结晶紫-柠檬酸染色液(0.1%),索莱宝,G1074-100ml

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索莱宝

·  储存条件 : 室温,避光 ,12个月

·  单位 : 瓶

·  货期 : 2-3天

 

结晶紫是一种可以和细胞核中的DNA结合的碱性染料,对细胞核染色。三苯甲烷染料和甲基紫是用于验证淀粉样物的第一个人工合成染料。甲基紫是四、五、六甲基副品红碱的混合物,淀粉样物的染色可能是由于甲基紫选择性地对某种有色成分具有亲和力,淀粉样物的反应还远远不是特异性的,因为缺乏同其他组织成分区分的显著的颜色变化。甲基紫染色切片采用水溶性封固剂封固是很必要的,因为局部的脱水作用会破坏红色的多染性。   
      结晶紫柠檬酸染色液(0.1%)主要由结晶紫、柠檬酸等组成,是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。

浓度
规格 100ml
保存 室温,避光 ,12个月

辣根过氧化物酶 HRP,索莱宝,P8020-100mg CAS : 9003-99-0

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·  别名 : Donor: hydrogen-peroxide oxidoreductase;Horseradish peroxidaseHRP POD

·  英文名称 : Peroxidase(POD)

·  CAS : 9003-99-0

·  储存条件 : -20℃

·  酶活 : ≥200units/mg solid (using npytogallol)

·  外观(性状) : 棕褐色结晶或冻干粉 
·  来源:horseradish

·  单位 : 支

 

说明:POD是一种具有氧化还原酶性质的血红素蛋白。用于生化研究,是酶标记法所用的一种主要酶。也用于生物液体中 葡萄糖和半乳糖的测定

 

HRP是一种分子量达44 000的糖蛋白,由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成,中性糖和氨基糖约占18%,主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个氯化血红素IX作辅基,该辅基在403nm波长处有最大吸收峰,而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有最大吸收。HRP403nmOD值与275nmOD值之比,也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl)值。RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量,并非表示HRP制剂的真正纯度,而且RZ值高的HRP制剂,并不意味着酶活性也高。但可以一纯酶溶液在10mm光径403nm波长下的吸光度来计算酶浓度[1(W/V)酶溶液吸光度为22.5,浓度为227umol/L]。纯HRP干燥贮存于–20oC可保持稳定,使用1.36 mol/L甘油、10mmol/L磷酸钠、30umol/L牛血清白蛋白和20umol/L细胞色素C(pH 7.4)溶液作为基质冷冻保存,可使酶结合物稳定数年。HRP对热及有机溶剂的作用比较稳定,用甲苯与石蜡切片处理或用纯乙醇或l0%甲醛水溶液固定做冷冻切片,均不能使其活性改变。氰化物或硫化物在105106mol/L浓度时具有可逆性地抑制HRP的作用;氟化物、叠氮化合物或羟胺仅在高于10-3molL浓度时抑制HRPHRP还可被羟甲基过氧化氢不可逆地抑制。强酸也是HRP的强烈的抑制剂。
   
因此,在酶免疫测定常选用上述的某些化合物如氟化钠、叠氮钠和强酸等作为酶反应的终止剂。此外,在配制酶免疫测定的稀释缓冲液时,为防止酶失活,应避免使用叠氮钠作防腐剂。HRP的同工酶主要可分为三种类型:①含糖量高的酸性同工酶。②等电点接近于中性(或微碱)的含糖量相对较低的同工酶。③含糖量低的碱性(PI>11)同工酶。酶免疫试验中所使用的HRP,以PI8.79.0的所谓“C”同工酶为主要组成成分,其他同工酶的活性则很低。“C”同工酶的共价结构由2个密切接近的区域组成,血红素基团则位于其间而成夹心结构,糖链以8个不同的部位结合于多肽。天然的酶所带的纯电荷极少;无游离的。—氨基,仅有2个可测出的组氨酸,6个赖氨酸似乎全被糖链外壳所遮盖。因此,HRP一般仅有12个可用于耦联的氨基。
   
根据HRP的催化特性,ELISA中一般使用过氧化氢(H2O2)作为HRP底物之一,在供氢体(即色原底物)存在时,HRPH2O2的反应迅速而又专一。由图4可见,HRPH2O2二价地氧化形成复合物I,而复合物I又可与氢供体的二步连续的单价相互作用而还原至起始状态。复合物Ⅱ是被氧化的带一个电子的中间产物,当H2O2过量,由于复合物Ⅲ或Ⅳ的形成,酶活性受抑制(以后补上)30%的H2O2并不稳定。由于H2O2既为HRP的底物,也为其抑制剂,因而ELISA要想得到满意的测定结果,H2O2必须限定在一定的浓度范围内,终浓度通常为26 mmol/L。然而在实际研究工作中,一般很少注意这一点。大多数研究者所使用的H2O2的浓度常较理想反应所需的量大24倍。吸附于固相的HRP较游离的HRP更易受过量H2O2的抑制。如果30H2O2贮存液浓度经测定证实确为30%,则稀释10 00012 000倍常是较为理想的底物。H2O2的摩尔消光系数为10mm光径240nm波长下为43.6,因此,可通过这种方式来检测H2O2工作溶液的浓度。
   
