lifesci AMV RT说明书

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lifesci AMV RT说明书

AMV-RT•T7 RNA聚合酶•RNase H•NASBA•冻干产品和服务。

AMV逆转录酶高规格活性(XL)

AMV Reverse Transcriptase High Spec Activity (XL)

$173.00 – $1,416.00

SKU: N/A

Category: AMV RT

描述

AMV RT-XL是天然逆转录酶的上等品级。该酶从单链RNA合成cDNA。选择了非常高的比活性,浓度和纯度后,每批都在cDNA合成中进行了功能测试,以将cDNA合成为大小为0.5至9.0 Kb的RNA阶梯。

 

 

 

逆转录酶(AMV)使用说明

逆转录酶(AMV)使用说明

反转录酶(reverse transcriptase,也可写成逆转录酶) 又称为依赖RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中发现了一种特殊的DNA 聚合酶,该酶以RNA 为模板,以dNTP 为底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 为引物,在tRNA 3'-OH 末端上,根据碱基配对的原则,按5'-3'方向合成一条与RNA 模板互补的DNA 单链,这条DNA 单链叫做互补DNA (complementary DNA,CDNA)。

反转录酶(Reverse transcriptase)是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。

AMV是一种逆转录酶的名称。amv逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒,其方法由houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157kd的αβ全。amv逆转录酶经高度纯化,*无核酸酶污染。amv逆转录酶可用于cdna合成,也可用于rnadna的双脱氧测序。amv逆转录酶以总rnd或polya+rnd为模板,具有以rna为模板的dna聚合酶活性,dna为模板的dna聚合酶活性和rnaseh酶活性,

AMV逆转录酶

适反应温度在42-55℃,高可达60℃,如果使用焦磷酸钠,适温度为37-41℃。rtt反应缓冲液根据不同用途可以作为5x或10x反应液使用,同时可抑制rnaseh酶活性。按照标准使用方法可以得到长至10-12kbcdna。rt007amv逆转录酶比普通amv逆转录酶和mmlv逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cdna。

 

基本资料

编辑

反应温度:42-60℃产物长度:10-12kb

来源:禽畜源,全酶

反应效率:5u/reaction

rnaseh活性:弱,被抑制

特点

编辑

1.高灵敏度2、高得率

3.高达60℃的反应温度可有效打开rna二级结构

4.可合成长至10-12kb的cdna

5.rt反应液可适用不同用途

 

逆转录酶(AMV)使用方法

solarbio逆转录酶

货号:RT1060
规格:200U/500U/1000U
保存:-20℃保存,避免反复冻融,保质期为2年。
产品内容

 

产品简介:
逆转录酶(AMV)从AvianMyeloblastosisVirus分离出来,经过高度纯化,不含核酸酶。可用于合成一链cDNA、制作cDNA探针、RNA转录、测序和RNA的逆转录反应。

逆转录酶(AMV)一个活性单位U定义为:在37℃,10min条件下,使1nmol的脱氧核糖核酸掺入酸性沉淀物质所需的酶量。

使用说明:
合成一链cDNA的步骤
以下试剂客户自己提供
dNTPs(10mM)

引物(OligodT(18)或随机引物或特异性引物

无核酸酶双蒸水
RNA模板
RNase抑制剂

RT反应(20μl体系):
1.使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s;
2.取灭过菌且无核酸酶的0.2mlPCR管,依次加入

2~5μgRNAXμl
引物*1μl

引物*:OligodT18(10μM)或随机引物(50ng/μl)或特异性引物(2μM)】
dNTPs(10mM)1μl
补加无核酸酶的双蒸水至总体积15.5μl

3. 65度保温 5min 然后冰浴5min;

4.往步骤3的pcr管中依次加入下列组份

RNase 抑制剂(40u/ul)    0.5ul

10*AMV reaction buffer   2ul

DTT  (200mm)  1ul

逆转录酶(AMV)     1UL

5.轻轻混匀后,然后2000rpm离心20s

6. 现在42度保温1hr ,然后70度保温15min,

7.上述产物可立即进行下一步的pcr反应或-20度保存。

 

 

AMV 逆转录酶

英文名称: AMV Reverse Transcriptase 总访问: 213
国产/进口: 进口 半年访问: 125
产地/品牌: 美国 Life Sciences Advanced Technologie 产品类别: 其他生物试剂
规       格: 50,000 U
货       号: AMV 007

 

