重组肠激酶说明书
重组肠激酶说明书
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标签归档：肠激酶
putaibiotech重组肠激酶简介
putaibiotech重组肠激酶简介
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规格：100U； 500U ；1000U； 10KU ；100KU； 1MU
一、 产品简介：
肠激酶（Enterokinase, light chain）是一种高度专一性识别 Asp-Asp-Asp- Asp-Lys 序列的蛋白酶，在 Lys 的 C 端水解多肽。它可以将胰蛋白酶原转变为 胰酶，也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。本产品为采用重组酵母分 泌表达系统制备的高纯度、高活性的牛肠激酶，适用范围广（4-45℃，pH 4.5-9.5），并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。
二、 产品特性：
来源：毕赤酵母
性状：澄清、无色至淡黄色液体
活性：≥ 5.0 U/µl
纯度（蛋白电泳）：单一主条带
特异性：高度专一的识别 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列，在 Lys 的 C 端进行酶切。
三、产品用途：
重组肠激酶用于基因工程产品的开发，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、 生物化学、分子生物学等研究。
四、使用方法：
按照酶活性定义，酶切条件举例： 20~50mM Tris-HCl ，pH 8.0-8.5 体系中： 酶：融合蛋白浓度 = 0.1-10U：1mg
最适温度 25-30℃，反应时间 4~24h，可用 SDS-PAGE 检测酶切效果。
五、储存稳定性：
-15℃以下 保存 2 年。杭州浦泰生物科技有限公司
六、产品优势：
无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原 料。
质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量 稳定。
纯度高：不含其他蛋白酶，无非特异性切割。
产量高：吨级罐生产，批产量可达 6 千万单位，适合工业客户生产。
符合法规要求：生产设备和生产环境符合相关法规要求，生产过程*遵循 NSF ISO 9001:2015 质量体系并符合 GMP 指导原则。
质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。
EK酶（肠激酶）*
EK酶（肠激酶）*
EK酶（肠激酶）
本产品为牛肠激酶,纯度高（大于95%）,活性高,酶切特性高! 一支为:500U
重组肠激酶（rEK）是高纯度的牛肠激酶轻链亚基，它有着和天然提取的肠激酶同样特异的切割酶活性质
（切割位点AspAspAspAspLys ）。rEK表现了比天然酶更高的切割活性。我们重组表达的rEK带有6His纯
化标签，即不影响蛋白酶的切割活性，又可以在酶切后易于除去，迅速将剩余的酶去除掉，可以使rEK的
作用更加特异。
单位定义：
一个单位酶定义为25℃，pH8.0，1min切1nM胰蛋白酶原为蛋白酶所需要的酶量。
酶浓度： 2U/μl
建议酶切用量：
1μl的rEK在20℃，20mM Tris-HCl，100mM NaCl，pH7.6的条件下8h可以*切割融合蛋白Trx-PTH（25KD
）0.4mg。
建议酶切温度及酶切buffer：
25℃，20mM Tris-HCl，100mM NaCl，pH8.0。
产品特点：
1. 高活性，高纯度，特异性高；
2. 切割后蛋白的N端与天然蛋白N端相同；
保存条件： -20℃储存。
规格 价格（￥）
500u ￥600
1000u ￥1200
5000u ￥4200
10×5000u ￥40000
上海金畔生物科技有限公司
肠激酶(E.coli重组) 货号： BN24199
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- 产品货号：
- BN24199
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- 中文名称：
- 肠激酶(E.coli重组)
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- 英文名称：
- Enteropeptidase
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- CAS号：
- 9014-74-8
-
- 品牌：
- Biorigin
-
货号
产品规格
售价
备注
-
BN24199-100u
100u
¥540.00
重组体
-
BN24199-500u
500u
¥2000.00
重组体
产品描述
重组牛肠激酶,索莱宝,E8350-100U
上海金畔生物科技有限公司提供重组牛肠激酶,索莱宝,E8350-100U，可以访问官网了解更多产品信息。
重组牛肠激酶,索莱宝,E8350-100U
询价
索莱宝
· 英文名称 : Enterokinase from bovine intestine
· 分子量 : 25850Da
· 储存条件 : -20℃保存
· 酶活 : 10U/ul
· 单位 : 瓶
索莱宝肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经HPLC纯化，纯度高，特异性高，并且不含其他蛋白酶。肠激酶（EC3.4.21.9）是一个特定的蛋白酶，它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：天冬氨酸–天冬氨酸–天冬氨酸–天冬氨酸–赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签。
来源：重组蛋白
| 浓度 | |
| 规格 | 100U |
| 保存 | -20℃保存 |
Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒 货号11410-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
- 产品参数
- 产品详情
产品详情
Product details
Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒
| 货号 | 11410 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 200 Tests | ||
| Ex (nm) | 405 | Em (nm) | |
