荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品 (停产) 货号11628-AAT Bioquest荧光染料

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荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品 (停产)

荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品 (停产)

货号 11628 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mg 价格 0
Ex (nm) 356 Em (nm) 456
分子量 352.55 溶剂 Water
产品详细介绍

简要概述

荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品是美国AAT Bioquest生产的荧光素,该产品在与磷酸酶相互作用后,无色和非荧光FDP被水解成高荧光荧光素,其表现出优异的光谱特性,与配备有氩激光激发的大多数荧光仪器的最佳检测相匹配。或者,FDP也可用于检测发色模式中的磷酸酶,因为酶产物(荧光素)表现出很大的消光系数(接近100,000cm-1mol-1)。在一些文献中,FDP被认为是最敏感的荧光磷酸酶底物之一。FDP已广泛用于各种ELISA测定。此外,它还用于检测酪氨酸磷酸酶。FDP是热不稳定的,需要特别注意保存固体样品和储备溶液。

Mup是用于磷酸酶的荧光底物。它广泛用于检测溶液中的磷酸酶。然而,这种磷酸酶底物不适合活细胞或连续测定,因为MU(4-甲基伞形酮)是酶产物,其仅在pH值> 10时发展出最大荧光。因此,也难以使用MUP检测具有酸性最佳pH范围的磷酸酶,例如酸性磷酸酶。

AAT Bioquest提供的CF-MUP Plus,用于解决与MUP基质相关的pH限制问题。CF-MU在pH 5.0以上表现出最大荧光,因此CF-MUP底物可以很好地用于连续磷酸酶测定。它还可以用于酸性pH的测定,例如酸性磷酸酶和一些蛋白磷酸酶。

衍生自红色荧光二甲基吖啶酮(Sun Red)的磷酸酶底物仅含有单个水解敏感部分,从而避免了基于荧光素底物的双相动力学。磷酸酶催化的太阳红磷酸盐(SRP)的水解产生可以用633nm激光激发并且发射~660nm的太阳红荧光团。虽然Sun Red很容易在633 nm处激发,红色发射约为660 nm,但SRP在633 nm处的吸收非常小,没有红色发射,使SRP成为最敏感的NIR磷酸酶传感器之一。请不要使用DMSO制备储备溶液,因为它会显著增加分析背景。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的荧光磷酸酶底物 CF-MUP钠盐 MUP的卓越代替品。

产品说明书

磷酸盐底物的测定方案

概述

在Tris缓冲液(50μL)中制备10-50μM磷酸盐

添加磷酸酶标准品和/或测试样品(50μL)

在室温或37℃孵育30至120分钟监测荧光强度

注意:以下是溶液中磷酸酶测定的推荐方案。 该说明仅提供指导,应根据具体需要进行修改。

 

1.准备工作解决方案:

1.1在升值溶剂中制备2至10 mM的储备溶液(见说明书中的表)。任何未使用的溶液需要等分并在<-20℃冷冻。

注意1:不要使用DMSO,ETOH或METH制备SunRed™磷酸盐(目录号11629)的原液,因为它可以显著提高分析背景。

注意2:避免反复冻融循环,避免光照。

1.2制备2X磷酸盐工作溶液:在实验当天,将底物溶解在升值溶剂中或在室温下解冻等份的储备溶液(来自步骤1.1)。在100 mM Tris缓冲液或您选择的缓冲液(pH 8至9)(非磷酸盐缓冲液)中制备10至50μM的2X工作溶液。

 

2.在上清液中进行磷酸酶测定:

2.1将50μL2X磷酸盐工作溶液(来自步骤1.2)加入磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,使总磷酸酶测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL2X磷酸盐工作溶液。

2.2在所需温度下孵育反应30至120分钟,避光。

2.3用荧光板读数器检测适当滤光片组(见说明书中的表)的荧光增加。

2.4空白孔中的荧光(仅用测定缓冲液)用作对照,并从具有磷酸酶反应的那些孔的值中减去。

 

参考文献

Application of intracellular alkaline phosphatase activity measurement in detection of neutrophil adherence in vitro
Authors: Bednarska K, Klink M, Sulowska Z.
Journal: Mediators Inflamm (2006): 19307

Evaluation of an alternative method for the enumeration and confirmation of Clostridium perfringens from treated and untreated sewages
Authors: Wohlsen T, Bayliss J, Gray B, Bates J, Katouli M.
Journal: Lett Appl Microbiol (2006): 438

Fluorometric cell-ELISA for quantifying rabies infection and heparin inhibition
Authors: Rincon V, Corredor A, Martinez-Gutierrez M, Castellanos JE.
Journal: J Virol Methods (2005): 33