固相ELISA中,当温度高于20oC时,HRP活性常较低,在底物溶液中加入非离子去垢剂聚山梨醇-20TritonX-100可延迟HRP的失活,且可使反应温度加大,但非离子去垢剂的这种酶活性保护效应依氢供体的不同而有差异。如以2,2联氮-[3-乙基苯并噻唑啉]-6-磺酸(ABTS)为氢供体,则只能保护20%的酶活性,而以邻联茴香胺(ODA)为氢供体时,酶活性的保护提高至90%。
    HRP
之所以是迄今为止在ELISA中应用最为广泛的标记用酶,主要是因为其一方面易于提取,价格相对低廉;另一方面性质稳定,耐热及有机溶剂的作用,与抗原或抗体偶联后,活性很少受损失。

浓度
规格 100mg
保存 -20℃

辣根过氧化物酶 HRP,索莱宝,P8020-10mg CAS : 9003-99-0

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·  别名 : Donor: hydrogen-peroxide oxidoreductase;Horseradish peroxidaseHRP POD

·  英文名称 : Peroxidase(POD)

·  CAS : 9003-99-0

·  储存条件 : -20℃

·  酶活 : ≥200units/mg solid (using npytogallol)

·  外观(性状) : 棕褐色结晶或冻干粉 
·  来源:horseradish

·  单位 : 支

 

说明:POD是一种具有氧化还原酶性质的血红素蛋白。用于生化研究,是酶标记法所用的一种主要酶。也用于生物液体中 葡萄糖和半乳糖的测定

 

HRP是一种分子量达44 000的糖蛋白,由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成,中性糖和氨基糖约占18%,主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个氯化血红素IX作辅基,该辅基在403nm波长处有最大吸收峰,而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有最大吸收。HRP403nmOD值与275nmOD值之比,也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl)值。RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量,并非表示HRP制剂的真正纯度,而且RZ值高的HRP制剂,并不意味着酶活性也高。但可以一纯酶溶液在10mm光径403nm波长下的吸光度来计算酶浓度[1(W/V)酶溶液吸光度为22.5,浓度为227umol/L]。纯HRP干燥贮存于–20oC可保持稳定,使用1.36 mol/L甘油、10mmol/L磷酸钠、30umol/L牛血清白蛋白和20umol/L细胞色素C(pH 7.4)溶液作为基质冷冻保存,可使酶结合物稳定数年。HRP对热及有机溶剂的作用比较稳定,用甲苯与石蜡切片处理或用纯乙醇或l0%甲醛水溶液固定做冷冻切片,均不能使其活性改变。氰化物或硫化物在105106mol/L浓度时具有可逆性地抑制HRP的作用;氟化物、叠氮化合物或羟胺仅在高于10-3molL浓度时抑制HRPHRP还可被羟甲基过氧化氢不可逆地抑制。强酸也是HRP的强烈的抑制剂。
   
因此,在酶免疫测定常选用上述的某些化合物如氟化钠、叠氮钠和强酸等作为酶反应的终止剂。此外,在配制酶免疫测定的稀释缓冲液时,为防止酶失活,应避免使用叠氮钠作防腐剂。HRP的同工酶主要可分为三种类型:①含糖量高的酸性同工酶。②等电点接近于中性(或微碱)的含糖量相对较低的同工酶。③含糖量低的碱性(PI>11)同工酶。酶免疫试验中所使用的HRP,以PI8.79.0的所谓“C”同工酶为主要组成成分,其他同工酶的活性则很低。“C”同工酶的共价结构由2个密切接近的区域组成,血红素基团则位于其间而成夹心结构,糖链以8个不同的部位结合于多肽。天然的酶所带的纯电荷极少;无游离的。—氨基,仅有2个可测出的组氨酸,6个赖氨酸似乎全被糖链外壳所遮盖。因此,HRP一般仅有12个可用于耦联的氨基。
   
