内切糖苷酶
– 内切
糖苷酶从清洁制剂中的糖蛋白 – 高度稳定的酶切割完整的聚糖 – 不含甘油，NaCl或其他添加剂，如EDTA。
– 测试所有酶不存在蛋白水解或意外的糖苷活性
内切糖苷酶是用于分析糖蛋白的广泛使用的酶。这些酶从糖蛋白释放完整的聚糖，而外切糖苷酶释放单个单糖（即唾液酸，半乳糖，β-N-乙酰基葡糖胺，甘露糖等）。
PNGase F通常包含在酶组中，因为其切割完整的N-连接聚糖的活性相似，尽管它实际上是酰胺酶。它在天冬酰胺氨基酸和N-连接聚糖的壳二糖核心的个β-N-乙酰葡糖胺糖（GlcNAc）之间切割。Endo F酶和Endo H在和第二GlcNAc之间切割N-连接的聚糖，留下带电荷的残基，其有助于增加去糖基化蛋白质的溶解度，降低蛋白质聚集体沉淀的可能性。PNGase F切割所有N-连接的聚糖，而Endo H和Endo F酶切除特定类型的N-连接聚糖。
酶的这种分类还包括O-糖苷酶，其从丝氨酸或苏氨酸氨基酸中除去核心1O-连接的聚糖（Galβ1,3GalNAcα）。O-连接的聚糖通常含有在分支和线性连接中与半乳糖连接的另外的单糖，需要使用外切糖苷酶如唾液酸酶和半乳糖苷酶来除去额外的糖。
Endo F1 从肽和蛋白质中切割出高甘露糖和一些杂合型N-聚糖
qa-bio E-EF01说明书
产品编号 – 酶
E-EF01的量 – 60μLsE
-EF01-20 – 20μls¹E
-EF01-200 – 200μls²¹
包括缓冲液
² 仅含酶
Endo F1，内切糖苷酶F1，内切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶F.
Endo F1切割天冬酰胺连接的高甘露糖和一些混合低聚糖。核心岩藻糖基化将活性降低50倍。内切糖苷酶F1将水解含有高甘露糖链的硫酸盐。它在寡糖的二乙酰基壳二糖核心中的两个N-乙酰葡糖胺残基之间切割，产生截短的糖分子，其中一个N-乙酰葡糖胺残基保留在天冬酰胺上。相反，PNGase F完整地去除寡糖。
附加远藤˚F产品
内切糖苷酶F2释放双触角和高甘露糖聚糖（以40X减小的速率）
内切糖苷酶F3将释放triantennarry和岩藻糖基双触角N-聚糖
的远藤˚F多套件包括每个远藤˚F酶和它们的缓冲器中的20个μLs。
源重组Elizabethkingia miricola（是脑膜脓毒性金黄）在大肠杆菌
EC 3.2.1.96
Endo F1特异性切割所有天冬酰胺连接的高甘露糖和一些混合低聚糖
内容
在20mM酶的60微升等分试样（1 U）的Tris-HCl，pH 7.5中
包含20μL和60μL包装尺寸：
5x反应缓冲液 – 250 mM磷酸钠，pH 5.5
比活性 > 16U / mg
活性 > 17U / ml
分子量 32,000道尔顿
建议用法
1.在Eppendorf管中加入高达200μg的糖蛋白。用去离子水调节至38μl终体积。
2.加入10μl5x反应缓冲液5.5
3.加入2.0μlEndoF1。在37℃孵育1小时。
比活性
定义为在37℃，pH5.5下，在1分钟内催化从1微摩尔变性核糖核酸酶B（RNase B）释放N-连接寡糖所需的酶量。通过SDS-PAGE监测切割（切割的RNase B迁移更快）。
储存酶储存在4˚C。
稳定性妥善储存至少12个月。几天暴露于环境温度不会降低活动。
纯度内切糖苷酶F1如下测试污染蛋白酶; 将10μg变性的BSA在37℃下与2μL酶一起温育24小时。经处理的BSA的SDS-PAGE分析显示没有降解的迹象。
生产宿主菌株已经过广泛测试，并且不产生任何可检测的糖苷酶。
