Fast Pfu DNA 聚合酶

Fast Pfu DNA 聚合酶

简要描述:Fast Pfu DNA 聚合酶

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目录号 规格 备注 价格 说明书下载
E031-01A 250U 含dNTP 360元
E031-01B A包装×5 含dNTP 1620元
E031-02A 250U 不含dNTP  310元
E031-02B A包装×5 不含dNTP  1395元

 

· 制品内容 (250 U)

Fast Pfu DNA聚合酶(5 U/μl) 50 μl
dNTP 混合液 (各10 mM) 250 μl
5 × Fast Pfu Buffer with Mg2+ 2000 μl

 

· 制品说明
Pfu DNA聚合酶为zui常用的高保真DNA聚合酶,在需高保真的PCR反应中广范使用,然而Pfu酶扩增灵敏度不高,延伸速度缓慢(0.5kb/分钟)给众多的使用者带来了不便。针对普通Pfu酶的以上缺点,SinoBio采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造,制备的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点,是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能获得更理想的扩增结果,并大幅度缩短扩增反应时间。

· 用 途
用于要求保真度比较高的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等(参见 SinoBio 实验方案)。

· 产品特点
高保真:具有同Pfu酶相同的保真度,为普通Taq酶的10倍。
快速:Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍,72℃保温30秒可延伸1kb以上。
高效:以λDNA为模板,扩增长度可达12kb,能高效扩增≤6kb片段;对于人基因组DNA等复杂模板,能有效扩增出3kb特定基因片段。
*配方的5×Buffer:使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。

· 质量保证
经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。

· 使用建议

Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3’端”A”突出, 其PCR产物的克隆有两种方案:
1.PCR前引物进行5’端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中(参见 Sinobio 实验方案)。
2.将产物3’末端加A后再与T-Vector连接(参见 SinoBio 实验方案)。

*由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为 20-30碱基。另外为了减少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解, 尽量在冰上配置反应体系,并zui后加入Fast Pfu酶。。

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· 其他说明

 

Pfu DNA 聚合酶

Pfu DNA 聚合酶

简要描述:Pfu DNA 聚合酶

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目录号 规格 备注 价格 说明书下载
E002-01A 250U 含dNTP 230元
E002-01B A包装×5 含dNTP 1035元
E002-02A 250U 不含dNTP  180元
E002-02B A包装×5 不含dNTP  810元
 

· Pfu DNA 聚合酶内容 (250 U)

Pfu DNA聚合酶(5 U/μl) 50 μl
dNTP 混合液 (各10 mM) 250 μl
10 × Pfu Buffer with Mg2+ 1 ml

 

· Pfu DNA 聚合酶说明
本酶为Pyrococcus furiosus中分离的pfu DNA pol 基因在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。Pfu DNA聚合酶具有3’-5’外切酶(校正)活性,当聚合反应发生碱基错配时,聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。Pfu DNA聚合酶为使用范围zui广的高保真DNA聚合酶,其错误率仅为1.3×10-6,推荐Pfu DNA聚合酶用于需高保真的PCR反应。

· 用途
用于要求保真度比较高的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等(参见 Sinobio 实验方案)。

· 产品特点
高保真:Pfu DNA聚合酶是使用zui广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的10倍。
灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段(图例一)。
快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。
便利:10μl, 25μl 或50μl体系全部适用。

· 质量保证
经多次柱纯化,SDS-PAGE检测纯度大于95%;
PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。

· 使用建议

Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3’端”A”突出,其PCR产物的克隆有两种方案。
1. PCR前引物进行5’端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中(参见 Sinobio实验方案)。
2. 将产物3’末端加A后再与T-Vector连接(参见 Sinobio 实验方案)。
3. 由于Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配置反应体系,并zui后加入Pfu酶。

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2×Pfu PCR MasterMix (含染料),索莱宝,PC1320-5ml

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·  别名 : PCR扩增试剂盒

·  英文名称 : 2×Pfu PCR MasterMix (含染料)

·  储存条件 : -20℃

·  外观(性状) : 液体

·  单位 : 支

 

产品简介:

索莱宝公司生产的PCR MasterMix包含三种酶(TaqPfuTaq plus),每种酶对应着两种PCR MasterMix(含染料和不含染料),一共六种PCR MasterMix

Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,其扩增速度约为1-2kb/min。扩增碱基出错率为10-5左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。

Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。其扩增速度约为500bp/min左右。其产物为平未端,须加A后才可用于TA克隆。

Taq Plus:Taq和Pfu的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其扩增速度约为1000bp/min左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。

染料PCR MasterMix反应完后可以直接电泳检测。不含染料的PCR MasterMix反应完后加入上样缓冲液后电泳检测。

浓度
规格 5ml
保存 -20℃

2×Pfu PCR MasterMix (含染料),索莱宝,PC1320-1ml

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·  别名 : PCR扩增试剂盒

·  英文名称 : 2×Pfu PCR MasterMix (含染料)

