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ROS Brite 活性氧荧光探针APF
| 货号 | 16050 | 存储条件 | F/L |
| 规格 | 1 mg | ||
| Ex (nm) | 492 | Em (nm) | 515 |
| 分子量 | 423.42 | 溶剂 | DMSO |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
ROS Brite 活性氧荧光探针APF是美国AAT Bioquest研发的检测活性氧的荧光探针，活性氧（ROS）是含氧的化学反应性分子（如超氧化物，羟基，单线态氧和过氧化物）。由于存在不成对的价电子，ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物，并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如，UV或热暴露）期间，ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地，这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离 产生。在氧化应激条件下，ROS产生显着增加，导致随后膜脂，蛋白质和核酸的改变。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件有关，包括动脉粥样硬化，致癌作用，缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病。细胞渗透性ROS Brite APF和HPF试剂是非荧光的并且在与羟基自由基反应时产生亮绿色荧光（激发/发射= 490 / 515nm），APF也将与次**根阴离子（OCl-）反应。此外，APF和HPF在过氧化物酶存在下也与过氧化氢反应。可以使用荧光成像，高内容成像，微孔板荧光测定法或流式细胞术测量所得荧光。 APF和HPF显示出对光诱导氧化的相对高的抗性。 APF和HPF在与羟基或过氧亚**根阴离子反应之前是非荧光的。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的ROS检测探针。
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产品说明书
ROS Brite 染料的分析方案
该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。在制备ROS Brite 工作溶液之前，根据需要处理细胞。
1）在DMSO中制备10至20mM ROS Brite APF（或HPF）储备溶液。通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液（HHBS）的Hanks溶液中，制备1至10μM的工作溶液。
2）根据需要处理细胞（例如，用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时）。
3）用ROS Brite APF（或HPF）（1-10μM，步骤＃1）在37℃孵育细胞20-60分钟。
4）用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。
5）用适当的荧光仪器在Ex / Em = 490 / 525mm（截止= 515nM）下用底部读取模式分析细胞（例如，用于荧光显微镜的FITC滤光片，用于流式细胞仪的FL1滤光片）。
注意：BSA和酚红会影响荧光，应谨慎使用。 APF和HPF均可用于溶液测定或细胞内测量。