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KTS-01/KlenTaq-S 产品说明书

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KTS-01/KlenTaq-S 产品说明书

货号：KTS-01

产品描述：KlenTaq-S（Taq DNA聚合酶）

品牌：ScienTech 

 

应用：

KlenTaq -S和PAP反应。

许多研究小组在PAP反应中发现KlenTaq- S是一种合适的热稳定 Taq DNA聚合酶。 

 

klentaq-s由编码Thermus aquaticus DNA聚合酶的，5’端缺失和F667Y（Tabor和Richardson）突变的基因表达的酶。在酶反应缓冲液中反复暴露于胞外，酶没有显示明显的活性丢失。

 

KlenTaq – S浓度：       10 U /μl

 

PAP（焦磷酸分解活化聚合）/ KlenTaq- S：

        

PAP在焦磷酸水解 和使用3’封闭引物与DNA聚合酶偶联聚合过程中，*的DNA扩增方法（Liu和Sommer：BioTechniques，29 [2000]，1072-1080; Nucleic Acids Res，30 [2002]，598-604）。  焦磷酸水解是DNA聚合的逆反应，其中在无机焦磷酸存在下，通过酶除去引物模板双链体3'末端处的封闭核苷酸（通常是双脱氧基）。通过焦磷酸水解除去封闭的核苷酸后，活化的引物可通过DNA聚合而延长。

 

由于PAP 的高特异性（1/3× 10 11） ，该过程正成为检测 存在大量过量的野生型等位基因时的罕见突变，大杂合缺失，基因重复等的有力工具（Liu等人：Biotechniques，40 [2006]，661-668）。理论上，PAP可以检测野生型等位基因3× 10 11个拷贝中的单个碱基突变。

 

PAP可以被用来作为一种替代或证实的实时PCR （Boon等人： Prenat   DIAGN 27 [2007]，932-937）方法。

 

PAP反应建议：

50mM Tris-HCl、7.8，16mM 硫酸铵，3.5mM氯化镁，25µM每种dNTPs，0.1µM每个引物，5-200 ng模板，90µm无机焦磷酸，2%二甲基亚砜（DMSO），2.5U klentaq-s酶。

循环条件：

950C for 1 min (变性), 然后 

940C for 15 sec

600C for 30 sec

640C for 30 sec

680C for 1 min

720C for 1-2 min      

共 25-45 个循环

 

缓冲液  (10X PR1):

500 mM Tris-HCl, pH 7.8, 160 mM  (NH4)2SO4, 35 mM MgCl2, 1.5 mg/ml BSA

订购信息：

货号：KTS-01

规格：100 µl or 1000 U/vial

货号

品名

规格

品牌

KTS-01

PAP (Pyrophosphorolysis-activated polymerization)/KlenTaq-S

1000 U

ScienTech 

KTS-01

PAP (Pyrophosphorolysis-activated polymerization)/KlenTaq-S

1000 U

ScienTech 

 

产品链接：http://www.scientechcorp。。ｎｅｔ/c_klentaqs.php

 

 

KlenTaq-S说明书

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KlenTaq-S说明书

KlenTaq-S说明书


           KlenTaq-S是一种热稳定性 DNA聚合酶，由基因的 5' 缺失和 Tabor 和 Richardson 的点突变 F667Y 表达，编码栖热菌 DNA 聚合酶。该酶进行聚合酶链反应的速度比 KlenTaq1 和全长 Taq DNA 聚合酶慢，但它接受的 ddNTP 是 Taq 的 100-5000 倍。已经发现这种酶 KlenTaq-S 最重要的特性是在焦磷酸解活化聚合 (PAP) 反应中，在该反应中可以在数十亿个野生型等位基因拷贝中检测到单个碱基突变（Liu 和 Sommer：生物技术，第 36 卷，第 156-166 页，2004 年）。到达后将酶储存在 -200°C。 

       储存缓冲液中的甘油可防止在 -200 C 下冻结，但非离子洗涤剂 Thesit 在此温度下会导致一些增稠。这是可选的，但建议在分配前在冰上加热至 00 C。对于长期储存，可以采用 -70 到 -800°C，但我们确保酶冷冻不超过两次。重新冷冻和解冻会导致酶活性降低。储存缓冲液为 50% 甘油 (v/v; 63% w/v)、50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。摩尔。重量 : ~ 62 kD

