Favorgen FASOI 001-1说明书
Favorgen FASOI 001-1说明书
Favorgen位于中国台湾国家生物技术园区。它通过自动化系统建立了ISO合格工厂，
生产高质量的分子生物学产品和临床化学试剂。目前，Favorgen在美国，中国，韩国和丹麦设立分支机构，并在30多个国家设立了分销网络。自成立以来，Favorgen已经在其先进的生产设施上投入了大量资金，以竞争力的价格为客户提供高质量的产品。Favorgen致力于通过与学术和行业合作伙伴的内部和合作开展研究，以不断提供高质量的创新产品。
核酸提取土壤DNA分离迷你试剂盒
Nucleic-acids extraction Soil DNA Isolation Mini Kit
核酸提取土壤DNA小试剂盒
FavorPrepTM Soil DNA Isolation Mini Kit
Favorgen FASOI 001-1说明书
Cat.No. : FASOI 000, 4 preps
FASOI 001, 50 Preps
FASOI 001-1, 100 Preps
(For Research Use Only)
FASOI 000
(4 preps_sample)
FASOI 001
(50 preps)
FASOI 001-1
(100 preps)
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Glass Beads |
1 g |
12 g |
25 g |
|
SDE1 Buffer |
3.6 ml |
40 ml |
70 ml |
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SDE2 Buffer |
1.2 ml |
15 ml |
25 ml |
|
SDE3 Buffer |
1.2 ml |
15 ml |
30 ml |
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SDE4 Buffer |
1.5 ml |
25 ml |
40 ml |
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Wash Buffer (concentrate) * |
1.5 ml |
20 ml |
40 ml |
|
Elution Buffer |
1.5 ml |
25ml |
50 ml |
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SDE Mini Column |
4 pcs |
50 pcs |
100 pcs |
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Collection Tube |
8 pcs |
100 pcs |
200 pcs |
|
Elution Tube |
4 pcs |
50 pcs |
100 pcs |
|
Bead tube |
4 pcs |
50 pcs |
100 pcs |
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User Manual |
1 |
1 |
1 |
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* Preparation of Wash Buffer for first use: |
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Cat. No: |
FASOI 000 |
FASOI 001 |
FASOI 001-1 |
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ethanol volume for Wash Buffer |
6 ml |
80 ml |
160 ml |
规格:
原理：自旋柱(硅胶膜)样品：0.25~0.5g
手术时间：<60分钟排气量：50~200毫升
重要说明：
本系统中提供的缓冲区包含刺激物。在处理这些缓冲器时，戴上手套和实验室外套。
使用前检查SDE 1缓冲液，如有沉淀，应在60℃温10分钟。
使用前，在洗涤缓冲液中加入适量乙醇(96%-100%)。
准备加热块或水浴至70°C。如果从革兰氏阳性细菌中分离出DNA，则准备加热块或水浴至95°C进行另一次培养。
所有的离心步骤都是在微型离心机中全速进行的(~18，000 x g)。
预热洗脱缓冲液或ddH2O至60°C为洗脱步骤。
“一般性议定书”：
在开始以下步骤之前，请阅读重要说明。
加入200毫克玻璃珠到2.0毫升珠管(提供)。将0.25~0.5g的土样移入珠管，然后放置在冰上。
-如果样品是液体的，在2.0毫升的珠管中加入200毫升的样品。
在样品中加入600升SDE 1缓冲器，以大速度旋转5分钟。将样品在70℃下孵育10 min，在孵育过程中旋转两次。
-从革兰阳性杆菌中分离DNA，在95℃下进一步孵育5分钟。
简单地旋转管子，以去除从盖子内部滴下来。
冷却样品混合物，加入200升SDE2缓冲液。通过涡旋使混合均匀。将样品在冰上孵育5分钟。
全速离心(~18，000×g)5分钟。
仔细地将澄清的上清液转移到1.5毫升的微离心管(未提供)。测量上清液的体积。
-避免将任何碎片和弹丸打穿。
加入1体积异丙醇和涡旋混合均匀，全速离心10 min，使DNA颗粒化。
-例如：如果澄清的溶解液体积为450升，则在澄清的裂解液中加入450升异丙醇。
小心丢弃上清液，在纸巾上倒置管1分钟，去除残留液体。
-不要打乱佩尔号
加入200升预加热排放缓冲液或ddH2O，旋涡使DNA颗粒*溶解。
在样品中加入100升SDE 3缓冲器，通过涡旋将其混合均匀。将样品在室温下孵育3分钟。
-注：SDE 3缓冲器必须在每次使用前，通过大力vrotexing*暂停。
-切断1毫升针尖的末端，使SDE 3缓冲器的插入更容易。
一
v 0515
全速离心2分钟。
小心地将上清液转移到1.5毫升的微离心机上(未提供)。测量上清液的体积。
-避免将任何碎片和弹丸打穿。
(可选)如果需要无RNA的DNA，加入1升100毫克/毫升的RNase A(不提供)到样品中，混合好。室温培养2 min。
简单地旋转管子，以去除从盖子内部滴下来。
加入1份SDE 4缓冲液和1份乙醇(96%~100%)。通过脉冲旋涡充分混合.