Purification and partial characterization of an acid phosphatase from Spirodela oligorrhiza and its affinity for selected organophosphate pesticides
Authors: Hoehamer CF, Mazur CS, Wolfe NL.
Journal: J Agric Food Chem (2005): 90

Relative movement and soil fixation of soluble organic and inorganic phosphorus
Authors: Anderson BH, Magdoff FR.
Journal: J Environ Qual (2005): 2228

Crystal structure of a covalent intermediate of endogenous human arylsulfatase A
Authors: Chruszcz M, Laidler P, Monkiewicz M, Ortlund E, Lebioda L, Lewinski K.
Journal: J Inorg Biochem (2003): 386

Development of a rapid 1-h fluorescence-based cytotoxicity assay for Listeria species
Authors: Shroyer ML, Bhunia AK.
Journal: J Microbiol Methods (2003): 35

Enzymatic differentiation of Candida parapsilosis from other Candida spp. in a membrane filtration test
Authors: Bauters TG, Peleman R, Dhont M, Vanhaesebrouck P, Nelis HJ.
Journal: J Microbiol Methods (2003): 11

A colorimetric and fluorometric microplate assay for the detection of microcystin-LR in drinking water without preconcentration
Authors: Bouaicha N, Maatouk I, Vincent G, Levi Y.
Journal: Food Chem Toxicol (2002): 1677

LVV-hemorphin-4 modulates Ca2+/calmodulin-dependent pathways in the immune system by the same mechanism as in the brain
Authors: Barkhudaryan N, Gambarov S, Gyulbayazyan T, Nahapetyan K.
Journal: J Mol Neurosci (2002): 203

说明书
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Tide Fluor 5酸 Cy5的卓越代替品 货号2278-AAT Bioquest荧光染料

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Tide Fluor 5酸 Cy5的卓越代替品

Tide Fluor 5酸 Cy5的卓越代替品

Tide Fluor 5酸  Cy5的卓越代替品     货号2278 货号 2278 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 10 mg 价格 3924
Ex (nm) 649 Em (nm) 664
分子量 864.92 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Tide Fluor 5酸  Cy5的卓越代替品是美国AAT Bioquest生产的荧光探针,Tide Fluor 3(TF3)系列的光谱特性与Cy3的光谱特性基本相同。与Cy3探针相比,TF3家族具有更强的荧光和更高的光稳定性。此外,它们的荧光与pH不相关,pH值为3至11.这些特性使这种新染料系列成为Cy3的优良替代品。TF3标记的肽和核苷酸比用Cy3标记的肽具有更强的荧光和更高的光稳定性。在与我们的Tide Quencher 3(TQ3)配对时,可以开发多种FRET肽和核苷酸,用于检测具有增强的灵敏度和稳定性的蛋白酶和分子信标。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Tide Fluor 5酸  Cy5的卓越代替品。 

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产品说明书

用Tide Fluor 染料标记氨基修饰的寡核苷酸

        以下方案已经过优化,可用于标记200μg(~6 A260 nm单位)的专有寡核苷酸。 您需要根据您的特定实验调整操作方案。 您的氨基改性OLIGO必须进行处理以去除快速反应并消耗染料SUCCINIMIDYL酯的氨。

1.准备Oligo溶液(溶液A)

1.1将氨基修饰的oligo(~200μg)溶解在四硼酸盐缓冲液(100μL,pH 8.5±0.5)中。

注1:寡核苷酸必须在5’末端用胺基合成。参见Appenxidx 1纯化氨基修饰的寡核苷酸。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将1mg染料SE溶解在100μLDMSO中(如果可能,> 10mg / mL)。将小瓶侧面的溶液原液离心至小瓶底部。

注意:在开始缀合之前准备DMSO染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMSO染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1在搅拌或摇动(保持反应混合物避光)的同时向染料溶液(B,20-50μL)中加入寡聚物溶液(A,100μL)。

3.2在室温下在旋转器或振荡器上旋转或摇动反应混合物4-6小时。

注意:在第一个小时内每10分钟轻轻涡旋一下小瓶,以确保反应溶液保持充分混合。不要剧烈混合,因为材料可能留在小瓶的两侧。六小时后,应标记50-90%的胺修饰的寡核苷酸分子。如果更方便的话,反应可以孵育过夜。然而,在大多数情况下,过夜孵育不会导致更高的标记效率。

 