KlenTaq-S 测序酶

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KlenTaq-S 测序酶

简要描述：KlenTaq-S 测序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版，为 Taq DNA 聚合酶的大片段，并做了基因突变。本酶具有 5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。

详细介绍

产品咨询

本公司 KlenTaq-S 测序酶是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义活性单位指在 72℃下， 1×AM PCR Buffer 1，30 min 内将 10 nmole dNTP 掺入酸不溶性物质所需的酶量。特点

1.尤其适合 ddNTP 等修饰核苷酸的掺入反应

2.相比全长 Taq DNA 聚合酶，本酶比活性有所降低

适用范围

ddNTP 终止法DNA 测序（一代测序）

焦磷酸解反应延伸法 SNP 分析

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

应用举例

以下反应举例为 50 μl 标准 PCR 体系，仅供参考。实际 PCR 条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

1） 按下表配制反应体系

组份 

体积/μl

终浓度 

10×AM PCR Buffer 1

5

1×

dNTPs（2.0 mM）

5

0.2 mM

引物 F（10 μM）

1.5

0.3 μM

引物R（10 μM）

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

KlenTaq-S测序酶（5U/μl）

0.5

2.5U

ddH2O

Varable

/

总体积

50

/

*模板DNA用量参数(50 μl反应体系):

人基因组DNA100-1000 ng ; 微生物基因组DNA 10-100ng；PCR产物 1 ng-10 ng； Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

 

2） 按如下条件进行反应，

95℃

2-5 min

95℃

15 sec

 

25-35 Cycles

55~72℃

20 sec

72℃

1kb/min

72℃

5 min

3） 琼脂糖凝胶电泳检测PCR 产物，或按实验目的进行后续操作。

注意事项1.PCR 条件和野生型 Taq DNA 聚合酶类似，对特定 DNA 的测序反应可能需要优化。2.本酶扩增能力较野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低，PCR 产量有所降低，不建议用于常规 PCR。3.不可用于 Taqman 探针法 q-PCR。

PAP（KlenTaq-S 测序酶）说明书

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PAP（KlenTaq-S 测序酶）说明书

PAP（KlenTaq-S 测序酶）说明书

产品详情

货号

规格

价格

78BEA10012-250U

250U

￥870.00

78BEA10012-1250U

1250U

￥3500.00

78BEA10012-5000U

5000U

￥11300.00

78BEA10012-12500U

12500U

￥26050.00

产品详情

KlenTaq-S 测序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版，为 Taq DNA 聚合酶的大片段，并做了基因突变。本酶具有 5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。相比普通Taq DNA 聚合酶，KlenTaq-S 测序酶具有很强的 ddNTP 的渗入能力，因此其适用于终止法 DNA 测序或焦磷酸解反应 SNP 分析。

本公司 KlenTaq-S 测序酶是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

活性单位指在 72℃下， 1×AM PCR Buffer 1，30 min 内将 10 nmole dNTP 掺入酸不溶性物质所需的酶量。

特点

1.尤其适合 ddNTP 等修饰核苷酸的掺入反应

2.相比全长 Taq DNA 聚合酶，本酶比活性有所降低

适用范围

ddNTP 终止法DNA 测序（一代测序）

焦磷酸解反应延伸法 SNP 分析

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

应用举例

以下反应举例为 50 μl 标准 PCR 体系，仅供参考。实际 PCR 条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

1） 按下表配制反应体系

组份

体积/μl

终浓度

10×AM PCR Buffer 1

5

1×

dNTPs（2.0 mM）

5

0.2 mM

引物 F（10 μM）

1.5

0.3 μM

引物R（10 μM）

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

KlenTaq-S测序酶（5U/μl）

0.5

2.5U

ddH2O

Varable

/

总体积

50

/

*模板DNA用量参数(50 μl反应体系):

人基因组DNA100-1000 ng ; 微生物基因组DNA 10-100ng；PCR产物 1 ng-10 ng； Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

