上海金畔生物科技有限公司提供羊抗小鼠IgG–FITC,索莱宝,SF131-3ml,可以访问官网了解更多产品信息。
羊抗小鼠IgG–FITC,索莱宝,SF131-3ml
浓度 | |
规格 | 3ml |
保存 |
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羊抗小鼠IgG–FITC,索莱宝,SF131-3ml
浓度 | |
规格 | 3ml |
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上海金畔生物科技有限公司提供透明切胶吸头,爱思进/Axygen,TGL-1165-R 1.1*6.5mm,未灭菌,盒装,10 盒 / 包,可以访问官网了解更多产品信息。
透明切胶吸头,爱思进/Axygen,TGL-1165-R 1.1*6.5mm,未灭菌,盒装,10 盒 / 包
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
级别 :
|
超纯、高纯
|
含量 :
|
95%
|
产品规格 :
|
5g
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CAS :
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166410-32-8
|
品牌 :
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AAT Bioquest
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用途范围 :
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AAT Bioquest生产的荧光染料
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特色服务 :
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包邮
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货号 | 4006 | 存储条件 | f |
规格 | 5 g | ||
Ex (nm) | Em (nm) | ||
分子量 | 318.80 | 溶剂 | DMF |
产品详细介绍 |
简要概述
产品基本信息
货号:4006
产品名称:N-FMOC-ethylenediamine hydrochloride CAS 166410-32-8
规格:5g
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:318.80
溶剂:DMF
激发波长(nm):N/A
发射波长(nm):N/A
产品介绍
金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的N-FMOC-ethylenediamine hydrochloride
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货号 | 11553 | 存储条件 | f/l |
规格 | 500 Tests | ||
Ex (nm) | 646 | Em (nm) | 667 |
分子量 | 溶剂 | ||
产品详细介绍 |
简要概述
Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂盒,过氧化酶是常用于与抗体按4:1比例结合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小,因此在与抗体、抗原结合形成复合物时不会带来空间阻碍。与其它酶标签相比,过氧化酶也更便宜;其主要缺点是在保护剂存在的条件下溶解性低;而在低浓度下,过氧化酶的活性低。HRP偶联物是广泛用作ELISA(酶联免疫吸附实验)、免疫组化技术、Northern、 Southern和Western blot分析的检测试剂。Amplite荧光法过氧化酶检测试剂盒 *近红外荧光* 提供了一种快速(10分钟)HRP一步法均质的、无需洗脱的分析检测方案。本试剂盒使用Amplite IR,HRP近红外荧光底物。Amplite IR是过氧化酶的显色底物,它比H2O2和过氧化酶,及其它的过氧化酶的显色底物(例如TMB, ABTS, OPD 和K-Blue)具有更高的灵敏度。Amplite IR可产生在647 nm具有大吸收光,在670 nM处具有大激发光的底物,这种近红外吸收使自动化检测生物样品时本底吸收很小,在600nm处几乎没有光吸收。本试剂盒可以用于ELISAs,酶促反应动力学分析,氧化酶抑制剂高通量筛选等。本试剂盒经过优化处理,并且可用于高通量液体处理设备。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒。
点击查看光谱
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备过氧化物酶工作溶液(50μL)
2.添加HRP标准品和/或测试样品(50μL)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.监测Ex / Em = 640/680 nm处的荧光强度(截止= 665 nm)
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 Amplite IR过氧化物酶底物储备液(100X):
将250μLDMSO(组分E)加入到Amplite IR过氧化物酶底物(组分A)的小瓶中以制备100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液。
1.2 HRP标准溶液(20 U / mL):