4.纯化染料 – 寡糖结合物

4.1通过乙醇沉淀标记的寡核苷酸进行初步纯化

4.1.1将20μL(一般十分之一反应溶液体积)的3M NaCl和300μL冷无水乙醇(通常为两个半反应溶液体积)加入反应小瓶中。

4.1.2充分混合溶液并将其置于-20℃下30分钟。

4.1.3将该溶液在微量离心机中以10,000至15,000×g离心30分钟。

注意:如果离心时间不够长,可能会导致样品丢失。

4.1.4小心取出上清液,用冷的70%乙醇冲洗沉淀1-3次并短暂干燥。

注意:一些未反应的标记试剂可能在反应过程中沉淀或可能粘在反应瓶的壁上。在离心之前,通过大量涡旋混合将该材料完全再溶解。重新溶解标记试剂可确保沉淀的寡核苷酸最少被未反应的标记物污染。

4.2通过HPLC或凝胶电泳进行最终纯化

 

使用Tide Fluor 染料标记肽

        以下方案已经过优化,用于标记10 mg仅含有一个游离氨基的专利肽(MW~2000)。您需要根据您的实验,调整实验方案。

1.制备肽溶液(溶液A)

1.1将肽(~10 mg)溶解在DMF(~1 ml)中。

注1:肽必须用碱如三乙胺或碳酸钾中和。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将5mg染料SE溶解在500μLDMF中(如果可能,> 10mg / mL)。

注意:在开始缀合之前准备DMF染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMF染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1向染料溶液(B,500μL)中加入肽溶液(A,1mL),搅拌或摇动(保持反应混合物不发光)。

3.2在室温下搅拌反应混合物4-6小时。

 

4.纯化染料 – 肽缀合物

4.1浓缩反应溶液并在C18柱上纯化,得到所需的缀合物。通过HPLC分析级分,合并> 97%纯度的级分并冻干。

注1:HPLC纯化条件:TEAB缓冲液(三乙基碳酸氢铵,0.25mmol,pH = 7.0-8.0)用作缓冲液A,乙腈用作缓冲液B. HPLC在60分钟内从0%B至30%B进行(流速:100毫升/分钟)。

注2:操作过程中避免强光。

 

参考文献

Fluorescent DNA: the development of 7-deazapurine nucleoside triphosphates applicable for sequencing at the single molecule level
Authors: Seela F, Feiling E, Gross J, Hillenkamp F, Ramzaeva N, Rosemeyer H, Zulauf M.
Journal: J Biotechnol (2001): 269

 

相关产品

产品名称 货号
Tide Fluor 5马来酰亚胺 Cy5的卓越代替品 Cat#2280
Tide Fluor 5胺 Cy5的卓越代替品 Cat#2279
Tide Fluor 2酸 FITC的卓越替代物 Cat#2348

说明书
Tide Fluor 5酸 Cy5的卓越代替品 .pdf

Tide Fluor 5胺 Cy5的卓越代替品 货号2279-AAT Bioquest荧光染料

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Tide Fluor 5胺 Cy5的卓越代替品

Tide Fluor 5胺 Cy5的卓越代替品

Tide Fluor 5胺  Cy5的卓越代替品     货号2279 货号 2279 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 649 Em (nm) 664
分子量 1021.03 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Tide Fluor 5WS(TF5WS)系列具有与Cy5相同的光谱特性。 与Cy5探针相比,TF5WS系列具有更强的荧光和更高的光稳定性。 此外,它们的荧光在3到11之间不受pH限制。这些特性使这种新染料家族成为Cy5的优良替代品。 TF5WS标记的肽和核苷酸比用Cy5标记的肽和核苷酸显示出更强的荧光和更高的光稳定性。 与我们的Tide Quencher™5WS(TQ5WS)配合使用,可以开发出多种FRET肽和核苷酸来检测蛋白酶和分子信标,从而提高了灵敏度和稳定性。 该TF5WS产品主要用于标记含有羰基的小分子。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Tide Fluor 5胺  Cy5的卓越代替品。 

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产品说明书

用Tide Fluor 染料标记氨基修饰的寡核苷酸

        以下方案已经过优化,可用于标记200μg(~6 A260 nm单位)的专有寡核苷酸。 您需要根据您的特定实验调整操作方案。 您的氨基改性OLIGO必须进行处理以去除快速反应并消耗染料SUCCINIMIDYL酯的氨。

1.准备Oligo溶液(溶液A)

1.1将氨基修饰的oligo(~200μg)溶解在四硼酸盐缓冲液(100μL,pH 8.5±0.5)中。

注1:寡核苷酸必须在5’末端用胺基合成。参见Appenxidx 1纯化氨基修饰的寡核苷酸。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将1mg染料SE溶解在100μLDMSO中(如果可能,> 10mg / mL)。将小瓶侧面的溶液原液离心至小瓶底部。