·  储存条件 : -20℃

·  外观(性状) : 液体

·  单位 : 支

 

产品简介:

索莱宝公司生产的PCR MasterMix包含三种酶(TaqPfuTaq plus),每种酶对应着两种PCR MasterMix(含染料和不含染料),一共六种PCR MasterMix

Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,其扩增速度约为1-2kb/min。扩增碱基出错率为10-5左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。

Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。其扩增速度约为500bp/min左右。其产物为平未端,须加A后才可用于TA克隆。

Taq Plus:Taq和Pfu的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其扩增速度约为1000bp/min左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。

染料PCR MasterMix反应完后可以直接电泳检测。不含染料的PCR MasterMix反应完后加入上样缓冲液后电泳检测。

浓度
规格 1ml
保存 -20℃

2×Pfu PCR MasterMix (不含染料),索莱宝,PC1350-5ml

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• 别名 : PCR扩增试剂盒 • 英文名称 : 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料) • 储存条件 : -20℃ • 外观(性状) : 液体 • 单位 : 支 索莱宝公司生产的PCR MasterMix包含三种酶(Taq,Pfu,Taq plus),每种酶对应着两种PCR MasterMix(含染料和不含染料),一共六种PCR MasterMix。 Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,其扩增速度约为1-2kb/min。扩增碱基出错率为10-5左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。 Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。其扩增速度约为500bp/min左右。其产物为平未端,须加A后才可用于TA克隆。 Taq Plus:Taq和Pfu的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其扩增速度约为1000bp/min左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。 染料PCR MasterMix反应完后可以直接电泳检测。不含染料的PCR MasterMix反应完后加入上样缓冲液后电泳检测。
浓度
规格 5ml
保存 -20℃

2×Pfu PCR MasterMix (不含染料),索莱宝,PC1350-1ml

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• 别名 : PCR扩增试剂盒 • 英文名称 : 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料) • 储存条件 : -20℃ • 外观(性状) : 液体 • 单位 : 支 索莱宝公司生产的PCR MasterMix包含三种酶(Taq,Pfu,Taq plus),每种酶对应着两种PCR MasterMix(含染料和不含染料),一共六种PCR MasterMix。 Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,其扩增速度约为1-2kb/min。扩增碱基出错率为10-5左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。 Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。其扩增速度约为500bp/min左右。其产物为平未端,须加A后才可用于TA克隆。 Taq Plus:Taq和Pfu的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。其扩增速度约为1000bp/min左右。其产物未端带有A,可直接用于TA克隆。 染料PCR MasterMix反应完后可以直接电泳检测。不含染料的PCR MasterMix反应完后加入上样缓冲液后电泳检测。
浓度
规格 1ml
保存 -20℃

Pfu DNA Polymerase,索莱宝,PC1300-10KU

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·  别名 : Pfu DNA 聚合酶

·  英文名称 : Pfu DNA Polymerase

·  储存条件 : -20

·  外观(性状) : 液体

·  单位 : 支

 

本公司生产的Pfu DNA Ploymerase是从克隆有Pyrococcusfuriosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性,它能纠正DNA扩增过程中产生的错配,而传统的Taq酶却不能,其它耐热DNA PolymeraseVentDeep VentTliUITma等虽具有校正功能,但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性,PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟,比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定性更好,95 1小时仍保持90%以上的活性,对于GC含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端,可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。

Pfu来源:表达Pfu DNA聚合酶的大肠杆菌。
Pfu
酶储存缓冲液:50mMTris-HClpH 8.20.1mM EDTA1mM DTT0.1% Nonidet P400.1% Tween 2050% 甘油。
Pfu
单位定义:在74℃条件下,30分钟内催化10 nmmoldNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需要的酶量为一个单位。
Pfu
用途:1)常规PCR反应中的DNA高保真体外扩增;
2
)基因定点突变和拼接。
Pfu
注意事项:
1
、 酶浓度:建议在50ml的体系中使用1.25个单位的Pfu DNA聚合酶,因为酶存在3-5’外切酶活性,高浓度的酶可能会增加降解引物的可能性。最好在加完dNTP后再添加Pfu DNA聚合酶。并在有冰浴的条件下混合PCR反应中的各种成分。
2
、延伸时间:Pfu DNA聚合酶的延伸速率低于Taq DNA聚合酶,大约为一分钟600个碱基(Taq DNA聚合酶大约为一分钟2000个碱基),因此建议扩增1KbDNA用两分钟的延伸时间。对于大多数的反应而言,2535个扩增循环就足够了。
Pfu
保存:-20℃保存至少一年。