将1mL测定缓冲液(组分C)加入到辣根过氧化物酶(组分D)的小瓶中以制备20U / mL HRP标准溶液。
1.3 H2O2储备溶液(20 mM):
将22.7μL的3%H2O2(0.88M,组分B)加入977μL的测定缓冲液(组分C)中以制备20mM H2O2储备溶液。 注意:稀释的H2O2溶液不稳定。 应丢弃未使用的部分。
2.标准溶液
HRP标准
将15μL20U / mL HRP标准溶液加入985μL测定缓冲液(组分C)中,得到300 mU / mL HRP标准溶液(SD7)。 取300 mU / mL HRP标准溶液(SD7),进行1:3连续稀释,得到连续稀释的HRP标准品(SD6 – SD1)和分析缓冲液(组分C)。
3.工作溶液
将50μL的100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液和50μL的20mM H2O2储备溶液加入到4.9mL的测定缓冲液(组分C)中以制备过氧化物酶工作溶液,避光。
样品分析
表1.实心黑色96孔微孔板中HRP标准品和测试样品的布局。 SD = HRP标准品(SD1-SD7,0.41至300mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。
BL | BL | TS | TS |
SD1 | SD1 | … | … |
SD2 | SD2 | … | … |
SD3 | SD3 | ||
SD4 | SD4 | ||
SD5 | SD5 | ||
SD6 | SD6 | ||
SD7 | SD7 |
表2.每个孔的试剂组成
孔 | 容积 | 试剂 |
SD1-SD7 | 50ul | 连续稀释液(0.41至300 mU / mL) |
BL | 50ul | 分析缓冲液(组分C) |
TS | 50ul | 测试样本 |
1.根据表1和2中提供的布局制备HRP标准品(SD),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。
2.向HRP标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL过氧化物酶工作溶液,使总过氧化物酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL过氧化物酶工作溶液,总体积为50μL/孔。
3.在室温下孵育反应30至60分钟,避光。
4.用荧光板读数器在激发= 600-650nm,发射= 650-690nm(Ex / Em = 640 / 680nm,截止= 665nm)监测荧光增加。 注意:也可将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在647±5nm波长下读数。 与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度
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简要概述
产品基本信息
货号:20318
产品名称:2’,3’-cGAMP-Cy5 偶联物
规格:100ug
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:2011.32
溶剂:DMSO
激发波长(nm):N/A
发射波长(nm):N/A
产品介绍
2',3'-cGAMP或cGAMP是由ATP和GTP的cGAS(cGAMP合酶)在胞浆DNA刺激下在哺乳动物细胞中产生的。2',3'-cGAMP也被称为“非正统”cGAMP。与典型的3',3'-cGAMP类似,2'3'-cGAMP通过与STING(IFN基因的刺激因子)结合并随后诱导IFN-β的TBK1-IRF3依赖性产生,作为激活先天免疫应答的信使。通过对其结构和功能研究表明,非标准2'3'-cGAMP与细菌产生的标准3'3'-cGAMP不同。2'3'-cGAMP以比3'3'-cGAMP拥有更大的亲和力与结合能力。cGAMP还被证明是一种能促进小鼠抗原特异性抗体的产生和T细胞反应的有效试剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的2’,3’-cGAMP-Cy5 偶联物。
上海金畔生物科技有限公司提供透明切胶吸头,爱思进/Axygen,TGL-1165 1.1*6.5mm,未灭菌,袋装,250 Tips / 包,可以访问官网了解更多产品信息。
透明切胶吸头,爱思进/Axygen,TGL-1165 1.1*6.5mm,未灭菌,袋装,250 Tips / 包
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羊抗小鼠IgG–FITC,索莱宝,SF131-0.3ml
浓度 | |
规格 | 0.3ml |
保存 |
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简要概述
Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有更效率标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。DIG Styramide是DIG酪胺的优良替代品,后者广泛用于众所周知的酪胺信号放大(TSA)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的DIG Styramide。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
修复/透化细胞或组织
在封闭缓冲液中添加一抗
加入结合HRP的二抗
准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)
溶液配制
储备溶液配制
