, Chunlan and Qiao, Yuan and Tang, Minke
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: Zhang, J and Shi, HS and Liu, JQ and Yu, T and Shen, ZH and Ye, JD
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Patrick, Ping and Price, Tulin O and Diogo, Ana L and Sheibani, Nader and Banks, William A and Shah, Gul N
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Lakshmi, Sowmya P and Reddy, Aravind T and Zhang, Yingze and Sciurba, Frank C and Mallampalli, Rama K and Duncan, Steven R and Reddy, Raju C
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kawamura, Kazuyuki and Kuroda, Yukiko and Sogo, Masako and Fujimoto, Miki and Inui, Toshio and Mitsui, Takao
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice
Authors: Nomura, Johji and Busso, Nathalie and Ives, Annette and Matsui, Chieko and Tsujimoto, Syunsuke and Shirakura, Takashi and Tamura, Mizuho and Kobayashi, Tsunefumi and So, Alex and er and Yamanaka, Yoshihiro
Journal: Scientific reports (2014): 4554

High glucose-induced mitochondrial respiration and reactive oxygen species in mouse cerebral pericytes is reversed by pharmacological inhibition of mitochondrial carbonic anhydrases: implications for cerebral microvascular disease in diabetes
Authors: Shah, Gul N and Morofuji, Yoichi and Banks, William A and Price, Tulin O
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 354–358

Automatic flow injection based methodologies for determination of scavenging capacity against biologically relevant reactive species of oxygen and nitrogen
Authors: Magalhaes LM, Lucio M, Segundo MA, Reis S, Lima JL.
Journal: Talanta (2009): 1219

Diabetes and the impairment of reproductive function: possible role of mitochondria and reactive oxygen species
Authors: Amaral S, Oliveira PJ, Ramalho-Santos J.
Journal: Curr Diabetes Rev (2008): 46

说明书
活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒 橙色荧光 .pdf

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪 货号11505-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪 货号11505 货号 11505 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 3264
Ex (nm) 405 Em (nm) 450
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒，过氧化氢是一种活性氧代谢副产物，可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多与哮喘，动脉粥样硬化，糖尿病血管病变，骨质疏松症，许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物具有细胞渗透性，当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具，并且它被优化用于流式细胞术。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器

流式细胞仪  
激发： 405nm
发射： 450/40nm 滤波片
通道： Pacific Blue通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.使用流式细胞仪Pacific Blue Channel监测荧光强度（Ex / Em = 405/450 nm）

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物传感器原液：
将100μLDMSO（组分B）加入到OxiVision 蓝色过氧化物传感器（组分A）的小瓶中，并充分混合。 注意：1μL重组的OxiVision 蓝色过氧化物传感器原液足以容纳0.5 mL细胞。 应立即使用原液,避光。

点击查看细胞制备指南

   

样品分析

1.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备液在完全培养基或37°C所需缓冲液中染色细胞20-30分钟，避光。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。注意：建议在完全培养基中处理细胞。然而，如果测试的化合物对血清敏感，则可以在治疗前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后，将细胞重悬于1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液中。或者，可以在无血清培养基中处理细胞。注意：我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37°C处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.使用流式细胞仪监测太平洋蓝色通道（Ex / Em = 405 / 450nm）的荧光强度。

 

参考文献

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55–63

 

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