LifeSci AMV 逆转录酶
一、公司介绍
Life Sciences Advanced Technologies 成立于1975年,是世界上一家生产AMV反转录酶的厂商。LSAT的AMV反转录酶因为其高灵敏度和有竞争力的价格体系,已经被许多世界有名的测序公司用于他们的反转录试剂盒产品。
Life Sciences Advanced Technologies在分子诊断试剂和酶类的开发研究上处于世界*地位。
Life Sciences Advanced Technologies决心在两个方面帮助人类疾病的诊断:提供应用基因测序诊断慢性复杂疾病的反转录试剂盒里的AMV反转录酶和传染病现场诊断的NASBA试剂盒。
 
二、产品推荐
1. RTHSA34
产品描述:
作为CDNA文库构建试剂盒的配套产品用于基因测序,浓度为35,000 U/ml。该款反转录酶已经被位居世界前三的的一家测序公司用于他们的反转录试剂盒,可实现17.5 U / cDNA逆转录和低于1 ng的RNA序列转录。
产品优势:
•仅需要0.5ul的酶对于每个cDNA文库试剂盒,有效控制反应体系,用于后续的扩增等
每个cDNA文库试剂盒只需要17.5U, 相对于其他使用200单位的逆转录酶,可以节省50%以上的成本。
• amv 效率是Invitrogen superscriptase (一款MMLV 反转录酶)的11倍,是NEB和Promega 同款AMV的4倍。
2.AMV 007
产品描述:
主要应用于RT-PCR反应的AMV反转录酶,已广泛应用于许多生物技术实验室,浓度是20,000 U/ml。终端用户使用2.5 U 就能完成一个RT-PCR反应。
产品优势:
•用2.5U就能完成一个反应,有些中国用户,将其20000单位/ml的产品稀释到5000 U /ml,这样客户使用0.5 ul 就能完成一个RT-PCR反应。
•一个RT – pcr反应只需要2.5 U,相比NEB和Promega 的AMV RT,可以节省75%的成本。
3. BRT121
产品描述:
作为一种低无机磷酸盐的反转录酶,适用于进行下游克隆过程中的CDNA合成,因为一般情况下较高的无机磷酸盐浓度对磷酸转移反应有抑制作用。常用的可选浓度为5,000 Units/mL。

通用RT-PCR试剂盒(AMV),索莱宝,RP1200-100T

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通用RT-PCR试剂盒(AMV),索莱宝,RP1200-100T

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索莱宝

·  别名 : 通用RT-PCR试剂盒(AMV)

·  英文名称 : Universal RT-PCR Kit(AMV)

·  储存条件 : -20℃

·  单位 : 盒

 

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。

浓度
规格 100T
保存 -20℃

通用RT-PCR试剂盒(AMV),索莱宝,RP1200-50T

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通用RT-PCR试剂盒(AMV),索莱宝,RP1200-50T

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索莱宝

·  别名 : 通用RT-PCR试剂盒(AMV)

·  英文名称 : Universal RT-PCR Kit(AMV)

·  储存条件 : -20℃

·  单位 : 盒

 

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。

浓度
规格 50T
保存 -20℃

AMV Reverse Transcriptase (Promega原装).,Promega,M5101-300u(10U/ul)

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AMV Reverse Transcriptase (Promega原装).,Promega,M5101-300u(10U/ul)

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Promega

·  别名 : 反转录酶

·  英文名称 : AMV Reverse Transcriptase

·  储存条件 : -20℃

·  单位 : 支

 

AMV 反转录酶 5×反应缓冲液(M515A):与 AMV 反转录酶一起提供的 5×反应缓冲液的组成为:250mM Tris-HCl(pH8.3 25),250mM KCl,50mM MgCl2,2.5mM 亚精胺和 50mM DTT 
酶储存液:AMV 反转录酶(AMV-RT

储存液组成为:200mM 磷酸钾(pH7.2 4),0.2% Triton X®-100,2mM DTT 50% 甘油。 
来源:酶纯化于禽成髓细胞瘤病毒颗粒。 
储存条件:保存于-20℃。避免反复冻融,切忌暴露于温度频繁变化的环境。请注意查看产品标签上的 过期日期。 
活力单位定义:在 37℃下,10 分内催化转化 1nmol 脱氧核苷酸为酸性可沉淀物质所需的酶量即一个活 力单位。反应条件为:50mM Tris-HCl(pH8.3),40mM KCl,8.75mM MgCl2, 10mM DTT,0.1mg/ml 乙酸化的 BSA ,1mM 放射性标记的 dTTP 0.25mM poly(A):oligo(dT)。请注意查看产品标签上的活力单位浓度。 

注意:

1. AMV 反转录酶 5×缓冲液仅用于 cDNA 第一链的合成,它不含有脱氧核苷酸,因此不能替换 Promega RiboClone AMV RT First-Strand 5×buffer(Part C121A)C121A Universal RiboClone cDNA System(目录号 C4360)中的一个组份,含有四种 dNTPPromega Access RT-PCR System(目录 号 A1250)是使用 AMV 反转录酶和 Tfl DNA 聚合酶,把反转录和 PCR 整合为一步而无须中间操作的 试剂盒,其中的缓冲液与 AMV 反转录酶 5×反应缓冲液组份不同,所以这两种缓冲液也是不能互 相替换的。 
2. AMV
反转录酶 5×缓冲液不能用于 M-MLV 反转录酶。 
3.
如果你将使用Taq DNA Polymerase 于 PCR 反应,那么可以直接加入体积在 10ul 以内的本反转录反 应混合物。如果你使用的是 GoTaq® DNA Polymerase(目录号 M3001)或 PCR Master Mix(目录号 M7501)那么可以直接加入 25ul 以内的本反转录反应混合物于 50ul PCR 体系中。

浓度
规格 300u(10U/ul)
保存 -20℃

AMV 第一链 cDNA 合成试剂盒,生工,B532445-0020 20 PREPS

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AMV 第一链 cDNA 合成试剂盒,生工,B532445-0020 20 PREPS

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生工
AMV 第一链 cDNA 合成试剂盒

英文名 AMV First Strand cDNA Synthesis Kit
相关类别 反转录PCR(RT-PCR) 储存 冷冻(-20℃)

产品描述

概述

本试剂盒是使用禽成纤维病毒逆转录酶(Avian Myeloblastosis Virus Reverse Transcriptase, AMV RT),以总RNA或者mRNA为模板合成第一链cDNA的试剂盒,含有cDNA第一链合成所需的所有试剂。AMV具有RNA酶H活性,最适温度为42°C。温度稳定性高,延伸温度可达55°C,特别适用于有复杂二级结构的模板的反转录。合成的第一链cDNA 可广泛应用于第二链合成、杂交、PCR 扩增、Real Time PCR 反应、构建cDNA文库等。

特点

  • 全长的第一链cDNA产量高,最长可合成8 kb的cDNA。
  • 试剂盒提供Random Primer p(dN)6和Oligo dT Primer两种引物。
  • 逆转录反应的模板总RNA范围可以在50 pg~5 μg之间。

应用

基因表达分析、cDNA文库构建、反义RNA合成

组份

5 × Reaction Buffer;10 mM dNTP Mix;Oligo dT Primer, 0.5 μg/μl;Random Primer p(dN)6, (0.2 μg/μl);RNase Inhibitor(20 U/μl);AMV Reverse Transcriptase (20 U/μl);RNase-free ddH2O;操作手册

浓度
规格 20 PREPS
保存 冷冻(-20℃)

AMV 第一链 cDNA 合成试剂盒,生工,B532445-0010 10 PREPS

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生工
AMV 第一链 cDNA 合成试剂盒

英文名 AMV First Strand cDNA Synthesis Kit
相关类别 反转录PCR(RT-PCR) 储存 冷冻(-20℃)

产品描述

概述

本试剂盒是使用禽成纤维病毒逆转录酶(Avian Myeloblastosis Virus Reverse Transcriptase, AMV RT),以总RNA或者mRNA为模板合成第一链cDNA的试剂盒,含有cDNA第一链合成所需的所有试剂。AMV具有RNA酶H活性,最适温度为42°C。温度稳定性高,延伸温度可达55°C,特别适用于有复杂二级结构的模板的反转录。合成的第一链cDNA 可广泛应用于第二链合成、杂交、PCR 扩增、Real Time PCR 反应、构建cDNA文库等。

特点

  • 全长的第一链cDNA产量高,最长可合成8 kb的cDNA。
  • 试剂盒提供Random Primer p(dN)6和Oligo dT Primer两种引物。
  • 逆转录反应的模板总RNA范围可以在50 pg~5 μg之间。

应用

基因表达分析、cDNA文库构建、反义RNA合成

组份

5 × Reaction Buffer;10 mM dNTP Mix;Oligo dT Primer, 0.5 μg/μl;Random Primer p(dN)6, (0.2 μg/μl);RNase Inhibitor(20 U/μl);AMV Reverse Transcriptase (20 U/μl);RNase-free ddH2O;操作手册

浓度
规格 10 PREPS
保存 冷冻(-20℃)

一步法 RT-PCR 扩增试剂盒(AMV),生工,B532441-0100 100 PREPS

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生工
一步法 RT-PCR 扩增试剂盒(AMV)

英文名 AMV One-step RT-PCR Kit
相关类别 反转录PCR(RT-PCR) 储存 冷冻(-20℃)

产品描述

概述

本试剂盒采用AMV逆转录酶与高质量的Taq DNA polymerase,并提供优化的反应体系,使反转录和PCR扩增在同一反应体系中进行。反应过程中,无需打开管盖,避免交叉污染。AMV一步法RT-PCR 试剂盒具有方便、便捷、灵敏度高、重复性好等特点。

特点

  • 方便、便捷、保真性高、重复性好.