1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 ℃的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。
2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。
工作溶液配制
1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。
2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。
3.Anti-DIG抗体工作溶液:按照相应说明书的步骤调配适当浓度的Anti-DIG抗体缀合物工作溶液。
实验步骤
(该步骤适用于细胞或组织染色)
细胞固定和透化
1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。
2.用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。
4.用PBS冲洗细胞或组织两次。
组织固定,脱石蜡和补液
(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)
过氧化物酶标记
1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。
2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。
3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。
4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。
5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。
6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。
7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。
Styramide标记
1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。
2.用PBS冲洗3次。
DIG标记
1.将100 µL二级抗DIG抗体缀合物工作溶液加到于每个样品中,并在室温下孵育60分钟。
2.用PBS洗涤3次,每次5分钟。
复染和荧光成像
1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。
2.加上盖玻片。
3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。
表1.建议用于核复染色的产品。
货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) |
17548 | 核蓝 DCS1 | 350/461 |
17550 | 核绿 DCS1 | 503/526 |
17551 | 核橙 DCS1 | 528/576 |
17552 | 核红 DCS1 | 642/660 |
图示
![]() 图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。 |
![]() 图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。 |
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简要概述
产品基本信息
货号:22012
产品名称:钙紫蓝素450 CytoCalcein 405nm激发
规格:1mg
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:24个月
产品物理化学光谱特性
分子量:~600
溶剂:DMSO
激发波长(nm):408
发射波长(nm):450
产品介绍
钙紫蓝素450 CytoCalcein 405nm激发 是美国AAT Bioquest生产的细胞活力测定试剂,CytoCalcein 紫罗兰450是开发的一种活细胞标记染料,其标记方式与Calcein AM相同。它的 激发光在405nm处,这与流式细胞仪中紫罗兰激光光谱十分吻合。它也可以被带有激发光源荧光显微镜的激发光激发。进入细胞的CytoCalcein Violet 450的荧光微弱,通过水解作用,形成发出强烈荧光的染料,其激发/ 发射光 波长在405 nm/450 nm处。这中特殊的光谱是从代表性荧光素FACS中分离出来的,它为多重荧光实验提供了更多的染料选择。与钙黄绿素蓝Calcein blue相比,CytoCalcein 紫罗兰450荧光更加明亮,并且在405 nm激发线下可以被更好的激发。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的钙紫蓝素450 CytoCalcein 405nm激发 。
上海金畔生物科技有限公司提供透明切胶吸头,爱思进/Axygen,TGL-1140-R 1.1*4mm,未灭菌,盒装,10 盒 / 包,可以访问官网了解更多产品信息。
透明切胶吸头,爱思进/Axygen,TGL-1140-R 1.1*4mm,未灭菌,盒装,10 盒 / 包
上海金畔生物科技有限公司提供羊抗大鼠IgG–FITC,索莱宝,SF132-0.3ml,可以访问官网了解更多产品信息。
羊抗大鼠IgG–FITC,索莱宝,SF132-0.3ml
浓度 | |
规格 | 0.3ml |
保存 |
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货号 | 12602 | 存储条 件 | f/l |
规格 | 200 Tests | ||
Ex (nm) | Em (nm) | ||
