脂多糖提取试剂盒等你来拿!

上海金畔生物脂多糖提取试剂盒等你来拿!

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LPS Extraction Kit 脂多糖提取试剂盒 

iNtRON17141     100 Prep

脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌外膜的主要成分。其功能包括抗吞噬、抗血清、外膜通透性屏障和作为某些噬菌体吸附受体。热酚水提取法是提取脂多糖的常用方法,但提取时间长,步骤复杂。当我们试图操纵如此少量的细胞时,这种方法有很大的局限性。LPS提取试剂盒是专为快速、简便地从细菌细胞中提取LPS而设计的,广泛适用于不同的革兰氏细菌,适合于细胞数量较少的情况。首先。细菌细胞被有机溶液溶解。细胞膜的磷脂和蛋白质成分被破坏,细胞成分在溶液中释放。第二步。用高盐浓度溶液纯化释放细胞组分中的脂多糖。第三步。对于高质量的脂多糖,洗涤和洗脱盐通过洗涤步骤被简单地除去 。

•广泛应用于不同的革兰氏阴性菌中

•仅需60分钟即可提取出脂多糖

•可重复地获得较高的脂多糖产量 

储存:

在4℃下储存,然后稳定至少一年。 

试剂盒包含:

LPS Extraction Kit       100 Preps
Lysis Buffer             100 ml Purification Buffer 80 ml

 

使用前配制溶液 :

70%乙醇,

室温10mmTris-HCl缓冲液(pH8.0)

蛋白酶K溶液(30∏/ml)

LPS提取率与培养体积成正比当使用5ml培养物时,LPS的产率达到大值。我们不建议处理超过5毫升的细菌培养物。如果使用过量的培养液,将降低裂解率和产量,增加细胞蛋白对脂多糖的污染。通常,在OD600为0.8-1.2时,宜培养体积为2毫升。

为从细菌细胞中获得高纯度的脂多糖,用蛋白酶K处理,按以下步骤提取脂多糖。 

 

协议:

1.在13000转/分钟的室温下离心,获得2-5毫升细菌细胞。注意:清除上清液的所有痕迹。对于成粒细胞,在使用前通过重复敲击试管*松开细胞颗粒。细胞颗粒的不*松动可能导致无效的溶解和降低产量。

2。加入1毫升裂解缓冲液,用力旋涡。注:为促进细菌细胞溶解,应大力旋涡直至细胞团消失。

3。加入200毫升氯方后,用力旋涡10-20秒。室温下孵育5分钟,注意:旋涡前观察试管。当加入氯方时,当氯方层向下移动时,会在上层(蓝色层)的正下方形成一条白线。这个区域包含细胞碎片、蛋白质、基因组DNA和RNA的混合部分。加入氯方的目的是分离酚层和水层,并终分离RNA和基因组DNA/蛋白质。

4。以13000转/分的转速在4℃下离心10分钟。将400毫升上清液移入新的1.5毫升试管中。注:上层移液时,注意形成白色沉淀物。

5。加入800ml纯化缓冲液,充分混合。在-20℃下孵育10分钟。注:本步骤的目的是从细胞的其他提取物(如蛋白质、核酸、脂质等)中纯化脂质6。在4℃下以13000转/分的速度离心15分钟后,除去上层以获得LPS颗粒。7号。加入1毫升70%乙醇,倒置试管2-3次,洗涤脂多糖颗粒。将混合物在4℃13000转/分下离心3分钟。丢弃上层并干燥剩余的LPS颗粒。

 

注:这是一个清洗阶段,用于去除杂质,如盐等。在RT.8干燥颗粒。将30–50毫升10毫升Tris HCl缓冲液(pH 8.0)加入到LPS颗粒和涡流管或移液管中。将LPS煮沸2分钟,使其*溶解。选择:用蛋白酶K处理,从细菌细胞中提取高纯度的LPS。每1个LPS处理2.5㎍蛋白酶K,在50℃孵育30分钟。通常从大肠杆菌中提取30㎍LPS。         