应用

基因表达分析、基因芯片可靠性验证、基因敲除验证

组份

10 × One Step RT-PCR Buffer;AMV RT;Taq DNA polymerase;RNase Inhibitor(20 U/μl);RNase Inhibitor(20 U/μl);RNase-free ddH2O;Mg2+(5 mM);操作手册

浓度
规格 100 PREPS
保存 冷冻(-20℃)

一步法 RT-PCR 扩增试剂盒(AMV),生工,B532441-0010 10 PREPS

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生工
一步法 RT-PCR 扩增试剂盒(AMV)

英文名 AMV One-step RT-PCR Kit
相关类别 反转录PCR(RT-PCR) 储存 冷冻(-20℃)

产品描述

概述

本试剂盒采用AMV逆转录酶与高质量的Taq DNA polymerase,并提供优化的反应体系,使反转录和PCR扩增在同一反应体系中进行。反应过程中,无需打开管盖,避免交叉污染。AMV一步法RT-PCR 试剂盒具有方便、便捷、灵敏度高、重复性好等特点。

特点

  • 方便、便捷、保真性高、重复性好.

应用

基因表达分析、基因芯片可靠性验证、基因敲除验证

组份

10 × One Step RT-PCR Buffer;AMV RT;Taq DNA polymerase;RNase Inhibitor(20 U/μl);RNase Inhibitor(20 U/μl);RNase-free ddH2O;Mg2+(5 mM);操作手册

浓度
规格 10 PREPS
保存 冷冻(-20℃)

AMV逆转录酶,生工,B500999-0200 200U

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AMV逆转录酶,生工,B500999-0200 200U

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生工
AMV逆转录酶

英文名 AMV Reverse Transcriptase
相关类别 反转录PCR(RT-PCR) 储存 冷冻(-20℃)

产品描述

概述

AMV Reverse Transcriptase (RT)是由大肠杆菌表达的重组禽类成髓细胞瘤逆转录酶。AMV RT是一个异源二聚体,由两个不同的亚基组成(alpha和beta亚基)。AMV RT 具有多种活性,包括RNA和DNA依赖的DNA polymerase活性、DNA-RNA解旋活性、序列特异的Mn2+依赖性内切核酸酶活性和RNase H (45~60°C)内保持活性,因此可逆转录含有大量二级结构的RNA。

特点

  • 优化活性温度范围45~50°C 热稳定性高,逆转录温度可达60°C 高效合成长达13 kb的第一链cDNA 合成掺入修饰的核苷酸

应用

第一链cDNA合成,用于RT-PCR和实时RT-PCR;可提高反应温度降低二级结构对逆转录的影响;合成cDNA,用于克隆和表达研究;合成标记的cDNA探针;引物延伸法分析RNA

组份

一个活性单位是指在37°C、10分钟内将1 nmol dTMP合成掺入多聚的核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量

技术规格

储存 -20°C
浓度 10 U/μl
保质期 24 months
储存缓冲液 200 mM 磷酸钾,2 mM DTT,0.2% (V/V) Triton X-100 和 50% (V/V) 甘油(pH 7.2)。
5X AMV RT 缓冲液 50 mM Tris-HCl (pH 8.3),40 mM KCl, 8.75 mM MgCl2,10 mM DTT,0.1 mg/ml 乙 酰化的 BSA,1 mM 放射性标记的 dTTP 以 及 0.25 mM poly(A):oligo(dT)。
保 存 液 200 mM磷酸钾,2 mM DTT,0.2% (V/V) Triton X-100和50%(V/V)甘油(pH 7.2)
5X AMV RT 缓冲液 250 mM Tris-HCl(pH 8.5, 25°C),40 mM MgCl2,150 mM KCl,5 mM DTT
抑制剂 金属鏊合剂和无机磷酸盐。焦磷酸钠可降低AMV RT活性,但是当其浓度 ≤ 4 mM 时可增加全长cDNA的产量
失活温度 85°C加热5分钟

浓度 10 U/μl
规格 200U
保存 冷冻(-20℃)