Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 适合流式细胞检测 货号22802-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 适合流式细胞检测

Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒 适合流式细胞检测     货号22802 货号 22802 存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
规格 100 Tests 价格 2604
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
产品详细介绍

简要概述

我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量线粒体膜电位的丧失来检测细胞凋亡。线粒体膜电位的崩溃与线粒体通透性过渡孔的开放相吻合,导致细胞色素C释放到细胞质中,进而触发凋亡级联反应中的其他下游事件。我们的Cell Meter NIR膜电位检测试剂盒为所有必需成分提供了优化的测定方法,可检测细胞凋亡的线粒体膜电位。该荧光测定法是基于我们专有的阳离子MitoLite NIR 染料对细胞中线粒体膜电位的检测。在正常细胞中,MitoLite NIR 主要在线粒体中积累,但是在凋亡细胞中,MitoLite NIR 染色强度降低。通过MitoLite NIR 染色的细胞可以通过流式细胞术观察到红色激发和远红色发射(FL4通道)。该试剂盒可与其他试剂配对,例如蓝激发碘化丙啶和Cell Meter 磷脂酰丝氨酸凋亡检测试剂盒(#22803),用于多参数研究细胞活力和凋亡。该试剂盒经过优化,可通过流式细胞仪筛选凋亡激活剂和抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Cell Meter 线粒体膜电位近红外检测试剂盒。

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适用仪器


流式细胞仪  
激发: 640nm激光
发射: 660/20nm滤波片
通道: APC通道

产品说明书

样品实验方案

简要概述

  1. 用5×105至1×106细胞/ mL的密度制备含测试化合物的细胞
  2. 将5 µL 200X MitoLite NIR加入1 mL细胞溶液中
  3. 在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞15-30分钟
  4. 沉淀细胞,并将细胞重悬于1 mL生长培养基中
  5. 使用带有FL4通道的流式细胞仪分析细胞

 

操作步骤

1.对于每个样品,在1 mL温暖的培养基或您选择的缓冲液中以5×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。 注意:应单独评估每种细胞系,以确定诱导凋亡的最佳细胞密度。

2.用测试化合物处理细胞一段时间,以诱导细胞凋亡,并建立平行对照实验。

阴性对照:仅用载体处理细胞。

阳性对照:在37℃,5%CO2培养箱中,以5-50 µM的浓度用FCCP或CCCP处理细胞15至30分钟。 注意:CCCP或FCCP可以与MitoLite NIR同时添加。 为了获得最佳结果,可能需要为每个单独的细胞系滴定CCCP或FCCP。

3.向处理过的细胞中加入5 µL 200X MitoLite NIR(组分A)。

4.将细胞在37°C,5%CO2培养箱中孵育15至30分钟。 注意:对于贴壁细胞,在用MitoLite NIR染料上样溶液孵育之前,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并用含血清的培养基洗涤一次。

5.以1000 rpm离心细胞4分钟,然后将细胞重悬于1 mL分析缓冲液(组分B)或您选择的缓冲液中。

6.使用带有FL4通道的流式细胞仪(Ex / Em = 635/660 nm)检测荧光强度。

 

参考文献

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说明书
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