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红色荧光示踪探针 CytoTrace CMTPX
简要概述
红色荧光示踪探针 CytoTrace CMTPX是美国AAT Bioquest生产的荧光示踪探针,CytoTrace Red CMTPX与CellTracker CMTPX在化学上相同。CytoTrace 红色CMTPX可以自由地通过细胞膜进入细胞,在细胞中转化为细胞不渗透的反应产物。CytoTrace 红色CMTPX染料经过几代保留在活细胞中。染料转移到子细胞但不转移到群体中的相邻细胞。CytoTrace 红色CMTPX染料设计用于显示荧光至少72小时,并且染料具有理想的跟踪特性。另外,Red CMTPX Red CMPTX染料的激发和发射光谱与GFP(绿色荧光蛋白)光谱很好地分离,允许多路复用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的红色荧光示踪探针 CytoTrace CMTPX。
产品说明书
操作步骤
准备2-10 mMDMSO储备溶液
对于#22014添加45微升DMSO成50 μ 克小瓶使2mM的储备溶液(1毫克/毫升,相当于1.8毫摩尔);
对于#22015添加36微升DMSO成50 μ 克小瓶制成10mM储备溶液(1毫克/毫升,相当于1.46毫摩尔);
对于#22016,加入153μLDMSO以制备10mM储备溶液(1mg / ml相当于1.53mM);
对于#22017,加入215uL ml DMSO以制备10mM储备溶液(1mg / ml相当于2.15mM);
对于#22020,将4.2mg溶于1ml DMSO中以制备10mM储备溶液(1mg / ml相当于~2.4mM);
注意:应及时使用原液; 任何剩余的溶液应等分并在< -20 o C冷冻。避免反复冻融循环,避免光照。
准备染料工作溶液
在使用之前,通过用Hanks和20mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液(pH7)稀释来自步骤1的DMSO储备溶液,制备1至20μM染料工作溶液。通过涡旋混合均匀。
用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞:
3.1用测试化合物处理细胞一段所需的时间。
3.2离心细胞,每管2-10×10 5个细胞。
3.3将细胞重悬于500μL 染料工作溶液中(来自步骤2)。
3.4在室温或37° C 下用染料溶液孵育细胞15至30分钟,避光。
3.5从细胞中取出染料工作溶液,用HHBS或您选择的缓冲液清洗细胞。将细胞重悬于500μL预热的HHBS或培养基中,得到每管2-10×10 5个细胞。
3.6使用流式细胞仪(FL1通道) 或荧光显微镜监测Ex / Em = 490 / 520nm处的荧光变化。
注意:对于细菌细胞染色:当通过测试细菌过夜生长预处理的营养肉汤中1:800稀释储备溶液时,染色是 有效的,但也可以使用新鲜牛肉膏或PBS。细菌悬浮液应用PBS稀释至每毫升10 5 -10 7个生物。可以通过将1ml溶液施加到.45μm过滤器(25mm)并真空过滤除去溶液,然后加入1ml染料溶液并在室温下孵育5-10分钟来染色细菌。