品牌PEI转染试剂

发表于2024年5月5日由上海金畔生物科技有限公司

Jinpan品牌PEI转染试剂

简要描述：上海金畔生物自产线性PEI转染试剂

PEI转染注意要点

化学名：线性聚乙烯亚胺，线性PEI，聚乙烯亚胺，线性，MW 25000，转染级

订货号＃： 9002-98-6 规格：1G 品牌：Jinpan CAS＃： 9002-98-6,26913-06-4

分子式：（CH2CH2NH）n 分子量： 25,000

详细介绍

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Jinpan品牌线性PEI转染试剂说明书

Jinpan品牌

PEI转染注意要点

化学名：线性聚乙烯亚胺，线性PEI，聚乙烯亚胺，线性，MW 25000，转染级

订货号＃： 9002-98-6 规格：1G 品牌：Jinpan CAS＃： 9002-98-6,26913-06-4

分子式：（CH2CH2NH）n 分子量： 25,000 熔点： 73-75º

溶于：热水，低pH冷水，甲醇和乙醇。 不溶于：苯，乙酉迷和丙酮

外观：白色至黄色固体处理：手套和通风橱

储存：在室温下避光干燥储存

配置：1：称取100mg线性聚乙烯亚胺，加新鲜的细胞级别的水90ml，加盐酸至PH=3左右，加热至80℃左右搅拌过夜溶解PEI，

2：用氢氧化钠溶液调整pH值至7.0 ，定容至100ml，用0.22um的滤器过滤，分装后储存于4℃，保质期可以达到12个月。

转染操作流程：

◆ 瞬时转染方法 1. 接种细胞：转染前一天，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到 70~80%。

2. 准备 DNA-PEI 复合物： DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。，用 Opti-MEM ITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。

3. 转染细胞：直接向每个孔中加入 DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染 3 h 后，添加½体积的包含 30%血清的生长培养基。

4. 孵育细胞和分析结果：在 CO2培养箱中 37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后快 7 h 即可检测到转入基因的表达。请自行确定适合检测时间。

◆稳定转染方法

1. 接种细胞：转染前一天，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到 70~80%。

2. 准备 DNA-PEI 复合物： DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表 1 所示，用 Opti-MEM ITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比，每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同）。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。

4. 孵育细胞和分析结果：在 CO2培养箱中 37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后 7 h 即可检测到转入基因的表达。

5.转染 24 h 后，将细胞传代至新鲜的生长培养基中（将细胞稀释 10 倍以上），在 CO2培养箱中 37℃孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约 1~2 周可筛选到耐药性克隆，在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。 „

上海金畔生物自产线性PEI转染试剂特别提醒

1. PEI 25K含有4-11％的残留丙酰基，这可能阻碍聚合物主链与DNA的有效结合，所以批间转染效率可能会有比较大的差异，建议一个批次可以多购买，PEI 25K稳定性在室温干燥避光下可稳定保存10年以上（虽然有效期标注只有18个月左右）

2. 对于某些类型的细胞如 HEK-293、HEK293T、NIH/3T3 和 COS 细胞，在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为 70~80%。

3. 对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。

4. 即使在有蛋白（如 10%的血清）存在的情况下，DNA-PEI复合物仍能转染细胞，但是 DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用 Opti-MEM ITM 培养基以达到宜转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。

5. 对大多数细胞来而言，每 1 μg DNA 使用 3.0 μL PEI转染试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每 1 μg DNA 使用 1~4 μL 体积线性PEI转染试剂进行优化。

6.本手册只是一个基本操作手册，具体转染过程中需要根据实验进行优化，优化方向为混合时间，转染时间，DNA混合比列…….

7.Polyethylenimine, Linear (MW 25,000) 为Polysciences公司生产的化合物产品，每批产品出厂前都经过严格的检测,保证每批产品都*、稳定且高品质,但由于作为转染试剂使用过程中有很多实验室因素(配置方法，PH,水纯度,称量的准度,dna RNA纯度,细胞状态，细胞品系…)造成溶解出现问题或者转染效率出现差异,所以厂家只受理该产品纯度，分子量及重量缺失破损等相关投诉，针对极个别客户溶解问题和转染效率问题我们只能友善解决,所以不能保证您能获得满意答复，对于产品产品转染效率不高，转染批间有差异，转染不了等问题，不作为评价我们售后工作的依据。
如果我们提供的PEI手册都无法解答您的问题,建议您可以多看文献,多调整一下转染条件,找出适合自己细胞的转染方法。如果无暇摸索条件,您也可以直接购买我们配置好细胞转染液,这样免去您很多烦恼,谢谢理解

8.部分数据参考，本数据来源于网络，不作为售后投诉依据

上海金畔生物自产线性PEI转染试剂转染试剂和DNA配比数据

细胞型号	培养基	每孔细胞数	DNA的量	转染试剂量	和培养基混合 4-6h
293H	DMEM	3×10⁴	0.2µg	0.5µL	DMEM+10�S
293FT	DMEM	3×10⁴	0.2µg	0.5µL	DMEM+10�S
293E	DMEM	3×10⁴	0.2µg	0.5µL	DMEM+10�S
293F	DMEM	3×10⁴	0.2µg	0.5µL	DMEM+10�S
COS7	DMEM	1.5×10⁴	0.4µg	0.5µL	DMEM+10�S
hela	DMEM	2×10⁴	0.3µg	0.5µL	1640+15�S
Caco2	MEM	3.5×10⁴	0.3µg	0.75µL	MEM+10�S
BHK21	MEM	2×10⁴	0.2µg	0.5µL	MEM+10�S
CHO-DG44	DMEM+HT+pro	2×10⁴	0.5µg	0.5µL	DMEM+HT+pro +10�S
RAW264.7	DMEM	3×10⁴	0.2µg	0.5µL	DMEM +10�S
MCF7	MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium pyruvat	2×10⁴	0.1µg	0.25µL	MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium pyruvat+10�S
SW480	IMDM	3×10⁴	0.4µg	0.5µL	IMDM +10�S
MDCK	DMEM	4×10⁴	0.6µg	1µL	DMEM+10�S
CHO-K1	IMDM+Pro	3×10⁴	0.2µg	0.5µL	IMDM+Pro +10�S
HepG2	DMEM	3×10⁴	0.5µg	0.75µL	DMEM+10�S
A549	DMEM	2×10⁴	0.3µg	0.5µL	DMEM+10�S
NIH/3T3	DMEM	1.5×10⁴	0.1µg	0.75µL	DMEM+10�S
vero	DMEM	3×10⁴	0.3µg	0.75µL	DMEM+10�S
sf9	SIM SF	5×10⁴	0.4µg	0.75µL	SIM SF+10�S

转染效率

细胞种类	中文名称	PEI 转染效率
HEK293	人胚肾细胞	90%-95%
293-T	人胚肾细胞	90%-95%
CHO-K1	仓鼠卵巢细胞	80%-90%
U251	人源神经胶质瘤细胞	80%-90%
Hela	人源宫颈癌细胞	70%-80%
COS7	猴SV40转化肾细胞	70%-80%
HepG2	人源肝癌细胞	70%-80%
NIH/3T3	小鼠胚胎成纤维细胞	60%-70%
胶质瘤干细胞	人源胶质瘤干细胞	60%-70%
Patu8988	人源胰腺癌细胞	60%-70%
U2OS	人源骨肉瘤细胞	60%-70%

上海金畔生物自产线性PEI转染试剂价格表

货号	品名	规格	品牌.
23966-1	Polyethylenimine, Linear (MW 25,000)	1g	polysciences
78pei25000	线性聚乙烯亚胺分子量25000	100mg	Jinpan
78pei25000	线性聚乙烯亚胺分子量25000	1g	Jinpan
78pei25000	线性聚乙烯亚胺分子量25000	5g	Jinpan

78PEI MAX 40K转染试剂

发表于2024年5月5日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物Jinpan 78PEI MAX 40K转染试剂

简要描述：上海金畔生物Jinpan 78PEI MAX 40K转染试剂
说明书

化学名：线性聚乙烯亚胺，线性PEI，聚乙烯亚胺，线性，MW 40000，转染级

线性聚乙烯亚胺分子量40000

订货号＃： 49553-93-7 规格：100mg 500mg 5g

品牌：Jinpan CAS＃： 49553-93-7

详细介绍

产品咨询

上海金畔生物Jinpan 78PEI MAX 40K转染试剂说明书

化学名：线性聚乙烯亚胺，线性PEI，聚乙烯亚胺，线性，MW 40000，转染级

线性聚乙烯亚胺分子量40000

订货号＃： 49553-93-7 规格：100mg 500mg 5g

品牌：Jinpan CAS＃： 49553-93-7

分子量： 40,000（~22,000自由基）

溶于：水 不溶于：常用有机溶剂（乙醇，丙酮，四氢呋口南）

外观：白色至灰白色自由流动的固体

处理：手套和通风橱 储存：在室温下避光干燥储存

PEI MAX 40K（在游离碱中也称为PEI 22K）是一种功能强大，值得信赖且经济实惠的瞬时转染试剂。在HEK293和CHO大多数表达系统中，PEI MAX都能提供稳定的高表达（96孔板至100L生物反应器）。现在每年有更多的研究人员和公司来使用PEI MAX进行细胞转染，因为相对于大多数转染试剂而言 PEI MAX既能等到稳定的高表达又能使转染成本降低少40%。

PEI MAX 比更PEI 25K易于使用，并且比PEI 25K有更高的转染效率，通常PEI 25K转染过程通常需要几个小时才能完成准备，而PEI MAX 40K可在两小时内完成整个转染过程。另外，PEI 25K含有4-11％的残留丙酰基，这可能阻碍聚合物主链与DNA的有效结合，而PEI MAX 40K的丙酰基*脱落，意味着PEI MAX每批产品的性能更加稳定。

货号	品名	规格
78pei40000	线性聚乙烯亚胺分子量40000	100mg
78pei40000	线性聚乙烯亚胺分子量40000	1g
78pei40000	线性聚乙烯亚胺分子量40000	5g

biontex转染常见问题解答

发表于2024年5月4日由上海金畔生物科技有限公司

biontex转染常见问题解答

“先天免疫系统”对合成载体系统的转染有什么作用？

先天免疫系统能够检测所谓的“病原体相关分子模式”（PAMP）。这些包括例如细胞外源核酸。取决于细胞类型的“先天免疫系统”有多明显，它启动针对假定病原体的防御措施的能力也越大。这导致了K2® 转染系统和后来的K4® 转染系统的开发。

► 决定细胞是否容易、难或不可能转染 DNA 的因素有哪些？

使用化学转染方法，特定细胞类型进行内吞作用和增殖的能力发挥了关键作用，因为脂质复合物/复合物最初通过内吞作用逃逸到细胞质中，然后从内体中释放出来。如果在分裂过程中核膜在短时间内是可渗透的，则脂质复合物/复合物或解复合的 DNA 只能渗透到细胞核（即克服“核屏障”）。如果这两个过程中的一个以不完善的形式发生，即使转染方法的应用是最佳的，也可能相应地降低转染效率。因此，低增殖或无增殖的细胞（如原代细胞或神经细胞）或内吞活性低的细胞（如 Jurkat 细胞）被认为难以转染也就不足为奇了。另一个关键因素是先天免疫系统，它针对每种细胞类型的发展各不相同。细胞能够检测外来核酸并进入防御状态。具有低发育先天免疫系统的细胞（例如 HEK293 细胞）因此易于转染，而具有强发育免疫系统的细胞（例如 Jurkat 细胞）则难以转染。
一个加剧的因素是，上面给出的这些现象可能不仅在细胞类型与细胞类型之间*不同，而且在同一细胞类型的不同基因型之间也可能*不同。不同大学甚至同一机构内不同工作组的同名细胞中可能会出现不同的行为，也可以在细胞系的长期传代过程中观察到。这种复杂性将协议参数从一个用户传输到另一个用户的选项减少到最小，即使显然涉及相同的细胞类型。

► 我一直使用不同的转染试剂。我现在可以使用 Metafectene 和我的旧试剂相同的优化方案吗？

不; 每个转染试剂都有一组特定的属性，包括：

大肠杆菌的特定组成和比例
每个分子的特定净载量和 pH 值
聚集体稳定性/脂质复合物稳定性

这些不同的特性对它们与 DNA 和所讨论的细胞类型的相互作用有直接和特定的影响。因此，协议参数不能从一种试剂转移到另一种试剂。

► 能否预测特定细胞类型的转染能力？

不，这是不可能的。每种细胞类型和每种转染试剂的高度特异性特性之间的相互作用非常复杂，以致于对转染效率的预测是徒劳的。另一方面，经验值表明，例如静止细胞、悬浮细胞和原代细胞通常难以转染。但没有规则无一例外。

► 获得最佳 DNA 转染结果的理想细胞培养条件是什么？

用合成载体系统转染 DNA 的一个基本原则是，这种材料只能在细胞分裂过程中穿透“核屏障”。作为不可避免的结果，必须遵守以下几个方面：
细胞培养传代数不应超过 30 次。每次传代都会发生一定的遗传分化；这意味着最能抵抗传代压力的细胞将不成比例地增殖。此外，细胞培养基的成分会改变细胞的生理状态，因为细胞会根据现有的营养条件调整自身。这导致与原始细胞的遗传差异逐渐扩大。
转染时细胞应尽可能快地生长。细胞应保持在高增殖状态，称为对数期或指数期。通过选择适合快速增殖的培养基并为要使用的细胞类型和适当的格式创建生长曲线，从而为接种和生长持续时间设置最佳细胞数量，可以最容易地实现这一阶段。由于生长抑制，定期保持在汇合条件下的细胞只有在经过几次传代后才能恢复其全部生长潜力。