分子量 | 溶剂 | ||
产品详细介绍 |
简要概述
Amplite 荧光法神经氨酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于β-半乳糖苷酶的试剂盒,神经氨酸酶,也称为唾液酸酶,是糖苷水解酶,其催化末端唾液酸残基和神经氨酸的水解。常见的神经氨酸酶是病毒神经氨酸酶。唾液酸和邻近糖残基之间的连接的切割允许病毒通过粘蛋白转运并破坏宿主细胞上的血凝素受体,从而允许从感染细胞中洗脱后代病毒颗粒。神经氨酸酶促进感染细胞释放 病毒,并促进病毒在呼吸道内传播。因此,它是 开发的重要目标。神经氨酸酶的检测和筛选其抑制剂是研究生物过程和预防 感染的重要任务之一。有一些检测试剂盒可用于检测神经氨酸酶,但所有商业上可用的试剂盒使用起来都很繁琐。我们的Amplite 荧光神经氨酸酶检测试剂盒提供灵敏且稳定的荧光测定法,可检测细胞或生物样品中存在的神经氨酸酶。在神经氨酸酶切割后,非荧光神经氨酸酶底物变为强荧光。该试剂盒可在100μL测定体积中检测低至0.3 mU / mL的神经氨酸酶。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且易于适应自动化而无需分离步骤。荧光酶标仪在Ex / Em = ~320 / ~450nm处可以容易地读取信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法神经氨酸酶检测试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备神经氨酸酶工作溶液(50 µL)
2.加入神经氨酸酶标准品或测试样品(50 µL)
3.在37°C或室温下孵育1-2小时
4.监控Ex / Em = 320/460 nm(截止= 420 nm)的荧光增加
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 神经氨酸酶标准溶液(2U / mL):
将50 µL ddH2O加入小瓶神经氨酸酶标准品(组分C)中,制成约2 U / mL神经氨酸酶标准溶液。
1.2 FluLite 蓝色原液(200X):
将50 µL ddH2O加入FluLite Blue(组分A)小瓶中,制成200X储备溶液。
2.标准溶液
神经氨酸酶标准品
将10 µL的2 U / mL神经氨酸酶标准储备液加到990 µL的测定缓冲液(组分B)中,以生成20 mU / mL的神经氨酸酶标准品(NA7)。 取20 mU / mL神经氨酸酶标准溶液,并按1:2进行系列稀释,以使用分析缓冲液(组分B)获得系列稀释的神经氨酸酶标准品(NA6-NA1)。 注意:稀释的神经氨酸酶标准溶液不稳定。 在4小时内使用。
3.工作溶液
3.1 0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液:
将30 µLβ-巯基乙醇(组分F)添加到10 mL反应缓冲液(组分B)中,并充分混合。
注意:制备酶稀释缓冲液需要额外的缓冲液,用于生成标准曲线。
3.2 FDG工作方案:
将25 µL 1X FDG储备溶液加到5 mL的0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液中。 注意:请勿将FDG溶液在室温下长时间放置,否则会发生自发水解。
3.3 裂解缓冲液工作液:
将25μL的200X FluLite 蓝色储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液(组分B)中并充分混合以制备神经氨酸酶工作溶液。
样品操作及分析
表1.黑色固体96孔微孔板中神经氨酸酶标准品和测试样品的布局。 NA =神经氨酸酶标准品(NA1-NA7,0.312至20 mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。
BL | BL | TS | TS |
NA1 | NA1 | … | … |
NA2 | NA2 | … | … |
NA3 | NA3 | ||
NA4 | NA4 | ||
NA5 | NA5 | ||
NA6 | NA6 | ||
NA7 | NA7 |
表2.每个孔的试剂组成
孔 | 容积 | 试剂 |
NA1-NA7 | 50ul | 连续稀释(0.312至20 mU / mL) |
BL | 50ul | 空白对照 |
TS | 50ul | 测试样本 |
1.根据表1和2中提供的布局,准备神经氨酸酶标准品(NA),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。
2.向神经氨酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中添加50μL神经氨酸酶工作溶液,以使神经氨酸酶测定的总体积为100μL/孔。 对于384孔板,请向每个孔中添加25 µL神经氨酸酶工作溶液,总体积为50 µL /孔。
3.在避光的条件下,将反应在37°C或室温下孵育1至2小时。 注意:37°C孵育可获得更好的结果。
4.用荧光酶标仪监测在Ex / Em = 320/460 nm(截止= 420 nm)处的荧光增加。
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简要概述
产品基本信息
货号:6909
产品名称:小沟结合物探针CDPI3马来酰亚胺
规格:1 mg
储存条件:-20℃干燥
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
外观:固体
分子量:834.94
溶剂:DMSO
产品介绍
