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钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐 货号21025-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

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钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐 货号21025
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Product details

钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐

钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐 货号21025

简要概述

        钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐是美国AAT Bioquest研发的用于钙通量测定的试剂，在比例钙指示剂中， 常用的是Fura-2和Indo-1。Fura-2可激发，而Indo-1可发射。对于比率成像显微镜，Fura-2是优选的，在比率成像中，更改激发波长比发射波长更实际。结合Ca2 +时，Fura-2表现出吸收位移，可通过扫描300至400 nm之间的激发光谱来观察，同时监测〜510 nm处的发射。Fura-2钾盐是一种不可渗透细胞的荧光探针，用于按比例模式检测Ca2+。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐。

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产品说明书

操作步骤

1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。 但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。 它们应该用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）重新配制。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下，AM酯应稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。

b）在实验当天，将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.02％Pluronic®F-127在您选择的缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系，我们建议钙指示剂的 终浓度为4-5 uM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影，建议使用可产生足够信号强度的 小探针浓度。

c）如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可以在细胞培养基中加入丙磺舒（1-2.5 mM）或磺吡酮（0.1-0.25 mM），以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37°C下用钙指示剂酯孵育细胞20分钟至1小时。

d）在HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如2.5mM丙磺舒，如果适用）中洗涤细胞1-2次以除去过量的探针。

e）在所需的Ex / Em波长下进行实验。

2.测量细胞内钙响应：

 

        为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用等式：[Ca]free = Kd[F – Fmin]/Fmax – F]

        其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。 解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca2 +结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显著。 细胞内指标的原位校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca 2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2 +水平。 说明书中的表1列出了一些钙试剂的Kd值供您参考。

Fura 10钾盐 货号21110-AAT Bioquest荧光染料

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Fura 10钾盐 货号21110
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
5*50ug
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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Product details

Fura-10，钾盐

Fura 10钾盐 货号21110

简要概述

产品基本信息

货号：21110

产品名称：Fura-10，钾盐

规格：5×50 ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：1024.27

溶剂：水

产品介绍

与Fluo-4等单波长探针不同，对于Ca2+，Fura探针的 吸收（或荧光激发）从380 nm（Fura-2），415 nm（Fura-8和Fura-10）转变，与Ca2+结合的无螯合剂可达到约340 nm（Fura-2），355 nm（Fura-8和Fura-10）， 荧光发射的波长相对独立于Ca2+浓度。通过使用在340nm和380nm（对于Fura-2），355nm和415nm（对于Fura-8和Fura-10）进行激发并分配荧光强度来获得Ca2+依赖性荧光信号的 动态范围在〜510 nm（Fura-2），525 nm（Fura-8和Fura-10）处检测到。根据该比率，可以使用从校准曲线得出的解离常数（Kd）估算细胞内Ca2+的水平。通过使用在两个波长下激发产生的荧光强度之比，诸如染料分布不均匀和光致漂白等因素将被 小化，因为它们应在相同程度上影响两种测量。校准溶液 初应不含重金属离子，例如锰，这可能会影响其荧光和对钙的亲和力。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Fura-10，钾盐。 

钙离子荧光探针Mag-Fura-2 四钾盐 货号20380-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Mag-Fura-2 四钾盐 货号20380
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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钙离子荧光探针Mag-Fura-2 四钾盐

钙离子荧光探针Mag-Fura-2 四钾盐 货号20380

简要概述

产品基本信息
产品编号：20380
产品名称：Mag-Fura-2四钾盐*细胞不渗透*
规格：1毫克
储存条件：冷冻（<-15°C），干燥，避光
保质期：收到后12个月

化学和光谱特性
外观：固体
分子量：586.68
可溶于：水
激发波长：336
发射波长：503

产品介绍

        钙离子荧光探针Mag-Fura-2 四钾盐 是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，Mag-Fura-2，四钾盐是一种细胞内镁指示剂，具有比率和UV光可激发。 这种水溶性盐形式可用于通过微量注射或从贴片移液管输注来进行细胞内负载。 这种特殊的镁指示剂也用于高浓度钙检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针Mag-Fura-2 四钾盐 。 

钙离子荧光探针Fura Red钾盐 货号21045-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura Red钾盐 货号21045
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
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钙离子荧光探针Fura Red,钾盐

钙离子荧光探针Fura Red钾盐 货号21045

简要概述

      Fura Red是可见光可激发的fura-2类似物，当与单一激发的绿色荧光钙指示剂一起使用时，通过显微光度法，成像或流式细胞术，可用于比率测量单细胞中的钙离子，提供了独特的可能性。Fura Red AM是用于非侵入性细胞内装载的Fura Red的细胞渗透性版本。Fura Red AM可以使用Fluo-3 AM，Fluo-8 AM或Cal-520 AM同时加载到单元中。结合两种钙染料的优点是可以使用具有更长激发波长的染料。与使用比例或紫外线或近紫外线（例如Fura-2）激发的比例染料相比，这通常对细胞造成的伤害较小，因为可见波长的光的光毒性较小。

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产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（ 终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

钙离子荧光探针Fura-2，AM 货号21023-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-2，AM 货号21023
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
20*50ug
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
特色服务 :
包邮

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钙离子荧光探针Fura-2，AM

钙离子荧光探针Fura-2，AM 货号21023

简要概述

        钙离子荧光探针Fura-2，AM是美国AAT Bioquest研发的用于钙通量测定的试剂，钙通量测定是用于筛选G蛋白偶联受体（GPCR）的 发现中的优选方法。 我们的Fluo-8®和Rhod-4 系列钙检测试剂是 亮的绿色和红色钙指示剂，而我们的Cal-520®和Cal-590 具有高的细胞内钙检测信号/背景比，因为它们具有出色的保留 活细胞。 AAT Bioquest以高质量提供其他钙指标，如Fluo-4，Fluo-3，Fura-2，Indo-1，Rhod-5N和Rhod-2 AM，金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针。