光学汇合与实际汇合不同。上面的生长曲线表示目视确定的汇合（覆盖整个生长表面）对应于实际汇合（生长曲线的第 5 阶段）的程度。这两个汇合值通常有显着差异。以图中所示的 COS7 细胞为例，很明显，在最常见的情况下，仅实现了早期生长期 3。出于这个原因，如果要在贴壁细胞上执行该过程，作为规则，细胞在转染当天应具有约 90% 的视觉确定的汇合度。

► 如何确定脂质复合物形成的最佳参数？

脂质复合物的形态一方面与阳离子脂质的类型和所用转染试剂的脂质组成密切相关，另一方面与遗传物质与转染试剂的比例密切相关。每种细胞类型都显示出特定的转染能力，具体取决于产生的脂质复合物形态
。可以通过应用优化过程确定以下最佳转染参数：
首先必须确定 DNA/RNA 与脂质的最佳比例。通常认为，脂质复合物需要净正电荷才能与带负电荷的细胞膜表面静电相互作用，以实现成功的内吞吸收。在大多数情况下，这个比例大约为 1-7µl 脂质对 1µg DNA/RNA。
第二个关键因素是每个细胞的 lipoplex 量；如果这太高，产生的毒性会过度补偿转染的成功。因此应改变脂质复合物的量以反映已知的 DNA/RNA 与脂质的最佳比例。

► 我已经注意到我的转染过程中的毒性作用。原因是什么？

阳离子脂质能够扩散到细胞膜中并使其不稳定。随着脂质复合物中脂质含量的增加，这可能是毒性增加的主要原因。出于这个原因，与 DNA/RNA 量相关的高水平脂质只能在有限的范围内使用。
由于未知的原因，脂质复合物对细胞的毒性影响比转染试剂本身要大得多。
必须假设先天免疫系统在检测到细胞内的外来核酸后触发细胞凋亡，这很难与毒性相区分。
这导致了第二个限制：过多的 lipoplex 水平会损害转染成功。毒性的另一个原因可能是通过表达或抑制的蛋白质本身进行所需的细胞操作，这可能对细胞生理学产生重大影响。在这种情况下，最佳转染可能会导致高细胞死亡率，这只能通过下调转染效率来避免。

► 培养基中使用的培养基和血清如何影响转染成功？

细胞培养中使用的血清（例如 FCS、FBS）是一种高度复杂的不确定混合物，由水溶性血液成分（如生长因子和营养物质）组成，并且总是对转染成功有重大影响。
血清具有广泛的脂质复合物抑制特性。因此，在脂质复合物形成（结合转染试剂和遗传物质）期间不得存在血清。
用这些转染试剂形成的脂质复合物可以与含血清的细胞培养基一起添加到细胞中，而不会影响转染结果。事实上，当存在血清时，这些试剂会定期提供更高水平的转染效率。
血清支持细胞生长行为。其成分，如生长激素，可显着促进待转染细胞的生长和细胞分裂率，从而显着提高转染效率。在选择合适的细胞培养基时，还应考虑细胞的增殖行为。如果存在多种可能性，则应选择细胞增殖率最高的培养基。
由于血清的保质期极其有限（最长 1 个月），应注意所用血清在有效期内，因为使用过期血清会显着损害细胞所需的成分。在这种情况下，细胞显示出*不同和减少的生长模式（见图），并且无法再预期最佳转染结果。
血清的质量可能因批次而异。如果所有其他参数保持不变，成分的多样性会导致不同的转染结果。

► 支原体对转染成功有影响吗？

是的，因为细胞培养物的任何污染，无论是真菌、病毒还是细菌，都会对转染结果产生重大影响，通常会导致整个细胞培养物死亡。由于支原体污染具有不可见且不会导致细胞死亡的特殊特性，因此污染可能会在很长一段时间内未被发现。然而，这些细菌对转染成功有广泛的影响：
由于精氨酸需求增加，细胞生长显着降低（见图）
支原体被先天免疫系统识别并调节细胞因子的产生
支原体引起染色体畸变
支原体滞留在细胞膜中并可能调节细胞膜过程，如内吞作用。
有和无支原体污染的 HeLa 细胞的不同细胞生长：

支原体污染对转染效率的影响：

在 48 孔板上用 pCMVßgal 转染 HeLa 和 HepG2 细胞。通过 ONPG 和 BCA 分析评估比吸收值。下图显示了支原体污染对 HeLa 和 HepG2 细胞的广泛影响（未污染细胞效率的 17% 和 5.6%）：

支原体可以在几乎所有已知的细胞类型中增殖，因此无处不在。据估计，大约 80% 的日本细胞培养物、65% 的阿根廷细胞培养物和 15% 的美国细胞培养物被支原体污染。主要来源是实验室工作人员以及胰蛋白酶和血清，它们是从动物来源分离的细胞培养添加剂。

► 我如何确定我的细胞是否被支原体污染，如果是这种情况该怎么办？

一种长期存在的支原体检测方法是 DAPI 染色。然而，由于其极低的检测灵敏度，该方法仅显示出显着水平的污染。PCR 方法明显更灵敏，因此是检测方法。Biontex 提供基于 PCR 的检测试剂盒MycoSPY®和MycoSPY® Master Mix，它们甚至可以识别支原体基因组的单个拷贝。如果细胞培养物受到污染，我们建议使用MycoRAZOR®进行处理。

► DNA/RNA 的类型及其质量对转染成功有什么影响？

基本上，具有更高纯度的遗传材料将始终提供更好的转染结果。需要特别注意的一个因素是被称为内毒素的脂多糖污染。它们在制造过程中由细菌引入，即使以微量存在，也会被先天免疫系统检测到，从而显着损害转染过程。应注意遗传材料的清洁包括去除内毒素，可提供商业试剂盒。不建议将基于“小量制备方案”的质粒清洗用于转染目的，因为遗传物质的特定结构直接影响转染成功：
由于启动子具有特定的表达率，因此细胞具有特征量或每单位时间的表达产物量。
根据细胞类型，待表达基因或产生的蛋白质的特定特征可能显着影响细胞的生理学，甚至导致细胞死亡。

遗传物质的尺寸和三级结构也会影响潜在的转染成功。一般来说，以下原则适用：
细胞的转染能力随遗传物质的量而下降
超螺旋质粒在瞬时转染中更有效，而线性 DNA 更适合于稳定转染。

► 我计划更改为不同的细胞培养格式。我应该注意什么？

Lipoplexes 粘附在细胞培养容器的自由塑料表面上，因此在转染过程中丢失。这就是为什么不能简单地将针对特定容器格式确定的最佳参数与其他容器格式成比例地应用的原因。
使用的容器规格越小，lipoplex 的量/mm² 就必须越高。当从 6 孔培养皿缩小到 96 孔格式时，必须使用大约三倍于 lipoplex / cm² 的量才能实现可比的转染效率。

► Biontex 是否提供针对特定细胞系和转染试剂的特定方案？

不。鉴于常见问题解答中给出的大量参数是成功转染的影响因素，很明显，提供通用的特定协议是徒劳的。我们网站上列出的已发表案例研究只能说明如何尽快实现成功转染，一般不能声称具有普遍适用性。最后可能需要在自己的实验室环境中进行优化。

► 某些手册中描述的冻融循环的作用是什么？

在室温或 4°C 下长期储存期间，脂质体制剂往往会凝结。这意味着大小分布向更大的脂质体移动，这可能对转染效率产生负面影响。冷冻和解冻脂质是一种已知的生产脂质体的方法，因此也可用于为某些转染试剂重建理想的脂质体大小分布。
为此目的，该试剂在冰箱中冷冻，然后在室温下解冻。软涡旋后，试剂再次储存在 4°C。建议在使用 METAFECTENE 转染试剂系列（METAFECTENE®、METAFECTENE® PRO、METAFECTENE® SI）和K2® 转染试剂/ K4® 转染试剂，两个月后。

► 转染试剂、核酸或脂质复合物的稀释溶液可以储存多长时间？

原则上，核酸和阳离子脂质或聚合物等带电分子倾向于粘附在玻璃和塑料表面。虽然在高浓度溶液的情况下由此产生的质量损失可以忽略不计，但用于形成脂质复合物的稀溶液的条件是不同的。根据我们的经验，这种影响是不可避免的。聚丙烯仍然是 lipoplex 形成容器的最佳可用材料（在聚苯乙烯和玻璃之前）。因此，应注意将稀释的溶液尽可能短地留在容器中。Lipoplexes 还倾向于粘附在塑料表面上，此外，还会“老化”。这意味着 lipopolex 聚集成更大的单元，在胞吞作用中不能被细胞吸收，这降低了它们的转染能力。因此，

biontex转染试剂选择指南

发表于2024年5月4日由上海金畔生物科技有限公司

biontex转染试剂选择指南

使用说明：

在“转染试剂选择指南”中，您可以通过设置不同的过滤器（例如，针对核酸和细胞类型的组合）找到现有参考。页面顶部“搜索参考”中的适当关键字也可以产生结果。参考文献表明找到的转染试剂已成功用于相应的应用。理想情况下，应测试的转染参数和转染效率。

如果该列表不包括有关您的细胞类型的参考，这并不意味着没有合适的试剂可用，而只是没有关于该细胞类型的经验报告。

细胞类型描述	核酸/递送分子	产品	书目数据	关联
小鼠原代成肌细胞	miRNA	Metafectene PRO	CE Winbanks 等人，J. Biol。化学，2011 年 4 月；286: 13805 – 13814	关联
小鼠原代肝细胞	miRNA	Metafectene PRO	S. Surendran 等人，《科学报告》，2016 年，6：18958；DOI：10.1038/srep18958	关联
人原代成纤维细胞	siRNA	Metafectene PRO	T. Stiff 等人，PLoS Genet., 2013, 9(3): e1003360, doi.org/10.1371/journal.pgen.1003360	关联
早三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）的Plutella xylostella hemocoel	双链RNA	Metafectene PRO	S. Kumar 等人，《科学报告》，7：43287，DOI：10.1038/srep43287	关联
晚二龄幼虫小菜蛾血腔	质粒	Metafectene PRO	S. Kumar 等人，Comp. 生化。和生理学，2014，A 部分 177：27-34，doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.07.017
Plutella xylostella 早期三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	Z. Guo 等人，《科学报告》，2015，5：13728；DOI：10.1038/srep13728	关联
小鼠（18.5 dpc 胎儿或新生儿）卵巢	miRNA	Metafectene	H. Zhang 等人，Reproduction，2014 年 6 月；148: 43 – 54	关联
兔（新西兰）来自关节软骨的原代软骨细胞	质粒	Metafectene	J.-H. Ryu 等人，J. Biol。化学，2006 年 8 月；281：22039 – 22047	关联
Spodoptera exigua hemocoel 第一天幼虫 L5（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	Y. Kim 等人, Peptides, 2015, 68: 91-98;doi.org/10.1016/j.peptides.2015.02.003
L3D1 NP 幼虫的 Plutella xylostella hemocoel（菱背蛾或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	S. Kumar 等，J. of General Virology，2016，97：2780-2796；DOI 10.1099/jgv.0.000560	关联
早三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）的Plutella xylostella hemocoel	双链RNA	Metafectene PRO	J. Zhou 等人，Pest Manag。科学，2020，76：712–720，DOI：10.1002/ps.5569	关联
Plutella xylostella，三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	B. Park 等人，昆虫科学，2012，19：47–54，DOI 10.1111/j.1744-7917.2011.01421.x
甜菜夜蛾五龄幼虫（L5）（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	J. Park 等人，PLoS ONE，2014，9(9)：e105717，doi：10.1371/journal.pone.0105717	关联
小鼠混合神经元-神经胶质小脑培养物	质粒	K2转染系统
Rabitt (Lapine) 关节软骨细胞	质粒	Metafectene	P. Orth 等人，Mol Biotechnol，2008 年 2 月；38(2): 137-44
小鼠软骨细胞	质粒	Metafectene	A. Jash 等人，PLoS ONE，2012，7(7)：e40828，doi：10.1371/journal.pone.0040828	关联
甜菜夜蛾幼虫和蛹（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	S. Ahmed 等人，《科学报告》，2019，9：4988，doi.org/10.1038/s41598-019-41541-2	关联
小鼠异种移植肿瘤，由人类 Hep-2 细胞建立	质粒	Metafectene	J. Zhou et al., Lin Chuang Er Bi Yan Hou Ke Zazhi, Mar 2006; 20(6): 264-7
甜菜夜蛾四龄和五龄幼虫（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	S. Ahmed 等人，无脊椎动物病理学杂志，2018，doi.org/10.1016/j.jip.2018.05.009
小鼠原代肝细胞	质粒	Metafectene PRO	S. Surendran，博士论文，2014 年，印第安纳大学
人原代 CD14+ 单核细胞	miRNA	Metafectene SI	S. Smith，JCI 洞察力，2018，3(15):e120798，doi.org/10.1172/jci.insight.120798	关联
人永生化淋巴细胞细胞系（EBV永生化）	siRNA	Metafectene PRO	M. Pradas-Juni 等人，Mol. 内分泌学, 2014, 28(9): 1558-1570, doi: 10.1210/me.2014-1065	关联
Antheraea pernyi pupae in diaupase (Chinese Tasar Moth)	双链RNA	Metafectene PRO	AAM Mohamed 等人，PLoS ONE，2014，9(3)：e92680，doi：10.1371/journal.pone.0092680	关联
Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）	双链RNA	Metafectene PRO	Al B. Md Abdullaha 等人，Dev。和比较。免疫学, 2020, 103, 103500, doi.org/10.1016/j.dci.2019.103500	关联
小鼠永生化皮肤成纤维细胞（缺乏 Lap2-alpha）	质粒	Metafectene PRO	E. Bartova 等，Protoplasma，2017，254：2035-2043，DOI 10.1007/s00709-017-1076-1