小沟结合物(MGB)分子选择性地结合到DNA分子的小沟,即DNA螺旋中的浅沟。MGB标记的寡核苷酸与互补的DNA和RNA靶序列形成稳定的杂合复合物。天然产物CC-1065的类似物(CDPI3)已表现出与寡核苷酸连接时可在单链DNA上阻止序列特异性引物延伸。包含CDPI3的寡核苷酸可提高特异性和杂交强度,从而增强DNA双链体的稳定性。将MGB分子添加到DNA探针可以设计出较短的杂交探针,该探针可用于分子诊断,例如基于定量PCR的测定。可能有几种设计,包括Taqman MGB探针。AAT Bioquest提供此CPG支持,可将MGB部分方便地添加到寡核苷酸的3'末端。我们还提供MGB亚磷酰胺,用于用MGB部分标记5'末端。
上海金畔生物科技有限公司提供透明切胶吸头,爱思进/Axygen,TGL-1140 1.1*4mm,未灭菌,袋装,250 Tips / 包,可以访问官网了解更多产品信息。
透明切胶吸头,爱思进/Axygen,TGL-1140 1.1*4mm,未灭菌,袋装,250 Tips / 包
上海金畔生物科技有限公司提供羊抗牛IgG–FITC,索莱宝,SF133-0.5ml,可以访问官网了解更多产品信息。
羊抗牛IgG–FITC,索莱宝,SF133-0.5ml
浓度 | |
规格 | 0.5ml |
保存 |
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简要概述
LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针,用于标记活细胞的溶酶体。专有的溶解性染料可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。 溶致指示剂是疏水性化合物,易于渗透完整的活细胞,并在进入细胞后被捕获在溶酶体中。 进入溶酶体后,LysoBrite 试剂的荧光显着增强。 可以使用荧光成像,高内容成像,微孔板荧光测定法或流式细胞术测量所得荧光。 LysoBrite 橙色,红色,深红色和NIR试剂具有极高的光稳定性和优异的细胞保留性,可用于各种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。 它们适用于增殖和非增殖细胞,可用于悬浮细胞和贴壁细胞。溶酶体是细胞器,其含有酸水解酶以分解废物和细胞碎片。 溶酶体消化多余的或破旧的细胞器,食物颗粒和吞噬的病毒或细菌。 溶酶体周围的膜允许消化酶在pH4.5下工作。 与微碱性胞质溶胶(pH 7.2)相比,溶酶体的内部是酸性的(pH 4.5-4.8)。 溶酶体通过质子泵和氯离子通道从细胞质中泵送质子穿过膜来维持这种pH差异。LysoBrite 溶酶体近红外荧光探针是美国AAT Bioquest研发的产品。
点击查看光谱
产品光谱图
产品说明书
使用LysoBrite 染料的分析方案
概述
准备细胞
添加染料工作溶液
在37°C孵育30分钟
洗涤细胞
在荧光显微镜下分析
注:该方案仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改。
操作方法
1.制备溶酶体染色溶液:
1.1解冻 LysoBrite 染料至室温。
1.2通过将20μL的500 X LysoBrite 染料稀释到10 mL Hanks和20 mm Hepes缓冲液或缓冲液(HBSS)中,制备染料工作溶液。
注1:对于一个96孔板,20μL的LysoBrite 染料就足够了。 在<-15℃下等分并储存未使用的LysoBrite 染料储备溶液。 保护它免受光照,避免反复冻融循环。
注2:荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。
2.准备和染色细胞:
2.1贴壁细胞:a.在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。 b.将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟。 c.用预热(37℃)Hanks和20mM Hepes缓冲液(HBSS)或您选择的缓冲液洗涤细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔。 d.使用配有所需滤光片组的荧光显微镜观察细胞。
注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。
2.2对于悬浮细胞:a.将等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)加入细胞中。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟。 b.用预热(37℃)Hanks和20mM Hepes缓冲液(HBSS)或您选择的缓冲液洗涤细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔。 c.使用配备有所需过滤器组的荧光显微镜观察细胞。
注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。
注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为粘附细胞染色(见步骤2.1)。
A: LysoBrite™ Orange (from AAT Bioquest) |
B: LysoTracker™ Red (from Invitrogen) |
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0 second |
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120 seconds |
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图1.在Costar黑色96孔板中用A:LysoBrite Orange或B:LysoTracker®RedDND-99(来自Invitrogen)染色的Hela细胞的图像。 通过使用Olympus荧光显微镜在0和120秒曝光时间比较TRTIC信号。