2） 按如下条件进行反应，

95℃

2-5 min

95℃

15 sec

25-35 Cycles

55~72℃

20 sec

72℃

1kb/min

72℃

5 min

3） 琼脂糖凝胶电泳检测PCR 产物，或按实验目的进行后续操作。

注意事项

1.PCR 条件和野生型 Taq DNA 聚合酶类似，对特定 DNA 的测序反应可能需要优化。

2.本酶扩增能力较野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低，PCR 产量有所降低，不建议用于常规 PCR。

3.不可用于 Taqman 探针法 q-PCR。

浓度

5U/uL

运输与保存

-20℃可保存 2 年，避免反复冻融

klentaq 热启动产品列表

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klentaq 热启动产品列表

klentaq 热启动产品

在标准 PCR 循环过程中，引物二聚体形成和其他非特异性引物退火可能会在机器加热时发生。这对于严格的 PCR 反应可能是有害的。在管达到熔化温度后，可以通过添加酶或其他关键反应组分来执行手动热启动。但是使用热启动产品会使这个过程变得更加容易。 

我们的铯酶是 Taq 或 Klentaq1 DNA 聚合酶的双重冷敏感突变体。由于在低温下抑制了活性，它们为 PCR 提供了自动热启动。

此外，所有列出的酶都可逆地结合至适体。适体形成发夹并在亚循环温度下与聚合酶的活性位点结合，使酶失活并防止虚假扩增。适配体在第一个熔解步骤中释放，从而实现*的酶活性。

RockStart 缓冲液旨在为任何 DNA 聚合酶提供热启动。它通过在室温下沉淀镁并防止酶活性起作用。镁在正常循环条件下释放。 

klentaq 热启动产品列表

PRODUCT NAME CAT # AMOUNT PRICE
Hot Start Klentaq1 HS100 100 ul (2,000 X 25 ul rxns up to 1kb) $265.00
Hot Start OmniTaq HS300 125 ul (500 x 25 ul rxns) $280.00
Hot Start OmniTaq 2 HS302 125 ul (500 X 25 ul rxns) $350.00
Hot Start OmniTaq 3 HS303 125 ul (500 X 25 ul rxns) $350.00
Hot Start Omni Klentaq HS340 125 ul (500 X 25 ul rxns) $280.00
Hot Start Omni Klentaq 2 HS342 125 ul (500 X 25 ul rxns) $350.00
Hot Start Cesium Klentaq C HS280 100ul (2000 x 25ul rxns) $220.00
Hot Start Cesium Klentaq AC HS240 100ul (2000 x 25ul rxns) $220.00
Hot Start CesiumTaq HS200 100 ul (2,000 X 25 ul rxns) $220.00
Hot Start Enzyme Combo HS500 variable $325.00
RockStart Buffer System Rock100 100 rxns $60.00

 

 

klentaq产品概述

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klentaq产品概述

klentaq产品概述


我们所有的聚合酶都有 LA（Long Accurate）、非 LA 版本，或者为方便起见，作为 5x PCR 试剂盒的一部分提供。

Klentaq1 和 Klentaq LA

我们的 5'-外切核酸酶缺陷型 Taq 聚合酶可提供更高的保真度和热稳定性，尤其是作为 LA（长准确度）酶混合物的一部分。

克伦塔克1  长而准确的产品

Taq 和 Klentaq 的抗抑制突变体

我们的 Omni 酶是 Taq 或 Klentaq1 聚合酶的三重突变体，对血液、血清、土壤、荧光染料和其他 PCR 抑制剂具有抗性。我们强烈建议将这些酶与我们的一种 PCR 增强剂鸡尾酒配对。

抗抑制产品

一种酶中的逆转录和 PCR

我们的 OmniTaq2 酶的速度提高了 2-3 倍，并且能够进行链置换和逆转录。

逆转录和 PCR 合二为一  

热启动酶和缓冲液

我们的铯酶是 Taq 或 Klentaq1 DNA 聚合酶的双重冷敏感突变体。由于在低温下抑制了活性，它们为 PCR 提供了自动热启动。RockStart 是一种缓冲系统，可为任何 DNA 聚合酶的 PCR 提供热启动。 

