日度归档：2023年9月21日

Q-琼脂糖凝胶FF,索莱宝,S8851-100ml

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上海金畔生物科技有限公司提供Q-琼脂糖凝胶FF,索莱宝,S8851-100ml，可以访问官网了解更多产品信息。
Q-琼脂糖凝胶FF,索莱宝,S8851-100ml

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索莱宝

·  别名 : 快流速Q琼脂糖凝胶

·  英文名称 : Q-Sepharose Fast Flow

·  储存条件 : 4℃~25℃，有效期5年。

·  外观（性状） : 本品为白色球状凝胶，无嗅、无味、无肉眼可见杂质。

·  单位 : 瓶

 

一、简介

Q-琼脂糖凝胶FF是将三甲胺基烷基季铵基团键合在高流速琼脂糖微球上形成的一种强阴离子交换介质。广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。

本品为白色球状凝胶，无嗅、无味、无肉眼可见杂质。

二、亲和填料特性

Q-琼脂糖凝胶FF,索莱宝,S8851-100ml

*检测条件： 层析柱10mm×300mm  *柱床高15cm，25℃，流动相为0.1mol/LNaCl。.

三、 适用范围

本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在pH工作范围内可形成负离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。

四、操作说明

1 装柱

（1）让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。

（2）根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1的比例）配成匀浆。

（3）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。

（4）用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。

（5）打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。

2 平衡

让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。平衡液是低浓度的缓冲溶液，如Tris、PBS等。

3 上样

（1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。盐浓度太大的样品处理后再配。

（2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。

（3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和pH值。盐浓度小，介质对样品组分吸附较牢。用DEAE介质时，推荐的pH值是小于目标产品等电点1个单位。

4 洗脱

Q琼脂糖凝胶FF介质可用增大盐浓度或减小pH值进行洗脱，常用增大盐浓度的办法洗脱。

5再生

一般用高盐浓度的缓冲液（含1~2mol/L NaCl）洗或减小pH洗10倍以上柱体积，接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。

若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

6 在位清洗

（1）对于以离子键结合上去的蛋白，可以用2M NaCl去除。

（2）对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类，可用1M NaOH 去除。

（3）对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。

清洗完毕后，用至少3倍缓冲液平衡柱子。

7 注意

在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。

在使用过程中，不能使用强酸，如使用酸洗，应使用浓度低于0.1 M的冰醋酸。

8 去热源

用0.5M的氢氧化钠清洗柱子5~6小时或用0.1M的氢氧化钠24小时。或用以下方法步骤去除：

（1）2倍柱体积的70%乙醇；

（2）2倍柱体积50mM Tris-HCl pH7.5；

（3）1倍柱体积4M尿素；

（4）3倍柱体积的Tris缓冲液+0.1M NaCl；

以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。

9 消毒

用0.5~1M NaOH室温下洗8~10倍柱体积，初始缓冲液平衡柱子。

10 灭菌

置介质于高压灭菌锅中120℃下30分钟。

五、注意事项

产品应密封贮存在4℃~25℃（保存溶液为20% 乙醇），通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。用过的柱子贮存在4℃（20% 乙醇）。避免与氧化剂接触；避免在pH< 4的环境中长时间暴露(一周,20℃)。

 

浓度
规格 100ml
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CCK-8试剂盒(细胞增殖及毒性检测试剂盒),索莱宝,CA1210-500T*10

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索莱宝

·  别名 : CCK-8 WST-8

·  英文名称 : CCK-8 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

·  储存条件 : 4℃密封避光保存

·  单位 : 瓶

 

Cell Counting Kit-8 简称CCK-8 试剂盒，为MTT 法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。

使用说明： 
一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时 （测定细胞具体数量时） 
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。 
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做 3-5 个细胞浓度梯度，每组 3-6 个复孔。 
3、接种后培养至细胞贴壁，然后加 CCK-8 试剂培养一定时间后测定 OD 值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X 轴），OD 值为纵坐标（Y 轴）的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入 CCK-8 后的培养时间。）

二、细胞活性检测

1、在 96 孔板中接种细胞悬液（100µL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（在 37℃,5% CO2 的条件下）。

2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数）。

3、将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。

4、用酶标仪测定在 450nm 处的吸光度。

5、如果暂时不测定 OD 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在 24 小时内吸光度不会发生变化。