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点击查看实验方案

产品说明书

操作步骤

1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。 但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。 它们应该用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）重新配制。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下，AM酯应稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。

b）在实验当天，将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.02％Pluronic®F-127在您选择的缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系，我们建议钙指示剂的 终浓度为4-5 uM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影，建议使用可产生足够信号强度的 小探针浓度。

c）如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可以在细胞培养基中加入丙磺舒（1-2.5 mM）或磺吡酮（0.1-0.25 mM），以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37°C下用钙指示剂酯孵育细胞20分钟至1小时。

d）在HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如2.5mM丙磺舒，如果适用）中洗涤细胞1-2次以除去过量的探针。

e）在所需的Ex / Em波长下进行实验。

2.测量细胞内钙响应：

 

        为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用等式：[Ca]free = Kd[F – Fmin]/Fmax – F]

        其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。 解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca2 +结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显著。 细胞内指标的原位校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca 2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2 +水平。 说明书中的表1列出了一些钙试剂的Kd值供您参考。

钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐 货号21026-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐 货号21026
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
1mg
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
AAT Bioquest生产的荧光染料
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钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐

钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐 货号21026

简要概述

        钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐是美国AAT Bioquest研发的用于钙通量测定的试剂，在比例钙指示剂中， 常用的是Fura-2和Indo-1。Fura-2可激发，而Indo-1可发射。对于比率成像显微镜，Fura-2是优选的，在比率成像中，更改激发波长比发射波长更实际。结合Ca2 +时，Fura-2表现出吸收位移，可通过扫描300至400 nm之间的激发光谱来观察，同时监测〜510 nm处的发射。Fura-2钾盐是一种不可渗透细胞的荧光探针，用于按比例模式检测Ca2+。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐。

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产品说明书

操作步骤

1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。 但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。 它们应该用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）重新配制。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下，AM酯应稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。

b）在实验当天，将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.02％Pluronic®F-127在您选择的缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系，我们建议钙指示剂的 终浓度为4-5 uM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影，建议使用可产生足够信号强度的 小探针浓度。

c）如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可以在细胞培养基中加入丙磺舒（1-2.5 mM）或磺吡酮（0.1-0.25 mM），以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37°C下用钙指示剂酯孵育细胞20分钟至1小时。

d）在HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如2.5mM丙磺舒，如果适用）中洗涤细胞1-2次以除去过量的探针。

e）在所需的Ex / Em波长下进行实验。

2.测量细胞内钙响应：

        为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用等式：[Ca]free = Kd[F – Fmin]/Fmax – F]

        其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。 解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca2 +结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显著。 细胞内指标的原位校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca 2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2 +水平。 说明书中的表1列出了一些钙试剂的Kd值供您参考。

钙离子荧光探针Fura Red, 钾盐 货号21047-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura Red, 钾盐 货号21047
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
10*50ug
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
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钙离子荧光探针Fura Red, 钾盐

钙离子荧光探针Fura Red, 钾盐 货号21047

简要概述

      Fura Red是可见光可激发的fura-2类似物，当与单一激发的绿色荧光钙指示剂一起使用时，通过显微光度法，成像或流式细胞术，可用于比率测量单细胞中的钙离子，提供了独特的可能性。Fura Red AM是用于非侵入性细胞内装载的Fura Red的细胞渗透性版本。Fura Red AM可以使用Fluo-3 AM，Fluo-8 AM或Cal-520 AM同时加载到单元中。结合两种钙染料的优点是可以使用具有更长激发波长的染料。与使用比例或紫外线或近紫外线（例如Fura-2）激发的比例染料相比，这通常对细胞造成的伤害较小，因为可见波长的光的光毒性较小。

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使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（ 终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

钙离子荧光探针Fura-8, AM 货号21056-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-8, AM 货号21056
级别 :
超纯、高纯
含量 :
95%
产品规格 :
10*50ug
品牌 :
AAT Bioquest
用途范围 :
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钙离子荧光探针Fura-8, AM

钙离子荧光探针Fura-8, AM 货号21056

简要概述

        钙离子荧光探针Fura-8, AM是美国AAT Bioquest生产的用于标记钙离子的荧光探针，虽然Fura-2已被广泛用作优选的激发比率钙指示剂，但它具有某些局限性，例如与单波长钙染料如Fluo-8®和Cal-520®相比灵敏度较低。AAT 近开发了Fura-8 以进一步改善Fura-2的钙响应。Fura-8的发射转换为更长的可见波长，与普通滤波器组兼容。它具有相当的钙亲和力（对Fura-2）。Fura-8 AM比Fura-2 AM对钙更敏感，信号/背景比高于Fura-2 AM。我们建议使用Ex / Em = 354 / 530nm和415 / 530nm进行比率测量，即通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针。

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产品说明书

操作说明

1.准备HHBS缓冲液，10％Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
 

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Fura-8 ，AM原液。
2.1使用量的Fura-8 ，AM：1 mg
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Fura-8 TM，AM与525.27μL无水DMSO混合。