注意:在开始缀合之前准备DMSO染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMSO染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1在搅拌或摇动(保持反应混合物避光)的同时向染料溶液(B,20-50μL)中加入寡聚物溶液(A,100μL)。

3.2在室温下在旋转器或振荡器上旋转或摇动反应混合物4-6小时。

注意:在第一个小时内每10分钟轻轻涡旋一下小瓶,以确保反应溶液保持充分混合。不要剧烈混合,因为材料可能留在小瓶的两侧。六小时后,应标记50-90%的胺修饰的寡核苷酸分子。如果更方便的话,反应可以孵育过夜。然而,在大多数情况下,过夜孵育不会导致更高的标记效率。

 

4.纯化染料 – 寡糖结合物

4.1通过乙醇沉淀标记的寡核苷酸进行初步纯化

4.1.1将20μL(一般十分之一反应溶液体积)的3M NaCl和300μL冷无水乙醇(通常为两个半反应溶液体积)加入反应小瓶中。

4.1.2充分混合溶液并将其置于-20℃下30分钟。

4.1.3将该溶液在微量离心机中以10,000至15,000×g离心30分钟。

注意:如果离心时间不够长,可能会导致样品丢失。

4.1.4小心取出上清液,用冷的70%乙醇冲洗沉淀1-3次并短暂干燥。

注意:一些未反应的标记试剂可能在反应过程中沉淀或可能粘在反应瓶的壁上。在离心之前,通过大量涡旋混合将该材料完全再溶解。重新溶解标记试剂可确保沉淀的寡核苷酸最少被未反应的标记物污染。

4.2通过HPLC或凝胶电泳进行最终纯化

 

使用Tide Fluor 染料标记肽

        以下方案已经过优化,用于标记10 mg仅含有一个游离氨基的专利肽(MW~2000)。您需要根据您的实验,调整实验方案。

1.制备肽溶液(溶液A)

1.1将肽(~10 mg)溶解在DMF(~1 ml)中。

注1:肽必须用碱如三乙胺或碳酸钾中和。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将5mg染料SE溶解在500μLDMF中(如果可能,> 10mg / mL)。

注意:在开始缀合之前准备DMF染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMF染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1向染料溶液(B,500μL)中加入肽溶液(A,1mL),搅拌或摇动(保持反应混合物不发光)。

3.2在室温下搅拌反应混合物4-6小时。

 

4.纯化染料 – 肽缀合物

4.1浓缩反应溶液并在C18柱上纯化,得到所需的缀合物。通过HPLC分析级分,合并> 97%纯度的级分并冻干。

注1:HPLC纯化条件:TEAB缓冲液(三乙基碳酸氢铵,0.25mmol,pH = 7.0-8.0)用作缓冲液A,乙腈用作缓冲液B. HPLC在60分钟内从0%B至30%B进行(流速:100毫升/分钟)。

注2:操作过程中避免强光。

 

参考文献

Fluorescent DNA: the development of 7-deazapurine nucleoside triphosphates applicable for sequencing at the single molecule level
Authors: Seela F, Feiling E, Gross J, Hillenkamp F, Ramzaeva N, Rosemeyer H, Zulauf M.
Journal: J Biotechnol (2001): 269

 

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产品名称 货号
Tide Fluor 5酸 Cy5的卓越代替品 Cat#2278
Tide Fluor 5马来酰亚胺 Cy5的卓越代替品 Cat#2280
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说明书
Tide Fluor 5胺 Cy5的卓越代替品 .pdf

Tide Fluor 5马来酰亚胺 Cy5的卓越代替品 货号2280-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Tide Fluor 5马来酰亚胺 Cy5的卓越代替品

Tide Fluor 5马来酰亚胺 Cy5的卓越代替品

Tide Fluor 5马来酰亚胺  Cy5的卓越代替品     货号2280 货号 2280 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 649 Em (nm) 664
分子量 987.05 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Tide Fluor 5WS(TF5WS)系列具有与Cy5相同的光谱特性。 与Cy5探针相比,TF5WS系列具有更强的荧光和更高的光稳定性。 此外,它们的荧光在3到11之间不受pH限制。这些特性使这种新染料家族成为Cy5的优良替代品。 TF5WS标记的肽和核苷酸比用Cy5标记的肽和核苷酸显示出更强的荧光和更高的光稳定性。 与我们的Tide Quencher™5WS(TQ5WS)配合使用,可以开发出多种FRET肽和核苷酸来检测蛋白酶和分子信标,从而提高了灵敏度和稳定性。 该TF5WS产品用于硫醇修饰的寡核苷酸和含半胱氨酸的肽的标记。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Tide Fluor 5马来酰亚胺  Cy5的卓越代替品。 

