OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒

 

SolubleBioScience一直在为工业解决溶解度和稳定性问题。

我们为制药和生物技术行业提供支持

·  优化蛋白质配方的服务

·  产品套件,提供溶解度和稳定性参数的早期解决方案评估

·  可以为希望在内部引入HSC技术的客户购买仪器

许多蛋白质不是非常易溶或稳定,特别是在研究,治疗,疫苗,科学试剂和工业酶通常需要的高浓度下。保持蛋白质可溶和稳定,直到它们准备好使用,是制造商和研究人员定期面临的艰巨挑战。蛋白质在纯化和配方优化过程中经常显示出不需要的聚集,这可能导致蛋白质活性的变化和配方团队必须在过程早期解决的更高的免疫原性风险。

与传统方法相比,SolubleBioScience提供的结果可以在更短的时间内以更低的成本促进蛋白质基制剂的溶解性和稳定性。

SolubleBioScience OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒

名称

细节

OptiSol I

肽,大小<9 kDa

OptiSol II

小蛋白质分子> 10 kDa且<25 kDa

OptiSol III

蛋白质分子高达90kDa

OptiSol IV

大蛋白分子,包括高达250 kDa的抗体和寡聚体

根据蛋白质分子的预期分子量选择滤板。

描述

OptiSol™蛋白质溶解度试剂盒可帮助研究人员识别保护目标蛋白免于聚集或溶解聚集蛋白样品的配方。

OptiSol蛋白质增溶筛选试剂盒包含一系列不同的缓冲液(pH 3至pH 10)和一系列溶解度增强剂(盐,氨基酸,糖类,多元醇,还原剂),可以确定特定蛋白质的条件样本受到保护以免聚合或可以解除聚合。可以在一个单一的无标记实验中测试总共90种具有溶解度增强剂的不同配方; 剩下的6个实验是阳性和阴性对照实验。下表列出了OptiSol试剂盒中的所有试剂。

 

 

为何选择OPTISOL?

找到蛋白质的溶解度点

OptiSol™蛋白质溶解度试剂盒可帮助研究人员识别保护目标蛋白免于聚集或溶解聚集蛋白样品的配方。

  •  快速评估聚合行为与pH,盐和添加剂的关系
  •  分析90多种不同条件并且无标记
  •  简单的混合和旋转方案,无需超速离心
  •  有机会拯救可逆聚集的蛋白质样本
  •  保护蛋白质免受压力下的聚集*
  •  使用Protein Dashboard快速查找趋势

蛋白质聚集,这种不希望的过程通常由升高的温度,剧烈搅拌,添加配体或分子结合配偶体或仅仅通过在一段时间内储存蛋白质样品引起。通过适当选择pH,盐或稳定添加剂,通常可以避免蛋白质聚集。这种OptiSol蛋白质增溶筛选试剂盒包含一系列不同的缓冲液(pH 3至pH 10)和一系列溶解度增强剂(盐,氨基酸,糖类,多元醇,还原剂),可以确定特定的条件。保护蛋白质样品免于聚集或可以解聚集。可以在一个单一的无标记实验中测试总共90种具有溶解度增强剂的不同配方; 剩下的6个实验是阳性和阴性对照实验。

可溶性蛋白质通过过滤器,聚合蛋白质不通过。这个简单的特征在过滤步骤中被利用。含有可溶性蛋白质的孔在过滤过程后会产生蛋白质; 蛋白质聚集体不含任何蛋白质。

运行蛋白质增溶试剂盒后,您已经确定了将蛋白质靶标保持在溶液中的条件,并且您知道蛋白质聚集的条件。然后选择条件以获得“表现良好的蛋白质”

  •  比传统的试错法测试更好,更快(不到1小时)
  •  对于每个蛋白质溶解度数据点,低蛋白质消耗消耗少于10uL。蛋白质量需要与您的目标检测分析相匹配
  •  方便:一次性获得大量蛋白质溶解信息。利用您自己选择的目标特异性检测。OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒与许多功能分析,SDS-PAGE,蛋白质印迹,质谱分析和基于荧光的蛋白质检测兼容。

 

 

