磷酸盐检测试剂 MESG 货号21600-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

磷酸盐检测试剂 MESG

磷酸盐检测试剂 MESG

磷酸盐检测试剂 MESG     货号21600 货号 21600 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 2340
Ex (nm) 330 Em (nm)
分子量 313.34 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

磷酸盐检测试剂 MESG 是美国AAT Bioquest生产的磷酸盐检测试剂,在无机磷酸盐存在下,MESG通过嘌呤核苷磷酸化酶(EC 2.4.2.1)转化为2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤,吸收波长变为红色。该特征已用于通过分光光度法定量磷酸盐。我们提供方便的MESG的磷酸盐检测试剂盒(#21659)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的磷酸盐检测试剂 MESG 。

产品说明书

操作步骤

1.准备分析试剂:

1.1使用前在室温下解冻所有四种成分。

1.2准备 MESG 底物(组分 B)溶液:将 500 μL 的 ddH2O 添加到 MESG 底物(组分 B)的小瓶中。通过涡旋充分混合以获得 MESG 底物溶液

注意: 250μl足以使一个平板制成单独使用的等分试样并立即储存在-20°C。

1.3制备嘌呤核苷磷酸化酶(组分 C)溶液:将 100 μL ddH2O 添加到嘌呤核苷磷酸化酶(PNP;组分 C)的小瓶中。涡旋混匀,得到嘌呤核苷磷酸化酶溶液

1.4制备测定溶液:将全部体积的MESG底物溶液(来自步骤1.2)和嘌呤核苷磷酸化酶 溶液(来自步骤1.3)加入到测定缓冲液瓶(组分A)中,充分混合以得到测定溶液。将测定溶液置于冰上。

注1:该测定溶液在冰上稳定至少4小时。

注2:为达到理想的效果,需要紫外线透明板或比色皿。

注3:由于该测定对P i 的高灵敏度,使用无P i的实验室器皿非常重要

 

2. 准备连续稀释的磷酸盐标准品和/或测试样品:

2.1制备磷酸盐标准品: 将50μL1mMKH 2 PO 4(组分D)加入950μL去离子水或酶反应缓冲液中,得到50μM磷酸盐标准溶液。

2.250μM磷酸盐标准溶液200μL1:2系列稀释,得到25,12.5,6.25,3.125,1.56和0.78μM连续稀释的磷酸盐标准。

2.3根据表1和2,将含磷酸盐的测试样品和/或磷酸盐标准品加入透明的UV透明96孔微孔板中。

 

表1透明的UV透明96孔板中磷酸盐标准品和测试样品的方案

BL BL TS TS
PS1 PS1
PS2 PS2      
PS3 PS3      
PS4 PS4      
PS5 PS5      
PS6 PS6      
PS7 PS7      

注意:PS =磷酸盐标准,BL =空白对照,TS =测试样品。

表2每个孔的试剂组成

磷酸盐标准 空白 样本
连续稀释:50ul 不含磷酸盐的水或缓冲液:50ul 50ul

注意:将磷酸盐标准品的连续稀释液(0.1μM至50μM)加入PS1至PS7的孔中。

 

3.运行PhosphoWorks MESG磷酸盐测定:

3.1添加50μL/孔的测定溶液(来自S对 TEP 1.4) 中到的磷酸盐标准,空白对照和测试样品的孔中。彻底混合试剂。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL分析溶液。

3.2在室温下孵育30分钟。用酶标仪或分光光度计在360nm处监测吸光度。

注意:对于需要总体积大于100μL的比色皿测定,在测量吸收之前按比例增加样品和测定试剂的体积。

 

参考文献

Sacrificial crystal templating of hyaluronic acid-based hydrogels
Authors: Richelle C Thomas, Paul E Chung, Shan P Modi, John G Hardy, Christine E Schmidt
Journal: European Polymer Journal (2016)

Osteogenic cell cultures cannot utilize exogenous sources of synthetic polyphosphate for mineralization
Authors: Marianne B Ariganello, Sidney Omelon, Fabio Variola, Rima M Wazen, Pierre Moffatt, Antonio Nanci
Journal: Journal of cellular biochemistry (2014): 2089–2102

说明书
磷酸盐检测试剂 MESG .pdf

PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收* 货号21659-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*

PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*

货号 21659 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 200 Tests 价格 3924
Ex (nm) 360 Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*是美国AAT Bioquest生产的用于检测ADP的试剂盒,在无机磷酸盐存在下,MESG 通过嘌呤核苷磷酸化酶 (EC 2.4.2.1) 转化为 2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤,吸收波长变为红色。此功能已用于开发我们方便的 MESG 磷酸盐检测试剂盒。我们的试剂盒提供所有必需的试剂,包括 MESG、磷酸化酶和反应缓冲液。在 pH 6.5-8.5 下,MESG 底物在 360 nm 处的吸光度增加,在 pH 7.6 时,消光系数的变化为 11,000 M-1cm-1。该测定法可对溶液中浓度至少低至 2 µM 的磷酸盐进行定量。它可用于通过耦合两种酶促反应来测量磷酸酶(如 GTP 酶和 ATP 酶)释放磷酸盐的动力学。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*。

 

适用仪器


分光光度计  
吸收: 360nm
推荐孔板: Clear UV-transparent
光吸收酶标仪  
吸收: 360nm
推荐孔板: 透明底板

产品说明书

样品实验方案

简要概述

1.运行激酶反应(20 µL)
2.添加ADP传感器缓冲液(20 µL)
3.添加ADP传感器(10 µL)
4.在室温下孵育15分钟-1小时
5.监控荧光强度

 

溶液制备 

1.标准溶液

磷酸盐标准
向950μL去离子水或酶反应缓冲液中添加50μL1 mM KH2PO4(组分D),得到50μM磷酸盐标准溶液(PS7)。 取50μM磷酸盐标准溶液,并进行1:2连续稀释,以用去离子水或酶反应缓冲液连续稀释磷酸盐标准液(PS6-PS1)。

 

2.工作溶液

2.1将500 µL ddH2O加入小瓶MESG底物(组分B)。 涡旋混合均匀,得到MESG底物溶液。 注意:250 µl足够一块板。

2.2向小瓶嘌呤核苷磷酸化酶(PNP;组分C)中加入100 µL ddH2O。 涡旋混合均匀,得到嘌呤核苷磷酸化酶溶液。

2.3将全部体积的MESG底物溶液和嘌呤核苷磷酸化酶溶液添加到分析缓冲液(组分A)的瓶子中,并充分混合以得到工作溶液。 将工作溶液放在冰上。 注意:此工作溶液在冰上至少可稳定4小时。 不建议将工作溶液冷冻进行其他测定。 为了获得理想的结果,需要紫外线透明的板或比色皿。 由于该测定法对Pi的敏感性很高,因此使用无Pi的实验室器具极为重要。

 

样品示例及操作

表1.黑色96孔微孔板中ADP标准品和测试样品的布局。 SD = ADP标准(SD1-SD7,0.05至30 uM); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
PS1 PS1
PS2 PS2
PS3 PS3    
PS4 PS4    
PS5 PS5    
PS6 PS6    
PS7 PS7    

表2.每个孔的试剂组成。

容积 试剂
PS1-PS7 50ul 连续稀释液(0.78至50 µM)
BL 50ul 不含磷酸盐的水或缓冲液
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和表2提供的布局,准备磷酸盐标准品(PS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL工作溶液添加到磷酸盐标准液,空白对照和测试样品的每个孔中,以使总测定体积为100 µL /孔。 彻底混合试剂。 对于384孔板,请向每个孔中添加25 µL工作溶液,总体积为50 µL /孔。

3.在室温下孵育30分钟。

4.用酶标仪或分光光度计在360 nm处监测吸光度。 注意:对于需要总体积大于100 µL的比色杯分析,在测量吸收之前,应按比例将样品和分析试剂的体积相乘。

 

参考文献

Sacrificial crystal templating of hyaluronic acid-based hydrogels
Authors: Richelle C Thomas, Paul E Chung, Shan P Modi, John G Hardy, Christine E Schmidt
Journal: European Polymer Journal (2016)

Osteogenic cell cultures cannot utilize exogenous sources of synthetic polyphosphate for mineralization
Authors: Marianne B Ariganello, Sidney Omelon, Fabio Variola, Rima M Wazen, Pierre Moffatt, Antonio Nanci
Journal: Journal of cellular biochemistry (2014): 2089–2102