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产品说明书

用Tide Fluor 染料标记氨基修饰的寡核苷酸

        以下方案已经过优化,可用于标记200μg(~6 A260 nm单位)的专有寡核苷酸。 您需要根据您的特定实验调整操作方案。 您的氨基改性OLIGO必须进行处理以去除快速反应并消耗染料SUCCINIMIDYL酯的氨。

1.准备Oligo溶液(溶液A)

1.1将氨基修饰的oligo(~200μg)溶解在四硼酸盐缓冲液(100μL,pH 8.5±0.5)中。

注1:寡核苷酸必须在5’末端用胺基合成。参见Appenxidx 1纯化氨基修饰的寡核苷酸。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将1mg染料SE溶解在100μLDMSO中(如果可能,> 10mg / mL)。将小瓶侧面的溶液原液离心至小瓶底部。

注意:在开始缀合之前准备DMSO染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMSO染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1在搅拌或摇动(保持反应混合物避光)的同时向染料溶液(B,20-50μL)中加入寡聚物溶液(A,100μL)。

3.2在室温下在旋转器或振荡器上旋转或摇动反应混合物4-6小时。

注意:在第一个小时内每10分钟轻轻涡旋一下小瓶,以确保反应溶液保持充分混合。不要剧烈混合,因为材料可能留在小瓶的两侧。六小时后,应标记50-90%的胺修饰的寡核苷酸分子。如果更方便的话,反应可以孵育过夜。然而,在大多数情况下,过夜孵育不会导致更高的标记效率。

 

4.纯化染料 – 寡糖结合物

4.1通过乙醇沉淀标记的寡核苷酸进行初步纯化

4.1.1将20μL(一般十分之一反应溶液体积)的3M NaCl和300μL冷无水乙醇(通常为两个半反应溶液体积)加入反应小瓶中。

4.1.2充分混合溶液并将其置于-20℃下30分钟。

4.1.3将该溶液在微量离心机中以10,000至15,000×g离心30分钟。

注意:如果离心时间不够长,可能会导致样品丢失。

4.1.4小心取出上清液,用冷的70%乙醇冲洗沉淀1-3次并短暂干燥。

注意:一些未反应的标记试剂可能在反应过程中沉淀或可能粘在反应瓶的壁上。在离心之前,通过大量涡旋混合将该材料完全再溶解。重新溶解标记试剂可确保沉淀的寡核苷酸最少被未反应的标记物污染。

4.2通过HPLC或凝胶电泳进行最终纯化

 

使用Tide Fluor 染料标记肽

        以下方案已经过优化,用于标记10 mg仅含有一个游离氨基的专利肽(MW~2000)。您需要根据您的实验,调整实验方案。

1.制备肽溶液(溶液A)

1.1将肽(~10 mg)溶解在DMF(~1 ml)中。

注1:肽必须用碱如三乙胺或碳酸钾中和。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将5mg染料SE溶解在500μLDMF中(如果可能,> 10mg / mL)。

注意:在开始缀合之前准备DMF染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMF染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1向染料溶液(B,500μL)中加入肽溶液(A,1mL),搅拌或摇动(保持反应混合物不发光)。

3.2在室温下搅拌反应混合物4-6小时。

 

4.纯化染料 – 肽缀合物

4.1浓缩反应溶液并在C18柱上纯化,得到所需的缀合物。通过HPLC分析级分,合并> 97%纯度的级分并冻干。

注1:HPLC纯化条件:TEAB缓冲液(三乙基碳酸氢铵,0.25mmol,pH = 7.0-8.0)用作缓冲液A,乙腈用作缓冲液B. HPLC在60分钟内从0%B至30%B进行(流速:100毫升/分钟)。

注2:操作过程中避免强光。

 

参考文献

Fluorescent DNA: the development of 7-deazapurine nucleoside triphosphates applicable for sequencing at the single molecule level
Authors: Seela F, Feiling E, Gross J, Hillenkamp F, Ramzaeva N, Rosemeyer H, Zulauf M.
Journal: J Biotechnol (2001): 269

 

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Tide Fluor 2马来酰亚胺 FITC的卓越替代物 Cat#2350

说明书
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Tide Fluor 5琥珀酰亚胺酯 Cy5的卓越代替品 货号2281-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。

Tide Fluor 5琥珀酰亚胺酯 Cy5的卓越代替品

Tide Fluor 5琥珀酰亚胺酯 Cy5的卓越代替品

Tide Fluor 5琥珀酰亚胺酯  Cy5的卓越代替品     货号2281 货号 2281 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 5 mg 价格 3924
Ex (nm) 649 Em (nm) 664
分子量 1050.35 溶剂 DMSO
产品详细介绍