细胞类型描述	核酸/递送分子	产品	书目数据	关联
小鼠原代肝细胞	质粒	Metafectene PRO	S. Surendran，博士论文，2014 年，印第安纳大学
Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）	双链RNA	Metafectene PRO	Al B. Md Abdullaha 等人，Dev。和比较。免疫学, 2020, 103, 103500, doi.org/10.1016/j.dci.2019.103500	关联
Plutella xylostella 幼虫（菱形或卷心菜蛾）	质粒	Metafectene PRO	W. Gad 等人，J. Gen. Virol.，2008 年 4 月；89: 931 – 938	关联
L5 幼虫（豆类荚螟）的 Maruca vitrata hemocoel	双链RNA	Metafectene PRO	AA Baki 等人，Arch。昆虫生化。生理学，2019:100:e21524，doi.org/10.1002/arch.21524
甜菜夜蛾幼虫血腔（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	Md. Sadekuzzaman 等人，Dev。和比较。Immunol., 2017, 77: 210-220, DOI: 10.1016/j.dci.2017.08.014
大鼠原代肝细胞	siRNA	Metafectene PRO	F. Damiano 等，Biochem。J., 2013, 449: 543–553, doi:10.1042/BJ20120906
大鼠（Wistar 新生儿）原代海马神经元	siRNA	Metafectene	PJ Kammermeier, J. Neurosci., 2008 年 8 月；28: 8560 – 8567	关联
4-6 周龄 Balb/c IL2 NOD SCID（无效）小鼠尾静脉注射	siRNA	Metafectene	S. Romano 等人，细胞死亡和疾病，2013 年，4：e578，doi：10.1038/cddis.2013.109	关联
人类皮肤黑色素瘤（FFPE 组织切片）	质粒	Metafectene PRO	M. Venza 等人，Biochim。等生物物理学。学报，2015，1849：247-256；doi.org/10.1016/j.bbagrm.2014.12.004
小鼠肝细胞	质粒	Metafectene PRO	S.-Y。Cai 等人，JCI 洞察力。2017, 2(5): e90780, doi.org/10.1172/jci.insight.90780
人胎儿皮质干细胞培养	质粒	Metafectene	S. Couillard-Despres 等人，2014 年，US 8,841,430	googleapis.com/c6/aa/0f/25b3644975870e/US8841430.pdf” style=”box-sizing: border-box; text-decoration: none; color: rgb(51,153,204); padding-bottom: 0px; padding-top: 0px; padding-left: 0px; margin: 0px; padding-right: 0px; touch-action: manipulation” target=”_blank”>关联
Antheraea pernyi pupae in diaupase (Chinese Tasar Moth)	双链RNA	Metafectene PRO	Q. Wang 等人, PLoS ONE, 2013, 8(11): e79381, doi:10.1371/journal.pone.0079381	关联
爪蟾XCT细胞	质粒	Metafectene PRO	M. Dubinska-Magiera 等，Protoplasma，2016，253：943-956；DOI 10.1007/s00709-015-0861-y	关联
Plutella xylostella，早期三龄幼虫（菱背蛾或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	阿里先生等人，无脊椎动物病理学杂志，2012，110：389–397，doi.org/10.1016/j.jip.2012.05.003
小鼠原代肝细胞	质粒	Metafectene PRO	JS Park 等人，BMC Res Notes，2011 年 1 月；4:8
Plodia interpunctella 幼虫（印度粉蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	G. Deok Han 等人，Pesticide Biochem。和生理学，2017 年 11 月，143：48-56，doi.org/10.1016/j.pestbp.2017.09.010
小鼠足细胞	siRNA	K2转染系统	F. Kliewe 等人，科学报告，nature.com，7：9916，DOI：10.1038/s41598-017-10116-4	关联
Plutella xylostella 早期三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	Z. Guo 等人，2015，PLoS Genet 11(4)：e1005124。doi:10.1371/journal.pgen.1005124	关联
从新生儿包皮中分离的人角质形成细胞	siRNA	Metafectene	S. Bruche，博士论文，2014，伦敦帝国理工学院	关联
Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）	双链RNA	Metafectene PRO	A. Al Baki 等人，Pest Manag。科学，2020，76：1020–1030，DOI：10.1002/ps.5612	关联
Tribolium castaneum（晚龄幼虫的血腔）	质粒	Metafectene PRO	R. Hepat 等人，J. Virol.，2013 年 10 月，第 87 卷，第 20 期，11223–11230	关联
L5D1 幼虫（豆类荚螟）的 Maruca vitrata hemocoel	双链RNA	Metafectene PRO	MA Al Baki 等人，公共科学图书馆 ONE，2018 年，13 (10)：e0204935，doi.org/10.1371/journal。pone.0204935	关联
4-6 周龄 Balb/c IL2 NOD SCID（无效）小鼠尾静脉注射	siRNA	Metafectene	S. Romano 等人，细胞死亡和疾病，2013 年，4：e578，doi：10.1038/cddis.2013.109	关联
晚二龄幼虫小菜蛾血腔	双链RNA	Metafectene PRO	S. Kumar 等人，Comp. 生化。和生理学，2014，A 部分 177：27-34，doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.07.017
小鼠培养的海马神经元	质粒	Metafectene PRO	A. Schneider, 论文, 2018, Albert-Ludwigs-Universität Freiburg

德国Biontex转染试剂简介

发表于2024年5月4日由上海金畔生物科技有限公司

德国Biontex转染试剂简介

德国Biontex转染试剂简介
Biontex 公司成立于1998年，其总部位于德国慕尼黑附近的Martinsried，专注于转染试剂的研发和应用。

（一） K2^® Transfection System ，Biontex最新产品
全新高效的哺乳动物细胞DNA和mRNA转染工具

产品特点：

真核细胞依赖自身的先天性免疫系统，能够识别并抑制外来物质（如脂多糖、细菌、病毒核酸及蛋白质）的入侵。此外，细胞还可以将这些外来物质的信息通过信号分子传导给相邻的细胞，使这些临近细胞在无需接触病原体的情况下产生防御体系。
为降低细胞自身的免疫反应，提高基因转染效率，Biontex公司最新开发了K2® Transfection System，由K2^® Transfection Reagent 和 K2^® Multiplier两部分组成。K2^® Transfection Reagent是一种高效的阳离子脂质，而K2^®Multiplier则可以降低细胞对外来核酸及脂质体的免疫反应。

应用实例1：

K2转染pCMV-GFP的效率® 转染系统和Metafectene Pro与几种细胞系的市售转染试剂L2k进行了比较。

应用实例2：

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
K2® Transfection System	T060-8.0	1.5 ml Transfection reagent 6.5 ml Multiplier
K2® Transfection System	T060-8.2	2 X 1.5 ml Transfection reagent 2 X 6.5 ml Multiplier
K2® Transfection System	T060-8.5	5 X 1.5 ml Transfection reagent 5 X 6.5 ml Multiplier

（二）METAFECTENE^® SI⁺
特别适合于siRNA或miRNA mimic/inhibitor的高效转染试剂

特点:

METAFECTENE^® SI⁺是一种脂质复合物，经特殊优化适用于siRNA和microRNA转染（siCOM技术），综合了Biontex公司RMA和TOP技术的特点，具有沉默效率高、RNA聚合和毒性低等优点，适用于所有细胞系和原代细胞。

siCOM技术(siRNA adjusted Composition)
不同于一般的DNA转染试剂，本技术不需要将siRNA和miRNA转运到细胞核。因此，METAFECTENE^® SI⁺主要目的在于大化的内吞作用并快速*释放RNA进入细胞质。

转基因HeLa-GFP细胞GFP表达序列的研究® SI+和siRNA直接作用于GFP的mRNA。清晰可见的是GFP表达在72小时内下降到最大值。

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
METAFECTENE^® SI⁺	T100-1.0	1 ml RNA transfection reagent 2 ml SI⁺ buffer (10x)
METAFECTENE^® SI⁺	T100-2.0	2 X 1 ml RNA transfection reagent 2 X 2 ml SI⁺ buffer (10x)
METAFECTENE^® SI⁺	T100-5.0	5 X 1 ml RNA transfection reagent 5 X 2 ml SI⁺ buffer (10x)

（三） METAFECTENE® EASY
更快、更简便、更高效的转染技术

特点：

在开发第二代DNA转染试剂（METAFECTENE^®及其升级版本METAFECTENE^®PRO）的时候，Biontex的主要目标是大化转染效率(RMA技术)和最小化毒性作用(TOP技术)。进一步开发的Biontex FEE技术预示着第三代质粒转染试剂的开始：METAFECTENE^®EASY⁺。

FEE技术
FEE技术是优化的具更高转染效率的技术，通过固定DNA /脂质体比率和转染复合物体积而适用于广泛的细胞类型。不需要针对每种细胞类型进行费时、费力的条件优化。

变质体® EASY的转染效率与METAFECTENE相当® 无需优化DNA/脂质体（深蓝色柱：COS-7，浅蓝色柱：HeLa细胞）。

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
METAFECTENE^® EASY⁺	T090-1.0	1 ml Transfection reagent 2 ml EASY+ buffer (10x)
METAFECTENE^® EASY⁺	T090-2.0	2 X 1 ml Transfection reagent 2 X 2 ml EASY+ buffer (10x)
METAFECTENE^® EASY⁺	T090-5.0	5 X 1 ml Transfection reagent 5 X 2 ml EASY+ buffer (10x)

（四）METAFECTENE^® PRO
真核细胞的高效、低毒性转染试剂

METAFECTENE^® PRO是针对哺乳动物细胞的新一代转染试剂。采用毒性优化技术（TOP技术），Biontex成功地降低了转染试剂对细胞的毒性，并显著提高DNA进入细胞的效率。除了能加强细胞的转染效率之外，METAFECTENE^® PRO的另一个主要特点是提高细胞内基因的表达。

TOP技术(Toxicity Optimization Module)
毒性最小化是现代转染试剂达到效率和广泛应用性的首要前提条件。TOP技术的基本准则是模拟物质天然结构，加强生物降解能力，提高细胞耐受性。另外，通过物理化学修饰，降低脂质复合体的稳定性，从而促进DNA在细胞质的释放。

METAFECTENE转染效率的比较® PRO与各种细胞系（代谢物）® 100%)

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
METAFECTENE^® PRO	T040-1.0	1 ml Transfection reagent
METAFECTENE^® PRO	T040-2.0	2 X 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE^® PRO	T040-5.0	5 X 1 ml Transfection reagent

（五）METAFECTENE^®

RMA技术(Repulsive Membrane Acidolysis)
排斥膜酸水解（RMA）技术，一方面能促进细胞内涵体中“质子海绵”的活性，另一方面能促进脂质体复合物分解，通过小片段质子化结构模拟磷脂结构。当内涵体处于酸性环境时，正电荷累积在脂质体复合物的磷脂双分子结构中，通过电荷的排斥力，这些电荷最终引起脂质体复合物的分解，同时高效地将DNA/RNA释放到细胞质中。
最后，胞质中非络合的DNA/RNA急剧增多，以DNA为例，这个结果导致其在胞质中的活性显著提升，DNA与细胞核接触的可能性增加，从而大大提高转染效率。

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
METAFECTENE^®	T020-1.0	1 ml Transfection reagent
METAFECTENE^®	T020-2.0	2 X 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE^®	T020-5.0	5 X 1 ml Transfection reagent

其他相关产品：

产品名称	产品介绍	规格	货号
METAFECTENE®FluoR	转染全过程可视化低毒性：维持细胞最佳形态可使用显微镜观察细胞密度应用：转染真核细胞	0.5 ml 1.0 ml	T050-0.5 T050-1.0
INSECTOGENE	简便、高效地转染昆虫细胞生产重组蛋白；与杆状病毒表达系统兼容；耐受血清抑制；快速，操作简便；性价比高应用：昆虫细胞转染	1 ml 2 X 1ml 5 X 1ml	T030-1.0 T030-2.0 T030-5.0
DOTAP	第一代转染试剂用于DNA或者反义核苷酸寡聚体转染哺乳动物细胞。价格便宜，已被大量文献报道。	1 ml 2 X 1ml 5 X 1ml	T010-1.0 T010-2.0 T010-5.0
PROTEOfectene®	快速、高效的蛋白转染试剂广泛适用于各种蛋白质转染和各种细胞类型低毒性，耐受血清抑制	0.1 ml 0.25 ml 0.5 ml	E010-0.1 E010-0.25 E010-0.5
PROTEOfectene®AB	快速、高效的蛋白转染试剂广泛适用于各种蛋白质转染和各种细胞类型低毒性，全血清耐受具有所有同型抗原的单克隆/多克隆抗体	0.1 ml 0.25 ml 0.5 ml	E020-0.1 E020-0.25 E020-0.5

二、自主生产的转染试剂：HTfect transfection kit

HTfect transfectionKit是盎然生物技术有限公司研发的一种高效、低毒、廉价且重复性好的新型转染试剂，适用于大部分细胞类型。本产品特别适合于HEK293、HeLa、HT1080等细胞的转染，在重组蛋白表达，病毒包装， microRNA靶基因3’-UTR分析、co-IP等实验中用途广泛。同时，本产品也不受血清的干扰，实验操作简单。
产品优势

使用实例
用HTfect transfection kit 将3 μgpLVX-cmyc-EGFP质粒转染HEK293细胞，两天后使用Olympus倒置荧光显微镜（IX71）进行观察和拍照。（左图为明场细胞图像，右图为绿色荧光细胞图像）。

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
Htfect transfection kit	AB-TP1001	Sol.A 1.25 ml Sol.B 20 ml
Htfect transfection kit	AB-TP1002	Sol.A 2.5 ml Sol.B 40 ml
Htfect transfection kit	AB-TP1003	Sol.A 5 ml Sol.B 80 ml