| 分子量 | 溶剂 | ||
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于酶活性的试剂盒，肠激酶（也称为肠肽酶）是由十二指肠壁中的细胞产生的丝氨酸蛋白酶，并且是人和动物消化系统中的关键酶。 肠激酶的缺乏导致肠道消化障碍。 肠激酶的抑制可能通过抑制参与癌变和转移的蛋白酶而具有抗肿瘤作用。 因此，高度选择性和灵敏的肠激酶检测在生物化学应用中起着关键作用。 Amplite 比色肠激酶活性检测试剂盒为定量肠激酶活性提供了一种灵敏的检测方法。 在肠激酶切割后，肠激酶底物可以通过EK Yellow 在吸光度酶标仪中在405nm处检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒。
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用稀释的肠激酶标准品（50μL）制备测试样品
2.加入等体积的肠激酶工作液（50μL）
3.在37°C孵育30-60分钟
4.监测OD增加到405nm
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. EK Yellow 原液（100X）：
将50μLDMSO（组分E）加入EK Yellow （组分A）中以制备100X储备溶液。
2.肠激酶底物储备液（100X）：
将50μLDMSO（组分E）加入肠激酶底物（组分B）中以制备100X储备溶液。
3.肠激酶标准溶液（10ug / mL）：
将50uL ddH2O + 0.1％BSA加入肠激酶标准小瓶（组分D）中以制备10μg/ mL肠激酶原液。
2.标准溶液
肠激酶标准
将10μL10μg/ mL肠激酶标准溶液加入990μL分析缓冲液（组分C）中，得到100ng / mL肠激酶溶液（EK7）。 然后在测定缓冲液中进行1：2连续稀释，以获得连续稀释的肠激酶标准品（EK6-EK1）。 注意：EK标准仅用于阳性对照，不应作为酶活性的定量标准。
3.工作溶液
将50μLEKYellow 储备液和50μL肠激酶底物储备液加入5 mL分析缓冲液（组分C）中; 混合均匀，制成肠激酶（EK）工作溶液（组分A + B + C）。 注意：对于一个96孔板，测定混合物就足够了。 它不稳定，使用迅速。
样品分析
表1.在96孔透明底微孔板中肠激酶标准品和测试样品的布局。 EK =肠激酶标准品（EK1-EK7,1.56至100ng / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| EK1 | EK1 | … | … |
| EK2 | EK2 | … | … |
| EK3 | EK3 | ||
| EK4 | EK4 | ||
| EK5 | EK5 | ||
| EK6 | EK6 | ||
| EK7 | EK7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| EK1-EK7 | 50ul | 连续稀释（1.56至100 ng / mL） |
| BL | 50ul | 分析缓冲液（组分C） |
| TS | 50ul | 样品 |
1.根据表1和表2中提供的布局，将肠激酶标准品（EK），空白对照（BL）和测试样品（TS）制备到96孔透明底微孔板中。对于384孔板，使用25μL 每孔试剂代替50μL。
2.在肠激酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLEK工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLEK工作溶液，总体积为50μL/孔。
3.将反应混合物在37℃孵育30-60分钟。
4.用吸光度板读数器监测吸光度的增加，在OD为405nm时进行路径检查。
Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒 货号11410-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒
Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒
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货号 | 11410 | 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
| 规格 | 200 Tests | 价格 | 5244 | |
| Ex (nm) | 405 | Em (nm) | ||
| 分子量 | 溶剂 | |||
| 产品详细介绍 | ||||
简要概述
Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于酶活性的试剂盒，肠激酶（也称为肠肽酶）是由十二指肠壁中的细胞产生的丝氨酸蛋白酶，并且是人和动物消化系统中的关键酶。 肠激酶将胰蛋白酶原转化为其活性形式的胰蛋白酶，导致随后的胰腺消化酶的活化。 肠激酶的缺乏导致肠道消化障碍。 肠激酶的抑制可能通过抑制参与癌变和转移的蛋白酶而具有抗肿瘤作用。 因此，高度选择性和灵敏的肠激酶检测在生物化学应用中起着关键作用。 Amplite 比色肠激酶活性检测试剂盒为定量肠激酶活性提供了一种灵敏的检测方法。 在肠激酶切割后，肠激酶底物可以通过EK Yellow 在吸光度酶标仪中在405nm处检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒。
适用仪器
| 光吸收酶标仪 | |
| 吸收： | 405nm |
| 推荐孔板： | 透明底板 |
产品说明书
样品实验方案
简要概述
1.用稀释的肠激酶标准品（50μL）制备测试样品
2.加入等体积的肠激酶工作液（50μL）
3.在37°C孵育30-60分钟
4.监测OD增加到405nm
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. EK Yellow 原液（100X）：
将50μLDMSO（组分E）加入EK Yellow （组分A）中以制备100X储备溶液。
2.肠激酶底物储备液（100X）：
将50μLDMSO（组分E）加入肠激酶底物（组分B）中以制备100X储备溶液。
3.肠激酶标准溶液（10ug / mL）：
将50uL ddH2O + 0.1％BSA加入肠激酶标准小瓶（组分D）中以制备10μg/ mL肠激酶原液。
2.标准溶液
肠激酶标准
将10μL10μg/ mL肠激酶标准溶液加入990μL分析缓冲液（组分C）中，得到100ng / mL肠激酶溶液（EK7）。 然后在测定缓冲液中进行1：2连续稀释，以获得连续稀释的肠激酶标准品（EK6-EK1）。 注意：EK标准仅用于阳性对照，不应作为酶活性的定量标准。
3.工作溶液