根据HRP的催化特性,ELISA中一般使用过氧化氢(H2O2)作为HRP底物之一,在供氢体(即色原底物)存在时,HRPH2O2的反应迅速而又专一。由图4可见,HRPH2O2二价地氧化形成复合物I,而复合物I又可与氢供体的二步连续的单价相互作用而还原至起始状态。复合物Ⅱ是被氧化的带一个电子的中间产物,当H2O2过量,由于复合物Ⅲ或Ⅳ的形成,酶活性受抑制(以后补上)30%的H2O2并不稳定。由于H2O2既为HRP的底物,也为其抑制剂,因而ELISA要想得到满意的测定结果,H2O2必须限定在一定的浓度范围内,终浓度通常为26 mmol/L。然而在实际研究工作中,一般很少注意这一点。大多数研究者所使用的H2O2的浓度常较理想反应所需的量大24倍。吸附于固相的HRP较游离的HRP更易受过量H2O2的抑制。如果30H2O2贮存液浓度经测定证实确为30%,则稀释10 00012 000倍常是较为理想的底物。H2O2的摩尔消光系数为10mm光径240nm波长下为43.6,因此,可通过这种方式来检测H2O2工作溶液的浓度。
   
固相ELISA中,当温度高于20oC时,HRP活性常较低,在底物溶液中加入非离子去垢剂聚山梨醇-20TritonX-100可延迟HRP的失活,且可使反应温度加大,但非离子去垢剂的这种酶活性保护效应依氢供体的不同而有差异。如以2,2联氮-[3-乙基苯并噻唑啉]-6-磺酸(ABTS)为氢供体,则只能保护20%的酶活性,而以邻联茴香胺(ODA)为氢供体时,酶活性的保护提高至90%。
    HRP
之所以是迄今为止在ELISA中应用最为广泛的标记用酶,主要是因为其一方面易于提取,价格相对低廉;另一方面性质稳定,耐热及有机溶剂的作用,与抗原或抗体偶联后,活性很少受损失。

浓度
规格 10mg
保存 -20℃

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红,索莱宝,T1300-100ml*20 CAS : 9002-07-7

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·  别名 : 胰酶 胰蛋白酶

·  英文名称 : Trypsin-EDTA solution,0.25% (without phenol red)

·  CAS : 9002-07-7

·  分子式 : C6H15O12P3

·  分子量 : 24000

·  储存条件 : -20℃

·  外观(性状) : 白色或类白色

·  单位 : 200ml/瓶 20/

 

索莱宝生产的胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTA Solution) 0.25%胰酶和 0.02%EDTA0.53mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。

产品说明:

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。

保存:-20℃保存,有效期12个月。

使用方法:

1. 贴壁细胞的消化:

a) 吸去培养液,用无菌的PBSHanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。

c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。

d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。

e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

2. 组织的消化:

不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

注意事项:

1.由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;

2.本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;

3.不宜4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

浓度
规格 100ml*20
保存 -20℃

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 不含酚红,索莱宝,T1300-100ml CAS : 9002-07-7

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·  别名 : 胰酶 胰蛋白酶

·  英文名称 : Trypsin-EDTA solution,0.25% (without phenol red)

·  CAS : 9002-07-7

·  分子式 : C6H15O12P3

·  分子量 : 24000

·  储存条件 : -20℃

·  外观(性状) : 白色或类白色

·  单位 : 200ml/瓶 20/

 

索莱宝生产的胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTA Solution) 0.25%胰酶和 0.02%EDTA0.53mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。

产品说明:

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。

保存:-20℃保存,有效期12个月。

使用方法:

1. 贴壁细胞的消化:

a) 吸去培养液,用无菌的PBSHanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。

c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。

d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。

e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

2. 组织的消化:

不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

注意事项:

1.由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;

2.本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;

3.不宜4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

浓度
规格 100ml
保存 -20℃

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 含酚红,索莱宝,T1320-100ml*20

上海金畔生物科技有限公司提供胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 含酚红,索莱宝,T1320-100ml*20,可以访问官网了解更多产品信息。
胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) 含酚红,索莱宝,T1320-100ml*20

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索莱宝

·  别名 : 胰酶

·  英文名称 : Trypsin-EDTA solution,0.25% (with phenol red)

·  储存条件 : -20℃

·  单位 : 200ml/瓶 20/

 

液体,2.5g 猪胰蛋白酶和0.2g EDTA溶于1PBS。不含钙和镁,含酚红。过滤除菌

产品说明:

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。

索莱宝生产的T1320胰蛋白酶消化液(Trypsin Solution)0.25%胰酶,溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。通常室温消化2分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。

保存:-20℃保存,有效期12个月。

使用方法:

1. 贴壁细胞的消化:

a) 吸去培养液,用无菌的PBSHanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。

c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。

d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。

e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

2. 组织的消化:

不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

注意事项:

1.由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;

2.本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;

3.不宜4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

浓度
规格 100ml*20
保存 -20℃