简要概述

Tide Fluor 5WS(TF5WS)系列具有与Cy5相同的光谱特性。 与Cy5探针相比,TF5WS系列具有更强的荧光和更高的光稳定性。 此外,它们的荧光在3到11之间不受pH限制。这些特性使这种新染料家族成为Cy5的优良替代品。 TF5WS标记的肽和核苷酸比用Cy5标记的肽和核苷酸显示出更强的荧光和更高的光稳定性。 与我们的Tide Quencher™5(TQ5)配合使用,可以开发出多种FRET肽和核苷酸来检测蛋白酶和分子信标,从而提高了灵敏度和稳定性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Tide Fluor 5琥珀酰亚胺酯。 

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产品说明书

用Tide Fluor 染料标记氨基修饰的寡核苷酸

以下方案已经过优化,可用于标记200μg(~6 A260 nm单位)的专有寡核苷酸。 您需要根据您的实验调整相应的实验步骤以达到实验的最佳效果。 您的氨基改性OLIGO必须进行处理以去除快速反应并消耗染料SUCCINIMIDYL酯的氨。

1.准备Oligo溶液

1.1将氨基修饰的oligo(~200μg)溶解在四硼酸盐缓冲液(100μL,pH 8.5±0.5)中。

注1:寡核苷酸必须在5’末端用胺基合成。 参见Appenxidx 1纯化氨基修饰的寡核苷酸。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液

2.1通过上下吸移将1mg染料SE溶解在100μLDMSO中(如果可能,> 10mg / mL)。 将小瓶侧面的溶液原液离心至小瓶底部。

注意:在开始缀合之前准备DMSO染料溶液。 染料溶液的长期储存可降低染料活性。 任何含有染料的溶液都应避光。 我们不建议您存储DMSO染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1在搅拌或摇动(保持反应混合物避光)的同时向染料溶液(B,20-50μL)中加入寡聚物溶液(A,100μL)。

3.2在室温下在旋转器或振荡器上旋转或摇动反应混合物4-6小时。

注意:在第一个小时内每10分钟轻轻涡旋一下小瓶,以确保反应溶液保持充分混合。 不要剧烈混合,因为材料可能留在小瓶的两侧。 六小时后,应标记50-90%的胺修饰的寡核苷酸分子。 如果更方便的话,反应可以孵育过夜。 然而,在大多数情况下,过夜孵育不会导致更高的标记效率。

 

4.纯化染料 – 寡糖结合物

4.1通过乙醇沉淀标记的寡核苷酸进行初步纯化

4.1.1将20μL(一般十分之一反应溶液体积)的3M NaCl和300μL冷无水乙醇(通常为两个半反应溶液体积)加入反应小瓶中。

4.1.2充分混合溶液并将其置于-20℃下30分钟。

4.1.3将该溶液在微量离心机中以10,000至15,000×g离心30分钟。

注意:如果离心时间不够长,可能会导致样品丢失。

4.1.4小心取出上清液,用冷的70%乙醇冲洗沉淀1-3次并短暂干燥。

注意:一些未反应的标记试剂可能在反应过程中沉淀或可能粘在反应瓶的壁上。在离心之前,通过大量涡旋混合将该材料完全再溶解。重新溶解标记试剂可确保沉淀的寡核苷酸最少被未反应的标记物污染。

4.2通过HPLC或凝胶电泳进行最终纯化

 

使用Tide Fluor 染料标记肽

以下方案已经过优化,用于标记10 mg仅含有一个游离氨基的专利肽(MW~2000)。您需要根据您的实验,调整相应的步骤以达到最佳的实验效果。

1.制备肽溶液(溶液A)

1.1将肽(~10 mg)溶解在DMF(~1 ml)中。

注1:肽必须用碱如三乙胺或碳酸钾中和。

注2:避免使用含有伯胺的缓冲液,如Tris,因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

 

2.准备染料溶液(溶液B)

2.1通过上下吸移将5mg染料SE溶解在500μLDMF中(如果可能,> 10mg / mL)。

注意:在开始缀合之前准备DMF染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMF染料溶液以备将来使用。

 

3.运行共轭反应

3.1向染料溶液(B,500μL)中加入肽溶液(A,1mL),搅拌或摇动(保持反应混合物不发光)。

3.2在室温下搅拌反应混合物4-6小时。

 

4.纯化染料 – 肽缀合物

4.1浓缩反应溶液并在C18柱上纯化,得到所需的缀合物。通过HPLC分析级分,合并> 97%纯度的级分并冻干。

注1:HPLC纯化条件:TEAB缓冲液(三乙基碳酸氢铵,0.25mmol,pH = 7.0-8.0)用作缓冲液A,乙腈用作缓冲液B. HPLC在60分钟内从0%B至30%B进行(流速:100毫升/分钟)。