3.使用10μMFura-8 ，AM 4在HHBS中制备2X工作溶液，0.08％Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1 终孔内浓度为Fura-8 ，AM：5μM
3.2Pluronic®F-127的 终井内浓度：0.04％
3.3 终孔内浓度的丙磺舒：1mM
3.4在合适的容器中混合16μLFura-8 ，AM，25.6μL10％Pluronic F-127和256μL25mM丙磺舒。下一个，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议使用Fura-8™的 终浓度，AM为4至5μM。
注意：推荐的Pluronic F-127井浓度 终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的 终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的 终浓度调节至以下：5μMFura-8 TM，AM，0.04％Pluronic®F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为4 mL

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 354/525 nm运行实验。

钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 CAS 192140-58-2 货号21028-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 CAS 192140-58-2

钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 CAS 192140-58-2

钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 CAS 192140-58-2 货号21028 货号 21028 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 2604
Ex (nm) 336 Em (nm) 505
分子量 853.94 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐是美国AAT Bioquest研发的用于钙通量测定的试剂，在比例钙指示剂中，最常用的是Fura-2和Indo-1。Fura-2可激发，而Indo-1可发射。对于比率成像显微镜，Fura-2是优选的，在比率成像中，更改激发波长比发射波长更实际。结合Ca2 +时，Fura-2表现出吸收位移，可通过扫描300至400 nm之间的激发光谱来观察，同时检测〜510 nm处的发射。Fura-2钾盐是一种不可渗透细胞的荧光探针，用于按比例模式检测Ca2+。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

操作步骤

1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。 但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。 它们应该用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）重新配制。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下，AM酯应稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。

b）在实验当天，将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.02％Pluronic®F-127在您选择的缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系，我们建议钙指示剂的最终浓度为4-5 uM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影，建议使用可产生足够信号强度的最小探针浓度。

c）如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可以在细胞培养基中加入丙磺舒（1-2.5 mM）或磺吡酮（0.1-0.25 mM），以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37°C下用钙指示剂酯孵育细胞20分钟至1小时。

d）在HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如2.5mM丙磺舒，如果适用）中洗涤细胞1-2次以除去过量的探针。

e）在所需的Ex / Em波长下进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

        为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用等式：[Ca]free = Kd[F – Fmin]/Fmax – F]

        其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。 解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca2 +结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显著。 细胞内指标的原位校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca 2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2 +水平。 说明书中的表1列出了一些钙试剂的Kd值供您参考。

 

参考文献

An essential role of NAD (P) H oxidase 2 in UVA-induced calcium oscillations in mast cells
Authors: Zhi Ying Li, Wen Yi Jiang, Zong Jie Cui
Journal: Photochemical & Photobiological Sciences (2015): 414–428

Lasting inhibition of receptor-mediated calcium oscillations in pancreatic acini by neutrophil respiratory burst–A novel mechanism for secretory blockade in acute pancreatitis?
Authors: Hui Yuan Liang, Zhi Min Song, Zong Jie Cui
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 361–367

 

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产品名称 货号
钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐 Cat#21025
钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐 Cat#21058

说明书
钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 CAS 192140-58-2.pdf

钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 [Fura-2FF, pentapotassium salt] *CAS 192140-58-2* 货号21029-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 [Fura-2FF, pentapotassium salt] *CAS 192140-58-2*

钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 [Fura-2FF, pentapotassium salt] *CAS 192140-58-2*

钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 [Fura-2FF, pentapotassium salt] *CAS 192140-58-2* 货号21029 货号 21029 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 3924
Ex (nm) 336 Em (nm) 505
分子量 853.94 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

在比例钙指示剂中，最常用的是Fura-2和Indo-1。Fura-2可激发，而Indo-1可发射。对于比率成像显微镜，Fura-2是优选的，在比率成像中，更改激发波长比发射波长更实际。结合Ca2 +时，Fura-2表现出吸收位移，可通过扫描300至400 nm之间的激发光谱来观察，同时监测〜510 nm处的发射。不渗透细胞的Fura-2FF是Fura-2的类似物，钙结合亲和力低得多，Kd〜10 µM。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

An essential role of NAD (P) H oxidase 2 in UVA-induced calcium oscillations in mast cells
Authors: Zhi Ying Li, Wen Yi Jiang, Zong Jie Cui
Journal: Photochemical & Photobiological Sciences (2015): 414–428

Lasting inhibition of receptor-mediated calcium oscillations in pancreatic acini by neutrophil respiratory burst–A novel mechanism for secretory blockade in acute pancreatitis?
Authors: Hui Yuan Liang, Zhi Min Song, Zong Jie Cui
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 361–367

 

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钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐 Cat#21025
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钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 [Fura-2FF, pentapotassium salt] *CAS 192140-58-2*.pdf

钙离子荧光探针Fura Red,钾盐 货号21045-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura Red,钾盐

钙离子荧光探针Fura Red,钾盐

钙离子荧光探针Fura Red,钾盐 货号21045 货号 21045 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 4584
Ex (nm) 435 Em (nm) 639
分子量 808.98 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Fura Red是可见光可激发的fura-2类似物，当与单一激发的绿色荧光钙指示剂一起使用时，通过显微光度法，成像或流式细胞术，可用于比率测量单细胞中的钙离子，提供了独特的可能性。Fura Red AM是用于非侵入性细胞内装载的Fura Red的细胞渗透性版本。Fura Red AM可以使用Fluo-3 AM，Fluo-8 AM或Cal-520 AM同时加载到单元中。结合两种钙染料的优点是可以使用具有更长激发波长的染料。与使用比例或紫外线或近紫外线（例如Fura-2）激发的比例染料相比，这通常对细胞造成的伤害较小，因为可见波长的光的光毒性较小。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Ratiometric analysis of fura red by flow cytometry: a technique for monitoring intracellular calcium flux in primary cell subsets
Authors: Wendt ER, Ferry H, Greaves DR, Keshav S.
Journal: PLoS One (2015): e0119532

