Protein A Sepharose 4FF 产品使用说明书

Protein A Sepharose 4FF 产品使用说明书

——高IgG结合特异性 高流速 低蛋白A脱落

产品特点

特点

 

结合特异性强,基团脱落少

颗粒大小

50-160 μm

基质

4%的交联琼脂糖凝胶

推荐流速

50-300cm/h

配基

重组protein A

使用温度

常温

配基密度

6mg重组蛋白A/ml

pH范围

3-10

动态吸附载量

60mg人IgG/ml

保存温度

+4~8℃

蛋白A残留

小于3ng蛋白A/mg IgG

保存液体

20%乙醇

 

Protein A Sepharose 4FF ,上海金畔生物专业代理,:

 产品介绍

Protein A sepharose介质是经过我们公司长期开发,在公司生产的native protein A 的基础上精致而成。通过Protein A Sepharose 4FF,可分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。本产品相对同类产品具有如下优势:

1、偶联条件温和,更好的保持了protein A的构象,所以抗体载量高,同体积的介质,相同规模的纯化设备,相同体积介质,抗体的产量明显高于用同类产品,大大的降低了抗体药物生产成本。

2、非常稳定,不易脱落,用其生产的抗体中protein A的残留比同类产品的更少。

3、公司的Protein A 以及Protein A sepharose的生产都是在清洁车间生产,符合制药企业生产需求。

4、公司生产的Protein A sepharose使用寿命长,常规条件下能够重复使用100次以上。

 

 

使用说明

(1)缓冲液的准备:

平衡缓冲液:纯化不同动物和不同亚型抗体时所用平衡缓冲液是不同的,部分参照如下: 抗体种类

平衡缓冲液成分

人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b

10mM 磷酸盐缓冲液,150mM NaCl,pH 7.21

人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG3

50mM Tris-Cl,3M NaCl,pH7.8-8.5

 

(2)样品的准备

样品上柱前先用平衡缓冲液稀释5至10倍,从而确保样品液的成分和pH与平衡缓冲液相近。如果上样体积过大,可以采取调节上样液pH和盐浓度的方式,使样品的pH和电导与平衡液接近,使样品中的缓冲体系与平衡缓冲液相同。

细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰,去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。

样品在上柱前也需0.45μm微孔滤膜过滤。

(3)操作步骤

a) 填料装柱后,用纯水流洗至少3个柱管体积,以冲掉乙醇,再用平衡缓冲液流洗至少5个柱管体积来平衡柱子。

b) 将样品上柱,上样流速控制在60cm/h。

c) 平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积,把UV洗至基线。

d) 洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱峰,立即用中和缓冲液中和到中性。

e) 再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于+4-8℃保存。

操作中如果没有在线的蛋白监测系统,洗脱峰时可以分阶段

收集,zui后根据测定结果合并活性部分。

Protein A Sepharose 4FF 说明书

Protein A Sepharose 4FF,Protein A Sepharose 4FF说明书

 产品介绍

Protein A sepharose介质是经过我们公司长期开发,在公司生产的native protein A 的基础上精致而成。通过Protein A Sepharose 4FF,可分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。

本产品相对同类产品具有如下优势:

1、偶联条件温和,更好的保持了protein A的构象,所以抗体载量高,同体积的介质,相同规模的纯化设备,相同体积介质,抗体的产量明显高于用同类产品,大大的降低了抗体药物生产成本。

2、非常稳定,不易脱落,用其生产的抗体中protein A的残留比同类产品的更少。

3、公司的Protein A 以及Protein A sepharose的生产都是在清洁车间生产,符合制药企业生产需求。

4、公司生产的Protein A sepharose使用寿命长,常规条件下能够重复使用100次以上。