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- 产品货号:
- BN14073
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- 中文名称:
- NerveRedTM C2(FM4-64)
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- 品牌:
- Biorigin
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货号
产品规格
售价
备注
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BN14073-5mg
5mg
¥2700.00
染色剂/指示剂
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BN14073-5 x 1mg
5 x 1mg
¥3200.00
染色剂/指示剂
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BN14073-1mg
1mg
¥720.00
产品描述
应用范围:神经荧光染料
产品参数
外观:可溶于水的紫色固体
Abs/Em (in MeOH): 543/- nm, (emission in MeOH is too weak to measure)
Abs/Em (in membranes) :510/750 nm
贮存条件:-20℃避光保存
保质期:12 个月
分子式:C30H45Br2N3
分子量:607.51
产品介绍
神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料,用于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部。 NerveRed 系列探针是具有三个双键的染料。
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时,染料的水相部分没有荧光,而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后,在进行胞吞作用时,染料被包裹在囊泡内,因此,洗去细胞表面附着的染料后,荧光信号强弱表示新形成 的囊泡的数量的多少。反之,在胞吐作用时,染料与神经递质一起从囊泡释放,导致荧光信号减少。因此,荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率 ——“解离速率”因染料种类而异。通常,具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力,因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。
NerveRed C2 染料不能用于固定细胞染色,固定细胞的染色可选择 NM 系列染料。
实验操作
以下是盖玻片上培养的神经元细胞的神经末梢染色方案。
神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞囊泡。染色可以在 4℃进行以选择性标记质膜; 在室温或 37℃下,染料的内吞通常在 10 min 内发生。可以使用 Tyrode 溶液或其它缓冲液,可选择性添加钠离子通道阻断剂河豚毒 素(TTX),其目的是阻断动作电位,防止染色后的突触囊泡释放。用于特定实验的最佳方案需要由实验者摸索。
1. 在 50 mM Tyrode 溶液中稀释神经末梢染料至最终浓度为 4 μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中 1 min,使细胞完全浸没。
2. 将盖玻片转移至 Tyrode + 0.5 μM 河豚毒素(TTX)溶液中,室温下孵育 1 min。
3. 室温下,用 Tyrode + 0.5 μM TTX 溶液反复多次洗涤盖玻片。
4. 荧光显微镜下拍照观察。
图. FM4-64 在脂质体中的吸收和发射光谱。
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