A flow cytometric comparison of Indo-1 to fluo-3 and Fura Red excited with low power lasers for detecting Ca(2+) flux
Authors: Bailey S, Macardle PJ.
Journal: J Immunol Methods (2006): 220

Use of co-loaded Fluo-3 and Fura Red fluorescent indicators for studying the cytosolic Ca(2+)concentrations distribution in living plant tissue
Authors: Walczysko P, Wagner E, Albrechtova JT.
Journal: Cell Calcium (2000): 23

[Monitoring calcium in outer hair cells with confocal microscopy and fluorescence ratios of fluo-3 and fura-red]
Authors: Su ZL, Li N, Sun YR, Yang J, Wang IM, Jiang SC.
Journal: Shi Yan Sheng Wu Xue Bao (1998): 323

Calcium transient alternans in blood-perfused ischemic hearts: observations with fluorescent indicator fura red
Authors: Wu Y, Clusin WT.
Journal: Am J Physiol (1997): H2161

Problems associated with using Fura-2 to measure free intracellular calcium concentrations in human red blood cells
Authors: Blackwood AM, Sagnella GA, Markandu ND, MacGregor GA.
Journal: J Hum Hypertens (1997): 601

IgG-induced Ca2+ oscillations in differentiated U937 cells; a study using laser scanning confocal microscopy and co-loaded fluo-3 and fura-red fluorescent probes
Authors: Floto RA, Mahaut-Smith MP, Somasundaram B, Allen JM.
Journal: Cell Calcium (1995): 377

Improved sensitivity in flow cytometric intracellular ionized calcium measurement using fluo-3/Fura Red fluorescence ratios
Authors: Novak EJ, Rabinovitch PS.
Journal: Cytometry (1994): 135

Localization of calcium entry through calcium channels in olfactory receptor neurones using a laser scanning microscope and the calcium indicator dyes Fluo-3 and Fura-Red
Authors: Schild D, Jung A, Schultens HA.
Journal: Cell Calcium (1994): 341

The distribution of intracellular calcium chelator (fura-2) in a population of intact human red cells
Authors: Lew VL, Etzion Z, Bookchin RM, daCosta R, Vaananen H, Sassaroli M, Eisinger J.
Journal: Biochim Biophys Acta (1993): 152

说明书
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钙离子荧光探针Fura Red, 钾盐 货号21047-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura Red, 钾盐

钙离子荧光探针Fura Red, 钾盐

钙离子荧光探针Fura Red, 钾盐 货号21047 货号 21047 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 3264
Ex (nm) 435 Em (nm) 639
分子量 808.98 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

Fura Red是可见光可激发的fura-2类似物，当与单一激发的绿色荧光钙指示剂一起使用时，通过显微光度法，成像或流式细胞术，可用于比率测量单细胞中的钙离子，提供了独特的可能性。Fura Red AM是用于非侵入性细胞内装载的Fura Red的细胞渗透性版本。Fura Red AM可以使用Fluo-3 AM，Fluo-8 AM或Cal-520 AM同时加载到单元中。结合两种钙染料的优点是可以使用具有更长激发波长的染料。与使用比例或紫外线或近紫外线（例如Fura-2）激发的比例染料相比，这通常对细胞造成的伤害较小，因为可见波长的光的光毒性较小。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Ratiometric analysis of fura red by flow cytometry: a technique for monitoring intracellular calcium flux in primary cell subsets
Authors: Wendt ER, Ferry H, Greaves DR, Keshav S.
Journal: PLoS One (2015): e0119532

A flow cytometric comparison of Indo-1 to fluo-3 and Fura Red excited with low power lasers for detecting Ca(2+) flux
Authors: Bailey S, Macardle PJ.
Journal: J Immunol Methods (2006): 220

Use of co-loaded Fluo-3 and Fura Red fluorescent indicators for studying the cytosolic Ca(2+)concentrations distribution in living plant tissue
Authors: Walczysko P, Wagner E, Albrechtova JT.
Journal: Cell Calcium (2000): 23

[Monitoring calcium in outer hair cells with confocal microscopy and fluorescence ratios of fluo-3 and fura-red]
Authors: Su ZL, Li N, Sun YR, Yang J, Wang IM, Jiang SC.
Journal: Shi Yan Sheng Wu Xue Bao (1998): 323

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Authors: Wu Y, Clusin WT.
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Problems associated with using Fura-2 to measure free intracellular calcium concentrations in human red blood cells
Authors: Blackwood AM, Sagnella GA, Markandu ND, MacGregor GA.
Journal: J Hum Hypertens (1997): 601

IgG-induced Ca2+ oscillations in differentiated U937 cells; a study using laser scanning confocal microscopy and co-loaded fluo-3 and fura-red fluorescent probes
Authors: Floto RA, Mahaut-Smith MP, Somasundaram B, Allen JM.
Journal: Cell Calcium (1995): 377

Improved sensitivity in flow cytometric intracellular ionized calcium measurement using fluo-3/Fura Red fluorescence ratios
Authors: Novak EJ, Rabinovitch PS.
Journal: Cytometry (1994): 135

Localization of calcium entry through calcium channels in olfactory receptor neurones using a laser scanning microscope and the calcium indicator dyes Fluo-3 and Fura-Red
Authors: Schild D, Jung A, Schultens HA.
Journal: Cell Calcium (1994): 341