1. 通过抑制细胞对外源DNA的免疫反应来提高转染效率，特别适用于转染人类细胞
2. 多数情况下，比其他常见转染试剂（如，Lip2K）有更高转染效率
3. 细胞毒性较低
- 整合了RMA和TOP技术
- 沉默效率更高，siRNA用量更少
- 操作简便、快速，适合大规模筛选
1. 快速：一次转染实验只需3天
2. 简便：优化条件时，只需摸索两个固定的 DNA:lipid比例
3. 高效：升级产品提高了转染效率，进一步降低毒性
4. 经济：EASY⁺的显著特征，EASY⁺降低了核酸复合物(DNA +脂质)所需要的体积，节约至少50%的成本
1. METAFECTENE^®是一种基于脂质体的包含阳离子和中性脂质的复合物，在DNA转染哺乳动物细胞时达到很高的转染效率。属于第二代转染试剂。
2. RMA技术是高效转染率的保证。另外，METAFECTENE^®的低毒性和耐受血清抑制等特性使其具有广泛的应用空间。
1. 转染效率高，尤其对HEK293T细胞的转染效率高达95%以上。
2. 细胞毒性小，显著低于L2K等试剂。
3. 转染过程中无需更换无血清培养液，操作简单。
4. 性价比高，特别适合大规模转染实验，如表达重组蛋白或者包装病毒等。
5. 结果重复性好。

世界转染试剂汇总

发表于2024年5月4日由上海金畔生物科技有限公司

世界转染试剂汇总

简要描述：世界上有很多转染试剂，到底你该选用哪种？

详细介绍

产品咨询

promega

产品名称

包装

目录号

价格(元)

FuGENE® 6 Transfection Reagent

1ml

E2691

3976

FuGENE® HD Transfection Reagent

5 × 1ml

E2312

33264

TransFastTM Transfection Reagent

1.2mg

E2431

2247

FuGENE® 6 Transfection Reagent

5 × 1ml

E2692

16190

FuGENE® 6 Transfection Reagent

0.5ml

E2693

2294

FuGENE® HD Transfection Reagent

1ml

E2311

6720

origene

多种转染试剂满足您的特定的cDNA和shRNA转染需求。

Cell Types	Examples	Recommended Reagents
Commonly used established cell lines	Hela, MCF 7, K562, Jurkat, 3T3, COS	TurboFectin 8.0
Most established cell lines and primary cells	Above, plus MEF, HUVEC, SMC, lymphocytes, etc.	Magnetofection PolyMag Magnetofection CombiMag
Primary neurons and neuronal cell lines	Hippocampal neurons and neuronal cell lines PC-12, B95, C6, N2A or SH-5YSY, etc.	Magnetofection NeuroMag
Virus infection of non-permissive cells		Magnetofection ViroMag
HEK293T, CHO, 293S, etc		MegaTran 1.0
For siRNA transfection	HEK293T	siTran 1.0

TurboFectin 8.0^TM是针对核酸转染真核细胞所优化的一种高效率的新型转染试剂，由配方的脂质体和组蛋白混合物，溶在80%的酒精中。适用于在各种不同构建类型的细胞中转染TrueClone®/TrueORF®克隆 (基因过表达) 以及 HuSH-29® (用于基因沉默的shRNA)。
- 性能优越: 与FuGENE®6 相媲美的高转染效率和低毒性
- 应用广泛: 使用TurboFectin 8.0 已经成功转染超过100种细胞系及原代细胞类型
- *: 比FuGENE^®价格便宜
Magnetofection ^TM是一种新型, 简易，高效的转染方法。利用磁力将含有磁珠的目的基因载体，吸向靶细胞。
- 可用于更多种细胞，更加适用于难转染的细胞。包括原代细胞和神经细胞
- 与常规转染方法相比，转染效率极大提高。
- 在较短的孵育过程内，拥有比常规转染方法高上千倍的转染效率
了解更多春季*
MegaTran 1.0 是一种非脂质体聚合物，适用于大量DNA和shRNA转染及大规模蛋白质制备。
适用细胞系：CHO，HEK293，293F suspension cells，Hela，COS-7，NIH3T3，MEF，Sf9，U2OS等。
- 高效，低毒。
- 提高瞬时转染后蛋白的表达量。
- 价格非常优惠。

INVITROGEN

Transfection Reagent	Key Features & Applications of Reagent
Lipofectamine™ LTX Transfection Reagent	High transfection efficiency and significantly lower toxicity levels for a wide range of cell lines Significantly improved transfection performance in a number of primary and hard-to-transfect cell lines Optimized protocols for over 30 different cell lines are available so much less time is needed for evaluation and optimization
FreeStyle™ MAX Transfection Reagent	Optimized for transient transfection in CHO suspension cells and also works for HEK-293 cells Used for a large-scale transient protein production with milligrams of protein yield
Lipofectamine™ RNAiMAX Transfection Reagent	Superior transfection efficiency requiring lower RNAi concentrations leading to more effective gene knockdown with minimal non-specific effects Easy optimization due to minimal cytotoxicity across a 10-fold concentration range of transfection reagent Compatibility with a broad range of cell types providing the most versatile approach to all of your gene silencing experiments
Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent	Achieves highest efficiency and expression results for plasmid or RNAi transfections Works effectively with many cell types (adherent or suspension) Easy and fast protocol – no need for wash steps before or after transfection Complexes can be added to cells growing in serum-containing media Ideal if transfecting at confluencies of 90% or greater (minimizes cytotoxicity following transfection)
Lipofectamine™ 2000 CD Transfection Reagent	Same performance as Lipofectamine™ 2000, certified animal-origin free (“CD” = chemically defined)
Oligofectamine™ Transfection Reagent	Transfection of antisense oligonucleotides
293fectin™ Transfection Reagent	Used for transient protein production in combination with the FreeStyle™ 293 Expression System Optimized for suspension FreeStyle™ 293-F cells
Cellfectin® Transfection Reagent	Optimal transfection of insect cells, including S2, Sf9, Sf21 and High Five™ cells
DMRIE-C Transfection Reagent	Transfection of suspension cells, including CHO, lymphoid and Jurkat cell lines.
Lipofectamine™ Transfection Reagent	First generation reagent for plasmid DNA transfections In most cases, Lipofectamine™ 2000 provides better performance than Lipofectamine™ Transfection Reagent
Lipofectin® Transfection Reagent	First generation reagent for plasmid DNA transfections In most cases, Lipofectamine™ 2000 provides better performance than Lipofectin® Transfection Reagent
Optifect™ Transfection Reagent	Broad use reagent designed for low confluency applications (<70% confluent at the time of transfection) Useful for cell lines that are sensitive to transfection reagents

Plasmid DNA Transfection

To obtain efficient gene transfer by transfection, plasmid DNA can be complexed with lipid reagents to mediate efficient delivery into the cell's nucleus. This process is essential for subsequent protein expression of the gene of interest. Plasmids are small circular DNA molecules that naturally occur in bacteria, and are actually used by the bacteria to transfer genetic information. The mechanism of adding a DNA Plasmid into a mammalian cell is known as plasmid transfection.

Invitrogen offers a wide range of transfection reagents for your specific needs. For cell types specific protocols, please refer to Transfection Selection Tool.

Order:
- Plasmid Transfection Reagents
- Electroporation Instruments & Reagents

Featured Product – Lipofectamine™ LTX with PLUS™ Reagent

Our latest and most efficient Lipofectamine™ product. The best choice for transfecting plasmid DNA into standard and other difficult to transfect cell types; highest transfection efficiency and viability with superb expression for all cell types.

High transfection efficiency and high gene expression with minimal cytotoxicity in a broad range of cells
Significantly improved transfection performance in a number of primary and disease-relevant cell types
No washes or media changes required – just set up and go!

In 90% of the cell lines that we have tested, transfection performance is enhanced by using Lipofectamine™ LTX and PLUS™ Reagent together.

Learn more about Lipofectamine™ LTX with PLUS™ Reagent

15338100,15338500

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Ordering Information

Sku	Product Catalog	Size	Price	Quantity
15338-100	Lipofectamine™ LTX & Plus Reagent	1 ml	488.43 USD
15338-500	Lipofectamine™ LTX Reagent	15 ml	6592.80 USD

多功能DNA/siRNA 转染试剂说明书

发表于2024年5月1日由上海金畔生物科技有限公司

多功能DNA/siRNA 转染试剂说明书

polyplus-transfection 多功能 DNA/siRNA 转染试剂说明书

jetPRIME ^®

高DNA转染效率
核酸含量低
细胞活力
一种用于 DNA 和/或 siRNA 转染的试剂
性价比高

规格

试剂	jetPRIME ^®
分子交付	DNA, siRNA, DNA & siRNA
应用	质粒转染基因组编辑病毒生产 siRNA 转染不同核酸的共同递送
细胞类型	在血清存在下生长的贴壁细胞系
转染次数	1.5 ml jetPRIME ^®转染试剂足以在 24 孔板中进行多达 1500 次转染或在 6 孔板中进行 375 次转染
贮存	5°C ± 3°C，适当储存可稳定至少一年
提供	jetPRIME 缓冲区

概括

jetPRIME® 是一种功能强大且用途广泛的 DNA 和 siRNA 转染试剂，适用于日常实验，可产生高效可靠的科学结果。jetPRIME® 可确保在各种贴壁细胞中实现高 DNA转染效率和出色的基因沉默。jetPRIME ® 也是DNA/siRNA 共转染或多种质粒共递送的理想选择。此外，我们的 jetPRIME® 试剂对细胞非常温和，因为它在转染过程中需要少量的试剂和核酸。

订购信息

参考编号	试剂量	缓冲量
114-01	0.1毫升	5毫升
114-07	0.75 毫升	60毫升
114-15	1.5 毫升	2 x 60 毫升
114-75	5 x 1.5 毫升	10 x 60 毫升
712-60	X	60毫升

1.5 ml 足以在 6 孔板中进行约 375 次转染

描述

转染效率

jetPRIME ^®是一种适用于日常实验的强大转染试剂。它导致各种来源的转染贴壁细胞系以及原代细胞的比例异常高。

与竞争对手的试剂相比，使用 jetPRIME ^®试剂获得了 70% 至 90% 的转染效率（图 1 和图 2）。

图 1：jetPRIME 与其主要竞争对手的转染效率比较。在 24 孔板中转染后 24 小时，通过 FACS 分析在各种细胞系中评估转染效率。根据制造商对 Lipofectamine ^® 2000 和 jetPRIME ^®的推荐使用条件。

图 2：jetPRIME ^®与 Lipofectamine ^® 3000 的转染效率比较。在 96 孔板或 24 孔板中转染后 24 小时，通过 FACS 分析在各种细胞系中评估转染效率。根据制造商对 lipofectamine ^® 3000 和 jetPRIME ^®的推荐使用条件。

成本效益：更少的 DNA 和更少的试剂

jetPRIME ^® 是一种强大的体外转染试剂，需要少量试剂和质粒 DNA，因此使用起来非常经济高效 （表 1）。

表 1：推荐使用条件。根据制造商的建议，用于转染的 6 孔板中每孔 DNA 和试剂（jetPRIME ^®和竞争对手）的数量。

除了降低成本之外，使用更少的 DNA 还可以最大限度地减少转染引发的不利细胞毒性作用。因此，jetPRIME ^® 是实现高转染效率和出色细胞活力的试剂。

更好的细胞活力

jetPRIME ^® 在转染过程中对细胞极其温和，从而提高细胞活力并改善转染结果。用 jetPRIME ^®转染的细胞是健康的，而竞争者则观察到主要的细胞毒性（图 3）。

图 3：转染后 24 小时的细胞活力。根据制造商对每种试剂的建议，在转染后 24 小时对 HeLa 细胞进行相差显微镜检查。

易于使用的协议

jetPRIME ^® 是一种易于使用的转染试剂（图 4）：

快速且轻松地扩大和缩小规模
与血清和抗生素兼容

图 4：jetPRIME ^®协议。方便的 DNA、siRNA 和 DNA 和 siRNA 共转染方案。

在我们的博客部分查看我们的专家提示，以加快 DNA 转染。

应用

质粒转染

jetPRIME ^®导致各种来源的转染贴壁细胞系以及原代细胞的比例非常高（表 1）。

表 1：使用 jetPRIME ^®的各种细胞类型的转染效率。转染后 24 小时通过 FACS 分析确定 GFP 阳性细胞的百分比。

质粒是在细菌中常见的环状 DNA 小分子。质粒与染色体 DNA 分开存在和复制，并且在细菌中它们通常携带有利于细菌生存的基因。质粒可被有意引入所需细胞并用于在特定细胞系中过表达感兴趣的基因。此过程称为 DNA 转染，是研究基因功能或目标蛋白质的常用方法。

基因组编辑

CRISPR/Cas9 系统在哺乳动物细胞中的使用最近成为一种在特定位点修改细胞基因组的非常方便的方法。它涉及将 (a) 一个或多个编码 Cas9、特定 gRNA 和最终插入序列的质粒瞬时转染到哺乳动物细胞中，或 (b) 一个或两个质粒和一个 RNA 分子（gRNA）的混合物.