浓度
规格 10KU
保存 -20

Pfu DNA Polymerase,索莱宝,PC1300-1000U

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索莱宝

·  别名 : Pfu DNA 聚合酶

·  英文名称 : Pfu DNA Polymerase

·  储存条件 : -20

·  外观(性状) : 液体

·  单位 : 支

 

本公司生产的Pfu DNA Ploymerase是从克隆有Pyrococcusfuriosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性,它能纠正DNA扩增过程中产生的错配,而传统的Taq酶却不能,其它耐热DNA PolymeraseVentDeep VentTliUITma等虽具有校正功能,但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性,PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟,比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定性更好,95 1小时仍保持90%以上的活性,对于GC含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端,可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。

Pfu来源:表达Pfu DNA聚合酶的大肠杆菌。
Pfu
酶储存缓冲液:50mMTris-HClpH 8.20.1mM EDTA1mM DTT0.1% Nonidet P400.1% Tween 2050% 甘油。
Pfu
单位定义:在74℃条件下,30分钟内催化10 nmmoldNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需要的酶量为一个单位。
Pfu
用途:1)常规PCR反应中的DNA高保真体外扩增;
2
)基因定点突变和拼接。
Pfu
注意事项:
1
、 酶浓度:建议在50ml的体系中使用1.25个单位的Pfu DNA聚合酶,因为酶存在3-5’外切酶活性,高浓度的酶可能会增加降解引物的可能性。最好在加完dNTP后再添加Pfu DNA聚合酶。并在有冰浴的条件下混合PCR反应中的各种成分。
2
、延伸时间:Pfu DNA聚合酶的延伸速率低于Taq DNA聚合酶,大约为一分钟600个碱基(Taq DNA聚合酶大约为一分钟2000个碱基),因此建议扩增1KbDNA用两分钟的延伸时间。对于大多数的反应而言,2535个扩增循环就足够了。
Pfu
保存:-20℃保存至少一年。

浓度
规格 1000U
保存 -20

Pfu DNA Polymerase,索莱宝,PC1300-500U

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Pfu DNA Polymerase,索莱宝,PC1300-500U

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索莱宝

·  别名 : Pfu DNA 聚合酶

·  英文名称 : Pfu DNA Polymerase

·  储存条件 : -20

·  外观(性状) : 液体

·  单位 : 支

 

本公司生产的Pfu DNA Ploymerase是从克隆有Pyrococcusfuriosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性,它能纠正DNA扩增过程中产生的错配,而传统的Taq酶却不能,其它耐热DNA PolymeraseVentDeep VentTliUITma等虽具有校正功能,但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性,PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟,比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定性更好,95 1小时仍保持90%以上的活性,对于GC含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端,可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。

Pfu来源:表达Pfu DNA聚合酶的大肠杆菌。
Pfu
酶储存缓冲液:50mMTris-HClpH 8.20.1mM EDTA1mM DTT0.1% Nonidet P400.1% Tween 2050% 甘油。
Pfu
单位定义:在74℃条件下,30分钟内催化10 nmmoldNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需要的酶量为一个单位。
Pfu
用途:1)常规PCR反应中的DNA高保真体外扩增;
2
)基因定点突变和拼接。
Pfu
注意事项:
1
、 酶浓度:建议在50ml的体系中使用1.25个单位的Pfu DNA聚合酶,因为酶存在3-5’外切酶活性,高浓度的酶可能会增加降解引物的可能性。最好在加完dNTP后再添加Pfu DNA聚合酶。并在有冰浴的条件下混合PCR反应中的各种成分。
2
、延伸时间:Pfu DNA聚合酶的延伸速率低于Taq DNA聚合酶,大约为一分钟600个碱基(Taq DNA聚合酶大约为一分钟2000个碱基),因此建议扩增1KbDNA用两分钟的延伸时间。对于大多数的反应而言,2535个扩增循环就足够了。
Pfu
保存:-20℃保存至少一年。

浓度
规格 500U
保存 -20

Pfu DNA 聚合酶,生工,B500014-0500 500U

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Pfu DNA 聚合酶,生工,B500014-0500 500U

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生工
Pfu DNA 聚合酶

英文名 Pfu DNA Polymerase
相关类别 常规PCR 储存 冷冻(-20℃)

产品描述

概述

Pfu DNA聚合酶是从高温嗜热菌Pyrococcus furiosis分离出的高保真耐高温DNA聚合酶,分子量为90 kDa,具有3’→5’外切核酸酶活性,无5’→3’外切核酸酶活性,其扩增产物为平末端,无突出的A。DNA聚合时延伸速度为600 bp/min;PCR产物为平末端。其他高温DNA polymerase,如:Vent、DeepVent、Tli、UlTma等具有校正功能,但是Pfu是目前已发现的所有DNA聚合酶中扩增DNA时出错率最低的。Pfu DNA聚合酶比普通的Taq DNA聚合酶热稳定性更好,95°C、1 h仍保持90%以上的活力