注2:操作过程中避免强光。

 

参考文献

Inhibiting fibronectin polymerization alleviates kidney injury due to ischemia/reperfusion
Authors: Stephanie LK Bowers, Stephanie Davis-Rodriguez, Zachary M Thomas, Valeriia Rudomanova, W Clark Bacon, Alex Beiersdorfer, Qing Ma, Prasad Devarajan, Burns C Blaxall
Journal: American Journal of Physiology-Renal Physiology (2019)

A mechanistic model to predict effects of cathepsin B and cystatin C on β-amyloid aggregation and degradation
Authors: Tyler J Perlenfein, Regina M Murphy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): jbc–M117

Real-Time Detection of a Self-Replicating RNA Enzyme
Authors: Charles Olea, Gerald F Joyce
Journal: Molecules (2016): 1310

Development of a universal RNA beacon for exogenous gene detection
Authors: Yuanjian Guo, Zhongju Lu, Ira Stephen Cohen, Suzanne Scarlata
Journal: Stem cells translational medicine (2015): 476–482

Development of Multi-Parametric/Multimodal Spectroscopy Apparatus for Characterization of Functional Interfaces
Authors: Lang Zhou, Mary Arugula, Christopher J Easley, Curtis Shannon, Aleksandr Simonian
Journal: ECS Transactions (2015): 9–16

Maternal serum glycosylated fibronectin as a point-of-care biomarker for assessment of preeclampsia
Authors: Juha Rasanen, Matthew J Quinn, Amber Laurie, Eric Bean, Charles T Roberts, Srinivasa R Nagalla, Michael G Gravett
Journal: American journal of obstetrics and gynecology (2015): 82–e1

Array of biodegradable microrafts for isolation and implantation of living, adherent cells
Authors: Yuli Wang, Colleen N Phillips, Gabriela S Herrera, Christopher E Sims, Jen Jen Yeh, Nancy L Allbritton
Journal: RSC advances (2013): 9264–9272

Development of SNAP-Tag Fluorogenic Probes for Wash-Free Fluorescence Imaging
Authors: Xiaoli Sun, Aihua Zhang, Brenda Baker, Luo Sun, Angela Howard, John Buswell, Damien Maurel, Anastasiya Masharina, Kai Johnsson, Christopher J Noren
Journal: ChemBioChem (2011): 2217–2226

FERRAMENTAS PARA ESTUDO DA BIOLOGIA DE GPCRS (G-PROTEIN COUPLED RECEPTORS)
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RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*    货号21189 货号 21189 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1272
Ex (nm) 504 Em (nm) 527
分子量 ~500 溶剂 DMSO
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分子量:~500

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激发波长(nm):503

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RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*是美国AAT Bioquest生产的BCFL染料,细胞内pH在许多细胞事件中起着重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感的荧光染料已广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还使研究人员能够以更大的空间分辨率和采样密度研究这些过程,这可以使用其他技术(例如微电极)来实现。其中,2’,7′-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF)是最受欢迎的pH探针,因为它可用于按比例监测细胞的pH。然而,所有商用BCECF AM是至少三种异构体的复杂混合物,批次之间的比率不同,这使BCECF应用变得复杂。开发BCFL是为了克服与BCECF AM相关的异构体难题。作为BCECF,BCFL表现出pH依赖性的双重激发,与BCECF基本相同。它的pKa约为7.0,也与BCECF相同。与BCECF一样,BCFL的双激发光谱在454 nm处具有等吸收点,应使BCFL成为良好的激发比pH指示剂。BCFL比例成像使细胞内pH值测定基本上独立于几个可变因素,包括染料浓度,光程长度,细胞渗漏和光漂白速率。BCFL,AM是单一异构体,因此pH值的测量比BCECF,AM更可重复,由许多不同的异构体组成 该BCFL是BCFL AM的酯酶水解产物,可与BCFL AM一起用作参考标准。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks BCFL,酸*BCECF的卓越代替品*。 

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操作方法

 1.用pH 3到10(3、4、5、6、7、7.5、8、10)制备一系列50 mM磷酸盐缓冲液

 2.制成1 mM DMSO储备溶液。如果在-20°C下储存,则DMSO储备液可保存6个月。

 3.制作 1:将1000稀释液放入不同的pH缓冲液中以得到1uM。

 4.在Ex / Em = 500/535和430/535 nm下测量荧光比。

 