可用应用说明：使用 jetPRIME ^{® 进行}CRISPR/Cas9 介导的基因破坏。

siRNA转染

jetPRIME ^® 导致多种细胞系中内源基因表达的抑制率超过 90%。例如，jetPRIME ^®介导的HeLa 细胞转染与10 nM siRNA 双链体靶向HeLa 细胞中的内源性核纤层蛋白A/C 显着降低了核纤层蛋白A/C 基因的表达水平（图1）。

图 1：使用 jetPRIME ^{® 的}内源性 lamin A/C 静音。用 10 nM 的 21-mer 核纤层蛋白 A/C siRNA 转染 HeLa 细胞。48 小时后，使用抗 lamin A/C 抗体通过免疫荧光显微镜评估 lamin A/C 沉默。

不同核酸的共转染

jetPRIME ^® 非常适用于 DNA 和 siRNA/miRNA共转染实验或多种 DNA 质粒的共递送。

我们使用 jetPRIME ^®进行了 DNA 和 siRNA 递送，并在各种细胞系中观察到高效的基因沉默且毒性极低。使用 10 nM siRNA 在贴壁细胞中实现了超过 90% 的沉默（图 2）。

图 2：使用 jetPRIME ^{® 共}转染 DNA 和 siRNA 后，几种细胞系中的外源荧光素酶沉默。在 6 孔板中，每孔使用 400 ng p4CMV-Luc 和 10 nM 荧光素酶 siRNA 进行实验。

质量

每批 jetPRIME ^®试剂都通过用表达 GFP 的质粒对 HeLa 细胞进行 DNA 转染进行内部测试，并且每瓶试剂都提供分析证书。

polyplus-transfection DNA 转染试剂产品说明书

发表于2024年5月1日由上海金畔生物科技有限公司

polyplus-transfection DNA 转染试剂产品说明书

Polyplus-transfection® SA 是家生物技术公司，通过创新的核酸转染解决方案支持基因和细胞治疗、生物制剂制造和生命科学研究。Polyplus-transfection 的优势在于在制造转染解决方案方面拥有20 年的经验，并提供量身定制的科学和监管支持以加速研究。

polyplus-transfection DNA 转染试剂产品说明书

jetOPTIMUS ®

高效：在难以转染的细胞中达到最大基因表达
经济高效：使用最少的试剂量和 DNA 量
生物学相关：保持出色的细胞活力和形态
省时：使用优化的即用型方案进行转染

试剂	jetOPTIMUS ® DNA 转染试剂
分子交付	质粒DNA
应用	来自质粒 DNA 转染的瞬时和稳定基因表达 CRISPR 使用 DNA 方法进行基因组编辑
细胞类型	难以转染的贴壁哺乳动物细胞： – 原代细胞（上皮细胞、肝细胞、内皮细胞、成纤维细胞等） – 干细胞（胚胎、间充质、诱导多能细胞）- 癌细胞系
转染次数	按照标准方案，1.5 ml jetOPTIMUS ®转染试剂足以在 24 孔板中进行 3000 次转染或在 6 孔板中进行 750 次转染
贮存	5°C ± 3°C，适当储存可稳定至少一年
提供	jetOPTIMUS ®缓冲液

概括

®在您需要的细胞模型中完成您的 DNA 转染！

作为转染专家，我们知道生物学家必须使用生理相关的细胞模型。对于基因表达研究，转染是在给定细胞模型中引入感兴趣基因的技术，因为与物理技术（例如微注射、电穿孔）相比，转染具有成本效益和使用简单性。

由于不同的原因，几种类型的细胞（原代细胞、干细胞或癌细胞系）仍然难以用 DNA 转染：分裂速度慢、细胞脆弱性和细胞防御机制。为了解决当前 DNA 转染的局限性并补充我们现有的基因表达产品组合（jetPEI®、jetPRIME®、jetMESSENGER®），Polyplus-transfection® 设计了一种创新的递送纳米颗粒：jetOPTIMUS®。

jetOPTIMUS® 是一种强大的转染试剂，可改善贴壁细胞（甚至难以转染的细胞）中 DNA 的细胞摄取和内体逃逸，从而提高转染效率。为了在相关生理条件下工作，使用 jetOPTIMUS® 进行转染需要最少的 DNA 量和试剂量，以保持出色的细胞活力和形态。

订购信息

参考编号	试剂大小	缓冲区大小
117-01	0.1 毫升	10 毫升
117-07	0.75 毫升	2 x 60 毫升
117-15	1.5 毫升	4 x 60 毫升
717-60	X	60 毫升

描述

优化难转染细胞的 DNA 转染效率

jetOPTIMUS ^®是一种创新的阳离子纳米技术，旨在提高易转染和难转染细胞的 DNA 转染效率，用作体外细胞培养模型。在各种原代细胞和细胞系上进行了测试，jetOPTIMUS ^®通过达到比主要竞争对手更高的转染效率和基因表达证明了其优越性。

图 1：jetOPTIMUS ^®优于其主要竞争对手。在 24 孔板中用编码 GFP 蛋白的质粒转染 24 小时后，通过 FACS 分析在各种细胞系中评估转染效率。根据制造商对 Lipofectamine ^® 3000 和 jetOPTIMUS ^®的建议设置条件。

先进的纳米技术：使用更少的材料实现基因表达！

jetOPTIMUS ^{® 的}开发旨在提高对多种细胞类型的转染效率，同时保持尽可能低的 DNA 量，并与主要竞争对手相比减少所需的试剂量。因此，科学家可以增加转染次数并将每次反应的成本降低多达七倍（表 1）。

表 1：在 24 孔板中，与 Lipofectamine ^® 3000相比，所需的 jetOPTIMUS ^®体积更小。

出色的细胞活力和形态

达到高转染效率通常以细胞完整性为代价，对细胞周期、代谢和信号通路产生不利影响。在 Polyplus-transfection，我们对细胞完整性不做任何妥协：jetOPTIMUS ^®转染试剂对细胞温和，允许从基因表达研究中生成生物学相关数据。

图 2：细胞在转染后 24 小时保持健康并保持良好的形态。根据制造商对每种试剂的建议，用编码 GFP 蛋白的质粒转染 24 小时后，对 MDCK 和 VERO 细胞进行相差显微镜检查。

优化的转染方案

jetOPTIMUS ^®是一种即用型转染试剂，自带复合缓冲液（jetOPTIMUS ^® Buffer）。该方案针对使用简单（所有板尺寸）、培养基兼容性（抗生素、血清）和成本效益（DNA 量和试剂量）进行了优化。

图 3：24 孔板中用于 DNA 转染的 jetOPTIMUS ^®方案的简单性。

应用

DNA转染

CRISPR基因组编辑

病毒生产

jetOPTIMUS ^®转染试剂对于在有血清的经典培养基（如 DMEM）中生长的贴壁细胞中 AAV 和慢病毒的常规病毒生产非常有效。

每批 jetOPTIMUS ^®都按照标准方案在 HeLa 细胞中通过 DNA 转染进行内部测试。每批将提供分析证书。

Polyplus-transfection ^®自 2002 年起获得 ISO 9001 质量管理体系认证；这一级别的认证向全球客户保证，供应商已为产品开发、制造、销售和客户支持建立了可靠且有效的流程

polyplus-专业转染试剂供应商

发表于2024年4月30日由上海金畔生物科技有限公司

polyplus-专业转染试剂供应商

PolyPlus-transfection是一家专业的转染试剂研发和生产的生物技术公司，拥有20年的的转染试剂研发经验，通过创新的核酸转染解决方案支持基因和细胞治疗、生物制剂制造和生命科学研究。目前已经通过了ISO 9001: 2000质量体系认证，已经开发了一系列的转染试剂，包括DNA、siRNA及其他寡核苷酸、蛋白和多肽转染。高效率、低毒性、操作简便和高性价比的产品受到广大科研工作者喜爱，广泛应用于基因功能研究、蛋白生产、病毒包装和动物模型的构建。

主要产品线

一、用于基因和细胞治疗的病毒载体：基因和细胞治疗依赖于使用修饰病毒作为载体，将基因转移到细胞中。

二、非病毒载体的体内递送试剂：非病毒体内递送试剂是用于核酸递送的病毒载体的zui强大的替代品。在基于核酸的治疗的可靠性、安全性和成本方面具有显著优势。不同质量等级的体内转染试剂可用于验证基础研究、临床前研究和临床试验。

三、基础生命科学转染试剂：用于对各种贴壁和悬浮哺乳动物细胞类型、原代和细胞系核酸递送。

四、蛋白生产：专用于为CHO和HEK-293细胞在无血清合成培养基中进行蛋白质生产。

polyplus-transfection部分产品

品牌	产品名称	货号	规格
polyplus-transfection	jetPRIME^® 1.5 mL	101000046	1.5 mL
polyplus-transfection	jetPRIME	114-15	1.5 mL
polyplus-transfection	（409-10）INTERFERin 1 mL	100100028	1 mL
polyplus-transfection	jetPRIME kit	PT-114-15	1.5 mL
polyplus-transfection	in vivo-jetPEI^® 0.1 mL	101000040	0.1 mL
polyplus-transfection	FectoPRO	116-010	10 mL
polyplus-transfection	INTERFERin	PT-409-10	1 mL
polyplus-transfection	in vivo-jetPEI^® 0.5 mL	101000030	0.5 mL
polyplus-transfection	PEIpro	PT-115-010	10 mL
polyplus-transfection	jetPEI	101000053	1 mL
polyplus-transfection	in vivo-jetPEI	201-10G	0.1 mL
polyplus-transfection	(115-0015)PEIpro 1.5 mL	101000017	1.5 mL
polyplus-transfection	(115-100)PEIpro 100 mL	101000026	100 mL
polyplus-transfection	INTERFERin^®	409-10	1 mL
polyplus-transfection	PULSin	PT-501-04	0.4 mL
polyplus-transfection	(116-001)FectoPRO 1 mL	101000014	1 mL
polyplus-transfection	（117-01）jetOPTIMUS 0.1 mL	101000051	0.1 mL
polyplus-transfection	（114-01）jetPRIME^® 0.1 mL	101000027	0.1 mL
polyplus-transfection	（117-15）jetOPTIMUS 1.5 mL	101000006	1.5 mL
polyplus-transfection	jetPEI-Macrophage	PT-103-05N	0.5 mL
polyplus-transfection	jetMESSENGER 0.1 mL	101000056	0.1 mL
polyplus-transfection	in vivo-jetPEI	201-50G	0.5 mL
polyplus-transfection	(115-010)PEIpro 10 mL	101000033	10 mL
polyplus-transfection	FectoPRO^® Reagent	116-001	1 mL
polyplus-transfection	in vivo-jetRNA transfection reagent	204-03	0.3 mL

作为polyplus-transfection在中国区域的经销商，上海金畔生物科技有限公司将为中国客户提供全面的polyplus-transfection的产品。

GMP资质级别转染试剂——现货

发表于2024年4月30日由上海金畔生物科技有限公司

GMP资质级别转染试剂——现货

GMP资质级别转染试剂——现货，

GMP资质级别转染试剂，转染效率高，按照符合GMP认证管理体系下，采用药用规格原辅料生产，所用起始材料及所需化学品和配制过程均在无菌环境中操作进行，以确保制造过程中每个步骤的特性、效力、纯度和安全性的一致性。

产品编号:

78EF10003

运输条件:

常温

存储条件:

4度干燥储存

有效期:

1年

货期:

现货

关键词:

GMP PEI 线性聚乙烯亚胺 125-01L

货号	规格	价格

78EF10003-1L	1L	询价
78EF10003-5ml	5ml	询价

基本信息 Jinpan Polyethyleneimine PEI PRO(GMP)是GMP级别转染试剂，本制品利用Jinpan公司生产的线性阳离子聚合物,按照符合GMP认证管理体系下，采用药用规格原辅料生产，所用起始材料及所需化学品和配制过程均在无菌环境中操作进行，以确保制造过程中每个步骤的特性、效力、纯度和安全性的一致性。并严格控制重金属残留、细菌内毒素残留等，生产工艺符合 GMP 规范的产品生产与质量管理规程，保障生产过程及所有原辅料可追溯。

PH值检测通过中国药典 2020 版第四部 pH 值测定法(通则 0631)
检测遵循《人用基因治疗总论-中国药典 2020》国家药典委。
检测遵循USP Chapter <1043>, Ancillary Materials for Cell, Gene, and Tissue-Engineered Products 用于细胞治疗，基因治疗和组织工程产品中的辅料。
细菌内毒素检测符合中国药典2015版四部通则（1143）方法2光度测试法（动态浊度法）
重金属残留检测符合国药典 2020 版第四部重金属检查法(通则 0821)
支原体检测使用支原体检测试剂盒

质量信息表

产品特点 Jinpan-PRO GMP在 HEK293和CHO大多数表达系统中,Jinpan-PRO GMP 都能提供稳定的高表达（96 孔板至 100L 生物反应器）。现在每年有更多的研究人员和公司选择使用 Jinpan-PRO GMP 进行细胞转染.。

GMP级别定制监管，支持并满足合规要求。
不含动物源性成分。
严格遵循以下规范生产 1. ISO 9001:2015, certified facility。
严格按照《GMP 附录-细胞治疗产品》国家药品监督管理局。
从工艺开发到临床试验和商业化的无缝过渡生产细胞系（HEK-293 和衍生物、VERO 等的最高病毒产量。

操作方法参考

一、贴壁细胞转染以 6 孔板转染 293T 细胞为例：

（一）转染前准备

1) 转染前一天：用胶原酶（WORTHINGTONG 公司 LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。按照每孔2×10 6的细胞量接种293T 至 6 孔板(每孔加入 2ml 新鲜的 DMEM:F12+5%FBS *培养基和 1ml 的细胞悬液)置于 37°C,5%CO2培养箱培养 24h。

2) 24h 后,移除之前培养基，每孔加入 2ml 新鲜的 DMEM:F12+5%FBS。注意：确保 293T 细胞生长状态良好传代不超过 15 代。

（二）转染过程

3) 第一天：显微镜下检查细胞汇合度，当细胞达到 70%到 80%的汇合度时，开始准备转染。

4) 对于每孔细胞，用 100µl 无血清培养基（如 OPTI-MEMⅠ培养基）稀释 DNA 使 DNA 终浓度为 1ug/ml（DNA/总培养体积）。

5) 对于每孔细胞，用 100μL 无血清培养基（如 OPTI-MEMⅠ培养基）稀释适当比例的适量 Jinpan-PRO GMP 。DNA:Jinpan-PRO GMP 的比例要依据自己实验摸索最适比例。