例如：当澄清液体积为250 l时，加入250升SDE 4缓冲液和250升乙醇(96%~100%)。
将SDE柱放入收集管中，并将所有样品混合物转移到SDE柱。全速离心1分钟，然后丢弃流过，然后将sde柱放入ne中。 W收集管。
加入750升洗涤缓冲液(乙醇添加)到SDE柱。全速离心1分钟，然后丢弃流道.
-确保在次使用时将乙醇(96%~100%)加入到洗涤缓冲液中。
重复第17步。
全速离心3分钟，干燥SDE柱。
-重要的一步！这一步将避免残留液体抑制后续的酶反应。
将SDE柱放入1.5毫升的微离心管(未提供)。在SDE塔膜中心加入50~200μl预热排液缓冲液或ddH2O。将SDE柱放置2分钟 室温。
-重要的一步！为了进行有效的洗脱，确保洗脱缓冲液或ddH2O被分配到膜中心并被*吸收。
全速离心1 min以逃避DNA。
发现并修理故障，解决纷争
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问题 |
可能的原因 |
解答 |
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基因组DNA的低产率或无产率 |
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样本存储不当 |
粪便样本存放在-20°C。 |
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样本中细胞数量少 |
增加样本量 |
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不良细胞溶解 |
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细胞溶解能力差，因为打珠不够 time |
延长珠子打浆时间。 |
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DNA与柱膜结合不足 |
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在dna结合之前，没有在样品中加入乙醇。 |
确保在DNA结合之前，在样品中加入一定量的乙醇(96%-100%)。 |
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乙醇和样品裂解液在DNA结合之前没有很好的混合。 |
确保乙醇和样品裂解液在dna结合之前已*混合。 |
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W1/W2洗涤缓冲液制备不当 |
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次使用时不加乙醇。 |
次使用时不加乙醇。 |
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在洗涤缓冲液中加入乙醇的体积或百分比是不正确的。 |
次使用时，一定要将适量的乙醇(96%-100%)加入到洗涤缓冲液中。 |
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DNA洗脱无效。 |
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洗脱用水(DdH2O)的pH是酸性的。 |
确保ddH2O的pH值在7.0-8.5之间。 |
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使用洗脱缓冲液(提供)进行洗脱。. |
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洗脱缓冲液或ddH2O不能被柱膜*吸收。 |
加入萃取缓冲液或ddH2O后，在离心前将SD柱放置5 min。 |
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基因组DNA质量差 |
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A 260/A 280
洗脱DNA率低 |
不良细胞溶解 |
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细胞溶解能力差，因为打珠时间不够 |
延长珠子打浆时间。 |
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A 260/A 280
洗脱DNA率高 |
洗脱DNA中的大量残留RNA |
在洗脱液中加入8升RNase A(50 mg/ml)，37℃孵育10 min。孵育后，加入200升SD2缓冲液和200升乙醇(96%~100%)，混合均匀。
-涡旋。然后从第7步开始遵循“一般协议”。 |
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FASOI 000 |
FavorPrep™土壤DNA分离迷你试剂盒 |
4个准备。 |
Glass Beads |
在室温（15~25℃）下保存2年。 |
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FASOI 001 |
50个准备。 |
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FASOI 001-1 |
100个准备。 |
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FASOI 002 |
FavorPrep™土壤DNA分离Midi试剂盒 |
24个准备。 |
Glass Beads |
在室温（15~25℃）下保存2年。 |
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