应用

蛋白质溶解度筛选试剂盒OptiSol™的应用

OptiSol™蛋白质溶解度筛选试剂盒可用于保护目标蛋白质免受各种聚集诱导应激。当蛋白质溶液反复冷冻和解冻时,或者当液体暴露于高剪切力或强光下时,蛋白质在暴露于高温时,当它们被储存较长时间时,通常会聚集。空气氧化,反应试剂或表面暴露提供了蛋白质聚集的进一步来源。

这些应激物可用于评估特定蛋白质样品的易感性并鉴定保护剂。

如果你的挑战是 –

  •  不希望的抗体或蛋白质聚集
  •  从纯化柱洗脱过程中蛋白质的可逆沉淀
  •  中性pH值下的不溶性蛋白质

如果你需要 –

  •  筛选不同的缓冲液,以保持蛋白质在高浓度下稳定
  •  保持抗原可溶,同时从缓冲液中去除某些成分
  •  将结合的抗原 – 抗体复合物分离成未结合的形式
  •  找到纯化后蛋白质长期稳定性的宜条件。
  •  优化净化条件

 

 

技术

这是OPTISOL KITS的工作原理:

how-optisol- works-image-1

 

新的FASOS技术

OptiSol基于专有的FASOS技术。FASOS代表Filter Aided SolubilityOptimization Screening。将蛋白质溶液与许多不同的溶液分开混合,仅检测通过分子量截止滤器(MWCO 30或MWCO 200)的那些蛋白质溶液。这种组合溶液和过滤方法确定了保持样品溶解的宜p​​H,盐,缓冲液类型,添加剂和抗氧化剂。溶解聚集的蛋白质溶液(应用A)或选择特定的样品应激(加热,冻融,储存,剪切等),并确定那些使蛋白质样品溶解而不会聚集的溶液。Protein Dashboard支持数据评估。

应用A:蛋白质溶解度分析
应用B:蛋白质聚集体增溶

如何-OPTISOL – 作品 – 应用 – 一个

 

如何-OPTISOL-工程应用-B

 

需要多少蛋白质?

当蛋白质溶液与制剂混合时,蛋白质浓度将在反应板中稀释11倍(15μL/165μL)。因此,必须从储备蛋白质溶液开始,该溶液是反应板中终溶液浓度的11倍。约2 mL蛋白质原液就足够了。所需的蛋白质浓度取决于蛋白质的消光系数和蛋白质检测测定的灵敏度。在我们的实验室中,我们使用半宽UV 96孔板和UV / vis板读数器开发了UV280方法。在我们的例子中,半宽UV280孔中的UV280吸光度必须至少约为0.4(吸光度单位)。

 

数据分析

使用蛋白质仪表板轻松进行数据分析

与OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒一起提供Protein Dashboard™。这种新工具有助于发现蛋白质行为趋势,并确定宜蛋白质溶解的关键溶剂因子。

Protein Dashboard™有助于发现蛋白质行为趋势,并在单个实验中确定宜蛋白质溶解的关键溶剂因子。只需将输出数据剪切并粘贴到基于Excel的蛋白质仪表板中,即可查看目标蛋白质行为。

 

OptiSol™蛋白质溶解度筛选试剂盒可用于四种不同大小的蛋白质,如下所述。这些试剂盒中的每一个也可以一式三份(3X)提供。

 

目录

产品名称

蛋白质大小

价钱

SOL-1

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒I.

肽,大小<9 kDa

$ 269

SOL-1-3X

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒I(3X)

肽,大小<9 kDa

$ 749

SOL-LL

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒II

小蛋白质分子> 10 kDa且<25 kDa

$ 269

SOL-LLL-3X

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒II(3X)

小蛋白质分子> 10 kDa且<25 kDa

$ 749

SOL III族

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒III

蛋白质分子高达90kDa

$ 269

SOL-LLL-3X

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒III(3X)

蛋白质分子高达90kDa

$ 749

SOL-LV

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒IV

大蛋白分子,包括高达250 kDa的抗体和寡聚体

$ 269

SOL-LV-3X

OptiSol蛋白质溶解度筛选试剂盒IV(3X)

大蛋白分子,包括高达250 kDa的抗体和寡聚体

$ 749

 

 

常问问题

OptiPharma与OptiSol:我应该得到哪一个?