6) 将稀释的 Jinpan-PRO GMP转染试剂加入到稀释的质粒中（总体积 200µL）轻轻混匀，室温孵育 30 分钟。

7) 小心地将 Jinpan-PRO GMP复合物滴加到细胞培养板每个孔中，轻轻摇动培养板混匀。注意加入混合液时轻轻沿着孔板边缘滴入，而不是在细胞的顶部以免破坏细胞的粘附性。

8) 将培养板放入 37°C，5%CO2培养箱培养中培养 24h。

（三）观察转染结果

9) 第二天：在荧光显微镜下观察细胞转染效率，通常超过 80%的 293T 细胞在转染后的 24h 可以观察到绿色荧光。小贴士 :建议进行不同基因转染时应对 Jinpan-PRO GMP 和 DNA 的比例进行优化，以达到最适比例，通常筛选范围在 1:1 到 1:3 之间。如果之前用过进口品牌的 PEI，用Jinpan-PRO GMP时应适当降低使用浓度。

通常情况下，分别准备Jinpan-PRO GMP GMP和 DNA 转染溶液时其体积一般是转染前每孔细胞培养液体积总量的 1/10-1/20，如细胞培养液体积为 3ml，则稀释Jinpan-PRO GMPI及 DNA 的体积为150ul。质粒 DNA 的浓度通常为 1ug/ml（DNA 质量/细胞培养总体积）[1][4]。不同质粒种类以及大小会影响转染效率，如较大片段插入质粒可能转染效率低，可根据实际实验需要调整，如适当增加转染质粒总量等。 HEK293 GnTI 细胞重悬浮可用枪头或移液管反复吹打，但 CHO-S 细胞的粘附性比较强重悬浮时需要借助细胞刮刀。一般建议用胶原酶消化细胞，如果表达的是膜蛋白，胰酶消化细胞可能会降低蛋白表达，建议用胶原酶消化细胞，我们推荐用(LS004196，WORTHINGTONG)的胶原酶。对于贴壁性低的细胞系，可用明胶或鼠尾胶铺板，增加细胞与培养皿之间的粘附性。一旦确定了细胞类型、培养基和78BioPEI GMP与 DNA 的最佳比例，就可以在转染后 24 至 96 小时内多次观察转染效率，以优化最大表达量时间点。

二、悬浮细胞转染

离心对数期生长的细胞用新鲜的培养基重悬浮使细胞密度达到 1×10 6cells/mL 小规模转染时，如需大规模转染细胞密度要到达 2-3×10 6cellsml/mL，可参考文献[4]。以 293F 细胞于 100mL 培养瓶（溶液体积占瓶体积的 1/5）操作体系举例如下：（一）转染前准备 1) HEK293F 细胞传代接种于 20mL 悬浮细胞生长培养基中(36.5℃，120rpm，5%CO2 )的条件下培养。当细胞密度到 1X10 6cells/mL，然后旋紧瓶口放入摇床继续培养，2~4 小时后可以进行转染。（二）转染过程 2) 用 1mlOptiPRO™SFM(无血清培养基)稀释适量的 DNA，使 DNA 终浓度为 1ug/ml（DNA/总培养体积）。混匀并静置 5min。 3) 用1mlOptiPRO™SFM(无血清培养基)稀释适当比例的Jinpan-PRO GMP，混匀并静置 10min。（78BioPEI：DNA 参考比例范围，可参考上述贴壁细胞Jinpan-PRO GMP和 DNA 优化方案优化）。 4) 将Jinpan-PRO GMP转染试剂加入到稀释的质粒中轻轻混匀，室温孵育 30 分钟。 5) 将Jinpan-PRO GMP转染复合物逐滴加入到细胞培养液中，摇匀后旋紧瓶口放回摇床（36.5℃，5%CO2，120rpm）。 6) 基因表达可在 24-72 小时后检测，具体时间取决于细胞系和转基因. 小贴士:在悬浮培养中，单个细胞的转染效率要高于聚集在一起的细胞，需要优化适合单细胞的生长条件。方形瓶应经过两个连续的干燥循环高压灭菌（每个 45 分钟，干燥 15 分钟）盖子应尽可能松，不得脱落。应该让它们冷却拧紧盖子前，将其*放入层流罩中。如果瓶子向内塌陷，细胞将无法正常生长。如果要获得更多的蛋白产量，有参考文献表明转染后 24 小时，可以适当稀释细胞，稀释比例参考范围（1:2—1:5）之间，可以增加蛋白产量，稀释效应与最佳稀释比率应根据经验确定, 可以把 DNA 和Jinpan-PRO GMP 转染试剂直接加入到细胞悬液中进行转染，但必须经过上述特定流程的 DNA 和转染试剂的比例和用量的相应优化。

注意事项

不同质粒种类以及大小会影响转染效率，可如较大片段插入质粒可能转染效率低，可根据实际实验需要调整，如适当增加转染质粒总量等。
细胞状态及代数会较大程度影响转染。刚复苏细胞需传代2-3次以上，待细胞生长稳定后做转染实验。为保证实验稳定性，转染细胞尽量选择20代以内进行实验。
对于贴壁性低的细胞系，可用明胶或鼠尾胶铺板，增加细胞与培养皿之间的粘附性。
初次使用应优化DNA浓度和 Jinpan-PRO GMP试剂量以得到最大的转染效率。 DNA 和转染试剂的比例，通常推荐是1:2-1:3，通过调整DNA/Jinpan-PRO GMP转染试剂比例优化转染效率，调整范围DNA（μg）:Jinpan-PRO GMP（μL）比值在1：0.5-1：5。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

altogen Neuro-2a转染试剂盒说明书

发表于2024年4月27日由上海金畔生物科技有限公司

altogen Neuro-2a转染试剂盒说明书

Altogen Biosystems是一家生命科学公司，生产100多种细胞类型特异性和预先优化的转染试剂盒，电穿孔缓冲液以及靶向体内递送试剂盒和试剂。先进的试剂配方和优化的转染方案可提供高效的细胞内生物分子递送（蛋白质，DNA，mRNA，shRNA和siRNA，以及小分子化合物）。在Altogen的转染资源上了解有关转染技术的更多信息。

altogen Neuro-2a转染试剂盒说明书

Neuro-2a转染试剂盒（神经母细胞瘤，CCL-131）

$ 309.00 – $ 1,657.00

套件尺寸体积	价格
0.5 ml（目录号＃6872）	$ 309.00
1.5毫升（样本＃6873）	$ 619.00
1.5 ml CRISPR（目录号2184）	$ 819.00
8.0毫升（目录号7703）	$ 1,657.00

Neuro-2a细胞转染试剂（神经母细胞瘤细胞，CCL-131）

专有的阳离子脂质制剂
有效而强大的细胞内递送
试剂盒包括转染增强剂和复杂冷凝器试剂
产生一致的结果，批次间，板对板和孔对孔
用于建立稳定细胞系的成熟试剂
下载Neuro2a体外转染方案：[ PDF ]
下载 Neuro2a CRISPR / Cas9转染方案：[ PDF ]
下载PowerPoint演示文稿的Neuro2a细胞转染试剂盒：[ PPT ]
UPC / GTIN / EAN：860002089792
品牌：ALTOGEN®，由Altogen Biosystems开发和制造

转染效率：

试剂表现出至少71％的siRNA转移转染效率。转染效率通过RT-PCR确定。

转染协议和MSDS：

下载Altogen生物具有Neuro2a转染协议：[ PDF ]

下载MSDS：[ PDF ]

Neuro-2a细胞系：

神经母细胞瘤是儿童中最常见的颅外实体瘤，大约一半的患者会发生骨转移并伴有骨痛，导致受影响者的预后较差。Neuro-2a细胞系是由患有神经母细胞瘤的白化病家鼠（小家鼠）的脑组织建立的。这些细胞表现出神经元和变形虫干细胞的形态，使其在科学研究中具有*的用途。另外，Neuro-2a细胞系对单纯疱疹病毒，人脊髓灰质炎病毒1和水泡性口腔炎病毒敏感。已知Neuro-2a细胞会产生大量的微管蛋白。Neuro-2a细胞由于其神经元和变形虫的形态而成为可靠的转染宿主。Altogen Biosystems提供体外转染试剂，可提供令人满意的结果，

数据：

图1.通过RT-PCR确定在按照推荐的转染方案转染了亲环蛋白B siRNA或非沉默siRNA对照的Neuro2a细胞中，亲环蛋白B的沉默效率。转染后48小时测量亲环素mRNA表达水平。18S rRNA水平用于归一化亲环蛋白B数据。值针对未经处理的样品进行标准化。数据表示为平均值±SD（n = 6）。

图2.亲环素B在Neuro-2a细胞中的蛋白表达。按照Altogen Biosystems转染方案，将表达Cyclophilin B或靶向Cyclophilin B的siRNA的DNA质粒转染到Neuro-2a细胞中。转染后72小时，通过蛋白质印迹法分析细胞的蛋白表达水平（按总蛋白归一化，每个孔上样总蛋白10 µg）。未经处理的细胞用作阴性对照。

synvoluxproducts蛋白质和多肽转染试剂简介

发表于2024年4月26日由上海金畔生物科技有限公司

synvoluxproducts蛋白质和多肽转染试剂简介

Synvolux 是一家位于荷兰莱顿的独立公司，致力于开发、制造和销售高效转染试剂。其专有的递送技术 (SAINT™) 基于非病毒、*合成的脂质结构。这些化合物已被证明是无毒的，并且在体外和体内广泛适用于大分子化合物如 DNA、RNA 和蛋白质/肽的高效细胞内递送。

synvoluxproducts蛋白质和多肽转染试剂简介

蛋白质和多肽转染试剂

SAINT-Protein

SP-3004-01

179 欧元

1 毫升：1x 1 毫升 SAINT 蛋白
SP-3004-02

335 欧元

2 毫升：2x 1 毫升 SAINT 蛋白
SP-3004-04

569 欧元

4 毫升：4x 1 毫升 SAINT 蛋白
SP-3004-12

1529 欧元

12 毫升：1x 12 毫升 SAINT 蛋白

蛋白转染试剂 SAINT-Protein

SAINT-PhD 的改进的、与 PBS 兼容的版本
快速简便的协议
效率高达 98%
低毒
全合成转染试剂
不含动物源性成分

SAINT-Protein 转染试剂是全合成脂质的专有配方，与蛋白质和肽非共价结合，从而形成带正电荷的复合物，可被细胞有效吸收。可以用 SAINT-Protein 转染多种哺乳动物细胞（例如 CHO-K1、COS-7、HUVEC、树突状细胞和真皮成纤维细胞），一些细胞系的效率高达 98%。使用 SAINT-Protein 的转染过程既快速又简单：只需将试剂与您感兴趣的蛋白质或肽在 PBS 中混合，短暂孵育，然后将复合物移液到您的细胞上。SAINT-Protein 转染试剂 (1 ml) 足以在 24 孔板中进行多达 50 次转染或在 96 孔板中进行多达 250 次转染。

产品的保质期

SAINT-Protein 在 4°-7°C 下储存，开封后至少可稳定保存一年。

synvoluxproducts RNA转染试剂说明书

发表于2024年4月26日由上海金畔生物科技有限公司

synvoluxproducts RNA转染试剂说明书

synvoluxproducts RNA转染试剂说明书

RNA转染试剂

sRNA

SR-2003-01

199 欧元

1 毫升：1x 1 毫升 SAINT-sRNA
SR-2003-02

362 欧元

2 毫升：2x 1 毫升 SAINT-sRNA
SR-2003-04

649 欧元

4 毫升：4x 1 毫升 SAINT-sRNA
SR-2003-12

1699 欧元

12 毫升：1x 12 毫升 SAINT-sRNA

SAINT-RED 的改进的、与 PBS 兼容的版本
快速简便的协议
使用低 siRNA 浓度进行高效转染
低毒
血清兼容
全合成转染试剂
无 RNase 生产
适用于高通量筛选

SAINT-sRNA 转染试剂是一种专有的无毒配方，由全合成的阳离子和中性脂质组成，可与小 RNA（如 siRNA 和 miRNA 模拟物或抑制剂）形成带正电荷的复合物，并能够将小 RNA 高效输送到多种哺乳动物细胞系。有效下调靶基因需要最少量的 siRNA。使用 SAINT-sRNA 的转染过程很简单：只需将试剂与您的 siRNA 或 miRNA 混合，孵育并将复合物移液到您的细胞上。SAINT-sRNA 转染试剂 (1 ml) 足以在 24 孔板中进行多达 200 次转染或在 96 孔板中进行多达 1000 次转染。

产品的保质期

SAINT-sRNA 在 4°-7°C 下储存，开封后至少可稳定保存一年。

仅供研究使用。不用于诊断过程。

高效转染试剂说明书

发表于2024年4月23日由上海金畔生物科技有限公司

Jinpan高效转染试剂说明书

Jinpan高效转染试剂说明书

产品详情

货号	规格	价格
78EF10001-1ML	1ml	2500
78EF10001-1ML*15	1ml*15	19800

基本信息

存储

本转染试剂在4℃可保存至少2年。

特点

1. 转染效率高，可用于绝大部分细胞的转染。

2. 即可用于贴壁细胞的转染，也可用于悬浮细胞的转染。

3. 培养液中的血清和抗生素不会影响转染的效率。

4. 对细胞的毒性极低。

5. 操作简单、重复性好。

6. 本转染试剂非常适合用于腺病毒和慢病毒的包装。

7. 与进口转染试剂相比，价格相对较低，性价比高。

配置方法

1、细胞铺板：

转染前18-24小时进行细胞的铺板，以便在转染时，贴壁细胞的密度大约在80%左右。

注：培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。

2 、Jinpan-DNA复合物的制备和转染的具体方法：

转染前将所有试剂置于室温10分钟。下面，以转染35 mm培养皿为例，说明转染的具体方法（如果在别的培养器皿中进行转染，各试剂的使用量见表1）：

（1）在转染前30-60分钟，将培养液更换成含血清和抗生素的新鲜培养液。

（2）将1 μg 质粒DNA稀释到50 μL无血清的高糖DMEM，用移液枪吹吸3-4次。

（3）将3 μL Jinpan转染试剂稀释到50 μL无血清的高糖DMEM，用移液枪吹吸3-4次。

（4）将稀释好的Jinpan转染试剂一次性全部加入到已稀释好的质粒DNA中，立即用移液枪吹吸3-4次。

注：此混合的顺序不能反向进行！

（5）室温放置10-15分钟，以形成Jinpan-DNA复合物。

（6）将上述100 μL Jinpan-DNA转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿，让Jinpan-DNA复合物分散均匀。