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
简要概述
Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测MDA的试剂盒,脂质过氧化物的特征在于不饱和脂肪酸,磷脂,糖脂,胆固醇酯和胆固醇的氧化降解。丙二醛(MDA)是脂质过氧化 常用的生物标志物之一。 MDA的测量历史上依赖于与TBA的反应以产生可以在532nm处比色测量的产物或在Ex / Em = 530550nm处以荧光法测量的产物。但是,TBA分析具有相当多的限制。(1)该反应对MDA没有特异性。(2)TBA-MDA反应需要在酸性条件下进行。(3)测定需要在高温下进行,一般在90-100ºC。由于这些限制,商业的基于TBA的MDA测定非常繁琐。这种Cell Meter 比色脂质过氧化(MDA)定量试剂盒提供了 快速, 方便的方法来测量MDA而不需要TBARS加热步骤。 MDA Blue 与MDA反应产生蓝色产物,用吸光度酶标仪在695 nm测量。该测定非常快速并且对MDA具有特异性,而与其他醛的干扰很小。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 比色法细胞内脂质氧化损伤(MDA)检测试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.准备并添加MDA标准和/或测试样品(50 µL)
2.准备并添加MDA Blue (10 µL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.加入反应溶液(40 µL)
5.监测OD在695 nm处的增加
溶液配制
1.储存溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
MDA标准储备液(100 mM):
将100 µL ddH2O加入MDA标准品(组分C)中,并充分混合。 注意:未使用的MDA储备溶液应以-20℃的形式等次储存。
2.标准溶液配制
MDA标准
将4μLMDA标准溶液(100 mM)添加到996μL稀释缓冲液(组分B)中以获得MDA标准溶液(400μM)。
样品操作及实验分析
表1.在透明的底部96孔微孔板中MDA标准品和测试样品的布局。 MDA = MDA标准(MDA1-MDA7); BL =空白对照; TS =测试样品。
BL | BL | TS | TS |
MDA1 | MDA1 | … | … |
MDA2 | MDA2 | … | … |
MDA3 | MDA3 | ||
MDA4 | MDA4 | ||
MDA5 | MDA5 | ||
MDA6 | MDA6 | ||
MDA7 | MDA7 |
表2.每个孔的试剂组成
孔 | 容积 | 试剂 |
MDA1-MDA7 | 50ul | 连续稀释 |
BL | 50ul | 稀释缓冲液(组分B) |
TS | 50ul | 测试样品 |
MDA测定
1.加入50 µL MDA标准品,空白对照和测试样品以清除底部96孔微孔板(如表1和表2所示)。
2.将10 µL /孔的MDA Blue (组分A)添加到MDA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中。 注意:对于384孔板,将25 µL样品,5 µL MDA Blue 溶液添加到每个孔中。 注意:请分装成一次性使用的组分A,并在-20ºC下闲置存放,并避免光照。
3.避光保存,室温下孵育反应10-30分钟。
4.加入40 µL反应溶液(组分D)使总测定体积为100 µL /孔。 注意:对于384孔板,请添加20 µL反应溶液(组分D),使总测定体积为50 µL /孔。
5.使用吸光度板读数器监控吸光度,并在695〜700 nm的OD处进行路径检查校正。
上海金畔生物科技有限公司提供枪头盒,爱思进/Axygen,RFL-R-1200 可填充空吸头盒,适配1200ul吸头,未灭菌,10 盒 / 包,可以访问官网了解更多产品信息。
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上海金畔生物科技有限公司提供羊抗兔IgG–FITC,索莱宝,SF134-3ml,可以访问官网了解更多产品信息。
羊抗兔IgG–FITC,索莱宝,SF134-3ml
浓度 | |
规格 | 3ml |
保存 |
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简要概述
产品基本信息
货号:20706
产品名称:新型钙离子荧光探针Calbryte 590,钾盐
规格:5×50 ug
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:12个月
产品物理化学光谱特性
分子量:1074.98
溶剂:水
激发波长(nm):573
发射波长(nm):588
产品介绍
新型钙离子荧光探针Calbryte 590,钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针,细胞内钙通量测定法是监测信号转导途径和G蛋白偶联受体(GPCR)和钙通道靶标的高通量筛选的一种广泛使用的方法。随后在1989年推出Rhod-2,后来开发了具有改善的信噪比的Rhod-4和Cal-590,它们成为用于共聚焦显微镜,流式细胞术和高通量筛选应用的广泛使用的红色荧光Ca2 +指示剂。Calbryte 590是用于测量细胞内钙的新一代红色荧光指示剂。Calbryte 590的信号/背景比率和细胞内保留特性大大提高,使其成为评估GPCR和钙通道靶标以及在活细胞中筛选其激动剂和拮抗剂的 强大的红色荧光指示剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的新型钙离子荧光探针Calbryte 590,钾盐。