The distribution of intracellular calcium chelator (fura-2) in a population of intact human red cells
Authors: Lew VL, Etzion Z, Bookchin RM, daCosta R, Vaananen H, Sassaroli M, Eisinger J.
Journal: Biochim Biophys Acta (1993): 152

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Fura-10，AM 货号21114-AAT Bioquest荧光染料

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Fura-10，AM

Fura-10，AM

Fura-10，AM 货号21114 货号 21114 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5×50 ug 价格 1200
Ex (nm) 354 Em (nm) 524
分子量 1194.14 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：21114

产品名称：Fura-10，AM

规格：5×50 ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：1194.14

溶剂：DMSO

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 354 nm and 415 nm
发射： 524 nm
cutoff： 475 nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式
其他仪器
FDSS, FLIPR, ViewLux, NOVOStar, ArrayScan, FlexStation, IN Cell Analyzer

 

产品介绍

在比例钙离子指示剂中，Fura-2和Indo-1是两个最受欢迎的指示剂。 但是，使用这两种钙离子指示剂仍然存在一些挑战，特别是对于活细胞。 Fura-2的紫外线激发导致快速的光致漂白。 几年前推出了Fura-8 ，将激发光移向可见光。 尽管Fura-8表现出信号/背景比率的明显改善，但它不能像Fura-2那样很好地保留在活细胞中。 Fura-10最近被引入以解决该细胞保留问题。 在没有丙磺舒的情况下，Fura 10表现出信号/背景比的明显改善。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Fura-10，AM。 

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参考文献

Acupotomy Alleviates Energy Crisis at Rat Myofascial Trigger Points.
Authors: Zhang, Yi and Du, Ning-Yu and Chen, Chen and Wang, Tong and Wang, Li-Juan and Shi, Xiao-Lu and Li, Shu-Ming and Guo, Chang-Qing
Journal: Evidence-based complementary and alternative medicine : eCAM (2020): 5129562

High-salt intake increases TRPC3 expression and enhances TRPC3-mediated calcium influx and systolic blood pressure in hypertensive patients.
Authors: Hu, Yingru and Xia, Weijie and Li, Yingsha and Wang, Qianran and Lin, Shaoyang and Wang, Bin and Zhou, Cui and Cui, Yuanting and Jiang, Yanli and Pu, Xiaona and Wei, Xiao and Wu, Hao and Zhang, Hengshu and Zhu, Zhiming and Liu, Daoyan and Li, Zhiyong
Journal: Hypertension research : official journal of the Japanese Society of Hypertension (2020)

Histamine induces intracellular Ca2+ oscillations and nitric oxide release in endothelial cells from brain microvascular circulation.
Authors: Berra-Romani, Roberto and Faris, Pawan and Pellavio, Giorgia and Orgiu, Matteo and Negri, Sharon and Forcaia, Greta and Var-Gaz-Guadarrama, Verónica and Garcia-Carrasco, Mario and Botta, Laura and Sancini, Giulio and Laforenza, Umberto and Moccia, Francesco
Journal: Journal of cellular physiology (2020): 1515-1530

Pharmacological and genetic characterisation of the canine P2X4 receptor.
Authors: Sophocleous, Reece A and Berg, Tracey and Finol-Urdaneta, Rocio K and Sluyter, Vanessa and Keshiya, Shikara and Bell, Lachlan and Curtis, Stephen J and Curtis, Belinda L and Seavers, Aine and Bartlett, Rachael and Dowton, Mark and Stokes, Leanne and Ooi, Lezanne and Sluyter, Ronald
Journal: British journal of pharmacology (2020)

Reduced store-operated Ca2+ entry impairs mesenteric artery function in response to high external glucose in type 2 diabetic ZDF rats.
Authors: Schach, Christian and Wester, Michael and Leibl, Florian and Redel, Andreas and Gruber, Michael and Maier, Lars S and Endemann, Dierk and Wagner, Stefan
Journal: Clinical and experimental pharmacology & physiology (2020)

Rumex acetosa modulates platelet function and inhibits thrombus formation in rats.
Authors: Jeong, Dahye and Irfan, Muhammad and Lee, Dong-Ha and Hong, Seung-Bok and Oh, Jae-Wook and Rhee, Man Hee
Journal: BMC complementary medicine and therapies (2020): 98

A Na+ /Ca2+ exchanger of the olive pathogen Pseudomonas savastanoi pv. savastanoi is critical for its virulence.
Authors: Moretti, Chiaraluce and Trabalza, Simone and Granieri, Letizia and Caballo-Ponce, Eloy and Devescovi, Giulia and Del Pino, Alberto Marco and Ramos, Cayo and Venturi, Vittorio and van den Burg, Harrold A and Buonaurio, Roberto and Palmerini, Carlo Alberto
Journal: Molecular plant pathology (2019): 716-730

A3 receptor agonist, Cl-IBMECA, potentiate glucose-induced insulin secretion from MIN6 insulinoma cells possibly through transient Ca2+ entry.
Authors: Keyvanloo Shahrestanaki, Mohammad and Aghaei, Mahmoud
Journal: Research in pharmaceutical sciences (2019): 107-114

Accumulation of intramyocyte TRPV1-mediated calcium during heat stress is inhibited by concomitant muscle contractions.
Authors: Ikegami, Ryo and Eshima, Hiroaki and Mashio, Takuro and Ishiguro, Tomosada and Hoshino, Daisuke and Poole, David C and Kano, Yutaka
Journal: Journal of applied physiology (Bethesda, Md. : 1985) (2019): 691-698