特点

  • 其扩增产物为平末端,无突出的A 扩增DNA 时出错率最低 酶比普通的Taq DNA 聚合酶热稳定性更好

应用

常规 PCR、高保真 PCR、基因定点突变、 克隆表达。

组份

Pfu DNA polymerase,10X PCR Buffer

技术规格

储存 -20°C
浓度 5 U/μl
保质期 24 months
储存缓冲液 20 mMTris-HCl(PH8.2); 0.1mMEDTA; 0.1%Tween20; 0.1%NP-40; 1mMDTT; 100mM KCl; 50%甘油。
10X PCR Buffer 200 mM Tris-HCl(PH8.8);100 mM KCl; 100mM(NH4)2SO4; 20mMMgSO4; 1.0mg/ml BSA; 1.0%TritonX-100。
单位定义 在74°C、30 min内,使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀所需的酶量定义为1个活力单位(U)

浓度 5 U/μl
规格 500U
保存 冷冻(-20℃)

Pfu DNA 聚合酶,生工,B500014-0200 200U

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生工
Pfu DNA 聚合酶

英文名 Pfu DNA Polymerase
相关类别 常规PCR 储存 冷冻(-20℃)

产品描述

概述

Pfu DNA聚合酶是从高温嗜热菌Pyrococcus furiosis分离出的高保真耐高温DNA聚合酶,分子量为90 kDa,具有3’→5’外切核酸酶活性,无5’→3’外切核酸酶活性,其扩增产物为平末端,无突出的A。DNA聚合时延伸速度为600 bp/min;PCR产物为平末端。其他高温DNA polymerase,如:Vent、DeepVent、Tli、UlTma等具有校正功能,但是Pfu是目前已发现的所有DNA聚合酶中扩增DNA时出错率最低的。Pfu DNA聚合酶比普通的Taq DNA聚合酶热稳定性更好,95°C、1 h仍保持90%以上的活力

特点

  • 其扩增产物为平末端,无突出的A 扩增DNA 时出错率最低 酶比普通的Taq DNA 聚合酶热稳定性更好

应用

常规 PCR、高保真 PCR、基因定点突变、 克隆表达。

组份

Pfu DNA polymerase,10X PCR Buffer

技术规格

储存 -20°C
浓度 5 U/μl
保质期 24 months
储存缓冲液 20 mMTris-HCl(PH8.2); 0.1mMEDTA; 0.1%Tween20; 0.1%NP-40; 1mMDTT; 100mM KCl; 50%甘油。
10X PCR Buffer 200 mM Tris-HCl(PH8.8);100 mM KCl; 100mM(NH4)2SO4; 20mMMgSO4; 1.0mg/ml BSA; 1.0%TritonX-100。
单位定义 在74°C、30 min内,使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀所需的酶量定义为1个活力单位(U)

浓度 5 U/μl
规格 200U
保存 冷冻(-20℃)

Pfu DNA 聚合酶,生工,B500014-0100 100U

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Pfu DNA 聚合酶

英文名 Pfu DNA Polymerase
相关类别 常规PCR 储存 冷冻(-20℃)

产品描述

概述

Pfu DNA聚合酶是从高温嗜热菌Pyrococcus furiosis分离出的高保真耐高温DNA聚合酶,分子量为90 kDa,具有3’→5’外切核酸酶活性,无5’→3’外切核酸酶活性,其扩增产物为平末端,无突出的A。DNA聚合时延伸速度为600 bp/min;PCR产物为平末端。其他高温DNA polymerase,如:Vent、DeepVent、Tli、UlTma等具有校正功能,但是Pfu是目前已发现的所有DNA聚合酶中扩增DNA时出错率最低的。Pfu DNA聚合酶比普通的Taq DNA聚合酶热稳定性更好,95°C、1 h仍保持90%以上的活力

特点

  • 其扩增产物为平末端,无突出的A 扩增DNA 时出错率最低 酶比普通的Taq DNA 聚合酶热稳定性更好

应用

常规 PCR、高保真 PCR、基因定点突变、 克隆表达。

组份

Pfu DNA polymerase,10X PCR Buffer

技术规格

储存 -20°C
浓度 5 U/μl
保质期 24 months
储存缓冲液 20 mMTris-HCl(PH8.2); 0.1mMEDTA; 0.1%Tween20; 0.1%NP-40; 1mMDTT; 100mM KCl; 50%甘油。
10X PCR Buffer 200 mM Tris-HCl(PH8.8);100 mM KCl; 100mM(NH4)2SO4; 20mMMgSO4; 1.0mg/ml BSA; 1.0%TritonX-100。
单位定义 在74°C、30 min内,使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀所需的酶量定义为1个活力单位(U)

浓度 5 U/μl
规格 100U
保存 冷冻(-20℃)