热启动产品

PCR 增强剂鸡尾酒 (PEC)

我们的 PEC 产品是非甜菜碱 PCR 增强剂，专为与抑制性模板一起使用而设计。强烈建议将它们与我们 的抗抑制 Taq 和 Klentaq 突变体一起使用。它们还与大多数市售 DNA 聚合酶兼容。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


jembio KlenTaq1 DNA 聚合酶说明书

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jembio KlenTaq1 DNA 聚合酶说明书

jembio KlenTaq1说明书


jembio中国代理

jembio KlenTaq1是一种热稳定性 DNA 聚合酶，从该基因的 5' 缺失表达，编码水生栖热菌 DNA 聚合酶，留下高活性和更热稳定的 DNA 聚合酶活性。在反应缓冲液 PC2 中反复暴露于 980°C 似乎不会降低酶活性。即使在暴露于 990 C 后仍保持显着活性。全长酶不能耐受这些处理。               



jembio KlenTaq1    ™ 酶缺少野生型全长 Taq DNA 聚合酶的 N 端部分。这部分蛋白质与大肠杆菌 DNA 聚合酶 1 的 5' – 外切核酸酶区域同源。  因此， KlenTaq1 ™ 与 Hoffman LaRoche 的 Stoffel 片段相似但又不同。               


对于不含甘油的KlenTaq1 （Cat# 1001 NGKT）：将酶和缓冲液储存在 4°C。储存缓冲液为 50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。               


对于50% 甘油中的KlenTaq1 （货号 1001）：将酶储存在 -200 C，缓冲液在 40 C。储存缓冲液中的甘油可防止在 -20°C 下冻结，但 Thesit 在此温度下会导致一些增稠。它是可选的，但建议在分配前在冰上加热至 0°C。对于长期储存，可以使用 -70°C 或 -80°C，但我们建议不要将酶冷冻一次以上。重新冷冻和解冻会导致酶的活性降解。储存缓冲液为 50% 甘油（v/v；63% w/v）、50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。                

 浓度：5   KlenTaq1™单位（在 72°C 下 30 分钟内掺入 60 nmole）。活化的鲑鱼精子DNA是模板；PC2（见下文）是缓冲区。NB 这些单位比标准单位大 6 倍。在标准单位（10 nmole/30 分钟）中，这里的酶浓度约为 30 单位/ml。                   

尽管该酶在各种条件下都能很好地发挥作用，但推荐的反应缓冲液 PC2 为：50 mM Tris-HCl pH 9.1、16 mM 硫酸铵、3.5 mM MgCl2 和 150 mg/ml BSA（按订单提供） . 请注意，与热稳定 DNA 聚合酶的其他缓冲液相比，不含 KC1 和明胶。dNTP 浓度可以从每个 50 µM 到每个 1.2 mM 不等，但通常使用 200 µM。如果 DNA 掺入量超过 500 bp，您将需要比 Taq 蛋白更多的KlenTaq1™蛋白。KlenTaq1™ 以 25-30 u/µl 的浓度运输，因此如果使用与全长 Taq DNA 聚合酶相同的数量（罗氏推荐），它可以很容易地掺入 2000 bp。

                    1 DNA 掺入单位 = 10 nmoles / 30 min ='标准单位'。罗氏的酶每微升含有 5 个“标准单位”。KlenTaq1™每微升含有 25-30 个“标准单位”。                    


罗氏推荐每 100 微升反应 0.5 微升；也就是说，1微升将催化2个反应。进行反应所需的KlenTaq1™的量取决于掺入的长度。对于KlenTaq1™ ，在 100 微升反应中，1 微升将催化 15-20 个 500 bp 的反应和 8-10 个 1 kb 的反应和 3-5 个 2kb 模板 DNA 的反应。由于过量的 KlenTaq1™ 是无害的，我们保守地建议每次反应 0.50 微升，以确保 2.5 kb 以内的所有内容都能正常工作。这就是我们检查和滴定酶的方式。


货号：1001