Acidification is an Essential Process of Cold Atmospheric Plasma and Promotes the Anti-Cancer Effect on Malignant Melanoma Cells.
Authors: Schneider, Christin and Gebhardt, Lisa and Arndt, Stephanie and Karrer, Sigrid and Zimmermann, Julia L and Fischer, Michael J M and Bosserhoff, Anja-Katrin
Journal: Cancers (2019)

说明书
Fura-10，AM.pdf

钙离子荧光探针Fura-8FF , AM 货号20620-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

钙离子荧光探针Fura-8FF , AM

钙离子荧光探针Fura-8FF , AM

钙离子荧光探针Fura-8FF , AM 货号20620 货号 20620 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 2604
Ex (nm) 354 Em (nm) 524
分子量 973.86 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

产品基本信息

货号：20620

产品名称：钙离子荧光探针Fura-8FF , AM

规格：10×50 ug

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：973.86

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：354

发射波长(nm)：525

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： Fura 2滤波片
发射： Fura 2滤波片
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 355，415nm
发射： 530nm
cutoff: 475nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

 

产品介绍

钙离子荧光探针Fura-8FF , AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，细胞渗透性Fura-8FF AM是Fura-8AM的类似物，具有低得多的钙结合亲和力，Kd~10μM。 Fura-8FF的发射转换为更长的可见波长，与普通滤波器组兼容。 Fura-8FF AM比Fura-2FF AM对钙更敏感，信号/背景比高于Fura-2FF AM。 我们建议使用Ex / Em = 354 / 530nm和415 / 530nm进行比率测量，即通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Fura-8FF , AM。 

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

参考文献

An essential role of NAD (P) H oxidase 2 in UVA-induced calcium oscillations in mast cells
Authors: Zhi Ying Li, Wen Yi Jiang, Zong Jie Cui
Journal: Photochemical & Photobiological Sciences (2015): 414–428

Lasting inhibition of receptor-mediated calcium oscillations in pancreatic acini by neutrophil respiratory burst–A novel mechanism for secretory blockade in acute pancreatitis?
Authors: Hui Yuan Liang, Zhi Min Song, Zong Jie Cui
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 361–367

说明书
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钙离子荧光探针Fura-8FF , 五钾盐 货号20621-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-8FF , 五钾盐

钙离子荧光探针Fura-8FF , 五钾盐

钙离子荧光探针Fura-8FF , 五钾盐 货号20621 货号 20621 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 2604
Ex (nm) 354 Em (nm) 524
分子量 837.97 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

细胞不渗透的Fura-8FF是Fura-8的类似物，钙结合亲和力低得多，Kd〜10 µM。Fura-8FF的发射转变为更长的可见光波长，与普通滤光片组兼容。例如，通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Fura-8FF , 五钾盐。 

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

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产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Spatio-temporal modulation of light for stimulation and recording of neuronal activity
Authors: He Ma, Michael Lawrence Castanares, Vincent Daria
Journal: (2018): 1072306

A Critical Period for the Rapid Modification of Synaptic Properties at the VPm Relay Synapse
Authors: Libiao Pan, Junhua Yang, Qian Yang, Xiaomeng Wang, Liya Zhu, Yali Liu, Huifang Lou, Chou Xu, Ying Shen, Hao Wang
Journal: Frontiers in molecular neuroscience (2017)

Advances in Two-Photon Scanning and Scanless Microscopy Technologies for Functional Neural Circuit Imaging
Authors: Simon R Schultz, Caroline S Copeland, Amanda J Foust, Peter Quicke, Renaud Schuck
Journal: Proceedings of the IEEE (2017): 139–157

Bidirectional communication between sensory neurons and osteoblasts in an in vitro co-culture system
Authors: Daisuke Kodama, Takao Hirai, Hisataka Kondo, Kazunori Hamamura, Akifumi Togari
Journal: FEBS Letters (2017)

Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505

Calcium Imaging Across Large Areas of Intact Vascular Endothelium Reveals Stimulus-Specific Sensory Cells
Authors: Matthew D Lee, Calum Wilson, John G McCarron
Journal: The FASEB Journal (2017): 1005–8

Calcium transient assays for compound screening with human iPSC-derived cardiomyocytes: Evaluating new tools
Authors: Neil J Daily, Radleigh Santos, Joseph Vecchi, Pinar Kemanli, Tetsuro Wakatsuki
Journal: Journal of evolving stem cell research (2017): 1

Characterization of postsynaptic calcium signals in the pyramidal neurons of anterior cingulate cortex
Authors: Xu-Hui Li, Qian Song, Tao Chen, Min Zhuo
Journal: Molecular Pain (2017): 1744806917719847

Direct measurement of TRPV4 and PIEZO1 activity reveals multiple mechanotransduction pathways in chondrocytes
Authors: M Rocio Servin-Vences, Mirko Moroni, Gary R Lewin, Kate Poole
Journal: eLife (2017): e21074

Expression of the GluA2 subunit of glutamate receptors is required for the normal dendritic differentiation of cerebellar Purkinje cells
Authors: Masahiko Tanaka, Tomomi Senda, Naohide Hirashima
Journal: Neuroscience Letters (2017)

 

相关产品

产品名称 货号
钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐 Cat#21025
钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐 Cat#21028
钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐 Cat#21057

说明书
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钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐 货号21026-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐

钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐

钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐 货号21026 货号 21026 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 336 Em (nm) 505
分子量 751.45 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐是美国AAT Bioquest研发的用于钙通量测定的试剂，在比例钙指示剂中，最常用的是Fura-2和Indo-1。Fura-2可激发，而Indo-1可发射。对于比率成像显微镜，Fura-2是优选的，在比率成像中，更改激发波长比发射波长更实际。结合Ca2 +时，Fura-2表现出吸收位移，可通过扫描300至400 nm之间的激发光谱来观察，同时监测〜510 nm处的发射。Fura-2钾盐是一种不可渗透细胞的荧光探针，用于按比例模式检测Ca2+。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