（7）转染后12-18小时，去除含Jinpan-DNA复合物的培养液，加入含血清和抗生素的新鲜培养液。

（8） 24-48小时后检测转染的效率。

注意事项

注：不能使用含血清的培养基（包括Opti-MEM）进行DNA和Jinpan转染试剂的稀释！因为Jinpan-DNA转染复合物的形成过程不能含有血清。

产品背景

本公司开发的HighMax高效转染试剂，是新一代的DNA转染技术，可用于各种真核细胞系的DNA转染，如HEK293、CHO、COS、NIH3T3等。此外，本试剂也可用于悬浮细胞（如淋巴细胞、昆虫细胞等）的转染。

产品反馈

图1. Jinpan转染HEK293的效果（GFP），转染效率大约为60-80%。

脂质体转染试剂 6G说明书

发表于2024年4月23日由上海金畔生物科技有限公司

脂质体转染试剂 6G说明书

脂质体转染试剂 6G说明书

产品详情

货号	规格	价格
78EF10001-1ML	1ml	2500
78EF10001-1ML*15	1ml*15	19800

产品描述

脂质体转染试剂 6G，是一种新型多功能的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA和RNA)转染入真核细胞，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响转染效率的优点。经证明可以将各种有效载荷有效地转染到各种贴壁和悬浮细胞系中。研究人员将 Lipofectamine 6G 试剂用于质粒 DNA 转染以及基于 siRNA 和 shRNA 的基因敲除实验、基因表达研究。

产品优势

采用Lipofectamine 6G试剂，您可以实现：

• 在各种细胞系中具有的高转染效率和高重组蛋白表达水平

• 出众的siRNA和质粒DNA共转染性能

• 在血清存在时亦具有可靠的转染效率 – 转染后无需更换培养基

• 适用于高通量应用的可靠性能

• 适用于基因表达和基因沉默的高性能转染试剂

• 超高的性价比，为您节省更多的实验经费。

如下市场实际数据反馈，我们的价格具有较好的优势,且拥有更高的品质效果（具体参考反馈图）。

11668030 Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent 0.75 mL 3399

11668019 Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent 1.5 mL 5673 78EF10001-1ml 2500

11668500 Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent 15mL 48393 78EF10001-15ml 19800

运输及保存方法

2-4℃保存，有效期⼀年。（避免冷冻）

产品应用及说明

质粒DNA的转染

对大多数细胞来说，DNA(µg)与Lipofectamine 6G (µl)的比例为1:2~1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平，并能减少细胞毒性。

1. 以24孔板为例

贴壁细胞：转染前一天，用500 µl不含抗生素的培养基接种0.5～2×105细胞，使之第二天能达到70-90%汇合。

悬浮细胞：在准备Lipofectamine 6G复合物之前，用500 µl不含抗生素的培养基接种4～8×105细胞即可。

2. 对每个转染样品，进行以下操作

a. 在eppendorf管里分别加入50 µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA轻柔混匀，制成DNA稀释液。

b. 在另一个eppendorf管里分别加入50µl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 µl Lipofectamine 6G (注意用前先混匀)，轻柔混匀，制成Lipofectamine 6G 稀释液，室温静置5分钟。

c. 将DNA稀释液和Lipofectamine 6G稀释液混合,轻柔混匀,室温静置20分钟,形成Lipofectamine 6G复合物。Lipofectamine 6G复合物在室温下可稳定存在6小时。

3. 将Lipofectamine 6G复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复合物分散均匀。

4. 在37℃ CO2培养箱中培养4-6小时后更换培养基,继续培养18～48小时。

5. 如果要筛选稳定细胞株，则在转染24小时后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中，第二天加入选择性培养基进行筛选。

备注：质粒DNA转染的优化为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对DNA和Lipofectamine 6G的比例以及细胞密度进行优化，一般在1:0.5~1:5的范围内优化DNA (µg)和Lipofectamine 6G (µl) 的比例。

不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及Lipofectamine 6G用量

Lipofectamine 6G用于不同细胞转染时用量参考（以96孔板为例）

产品反馈

Lipofectamine 6G适用细胞系及实际反馈图

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

POLYPEI转染试剂说明书

发表于2024年4月23日由上海金畔生物科技有限公司

POLYPEI转染试剂说明书

POLYPEI转染试剂说明书

产品详情

货号	规格	价格
78EF10004-1ml	1ml	950.00
78EF10004-5ml	5ml	3200.00

产品描述

细胞转染是指将外源分子导入真核细胞内以改变其基因型或表型的一种技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制基因功能的常规手段，广泛应用于基因功能研究、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等领域。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。其中化学介导方法因其兼具高效低毒、方便快捷等优点，应用广泛。化学介导方法包括经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法以及多种阳离子物质介导的转染方法。

理想的细胞转染方法应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。已有众多文献报道，脂质体本身会参与细胞生理活动，影响基因表达，对研究数据产生一定程度的干扰。同时，脂质体会对目的细胞造成细胞毒性，这种毒性是由其脂质特性决定的。市面上多种商业化的脂质体转染试剂要求细胞铺板密度较高，以90%-95%为佳，这有助于减少阳离子脂质体细胞毒性造成的影响。但是，如果研究的基因要求比较长的表达时间，例如细胞周期相关基因，或者细胞表面蛋白，又或者转染后续需要进行继续培养和功能研究，则不适合用脂质体核酸转染试剂。目前众多的研究者和生物公司将新一代转染试剂的开发聚焦在非脂质体的聚合物上，以寻找更高效低毒，同时对研究影响较小的转染试剂。

PolyShooter^TM Transfection Reagent是一种基于阳离子高分子聚合物的新型转染试剂，适用于DNA、RNA的转染。其原理为带正电的高分子聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后，与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞，随后在胞质中释放，实现外源核酸的细胞转染。

PolyShooter^TM Transfection Reagent对多种常见细胞具有高水平转染效率，具有高效低毒、操作简单、重复性好等优点。其配方使其可直接加入培养基中，血清的存在不会影响转染效率，这样可以减少去除血清对细胞的损伤。同时，转染后不需要除去PolyShooter^TMTransfection Reagent-核酸复合物或更换新鲜培养基，也可根据具体情况优化转染体系。

产品特点

1.转染效率好——针对广泛类型的细胞，均表现出的转染效率和高重组蛋白表达水平

2.细胞毒性低——作用温和，能较好地实现高转染效率与低细胞毒性之间的平衡

3.操作简单——在血清存在时亦具有可靠的转染效率，转染后无需去除复合物或更换新鲜培养基

4.高性价比——经济的价格，同时实现高效的转染效果

PolyShooter^TMTransfection Reagent采用阳离子高分子聚合物为主要成分，适用于DNA、RNA的转染。

使用方法

（以24孔板为例，其他培养板加样体积参考表一：转染量度标准）

1: 准备待转染细胞

贴壁细胞：转染前一天，将胰酶消化后的细胞按照每孔0.5-1.5×10⁵个细胞的量进行铺板，使其在转染时密度为50%左右。

悬浮细胞：转染当天，配制转染试剂-核酸复合物之前，在24孔板中进行细胞铺板，每500 µL生长培养基中加入1-3×10⁵个细胞。

Ø 细胞状态会极大影响转染效率，待转染细胞应处于良好生长状态，建议使用生长处于指数期、存活率大于90% 的细胞进行转染。

2: 准备PolyShooter^TM转染试剂-核酸复合物

（1）取1 μg质粒加入到1.5 mL离心管中，加入2.5 μL* PolyShooter^TM转染试剂与质粒混合，室温孵育3分钟。

Ø * 转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，通常情况下，DNA（μg）和 PolyShooter^TM转染试剂（μL）的用量比例为1：2.5。建议初次使用时，可在1：2-1：5的范围内调整以优化转染效果。

（2）往上述混合物中加入100 μL无血清基础培养基（与培养体系一致，且无血清无双抗），轻轻混匀，在室温下静置30分钟，形成PolyShooter^TM转染试剂-核酸复合物。

Ø PolyShooter^TM转染试剂-核酸复合物在室温下4个小时内保持稳定。

3: 细胞转染

给细胞更换新鲜的预热的Complete medium 500 μL/孔，将上述100 µL PolyShooter^TM 转染试剂-核酸复合物加入每孔细胞，轻轻摇动培养板混匀。

Ø 对于悬浮细胞系：转染5小时后，可选择加入PMA和/或PHA以提高CVM启动子的活性并促进基因表达。对于Jurkat细胞，PHA和PMA的终浓度分别为1 µg/mL和50 ng/mL，可以提高CMV启动子活性和基因表达。对于K562细胞，只加入PMA足以提高启动子活性。

4. 分析转染细胞

转染细胞培养24-48小时后，可根据实际情况用荧光检测法、Western Blot、RT-PCR、ELISA、流式细胞术、报告基因等检测转染效果，或加入筛选药物进行稳定细胞株的筛选。

表一：转染量度标准

细胞培养装置	生长培养基体积（mL）	质粒（μg）	PolyShooterTM转染试剂（μL）	无血清基础培养基体积（μL）
96孔板	0.1	0.2	0.5	20
24孔板	0.5	1	2.5	100
12孔板	1	2	5	200
6孔板	2	2-4	5-10	400
60 mm培养皿	4	3-5	7.5-12.5	800
100 mm培养皿	10	5-10	12.5-25	2000
125 mL摇瓶	30-35	30-35	75-87.5	6000
500 mL摇瓶	120-140	120-140	300-350	24000
1000 mL摇瓶	240-280	240-280	600-700	48000

实验案例分析

09/实验案例分析

1: 转染前一天，将图2所示9种状态良好的细胞接种于24孔板，使其在转染时密度约为50%。

2: 按照每孔计量，取1μg GFP质粒加入到1.5 mL离心管中，加入2.5 μL PolyShooter^TMTransfection Reagent与质粒混合，室温孵育3 min后，往混合物

加入100 μL无血清基础DMEM培养基，轻轻混匀，在室温下静置30 min，形成PolyShooter^TM转染试剂-核酸复合物。

3: 给细胞更换新鲜的预热的Complete medium 500 μL/孔，将上述100 µL PolyShooter^TM 转染试剂-核酸复合物加入每孔细胞，轻轻摇动培养板混匀。

4：转染细胞培养48小时后，用荧光显微镜检测GFP绿色荧光蛋白表达情况，并拍照记录，实验结果如图2所示。

图2: 转染细胞培养48小时后，用荧光显微镜检测GFP绿色荧光蛋白表达情况

注意事项

1. 核酸质量：想要获得最高的转染效率和较低的细胞毒性，应选用高纯度、无菌、无污染、无内毒素的优质核酸。质粒中的内毒素是转染的大敌，内毒素会导致转染效率显著下降，特别是对内毒素敏感的细胞，例如原代细胞、悬浮细胞、造血细胞等。推荐使用无内毒素质粒抽提试剂盒进行质粒提取，保证质粒A₂₆₀/A₂₈₀比值为1.8-2.0。同时，需合理计算质粒用量，转染过量的质粒可能会导致细胞毒性甚至死亡；

2. 细胞质量：细胞状态会极大影响转染效率，建议使用生长处于指数期、存活率大于90%的细胞进行转染；

3. 细胞密度：建议细胞传代后12-24 h内、细胞密度约为50%时进行转染。不同的细胞转染实验，对细胞密度的要求不尽相同。在进行不同核酸或不同细胞系的转染时，需要根据说明书再次优化实验条件。此外，在实验过程中保证相同的接种条件，确保实验数据的可重复性；

4. 质粒与转染试剂使用比例：对于大多数细胞系，转染复合物中DNA (μg)与PolyShooter^TM Transfection Reagent (μL) 的比例在1：2至1：5之间，推荐比例为1:2.5。想要获得好的转染结果，需要对这一比例进行优化，根据所转染细胞及质粒选择适合的转染比例；

5. PolyShooter^TM Transfection Reagent可用于有血清培养基的转染，并且转染前后不需要换培养基。但是，制备转染复合物时要求用无血清基础培养基稀释DNA和转染试剂，因为血清会影响复合物的形成；

6. 由于一些特殊培养基中的某些成分可能会抑制阳离子聚合物介导的转染，因此有必要检测特殊培养基与PolyShooter^TM Transfection Reagent的相容性；

7. 为了您的健康安全，请规范操作，穿戴实验服与手套开展实验；

8. 本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及治疗。

运输及保存方法

冰袋（wet ice）运输。4℃保存，有效期6个月。-30℃至-10℃保存，有效期12个月，避免反复冻融。

Baseclick mRNA转染试剂盒

发表于2024年4月21日由上海金畔生物科技有限公司

Baseclick mRNA转染试剂盒

Baseclick由巴斯夫风险投资公司和LMU慕尼黑于2008年成立，此后为的公司，实验室和科研机构提供了用于生命科学和点击试剂的高质量产品。我们位于德国慕尼黑附近。

Baseclick是您生命科学创新解决方案的专家。我们提供基于点击化学的产品，可对核酸进行高效，灵敏和模块化的标记。当前的应用领域包括：

核酸标记的创新技术
无论您要使用EdU细胞增殖测定，PCR标记试剂盒，FISH探针，（高度）修饰的寡核苷酸，还是仅用于点击化学的试剂，baseclick都是要引用的地址。凭借基于点击化学的专有方法，Baseclick提供了市场上有效，可靠的标签技术。除了提供成功完成点击反应的化学药品和试剂盒外，我们将很高兴为您的研发提供支持。自发现这一点以来，