参考文献

The F0F1 ATP synthase regulates human neutrophil migration through cytoplasmic proton extrusion coupled with ATP generation
Authors: Jun Gao, Tian Zhang, Zhanfang Kang, Weijen Ting, Lingqing Xu, Dazhong Yin
Journal: Molecular Immunology (2017): 219–226

Oxidative Stress-Activated NHE1 Is Involved in High Glucose-Induced Apoptosis in Renal Tubular Epithelial Cells
Authors: Yiqing Wu, Min Zhang, Rui Liu, Chunjie Zhao
Journal: Yonsei Medical Journal (2016): 1252–1259

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RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品*    货号21190 货号 21190 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 1944
Ex (nm) 504 Em (nm) 527
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产品物理化学光谱特性

分子量:~600

溶剂:DMSO

激发波长(nm):503

发射波长(nm):528

 

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RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品*是美国AAT Bioquest生产的BCFL染料,细胞内pH在许多细胞事件中起着重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感的荧光染料已广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还使研究人员能够以更大的空间分辨率和采样密度研究这些过程,这可以使用其他技术(例如微电极)来实现。其中,2’,7′-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF)是最受欢迎的pH探针,因为它可用于按比例监测细胞的pH。然而,所有商用BCECF AM是至少三种异构体的复杂混合物,批次之间的比率不同,这使BCECF应用变得复杂。开发BCFL是为了克服与BCECF AM相关的异构体难题。作为BCECF,BCFL表现出pH依赖性的双重激发,与BCECF基本相同。它的pKa约为7.0,也与BCECF相同。与BCECF一样,BCFL的双激发光谱在454 nm处具有等吸收点,应使BCFL成为良好的激发比pH指示剂。BCFL比例成像使细胞内pH值测定基本上独立于几个可变因素,包括染料浓度,光程长度,细胞渗漏和光漂白速率。BCFL,AM是单一异构体,因此pH值的测量比BCECF,AM更可重复,由许多不同的异构体组成 该BCFL是BCFL AM的酯酶水解产物,可与BCFL AM一起用作参考标准。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks BCFL,AM*BCECF的卓越代替品*。 

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参考文献

The F0F1 ATP synthase regulates human neutrophil migration through cytoplasmic proton extrusion coupled with ATP generation
Authors: Jun Gao, Tian Zhang, Zhanfang Kang, Weijen Ting, Lingqing Xu, Dazhong Yin
Journal: Molecular Immunology (2017): 219–226

Oxidative Stress-Activated NHE1 Is Involved in High Glucose-Induced Apoptosis in Renal Tubular Epithelial Cells
Authors: Yiqing Wu, Min Zhang, Rui Liu, Chunjie Zhao
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RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品* 货号21191-AAT Bioquest荧光染料

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RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*    货号21191 货号 21191 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 1 mg 价格 2604
Ex (nm) 504 Em (nm) 527
分子量 ~700 溶剂 DMSO
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货号:21191

产品名称:RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*

规格:1mg

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:~700

溶剂:DMSO

激发波长(nm):503

发射波长(nm):528

 

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RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*是美国AAT Bioquest生产的BCFL染料,细胞内pH在许多细胞事件中起着重要的调节作用,包括细胞生长,钙调节,酶活性,受体介导的信号转导,离子转运,内吞作用,趋化作用,细胞粘附和其他细胞过程。近年来,pH敏感的荧光染料已广泛应用于监测细胞内pH的变化。使用荧光pH指示剂的成像技术还使研究人员能够以更大的空间分辨率和采样密度研究这些过程,这可以使用其他技术(例如微电极)来实现。其中,2’,7′-双-(2-羧乙基)-5-(和-6)-羧基荧光素(BCECF)是最受欢迎的pH探针,因为它可用于按比例监测细胞的pH。然而,所有商用BCECF AM是至少三种异构体的复杂混合物,批次之间的比率不同,这使BCECF应用变得复杂。开发BCFL是为了克服与BCECF AM相关的异构体难题。作为BCECF,BCFL表现出pH依赖性的双重激发,与BCECF基本相同。它的pKa约为7.0,也与BCECF相同。与BCECF一样,BCFL的双激发光谱在454 nm处具有等吸收点,应使BCFL成为良好的激发比pH指示剂。BCFL比例成像使细胞内pH值测定基本上独立于几个可变因素,包括染料浓度,光程长度,细胞渗漏和光漂白速率。BCFL,AM是单一异构体,因此pH值的测量比BCECF,AM更可重复,由许多不同的异构体组成 该BCFL是BCFL AM的酯酶水解产物,可与BCFL AM一起用作参考标准。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的RatioWorks BCFL,SE*BCECF的卓越代替品*。 

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参考文献

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