产品说明书

操作步骤

1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。 但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。 它们应该用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）重新配制。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下，AM酯应稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。

b）在实验当天，将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.02％Pluronic®F-127在您选择的缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系，我们建议钙指示剂的最终浓度为4-5 uM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影，建议使用可产生足够信号强度的最小探针浓度。

c）如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可以在细胞培养基中加入丙磺舒（1-2.5 mM）或磺吡酮（0.1-0.25 mM），以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37°C下用钙指示剂酯孵育细胞20分钟至1小时。

d）在HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如2.5mM丙磺舒，如果适用）中洗涤细胞1-2次以除去过量的探针。

e）在所需的Ex / Em波长下进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

        为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用等式：[Ca]free = Kd[F – Fmin]/Fmax – F]

        其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。 解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca2 +结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显著。 细胞内指标的原位校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca 2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2 +水平。 说明书中的表1列出了一些钙试剂的Kd值供您参考。

 

参考文献

An essential role of NAD (P) H oxidase 2 in UVA-induced calcium oscillations in mast cells
Authors: Zhi Ying Li, Wen Yi Jiang, Zong Jie Cui
Journal: Photochemical & Photobiological Sciences (2015): 414–428

Lasting inhibition of receptor-mediated calcium oscillations in pancreatic acini by neutrophil respiratory burst–A novel mechanism for secretory blockade in acute pancreatitis?
Authors: Hui Yuan Liang, Zhi Min Song, Zong Jie Cui
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 361–367

 

相关产品

产品名称 货号
钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐 Cat#21025
钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐 Cat#21058

说明书
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钙离子荧光探针Fura-8, AM 货号21056-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-8, AM

钙离子荧光探针Fura-8, AM

钙离子荧光探针Fura-8, AM 货号21056 货号 21056 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10×50 ug 价格 1008
Ex (nm) 354 Em (nm) 524
分子量 951.90 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Fura-8, AM是美国AAT Bioquest生产的用于标记钙离子的荧光探针，虽然Fura-2已被广泛用作优选的激发比率钙指示剂，但它具有某些局限性，例如与单波长钙染料如Fluo-8®和Cal-520®相比灵敏度较低。AAT最近开发了Fura-8 以进一步改善Fura-2的钙响应。Fura-8的发射转换为更长的可见波长，与普通滤波器组兼容。它具有相当的钙亲和力（对Fura-2）。Fura-8 AM比Fura-2 AM对钙更敏感，信号/背景比高于Fura-2 AM。我们建议使用Ex / Em = 354 / 530nm和415 / 530nm进行比率测量，即通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针。

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点击查看光谱

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： Fura 2滤波片
发射： Fura 2滤波片
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 355，415nm
发射： 530nm
cutoff: 475nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

操作说明

1.准备HHBS缓冲液，10％Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
 

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Fura-8 ，AM原液。
2.1使用量的Fura-8 ，AM：1 mg
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Fura-8 TM，AM与525.27μL无水DMSO混合。

3.使用10μMFura-8 ，AM 4在HHBS中制备2X工作溶液，0.08％Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1最终孔内浓度为Fura-8 ，AM：5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度：0.04％
3.3最终孔内浓度的丙磺舒：1mM
3.4在合适的容器中混合16μLFura-8 ，AM，25.6μL10％Pluronic F-127和256μL25mM丙磺舒。下一个，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议使用Fura-8™的最终浓度，AM为4至5μM。
注意：推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的最终浓度调节至以下：5μMFura-8 TM，AM，0.04％Pluronic®F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为4 mL

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 354/525 nm运行实验。

 

参考文献

Nifedipine stimulates proliferation and migration of different breast cancer cells by distinct pathways
Authors: Tao Zhao, Dongqing Guo, Yuchun Gu, Yang Ling
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 2259–2263

Inhibition of pyruvate kinase M2 by reactive oxygen species contributes to the development of pulmonary arterial hypertension
Authors: Dongqing Guo, Junzhong Gu, Hui Jiang, Asif Ahmed, Zhiren Zhang, Yuchun Gu
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2016): 179–187

Nifedipine promotes the proliferation and migration of breast cancer cells
Authors: Dong-Qing Guo, Hao Zhang, Sheng-Jiang Tan, Yu-Chun Gu
Journal: PloS one (2014): e113649

Bioanalytics/Illumination: Just-right light-Inherently adaptive for application-specific needs
Authors: IAIN JOHNSON
Journal: Unknown

说明书
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钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐 货号21057-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐

钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐

钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐 货号21057 货号 21057 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 354 Em (nm) 524
分子量 816.01 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，尽管Fura-2已被广泛用作首选的可激发比率的钙指示剂，但它具有一定的局限性，例如，与单波长钙染料（如Fluo-8®和Cal-520®）相比，灵敏度较低。AAT最近开发了Fura-8 ，以进一步改善Fura-2的钙反应。Fura-8的发射转变为更长的可见光波长，与普通滤光片组兼容。它具有与Fura-2相当的钙亲和力。与Fura-2 AM相比，Fura-8 AM对钙的敏感性更高，信号/背景比更高。例如，通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐。

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

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产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Nifedipine stimulates proliferation and migration of different breast cancer cells by distinct pathways
Authors: Tao Zhao, Dongqing Guo, Yuchun Gu, Yang Ling
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 2259–2263