我们一直致力于核酸点击化学修饰领域

高性能技术，我们的使命不仅是推进基于DNA的技术的研究，而且是大程度地降低客户成本并提供高质量的产品。
我们在这一领域的专业知识已导致与制药，生命科学和生物技术领域的*公司以及学术实验室进行研发合作。

质量管理
我们致力于在高质量原则下经营我们的公司，因此坚持遵循符合标准ISO9001：2015 的质量管理体系的纪律和控制。当然，提供不妥协的质量还取决于我们的诚实反馈客户，我们非常感谢您为此以及您一直以来的支持与合作。
尽管我们已经通过ISO认证以及我们的经营理念和道德标准来正确执行质量标准，但我们仍在不断根据我们的信条进一步改善我们的产品和服务：我们相信质量并提供相同的

Baseclick mRNA转染试剂盒

BCK-transfect

-15％*

BCK转染

1套

仅供研究使用！

文本：

对于10种单独的mRNA 体外转染

，mRNA Transfection Kit设计用于使用少量的mRNA和试剂在各种哺乳动物细胞系中递送mRNA。在难以转染的细胞（例如原代细胞和干细胞）中，可以实现高的mRNA转染效率。所述mRNA的转染试剂盒是与血清和抗生素的存在兼容。
该基因转染试剂盒包含基因稀释优化的无菌缓冲。确保使用此缓冲液进行有效的mRNA复合物形成和随后的转染。

图片：

储存条件：
储存于2-8°C

保质期：
12个月

产品编号

BCK-transfect

-15％*

BCK-transfect

1套

baseclick转染试剂

发表于2024年4月21日由上海金畔生物科技有限公司

baseclick转染试剂

转染试剂盒和试剂

为了将核酸（DNA和RNA）高效传递到哺乳动物细胞中……

通过选择有利的转染试剂/策略-根据您的细胞类型-可以实现宜的转染效率。一种策略是基于转染试剂与带负电荷的核酸的阳离子聚合。随后的细胞摄取通过内吞途径发生。（对应产品：BCFA-213和BCFA-214 ）。另一种策略是自然细胞内在化过程的原理，例如受体介导的内吞作用，补胞作用和吞噬作用。靶细胞对这种配体-受体复合物的吸收取决于多种因素，例如靶上受体的表达水平，配体-受体的结合亲和力和配体-受体结合后的内在化途径。（对应产品：BCFA-111，BCFA-028）。因此，选择合适的转染试剂非常重要，必须针对每种细胞类型进行考虑。

该基因转染试剂盒被设计成提供的mRNA使用少量的mRNA和试剂可在多种哺乳动物细胞系中使用。在难以转染的细胞（例如原代细胞和干细胞）中，可以实现高的mRNA转染效率。

baseclick转染试剂

核酸（DNA / RNA）向细胞内的传递对于基因表达和沉默实验至关重要，需要适当的转染策略。已经确定了成功转染的几种方法。一种方法是基于阳离子聚合物与带负电荷的DNA / RNA分子的络合。通过粘附至细胞膜并随后进行胞吞作用，复合物被细胞吸收。可以这种方式使用的试剂是DEAE-葡聚糖或聚乙烯亚胺。另一种策略是受体介导的内在化原理。此类受体配体（如叶酸-PEG3-叠氮化物）显示出出色的转染特性。选择正确的转染试剂非常重要，应针对每种细胞类型进行考虑。

产品名称

叶酸-PEG3-叠氮化物

BCFA-111

生育酚-PEG3-叠氮化物

BCFA-028

叶酸-PEG3-叠氮化物

文本：

叠氮化物用于安装叶酸标签，以被癌细胞中过表达的叶酸受体识别。

CAS号：1313026-32-2

图片：

分子式：
C ₂₇ H ₃₅ N ₁₁ O ₈

分子量：
641.64 g / mol

储存条件：
储存于2-8°C

纯度：
96％（HPLC）

保质期：
12个月

生育酚-PEG3-叠氮化物

BCFA-028-1

1毫克

文本：

亲脂性载体叠氮化物

图片：

分子式：
C ₃₇ H ₆₅ N ₃ O ₅

分子量：
631.93 g / mol

储存条件：
-20°C储存

纯度：
≥95％（HPLC）

外观：
淡琥珀色液体

保质期：
12个月

吸收度：
280 nm

ozbiosciences转染试剂

发表于2024年4月21日由上海金畔生物科技有限公司

ozbiosciences转染试剂

ozbiosciences转染试剂

ozbiosciences转染试剂：

磁转/脂质转染/ Polyfection

–磁转染将核酸或其他载体与涂有阳离子分子的可生物降解的磁性纳米粒子相关联。此方法非常适合于原始细胞和难以转染的细胞。

-Lipofection，一种基于脂质的转染技术，属于生化方法。脂质转染的主要优点是高效，可在多种细胞类型中转染所有类型的核酸，可重复性和低毒性。

– Polyfection，基于聚合物的转染技术，新颖的设计和合成Ç ationic ħydroxylated甲mphipilic中号ULTI块P olymer（CHAMP）–优越的转染效率的优化系统中的细胞类型的具有低广谱得益于改进的递送机制，细胞压力增加。

Helix-IN转染试剂

新的！

Helix-IN ™ DNA转染试剂为解决经典转染技术问题开辟了新的可能性。
OZ Biosciences公司革命性Polyfection与螺旋-IN™的新颖的设计Çationic ħ ydroxylated甲mphiphilic中号ULTI块P olymer（CHAMP ™技术）。这种新型的双功能共聚物具有生物相容性，可离子化，pH响应性和可生物降解性。

减少细胞压力，保留活力并提高效率。

主要优点

适用于细胞系和难转染细胞的广谱转染试剂
即使DNA量少，转染效率也高，转基因表达提高
高细胞内蛋白质产量，同时保持活力
高分泌蛋白生产，同时减少细胞压力
可生物降解-避免二次效应
兼容任何培养基

HELIX-IN™翻译试剂

尺寸：

100µL：24孔板中多达100-200个测定
500µL：24孔板中多达500-1000个测定
1000 µL： 24孔板中多达1000-2000个测定

每个试剂盒包含一小瓶Helix-IN试剂+一小瓶HIB Enhancer试剂

储存： -20°C

运输条件：室温

HX10100	100微升	68,00€
HX10500	500微升	248,00€
HX11000	1毫升	429,00€

应用
结果
引文数据库
技术资源

Helix-IN™转染试剂：

用于将DNA传递到许多细胞系的高分子试剂
对于永生的细胞系，优先粘附的细胞有HEK-293，NIH-3T3，CHO，COS，HeLa等。
共转染的理想选择

推荐：转基因表达水平高的贴壁细胞系转染（见细胞转染数据库和引文数据库）

细胞转染技术原理及应用

发表于2024年4月13日由上海金畔生物科技有限公司

细胞转染技术原理及应用

摘要：讲述细胞转染技术分类,并分别介绍各种转染方法的原理、应用、特点,及各种转染方法的比较. 常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染.前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析.一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白 ,β半乳糖苷酶等来帮助检测.后者也称稳定转染,外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体（episome）存在.尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高.外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标记,如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因）,潮霉素B磷酸转移酶（HPH）,胸苷激酶（TK）等反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系.

转染技术的选择对转染结果影响也很大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等.一些传统的转染技术,如DEAE右旋糖苷法,磷酸钙法,电穿孔法, 脂质体法各有利弊,其主要原理及应用特点如下：

转染方法原理应用特点

磷酸钙法

磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞稳定转染

瞬时性转染不适用于原代细胞

操作简便但重复性差

有些细胞不适用

DEAE-右旋糖苷法

带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞瞬时性转染相对简便、结果可重复但对细胞有一定的毒副作用转染时需除血清

电穿孔法

高脉冲电压破坏细胞膜电位,DNA通过膜上形成的小孔导入稳定转染瞬时性转染

所有细胞适用性广但细胞致死率高,DNA和细胞用量大, 需根据不同细胞类型优化电穿孔实验条件

病毒介导法

通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中稳定转染可用于难转染的细胞、原代细胞,体内细胞等

逆转录病毒

特定宿主细胞但携带基因不能太大细胞需处分裂期需考虑安全因素

腺病毒通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中瞬时转染特定宿主细胞可用于难转染的细胞

需考虑安全因素

阳离子脂质体法带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞稳定转染瞬时性转染

所有细胞适用性广,转染效率高,重复性好,但转染时需除血清.转染效果随细胞类型变化大

Biolistic颗粒传递法

将DNA用显微重金属颗粒沉淀,再将包被好的颗粒用弹道装置投射入细胞,DNA在胞内逐步释放,表达瞬时性转染可用于：人的表皮细胞,纤维原细胞, 淋巴细胞系以及原代细胞

显微注射法

用显微操作将DNA直接注入靶细胞核稳定转染瞬时性转染转染细胞数有限

多用于工程改造或转基因动物的胚胎细胞

各种转染方法的比较：

除上述传统方法外,近年来上推出了一些阳离子聚合物基因转染技术,以其适用宿主范围广,操作简便,对细胞毒性小,转染效率高受到研究者们的青睐.其中树枝状聚合物（Dendrimers）和聚乙烯亚胺（Polyethylenimine,PEI）的转染性能Z佳,但树枝状聚合物的结构不易于进一步改性,且其合成工艺复杂.聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳个原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(proton sponge)体.这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞,其效果好于脂质聚酰胺,经进一步的改性后,其转染性能好于树枝状聚合物,而且它的细胞毒性低.大量实验证明,PEI是非常有希望的基因治疗载体.目前在设计更复杂的基因载体时,PEI经常做为核心组成成分.

线型PEI（Line PEI,LPEI）与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI（Branched PEI,BPEI）要早一些,过去的研究认为在不考虑具体条件,LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低,有利于细胞定位,因此与BPEI相比应该转染效率高一些.但近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成小的转染复合物,从而提高转染效率,但同时细胞毒性也增大.超高分枝的、较柔性的PEI衍生物含有额外的仲胺基和叔胺基,在染实验中发现这种PEI的毒性低,但转染效率却较高.

GenEscort是采用各种分枝状和超高分枝状的小分子PEI与各种含有生理条件下可降解键的交联剂交联,合成出的一系列高分枝的可降解的PEI衍生物.聚合物的分枝结构使得其具有较高的正电性,因此易于高效地包裹各种DNA、RNA分子及质粒形成小的纳米颗粒 ,从而提高转染效率,当所形成复合物进入细胞以后,其中所含的生理条件下可降解的化学键在细胞内水解,使交联聚合物分解为无细胞毒性的小分子PEI,这样结构的转染试剂在体外应用可以获得高的转染效率和低的细胞毒性,其可降解性对体内应用也具有重要的意义.

线性PEI——一种高效的阳离子聚合物转染试剂

转染效率更高，细胞毒性更低。线性PEI广泛适用于常见细胞系，如：HEK-293、HEK293T、Hep G2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、HIH/3T3和sf9等，PEI即使在有血清存在的情况下仍然能够高效的将核酸导入细胞，其具有优越的转染效率，重组蛋白的高表达水平，且与含血清的培养基相兼容，低细胞毒性，PEI的另外一个显著优势是较其他转染试剂使用成本极低。

BIOHIB的线性聚乙烯亚胺78pei25000
可完美替代 Polysciences公司货号为 23966-1Polyethylenimine, Linear (MW 25,000)的产品 BIOHIB的线性聚乙烯亚胺78pei40000
可完美替代 Polysciences公司货号为 24765-1 Polyethylenimine, Linear (MW 40,000)的产品

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“先天免疫系统”对合成载体系统的转染有什么作用？

► 决定细胞是否容易、难或不可能转染 DNA 的因素有哪些？

► 我一直使用不同的转染试剂。我现在可以使用 Metafectene 和我的旧试剂相同的优化方案吗？

► 能​​否预测特定细胞类型的转染能力？

► 获得最佳 DNA 转染结果的理想细胞培养条件是什么？

► 如何确定脂质复合物形成的最佳参数？

► 我已经注意到我的转染过程中的毒性作用。原因是什么？

► 培养基中使用的培养基和血清如何影响转染成功？

► 支原体对转染成功有影响吗？

► 我如何确定我的细胞是否被支原体污染，如果是这种情况该怎么办？

► DNA/RNA 的类型及其质量对转染成功有什么影响？

► 我计划更改为不同的细胞培养格式。我应该注意什么？

► Biontex 是否提供针对特定细胞系和转染试剂的特定方案？

► 某些手册中描述的冻融循环的作用是什么？

► 转染试剂、核酸或脂质复合物的稀释溶液可以储存多长时间？

biontex转染试剂选择指南

Plasmid DNA Transfection

Featured Product – Lipofectamine™ LTX with PLUS™ Reagent

Ordering Information

jetPRIME ®

规格

概括

订购信息

描述

转染效率

成本效益：更少的 DNA 和更少的试剂

更好的细胞活力

易于使用的协议

应用

质粒转染

基因组编辑

siRNA转染

不同核酸的共转染

质量

jetOPTIMUS ®

概括

订购信息

描述

优化难转染细胞的 DNA 转染效率

先进的纳米技术：使用更少的材料实现基因表达！

出色的细胞活力和形态

优化的转染方案

应用

DNA转染

CRISPR基因组编辑

病毒生产

Neuro-2a转染试剂盒（神经母细胞瘤，CCL-131）

SAINT-Protein

sRNA

Helix-IN转染试剂

主要优点

HELIX-IN™翻译试剂

Helix-IN™转染试剂：

细胞转染技术原理及应用

► 能否预测特定细胞类型的转染能力？

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