将50μLEKYellow 储备液和50μL肠激酶底物储备液加入5 mL分析缓冲液（组分C）中; 混合均匀，制成肠激酶（EK）工作溶液（组分A + B + C）。 注意：对于一个96孔板，测定混合物就足够了。 配制的工作溶液不稳定，需快速使用。
样品分析
表1.在96孔透明底微孔板中肠激酶标准品和测试样品的布局。 EK =肠激酶标准品（EK1-EK7,1.56至100ng / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| EK1 | EK1 | … | … |
| EK2 | EK2 | … | … |
| EK3 | EK3 | ||
| EK4 | EK4 | ||
| EK5 | EK5 | ||
| EK6 | EK6 | ||
| EK7 | EK7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| EK1-EK7 | 50ul | 连续稀释（1.56至100 ng / mL） |
| BL | 50ul | 分析缓冲液（组分C） |
| TS | 50ul | 样品 |
1.根据表1和表2中提供的布局，将肠激酶标准品（EK），空白对照（BL）和测试样品（TS）制备到96孔透明底微孔板中。对于384孔板，使用25μL 每孔试剂代替50μL。
2.在肠激酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLEK工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLEK工作溶液，总体积为50μL/孔。
3.将反应混合物在37℃孵育30-60分钟。
4.用吸光度板读数器监测吸光度的增加，在OD为405nm时进行路径检查。
参考文献
Optimization of the fermentation and downstream processes for human enterokinase production in Pichia pastoris
Authors: Melicherova K, Krahulec J, Safranek M, Liskova V, Hopkova D, Szeliova D, Turna J.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol. (2016)
A strategy for fusion expression and preparation of functional glucagon-like peptide-1 (GLP-1) analogue by introducing an enterokinase cleavage site
Authors: Liu Y, Ren L, Ge L, Cui Q, Cao X, Hou Y, Bai F, Bai G.
Journal: Biotechnol Lett (2014): 1675
Characterization of a gene family encoding SEA (sea-urchin sperm protein, enterokinase and agrin)-domain proteins with lectin-like and heme-binding properties from Schistosoma japonicum
Authors: Mbanefo EC, Kikuchi M, Huy NT, Shuaibu MN, Cherif MS, Yu C, Wakao M, Suda Y, Hirayama K.
Journal: PLoS Negl Trop Dis (2014): e2644
Do-it-yourself histidine-tagged bovine enterokinase: a handy member of the protein engineer’s toolbox
Authors: Skala W, Goettig P, Brandstetter H.
Journal: J Biotechnol (2013): 421
Fusion expression and purification of four disulfide-rich peptides reveals enterokinase secondary cleavage sites in animal toxins
Authors: Chen Z, Han S, Cao Z, Wu Y, Zhuo R, Li W.
Journal: Peptides (2013): 145
New strategy for specific activation of recombinant microbial pro-transglutaminase by introducing an enterokinase cleavage site
Authors: Wang K, Wang B, Yang HL, Pan L.
Journal: Biotechnol Lett (2013): 383
Immobilization of enterokinase on magnetic supports for the cleavage of fusion proteins
Authors: Santana SD, Pina AS, Roque AC.
Journal: J Biotechnol (2012): 378
Design and efficient production of bovine enterokinase light chain with higher specificity in E. coli
Authors: Chun H, Joo K, Lee J, Shin HC.
Journal: Biotechnol Lett (2011): 1227
The trail of my studies on glycoproteins from enterokinase to tumor markers
Authors: Yamashina I.
Journal: Proc Jpn Acad Ser B Phys Biol Sci (2010): 578
Application of immobilized bovine enterokinase in repetitive fusion protein cleavage for the production of mucin 1
Authors: Kubitzki T, Minor D, Mackfeld U, Oldiges M, Noll T, Lutz S.
Journal: Biotechnol J (2009): 1610
说明书
Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒.pdf