Inhibition of pyruvate kinase M2 by reactive oxygen species contributes to the development of pulmonary arterial hypertension
Authors: Dongqing Guo, Junzhong Gu, Hui Jiang, Asif Ahmed, Zhiren Zhang, Yuchun Gu
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2016): 179–187

Nifedipine promotes the proliferation and migration of breast cancer cells
Authors: Dong-Qing Guo, Hao Zhang, Sheng-Jiang Tan, Yu-Chun Gu
Journal: PloS one (2014): e113649

Bioanalytics/Illumination: Just-right light-Inherently adaptive for application-specific needs
Authors: IAIN JOHNSON
Journal: Unknown

 

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产品名称 货号
钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐 Cat#21058

说明书
钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐.pdf

钙离子荧光探针Fura-8, AM 货号21055-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

钙离子荧光探针Fura-8, AM

钙离子荧光探针Fura-8, AM

钙离子荧光探针Fura-8, AM 货号21055 货号 21055 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 354 Em (nm) 524
分子量 951.90 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Fura-8, AM是美国AAT Bioquest生产的用于标记钙离子的荧光探针，虽然Fura-2已被广泛用作优选的激发比率钙指示剂，但它具有某些局限性，例如与单波长钙染料如Fluo-8®和Cal-520®相比灵敏度较低。AAT最近开发了Fura-8 以进一步改善Fura-2的钙响应。Fura-8的发射转换为更长的可见波长，与普通滤波器组兼容。它具有相当的钙亲和力（对Fura-2）。Fura-8 AM比Fura-2 AM对钙更敏感，信号/背景比高于Fura-2 AM。我们建议使用Ex / Em = 354 / 530nm和415 / 530nm进行比率测量，即通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针。

点击查看实验方案

点击查看光谱

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

适用仪器

荧光显微镜  
激发： Fura 2滤波片
发射： Fura 2滤波片
推荐孔板： 黑色透明
荧光酶标仪  
激发： 355，415nm
发射： 530nm
cutoff: 475nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式

产品说明书

操作说明

1.准备HHBS缓冲液，10％Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
 

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Fura-8 ，AM原液。
2.1使用量的Fura-8 ，AM：1 mg
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Fura-8 TM，AM与525.27μL无水DMSO混合。

 

3.使用10μMFura-8 ，AM 4在HHBS中制备2X工作溶液，0.08％Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1最终孔内浓度为Fura-8 ，AM：5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度：0.04％
3.3最终孔内浓度的丙磺舒：1mM
3.4在合适的容器中混合16μLFura-8 ，AM，25.6μL10％Pluronic F-127和256μL25mM丙磺舒。下一个，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议使用Fura-8™的最终浓度，AM为4至5μM。
注意：推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的最终浓度调节至以下：5μMFura-8 TM，AM，0.04％Pluronic®F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为4 mL

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 354/525 nm运行实验。

 

参考文献

Nifedipine stimulates proliferation and migration of different breast cancer cells by distinct pathways
Authors: Tao Zhao, Dongqing Guo, Yuchun Gu, Yang Ling
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 2259–2263

Inhibition of pyruvate kinase M2 by reactive oxygen species contributes to the development of pulmonary arterial hypertension
Authors: Dongqing Guo, Junzhong Gu, Hui Jiang, Asif Ahmed, Zhiren Zhang, Yuchun Gu
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2016): 179–187

Nifedipine promotes the proliferation and migration of breast cancer cells
Authors: Dong-Qing Guo, Hao Zhang, Sheng-Jiang Tan, Yu-Chun Gu
Journal: PloS one (2014): e113649

Bioanalytics/Illumination: Just-right light-Inherently adaptive for application-specific needs
Authors: IAIN JOHNSON
Journal: Unknown

说明书
钙离子荧光探针Fura-8, AM.pdf

钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐 货号21058-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐

钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐

钙离子荧光探针Fura-8 五钠盐 货号21058 货号 21058 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 354 Em (nm) 524
分子量 751.59 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，尽管Fura-2已被广泛用作首选的可激发比率的钙指示剂，但它具有一定的局限性，例如，与单波长钙染料（如Fluo-8®和Cal-520®）相比，灵敏度较低。AAT最近开发了Fura-8，以进一步改善Fura-2的钙反应。Fura-8的发射转变为更长的可见光波长，与普通滤光片组兼容。它具有与Fura-2相当的钙亲和力。与Fura-2 AM相比，Fura-8 AM对钙的敏感性更高，信号/背景比更高。例如，通过监测530nm处的发射强度来计算354nm和415nm处的激发强度比。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供最优质的钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐。

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

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产品说明书

使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类

1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（最终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Nifedipine stimulates proliferation and migration of different breast cancer cells by distinct pathways
Authors: Tao Zhao, Dongqing Guo, Yuchun Gu, Yang Ling
Journal: Molecular Medicine Reports (2017): 2259–2263

Inhibition of pyruvate kinase M2 by reactive oxygen species contributes to the development of pulmonary arterial hypertension
Authors: Dongqing Guo, Junzhong Gu, Hui Jiang, Asif Ahmed, Zhiren Zhang, Yuchun Gu
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2016): 179–187

Nifedipine promotes the proliferation and migration of breast cancer cells
Authors: Dong-Qing Guo, Hao Zhang, Sheng-Jiang Tan, Yu-Chun Gu
Journal: PloS one (2014): e113649

Bioanalytics/Illumination: Just-right light-Inherently adaptive for application-specific needs
Authors: IAIN JOHNSON
Journal: Unknown

 

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钙离子荧光探针Fura-2,五钠盐 Cat#21026
钙离子荧光探针Fura-8 五钾盐 Cat#21057

说明书
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