OptiPharma试剂盒中的所有成分(缓冲液和添加剂)(3个对照孔除外)均为FDA批准的药物成分。如果您在药物配方开发的任何阶段都有药物蛋白,OptiPharma就是其中之一。

OptiSol适用于各种类型的蛋白质工作(例如制药,工业,食品,植物,结晶工作)。OptiSol试剂盒中的大多数添加剂不适用于药物配方。例如,如果您想要溶解粗蛋白质混合物,OptiSol是一个很好的选择。

我的聚合蛋白样品是否会与OptiSol试剂一起“溶解”?

这取决于蛋白质聚集体的性质。找出答案的仅有方法是通过实验测试 – 这正是OptiSol蛋白质溶解度筛选所做的。测试90种不同的温和配方 – 不同的pH,盐,聚合物,糖,多元醇,洗涤剂,还原剂。如果蛋白质样品可逆地聚集,OptiSol筛选器可能会产生溶解样品的条件。

使用的配方相当温和。目标是溶解聚集体并产生功能性蛋白质。任何聚集的蛋白质样品都会溶解吗?不,有些聚合物只含有“死”蛋白质。对于这些顽固性样品,您需要SDS或尿素,并获得非功能性蛋白质作为回报。

运行OptiSol试剂盒需要多少蛋白质?

当蛋白质溶液与制剂混合时,蛋白质浓度将在反应板中稀释11倍(15μL/165μL)。因此,必须从储备蛋白质溶液开始,该溶液是反应板中终溶液浓度的11倍。约2 mL蛋白质原液就足够了。所需的蛋白质浓度取决于蛋白质的消光系数和蛋白质检测测定的灵敏度。在我们的实验室中,我们使用半宽UV 96孔板和UV / vis板读数器开发了UV280方法。在我们的例子中,半宽UV280孔中的UV280吸光度必须至少约为0.4(吸光度单位)。

如何分析OptiSol实验的结果?

我们建议选择敏感的蛋白质检测分析来表征滤液,优选96孔格式。在大多数情况下,可以将平板读数器数据直接复制并粘贴到Protein Dashboard™Excel电子表格中,以评估实验结果并获得蛋白质行为趋势的图形支持,并确定宜蛋白质溶解的关键溶剂因子。可用于确定过滤溶液中蛋白质的量或活性的诊断分析测试的实例。各种测定可以基于荧光或放射性的检测(蛋白质测定,酶测定,Western / ELISA,配体结合测定)。请注意,分析可能需要对OptiSol配方进行补偿,或者在OptiSol配方存在下可能无效。

哪种蛋白质分析与OptiSol配合得很好?

任何具有足够特异性,动态范围和灵敏度的蛋白质测定。一些研究人员运行点印迹(Western),一些具有荧光读数,使用ELISA或使用酶活性测定。这取决于您,取决于您要筛选的内容。

可以使用功能测定(测量结合或酶活性)或被动测定(测量蛋白质质量)。

已经使用纯化蛋白质样品的几个使用者已经使用了Pierce BCA测定法及其'MICRO'变体。

实验需要多长时间?

这在某种程度上取决于您的设置,但计划运行实验约3小时。

我可以使用OptiSol套件处理多少样品/每个套件中有多少“运行”?

OptiSol蛋白溶解度筛选试剂盒仅设计用于单一蛋白质样品。虽然我们已经听过多次成功使用过滤板的用户,但我们不建议这样做。多次使用终会阻塞过滤器并使结果不可靠。

蛋白质仪表板如何帮助分析我的数据?

欢迎您使用任何想要绘制的工具并可视化您的OptiSol结果。Protein Dashboard是绘制pH与其他参数的依赖关系的快速方法。这有助于快速概述和详细了解蛋白质样品的行为。

查看“数据分析”选项卡下的“蛋白质仪表板”视频。

OptiSol试剂的成分是什么?

OptiSol试剂由组合溶液组成,具有多种pH,缓冲液类型,带电和中性有机添加剂和抗氧化剂。OpitSol手册和Protein Dashboard中列出了所有组件的详细列表。

什么是Solubilisin II?

Solubilisin II是一种专有技术解决方案,已被证明可以在很宽的pH值范围内促进溶解度并保护蛋白质免于聚集。

Solubilisin II可以用于体外PK研究吗?

Solubilisin II尚未进行体内研究测试,仅应用于体外研究。OptiSol试剂盒提供的一些试剂含有少量的sodium azide,因此与活细胞不相容。OptiSol试剂盒仅用于体外使用,不适用于细胞或动物研究

 

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上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

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