ACCUTASE细胞消化液的主要特点和操作流程

ACCUTASE细胞消化液的主要特点和操作流程

  ACCUTASE细胞消化液是一种用于细胞培养过程中分离贴壁细胞的酶溶液。含有多种蛋白酶,能够有效地降解细胞间的蛋白质,从而使贴壁细胞脱离培养容器的表面,便于进行细胞传代、计数或实验分析。主要作用是降解细胞间以及细胞与培养容器表面之间的蛋白质粘附分子,如细胞外基质蛋白和细胞黏附分子。这些蛋白酶能够识别并切割特定的肽键,从而破坏细胞间的连接,使细胞能够从培养容器表面脱落,达到分离细胞的目的。
 

 

  ACCUTASE细胞消化液的主要特点:
  1.温和性:相对于传统的胰酶(Trypsin-EDTA)消化液,ACCUTASE通常更为温和,对细胞的伤害较小,尤其适用于对细胞状态要求较高的实验。
  2.广谱性:ACCUTASE能够作用于多种类型的细胞,包括上皮细胞、成纤维细胞等,应用范围广泛。
  3.高效性:ACCUTASE的消化效率较高,能够在较短的时间内实现细胞的有效分离。
  4.无EDTA:与传统的胰酶消化液不同,ACCUTASE中不含EDTA,因此不需要担心EDTA对细胞的潜在影响。
  应用领域:
  1.细胞培养:用于细胞的传代、分瓶、计数等常规操作。
  2.细胞生物学研究:在进行细胞迁移、侵袭、克隆形成等实验前,需要将细胞从培养皿中分离出来。
  3.组织工程:在构建组织工程支架时,需要将细胞从原组织中分离出来。
  4.临床应用:在某些细胞治疗或检测中,需要将细胞从患者体内分离出来进行体外培养。
  ACCUTASE细胞消化液的操作流程:
  1.观察细胞:在开始消化前,先在显微镜下观察细胞的生长状态,确保细胞适合进行消化。
  2.清洗细胞:用生理盐水或PBS缓冲液清洗细胞,去除培养基中的血清和抗生素,以免影响消化效果。
  3.添加消化液:向培养容器中加入适量的细胞消化液,覆盖细胞表面。
  4.孵育:将培养容器放入培养箱中孵育一段时间,时间根据细胞类型和密度而定。
  5.观察分离:在显微镜下观察细胞是否已经从容器表面脱落,变成圆形悬浮状态。
  6.中和消化:加入含血清的培养基以中和消化液的作用,终止消化过程。
  7.收集细胞:用移液器轻轻吹打细胞,使其全脱落,然后将细胞悬液转移到离心管中。
  8.离心:通过离心收集细胞沉淀,弃去上清液。
  9.重悬:用新鲜培养基重悬细胞,进行后续实验或重新接种培养。