 1.在13000转/分钟的室温下离心,获得2-5毫升细菌细胞。注意:清除上清液的所有痕迹。对于成粒细胞,在使用前通过重复敲击试管*松开细胞颗粒。细胞颗粒的不*松动可能导致无效的溶解和降低产量。

2。加入1毫升裂解缓冲液,用力旋涡。注:为促进细菌细胞溶解,应大力旋涡直至细胞团消失。

3。加入200毫升氯方后,用力旋涡10-20秒。室温下孵育5分钟,注意:旋涡前观察试管。当加入氯方时,当氯方层向下移动时,会在上层(蓝色层)的正下方形成一条白线。这个区域包含细胞碎片、蛋白质、基因组DNA和RNA的混合部分。加入氯方的目的是分离酚层和水层,并终分离RNA和基因组DNA/蛋白质。

4。以13000转/分的转速在4℃下离心10分钟。将400毫升上清液移入新的1.5毫升试管中。注:上层移液时,注意形成白色沉淀物。

5。加入800ml纯化缓冲液,充分混合。在-20℃下孵育10分钟。注:本步骤的目的是从细胞的其他提取物(如蛋白质、核酸、脂质等)中纯化脂质

6。在4℃下以13000转/分的速度离心15分钟后,除去上层以获得LPS颗粒。

7。加入1毫升70%乙醇,倒置试管2-3次,洗涤脂多糖颗粒。将混合物在4℃13000转/分下离心3分钟。丢弃上层并干燥剩余的LPS颗粒。

注:这是一个清洗阶段,用于去除杂质,如盐等。在RT.8干燥颗粒。将30–50毫升10毫升Tris HCl缓冲液(pH 8.0)加入到LPS颗粒和涡流管或移液管中。将LPS煮沸2分钟,使其*溶解。选择:用蛋白酶K处理,从细菌细胞中提取高纯度的LPS。每1个LPS处理2.5㎍蛋白酶K,在50℃孵育30分钟。通常从大肠杆菌中提取30㎍LPS。

 

Cell culture volume(OD600=1.0) 2㎖(109 cells)
Yield of LPS 30㎍
Amount of Proteinase K 75㎍(2.5㎕of 30㎎/ ml PK)

脂多糖(LPS),索莱宝,L8880-100mg

上海金畔生物科技有限公司提供脂多糖(LPS),索莱宝,L8880-100mg,可以访问官网了解更多产品信息。
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索莱宝

·  别名 : LPS 内毒素 细菌内毒素

·  英文名称 : Lipopolysaccharides(LPS)

·  储存条件 : 2-8°C冷藏保存

·  纯度 : ≥99%

·  外观(性状) : 白色至微褐色絮状冻干粉

·  单位 : 支

 

Lipopolysaccharides From Escherichia coli 055:B5

L8880 脂多糖产品进口分装的,脂多糖效价大于等于500000 EUmg,但每批产品效价有一定差别,我们产品主要是提供脂多糖的活性,相关应用方面的实验需要客户自己摸索和优化。

 

说明:

①脂质和多糖的复合物;②为革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分,脂多糖是内毒素的重要群特异性抗原(O抗原)。脂多糖由三部分组成。脂质A(Lipid A)为构成内毒素活性的糖脂,以共价键联结到杂多糖链,有两部分:一是核心多糖,在有关的株内是恒定的;另一O特异性链(O-specific chain)是高度可变的。大肠杆菌的脂多糖在实验室免疫学中是常用的B细胞促分裂因子即多克隆活化因子(polyclonal activator)。可用于细胞培养。

简介:

脂多糖,英文名称Lipopolysaccharides,简称LPS,是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种特有成分,位于细胞壁的最外层并暴露于非荚膜细菌的细胞表面,有利于维持细胞外膜的完整性,保护细菌免受胆汁盐和脂类抗生素的破坏。结构上,脂多糖由类脂A、核心多糖和O-多糖侧链组成。其中类脂质A是构成细菌内毒素的主要成分,决定其毒性强弱;而O-多糖侧链在不同细菌间是高度变化的,特异性决定细菌的血清型。
    LPS
可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。正是LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤。将LPS分别与FITCTRITC2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBSA)反应即可得到FITCTRITCTNP标记的LPS,主要用于非胸腺依赖性B细胞对细菌LPS的免疫应答研究。。
    LPS
可通过TCA、酚、酚氯仿石油醚等方法制备,其中最后一种方法为粗提取法。TCA和酚提取得到的LPS在结构上、电泳图谱和内毒素水平均较相似,不同之处在于含有的核酸和蛋白质残留量不同,TCA法得到的LPS含有约2%RNA10%的变性蛋白。酚法提取的LPS含有达60%RNA和少于1%的蛋白。用凝胶过滤层析可除去酚提取LPS中的残留蛋白,但是仍会留下约10-20%的核酸。进一步用离子交换层析法纯化可得到<1%蛋白和<1%RNALPS

本品来源于血清型大肠杆菌O55:B55,用苯法提取而得。其内毒素水平不少于500,000 EU (endotoxin units)/mg,经分析,1ng相当于5EU(鲎试剂法)和10EU(显色法)。LPS O55:B55可用于刺激人腹腔巨噬细胞(1ng/ml)以及马腹腔巨噬细胞的活动(1-100ng/ml)。

来源:Escherichia coli 055:B5

溶解性:可溶于水(10mg/ml)或细胞培养基(1mg/ml),产生浑浊淡黄色溶液,溶于盐溶液经旋涡振荡并加热到70-80℃可得到一种浓度更高的LPS溶液(20mg/ml)。

使用方法:

1. LPS储存液的配制,用于细胞培养相关实验:将1mg LPS重悬于1ml无菌平衡盐溶液或细胞培养基,轻轻旋涡振荡直至粉末完全溶解,即得到1mg/ml的储存液。此储存液可进一步用无菌平衡盐或细胞培养基稀释至需要的工作浓度。

2. LPS储存液的保存:本储存液(1mg/ml)可放在4℃保存,约一个月稳定;也可分装成单次用量后放到-20℃,2年稳定。避免反复冻融。

【注意】:1)LPS溶液应储存于硅烷化容器内,因为LPS可吸附于塑料或某些玻璃器皿,尤其当其浓度<0.1mg/ml时。但当LPS浓度大于1mg/ml时,上述吸附则可忽略不计。2)如使用玻璃器皿,则需旋涡振荡LPS溶液至少30min,以重溶被吸附溶质。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

浓度
规格 100mg
保存 2-8°C冷藏保存

脂多糖(LPS),索莱宝,L8880-10mg

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·  别名 : LPS 内毒素 细菌内毒素

·  英文名称 : Lipopolysaccharides(LPS)

·  储存条件 : 2-8°C冷藏保存

·  纯度 : ≥99%

·  外观(性状) : 白色至微褐色絮状冻干粉

·  单位 : 支

 

Lipopolysaccharides From Escherichia coli 055:B5

L8880 脂多糖产品进口分装的,脂多糖效价大于等于500000 EUmg,但每批产品效价有一定差别,我们产品主要是提供脂多糖的活性,相关应用方面的实验需要客户自己摸索和优化。

 

说明:

①脂质和多糖的复合物;②为革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分,脂多糖是内毒素的重要群特异性抗原(O抗原)。脂多糖由三部分组成。脂质A(Lipid A)为构成内毒素活性的糖脂,以共价键联结到杂多糖链,有两部分:一是核心多糖,在有关的株内是恒定的;另一O特异性链(O-specific chain)是高度可变的。大肠杆菌的脂多糖在实验室免疫学中是常用的B细胞促分裂因子即多克隆活化因子(polyclonal activator)。可用于细胞培养。

简介:

脂多糖,英文名称Lipopolysaccharides,简称LPS,是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种特有成分,位于细胞壁的最外层并暴露于非荚膜细菌的细胞表面,有利于维持细胞外膜的完整性,保护细菌免受胆汁盐和脂类抗生素的破坏。结构上,脂多糖由类脂A、核心多糖和O-多糖侧链组成。其中类脂质A是构成细菌内毒素的主要成分,决定其毒性强弱;而O-多糖侧链在不同细菌间是高度变化的,特异性决定细菌的血清型。
    LPS
可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。正是LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤。将LPS分别与FITCTRITC2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBSA)反应即可得到FITCTRITCTNP标记的LPS,主要用于非胸腺依赖性B细胞对细菌LPS的免疫应答研究。。
    LPS
可通过TCA、酚、酚氯仿石油醚等方法制备,其中最后一种方法为粗提取法。TCA和酚提取得到的LPS在结构上、电泳图谱和内毒素水平均较相似,不同之处在于含有的核酸和蛋白质残留量不同,TCA法得到的LPS含有约2%RNA10%的变性蛋白。酚法提取的LPS含有达60%RNA和少于1%的蛋白。用凝胶过滤层析可除去酚提取LPS中的残留蛋白,但是仍会留下约10-20%的核酸。进一步用离子交换层析法纯化可得到<1%蛋白和<1%RNALPS

本品来源于血清型大肠杆菌O55:B55,用苯法提取而得。其内毒素水平不少于500,000 EU (endotoxin units)/mg,经分析,1ng相当于5EU(鲎试剂法)和10EU(显色法)。LPS O55:B55可用于刺激人腹腔巨噬细胞(1ng/ml)以及马腹腔巨噬细胞的活动(1-100ng/ml)。

来源:Escherichia coli 055:B5

溶解性:可溶于水(10mg/ml)或细胞培养基(1mg/ml),产生浑浊淡黄色溶液,溶于盐溶液经旋涡振荡并加热到70-80℃可得到一种浓度更高的LPS溶液(20mg/ml)。

使用方法:

1. LPS储存液的配制,用于细胞培养相关实验:将1mg LPS重悬于1ml无菌平衡盐溶液或细胞培养基,轻轻旋涡振荡直至粉末完全溶解,即得到1mg/ml的储存液。此储存液可进一步用无菌平衡盐或细胞培养基稀释至需要的工作浓度。

2. LPS储存液的保存:本储存液(1mg/ml)可放在4℃保存,约一个月稳定;也可分装成单次用量后放到-20℃,2年稳定。避免反复冻融。

【注意】:1)LPS溶液应储存于硅烷化容器内,因为LPS可吸附于塑料或某些玻璃器皿,尤其当其浓度<0.1mg/ml时。但当LPS浓度大于1mg/ml时,上述吸附则可忽略不计。2)如使用玻璃器皿,则需旋涡振荡LPS溶液至少30min,以重溶被吸附溶质。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

浓度
规格 10mg
保存 2-8°C冷藏保存

黄芪多糖,索莱宝,A7970-10g

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询价
索莱宝
• 英文名称 : Astragalus Root Rgbrm • 储存条件 : 室温 • 纯度 : ≥90% • 外观(性状) : 棕(黄)褐色粉末,味微甜,具引湿性 黄芪多糖是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖。淡黄色,粉末细腻,均匀无杂质,具引湿性。黄芪多糖由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等组成,可作为免疫促进剂或调节剂,同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗氧化等作用。
浓度
规格 10g
保存 室温

黄芪多糖,索莱宝,A7970-5g

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• 英文名称 : Astragalus Root Rgbrm • 储存条件 : 室温 • 纯度 : ≥90% • 外观(性状) : 棕(黄)褐色粉末,味微甜,具引湿性 黄芪多糖是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖。淡黄色,粉末细腻,均匀无杂质,具引湿性。黄芪多糖由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等组成,可作为免疫促进剂或调节剂,同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗氧化等作用。
浓度
规格 5g
保存 室温