说明书
PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*.pdf

磷酸盐检测试剂 MESG 货号21600-1MG-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

磷酸盐检测试剂 MESG

磷酸盐检测试剂 MESG

磷酸盐检测试剂 MESG    货号21600-1MG 货号 21600-1MG 存储条件
规格 1 mg 价格 900
Ex (nm) 330 Em (nm)
分子量 313.34 溶剂
产品详细介绍

简要概述

磷酸盐检测试剂 MESG 是美国AAT Bioquest生产的磷酸盐检测试剂,在无机磷酸盐存在下,MESG通过嘌呤核苷磷酸化酶(EC 2.4.2.1)转化为2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤,吸收波长变为红色。该特征已用于通过分光光度法定量磷酸盐。我们提供方便的MESG的磷酸盐检测试剂盒(#21659)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供磷酸盐检测试剂 MESG 。

产品说明书

操作步骤

1.准备分析试剂:

1.1使用前在室温下解冻所有四种成分。

1.2准备 MESG 底物(组分 B)溶液:将 500 μL 的 ddH2O 添加到 MESG 底物(组分 B)的小瓶中。通过涡旋充分混合以获得 MESG 底物溶液

注意: 250μl足以使一个平板制成单独使用的等分试样并立即储存在-20°C。

1.3制备嘌呤核苷磷酸化酶(组分 C)溶液:将 100 μL ddH2O 添加到嘌呤核苷磷酸化酶(PNP;组分 C)的小瓶中。涡旋混匀,得到嘌呤核苷磷酸化酶溶液

1.4制备测定溶液:将全部体积的MESG底物溶液(来自步骤1.2)和嘌呤核苷磷酸化酶 溶液(来自步骤1.3)加入到测定缓冲液瓶(组分A)中,充分混合以得到测定溶液。将测定溶液置于冰上。

注1:该测定溶液在冰上稳定至少4小时。

注2:为达到理想的效果,需要紫外线透明板或比色皿。

注3:由于该测定对P i 的高灵敏度,使用无P i的实验室器皿非常重要

 

2. 准备连续稀释的磷酸盐标准品和/或测试样品:

2.1制备磷酸盐标准品: 将50μL1mMKH 2 PO 4(组分D)加入950μL去离子水或酶反应缓冲液中,得到50μM磷酸盐标准溶液。

2.250μM磷酸盐标准溶液200μL1:2系列稀释,得到25,12.5,6.25,3.125,1.56和0.78μM连续稀释的磷酸盐标准。

2.3根据表1和2,将含磷酸盐的测试样品和/或磷酸盐标准品加入透明的UV透明96孔微孔板中。

 

表1透明的UV透明96孔板中磷酸盐标准品和测试样品的方案

BL BL TS TS
PS1 PS1
PS2 PS2      
PS3 PS3      
PS4 PS4      
PS5 PS5      
PS6 PS6      
PS7 PS7      

注意:PS =磷酸盐标准,BL =空白对照,TS =测试样品。

表2每个孔的试剂组成

磷酸盐标准 空白 样本
连续稀释:50ul 不含磷酸盐的水或缓冲液:50ul 50ul

注意:将磷酸盐标准品的连续稀释液(0.1μM至50μM)加入PS1至PS7的孔中。

 

3.运行PhosphoWorks MESG磷酸盐测定:

3.1添加50μL/孔的测定溶液(来自S对 TEP 1.4) 中到的磷酸盐标准,空白对照和测试样品的孔中。彻底混合试剂。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL分析溶液。

3.2在室温下孵育30分钟。用酶标仪或分光光度计在360nm处监测吸光度。

注意:对于需要总体积大于100μL的比色皿测定,在测量吸收之前按比例增加样品和测定试剂的体积。

 

参考文献

Sacrificial crystal templating of hyaluronic acid-based hydrogels
Authors: Richelle C Thomas, Paul E Chung, Shan P Modi, John G Hardy, Christine E Schmidt
Journal: European Polymer Journal (2016)

Osteogenic cell cultures cannot utilize exogenous sources of synthetic polyphosphate for mineralization
Authors: Marianne B Ariganello, Sidney Omelon, Fabio Variola, Rima M Wazen, Pierre Moffatt, Antonio Nanci
Journal: Journal of cellular biochemistry (2014): 2089–2102

说明书
磷酸盐检测试剂 MESG.pdf