三、细胞增值–毒性检测

1、在 96 孔板中配置 100 µL 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时（在 37 ℃，5% CO2 的条件下）。

2、向培养板加入 10µL 不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24 或 48 小时）。

3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数）。如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加 CCK-8 之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。

4、将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。

5、用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。

6、如果暂时不测定 OD 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在 24 小时内吸光度不会发生变化。

活力计算：

细胞活力（％）=[A(加药)－A(空白)]／[ A(0 加药)－A(空白)]×100

A（加药）：具有细胞、CCK-8 溶液和药物溶液的孔的吸光度

A（空白）：具有培养基和 CCK-8 溶液而没有细胞的孔的吸光度

A（0 加药）：具有细胞、CCK-8 溶液而没有药物溶液的孔的吸光度

细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力

注意事项：

①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。

②白细胞可能需要培养较长时间。

③当使用标准 96 孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为 1 ,000 个/孔 (100 µL 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于 2,500 个/孔 ( 100 µL 培养基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的 10% 加入 CCK-8 溶液。

 

④如果没有 450nm 的滤光片，可以使用吸光度在 430-490 nm 之间的滤光片，但是 450nm 检测灵敏度最高。

⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。

浓度
规格 500T*10
保存 4℃密封避光保存

SP-琼脂糖凝胶FF,索莱宝,S8861-100ml

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索莱宝

·  别名 : 快流速SP-琼脂糖凝胶

·  英文名称 : SP-Sepharose Fast Flow

·  储存条件 : 4-28℃

·  单位 : 瓶

 

产品说明：分离试剂，层析介质。平均颗粒大小：90µm；最高流速：750cm/h;下游初步纯化介质，高流速加上高载量，可快速纯化大量粗产品。

浓度
规格 100ml
保存 4-28℃

CCK-8试剂盒(细胞增殖及毒性检测试剂盒),索莱宝,CA1210-500T

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·  别名 : CCK-8 WST-8

·  英文名称 : CCK-8 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

·  储存条件 : 4℃密封避光保存

·  单位 : 瓶

 

Cell Counting Kit-8 简称CCK-8 试剂盒，为MTT 法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。

使用说明： 
一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时 （测定细胞具体数量时） 
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。 
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做 3-5 个细胞浓度梯度，每组 3-6 个复孔。 
3、接种后培养至细胞贴壁，然后加 CCK-8 试剂培养一定时间后测定 OD 值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X 轴），OD 值为纵坐标（Y 轴）的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入 CCK-8 后的培养时间。）

二、细胞活性检测

1、在 96 孔板中接种细胞悬液（100µL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（在 37℃,5% CO2 的条件下）。

2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数）。

3、将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。

4、用酶标仪测定在 450nm 处的吸光度。

5、如果暂时不测定 OD 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在 24 小时内吸光度不会发生变化。

三、细胞增值–毒性检测

1、在 96 孔板中配置 100 µL 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时（在 37 ℃，5% CO2 的条件下）。

2、向培养板加入 10µL 不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24 或 48 小时）。

3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响 OD 值的读数）。如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加 CCK-8 之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。

4、将培养板在培养箱内孵育 1-4 小时。

5、用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。

6、如果暂时不测定 OD 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入 10µL 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在 24 小时内吸光度不会发生变化。

活力计算：

细胞活力（％）=[A(加药)－A(空白)]／[ A(0 加药)－A(空白)]×100

A（加药）：具有细胞、CCK-8 溶液和药物溶液的孔的吸光度

A（空白）：具有培养基和 CCK-8 溶液而没有细胞的孔的吸光度

A（0 加药）：具有细胞、CCK-8 溶液而没有药物溶液的孔的吸光度

细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力

注意事项：

①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。

②白细胞可能需要培养较长时间。

③当使用标准 96 孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为 1 ,000 个/孔 (100 µL 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于 2,500 个/孔 ( 100 µL 培养基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的 10% 加入 CCK-8 溶液。

 

④如果没有 450nm 的滤光片，可以使用吸光度在 430-490 nm 之间的滤光片，但是 450nm 检测灵敏度最高。

⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。

浓度
规格 500T
保存 4℃密封避光保存